專利名稱：一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種介入用血管栓塞材料，特別是一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材
料及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
栓塞治療是指將栓塞材料通過導(dǎo)管選擇性地注入到某一病變器官的供應(yīng)血管 內(nèi)，使得相應(yīng)的血管閉塞、中斷血供而達到治療目的。其中栓塞材料和栓塞技術(shù)是其重 要的組成部分，血管栓塞材料的栓塞效果直接決定了治療結(jié)果的好壞。 目前，我國血管栓塞材料主要依賴進口，價格非常昂貴。因此，血管栓塞材 料的研究、開發(fā)與應(yīng)用是介入神經(jīng)放射學(xué)發(fā)展中的主要工作之一。理想的栓塞材料至 少應(yīng)具備以下條件①良好的生物安全性；②能牢固地栓塞病變血管；③無毒或低毒； ④容易獲得；⑤操作方便，可控；⑥能產(chǎn)生非損害性炎癥，誘發(fā)血栓形成；⑦具顯影 性?，F(xiàn)在已有多種介入用血管栓塞材料，主要包括顆粒狀栓塞材料如明膠、白蛋白、白 芨和聚乙烯醇等；液態(tài)栓塞材料如無水乙醇、碘油等；大型栓塞材料如螺圈、可脫球囊 等；磁性栓塞材料如葡聚糖磁性復(fù)合微球和放射性栓塞材料等(盛希忠等，醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜 志.2004， 14(10): 852;李世普等，生物骨科材料與臨床研究.2005， 12(2): 46)。 上述 栓塞材料各有其優(yōu)缺點和適用范圍。目前臨床用于惡性腫瘤動脈血管栓塞的最廣泛的栓 塞劑是碘油，但其在體內(nèi)維持栓塞的時間一般為2周 2月，需多次栓塞；另外其粘度 高，不易推注和載藥(蔣小良等，現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué).2006， 14(1): 112)，還容易返流且栓塞 后易形成側(cè)枝循環(huán)等，嚴重影響了腫瘤部位的栓塞療效。 溫敏型聚合物能感知環(huán)境溫度的變化，在很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生相轉(zhuǎn)變，利 用其在室溫時為可流動的流體而易于推注、在體溫時發(fā)生溶膠-凝膠相轉(zhuǎn)變，原位形成 凝膠的特性，現(xiàn)作為可注射材料，已廣泛用于藥物載體、酶的固定化、組織工程等領(lǐng) 域(郝建原等，CN1958074 ;王常勇等，CN101288779 ;蔣志強等，CN1916050)。 聚 (N-異丙基丙烯酰胺)(PNIPAAm)類聚合物由于其相轉(zhuǎn)變溫度接近人體溫度而成為一個 研究熱點。盛希忠等(盛希忠等，實用放射學(xué)雜志.2005， 21(12): 1233)、劉文廣等 (LiX， etal.Biomaterials.2005， 26:7002;劉文廣等，CN 1679620A， CN 1546057A， CN 101053681)和Bae等(Bae HL， et al.Biomacromolecules.2006， 7 : 2059.)分別做了 PNIPAAm類線性聚合物溶液作為液體栓塞材料的研究，指出此類栓塞材料具有非黏附 性，動物實驗取得了較好效果。另外，用溫敏型材料作為血管栓塞材料，由于僅以溫度 作為溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變的調(diào)控因素，避免了有機溶劑和交聯(lián)劑的使用，更為安全。
