專利名稱：魚腥草防治血栓的新制藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
魚腥草是三白草科植物蕺菜，別名側(cè)耳根、豬鼻拱(豬鼻孔)、九節(jié)蓮、折耳根、肺 形草、臭腥草。魚腥草全草(地上部分和地下部分)均既可食用也可藥用。作為藥用時(shí)，既 可用鮮品，也可用干燥品。魚腥草具有清熱解毒，消癰排膿，利尿通淋的功能。用于肺癰吐 膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒，如肺膿腫，痰熱咳嗽，腎炎水腫，尿路感染，癰癤。在臨 床上，魚腥草被制成外用、口服和注射劑應(yīng)用。1.魚腥草被報(bào)道有多方面的藥效作用，但未見有抗血栓或抗凝血方面的研究報(bào)道以往的研究證明魚腥草有以下作用(1)抗病原微生物作用能抑制金黃色葡萄 球菌、流感桿菌、肺炎雙球菌生長；(2)利尿作用，能增加尿液分泌，可用于尿路感染的頻尿 澀痛；(3)增強(qiáng)免疫作用能提高慢性氣管炎患者白血球的吞噬作用；(4)抗過敏作用能 改善動(dòng)物過敏性鼻炎癥狀。但未見有關(guān)魚腥草抗血栓或抗凝血的文獻(xiàn)記載或正式公開的研 究報(bào)道。2.魚腥草臨床應(yīng)用廣泛，但未見其在血栓性疾病防治方面的應(yīng)用魚腥草在臨床應(yīng)用廣泛，既可單獨(dú)使用，也可與其他藥物組成復(fù)方應(yīng)用，既有注射 劑，也有口服、外用制劑使用。其用途多用于治療病毒或細(xì)菌導(dǎo)致的呼吸道感染、泌尿系感 染、咽炎、扁桃體炎、腎炎等疾病。魚腥草注射劑應(yīng)用很廣泛。根據(jù)魚腥草注射液的國家標(biāo) 準(zhǔn)和生產(chǎn)廠家的說明書，魚腥草注射液的功能主治為清熱，解毒，利濕。應(yīng)用范圍為肺 膿瘍，痰熱咳嗽，白帶，尿路感染，癰癤。魚腥草復(fù)方制劑如復(fù)方魚腥草片(魚腥草、黃芩、板 藍(lán)根、連翹、金銀花)的功能主治為清熱解毒，用于外感風(fēng)熱所致的急喉痹、急乳蛾，癥見 咽部紅腫、咽痛；急性咽炎、急性扁桃體炎見上述證候者。魚腥草滴眼液的功能主治為清 熱，解毒，利濕。用于風(fēng)熱疫毒，暴風(fēng)客熱，天行赤眼暴翳(急性卡他性結(jié)膜炎，流行性角結(jié) 膜炎)。迄今，未見魚腥草單獨(dú)或以魚腥草為主要成分的復(fù)方以任何用藥途徑的相關(guān)制劑用 于防治血栓或凝血的臨床應(yīng)用報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了充分利用魚腥草資源，擴(kuò)大魚腥草的臨床應(yīng)用，本發(fā)明人經(jīng)過魚腥草給予大 鼠血栓模型后對血栓的抑制作用研究；魚腥草給予大鼠血栓模型后對血栓造成的血小板消 耗的影響；魚腥草給予大鼠血栓模型后對血栓造成的白細(xì)胞消耗的影響等實(shí)驗(yàn)，證明了魚 腥草有防治血栓、抗凝血的新作用。因此，本發(fā)明的目的是提供魚腥草在制備預(yù)防和/或治 療血栓藥物中的應(yīng)用，在制備抗凝血藥物中的應(yīng)用以及在制備治療心血管疾病的藥物組合 物中的應(yīng)用。。技術(shù)解決方案本發(fā)明內(nèi)容為提供魚腥草在制備預(yù)防和/或治療血栓藥物中的新的應(yīng)用，在制備抗凝血藥物中的新的應(yīng)用。所述的魚腥草是鮮或干魚腥草全草、地上或地下部分的提取物，其制備可采取如 下方法1.取鮮或干魚腥草IOOOg進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液1000ml，再進(jìn)行重蒸餾，收 集蒸餾液500ml，加入3. 5g氯化鈉及適量的助溶劑(如聚山梨酯80或solution HS15或其 他可接受的助溶劑)，混勻，加注射用水使成1000ml，濾過，滅菌。
2.取鮮或干魚腥草lOOOg，用沙氏提取器提取揮發(fā)油。用生理鹽水配制揮發(fā)油的 飽和水溶液，為了提高揮發(fā)油的溶解度，可加入適量可接受的助溶劑(如聚山梨酯80或 solution HS15或其他可接受的助溶劑)。3.取鮮或干魚腥草100g，加入800ml水煎煮至沸騰后20min，反復(fù)2次，合并過濾 藥液，濃縮至200ml，制得水煎液可以直接入制劑用。為了去除鞣質(zhì)，也可以將水煎液中再加 入95%乙醇，攪拌后，靜置過夜。取出上清，過濾，回收乙醇后，制成200ml液體。4.魚腥草200g，粉碎成小段，放入合適體積的容器中。加入乙醇或乙醚或石油醚 1200ml，塞緊瓶口，浸泡24 48h。濾出藥液，揮干石油醚。本發(fā)明的產(chǎn)品包括含有魚腥草的涉及抗血栓、抗凝血相關(guān)應(yīng)用的藥品、保健品、食 品和化妝品。本發(fā)明的產(chǎn)品包括涉及含有魚腥草的涉及抗血栓、抗凝血相關(guān)應(yīng)用的人用和獸用
