專利名稱：明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥工程的藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種載藥高分子微球，特別是明
膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
近年來，可生物降解的高分子材料作為藥物載體在醫(yī)藥上的應(yīng)用愈來愈引人注 目，尤其是將藥物包裹于高分子材料中制備的載藥微球。微球可在體內(nèi)特異性分布，利用對 指定器官、組織的靶向性和藥物的緩釋性來降低藥物的毒副作用，提高藥物的生物利用度， 減少給藥次數(shù)和藥量，減輕患者的痛苦，最大限度減少藥物的毒副作用。 —些親水性藥物，如阿昔洛韋、5-氟嘧啶、阿霉素、慶大霉素、氧氟沙星、牛血清白 蛋白、胰島素等，由于其半衰期短，必須每天服用多次，給藥次數(shù)多，病人順應(yīng)性較差，易產(chǎn) 生漏服現(xiàn)象。因此有必要將這些藥物制成緩釋制劑，減少服藥次數(shù)，提高生物利用度、維持 有效的血藥濃度，使藥效持續(xù)時間延長。 蒙脫土 (Montmorillonite，簡稱匪T)具有層紋狀結(jié)構(gòu)及非均勻性電性分布，對 消化道內(nèi)的一些病毒、病菌及毒素產(chǎn)生較強(qiáng)的選擇性吸附作用。如由法國益普生公司研 制的思密達(dá)(Smecta)就是以蒙脫土為主要成分的消化道粘膜保護(hù)劑。思密達(dá)作為粘膜 吸附劑的藥理作用表現(xiàn)為能加強(qiáng)粘膜屏障，抑制病毒和病菌，保持腸道微生物生態(tài)平衡 (M T D Lefaix， YDrouet， B Schatz， Sodium glycodcoxycholate and sprinability of gastrointestinalmucous -protective effect of smectite, Gastroenterology,1985， 88(2) :1369-1370)。在臨床上用于急、慢性腹瀉、食管炎、慢性胃炎及放化療消化道副作用、 以及口腔潰瘍的治療。 蒙脫土與人體有很好的相容性，對人體也不會產(chǎn)生毒副作用，已成功的應(yīng)用于 醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域。蒙脫土由于具有吸水性、懸浮性、分散性、粘結(jié)性、觸變性，使其作 為制劑輔料具有乳化、增稠、助懸、吸附的功能，是優(yōu)良的藥用輔料。正因為它與人體有 良好的相容性，而且沒有毒副作用，適合作為緩控釋制劑。最近，Aguzzi等(C Aguzzi， P Cerezo， C Viseras， et al， Use of clays as drug delivery systems -possibilities and limitations, A卯l Clay Sci， 2007， 36 :22-36)綜述了藥物_粘土的相互作用，以及將 天然粘土及其半合成、合成衍生物用于新型藥物傳遞系統(tǒng)的研究進(jìn)展。Lin等(F H Lin， Y H Lee， C H Jian， et al， A study of purifiedmontmorillonite intercalated with 5-fluorouracil as drug carrier, Biomaterials， 2002， 23 (9) :1981—1987)以蒙脫土作為 載體，制備了治療結(jié)腸癌藥物5-氟尿嘧啶/蒙脫土插層材料，確定了制備過程中最佳反應(yīng) 條件(藥物濃度、反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度、PH值等)，蒙脫土作為插層材料有望在結(jié)腸癌的定位 治療中得以應(yīng)用。 明膠(Gelatin)和殼聚糖(Chitosan)屬于天然高分子材料，它們具有良好的生物 降解性，并且它們的生物相容性好，因而可以利用它們的這些優(yōu)良的生物特性制備藥物載 體材料。但是明膠-殼聚糖復(fù)合微球作為藥物載體體系尚有下述不足，明膠和殼聚糖在制
4成微球的過程中需使用化學(xué)交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)，而化學(xué)交聯(lián)劑對人體有一定毒性，因此，如何 降低載藥微球的毒性并有效的控制藥物釋放成為研究者普遍關(guān)注的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種降低載藥微球毒性并有效 的控制藥物釋放的明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球。 本發(fā)明的第二個目的是提供一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下 —種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球，用下述方法制成 (1)將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為1% _5%的分子量為IO萬的明膠水溶液中， 所述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0. 15-0. 75 : 1，以1-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲波 處理后的質(zhì)量濃度為1% _2%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為 0.02-0.3 : l，在50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)40min-90min，得到溶液A ;
(2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于1 % -3%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼 聚糖完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為18-20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于60°C -8(TC恒溫攪拌 乳化30min-50min，得到乳液C ; (4)將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)60min-80min， 加入乳液C，攪拌30min-60min，在-5-5。C ，靜置60min-80min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì) 量濃度為10%的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h-3h，然后加入異丙醇攪拌30min-60min，靜置 分層后棄去上清液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的
戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為io : 10.1-25 : 190-210 : o-8 : 30-40 ; (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 所述步驟(1)優(yōu)選的是將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明 膠水溶液中，所述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0. 5 : 1，以1-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超 聲波處理后的質(zhì)量濃度為1. 5%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為 0.02-0.3 : 1，在50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A。 所述步驟(4)優(yōu)選的是將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插 層反應(yīng)70min加入乳液C，攪拌40min，降溫至(TC，靜置70min，以1 3滴/s的速度滴加 質(zhì)量濃度為10%的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2. 5h，然后加入異丙醇攪拌40min，靜置分層后 棄去上清液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的戊二醛
水溶液和異丙醇的體積比為io : ii : 200 : 2.5 : 35。 所述親水性藥物為阿昔洛韋、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。 —種明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法，由如下步驟組成 (1)將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為1% _5%的分子量為10萬的明膠水溶液中，
所述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0. 15-0. 75 : 1，以1-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲波
處理后的質(zhì)量濃度為1% _2%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為
0.02-0.3 : l，在50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)40min-90min，得到溶液A ;
(2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于1 % -3%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼 聚糖完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為18-20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于60°C -8(TC恒溫攪拌 乳化30min-50min，得到乳液C ; (4)將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)60min-80min， 加入乳液C，攪拌30min-60min，在-5-5。C ，靜置60min-80min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì) 量濃度為10%的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h-3h，然后加入異丙醇攪拌30min-60min，靜置 分層后棄去上清液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的
戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為io : io. 1-25 : 190-210 : o-8 : 30-40 ; (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 所述步驟(1)為將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠水 溶液中，所述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0.5 : 1，以l-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲 波處理后的質(zhì)量濃度為1.5%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為 0.02-0.3 : l，在50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A。 所述步驟(4)為將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng) 70min加入乳液C，攪拌40min，降溫至(TC ，靜置70min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì)量濃度 為10%的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2. 5h，然后加入異丙醇攪拌40min，靜置分層后棄去上清 液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的戊二醛水溶液和
異丙醇的體積比為io : ii : 200 : 2.5 : 35。 所述親水性藥物為阿昔洛韋、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。 本發(fā)明的明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球具有良好的組織相容性，低毒或無毒，是
性能優(yōu)良的藥物載體材料。本發(fā)明所采用的材料來源廣泛，成本低廉。通過調(diào)節(jié)蒙脫土的
比例來調(diào)節(jié)載藥量與包封率和體外模擬釋放速率。 本發(fā)明的方法可以減少化學(xué)交聯(lián)劑的用量，降低微球的毒性，并使釋藥速率明顯 降低，進(jìn)一步提高對藥物的緩控釋能力，在醫(yī)藥工程中有很好的應(yīng)用前景。


圖1為本發(fā)明實施例1所得微球的SEM照片；
圖2為本發(fā)明實施例2所得微球的SEM照片；
圖3為本發(fā)明實施例3所得微球的SEM照片； 圖4中a，b，c，d四條曲線分別為本發(fā)明實施例4， 5， 6， 7所得微球在模擬胃液(pH =1.26)中的累積釋放率曲線； 圖5中a，b，c三條曲線為本發(fā)明實施例8，9，10所得微球在模擬胃液(pH = 1. 26) 中的累積釋放率曲線； 圖6中b曲線為本發(fā)明實施例11所得微球在模擬胃液(pH = 1. 26)中的累積釋 放率曲線； a曲線為本發(fā)明對比例所得微球在模擬胃液(pH = 1. 26)中的累積釋放率曲線。
在圖4、5和6中，橫坐標(biāo)為時間t(min)，縱坐標(biāo)為累計釋放率Er(X )。
圖7為本發(fā)明實施例5得到微球的光學(xué)顯微鏡照片。
具體實施例方式
本發(fā)明得到的明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球可采用以下方式進(jìn)行性能評價
—、微球的粒徑 本發(fā)明所得到微球的光學(xué)顯微鏡照片如圖7所示，粒徑范圍為3 10 m。
二、載藥量與包封率 精確稱取50mg的載藥微球，放入具塞三角瓶中，加入100ml 5mol/L的HC1，放入恒
