專利名稱：：治療癌癥的藥物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是一種治療癌癥的藥物制劑及其制備方法，屬于中藥的
技術(shù)領(lǐng)域：
。技術(shù)背景癌癥是對人類威脅最嚴重的疾病之一。苗醫(yī)對癌癥包塊稱之為"龜"，苗語稱之為"波"或"播"。臨床主要表現(xiàn)為，患處包塊、消痩、乏力神差、癌痛等癥。苗醫(yī)認為"龜"之形成，主要是外受邪毒和內(nèi)損所致，由于人體自身氣血不足，受外來邪毒危害，傷及人體氣、血、水逐漸形成。氣結(jié)血滯則成"龜"(包塊)，癌痛；氣傷，乏力神差；傷血傷水，人體失養(yǎng)，久之則消痩。根據(jù)苗醫(yī)綱經(jīng)理論，這類疾病多為冷熱并病，按"熱病冷治，冷病熱治"原則，治應(yīng)冷熱藥合用；現(xiàn)有技術(shù)中也有許多中藥用于治療癌癥；這些藥品有一定的治療作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療癌癥的藥物制劑及其制備方法；根據(jù)苗醫(yī)藥的理論，本申請研發(fā)了治療癌癥的藥物制劑。在處方研究中，使用的"嘎龔處"(山慈菇)性微冷，味微苦辛，入熱經(jīng)，有小毒，具清熱解毒、消腫散結(jié)、抑瘤抗癌功能，為主藥。；"加丟歐里"(白英)性冷，味苦，入熱經(jīng)，有小毒，具清熱利濕、解毒消腫、抗癌功能；"加鞏山"(苦參)性冷，味苦，入熱經(jīng)，功用清熱燥濕；"加俄西"(淫羊藿)性熱，味辣，入快經(jīng)、半邊經(jīng)，具補腎陽，增強免疫功能；當歸性味辛溫，補血養(yǎng)血；白術(shù)苦、甘，溫，健脾益氣，燥濕利水，止汗；人參甘微苦平，補氣、生精安神；上述六味共為輔藥。諸藥合用，具補氣養(yǎng)血，健脾生津，養(yǎng)陰扶陽，抑瘤抗癌之功。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，除了研究了由山慈菇、白英、淫羊藿、苦參、當歸、白術(shù)制成的制劑之外，還重點研究了用這些藥材制備的分散片制劑、它的崩解性好，生物利用度高，特別適合于老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用。本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量計算，它是用山慈菇100—600g、白英100—500g、淫羊藿100—500g、苦參100—500g、當歸100—500g、白術(shù)100—300g、人參50—200g制作成分散片。準確的說按照重量計算，它是按山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g制成的分散片。所述的治療癌癥的藥物制劑的制備方法取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味3加水煎煮1一5次，每次0.5—3小時，合并煎液，過濾，濃縮，加入上述細粉，混勻，干燥，然后分別制成的。所述制劑中的分散片劑這樣制備取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；取PPVP3.0g與檸檬黃混勻，取3/4與浸膏粉混合均勻，用1%的00無水乙醇液作粘合劑，40目制料、整粒，剩余l(xiāng)/4的PPVP與檸檬黃混勻的混合粉加于制好的粒子中，壓片，即得。所述制劑中的片劑這樣制備取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時l.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥，粉碎，加入微晶纖維素22g，用60%乙醇制粒，干燥，整粒，加硬脂酸鎂1.5g，混勻，壓片，包衣，即得。本方中，使用的"嘎龔處"(山慈菇)性微冷，味微苦辛，入熱經(jīng)，有小毒，具清熱解毒、消腫散結(jié)、抑瘤抗癌功能，為主藥。；"加丟歐里"(白英)性冷，味苦，入熱經(jīng)，有小毒，具清熱利濕、解毒消腫、抗癌功能；"加鞏山"(苦參)性冷，味苦，入熱經(jīng)，功用清熱燥濕；"加俄西"(淫羊藿)性熱，味辣，入快經(jīng)、半邊經(jīng)，具補腎陽，增強免疫功能;當歸性味辛溫，補血養(yǎng)血；白術(shù)苦、甘，溫，健脾益氣，燥濕利水，止汗；人參甘微苦平，補氣、生精安神；上述六味共為輔藥。諸藥合用、協(xié)同增效，具補氣養(yǎng)血，健脾生津，養(yǎng)陰扶陽，抑瘤抗癌之功；藥品用于中晚期癌癥的輔助治療以及癌癥放化療引起的白細胞減少屬氣血兩虛者。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，提供的由山慈菇、白英、淫羊藿、苦參、當歸、白術(shù)制備而成的分散片、其崩解性好，生物利用度高，特別適合于老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用。本申請人在研制顆粒劑的過程中發(fā)現(xiàn)，顆粒劑以溶液狀態(tài)進入體內(nèi)，與口服固體制劑相比，減少了體內(nèi)崩解過程，有利于本產(chǎn)品的吸收，大大縮短了起效時間，但該產(chǎn)品顆粒劑也存在一定的問題，就是口感苦。本專利發(fā)明人擬通過添加矯味劑來解決這兩個問題。