專利名稱：：一種加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：加味藿香正氣丸(藿香正氣丸)收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十四冊，標(biāo)準(zhǔn)號為WS3-B-2682-97。加味藿香正氣丸由廣藿香、紫蘇葉等十一味藥制成，具有解表化濕，理氣和中的作用，是一種用于治療外感風(fēng)寒，內(nèi)傷濕滯，頭痛昏重，胸膈痞悶，脘腹脹痛，嘔吐泄瀉的中藥。加味藿香正氣丸原標(biāo)準(zhǔn)只有顯微鑒別，難以有效控制成品的質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為了提供一種能對加味藿香正氣丸成品的質(zhì)量進(jìn)行有效控制的加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取了以下的技術(shù)方案—種加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于采用以下鑒別和含量測定項目中的一項或多項進(jìn)行質(zhì)量控制(1)厚樸和廣藿香的薄層鑒別取加味藿香正氣丸成品4-8g，研細(xì)，加乙醚20-30ml，振搖，浸漬過夜，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇l-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取厚樸對照藥材0.5-1.5g，同法制成對照藥材溶液；再取百秋李醇對照品，加乙酸乙酯制成每lml含1.5-2.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液各10ia、對照品溶液5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以體積比為80-90:10-20:1-3的6090"石油醚-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展至約15cm，取出，晾干，置波長為254nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與厚樸對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)；噴以5%香草醛硫酸溶液，1051:加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與百秋李醇對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)白芷的薄層鑒別取加味藿香正氣丸成品15-20g，研細(xì)，加水100-200ml煎煮，放冷，離心取上清液，用鹽酸調(diào)pH至12，用三氯甲烷提取2-3次，每次15-25ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加三氯甲烷l-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取白芷對照藥材0.5-1.5g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU、對照藥材溶液5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8-12:0.5-1.5的三氯甲烷-甲醇為展開劑，置展開缸中預(yù)飽和15-25分鐘，展至約15cm，取出，晾干，置波長為365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(3)高效液相色譜法測定陳皮中橙皮苷的含量，包括以下步驟1)色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為20-24:76-80的乙腈-0.2%磷酸溶液為流動相，檢測波長為283nm，理論板數(shù)按橙皮苷峰計算應(yīng)不低于2000;2)對照品溶液的制備取橙皮苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含0.1-0.2mg的溶液，即得對照品溶液;3)供試品溶液的制備取加味藿香正氣丸成品適量，研細(xì)，取約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，水浴加熱回流，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測定，即得；按照加味藿香正氣丸成品計算，每克加味藿香正氣丸含陳皮以橙皮苷計，不少于設(shè)定值為合格。每克加味藿香正氣丸含陳皮以橙皮苷計，設(shè)定值為3.2mg。上述質(zhì)量檢測方法并不需要按照先后順序進(jìn)行，而且同時還可以進(jìn)行常規(guī)檢測，如形狀的觀察和顯微鑒別，即取加味藿香正氣丸成品，置顯微鏡下觀察不規(guī)則顆粒狀團(tuán)塊及分枝狀團(tuán)塊無色，遇水合氯醛液漸溶化；菌絲無色或淡棕色，細(xì)長，稍彎曲，有分枝，直徑38iim(茯苓)。草酸鈣方晶成片存在于薄壁細(xì)胞中(陳皮)。草酸鈣針晶細(xì)小，長1032ym，存在于薄壁細(xì)胞中(白術(shù))。草酸鈣針晶束存在于黏液細(xì)胞中，或散在，針晶長20144iim(半夏)。纖維成束，周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維(甘草)。石細(xì)胞類方形、橢圓形、卵圓形或不規(guī)則分枝狀，有時可見層紋(厚樸)。該成品還應(yīng)符合中國藥典丸劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。符合以上條件的加味藿香正氣丸成品為合格。本發(fā)明在原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增訂了厚樸和廣藿香、白芷的薄層色譜鑒別以及陳皮中橙皮苷的含量測定，本發(fā)明提高了加味藿香正氣丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有較強(qiáng)的專屬性與良好的重現(xiàn)性，有利于實(shí)現(xiàn)對加味藿香正氣丸成品的質(zhì)量的有效控制。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明。實(shí)施例1:本實(shí)施例質(zhì)量控制方法選用廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的加味藿香正氣丸為供試品，本品為青黃色至棕黃色的濃縮水丸；氣芳香，味甘、微苦。