溫水浴振蕩器中振蕩24h，溫度37°C ，振蕩速度100rpm。離心此混懸液，吸取上層清液測定
吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出載藥量與包封率。
#^3=微球中藥物質(zhì)量 _ 微球質(zhì)量~
包封率,ti中ii物二量x腿 藥物投放總量 三、體外模擬釋放行為評價 精確稱取50mg載藥微球，置于透析袋中，用5ml預(yù)熱的釋放液分散微球，密封后放
入含有95ml釋放液的具塞三角瓶中，放入恒溫水浴振蕩器中，溫度37°C ，振蕩速度100rpm。
在適當(dāng)?shù)臅r間間隔取樣，每次取樣5ml，同時用預(yù)熱的5ml釋放介質(zhì)補(bǔ)充。用紫外分光度計
測定所取釋放液的吸光度，通過以下公式計算累積釋放率(Er):
-1 "
^ =——^-x濯％ 其中Er為ACV的累積釋放率，％ ;Ve為釋放介質(zhì)置換體積，5ml ;Vo為起始釋放液 體積，100ml ;Ci為第i次置換時，釋放液中藥物的濃度，P g/ml ;m為微球中藥物質(zhì)量，P g ; n為置換次數(shù)。 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
實施例1 (1)稱取親水性藥物氧氟沙星溶于10ml質(zhì)量濃度為1%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，氧氟沙星與明膠的質(zhì)量比為0.5 : 1，以l滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的質(zhì) 量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.02 : 1，在5(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)40min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于1 %的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為18 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于6(TC恒溫攪拌乳化30min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入10. lml A溶液中，插層反應(yīng)60min， 加入190ml乳液C，攪拌30min，在(TC，靜置60min，以1滴/s的速度滴加lml質(zhì)量濃度為
710 %的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h，然后加入30ml異丙醇攪拌30min，靜置分層后棄去上清 液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 精確稱取50mg的載藥微球，放入具塞三角瓶中，加入100ml 5mol/L的HC1，放入恒 溫水浴振蕩器中振蕩24h，溫度37°C ，振蕩速度100rpm。離心此混懸液，吸取上層清液測定 吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算得到載藥量為81. 21mg/g，包封率為57. 2%。
精確稱取50mg載藥微球，置于透析袋中，用5ml預(yù)熱的釋放液分散微球，密封后放 入含有95ml釋放液的具塞三角瓶中，放入恒溫水浴振蕩器中，溫度37°C ，振蕩速度100rpm。 在適當(dāng)?shù)臅r間間隔取樣，每次取樣5ml，同時用預(yù)熱的5ml釋放介質(zhì)補(bǔ)充。用紫外分光度計 測定所取釋放液的吸光度，得出這種微球有緩慢釋放藥物的功效，微球的釋放速度比較平 穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)85.26%。用掃描電鏡觀察微球，其照片如圖1。
實施例2 (1)稱取親水性藥物氧氟沙星溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，氧氟沙星與明膠的質(zhì)量比為0. 15 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為1. 5%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0. 2 : l，在6(TC恒溫攪 拌下，插層反應(yīng)80min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為19 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于7(TC恒溫攪拌乳化40min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入12. 7ml A溶液中，插層反應(yīng)70min， 加入200ml乳液C，攪拌50min，在(TC，靜置70min，以2滴/s的速度滴加2ml質(zhì)量濃度為 10 %的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化3h，然后加入40ml異丙醇攪拌40min，靜置分層后棄去上清 液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 微球載藥量為60. 58mg/g，包封率為51. 39%。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)69. 77% 。用掃描電鏡觀察微
球，其照片如圖2。 實施例3 (1)稱取親水性藥物氧氟沙星溶于10ml質(zhì)量濃度為5%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，氧氟沙星與明膠的質(zhì)量比為0. 75 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為1%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.3 : 1，在7(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)90min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于3%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : l的液體石蠟和乳化劑司盤-80于80。C恒溫攪拌乳化50min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ;
(4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入25mlA溶液中，插層反應(yīng)80min，加入 210ml乳液C，攪拌60min，在0°C ，靜置80min，以2滴/s的速度滴加4ml質(zhì)量濃度為10 % 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化3h，然后加入35ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清液并 真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 微球載藥量為100. 02mg/g，包封率為60. 14 % 。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)53. 12% 。用掃描電鏡觀察微
