專利名稱：：一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種提取羥基萘醌總色素的方法。
背景技術(shù)：
：紫草因?qū)共≡⑸?、消化道平滑肌及血凝有一定影響，并對抗腫瘤、避孕、循環(huán)系統(tǒng)及降血糖有顯著的作用，所以，紫草已成為一種不可或缺的中草藥藥材，而經(jīng)研究表明，紫草中有效成分是"萘醌類色素"，目前提取羥基萘醌總色素效果最好的及最常用的方法為超聲萃取法和索氏提取法，但這兩種方法卻都存在操作復(fù)雜且操作時間長，提取不完全(提取量小——提取的羥基萘醌總色素占干燥紫草根的45%52%，純度低——僅為75%85%)，在操作過程中加入有機溶劑、導(dǎo)致有機溶劑殘留使環(huán)境受到污染。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是為了解決現(xiàn)有提取羥基萘醌總色素方法存在操作復(fù)雜且操作時間長，提取不完全，有機溶劑殘留的問題，而提供一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法。超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根180.0220.0g，加入95。/。的乙醇1822g，混合均勻后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為3555'C的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為1030L/h;二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為2030MPa、溫度為3555'C的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為3555'C、解析壓力為48MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為O.5lh。本發(fā)明超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法的重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均良好，左旋紫草素回收率高達99.0%103.8%。本發(fā)明超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法的方法工藝簡單、操作容易，整個方法操作時間短。本發(fā)明超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法在整個過程中沒有添加任何的有機溶劑，方法最后也沒有生成有機溶劑，解決了現(xiàn)有方法具有有機溶劑殘留的問題，避免的環(huán)境污染。采用本發(fā)明超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法的提取的羥基萘醌總色素純度高(高達98%以上)；提取量高(提取的羥基萘醌總色素占干燥紫草根的65.08%67.07%)。具體實施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。具體實施方式一本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根180.0220.0g，加入95。/。的乙醇1822g，混合均勻后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為3555。C的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為1030L/h;二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為2030MPa、溫度為3555。C的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為3555°C、解析壓力為48MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為0.5lh。本實施方式所使用的超臨界二氧化碳技術(shù)是指在臨界溫度和臨界壓力以上，且接近臨界點狀態(tài)下的C02作為萃取溶劑，通過改變溫度和壓力，以達到選擇性地提取各種類型化合物的目的。具體實施方式二本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟一中干燥紫草根過篩的規(guī)格為1號篩或2號篩。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一相同。具體實施方式三本實施方式與具體實施方式一或二不同的是步驟一中稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根190.0210.Og。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一或二相同。具體實施方式四本實施方式與具體實施方式一或二不同的是步驟一中稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根195.0205.0g。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一或二相同。具體實施方式五本實施方式與具體實施方式一或二不同的是步驟一中稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根200.Og。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一或二相同。具體實施方式六本實施方式與具體實施方式三至五不同的是步驟一中溫度為405(TC。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式三至五相同。具體實施方式七本實施方式與具體實施方式三至五不同的是步驟一中溫度為4248。C。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式三至五相同。具體實施方式八本實施方式與具體實施方式三至五不同的是步驟一中溫度為45。C。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式三至五相同。具體實施方式九本實施方式與具體實施方式一、二、六、七或八不同的是步驟一中C02的流量為1525L/h。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一、二、六、七或八相同。具體實施方式十本實施方式與具體實施方式一、二、六、七或八不同的是步驟一中C02的流量為1822L/h。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一、二、六、七或八相同。具體實施方式十一本實施方式與具體實施方式一、二、六、七或八不同的是步驟一中C02的流量為20L/h。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一、二、六、七或八相同。具體實施方式十二本實施方式與具體實施方式九至十一不同的是步驟二中萃取壓力為2228MPa。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式十或^^一相同。具體實施方式十三本實施方式與具體實施方式九至十一不同的是步驟二中萃取壓力為25MPa。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式十或^^一相同。具體實施方式十四本實施方式與具體實施方式一、二、六、七、八、十二或十三不同的是步驟二中每次間隔的時間為0.60.8h。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一、二、六、七、八、十二或十三相同。具體實施方式十五本實施方式與具體實施方式一、二、六、七、八、十二或十三不同的是步驟二中每次間隔的時間為0.7h。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式一、二、六、七、八、十二或十三相同。具體實施方式十六本實施方式與具體實施方式十四或十五不同的是步驟二中解析溫度為405(TC。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式十四或十五相同。具體實施方式十七本實施方式與具體實施方式十四或十五不同的是步驟二中解析溫度為45'C。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式十四或十五相同。具體實施方式十八本實施方式與具體實施方式一、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七不同的是步驟二中解析壓力為57MPa。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七相同。具體實施方式十九本實施方式與具體實施方式一、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七不同的是步驟二中解析壓力為6MPa。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七相同。