本申請人在研制分散片時發(fā)現(xiàn)，藥典規(guī)定分散片必須在19°C21°C水中3min內(nèi)完全崩解，對混懸性、生物利用度、分散均勻度等也有較高要求，而本發(fā)明提取物的出膏率很高、粘度過大、吸濕性過強，使得對成型工藝處方中各種輔料的種類以及用量選擇要求非常嚴格，稍有偏差，就會導(dǎo)致產(chǎn)品不合格。微丸的直徑小于2.5mm，類于顆粒性質(zhì)，生物利用度高，實驗例l:成型工藝研究1、分散片劑成型工藝研究分散片遇水可迅速崩解形成均勻的粘性懸液的水分散片，解決了原劑型崩解性差，溶出緩慢的缺點，本申請人制得的分散片在19。C2rC水中3min內(nèi)完全崩解，混懸性好、生物利用度高、分散均勻度。①輔料篩選處方PPVP(3g)K30(%)崩解時間/s外加內(nèi)加13/41/41.56322/42/41.23731/43/41.02640全量0.8525全量00.835②崩解時限檢査采用轉(zhuǎn)籃法，升降式崩解儀，片劑取6片，觀察通過篩網(wǎng)的情況。通過率高則崩解性好，更宜人體吸收。組別崩解時限(s)123456本發(fā)明片劑l批272830302829本發(fā)明片劑2批252731302927本發(fā)明片劑3批262834332729結(jié)果表明，取PPVP3.0g與檸檬黃混勻，取2/5與浸膏粉混合均勻，用1.5%的00無水乙醇液作粘合劑，40目制料、整粒，剩余3/5的PPVP與檸檬黃混勻的混合粉加于制好的粒子中，壓片，得到的分散片產(chǎn)品易于崩解。2藥理研究抗腫瘤作用實驗1.1對小鼠肉瘤S180的影響小鼠300只，18-22g，雌雄各半，隨機分5組，本發(fā)明制劑高劑量組(1.557g/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)及環(huán)磷酰胺組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天。停藥當日處死動物，扭力天平稱本實驗重復(fù)三批，結(jié)果相似。結(jié)果見下表。本發(fā)明制劑有明顯的抑制S180腫瘤生長怍用，但不如環(huán)磷酰胺作用強。對,J鼠肉瘤S180生長的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>1.2對小鼠艾氏腹水癌(實體型)的影響小鼠300只，18-22g，雌雄各半，隨機分為54組，本發(fā)明制劑高劑量組(1.557g/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)及環(huán)磷酰胺組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天。停藥當日處死動物，扭力天平實驗重復(fù)三批，結(jié)果見下表。結(jié)果表明，本發(fā)明各劑量組能明顯抑制腫瘤生長。本發(fā)明對小鼠艾氏腹水癌實體型生長的影響(X±S)組別劑量動物數(shù)(只)(藥前/藥后)藥后體重瘤重F值M制率第空白對照—10/102T.60±2.051.36±0.34環(huán)磷酰胺10/1025.10±1.410.56±0.25復(fù)Ol58.82本發(fā)明顆粒I3.010/102T.20±1.83O.ST土0.31復(fù)Ol36.03次本發(fā)明顆粒ii10/102.020.9肚0.26復(fù)Ol本發(fā)明顆粒III1.010/101.T21.02±<0.0125.00第空白對照—10/1024.90±1.451.3吐0.25環(huán)磷酰胺10/1022.30±1.050.41±0.19復(fù)OlTO.28—本發(fā)明顆粒I3.010/1024.50±1.T2O.T6±0.25復(fù)Ol44.93次本發(fā)明顆粒ii10/101.58O.S5±0.20復(fù)Ol38.41本發(fā)明顆粒ni1.010/10ISO復(fù)0521.01第空白對照—10/102T.40±1.86環(huán)磷酰胺10/1024.30±1.350.&0±0.12復(fù)Ol64.OT二本發(fā)明顆粒i3.010/101.93復(fù)Ol41.32次本發(fā)明顆粒ii2.010/102.011.17±0.26<0.01本發(fā)明顆粒ni1.010/1028.10±1.T51.2吐<0.0123.351.3對小鼠肝癌(H22)的影響小鼠300只，18-22g，雌雄各半，隨機分為5組，本發(fā)明分散片高劑量組(1.557g/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)及環(huán)磷酰胺組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天。停藥當日處死動物，扭力天平稱重。實驗重復(fù)三批，結(jié)果見下表。結(jié)果表明"本發(fā)明制劑"各組對肝癌生長均有抑制作用，大、中劑量組抑制作用明顯本發(fā)明分散片對小鼠肝癌實體型生長的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>升白實驗以下實驗數(shù)據(jù)處理方法采用的操作系統(tǒng)SC0XEVIXV2-3-2;編程語言SCOF0XBASE+V2-1-1數(shù)據(jù)庫。2.1、對環(huán)磷酰胺(CY)所致白細胞降低的影響小鼠隨機分為本發(fā)明微丸高劑量組(1.557/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)，鯊肝醇組(0.32g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)、CY對照組(等體積蒸餾水)六組，每組20只，18-22g，雌雄各半。