PNIPAAm類溫敏納米凝膠血管栓塞材料與已報道的上述溫敏型線性聚合物栓塞 材料相比，在溫敏聚合物濃度相同的情況下，由于兩者結(jié)構(gòu)的差異(納米凝膠為交聯(lián)的網(wǎng) 絡(luò)，而線性聚合物是球形結(jié)構(gòu))，溶膠狀態(tài)時納米凝膠體系具有更低的粘度，凝膠狀態(tài)具 有較高的彈性模量；同時具有更好的溫度敏感性(StiegerM， et al.Langmuir.2004， 20: 7283; Macromolecules.2003， 36: 8811)。與其它顆粒和微球型栓塞材料相比，由于分散體為納米尺寸的小粒子，具有易于推注和更適用于末端栓塞的優(yōu)點；與其它液體栓塞劑 相比，則具有栓塞時間長、無返流和側(cè)枝循環(huán)等優(yōu)點。可以說兼具了液體栓塞劑和顆粒 栓塞劑的優(yōu)點，克服了各自的不足，是很有應(yīng)用前景的血管栓塞材料。在實驗研究的基 礎(chǔ)上，本申請人于2006年9月15日提出了名稱為"用于血管栓塞材料的溫敏納米凝膠體 系"(公開號為CN1923303)的專利申請。 但由于作為栓塞材料時溫敏納米凝膠的濃度較大(Wang Q， et al.Colloid Polym. Sci.2007， 285(5)， 515-521.)，而PNIPAAm類溫敏納米凝膠不易大量制備，限制了其應(yīng) 用。另外，作為血管栓塞材料，還需要其具有顯影性，以便于臨床操作。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種具有較低溫敏納米凝膠濃度的溫敏納米凝膠類血管 栓塞材料，本發(fā)明的進一步的目的在于提供一種可顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材 料；本發(fā)明還提供了該材料的制備方法和應(yīng)用。 為實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的，本發(fā)明提供的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料， 其特征在于，它包括聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠和分散介質(zhì)，其中，聚 (N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠的質(zhì)量百分比濃度為3 10%，余量為分散介 質(zhì)；聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)簡式為poly(A-co-B)， 其粒徑為60 400nm，其中，A為N-異丙基丙烯酰胺，B為疏水性烯丙基類共聚單體， A、 B的摩爾百分比為80 100 : 0 20，交聯(lián)劑為N-取代的雙丙烯酰胺類化合物，交 聯(lián)劑用量為A與B總摩爾數(shù)的0.1 5% ; 分散介質(zhì)為水溶性含碘造影劑注射液或其稀釋液，每lmL分散介質(zhì)中碘含量為 50 350mg，稀釋液的稀釋劑為注射用水、生理鹽水或pH值為4 9的緩沖溶液中的一 種。 為實現(xiàn)本發(fā)明的第二個目的，在上述溫敏納米凝膠類血管栓塞材料中，每lmL 分散介質(zhì)中碘含量為180 350mg。 在上述二個技術(shù)方案中，聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠中，共聚單 體優(yōu)選N-取代的丙烯酰胺、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯，造影劑注射液優(yōu)選碘海醇或碘佛 醇。
上述溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的制備方法，其步驟包括 (l)稱取聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠凍干粉，加入分散介質(zhì)，在室 溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后靜置，得 到溫敏納米凝膠分散體； (2)將上述分散均勻的溫敏納米凝膠分散體，封口后用6°0)輻照滅菌，室溫儲存。 上述的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料可以作為腫瘤部位和血管畸形的血管栓塞 材料。 本發(fā)明的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，是將具有三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的納米凝 膠顆粒懸浮于含有水溶性含碘造影劑的水性介質(zhì)中。其中的水溶性含碘造影劑在加入極