球，其照片如圖3。 實施例4 (1)稱取親水性藥物阿昔洛韋溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，阿昔洛韋與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.02 : 1，在6(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : l的液體石蠟和乳化劑司盤-80于6(TC恒溫攪拌乳化30min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入10. 2ml A溶液中，插層反應(yīng)60min，加 入210ml乳液C，攪拌30min，在(TC ，靜置60min，以2滴/s的速度滴加2. 5ml質(zhì)量濃度為 10 %的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h，然后加入40ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清 液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。微球載藥量為62. 28mg/g，包封率為49. 82 % 。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)40. 49% 。見圖4-a。
實施例5 (1)稱取親水性藥物阿昔洛韋溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，阿昔洛韋與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0. 1 : l，在7(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)70min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于7(TC恒溫攪拌乳化40min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入llmlA溶液中，插層反應(yīng)70min，加入 210ml乳液C，攪拌45min，在0°C ，靜置65min，以2滴/s的速度滴加2. 5ml質(zhì)量濃度為10% 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2. 5h，然后加入40ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清液 并真空抽濾，除去液體；
(5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 微球載藥量為48. 25mg/g，包封率為38. 60 % 。微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)37.86%。見圖4_b。用光學(xué) 顯微鏡觀察微球，其照片如圖7。
實施例6 (1)稱取親水性藥物阿昔洛韋溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，阿昔洛韋與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0. 2 : l，在65t:恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)75min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于75。C恒溫攪拌乳化45min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入12mlA溶液中，插層反應(yīng)75min，加入 210ml乳液C，攪拌50min，在(TC ，靜置70min，以2滴/s的速度滴加2. 5ml質(zhì)量濃度為10% 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化3h，然后加入40ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清液并 真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 測得載藥量為51. 83mg/g，包封率為41. 46%。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放可達(dá)34. 61%。見圖4-c。
實施例7 (1)稱取親水性藥物阿昔洛韋溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，阿昔洛韋與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.3 : 1，在7(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)80min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于8(TC恒溫攪拌乳化50min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入13mlA溶液中，插層反應(yīng)80min，加入 210ml乳液C，攪拌60min，在0°C ，靜置80min，以2滴/s的速度滴加2. 5ml質(zhì)量濃度為10% 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化3h，然后加入40ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清液并 真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。測得載藥量為48. 04mg/g，包封率為38. 43 % 。微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放可達(dá)26. 96%。見圖4-d。
實施例8 (1)稱取親水性藥物5-氟嘧啶溶于10ml質(zhì)量濃度為4%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，5-氟嘧啶與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以1滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.2 : 1，在5(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為18 : l的液體石蠟和乳化劑司盤-80于6(TC恒溫攪拌乳化30min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以1滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插層反應(yīng)60min，加入 190ml乳液C，攪拌30min，在_5°C ，靜置65min，然后加入40ml異丙醇攪拌30min，靜置分層 后棄去上清液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10 ii m的明膠-殼聚糖/
蒙脫土載藥微球。測得載藥量為35. 78mg/g，包封率為28. 76 % 。微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放可達(dá)83. 12%。見圖5-a。