大鼠隨機分為本發(fā)明微丸高量組(1.035g/kg)、中劑量組(0.522g/kg)、低劑量組(0.261g/kg)、鯊肝醇組(0.32g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)、CY對照組(等體積蒸餾水)六組，每組15只，180-220g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天，給藥第1天，除CY、空白對照組腹腔注射等體積蒸餾水外，基余各組均腹腔注射環(huán)磷酰胺(小鼠、大鼠均0.03g/kg)，每日1次，連續(xù)3天。給藥第6天、第9天、第12天，分別取血進行白細胞計數(shù)。本發(fā)明微丸對環(huán)磷酰胺所致小鼠白細胞降低的影響組別動物數(shù)給藥第6天給藥第9天給藥第12天WBC(鵬1X士SD升白班％)PWBC(,1X士SD升白綴％)PWBC(鵬1)X士SD升白諷％)P敲s組203.7S±0.7360隨韓5.70±O.幻<謹**7.03±1.3914<0.05**中劑量組203.13±1.1333<0.014.65±1.1042<0.016.幻±1.4712>0.05低劑量組202.80±1.221S>0，3.79±1.0115>0，7.24±1.3619<0.01**203.61±0.7951<0.01O.呢51<0.01固處9412>0.05CY對照組202.40±0.333.37±1.116.07±1.20空白對照組207.11±O.SS隨林7.7±1.13<謹**7.36±<0.01**與鯊肝醇組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.001結(jié)果本發(fā)明微丸對環(huán)磷酰胺所致小鼠的白細胞降低有明顯的治療作用,本發(fā)明微丸對環(huán)磷酰胺所致大鼠白細胞降低的影響組別動物數(shù)給藥第6天給藥第9天給藥第12天WBC(1CI9,1X±SD升白率％)PWBC(鵬lX士SD升白率％)PWBC(鵬lX土SD升白率％)P高劑量組4.22±0.7552<謹**5.44±1.0265<0.01**S.T7土0.5349<隨林中劑量組153.卯±0.6341<0.014.7S±0.5345復(fù)OlS.01土0.6436■<0.01低劑量組153.35±0.8220>4.34±0P532<0.01*S.97土0.7952<0.01*154.15±0.9550<0.015.32±0.S962復(fù)OlS.44±D.S043■<0.01CY對照組152.78±0.650.875.90±0.65空白對照組151固±0.65<謹**1CI.9S土0.73<0.01**11.17±0.66隨林與鯊肝醇組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.001結(jié)果本發(fā)明微丸對環(huán)磷酰胺所致大鼠的白細胞降低有明顯的治療作用。2.2、對放射性所致白細胞降低的影響小鼠隨機分為本發(fā)明軟膠囊高劑量組(1.557g/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)，鯊肝醇組(0.32g/kg)、深部X線對照組(等體積蒸餾水)、空白對照組(等體積蒸餾水)六組，每組20只，18-22g，雌雄各半。大鼠隨機分為本發(fā)明軟膠囊高劑量組(1.035g/kg)、中劑量組(0.522g/kg)、低劑量組(0.261g/kg)、鯊肝醇組(0.32g/kg)、^Co對照組(等體積蒸餾水)、空白對照組(等體積蒸餾水)六組，每組15只，180-220g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天，給藥第1天，除空白對照組9以外，其余各組均用放射線照射l次，小鼠用深部X線照射，40.61^7分，總量350、距離40cm，200KV，150MA;大鼠60(](/照射，53.26CGY/分，總量400CGY，距離75cm，給藥第6天、第9天、第12天，分別取血進行白細胞計數(shù)。本發(fā)明軟膠囊對放射<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與鯊肝醇組比較*P<0.05林P<0.01彬P<0.001結(jié)果本發(fā)明軟膠囊對深部X線所致小鼠的白細胞降低有明顯的治療作用,本發(fā)明軟膠囊對放身性所致大鼠白細胞降低的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與鯊肝醇組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.001結(jié)果本發(fā)明軟膠囊對^Co7射線所致大鼠的白細胞降低有明顯的治療作用。免疫實驗3.1、對免疫器官的影響小鼠分為5組，本發(fā)明滴丸高劑量組(0.61g/kg)、中劑量組(0.3g/kg)、低劑量組(0.16g/kg)、強的松組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)，每組20只，18-22g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)9天。停藥后24h內(nèi)處死動物，稱體重、胸腺及脾臟重量，計算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。