4少量時，即可顯著降低具有栓塞效果的溫敏納米凝膠懸浮體中溫敏納米凝膠的濃度。同 時，水溶性含碘造影劑對溫敏納米凝膠的相轉(zhuǎn)變溫度和相轉(zhuǎn)變行為有影響。水溶性含碘 造影劑的使用使溫敏納米凝膠分散體的最低凝膠化濃度降低，而減少了溫敏納米凝膠的 用量；同時，在體溫形成的凝膠幾乎無脫水性；另外使納米凝膠分散體的相轉(zhuǎn)變溫度升 高。這可能是因為加入的水溶性含碘造影劑如碘海醇等為含多個羥基和氨基的化合物， 在體溫附近凝膠的形成除溫敏納米凝膠顆粒間的疏水作用的貢獻之外，還包括造影劑和 納米凝膠之間、造影劑和水之間的氫鍵作用。 本發(fā)明的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，其相轉(zhuǎn)變溫度和起栓塞效果所需 的最低納米凝膠含量，除可通過改變納米凝膠中共聚單體的種類和用量、交聯(lián)劑用量等 因素調(diào)控外，還可通過造影劑的種類和含量而調(diào)控。利用其室溫時是溶膠、注射入體內(nèi) 后因溫度升高形成凝膠，而起到栓塞作用。 本發(fā)明的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，當(dāng)其中造影劑的含量足夠大時， 除栓塞材料中溫敏納米凝膠濃度較低外，還具有可顯影性，而便于臨床觀測和操作。
本發(fā)明的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的制備方法簡單，僅需將溫敏納米 凝膠凍干粉分散于含水溶性含碘造影劑的分散介質(zhì)中即可。 另外上述血管栓塞材料的應(yīng)用范圍廣，可用于多種腫瘤部位的血管栓塞，如肝 癌、腎癌、肺癌、子宮肌瘤等實體腫瘤；也可用于多種血管性疾病的血管栓塞，如腦動 靜脈畸形、面部血管畸形等。另外，由于溫敏納米凝膠材料本身的不可降解性，為一種 永久栓塞型血管栓塞材料。 總之，本發(fā)明提供的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料中溫敏納米凝膠的濃度低、 溶膠狀態(tài)具有較低的粘度、較好的觸變性和快的凝膠化速度、具顯影性；同時因是溫敏 性材料，其溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變僅以溫度為調(diào)控因素，避免了有機溶劑和小分子單體的使用， 降低了毒性；另外，納米凝膠作為水凝膠的一種，也具有良好的生物相容性。
本發(fā)明的可顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料可不載藥直接栓塞血管，也可 根據(jù)需要載上水溶性治療藥物，如平陽霉素，絲裂霉素、阿霉素等。其載藥過程簡單易 行，即直接將藥物溶于處于溶膠狀態(tài)的可顯影的溫敏納米凝膠的懸浮體中。


圖1為6wt/v%的溫敏納米凝膠水分散體(a， b)和含碘海醇的分散體(碘含量為
180mg/mL)(c， d)在不同溫度下的照片。a， c : T = 25°C ; b， d: T = 37°C 圖2為溫敏納米凝膠濃度對含碘佛醇的水分散體(碘含量為150mg/mL)相轉(zhuǎn)變的
影響。■:溶脹凝膠化溫度GT，參濁化溫度CPT ; ▲:收縮凝膠化溫度ST 圖3為溫敏納米凝膠濃度對含碘海醇的水分散體(碘含量為300mg/mL)相轉(zhuǎn)變的
影響。■ : GT ;參CPT ; ▲ : ST 圖4為溫敏納米凝膠血管栓塞材料右腎段動脈栓塞數(shù)字減影血管造影(DSA)片。 圖A :正常右腎動脈造影；B :栓塞后右腎段動脈造影；C : 35天復(fù)查造影；D : 60天 復(fù)查造影 圖5為對照組PVA顆粒栓塞腎動脈DSA片。A:栓塞后右腎段動脈造影；B: 35天復(fù)查造影；C : 60天復(fù)查造影