實施例9 (1)稱取親水性藥物5-氟嘧啶溶于10ml質(zhì)量濃度為4%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，5-氟嘧啶與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.2 : 1，在6(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)70min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為19 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于7(TC恒溫攪拌乳化40min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插層反應(yīng)70min，加入 200ml乳液C，攪拌40min，在(TC ，靜置60min，以3滴/s的速度滴加6ml質(zhì)量濃度為10 % 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h，然后加入40ml異丙醇攪拌40min，靜置分層后棄去上清液并 真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。測得載藥量為68. 22mg/g，包封率為54. 58 % 。微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放可達(dá)26. 89%。見圖5-b。
實施例10 (1)稱取親水性藥物5-氟嘧啶溶于10ml質(zhì)量濃度為4%的分子量為10萬的明膠 水溶液中，5-氟嘧啶與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以3滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波處理后的 質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0.2 : 1，在7(TC恒溫攪拌 下，插層反應(yīng)80min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖
11完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于8(TC恒溫攪拌乳化50min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插層反應(yīng)80min，加入 210ml乳液C，攪拌60min，在3°C ，靜置80min，以3滴/s的速度滴加8ml質(zhì)量濃度為10 % 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化3h，然后加入40ml異丙醇攪拌60min，靜置分層后棄去上清液并 真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 測得載藥量為65. 15mg/g，包封率為52. 12%。微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放可達(dá)22. 34%。見圖5-c。
實施例11 (1)稱取親水性藥物牛血清白蛋白溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的 明膠水溶液中，牛血清白蛋白與明膠的質(zhì)量比為0. 25 : 1，以2滴/s的速度滴加經(jīng)超聲波 處理后的質(zhì)量濃度為2%的蒙脫土懸浮水溶液，蒙脫土與明膠的質(zhì)量比為0. 1 : 1，在7(TC 恒溫攪拌下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于6(TC恒溫攪拌乳化30min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入llmlA溶液中，插層反應(yīng)60min，加入 210ml乳液C，攪拌30min，在5°C ，靜置60min，然后加入40ml異丙醇攪拌30min，靜置分層 后棄去上清液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/ 蒙脫土載藥微球。 測得載藥量為37. 02mg/g，包封率為29. 62 % 。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)69. 70%。見圖6-b。
對比例 (1)稱取親水性藥物牛血清白蛋白溶于10ml質(zhì)量濃度為2%的分子量為10萬的 明膠水溶液中，牛血清白蛋白與明膠的質(zhì)量比為0.25 : 1，在7(TC恒溫攪拌下，反應(yīng)60min， 得到溶液A ; (2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于2%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ; (3)將體積比為20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于6(TC恒溫攪拌乳化30min， 攪拌速度400rpm，得到乳液C ; (4)將10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入10ml A溶液中，反應(yīng)60min，加入210ml 乳液C，攪拌30min，在5°C ，靜置60min，然后加入40ml異丙醇攪拌30min，靜置分層后棄去 上清液并真空抽濾，除去液體； (5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10ym的明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球。 測得載藥量為16. 44mg/g，包封率為13. 15%。 微球的釋放速度比較平穩(wěn)，藥物在480min內(nèi)釋放達(dá)87. 13%。見圖6-a。
權(quán)利要求
一種明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球，其特征是用下述方法制成(1)將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為1％-5％的分子量為10萬的明膠水溶液中，所述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0.15-0.75∶1，以1-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲波處理后的質(zhì)量濃度為1％-2％的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為0.02-0.3∶1，在50-70℃恒溫攪拌下，插層反應(yīng)40min-90min，得到溶液A；(2)把分子量為30萬的殼聚糖溶于1％-3％的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2％的溶液為B；(3)將體積比為18-20∶1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于60℃-80℃恒溫攪拌乳化30min-50min，得到乳液C；(4)將B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)60min-80min，加入乳液C，攪拌30min-60min，在-5-5℃，靜置60min-80min，以1～3滴/s的速度滴加質(zhì)量濃度為10％的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h-3h，然后加入異丙醇攪拌30min-60min，靜置分層后棄去上清液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10％的戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為10∶10.1-25∶190-210∶0-8∶30-40；(5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10μm的明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球，其特征是所述步驟(1) 