該加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法包括以下鑒別和含量測定A、鑒別(1)厚樸和廣藿香的鑒別取加味藿香正氣丸成品6g，研細(xì)，加乙醚25ml，振搖，浸漬過夜，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取厚樸對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取百秋李醇對照品，加乙酸乙酯制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液各10y1、對照品溶液5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(609(TC)-乙酸乙酯-甲酸(85:15:2)為展開劑，展至約15cm，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視，供試品色譜中，在與厚樸對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)；噴以5X香草醛硫酸溶液，105t:加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與百秋李醇對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2)白芷的鑒別取加味藿香正氣丸成品18g，研細(xì)，加水150ml煎煮30分鐘，放冷，離心(1500轉(zhuǎn)/分鐘)10分鐘，取上清液，用鹽酸調(diào)pH至12，用三氯甲烷提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使溶解，作為供試品溶液。另取白芷對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ii1、對照藥材溶液5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(lO:1)為展開劑，置展開缸中預(yù)飽和20分鐘，展至約15cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。B、含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定陳皮中橙皮苷的含量。測定步驟包括(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液(22:78)為流動相；檢測波長為283nm。理論板數(shù)按橙皮苷峰計算應(yīng)不低于2000。(2)對照品溶液的制備取橙皮苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含0.15mg的溶液，即得。(3)供試品溶液的制備取本品適量，研細(xì)，取約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，水浴加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ii1，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每lg含陳皮以橙皮苷(C28H34015)計，不得少于3.2mg。上述質(zhì)量檢測方法并不需要按照先后順序進(jìn)行，而且同時還可以進(jìn)行常規(guī)檢測，如形狀的觀察和顯微鑒別，該成品還應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄IA丸劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。符合以上條件的加味藿香正氣丸成品為合格。以下對本發(fā)明質(zhì)量檢測方法的方法學(xué)進(jìn)行考察A、厚樸和廣藿香鑒別的方法學(xué)驗(yàn)證1.專屬性考察吸取供試品溶液、厚樸對照藥材(中國藥品生物制品檢定所提供，批號121285-200301)溶液10iU、厚樸陰性對照溶液10iU、百秋李醇對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號110772-200404)溶液5iU、廣藿香陰性對照溶液10iU，分別點(diǎn)于同一硅膠GF^薄層板上，按本發(fā)明鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果未見厚樸陰性對照對厚樸的薄層色譜及廣藿香陰性對照對百秋李醇的薄層色譜鑒別有干擾。2.耐用性考察2.1不同薄層板的比較取手鋪的硅膠GF254薄層板與預(yù)制硅膠GF254薄層板，分別按本發(fā)明鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示自制手工鋪板與預(yù)制板的分離效果基本一致。2.2溫度考察取點(diǎn)樣后的薄層板，按按本發(fā)明鑒別方法分別在4t:和35t:中展開。結(jié)果顯示在4°C35°C溫度范圍內(nèi)試驗(yàn)，溫度對該鑒別無明顯影響。2.3濕度考察取點(diǎn)樣后的薄層板，按本發(fā)明鑒別方法分別在正常濕度65%和用硫酸調(diào)節(jié)相對濕度20%中展開。結(jié)果顯示在20%65%相對濕度范圍內(nèi)試驗(yàn)對鑒別無明顯的影響。經(jīng)上述方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果表明薄層板、溫濕度變化對展開效果影響不大，因此，認(rèn)為厚樸和廣藿香鑒別方法的耐用性良好。B、白芷鑒別的方法學(xué)驗(yàn)證1.專屬性考察吸取供試品溶液及陰性對照溶液各10iU、對照藥材溶液5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按本發(fā)明鑒別方法試驗(yàn)。結(jié)果未見白芷陰性對照對白芷的薄層色譜鑒別有干擾。2.耐用性考察2.1不同薄層板的比較取手鋪的硅膠G薄層板與預(yù)制硅膠G薄層板，分別按本發(fā)明鑒別方法實(shí)驗(yàn)。結(jié)果，預(yù)制板的分離效果優(yōu)于手工鋪板。2.2溫度考察取點(diǎn)樣后的薄層板，按本發(fā)明鑒別方法分別在35t:和4t:中展開。結(jié)果顯示在4°C35t:溫度范圍內(nèi)試驗(yàn)，對結(jié)果沒有明顯的影響。2.3濕度考察取點(diǎn)樣后的薄層板，按本發(fā)明鑒別方法分別在正常濕度(65%)和用硫酸調(diào)節(jié)相對濕度(20%)中展開。