專利名稱：一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，涉及藥材有效成分的提取制備方法，具體涉及一種從 知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法。
背景技術(shù)：
知母為百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloiides Bge)的干燥根莖。味苦、 甘，性寒，入肺、胃、腎經(jīng)，具有清熱瀉火，生津潤(rùn)燥等功效，主治煩熱，消渴。藥理研究表明知 母有解熱、降糖、利膽、抗血小板凝聚等作用。其皂苷成分、芒果苷有降糖作用，臨床上用的 玉液湯、白虎人參湯、糖渴清、林牌糖尿膠囊、糖血寧等治療糖尿病湯劑或方劑中知母常作 為君藥使用，通過相關(guān)資料分析，知母總皂苷對(duì)_葡萄糖苷酶活性半數(shù)抑制作用劑量約為 芒果苷的10倍，而芒果苷在知母總皂苷中約占10%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方 法，采用該方法可以有效的從知母中分離出知母總皂苷和芒果苷，并且在這一前提下，使分 離過程簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可靠。為使這本發(fā)明目的能夠順利實(shí)現(xiàn)，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其步驟包括a、用水或醇提取知母藥材飲片或粗粉，濃縮所得提取液，對(duì)經(jīng)濃縮后的提取液進(jìn) 行醇沉，得濾液部分和沉淀部分；b、對(duì)濾液部分進(jìn)行濃縮，然后用正丁醇萃取，得到第一萃取液；C、沉淀部分加堿液堿化，攪拌一小時(shí)，離心，上清液用稀酸中和，減壓濃縮后用正 丁醇萃取，得到第二萃取液；d、合并第一萃取液和第二萃取液，濃縮至干，得知母粗總皂甙粉；e、用少量低級(jí)醇加熱溶解知母粗總皂甙粉，放置、析晶，得芒果苷結(jié)晶和母液；f、濃縮結(jié)晶母液至干得到知母總皂苷。本技術(shù)方案所述的知母藥材可以是知母飲片，或知母粗粉。因?yàn)橹缚傇碥找兹苡诘图?jí)醇，而芒果苷在低級(jí)醇中的溶解度較低，特別是在溫 度較低的時(shí)候，基于這一點(diǎn)，本發(fā)明所述醇沉是向該濃縮后提取液中加入低級(jí)醇，使低級(jí)醇 的含量在加入低級(jí)醇的提純液中所占的質(zhì)量百分比達(dá)到60% 75%。低級(jí)醇優(yōu)選為甲醇 或乙醇。由于芒果苷含酸性酚羥基，利用堿液對(duì)沉淀部分進(jìn)行處理，即可將該部分內(nèi)的少 量殘留的芒果苷以成鹽的形式溶于水液，達(dá)到充分利用有效成份的效果，為提取全面，進(jìn)一 步提高知母總皂苷及芒果苷的產(chǎn)量，本發(fā)明對(duì)沉淀部分的處理步驟中的堿液為質(zhì)量百分比 濃度為 5%的氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸氫鈉中的一種。本發(fā)明是用質(zhì)量百分比濃度為40% 70%的低級(jí)醇或水作為提取劑對(duì)知母藥材 進(jìn)行提取，所述a步驟中的濃縮后提取液的比重1. 1 1. 3，
考慮到知母總皂苷及芒果苷的極性高，根據(jù)相似相溶原理，本發(fā)明選用正丁醇進(jìn) 行萃取。本發(fā)明方法還包括對(duì)e步驟所述芒果苷結(jié)晶的重結(jié)晶，以進(jìn)一步提高芒果苷的純度。綜上，本發(fā)明利用了知母總皂苷及芒果苷在某些溶劑中表現(xiàn)的溶解度并不一致的 特點(diǎn)，對(duì)兩者進(jìn)行了有效分離，該分離方法雖然所有操作均為本領(lǐng)域一般性操作，但卻得到 了很好的分離效果，并得到了高純度的芒果苷，從而使本發(fā)明方法具備了成本低，簡(jiǎn)便，易 于擴(kuò)大化生產(chǎn)的特點(diǎn)，另外，本發(fā)明還在工藝流程上加入了對(duì)沉淀部分處理步驟，提高了產(chǎn) 品的得率。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1下面對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明取Ikg知母飲片，用10立升水回流提取，共提取3次，每次1. 5小時(shí)，合并3次水 提液，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1. 1 1. 3，加酒精調(diào)節(jié)使其含酒精65% 70%，放置 24小時(shí)，沉淀，過濾，得到濾液部分和沉淀部分，濾液部分減壓濃縮得濃縮液；沉淀部分用2%氫氧化鈉于60°C 70°C水浴攪拌1小時(shí)，放置，過濾，堿性濾液用 稀鹽酸調(diào)PH至7后，減壓濃縮與前述濃縮液合并，得合并液；合并液用正丁醇萃取3次，每次用正丁醇300ml，合并正丁醇萃取液，用少量水反 洗一次；所得正丁醇層減壓濃縮至干，得到知母粗總皂苷粉；用IOOml甲醇加熱溶解知母粗總皂苷粉，然后放置24小時(shí)，析晶，過濾，結(jié)晶用少 量甲醇洗一次，結(jié)晶用少量甲醇再重結(jié)晶一次，得到淡黃色芒果苷純品7. lg，得率0.71% ；甲醇母液蒸干，得類白色粉32. 5g知母總皂苷，得率3. 25%。實(shí)施例2取Ikg知母粗粉，用10立升70%乙醇回流提取，共提取3次，每次1.5小時(shí)，合并 3次稀乙醇提取液，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1. 