本發(fā)明滴丸對小鼠免疫器官的影響X士SD<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>與空白對照組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.01結(jié)果本發(fā)明滴丸高劑量對小鼠胸腺和脾臟重量有明顯的增加，本發(fā)明滴丸中劑量對小鼠胸腺重量有明顯的增加，與空白對照組比較，P<0.01。3.2、對荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響小鼠分為本發(fā)明片劑高劑量組(0.61g/kg)、中劑量組(0.3g/kg)、低劑量組(0.16g/kg)、強的松組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)5組，每組20只，18-22g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)9天，停藥當日小鼠腹腔注射2%雞紅細胞懸液lml/只，30分鐘后處死動物，生理鹽水沖洗腹腔，取腹腔洗液滴于玻片上，37。C溫孵30分鐘后染片，油鏡下計數(shù)200個巨噬細胞/片，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。本發(fā)明片劑對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影口<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>與空白對照組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.01結(jié)果本發(fā)明片劑高劑量、中劑量對小鼠巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)有明顯的提高作用，與空白對照組比較，P<0.001，P<0.01或P〈0.05。3.3、對荷瘤小鼠血清溶血素抗體的影響小鼠分為本發(fā)明口服液高劑量組(0.61g/kg)、中劑量組(0.3g/kg)、低劑量組(0.16g/kg)、強的松組(0.04g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)5組，每組20只，18-22g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12天，給藥第三天，腹腔注射5%雞紅細胞懸液0.2ml/只，停藥24h處死動物，取血離心，血清用生理鹽水稀釋100倍，將稀釋血清lml與5。/。雞紅細胞懸液0.5ml混合，(TC條件下加入10。/。補體0.5ml，溫孵30分鐘后在(TC條件下終止反應(yīng)，離心后取上清液于721型分光光度計540nm處測光密度。表io本發(fā)明口服液x寸一小鼠溶血素抗體的影響X士SD<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>結(jié)果本發(fā)明口服液高劑量、中劑量對小鼠溶血素抗體有明顯的升高作用，與空白對照組比較，P<0.001，P<0.01或P〈0.05。3.4、對炭粒廓清的影響小鼠分為本發(fā)明膠囊高劑量組(1.557g/kg)、中劑量組(1.035g/kg)、低劑量組(0.522g/kg)、環(huán)磷酰胺組(0.01g/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)5組，每組20只，18-22g，雌雄各半。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)9天，末次給藥后lh各鼠尾靜脈注射印度墨汁O.lml/10g，分別于注射墨汁后5分鐘、10分鐘眼球后取血20yl，各加入O.1%碳酸鈉2ml以721型分光光度計600nm測定光密度，計算吞噬指數(shù)K值和吞噬活性a值。本發(fā)明膠囊對小鼠炭粒廓清的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>與空白對照組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.01結(jié)果本發(fā)明膠囊高劑量、中劑量對小鼠炭粒廓清功能有明顯的促進作用，與空白對照組比較，P<0.001或P〈0.01。減毒作用小鼠100只，18-22g，雌雄各半，隨機分5組，本發(fā)明膠囊高劑量組(1.557g+環(huán)磷酰胺O.lg/kg)、中劑量組(1.035g+環(huán)磷酰胺0.lg/kg)、低劑量組(0.522g+環(huán)磷酰胺O.lg/kg)及環(huán)磷酰胺組(0.lg/kg)、空白對照組(等體積蒸餾水)。動物均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)9天。停藥當日處死動物取血、骨髓對白細胞及有核細胞進行計數(shù)。本發(fā)明膠，震對環(huán)磷翻C胺引起白細胞及骨髓有核細胞減少的影響(x組別劑量(g/kg)動物數(shù)(只)白細胞敷WO'/L)骨髄有核細胞WO'/L)空白對照_2011.TO土1.4T肌54±9.34環(huán)磷親胺0.1202.78±0.8425.96±7.64環(huán)+藥I3.0204.04士0.58**33.26±7.16*環(huán)+藥n2.0203.65±0.36**33.74±6.79*Jff藥in1.0203.10±0.34**25.98±8.93*與環(huán)磷酉先胺比較，*P<0.05，**P<0.01。