專利名稱：治療性肽治療和預防癌癥的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及癌癥治療法和預防法領域。特別地，本發(fā)明涉及抑制、延緩和減低癌癥 開始、生長和侵襲的危險的方法。
背景技術：
MUCl (DF3、CD227、上皮唾液蛋白、PEM)是> 300kDa的重度0-糖基化異二聚體蛋 白質(zhì)，通常大量表達于腺上皮的頂端表面。在大于90%的人乳腺癌和轉移中，頂點的定位 消失，MUCl過表達(大于10倍)并糖基化不足(underglycosylated) (1,2)。除了在白血 病、骨髓瘤和淋巴瘤中高表達，MUCl的失調(diào)表達被發(fā)現(xiàn)在許多其它類型的腺癌以及癌癥中， 包括肺癌、胰腺癌、卵巢癌和前列腺癌(3-5)。在遺傳小鼠模型和細胞系模型中的研究都已 證明MUCl是癌基因。迫使MUCl (人類)在小鼠乳腺過表達的轉基因小鼠模型(MMTV-MUC1) 導致乳腺癌的發(fā)展并伴隨乳腺通過凋亡進行完全的哺乳后復原的失敗(6)。將MUCl轉染 到3Y1成纖維細胞引起它們的轉化，將MUCl轉染到結腸癌細胞表明MUCl過表達抑制藥物 誘導的凋亡(7)。MUCl的胞質(zhì)域含有多種蛋白質(zhì)相互作用位點，盡管這些相互作用在正常乳腺的極 化上皮細胞中大量地未成形，因為MUCl的結合配偶體被典型地發(fā)現(xiàn)在基底外側膜上((8) 和(9、10)中評論的)。在癌癥的演進過程中，當細胞極化喪失時，MUCl過表達并與src、 GSK3i3、表皮生長因子受體(EGFR)和β -聯(lián)蛋白等功能性相互作用(9、11、12)。MUCl和 這些蛋白之間相互作用的位點已被作圖以獲得MUCl的72個氨基酸胞漿尾內(nèi)的獨特結 構域(11、13-15)。EGFR和src能在YEKV基序上磷酸化MUC1，并且這種磷酸化導致通過 SAGNGGSSLS結構域MUCl與β -聯(lián)蛋白的結合增加(11)。最近的證據(jù)表明MUCl與EGFR之 間的相互作用能顯著地調(diào)節(jié)EGFR生物學并影響EGFR依賴的轉化{Pochampal 1 i，2007#537 ； Pochampalli，2007#527}。酪氨酸激酶的表皮生長因子受體(EGFR)家族在癌癥中經(jīng)常失調(diào)，并通常在侵襲 性癌中被擴增和/或過表達[(16)所評述的]。該家族由4個同源的1型酪氨酸激酶受 體(包括EGFR、her2/neu/erbB2、erbB3和erbB4)和多個相關的配體[包括表皮生長因子 (EGF)和轉化生長因子α (TGFa)等]構成。配體誘導的受體同源或異源二聚化導致酪氨 酸激酶活化和胞質(zhì)域中的酪氨酸殘基的轉磷酸作用。這引起許多種效應物蛋白——包括 Src、PI 3-激酶、She、PLC γ、STATs、Grb2和cbl——的募集，導致增殖、遷移、凋亡的抑制、 分化或內(nèi)吞受體的降解(17-20)。在過表達MUCl的人乳腺癌細胞系和轉基因小鼠(MMTV-MUC1)中已經(jīng)確定，MUCl和 EGFR生物化學地相互作用，從而導致在哺乳過程中EGF依賴的p42/44ERK活化的增強(11、 21)。最近，我們的實驗室已證明MUCl表達抑制EGFR的配體介導的泛素化和降解同時增強 其內(nèi)化和再循環(huán)(Pochampalli et al 2007)。為了評價Mucl在轉化中的作用，我們進一步 在Mucl無效的背景上產(chǎn)生了 WAP-TGF α小鼠，其揭示了 Mucl表達對乳腺的TGF α依賴的轉化、促進開始和進展具有主導的影響(Pochampalli et al 2007b)。盡管現(xiàn)在已確定EGFR被MUCl表達有效地調(diào)節(jié)，在EGFR和MUCl信號傳導中，轉 基因小鼠模型也已牽涉細胞粘著蛋白β-聯(lián)蛋白。在WAP-TGFa轉基因模型的研究中， Wntl和Wnt3被發(fā)現(xiàn)在大多數(shù)侵襲性乳腺腫瘤中被選擇性地活化(22)。Wnt是分泌的糖蛋 白，它結合跨膜卷曲受體，導致信號級聯(lián)放大，這使β _聯(lián)蛋白降解的機制失活并導致轉化 (23-28)。此外，在MMTV-Wntl轉基因小鼠中，EGFR被發(fā)現(xiàn)以腫瘤特異性方式與β-聯(lián)蛋白 相互作用并將之磷酸化(Schroeder et al 2002)。這些研究證明β-聯(lián)蛋白和EGFR能影 響它們各自的通路來促進轉化。最后，MUCl在聯(lián)蛋白依賴的轉化中也被牽涉，表明這 三種蛋白具有協(xié)同促進癌癥進展的能力。在雜交到Mucl無效背景上的MMTV-Wnt-I轉基因 小鼠中，Mucl的丟失對應腫瘤進展的顯著減少(Schroeder et al，2003)。此外，MUCl和 β-聯(lián)蛋白之間的相互作用被發(fā)現(xiàn)在來自人轉移性乳腺腫瘤的樣品中高度地增加，表明這 些相互作用是臨床上相關的(Schroeder et al，2003)。這些研究共同證明MUC1、EGFR和β -聯(lián)蛋白在轉化過程中相互影響的強大潛力， 包括在轉化和轉移過程中它們顯著的共同上調(diào)。MUCl能抑制EGFR的下調(diào)并促進EGFR和 β -聯(lián)蛋白的轉化能力，并且遺傳上衍生的小鼠模型在EGFR和β -聯(lián)蛋白依賴的轉化和轉 移中牽涉MUC1。有趣的是，MUCl上EGFR和β -聯(lián)蛋白的相互作用位點串聯(lián)地位于MUCl胞 質(zhì)域上。