女口
廣 PFt ο本發(fā)明再一方面還涉及以魚腥草提取物為活性成分，以抗血栓、抗凝血為適應(yīng)癥 的藥物組合物。該藥物組合物可將本發(fā)明技術(shù)方案中所述的方法制備的提取物，與一種或 多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦型劑和/或輔料結(jié)合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑 型。給藥途徑可為腸道或非腸道途徑，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔 粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體 劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑、微乳、混懸劑、注射劑(包 括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑、搽劑等；固體制劑可以是片劑(包括普通 片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片等)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、 腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體制 劑可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。制劑可以制成普通制劑、也可以是緩釋劑、控釋劑、靶向 制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)和效果1.魚腥草資源非常廣泛，提取方法簡單易行，可制成注射液、膠囊劑、濃縮丸、顆粒 齊U、片劑、散劑、口服液等藥物制劑。2.經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證明，魚腥草能夠明顯抑制血栓模型的血栓形成，顯著縮短血栓長 度，抑制由于血栓形成和凝血而導(dǎo)致的血小板下降，抑制血栓形成過程中的白細(xì)胞數(shù)降低。
四

無附圖。五具體實(shí)施例方式實(shí)施例一魚腥草的抗血栓作用試驗(yàn)1.魚腥草制備方法取鮮或干魚腥草IOOOg進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液1000ml，再進(jìn)行重蒸餾，收集蒸餾液500ml，加入3. 5g氯化鈉及適量的助溶劑(如聚山梨酯80或solutionHS15或其他 可接受的助溶劑)，混勻，加注射用水使成IOOOml，濾過，滅菌。2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法將大鼠按隨機(jī)分組，每組10只，分別為①正常組；②血栓模型組(角叉菜膠Ca/ 內(nèi)毒素LPS造模)；③魚腥草24ml/kg;④魚腥草12ml/kg。試驗(yàn)第一天，③、④組大鼠腹腔 注射魚腥草，①、②組腹腔注射生理鹽水5ml/kg，每組分別上午和下午各注射1次；下午注 射給藥完畢后(16 :00pm)，除了正常組以外，其他三組均腹腔注射角叉菜膠25mg/kg。隨后， 將動(dòng)物禁食16 18h。次日，魚腥草二個(gè)劑量組再腹腔注射給藥一次，正常對照組和模型組 仍然腹腔注射生理鹽水。給藥后30分鐘，正常對照組靜脈注射給予生理鹽水0. 24ml/100g, 其他三個(gè)組的動(dòng)物均經(jīng)靜脈注射給予內(nèi)毒素(LPS) 50 μ g/kg (每ml含LPS 20 μ g)。于注射 LPS后24h，用卡尺測量大鼠尾部的血栓長度。3.抗血栓試驗(yàn)結(jié)果采用角叉菜膠/LPS造模后，模型組動(dòng)物體內(nèi)形成血栓，具體表現(xiàn)在動(dòng)物的尾巴遠(yuǎn) 端，形成約5-9cm的血栓長度，由于血栓阻塞尾動(dòng)脈和靜脈血管，而使得相應(yīng)的組織以及皮 膚因缺血而呈現(xiàn)為紫色，因此，血栓長度很容易測量。