具體實施方式二十本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根200.0g，加入95。/。的乙醇20g，混合均勻后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為45'C的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為20L/h;二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為25MPa、溫度為45。C的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為45'C、解析壓力為4MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為lh。對紫外-可見分光光度計進行精密度實驗——精密量取lmL的對照品溶液(精密稱取10.4mg的左旋羥基萘醌總色素對照品，置10mL容量瓶中，加適量的95%乙醇，超聲處理使溶解，放冷，力口95%乙醇至刻度，搖勻，即得)，置50mL容量瓶中，力口95%乙醇至刻度，搖勻，即得濃度為20.80yg/mL的左旋羥基萘醌總色素溶液，然后在波長為516nm處重復(fù)5次，連續(xù)測定，測定結(jié)果如表l所示，從表l中可以看出吸光度的RSD為O.16%。表明儀器精密度良好，說明測量結(jié)果準確。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>對本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法進行重現(xiàn)性實驗一將本實施方式得到的羥基萘醌總色素配成溶液，在紫外光為516nm處，測定吸光度，測得各吸光度的RSD為O.16%，從表2中可以表明本實施方式超臨界二氧化碳提取紫草的方法重現(xiàn)性良好。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結(jié)合表1和表2中的吸光度的數(shù)據(jù)可知，采闬本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法得到的羥基萘醌總色素的純度高(高于99%)。對本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法進行穩(wěn)定性實驗——取超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素樣品配制濃度為20.80yg/mL的供試品溶液，分別在Oh、2h、4h、6h、8h、10h、12h及24h重復(fù)測定吸光度，測試結(jié)果如表3所示，從表3中可知RSD為<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>對本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法進行回收率實驗一精密稱取5份(超臨界二氧化碳提取物即本實施方式得到的羥基萘醌總色素168.60yg——為樣品量)，稱取5份左旋紫草素對照品(左旋紫草素166.40yg為加入量)，測得左旋紫草素的回收率如表4所示，從表4中可知平均回收率為101.34%，RSD為1.17。/。。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>÷采月目本實施方式超臨界二氧化碳方法提，f又得到的羥基萘醌總色素經(jīng)測得為133.54g，可知提取的羥基萘醌總色素占200.0g的干燥紫草根的66.77%。具體實施方式二十一本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步、過篩后的干燥紫草根200.0g，加入95。/。的乙醇20g，混合均勻后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為5(TC的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為15L/h;二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為30MPa、溫度為5(TC的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為45'C、解析壓力為6MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為0.8h。采用本實施方式超臨界二氧化碳提取方法提取得到的羥基萘醌總色素經(jīng)測得為131.24g，可知提取的羥基萘醌總色素占200.0g的干燥紫草根的65.62%。具體實施方式二十二本實施方式超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根190.0g，加入95。/。的乙醇19g，混合均勻后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為4(TC的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為25L/h;二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為20MPa、溫度為4(TC的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為55。C、解析壓力為8MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為O.5h。采用本實施方式超臨界二氧化碳提取方法提取得到的羥基萘醌總色素經(jīng)測得為124.18g，可知提取的羥基萘醌總色素占190.0g的干燥紫草根的65.36%。權(quán)利要求1.一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根180.0～220.0g，加入95％的乙醇18～22g，然后裝入1L的萃取釜中，而后對萃取釜、解析釜和貯罐進行加熱，均加熱至溫度為35～55℃的條件下開啟C02鋼瓶，控制C02的流量為10～30L/h；二、通過高壓泵進行加壓，在萃取壓力為20～30MPa、溫度為35～55℃的恒溫恒壓條件下進行循環(huán)萃取，然后在解析溫度為35～55℃、解析壓力為4～8MPa的條件下進行分離，而后在解析釜出料口出料，即得羥基萘醌總色素；其中步驟二中循環(huán)萃取次數(shù)為4次，每次間隔的時間為0.5～1h。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟一中干燥紫草根過篩的規(guī)格為1號篩或2號篩。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟一中稱取經(jīng)研磨、過篩后的干燥紫草根190.0210.0g。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟一中溫度為405(TC。5.根據(jù)權(quán)利要求l、2或4所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟一中C02的流量為1525L/h。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟二中萃取壓力為2228MPa。7.根據(jù)權(quán)利要求l、2、4或6所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟二中每次間隔的時間為O.60.8h。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟二中解析溫度為405(TC。9.根據(jù)權(quán)利要求l、2、4、6或8所述的一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，其特征在于步驟二中解析壓力為57MPa。全文摘要一種超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法，它涉及一種提取羥基萘醌總色素的方法。它解決了現(xiàn)有提取羥基萘醌總色素方法存在操作復(fù)雜且操作時間長，提取不完全，有機溶劑殘留的問題。提取方法將干燥紫草根及乙醇的混合物加熱，在CO₂氛圍及中具有萃取壓力條件下進行循環(huán)萃取，然后再解壓進行分離，出料，即得。本發(fā)明超臨界二氧化碳提取羥基萘醌總色素的方法的重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均良好，左旋紫草素回收率高。本發(fā)明方法工藝簡單、操作容易，整個方法操作時間短。本發(fā)明方法無有機溶劑殘留，避免環(huán)境污染。采用本發(fā)明方法提取的羥基萘醌總色素純度高達98％以上，提取量高——占干燥紫草根的65.08％～67.07％。文檔編號A61P35/00GK101669981SQ20091030913公開日2010年3月17日申請日期2009年10月30日優(yōu)先權(quán)日2009年10月30日發(fā)明者暉孫,輝董,華邵申請人:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)