結(jié)果本發(fā)明膠囊對環(huán)磷酰胺所致的毒性反應(yīng)有明顯減輕作用，可對抗其引起的白細胞及有核細胞的減少。本產(chǎn)品的膠囊制劑的急性毒性試驗實驗材料藥物本發(fā)明的膠囊制劑，內(nèi)容物為黃棕色的粉末由貴州百祥制藥有限責(zé)任公司提供。試驗前用蒸餾水配制成25%混懸液使用。二、動物昆明種小鼠，20士2g，雌雄各半，由貴州省中醫(yī)研究所動物室提供。實驗方法與結(jié)果小鼠60只，雌雄各半，按性別、體重隨機分為甲、乙兩組，禁食12h后，按0.4ml/10g灌胃給藥，甲組用藥一次，乙組用藥二次(間隔2h)，劑量分別為10g/kg和20g/kg。用藥后lh恢復(fù)水和食物供給，觀察7天。結(jié)果見各組小鼠活動、進食及大小便正常，無死亡及其它異常發(fā)現(xiàn)。結(jié)論小鼠灌胃本產(chǎn)品的膠囊制劑，在預(yù)試中未測出灌胃給藥的最小量，故作最大耐受量試驗。本品臨床用量為口服l.05g/次，3次/日，以成人體重60kg折算相當于0.0525g/kg.d，本試驗最大用量達20g/kg，為臨床用量的380.95倍，用藥后小鼠均無死亡及其它異常發(fā)現(xiàn)，表明本品口服安全無毒。本產(chǎn)品的膠囊制劑的長期毒性試驗13摘要本試驗觀察了膠囊制劑長期口服給藥對大鼠的生長、血象、血清生化指標以及主要臟器的組織學(xué)的影響。結(jié)果表明，膠囊給大鼠口服用藥，二組大鼠一日用藥劑量分別為8k/kg、4g/kg，試驗期90天，相當于臨床用藥的3個療程。實驗期間大鼠的一般狀況良好，體重持續(xù)增長、血象、血液生化、臟器系數(shù)、病理檢査等多方面指標與對照組比較，均無顯著差異。停藥2周后，亦未發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性不良反應(yīng)。實驗?zāi)康挠^察大鼠長期口服本發(fā)明膠囊所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，以確定臨床用藥的安全性。實驗材料1.藥品本發(fā)明制備的膠囊，樣品由貴州百祥制藥有限責(zé)任公司提供，實驗時用其生理鹽水配成所需濃度，每日現(xiàn)用現(xiàn)配。2.動物Wistar種大鼠，雌雄各半，雄性平均體重為IOI.4±5.8g，雌性平均體重為78.5士5.4g，由貴州省中醫(yī)研究所動物室提供，每日水、飼料供應(yīng)充足。3.儀器日本產(chǎn)F-800血球記數(shù)儀，COBASMIRA25-4464生化分析儀。實驗方法Wister大鼠60只，體重103123g，按體重隨機分為3組，每組20只，早悉分籠飼養(yǎng)，每籠2只。將藥物拌在飼料(飼料為動物體重的5%)中，于下午4時喂飼，次日8時動物喂完，另投放普通飼料，中午12時停食，每日相同。設(shè)2個藥物組，高劑量組(I組)為8g/kg穌，低量組(II組)4g/kgd，對照組喂普通飼料，連續(xù)90天。停藥第二天，各組一半動物取尾血檢査血象，取頸動脈血檢査生化指標。解剖動物，對心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胃腸、睪丸、子宮、卵巢、腦等器官進行觀察，取高劑量組和對照組大鼠心、肝、脾、肺、腎作病理組織學(xué)檢査。停藥第14天剖殺另一半動物，作上述檢査。結(jié)果1、動物一般狀況給藥及停藥期間，各組大鼠均無異常表現(xiàn)，毛光滑，無流淚、流涎形象，行為和活動、飲食、大便小便均如常。2、生長發(fā)育實驗期間各組體重均持續(xù)增長，組間無顯著性差異(表l)。3、血象各組大鼠血象指標均在正常范圍內(nèi)，組間無顯著性差異(表2)。4、血液生化結(jié)果列于表3，肝、腎功能的各項指標均在正常范圍內(nèi)，組間無顯著性差異。5、內(nèi)臟系數(shù)結(jié)果列于表4，各組大鼠間無顯著性差異。6、病理檢査大體觀察，各組均有少數(shù)動物肺臟呈現(xiàn)局部淤血現(xiàn)象，其他器官未見異樣。病理切片檢査，給藥組與對照組比較，未見與藥物有關(guān)的病理變化。停藥2周后，亦未發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性不良反應(yīng)。討論和結(jié)論本實驗按照《新藥審批辦法》"補充規(guī)定"和《中藥新藥研究指南》等文獻，并根據(jù)膠囊的臨床用量、療程和主要藥效學(xué)研究所用劑量，確定采用高劑量為8g/kg/日低劑量組為4g/kg/日，連續(xù)給藥3個月，按要求觀察了各項指標。結(jié)果顯示膠囊制劑連續(xù)灌胃給藥3個月，對大鼠飲食、生長、血液學(xué)指標、血清生化學(xué)指標、主要臟器(心、肝、脾、肺、腎)的臟器系數(shù)和病理形態(tài)學(xué)檢査均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)，對胃和十二指腸也無明顯刺激反應(yīng)，說明膠囊在所用劑量和用藥時間內(nèi)無毒性作用。