1 1.3，加酒精調(diào)節(jié)使含酒精65% 70%，放置24小時(shí)，沉淀，過濾，得到濾液部分和沉淀部分，濾液部分減壓濃縮得濃縮液；沉淀用2%氫氧化鈉于60°C 70°C水浴攪拌1小時(shí)，放置，過濾，堿性濾液用稀鹽 酸調(diào)PH至7后，減壓濃縮與前述濃縮液合并，得合并液；合并液用正丁醇萃取3次，每次用正丁醇300ml，合并正丁醇萃取液，用少量水反 洗一次；所得正丁醇層減壓回收至干，得到知母粗總皂苷粉；用IOOml甲醇加熱溶解，放置24小時(shí)，析晶，過濾，結(jié)晶用少量甲醇洗一次，結(jié)晶用 少量甲醇再重結(jié)晶一次，得到淡黃色芒果苷純品7. 8g，得率0. 78% ；甲醇母液蒸干，得類白色粉37g知母總皂苷，得率3. 7%。為便于比較實(shí)施例1及實(shí)施例2中芒果苷在整個(gè)知母的提取率，需要測(cè)出芒果苷 在整個(gè)知母中的所含比例，芒果苷含量的測(cè)定可以采用如下方法進(jìn)行(該方法參考藥物 分析分析雜志，2007，27 (9) 1478上描述的方法)
1.測(cè)試條件高效液相色譜儀Agilent1100，Elite-ODS 色譜柱(4. 0mmX150mm, 5 μ m)流動(dòng)相Me0H-0.磷酸液(27 73v/v)流速L0ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)316nm柱溫室溫進(jìn)樣體積10 μ 12.知母樣品液制備取知母干燥藥材粉(80目)lg，精密稱定1. 0508g，加甲醇適量，加熱回流1小時(shí)， 冷卻，濾過，濾渣用甲醇洗滌3次，甲醇濾液定量至IOOml量瓶中，搖勻，經(jīng)0. 45 μ m微孔濾 膜，作為供試品液。芒果苷樣品經(jīng)70°C減壓干燥6小時(shí)后稱量，芒果苷對(duì)照品配成42. 8 μ g/ml的溶 液。經(jīng)測(cè)定知母藥材中芒果苷含量為1.28%，所得樣品芒果苷純度分別為96%和 97%，其從藥材中提取得率為55. 5%和66. 4%。應(yīng)當(dāng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明 作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
權(quán)利要求
1.一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于該方法步驟包括a、用水或稀醇提取知母藥材粗粉，濃縮所得提取液，對(duì)經(jīng)濃縮后的提取液進(jìn)行醇沉，過 濾，得濾液部分和沉淀部分；b、對(duì)濾液部分進(jìn)行濃縮，然后用正丁醇萃取，得到第一萃取液；c、沉淀部分加堿液堿化，攪拌一小時(shí)，離心，上清液用稀酸中和，減壓濃縮后用正丁醇 萃取，得到第二萃取液；d、合并第一萃取液和第二萃取液，濃縮至干，得知母粗總皂甙粉；e、用少量低級(jí)醇加熱溶解知母粗總皂甙粉，放置、析晶，得芒果苷結(jié)晶和母液；f、濃縮結(jié)晶母液至干得到知母總皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于 所述的知母藥材是知母飲片或知母粗粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于 用質(zhì)量百分比濃度為40% 70%的低級(jí)醇或水作為提取劑對(duì)知母藥材進(jìn)行提取。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于 所述a步驟中的濃縮后提取液的比重1. 1 1. 3。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于 所述醇沉是向該濃縮后提取液中加入低級(jí)醇，使低級(jí)醇的含量在加入低級(jí)醇的提純液中所 占的質(zhì)量百分比達(dá)到60% 75%。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或5所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征 在于所述低級(jí)醇為甲醇或乙醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從知母中提取芒果苷和知母總皂苷的方法，其特征在于 對(duì)沉淀部分的處理步驟中的堿液為質(zhì)量百分比濃度為 5%的氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳 酸鈉或碳酸氫鈉中的一種。
全文摘要
本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，具體涉及一種從知母中制備芒果苷和知母總皂苷的方法，主要步驟包括水或稀醇提取、濃縮、醇沉、過濾、蒸干，重結(jié)晶。本發(fā)明方法所涉及的分離過程具有簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可靠的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/8964GK101993438SQ20091019467
公開日2011年3月30日 申請(qǐng)日期2009年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月27日
發(fā)明者葉曉平, 宋純清, 茅仁剛 申請(qǐng)人:上海新康制藥廠;上海師大科技開發(fā)總公司