從表1結(jié)果可見，模型組的血栓長度 平均約為7. 7cm，魚腥草24ml/kg和12mg/kg均能抑制大鼠血栓形成，其中，24ml/kg組與對 照組比較有非常顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P < 0. 05)。結(jié)果表明，魚腥草能夠明顯抑制血栓形成。表1魚腥草對大鼠血栓形成的抑制作用(x±sd)「00301 注與模型組比較**Ρ <0.01實(shí)施例二 魚腥草對血栓造成的白細(xì)胞消耗的影響1.魚腥草制備方法取鮮或干魚腥草IOOOg進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液1000ml，再進(jìn)行重蒸餾，收集 蒸餾液500ml，加入3. 5g氯化鈉及適量的助溶劑，混勻，加注射用水使成1000ml，濾過，滅菌。2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法將大鼠按隨機(jī)分組，每組10只，分別為①正常組；②血栓模型組(角叉菜膠Ca/ 內(nèi)毒素LPS造模)；③魚腥草24ml/kg;④魚腥草12ml/kg。試驗(yàn)第一天，③、④組大鼠腹腔 注射魚腥草，①、②組腹腔注射生理鹽水5ml/kg，每組分別上午和下午各注射1次；下午注 射給藥完畢后(16:00pm)，除了正常組以外，其他三組均腹腔注射角叉菜膠25mg/kg。隨后，將動(dòng)物禁食16 18h。次日，魚腥草二個(gè)劑量組再腹腔注射給藥一次，正常對照組和模型組 仍然腹腔注射生理鹽水。給藥后30分鐘，正常對照組靜脈注射給予生理鹽水0. 24ml/100g, 其他三個(gè)組的動(dòng)物均經(jīng)靜脈注射給予內(nèi)毒素(LPS) 50 μ g/kg (每ml含LPS 20 μ g)。于注射 LPS后4h (當(dāng)日)，從眼眶靜脈叢取血，用全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀，測定血栓形成導(dǎo)致的白細(xì)胞消
耗 ο3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)血栓形成的過程，當(dāng)血栓凝聚時(shí)，血栓內(nèi)會聚集大量的白細(xì)胞，從而造成外周 血白細(xì)胞數(shù)量降低，血栓越大，外周血白細(xì)胞數(shù)越低。因此外周血白細(xì)胞數(shù)量降低的程度可 反應(yīng)血栓程度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠外周血中的白細(xì)胞總數(shù)在給予LPS后4小時(shí) 迅速下降62% (與正常對照組比較P <0.01)，這是由于血栓聚集了大量的白細(xì)胞，而導(dǎo)致 外周循環(huán)血中的白細(xì)胞數(shù)量迅速下降。魚腥草能抑制血栓形成造成的白細(xì)胞消耗，從而使 得外周血白細(xì)胞數(shù)量明顯增高，其中24ml/kg劑量組較模型組增高約40%，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué) 顯著性差異(P <0.05)。結(jié)果提示，魚腥草可抑制血栓形成，從而減少白細(xì)胞在血栓的聚 集，提升外周血中循環(huán)的白細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果見表2。表2魚腥草對血栓造成的白細(xì)胞消耗的影響(，η=10) 注與對照組比較##P < 0. 01，與模型組比較*P < 0. 05，**P < 0.01實(shí)施例三、魚腥草對血栓造成的血小板消耗的影響1.魚腥草制備方法取鮮或干魚腥草IOOOg進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液1000ml，再進(jìn)行重蒸餾，收集 蒸餾液500ml，加入3. 5g氯化鈉及適量的助溶劑，混勻，加注射用水使成1000ml，濾過，滅菌。2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法將大鼠按隨機(jī)分組，每組10只，分別為①正常組；②血栓模型組(角叉菜膠Ca/ 內(nèi)毒素LPS造模)；③魚腥草24ml/kg;④魚腥草12ml/kg。試驗(yàn)第一天，③、④組大鼠腹腔 注射魚腥草，①、②組腹腔注射生理鹽水5ml/kg，每組分別上午和下午各注射1次；下午注 射給藥完畢后(16:00pm)，除了正常組以外，其他三組均腹腔注射角叉菜膠25mg/kg。