_表1本膠囊大鼠長期毒性試驗_體重(X±SDg)組別藥前藥后15天藥后30天天藥后60天藥后75天藥后卯天停藥14天對昭114jO±12jS171.0±16.0雄苯I179.7±13.2本II114J±4.091".1±117對昭112JOi4.99201.1±15.0雌本I1化.6±15.2本II11.06±i.7S17丄7±19.1表2^ME大鼠長期毒性試驗一血象測定結(jié)栗⑤SD)組別血紅蛋白紅細胞數(shù)(X10D血小板數(shù)(X10化)白細胞數(shù)(Xl[ftL〕白細胞分類淋巴中性單核hK盟143.7±11214.7±1_5470.1±3.16本i14.5￡21本n146.1:^1監(jiān)菱14SJ士11.452993士2.73j60士1D7本I5.11±0.4014.5±05272.0±35724.5±3393.44±1.13本n4WiOM14.7±0.74表3本膠棄大鼠長期毒性試驗一肝腎功能指標測定結(jié)果(3SSD)組別丙氮酸基轉(zhuǎn)移酶(卡門氏單位)草氮酸氨基轉(zhuǎn)移瞎(卡門氏單位)尿棄氨(mmol/L)肌酐(uiriolLJ90天對照31.辻9.9S25.0±11.74.9辻。.W56.2±11.0本I29.1±14.14.53土。.S348.2±9.72本II27.4±6.2927.21±3.64.0吐。.3747.吐10.114天對照".吐4.1620.5±3.564.0吐。.S244.5±6.30本I20.吐3.6017.1±2.594.73±0.9644.2±5.34本n20.吐3.5720.5±3.574.64±1.1615表4本膠囊大鼠長期毒性試驗_內(nèi)臟系數(shù)(邁SDg/kg)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>臨床試驗資料和臨床使用情況本發(fā)明提供的膠囊治療白細胞減少癥臨床驗證實施方案本發(fā)明提供的膠囊系苗族民間驗方挖掘整理而成，具有清熱燥濕、補氣養(yǎng)血、健脾生津、養(yǎng)陰扶陽之功效，可抑制腫瘤生長，對癌癥有一定療效，可用于癌癥放化療引起的白細胞減少等癥。白細胞減少癥是由多種原因引起的綜合癥，臨床有藥源性引起的(如化療藥、化學(xué)藥品、放療等)以及感染、免疫等因素引起或原因不明者的。藥源性引起的白細胞其發(fā)生率較高，常見于臨床醫(yī)療過程中。本產(chǎn)品具有治療白細胞減少癥的功效，經(jīng)藥效學(xué)及毒理學(xué)研究證實該藥安全無毒副反應(yīng)，臨床研究發(fā)現(xiàn)對腫瘤患者因放射或化療引起的白細胞減少癥治療作用明顯。根據(jù)衛(wèi)生部《新藥審批辦法》要求，須對其臨床效用及有無不良反應(yīng)進行驗證。參照《中藥新藥治療血液病藥物臨床研究指導(dǎo)原則》制定本臨床驗證實施計劃。一、診斷標準1、有化療或放射治療史。2、外周血液白細胞總數(shù)連續(xù)兩次在4000/yl以下。中性粒細胞絕對值在1000-1800/yl之間。3、易于感冒，頭暈乏力，四肢酸軟。二、病例選擇(一)、納入病例1、以成年患者為主要觀察對象，男女兼顧。2、以住院病人為主，及部分能完成各項觀察指標的門診患者。3、經(jīng)放療或化療后白細胞總數(shù)已降至4000/yl以下的腫瘤患者。(二)、排除病例進期內(nèi)輸過全血或血液制品者。使用過有升高白細胞作用的中西藥者。三、觀察項目安全性觀測1、治療前、中、后檢査尿、糞便常規(guī)、肝功能、腎功能(血尿素氮、血肌酐等)。2、觀察治療藥物對消化、呼吸、心血管、神經(jīng)、泌尿、皮膚等系統(tǒng)的不良反應(yīng)。療效性觀察1、對一般癥狀治療，如頭暈、乏力、全身酸軟、失眠多夢、低熱等癥。2、治療前后觀察血紅蛋白(Hb)(克/dl)、紅細胞(RBC)、白細胞數(shù)(WBC)及分類3、治療前，后骨髓象比較(增生程度、造血細胞比例及形態(tài)改變)。治療期間應(yīng)按計劃詳細觀察及記錄各項指標。四、驗證方法臨床驗證擬在2-3個醫(yī)院進行，共觀察100例，另設(shè)對照組30例，性別、年齡、發(fā)病時間及病情輕重與治療組近似。采取隨機分組。對照藥用鯊肝醇+利血生。五、用法、用量與療程治療組口服本發(fā)明制備的膠囊，每次1.35克，每日三次，7日為一療程。對照組口服鯊肝醇20毫克/次+利血生20毫克/次，每日三次。二藥合用，療程與治療組一致。六、療效判斷治療后以白細胞計數(shù)評定藥物療效，分顯效、有效、無效三級。(1)顯效白細胞計數(shù)及分類恢復(fù)正常范圍(>5000/yl)。(2)有效白細胞計數(shù)較治療前提高100。/。或上升至3000/yl以上。且粒細胞絕對值>1500/y1。(3)無效白細胞數(shù)無明顯增高。七、資料分析、統(tǒng)計處理及評價臨床驗證結(jié)束后，應(yīng)匯總整理資料，但不能任意涂改觀察記錄，各臨床驗證單位應(yīng)寫出小結(jié)報告。由臨床負責(zé)單位匯總復(fù)核驗證單位、概述、一般資料、驗證方法、論斷、觀察指標、判斷療效標準、治療與結(jié)果(包括表格和典型病例)、討論與結(jié)果。討論中應(yīng)當根據(jù)本次驗證結(jié)果，對本發(fā)明提供的膠囊的功能主治、適應(yīng)范圍、給藥方案、療程、療效(觀察17有效以上結(jié)果)、安全性、不良反應(yīng)(包括處理方法)等作出結(jié)論。并根據(jù)其臨床意義，對產(chǎn)品作出客觀評價。本發(fā)明制備的膠囊治療白細胞減少癥臨床驗證總結(jié)根據(jù)貴陽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤科和貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院的臨床驗證"民族藥"艾愈膠囊(本發(fā)明制備的膠囊制劑，其商品名稱艾愈膠囊)"是由苗族民間驗方研制而成的內(nèi)服膠囊劑。