圖6為兔VX2肝癌模型肝動脈栓塞肝動脈造影圖。A-C分別為瘤兔肝動脈造 影、溫敏納米凝膠栓塞后造影、栓塞后14天肝動脈造影；D-F分別為瘤兔肝動脈造影、 超液態(tài)碘油栓塞后造影、栓塞后14天肝動脈造影 圖7為溫敏納米凝膠栓塞組的腫瘤組織切片分別在低倍鏡和高倍鏡下的觀測 圖。A :低倍鏡(HE X40) ; B :高倍鏡(HE X200) 圖8為碘油栓塞組的腫瘤組織切片分別在低倍鏡和高倍鏡下的觀測圖。A:低 倍鏡(HE X40) ; B :高倍鏡(HE X200)
具體實施例方式
本發(fā)明在對顯影性的實現(xiàn)方法、造影劑對溫敏性凝膠化的影響進行研究的基礎(chǔ) 上，得到較低溫敏納米凝膠濃度的、可顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料。下列實施 例僅用于進一步說明本發(fā)明，本文中公開和說明的溫敏納米凝膠的組成、造影劑的種類 和含量可以用其它效果相同的來代替，本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員可以做出無數(shù)的變化、改進 和代替，而不會脫離本發(fā)明。
本發(fā)明的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料可通過以下方式實施
1.本發(fā)明之溫敏納米凝膠凍干粉的制備 按文獻報道的沉淀聚合法或乳液聚合法制備聚(N-異丙基丙烯酰胺)(PNIPAAm) 類溫敏納米凝膠(Wang Q， et al.Colloid Polym Sci， 2007， 285 : 515-521.Pelton R H， et al.Colloids Surf， 1986， 20: 247-256.)，反應(yīng)得到的納米凝膠分散體經(jīng)透析、凍干，保存 于干燥器中備用。 2.本發(fā)明之較低溫敏納米凝膠濃度的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的制備
(1)將商品用水溶性含碘造影劑注射液用稀釋劑-注射用水或生理鹽水或pH為 4 9的緩沖溶液稀釋至所需濃度； (2)稱取一定量的溫敏納米凝膠凍干粉，加入商品用水溶性含碘造影劑注射液 或上述的造影劑稀釋液，在室溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均 勻，離心除去氣泡后靜置，得到所需質(zhì)量百分濃度的溫敏納米凝膠分散體；
(3)將上述分散均勻的溫敏納米凝膠分散體，封口后用6°0)輻照滅菌，室溫儲存。 3.本發(fā)明之既有較低溫敏納米凝膠濃度又能顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材 料的制備 (1)將商品用水溶性含碘造影劑注射液用稀釋劑-注射用水或生理鹽水或pH為 4 9的緩沖溶液稀釋至所需濃度(碘含量大于180mg/mL); (2)稱取一定量的溫敏納米凝膠凍干粉，加入商品用水溶性含碘造影劑注射液 或上述的造影劑稀釋液，在室溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均 勻，離心除去氣泡后靜置，得到所需質(zhì)量百分濃度的溫敏納米凝膠分散體；
(3)將上述分散均勻的溫敏納米凝膠分散體，封口后用6°0)輻照滅菌，室溫儲存。 4.本發(fā)明之載藥的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的制備
方法一
6
(1)將商品用水溶性含碘造影劑注射液用稀釋劑-注射用水或生理鹽水或pH為 4 9的緩沖溶液稀釋至所需濃度； (2)稱取一定量的溫敏納米凝膠凍干粉，和一定量的水溶性藥物，加入商品用水 溶性含碘造影劑注射液或上述的造影劑稀釋液，在室溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切 勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后靜置，得到所需的質(zhì)量百分濃度的溫敏納米 凝膠分散體； (3)將上述分散均勻的載藥的溫敏納米凝膠分散體，封口后用6°0)輻照滅菌，室 溫儲存。