隨后， 將動(dòng)物禁食16 18h。次日，魚腥草二個(gè)劑量組再腹腔注射給藥一次，正常對照組和模型組 仍然腹腔注射生理鹽水。給藥后30分鐘，正常對照組靜脈注射給予生理鹽水0. 24ml/100g, 其他三個(gè)組的動(dòng)物均經(jīng)靜脈注射給予內(nèi)毒素(LPS) 50 μ g/kg (每ml含LPS 20 μ g)。于注射 LPS后24h (次日)，從眼眶靜脈叢取血，用全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀，測定血栓形成導(dǎo)致的血小板消耗。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)血栓形成的過程，當(dāng)血栓凝聚時(shí)，血栓內(nèi)會聚集大量的血小板，從而造成外周 血血小板數(shù)量降低，血栓越大，外周血小板數(shù)越低。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，模型組在給予LPS24h 后外周血中的血小板數(shù)(PLT)顯著下降62% (與正常對照組比較P <0.01)，這是由于血 栓聚集了大量的血小板，從而導(dǎo)致外周循環(huán)血中的血小板數(shù)量迅速下降。魚腥草能顯著抑 制血小板數(shù)量降低，其中24ml/kg劑量組較模型組增高約40%，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異 (P < 0. 05)。結(jié)果提示，魚腥草可抑制血栓形成，從而減少血小板在血栓的聚集，提升外周 血中循環(huán)的血小板數(shù)量。結(jié)果見表3。表3魚腥草對血栓形成造成的血小板消耗的抑制作用(M，n=10) 注與對照組比較##P < 0. 01，與模型組比較< 0. 05，**Ρ < 0. 01。
權(quán)利要求
魚腥草在制備預(yù)防和/或治療血栓藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的魚腥草是魚腥草全草、地上或地下 部分的水煎液、蒸餾液、揮發(fā)油或有機(jī)溶劑提取物。
3.根據(jù)權(quán)利1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物產(chǎn)品包括含有魚腥草的藥物組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3，其特征在于，所述的藥物產(chǎn)品包括藥品、保健品、食品、化妝 品。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4，其特征在于，所述的藥物產(chǎn)品包括注射液、膠囊劑、濃縮丸、 顆粒劑、片劑、散劑、口服液、凝膠劑、噴霧劑、滴鼻劑、滴眼劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4、5，其特征在于，所述的藥物產(chǎn)品包括人用和獸用。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及魚腥草防治血栓的新制藥用途，以提供魚腥草在制備預(yù)防和/或治療血栓的藥物、制備抗凝血藥物中的新的應(yīng)用。采用鮮或干魚腥草，用蒸餾法、水煎、有機(jī)溶劑提取或采用揮發(fā)油提取方法制備魚腥草活性部分。經(jīng)過動(dòng)物試驗(yàn)證明，魚腥草具有明顯的抗血栓、抑制血栓導(dǎo)致的血小板消耗和白細(xì)胞消耗的作用。這些作用在魚腥草以往的研究和臨床上未見報(bào)道和應(yīng)用，故本發(fā)明具有獨(dú)特性及新穎性。魚腥草資源廣泛，提取方法簡便，可制成各種劑型；血栓性疾病是最常見的疾病，臨床用藥需求巨大，因此本發(fā)明具有很強(qiáng)的實(shí)用性，其在預(yù)防和/或治療血栓方面的應(yīng)用前景十分廣闊。
文檔編號A61K8/97GK101862392SQ200910237348
公開日2010年10月20日 申請日期2009年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月16日
發(fā)明者李春英, 梁愛華 申請人:中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所