具有清熱燥濕、補氣養(yǎng)血、健脾生津、養(yǎng)陰扶陽之功效，可抑制腫瘤生長，對癌癥有一定療效，可用于癌癥放化療引起的白細胞減少等癥。經(jīng)主要藥效學(xué)試驗及毒理學(xué)研究證實該藥安全無毒副反應(yīng)，臨床研究發(fā)現(xiàn)對腫瘤患者因放射或化療引起的白細胞減少癥治療作用明顯。根據(jù)貴州省衛(wèi)生廳黔衛(wèi)藥字(95)第27號文件艾愈膠囊的臨床驗證計劃要求，我們對130例因放化療引起的白細胞減少癥患者進行了臨床驗證，結(jié)果表明"艾愈膠囊"對放化療引起的白細胞減少癥總有效率達87.28%"。臨床資料一、診斷標準根據(jù)《中藥新藥治療血液病藥物臨床研究指導(dǎo)原則》為診斷依據(jù)。觀察對象為臨床驗證前二次白細胞總數(shù)低于正常值(4.0X109/1)，對比指標為第二次白細胞檢出值。二、病例選擇(一)、納入病例1、以成年患者為主要觀察對象，男女兼顧。2、以住院病人為主，及部分能完成各項觀察指標的門診患者。3、經(jīng)放療或化療后白細胞總數(shù)已降至4000/yl以下的腫瘤患者。4、住院病人及能完成各項觀察指標的門診患者。(二)、排除病例1、進期內(nèi)輸過全血或血液制品者。2、使用過有升高白細胞作用的中西藥者。三、一般資料共觀察130例，有95例為住院病人。其有為門診可査病人，男性76例，女性54例，年齡最小20歲，最大71歲，各年齡組分布及性別情況見表l。其中肺癌27例，鼻咽癌9例，甲狀腺癌6例，惡性淋巴肉瘤13例，食道癌12例，直腸癌8例，胰腺癌3例，原發(fā)病乳腺癌19例，子宮頸癌8例，結(jié)腸癌11例，子宮內(nèi)膜癌2例，會陰癌l例，惡性黑色素瘤4例，卵巢癌6例，腎癌1例。以上病例中放療者53例，化療者49例，放療加化療者21例，原因不明者7例。全部病例分為治療組100例，對照組30例。表l艾愈膠囊臨床驗證一般資料組別例性別年齡(歲〕數(shù)男女31-3031-4041-5051-6060以上治療組1005743518172931對照組301911131673合計1307654621233634四、治療方法治療組口服艾愈膠囊，每次1.35克，每日三次，7日為一療程。觀察兩個療程。對照組口服鯊肝醇20毫克/次+利血生20毫克/次，每日三次。二藥合用，療程與治療組一致。五、觀察指標根據(jù)資料臨床驗證計劃要求，詳細填寫觀察記錄。(一)安全性觀測1、治療前、中、后檢査尿、糞便常規(guī)、肝功能、腎功能(血尿素氮、血肌酐等)。2、觀察治療藥物對消化、呼吸、心血管、神經(jīng)、泌尿、皮膚等系統(tǒng)的不良反應(yīng)。(二)療效性觀察1、對一般癥狀治療，如頭暈、乏力、全身酸軟、失眠多夢、低熱等癥。2、治療前后觀察血紅蛋白(Hb)(克/dl)、紅細胞(RBC)、白細胞數(shù)(WBC)及分類3、治療前，后骨髓象比較(增生程度、造血細胞比例及形態(tài)改變)。觀察結(jié)果療效評定標準，根據(jù)《治療血液病藥物臨床研究指導(dǎo)原則》中白細胞藥物療效制定標準，分顯效、有效、無效三級。一、艾愈膠囊治療組的療效結(jié)果治療組共100例，總有效率為89%。資料匯總統(tǒng)計，見表2。表2艾愈膠囊治療組療效統(tǒng)計表19<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>X檢驗*P<0.001結(jié)果示，艾愈膠囊治療放療后繼發(fā)的白細胞減少證的總有效率為89%。對照組(鯊肝醇加利血生)為66.67%，治療組與對照組比較P〈0.001。三、艾愈膠囊用藥療程與療效關(guān)系治療組100例中有效病例共89例，用藥一療程后白細胞總數(shù)及中性分類數(shù)值均有增高，第二個療程后全部有效病例達到有效以上標準，表明艾愈膠囊在用藥7日后即出現(xiàn)升白作用，隨著療程的增加升白效果更佳，為臨床合理用藥提供了依據(jù)。四、不良反應(yīng)病例中未見有不良反應(yīng)或毒副作用。小結(jié)經(jīng)臨床驗證觀察130例的結(jié)果表明，艾愈膠囊對放化療所引起的白細胞減少癥的升白功效，總有效率為89%，其療效優(yōu)于對照組(鯊肝醇+利血生)P<0.001，在100例治療組中，顯效、有效病例共89例，達到有效以上療效制定標準。療效與療程成正比關(guān)系，為臨床合理用藥提供了依據(jù)。綜上所述，艾愈膠囊是治療腫瘤放療化療后引起的白細胞減少癥的有效制劑，其具有見效快、安全無毒的特點。具體實施例方式本發(fā)明的實施例l:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，裝入膠囊，制成1000粒，即得膠囊劑，口服，一次3粒，一日3次，每粒裝0.35g。本發(fā)明的實施例2:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥，加糖粉混勻，制粒，干燥，制成1000g，即得顆粒劑。本發(fā)明的實施例3:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；取PPVP3.0g與檸檬黃混勻，取3/4與浸膏粉混合均勻，用1%的00無水乙醇液作粘合劑，40目制料、整粒，剩余1/4的PPVP與檸檬黃混勻的混合粉加于制好的粒子中，壓片，即得分散片。