方法二 按上述方法先制備不載藥的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，再往其中加入常規(guī) 量的水溶性藥物，超聲，混合均勻，封口， 6°0)滅菌，室溫儲存。
5.本發(fā)明之可顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的應(yīng)用 采用介入治療的方法，將微導(dǎo)管插入靶器官供血動脈，先用冷鹽水沖洗導(dǎo)管， 后在透視下行動脈造影，再根據(jù)需要栓塞的程度(從末梢血管到主動脈)注射所需量的溫 敏納米凝膠類栓塞材料， 一般為0.5-5mL。
實施例1稱取4.526gN-異丙基丙烯酰胺(NIPAAm)， 0.006 gN， N-亞甲基雙丙烯酰胺(為 NIPAAm的0.1molX)， 0.196g十二烷基硫酸鈉，加入到500mL的三頸瓶中，加入超純水 326mL，按文獻報道的沉淀聚合法或乳液聚合法制備PNIPAAm溫敏納米凝膠(Wang Q， etal.ColloidPolym Sci， 2007， 285: 515-521.Pelton R H， et al.Colloids Surf， 1986， 20: 247-256.)，反應(yīng)得到的納米凝膠分散體在超純水中透析兩星期，留5mL作粒徑測試，其 余凍干，收集凍干粉，保存于干燥器中備用。PNIPAAm納米凝膠顆粒的平均粒徑的測定采用動態(tài)光散射法，用Nano-ZS 90 激光粒度儀(英國Malvern公司)測定，光源為氦氖激光(入=633nm)，檢測角90° ，測 試樣品為納米凝膠透析液，用超純水稀釋。測得其在2(TC時的粒徑為115.3nm。
實施例2-6 按表l所示的共聚單體種類及配比、交聯(lián)劑用量，按文獻報道的沉淀聚合法或 乳液聚合法制備PNIPAAm類溫敏納米凝膠(Wang Q， et al.Colloid Polym Sci， 2007， 285: 515-521.PeltonRH， et al.Colloids Surf， 1986， 20: 247-256.)，反應(yīng)得到的納米凝 膠分散體在超純水中透析兩星期，留5mL作粒徑測試，其余凍干，收集凍干粉，保存于 干燥器中備用。在此制備PNIPAAm類溫敏納米凝膠的方法中，還可通過調(diào)控乳化劑的 用量來調(diào)控納米凝膠的粒徑。用動態(tài)光散射法測得的各個PNIPAAm類溫敏納米凝膠在 2(TC時的粒徑見表1。
表1溫敏納米凝膠組成及粒徑
實施洌編"單體種類單休序爾比交聯(lián)劑含W粒徑
(mol%)(扁，)
: 2()n. 8
:〗NIPM隨/國AU h - h.0222. 7
4NIPiWm/iPA90:102.0還.4
5NIPMii/NiPMm97:32.5棚，i
685:155, 0318, 5注MAA、 BMA、 iPA、 NiPAAm和NEAAm分別為甲基丙烯酸甲酯、甲基丙 烯酸丁酯、丙烯酸異丙酯、N-異戊基丙烯酰胺，N-乙基丙烯酰胺。
實施例7 將碘海醇300注射液用注射用水稀釋至碘含量為50mg/mL。后稱取0.5g的按實 施例2制備的溫敏納米凝膠凍干粉，加入上述碘海醇稀釋液5mL，室溫下攪拌至充分溶 脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后靜置，得到溫敏納米凝膠濃 度為10%的分散體。
實施例8 稱取0.6g的按實施例4制備的溫敏納米凝膠凍干粉，加入10mL碘佛醇350注 射液，在室溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡 后靜置，得到碘含量為350mg/mL的可顯影的溫敏納米凝膠分散體(溫敏納米凝膠濃度為 6% )。 實施例9 稱取0.3g的按實施例6制備的溫敏納米凝膠凍干粉，加入用生理鹽水稀釋的碘 海醇350注射液10mL(生理鹽水與碘海醇注射液體積比為1 : 2，此時碘濃度為233.3mg/ mL)，在室溫下攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后 靜置，得到可顯影的溫敏納米凝膠分散體(溫敏納米凝膠濃度為3% )。
