專利名稱：一種曼陀羅子總黃酮提取制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及茄科植物種子總黃酮提取制備方法，尤其涉及一種曼陀羅子總黃酮提
取制備方法。
背景技術(shù)：
曼陀羅子為茄科植物曼陀羅Datura stramoni皿L.的干燥成熟種子。秋季果實 成熟時割下果枝，打下種子曬干。呈腎形，略扁，長3 4mm，寬2. 5 3. 2mm。表面黑色或 棕黑色，具有隆起的網(wǎng)紋，遍布小凹點。種臍為于一側(cè)，平坦。橫切面外種皮撐類方形，常 為底和側(cè)面增厚。內(nèi)層為數(shù)列切線延長的棕色薄壁細(xì)胞。外胚乳細(xì)胞呈扁矩形，切線延長， 在種皮內(nèi)層與外胚之間夾有頹廢層。內(nèi)胚乳細(xì)胞多角形，較大，內(nèi)含脂肪油滴及蛋白粒。氣 微，味辛辣。其曼陀羅全草入藥，具有鎮(zhèn)咳平喘、麻醉止痛、祛風(fēng)除濕的功效，能治哮喘、銀屑 病、驚痛、風(fēng)濕痹痛、瘡瘍疼痛、脫肛、瀉痢等多種疾病。曼陀羅花治療銀屑病效果十分顯著。 曼陀羅是重要的麻醉藥，可制作外科手術(shù)麻醉劑。而曼陀羅種子具有鎮(zhèn)靜，止痛，安神，止 咳，平喘的功能，主治關(guān)節(jié)骨痛，胃痛腹痛，咳嗽氣喘。曼陀羅子的藥效跟其總黃酮類成分有 很大的關(guān)系，由于其生理活性較強(qiáng)，應(yīng)用廣泛，因此選擇性好，操作簡單的提取純化方法，分 離曼陀羅有效成分，是一項很有意義的工作。 中藥中黃酮類化合物的提取制備方法有冷浸法，水提法，醇提法，水提法和醇提法 一般要求回流加熱。冷浸法和水提法的提取效率低；醇提法的提取率高，但耗費溶劑，且提 取雜質(zhì)高。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有曼陀羅子中總黃酮的提取與純化方法上存在的不足之處，本發(fā)明提供一 種全新的曼陀羅子中總黃酮的提取制備方法，主要用重量分?jǐn)?shù)O. 5 5% NaOH水溶液和樹 脂對曼陀羅子進(jìn)行柱提純，采用這種方法，降低了有機(jī)溶劑在整個提純過程中的應(yīng)用，防止 了有機(jī)溶劑對最終產(chǎn)物的影響，本發(fā)明方法純化曼陀羅子，獲得純化的曼陀羅子總黃酮含 量>55%。且重現(xiàn)性好，樹脂可重復(fù)使用。 本發(fā)明所述的技術(shù)方案如下一種曼陀羅子總黃酮樹脂提取制備方法，由以下具 體步驟組成 1)取粉碎的曼陀羅子，加入藥材質(zhì)量10 30倍體積量的提取劑，先浸泡10 20 小時，然后回流提取2 8小時，收集提取液，過濾。優(yōu)選以藥材質(zhì)量15 20倍體積量的 提取劑用量，浸泡15小時，回流提取4 5小時。 2)將步驟1得到的提取液濃縮到10mg/ml，選用HPD-400或HPD-600或AB-8或 D101大孔樹脂，上樣，上樣吸附0. 1 2. 0小時，先水洗，水洗體積為1BV 4BV，水洗流速 為lBV/h 4BV/h，然后用乙醇洗脫，洗脫用乙醇體積分?jǐn)?shù)為30% 80%，洗脫量為1BV 4BV，洗脫速度為lBV/h 4BV/h。優(yōu)選工藝條件為HPD-600或D101大孔樹脂進(jìn)行純化，上 樣吸附時間為1. 0小時，水洗體積為2BV 3BV，水洗流速為2BV 3BV，洗脫用乙醇濃度為
340 % 60%，乙醇洗脫量為2BV 3BV，乙醇洗脫速度為2BV/h 3BV/h。3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，5(TC 6(TC真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品。 本發(fā)明提供的一種曼陀羅子的總黃酮提取制備方法步驟l所采用的提取劑為
0. 5 5% NaOH水溶液。優(yōu)選0. 5 1 % NaOH水溶液。其優(yōu)點是，低濃度的NaOH水溶液比
水溶液提取黃酮類化合物的提取效率高，而且較之有機(jī)溶劑法提取節(jié)省溶劑。 本發(fā)明提供的一種曼陀羅子的總黃酮提取制備方法步驟1的回流狀態(tài)為減壓條
件下采用微波加熱。微波加熱功率為50W 500W，優(yōu)選100W 200W。其優(yōu)點是，微波加
熱對黃酮類活性成分的損害少，加壓條件下微波加熱的提取效率高。 本發(fā)明方法純化曼陀羅子，獲得純化的曼陀羅子總黃酮含量>55%。且重現(xiàn)性好，
樹脂可重復(fù)使用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點 1.本發(fā)明提供的曼陀羅子總黃酮提取制備方法操作簡單、快捷；
2.所選的大孔樹脂具有吸附量大、解吸率大的功能；
3.以乙醇為溶劑和洗脫劑，價廉、無毒。
具體實施例方式
為了更好理解本發(fā)明的技術(shù)方案，以下通過具體的實施例進(jìn)一步詳細(xì)描述。
實施例l 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量IO倍體積量的O. 5% NaOH水溶液，先浸
泡10小時，然后微波加熱，功率為150W，減壓回流提取4小時，收集提取液，過濾； 2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用HPD-600大孔樹脂純化，上樣吸附
0. 5小時，先用1BV蒸餾水水洗，水洗流速為2BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)40%乙醇溶液為洗脫劑洗 脫，洗脫量為3BV，洗脫速度為2BV/h ; 3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，5(TC真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品4. 83g，黃酮 含量為59.1%。
實施例2 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量15倍體積量的1 % NaOH水溶液，先浸泡
15小時，然后微波加熱，功率為200W，減壓回流提取3小時，收集提取液，過濾； 2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用D-101大孔樹脂純化，上樣吸附