結(jié)果顯示在20%65%相對濕度范圍內(nèi)試驗(yàn)對鑒別無明顯的影響。經(jīng)上述方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果表明白芷鑒別方法的耐用性良好。C、陳皮中橙皮苷含量測定的方法學(xué)所用儀器為SHIMADZULC-2010A高效液相色譜儀；數(shù)據(jù)處理軟件系統(tǒng)SHIMADZULCsolution;超聲儀KQ-300DA:紫外光譜儀UV-2450。1色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)1.l流動相的選擇流動相參考文獻(xiàn)"高效液相色譜法測定藿香正氣口服液中橙皮苷含量"并稍作改動，選用乙腈_0.2%磷酸溶液(22:78)為流動相。1.2測定波長的選擇精密稱取橙皮苷對照品(批號110721-200612，含量測定用，中國藥品生物制品檢定所)10.36mg，置250ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，在200380nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果表明，橙皮苷在283nm處有最大吸收，與中國藥典2005年一部藥材陳皮項下所采用的檢測波長(283nm)—致。故選定283nm作為本品的測定波長。1.3色譜柱參照《中國藥典》2005版一部"陳皮"[含量測定]的方法，選用反向高效液相色譜_紫外檢測器法進(jìn)行測定，選用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱。2方法學(xué)驗(yàn)證2.1準(zhǔn)確度2.1.1加樣回收用的對照品貯備液制備精密稱取橙皮苷對照品10.50mg，置50ml量瓶中，加甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液(0.2100mg/ml)。2.1.2加樣回收供試品溶液的制備取同一批號的濃縮丸(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號K00123，含橙皮苷8.46mg/g)粉末共6份，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入上述加樣回收用的對照品貯備液20ml，再精密加入甲醇30ml，稱定重量，水浴加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得(表1)。表1準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果稱樣阜d知％測得的ttM收率RSD(g)(mg)(mg)(mg)(%)(%)(%)10,5i204.33154.20008扁5103,764.34174.20008.62501.9930.51044.3腦4.20008.6065跳ll102.720.9■4固804.29774扁0國7S103.33-50.5054"7574,20008.5536101.8564.33324.2細(xì)8扁9103'，252.2精密度(重復(fù)性試驗(yàn))取同一批號的濃縮丸(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號K00123)粉末共6份，取約lg，精密稱定，按供試品溶液制備方法制備，測定，即得。結(jié)果重復(fù)性良好(表2)。表2重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果No.稱f羊量g)含量':.mg)平均含量(mg'g)RSD()11,(H378，5820,99758-3831扁68.574i，011o8.38o,畫g8.3761，88.502.3專屬性精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10iU，分別注入高效液相色譜儀中，按含量測定方法測定，結(jié)果陰性對照溶液在與橙皮苷對照品色譜保留時間相應(yīng)的位置上無干擾。2.4線性精密稱取橙皮苷對照品19.32mg，置20ml量瓶中，加甲醇使溶解，稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液(0.9660mg/ml)，精密吸取貯備液lml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液A(0.09660mg/ml);精密吸取貯備液2ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液B(O.1932mg/ml);精密吸取貯備液3ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液C(O.2898mg/ml)。精密吸取貯備液A(O.09660mg/ml)3yl、10iil，貯備液B(O.1932mg/ml)10ii1、12iil，貯備液C(O.2898mg/ml)10ii1、15ii1分別注入液相色譜儀。以峰面積為縱坐標(biāo)、橙皮苷含量(Pg)為橫坐標(biāo)，得到回歸方程為y=1757874.6832x+73713.5567，r=0.9999。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，橙皮苷在0.2898iig4.347iig的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系(表3)。表3線性考察結(jié)果序號！橙皮—普含量(,)|峰面積1D.28健5457600J66180391331.93234簡642.318441418312扁517255964J4"7"7TO19*742.5范圍2.5.1范圍_范圍實(shí)驗(yàn)設(shè)計擬定[含量測定]項下每lg含陳皮以橙皮苷(C28H34015)計，不得少于3mg。范圍的考察可按(表4)設(shè)計實(shí)驗(yàn)。表4范圍實(shí)驗(yàn)設(shè)計'n度擬取樣吊3nig/g低值(約60%)2mg/g約0.12g高值(2.8倍)8,4mg/g參考準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)2.5.2范圍-準(zhǔn)確度用對照品貯備液制備精密稱取橙皮苷對照品10.90mg，置50ml量瓶中，加甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液(0.2180mg/ml)。