實施例10 稱取0.75g的按實施例6制備的溫敏納米凝膠凍干粉，加入10mL用pH值為9 的緩沖溶液稀釋的碘佛醇320注射液，其中碘含量為120mg/mL，在室溫下攪拌至充分溶 脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后靜置，得到溫敏納米凝膠濃 度為7.5%的溫敏納米凝膠分散體。
實施例11 稱取0.06g按實施例3制備的溫敏納米凝膠凍干粉，加入l.OmL用pH值為7.4的
磷酸鹽緩沖溶液稀釋的碘海醇溶液，其中碘含量為180mg/mL，按實施例7的方法制備納 米凝膠濃度為6wt/v^的分散體。采用目視法結(jié)合瓶倒轉(zhuǎn)法測定溫敏納米凝膠分散體的溫 敏相行為，相轉(zhuǎn)變照片如附圖1所示。附圖1說明納米凝膠濃度為6wt/v^的水分散體在 37t:不能形成凝膠，而相同納米凝膠濃度的含碘海醇的分散體在37t:可凝膠化。
實施例12 稱取一定量(0.02 0.08g)的按實施例4制備的溫敏納米凝膠凍干粉于5mL塑料管中，加入用pH為4的緩沖溶液稀釋1倍的碘佛醇300注射液1.0mL，按實施例7的方 法，制備溫敏納米凝膠質(zhì)量百分濃度不同的溫敏納米凝膠分散體(碘含量為150mg/mL)。 另用碘海醇300注射液l.OmL作分散介質(zhì)，制備碘含量為300mg/mL的不同溫敏納米凝膠 質(zhì)量百分濃度的溫敏納米凝膠分散體。采用目視法結(jié)合瓶倒轉(zhuǎn)法測定樣品的各個相轉(zhuǎn)變 溫度溶脹凝膠化溫度GT、濁化溫度CPT和收縮凝膠化溫度ST，測試溫度范圍為5 45°C。其結(jié)果分別如附圖2和附圖3所示。附圖2和附圖3顯示溫敏納米凝膠分散體中 溫敏納米凝膠的質(zhì)量濃度不同時，其隨溫度的變化，相轉(zhuǎn)變行為不同。其相轉(zhuǎn)變溫度和 相態(tài)與溫敏納米凝膠的質(zhì)量百分含量有關(guān)。另外碘含量高的溫敏納米凝膠分散體(附圖 2)在體溫附近形成的凝膠強度好，且無脫水現(xiàn)象。
實施例13 稱取0.5g的按實施例6所制備的溫敏納米凝膠凍干粉于10mL比色管中，加入 lmL碘佛醇240注射液為分散介質(zhì)，按實施例7的方法制備溫敏納米凝膠分散體。加入 l.Omg平陽霉素，超聲分散，即得載藥的可顯影的溫敏納米凝膠分散體。
實施例14 往按實施例8制備的可顯影的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料中加入治療量的鹽 酸阿霉素，超聲，混合均勻，備用。
實施例15-18 將按實施例7-10所制備的溫敏納米凝膠分散體，封口，經(jīng)6°0)輻照滅菌，室溫
儲存，待用。
實施例19 動物實驗按照《湖北省實驗動物管理條例》進行，并經(jīng)同濟醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)倫理委 員會批準。 純種、清潔的新西蘭大白兔，體重3.0kg左右，雌雄不限，由華中科技大學(xué)同濟 醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。 對正常家兔腎動脈栓塞實驗取新西蘭大白兔40只，實驗前12小時禁食、水， 術(shù)前秤取家兔體重，麻醉前30分鐘肌肉注射阿托品0.05rag/kg，以減少唾液腺分泌，保持 呼吸道通暢。然后以0.2mL/kg的速眠新進行右大腿肌肉注射麻醉，5 10分鐘后待家兔 痛覺反應(yīng)消失后，仰臥固定于自制的四角帶有釘子的木板上，將木板放置于血管造影手 術(shù)臺，右側(cè)腹股溝備皮并消毒，切開腹股溝皮膚，暴露右側(cè)股動脈并用止血鉗分離暴露 的股動脈，兩端套上絲線，提起兩端絲線，使股動脈與周圍肌肉組織分離。