本發(fā)明的實施例4:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；加入適量的淀粉，用60%乙醇和1.2%大豆油制軟材，制好的軟材用微丸機制丸，濕料擠壓過O.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，5060。C干燥成型，過1620目篩選丸或者合并上述四種清膏，噴霧干燥，濕粉制粒起模，將模子置于包衣鍋內(nèi)加大成丸，藥粉水為l:1，包衣鍋轉(zhuǎn)速為42r/min，蓋面，選丸，即得微丸本發(fā)明的實施例5:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；按藥物量基質(zhì)量=1:1.3加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠甘油水二氧化鈦二100g:40g:100g:3g，配料化膠條件為稱量配料，投入化膠罐中，冷浸30分鐘后逐漸升溫至65士5。C，攪拌5小時并同時抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過后裝入膠囊機之膠料桶中；調(diào)試壓丸機，明膠盒溫控65'C，噴體溫控45°C，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度1825。C，相對濕度<40%，壓丸；干燥采21用滾動定型干燥與托盤干燥兩步結(jié)合，滾動定型干燥2小時，干燥溫度22'C，干燥相對濕度應(yīng)低于40%，干燥時間在2448小時，即得軟膠囊。本發(fā)明的實施例6:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；取浸膏粉一份，PEG6000兩份和聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40兩份，混合均勻，水浴上熔解，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距5cm滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度75。C，冷卻液高度65cm，即得滴丸劑。本發(fā)明的實施例7:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥，粉碎，加入微晶纖維素22g，用60%乙醇制粒，干燥，整粒，加硬脂酸鎂1.5g，混勻，壓片，包衣，即得片劑。本發(fā)明的實施例8:山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g、人參100g，取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25。C時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，加入蒸餾水、3.0%阿司帕坦，滅菌，即得口服液本發(fā)明的實施例9:山慈菇100g、白英100g、淫羊藿100g、苦參100g、當歸100g、白術(shù)100g、人參50g取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮O.5小時，煎液過濾，濃縮，加入上述細粉，混勻，干燥，制丸，即得丸劑。本發(fā)明的實施例10:山慈菇600g、白英500g、淫羊藿500g、苦參500g、當歸500g、白術(shù)300g、人參200g取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余藥材加水煎煮5次，每次3小時，合并煎液，過濾，濃縮，加入上述細粉，混勻，干燥，加入糖漿，即得糖漿劑。權(quán)利要求1.一種治療癌癥的藥物制劑，由山慈菇450g、白英350g、淫羊藿300g、苦參350g、當歸300g、白術(shù)250g和人參100g及輔料按照下述方法制備取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味剩余的當歸和山慈菇、白英、淫羊藿、苦參和白術(shù)加水煎煮1-5次，每次0.5-3小時，合并煎液，過濾，濃縮，加入上述細粉，混勻，干燥，然后制成分散片；其特征在于取當歸100g、人參磨成細粉，備用；其余六味加水煎煮三次，第一次2小時，第二次1小時，第三次1小時，合并三次煎煮，過濾，濃縮至相對密度為25℃時1.12-1.15的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥；取PPVP3.0g與檸檬黃混勻，取3/4與浸膏粉混合均勻，用1％的K30無水乙醇液作粘合劑，40目制料、整粒，剩余1/4的PPVP與檸檬黃混勻的混合粉加于制好的粒子中，壓片，即得。全文摘要本發(fā)明是一種治療癌癥的藥物制劑及其制備方法，它是由山慈菇、白英、淫羊藿、苦參、當歸、白術(shù)和人參與適當輔料按照下述方法制作成的取當歸、人參磨成細粉，備用；其余藥材加水煎煮、合并煎液，過濾，濃縮，加入上述細粉，混勻，干燥，然后制成分散片制劑；得到的產(chǎn)品具有補氣養(yǎng)血，健脾生津，養(yǎng)陰扶陽，抑瘤抗癌的功效；藥品用于中晚期癌癥的輔助治療以及癌癥放化療引起的白細胞減少屬氣血兩虛者，效果顯著。文檔編號A61K36/88GK101491642SQ20091030052公開日2009年7月29日申請日期2005年9月29日優(yōu)先權(quán)日2005年9月29日發(fā)明者楷吳申請人:貴州百祥制藥有限責(zé)任公司