2.5.3范圍_準(zhǔn)確度用供試品貯備液制備取同一批號的濃縮丸(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號K00123，含橙皮苷8.46mg/g)粉末共6份，取約0.12g，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入對照品貯備液5ml，再精密加入甲醇45ml，按含量測定方法測定。實(shí)驗(yàn)表明本次分析方法的考察范圍在供試品含量為2mg/g8.46mg/g均具有良好的準(zhǔn)確度(見表5)。表5范圍_準(zhǔn)確度試驗(yàn)測定結(jié)果No,稱樣量加入量測得tt量,收率平均回牧率RSD(g)(mg》Cmg3(mg)(%)(%)(%)10.12%1農(nóng)4l房OO2.1956,J40,1286i,鍵goL09002.170599.320,12.551細(xì)71.0,2.131098.1098.741.74o.譜o1扁91扁02.1746跳15-50.1254細(xì)9LO謹(jǐn)2.120197.186CU2611.081細(xì)02.122396.842.6耐用性2.6.1穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，自制備后，每隔2.5小時，按含量測定方法測定。結(jié)果供試品溶液在19小時內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果見表6。表6穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果時間(小時)峰面積RSD(%)03016,461912.52979.4265直2934.73卯17.53034,763181.5103000,5422412-53047,720715,53062.44385193068,281982.6.2提取方法的考察取同一批號(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，K00123)樣品粉末兩份，每份約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，分別采用超聲處理(功率300W，頻率40kHz)與水浴加熱回流的方式，提取時間均為30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，測定樣品中橙皮苷的含量。試驗(yàn)表明，水浴加熱回流效果明顯比超聲處理好，故選用水浴加熱回流作為提取方法，結(jié)果見表7。表7不同提取方式的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2.6.3是否采用石油醚去雜的選擇取同一批號(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，K00123)樣品粉末兩份，每份約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別采用(1)精密加入石油醚(6090°C)50ml，水浴加熱回流30分鐘，棄去石油醚液，藥渣揮干石油醚，再精密加入甲醇50ml，稱定重量，水浴加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；(2)直接精密加入甲醇50ml，稱定重量，水浴加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，測定樣品中橙皮苷含量。結(jié)果表明兩種方法處理后的雜質(zhì)峰數(shù)量無顯著差異，故選用直接加甲醇水浴加熱回流(表8)。表8是否采用石油醚去雜的結(jié)果有石油醚i-雜無石油,去雜取樣量(g)1.00451.0029峰面積54704605374824峰面積/取樣量5445953,25359282.12.6.4回流提取時間的選擇取同一批號(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，K00123)樣品粉末三份，每份約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，分別加熱回流30、45、60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，測定樣品中橙皮苷含量。試驗(yàn)表明，不同提取時間測定結(jié)果相差不大，將提取時間定為30分鐘(見表9)。表9不同提取時間的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2.6.5提取溶劑用量的考察取同一批號(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，K00123)樣品粉末共三份，每份約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇25、50、75ml，稱定重量，水浴加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，測定樣品中橙皮苷含量。試驗(yàn)表明，用量25ml的測定結(jié)果較50ml、75ml的測定結(jié)果低，而50ml、75ml測定的結(jié)果相差不大，故提取溶劑的用量選擇為50ml(表10)。表10不同提取溶劑Ji:的比較溶齊,1:S:(ml)取樣tt(g)f'rlt平均含顯25l扁28.03，5227198,2固096飼8.1i78()62()5501纖48.3122425648.5544185278.433330545751,畫07國,70748.345628446g,491852762.6.6不同規(guī)格色譜柱的比較取同一對照品溶液、供試品溶液(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號K00009)，按含量測定方法操作，考察不同色譜柱對橙皮苷含量測定結(jié)果的影響程度，試驗(yàn)表明，使用不同生產(chǎn)商的色譜柱進(jìn)行分析，所得結(jié)果無顯著性差別(表11)。表11不同色譜柱的測定結(jié)果色譜柱取樣量(g)理論塔機(jī)數(shù)含顯Ai.03771.036956408,66B1,03771.03695907g.62CL03771,03695466g,S4備注A.AgilentEclipseXDB—C18(4.6*150mm*5iim);B.Diamonsil鉆石C18(4.6氺200mm氺5iim);C.WatersSy騰tryShieldRP-C18(4.6*150mm*5iim)3試品含量測定取不同生產(chǎn)批號(廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn))的濃縮丸，按含量測定方法操作，測定，結(jié)果見表12。