為將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為2%的分子量為IO萬的明膠水溶液中，所述親水性藥物 與明膠的質(zhì)量比為0.5 : 1，以1_3滴/8的速度滴加入經(jīng)超聲波處理后的質(zhì)量濃度為1.5% 的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為0.02-0. 3 : 1，在50-7(TC恒溫攪 拌下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球，其特征是所述步驟 (4)為將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)70min加入乳液C， 攪拌40min，降溫至Ot:，靜置70min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì)量濃度為10%的戊二醛 水溶液，交聯(lián)固化2. 5h，然后加入異丙醇攪拌40min，靜置分層后棄去上清液并真空抽濾， 除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為io : ii : 200 : 2.5 : 35。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球，其特征是所 述親水性藥物為阿昔洛韋、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。
5. —種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法，其特征是由如下步驟組成(1) 將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為1% _5%的分子量為IO萬的明膠水溶液中，所 述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為O. 15-0.75 : 1，以l-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲波 處理后的質(zhì)量濃度為1% _2%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為 0.02-0.3 : 1，在50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)40min-90min，得到溶液A;(2) 把分子量為30萬的殼聚糖溶于1 % -3%的醋酸水溶液中，并快速攪拌，直至殼聚糖 完全溶解，配制成殼聚糖的質(zhì)量濃度為2%的溶液為B ;(3) 將體積比為18-20 : 1的液體石蠟和乳化劑司盤-80于60°C -S(TC恒溫攪拌乳化 30min-50min，得到乳液C ;(4) 將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)60min-80min，加入乳液C，攪拌30min-60min，在-5-5 °C ，靜置60min-80min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì)量濃 度為10%的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2h-3h，然后加入異丙醇攪拌30min-60min，靜置分層 后棄去上清液并真空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為io : 10.1-25 : 190-210 : o-8 : 30-40 ;(5)依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到粒徑為3-10 i！ m的明膠-殼聚糖/蒙脫 土載藥微球。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法，其特征是 所述步驟(1)為將親水性藥物溶于質(zhì)量濃度為2%的分子量為IO萬的明膠水溶液中，所 述親水性藥物與明膠的質(zhì)量比為0. 5 : 1，以1-3滴/s的速度滴加入經(jīng)超聲波處理后的質(zhì) 量濃度為1.5%的蒙脫土懸浮水溶液，所述蒙脫土與所述明膠的質(zhì)量比為0.02-0. 3 : l，在 50-7(TC恒溫攪拌下，插層反應(yīng)60min，得到溶液A。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法，其特征是 所述步驟(4)為將B溶液以1 3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插層反應(yīng)70min加 入乳液C，攪拌40min，降溫至Ot:，靜置70min，以1 3滴/s的速度滴加質(zhì)量濃度為10% 的戊二醛水溶液，交聯(lián)固化2. 5h，然后加入異丙醇攪拌40min，靜置分層后棄去上清液并真 空抽濾，除去液體；所述B溶液、A溶液、乳液C、質(zhì)量濃度為10%的戊二醛水溶液和異丙醇的體積比為io : ii : 200 : 2.5 : 35。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5或6或7所述的一種明膠_殼聚糖/蒙脫土載藥微球的制備方法， 其特征是所述親水性藥物為阿昔洛韋、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種明膠-殼聚糖/蒙脫土載藥微球及制備方法，載藥微球用下述方法制成將親水性藥物溶于明膠水溶液中，加入蒙脫土懸浮水溶液，插層反應(yīng)，得到溶液A；殼聚糖溶于醋酸水溶液中，攪拌，溶解，得溶液B；將液體石蠟和司盤-80攪拌乳化，得到C；將B溶液加入A溶液中，插層反應(yīng)，加入C，攪拌，靜置，滴加戊二醛水溶液，交聯(lián)固化，加入異丙醇攪拌，靜置分層后棄去上清液并真空抽濾，除去液體；依次用無水乙醚和異丙醇清洗，干燥，得到微球。本發(fā)明的載藥微球具有良好的組織相容性，低毒或無毒，是性能優(yōu)良的藥物載體材料。本發(fā)明的方法可減少化學(xué)交聯(lián)劑用量，降低微球的毒性，并使釋藥速率明顯降低，進(jìn)一步提高對藥物的緩控釋能力。
文檔編號A61K47/42GK101703480SQ200910229028
公開日2010年5月12日 申請日期2009年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月8日
發(fā)明者單佳慧, 姚康德, 王欣, 范兆明, 鄭俊萍 申請人:天津大學(xué)