然后用18G 穿剌針穿剌股動脈后經(jīng)穿剌針直接置入3F同軸微導(dǎo)管，將微導(dǎo)管置于腹主動脈手推造影 劑造影，明確右腎動脈開口后將微導(dǎo)管經(jīng)腹主動脈選擇插管至右腎動脈，手推注射造影 劑碘海醇，行右腎動脈造影，其中20只家兔經(jīng)微導(dǎo)管用lmL注射器將按實施例7制備的 溫敏納米凝膠血管栓塞材料在透視下以O(shè).lmL/s的注射速度注入右腎動脈，行末梢動脈栓 塞；另15只分別行各級腎動脈栓塞，并分別用數(shù)字減影血管造影(DSA)機造影，栓塞前 后均用4t:生理鹽水沖管，以防止微導(dǎo)管堵塞；對照組5只家兔用PVA細顆粒與碘海醇的 混懸液栓塞右腎動脈。操作結(jié)束撤管后結(jié)扎穿剌點遠端股動脈，縫合后繼續(xù)飼養(yǎng)。術(shù)后 3天觀察家兔精神、飲食等一般情況。 統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)以x士s表示，應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件分析處理，計數(shù)資料
9應(yīng)用x2檢驗和Fiher精確概率法，計量資料用獨立樣本t檢驗和雙因素方差分析，以P <0.05為差異有顯著性。 其DSA片見附圖4和5。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該溫敏納米凝膠類血管栓塞材料易經(jīng)介入 導(dǎo)管注射，注射時未出現(xiàn)堵管及反流現(xiàn)象，術(shù)后剖開導(dǎo)管，其內(nèi)壁內(nèi)未見溫敏納米凝膠 粘附管壁。該溫敏納米凝膠類血管栓塞材料呈稍高密度影逐漸流向腎動脈末梢，較快地 栓塞末梢小動脈；按照相同的注射速度繼續(xù)注射栓塞劑，可依次栓塞各級腎動脈分支及 腎動脈主干。栓塞后家兔精神、飲食正常，腎功能14天可恢復(fù)正常；凝膠可根據(jù)需要栓 塞各級動脈，栓塞末梢血管牢固，60天復(fù)查造影發(fā)現(xiàn)被栓塞的腎動脈遠端血管無再通； 栓塞后家兔無明顯毒副反應(yīng)；病理檢查右腎動脈栓塞后3天即出現(xiàn)梗死，肝組織14天后 出現(xiàn)壞死；35天后被凝膠栓塞的肝組織及腎組織均出現(xiàn)彌漫性壞死；而對照組PVA組35 天復(fù)查造影發(fā)現(xiàn)被栓塞的腎上極動脈部分再通，腎實質(zhì)部分顯影；60天復(fù)查造影，被栓 塞的腎上極動脈血管再通，腎實質(zhì)顯影。
實施例20 [OOSS] (1)實驗動物同實施例19。 (2)實驗材料皮下VX2腫瘤瘤株由美國ATCC公司引進，在武漢協(xié)和醫(yī)院傳代 數(shù)年。兔麻醉用速眠新II由解放軍軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所試研制，每毫升速眠新含保定寧 60mg、鹽酸二氫埃托啡4iig、氟哌啶醇2.5mg。 歐乃派克(碘海醇)購自德國貝朗公司 (B.Braun AG)。 (3)實驗方法50只新西蘭大白兔建立VX2移植性肝癌模型，14天后行CT及 MRI檢查，經(jīng)腹正中切口打開腹腔，暴露肝動脈后，治療時以動脈夾暫時夾閉肝右動脈 暫時夾閉肝右動脈，使插管超選擇栓塞肝左葉腫瘤血管。然后分為如下2組治療，每組 25只。A組經(jīng)肝動脈注入按實施例9所制備的可顯影的溫敏納米凝膠分散體進行栓 塞；B組經(jīng)肝動脈注入超液態(tài)碘油。術(shù)后2周進行如下檢測 a.行CT和MRI檢查。實驗結(jié)果見附圖6。附圖6說明溫敏納米凝膠栓塞前兔 VX2肝癌動脈期可見腫瘤血管走行不規(guī)則，排列紊亂，部分供血動脈被瘤體推壓成"抱 球狀"，可見結(jié)節(jié)狀腫瘤染色。經(jīng)細導(dǎo)管注入溫敏納米凝膠見腫瘤及其周圍小血管均被 栓塞。栓塞后14天腫瘤壞死。而碘油栓塞14天后只是部分腫瘤壞死。