表12十批含量測定結(jié)果批號供試品取樣量(g)誦003K聽聽4誦謹(jǐn)誦畫腦0纖8國,9扁121畫1221.0013謹(jǐn)W1纖2l細(xì)71.003.0021讓30l扁O1扁2L細(xì)l國391,00551扁01扁7l.謝O1扁21.00531扁2測得信1(mg/g)9.9479J129.2779.231賺S8.9268.5858.5148,182g.固8扁8.6179.4129,權(quán),78,1538.9479.216測得值2(mg/g)平均值(mg/g》9.9529.7439,2559.2009,244瞧58.525g,5暢隨l8.1468.8148扁94189.487謹(jǐn)！8.1148.9499.2!99.869.24畫8,558-158.709.458,079.08膽123參考重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果8.464含量限度的確定上述10批平均含量為8.86mg/g。由于在該10批樣品中，廠家投料所選用陳皮的橙皮苷含量極高，故以此作為含量測定的限度依據(jù)不合適?？紤]到合格原料、合理的工藝生產(chǎn)出來的樣品為合格品，故以藥典規(guī)定的陳皮中橙皮苷的最低含量確定限度較合理。按藥典規(guī)定陳皮以干燥品計算，橙皮苷含量不得低于3.5%(水分不得過13%，即陳皮含橙皮苷不應(yīng)低于3.045%)，粉末投料丸劑轉(zhuǎn)移率不應(yīng)低于90%計算，折算以藥典規(guī)定最低橙皮苷含量的陳皮投料，加味藿香正氣丸中橙皮苷含量為3.2mg/g，以此為據(jù)，擬定本品含陳皮以橙皮苷(C28H34015)計，不得少于3.2mg/g。權(quán)利要求一種加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法采用以下鑒別和含量測定項目中的一項或多項(1)厚樸和廣藿香的薄層鑒別取加味藿香正氣丸成品4-8g，研細(xì)，加乙醚20-30ml，振搖，浸漬過夜，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇1-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取厚樸對照藥材0.5-1.5g，同法制成對照藥材溶液；再取百秋李醇對照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1.5-2.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液各10μl、對照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以體積比為80-90∶10-20∶1-3的60～90℃石油醚-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展至約15cm，取出，晾干，置波長為254nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與厚樸對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)；噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與百秋李醇對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)白芷的薄層鑒別取加味藿香正氣丸成品15-20g，研細(xì)，加水100-200ml煎煮，放冷，離心取上清液，用鹽酸調(diào)pH至1～2，用三氯甲烷提取2-3次，每次15-25ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加三氯甲烷1-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取白芷對照藥材0.5-1.5g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8-12∶0.5-1.5的三氯甲烷-甲醇為展開劑，置展開缸中預(yù)飽和15-25分鐘，展至約15cm，取出，晾干，置波長為365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(3)高效液相色譜法測定陳皮中橙皮苷的含量包括以下步驟1)色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為20-24∶76-80的乙腈-0.2％磷酸溶液為流動相，檢測波長為283nm，理論板數(shù)按橙皮苷峰計算應(yīng)不低于2000；2)對照品溶液的制備取橙皮苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1-0.2mg的溶液，即得對照品溶液；3)供試品溶液的制備取加味藿香正氣丸成品適量，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，水浴加熱回流，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；按照加味藿香正氣丸成品計算，每克加味藿香正氣丸含陳皮以橙皮苷計，不少于設(shè)定值為合格。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的加味藿香正氣丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于按照加味藿香正氣丸成品計算，每克加味藿香正氣丸含陳皮以橙皮苷計，設(shè)定值為3.2mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種加味藿香正氣丸的質(zhì)量檢測方法，在原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增訂了厚樸和廣藿香、白芷的薄層色譜鑒別以及陳皮中橙皮苷的含量測定，本發(fā)明提高了加味藿香正氣丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有較強(qiáng)的專屬性與良好的重現(xiàn)性，有利于實(shí)現(xiàn)對加味藿香正氣丸成品的質(zhì)量的有效控制。文檔編號A61P1/00GK101698034SQ20091019364公開日2010年4月28日申請日期2009年11月5日優(yōu)先權(quán)日2009年11月5日發(fā)明者孫晶,李飛飛,程艷陽,謝友蓮,黎炳華申請人:廣州中一藥業(yè)有限公司