1. 0小時，先用2BV蒸餾水水洗，水洗流速為3BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液為洗脫劑洗 脫，洗脫量為2BV，洗脫速度為3BV/h ; 3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，55t:真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品4. 76g黃酮 含量為55. 2%。
實施例3 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量20倍體積量的3% NaOH水溶液，先浸泡 20小時，然后微波加熱，功率為150W，減壓回流提取5小時，收集提取液，過濾；
2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用AB-8大孔樹脂純化，上樣吸附1. 5 小時，先用1BV蒸餾水水洗，水洗流速為2BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)70X乙醇溶液為洗脫劑洗脫， 洗脫量為1BV，洗脫速度為lBV/h ;
3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，5(TC真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品4. 27g，黃酮 含量為56.7%。
實施例4 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量18倍體積量的2% NaOH水溶液，先浸泡 12小時，然后微波加熱，功率為180W，減壓回流提取3小時，收集提取液，過濾；
2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用HPD-400大孔樹脂純化，上樣吸附 1. 0小時，先用4BV蒸餾水水洗，水洗流速為4BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)30%乙醇溶液為洗脫劑洗 脫，洗脫量為4BV，洗脫速度為3BV/h ; 3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，6(TC真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品4. 62g，黃酮 含量為58. 4%。
實施例5 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量18倍體積量的體積分?jǐn)?shù)為50%乙醇溶 液，先浸泡10小時，然后微波加熱，功率為IOOW，減壓回流提取4小時，收集提取液，過濾；
2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用D-101大孔樹脂純化，上樣吸附 1. 0小時，先用2BV蒸餾水水洗，水洗流速為2BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液為洗脫劑洗 脫，洗脫量為2BV，洗脫速度為3BV/h ; 3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，55t:真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品4. 62g，黃酮 含量為55.7%。
實施例6 1)取粉碎的曼陀羅子100g，加入藥材質(zhì)量15倍體積量的1 % NaOH水溶液，先浸泡 15小時，電熱套加熱，減壓回流提取4小時，收集提取液，過濾； 2)將步驟1得到的過濾液濃縮到10mg/ml，選用D-101大孔樹脂純化，上樣吸附 1. 0小時，先用3BV蒸餾水水洗，水洗流速為3BV/h，再用體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液為洗脫劑洗 脫，洗脫量為2BV，洗脫速度為lBV/h ; 3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，6(TC真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品5.01g，黃酮 含量為59. 8%。
權(quán)利要求
一種曼陀羅子總黃酮提取制備方法，其特征是步驟為1)取粉碎的曼陀羅子，加入藥材質(zhì)量10～30倍體積量的提取劑，先浸泡10～20小時，然后回流提取2～8小時，收集提取液，過濾；2)將步驟1得到的提取液濃縮到10mg/ml，選用HPD-400或HPD-600或AB-8或D101大孔樹脂，上樣，上樣吸附0.1～2.0小時，先水洗，水洗體積為1BV～4BV，水洗流速為1BV/h～4BV/h，然后用乙醇洗脫，洗脫用乙醇體積分?jǐn)?shù)為30％～80％，洗脫量為1BV～4BV，洗脫速度為1BV/h～4BV/h；3)收集步驟2的乙醇洗脫液，濃縮，50℃～60℃真空干燥，得干燥的純化產(chǎn)品。
2. 如權(quán)利要求1所述的曼陀羅子總黃酮提取制備方法，其特征是步驟1所采用的提 取劑為重量分?jǐn)?shù)0. 5 5% NaOH水溶液。
3. 如權(quán)利要求1所述的曼陀羅子總黃酮提取制備方法，其特征是步驟1的回流狀態(tài) 為減壓條件下采用微波加熱。
4. 如權(quán)利要求1所述的曼陀羅子總黃酮樹脂純化方法，其特征是獲得純化的曼陀羅子總黃酮含量>55%。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及提供一種全新的曼陀羅子中總黃酮的提取制備方法，主要用重量分?jǐn)?shù)0.5～5％NaOH水溶液和樹脂對曼陀羅子進(jìn)行柱提純，采用這種方法，降低了有機(jī)溶劑在整個提純過程中的應(yīng)用，防止了有機(jī)溶劑對最終產(chǎn)物的影響，本發(fā)明方法純化曼陀羅子，獲得純化的曼陀羅子總黃酮含量＞55％。且重現(xiàn)性好，樹脂可重復(fù)使用。
文檔編號A61P25/20GK101780175SQ20091023009
公開日2010年7月21日 申請日期2009年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月13日
發(fā)明者段洪東, 王世瀟 申請人:日照金禾生化集團(tuán)有限公司