b.病理學(xué)檢測。實驗結(jié)果如附圖7和8所示。附圖7說明溫敏納米凝膠栓塞 組在低倍鏡下觀察時其瘤界限清楚，瘤巢較小而少，類圓形，腫瘤呈凝固性壞死；高倍 鏡下觀測發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞核固縮、碎裂、溶解消失，壞死灶內(nèi)未見存活的腫瘤細胞。附圖 8說明碘油栓塞組在低倍鏡下觀察時發(fā)現(xiàn)其腫瘤瘤巢較大，與正常肝組織界限尚清晰，腫 瘤以凝固性壞死為主，可見大量纖維組織形成，壞死區(qū)可見少許存活腫瘤組織；高倍鏡 下觀察，可見壞死灶內(nèi)大量纖維組織形成，壞死區(qū)內(nèi)見存活腫瘤細胞。
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權(quán)利要求
一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，其特征在于，它包括聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠和分散介質(zhì)，其中，聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠的質(zhì)量百分比濃度為3～10％，余量為分散介質(zhì)；聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)簡式為poly(A-co-B)，其粒徑為60～400nm，其中，A為N-異丙基丙烯酰胺，B為疏水性烯丙基類共聚單體，A、B的摩爾百分比為80～100∶0～20，交聯(lián)劑為N-取代的雙丙烯酰胺類化合物，交聯(lián)劑用量為A與B總摩爾量的0.1～5％；分散介質(zhì)為水溶性含碘造影劑注射液或其稀釋液，每1mL分散介質(zhì)中碘含量為50～350mg，稀釋液的稀釋劑為注射用水、生理鹽水或pH值為4～9的緩沖溶液中的一種。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，其特征在于，每lmL 分散介質(zhì)中碘含量為180 350mg。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，其特征在于，聚(N-異 丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠中，共聚單體為N-取代的丙烯酰胺、丙烯酸酯和甲基 丙烯酸酯中的任一種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種溫敏納米凝膠類血管栓塞材料，其特征在于，造影 劑注射液為碘海醇或碘佛醇。
5. 權(quán)利要求1所述溫敏納米凝膠類血管栓塞材料的制備方法，其步驟包括(1) 稱取聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠凍干粉，加入分散介質(zhì)，在室溫下 攪拌至充分溶脹、再經(jīng)高剪切勻質(zhì)機乳化使其分散均勻，離心除去氣泡后靜置，得到溫 敏納米凝膠分散體；(2) 將上述分散均勻的溫敏納米凝膠分散體封口，經(jīng)60Co輻照滅菌，室溫儲存。
6. 權(quán)利要求1所述的溫敏納米凝膠類血管栓塞材料作為腫瘤部位和血管畸形的血管栓 塞材料中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種介入用血管栓塞材料，該血管栓塞材料由聚(N-異丙基丙烯酰胺)(PNIPAAm)類聚合物溫敏納米凝膠、水溶性含碘造影劑注射液或其稀釋液組成。聚(N-異丙基丙烯酰胺)類聚合物納米凝膠為N-異丙基丙烯酰胺和疏水性烯丙基類單體的共聚凝膠，其粒徑為60～400nm。該血管栓塞材料具有溫敏納米凝膠濃度低、可顯影、制備方法簡單、室溫流動性好、體溫凝膠強度高、栓塞時間長、非粘附、適宜末端栓塞等優(yōu)點。此血管栓塞材料可用于腫瘤部位的血管栓塞和動靜脈畸形等多種疾病的治療。
文檔編號A61L31/18GK101690831SQ20091030874
公開日2010年4月7日 申請日期2009年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月26日
發(fā)明者馮敢生, 徐輝碧, 楊亞江, 楊祥良, 王芹, 趙彥兵, 鄭傳勝 申請人:華中科技大學(xué)