對于發(fā)展在預防和治療癌癥中有效的治療，本領域存在持續(xù)的需求。 發(fā)明概要根據(jù)一方面，具有A-B-C或C-B-A結構的融合肽被給予具有鑒定的高癌癥危 險的人。癌癥開始的概率因此被減小。A是增強附著的大分子跨細胞膜轉運的蛋白轉 導結構域。B是0-5個氨基酸殘基的間隔區(qū)。C是6-15個氨基酸殘基的多肽。C包含 PYEKVSAGNGGSSLS(SEQ ID NO 1)的全部或部分。C 的部分包含 GGSSLS(SEQ IDNO 2)。可 選地，所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電 荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或 其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。根據(jù)另一個方面，具有A-B-C或C-B-A結構的融合肽和EGFR抑制劑被給予已切除 腫瘤的人。腫瘤復發(fā)或轉移的概率因此被減小。A是增強附著的大分子跨細胞膜轉運的蛋 白轉導結構域。B是0-5個氨基酸殘基的間隔區(qū)。C是6-15個氨基酸殘基的多肽。C包含 PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ ID NO 1)的全部或部分。C 的部分包含 GGSSLS (SEQ ID NO :2)?？?選地，所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電 荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或 其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。根據(jù)另一個方面，具有A-B-C或C-B-A結構的融合肽被給予結腸或皮膚癌患者。 癌癥的侵襲力或生長因此被減小或延緩。A是增強附著的大分子跨細胞膜轉運的蛋白轉 導結構域。B是0-5個氨基酸殘基的間隔區(qū)。C是6-15個氨基酸殘基的多肽。C包含 PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ ID NO 1)的全部或部分。C 的部分包含 GGSSLS (SEQID NO :2)。可 選地，所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或 其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。閱讀說明書后，這些和其它方面對本領域的技術人員來說將是清楚可見的，它們 為本領域提供治療或預防癌癥的新方法。附圖簡述

圖1A-1F。MUCl模擬肽(PMIP)能有效地進入細胞，促進EGFR降解并抑制MUCl和 β-聯(lián)蛋白的相互作用。圖1Α)人MUCl的胞質(zhì)氨基酸序列(MUC1CT ； SEQ ID Ν0:15)，其包 含EGFR/src磷酸化位點(下劃線=SEQ ID NO 15，殘基46-49)和β-聯(lián)蛋白結合位點(雙 下劃線SEQ ID NO: 15，殘基50-59)。PTD4蛋白轉導結構域(SEQ IDNO 16)允許細胞攝取 PMIP模擬Jj太(人PMIP(hPMIP ;SEQ ID NO :17)和小鼠PMIP(msPMIP ;SEQ ID N0:18)。綠盒子 突出MUCl模擬的氨基酸序列。圖IB)用10 μ M生物素-hPMIP處理BT-20乳腺癌細胞4小 時顯示hPMIP有效的細胞攝取和保留(綠色=生物素-PMIP，藍色=DAPI (細胞核)，400 X 和630X)。圖lC)BT-20乳腺癌細胞用hPMIP(lOyM)或PTD4(10yM)處理18小時。細 胞用EGF(30' EGF, 10ng/ml)處理或不處理(-S，無血清)，產(chǎn)生蛋白裂解物并在SDS-PAGE 上分離。對裂解物就EGFR (1005)和β-肌動蛋白(AC-15)進行免疫印跡(IB)。圖ID-F MDA-MB-468 細胞用 EGF (10ng/ml)以及或者(圖 ID) hPMIP (10 μ M)、(圖 IE) PTD4 (10 μ Μ)或 者(圖1F)PBS處理過夜。細胞被固定，探測MUCl (Texas Red)和β-聯(lián)蛋白(FITC)，并在 共聚焦顯微鏡上檢查(400Χ)。使用Image Pro Plus進行共定位(箭頭)分析，并用白色 像素指定。圖2A-2C。PMIP抑制體外乳腺癌細胞的細胞增殖和侵襲。圖2A)BT20細胞在96 孔盤中(IO4細胞/孔)培養(yǎng)并用在RPMI 1640/1 % FBS中的hPMIP (10 μ M)或PTD4 (10 μ Μ) 每天處理，持續(xù)6天。處理完成之后，進行MTT測定法來定量細胞數(shù)，ρ < 0.0001)。誤 差條代表標準誤差。圖2B)MDA-MB-231和圖2C)BT20細胞系用hPMIP(50 μ Μ)、PTD4(50 μ Μ) 或PBS處理過夜，用Calcein AM標記，允許通過Transwell (8. 0 μ Μ)插入物侵入到I型膠 原凝膠，被侵入的細胞通過熒光測量。(AN0VA，*p < 0. 0001廣ρ < 0. 0001, #p = 0. 007, ##p =0. 007)。誤差條代表標準偏差。圖3A-3E。PMIP顯著地抑制體內(nèi)腫瘤生長和復發(fā)。圖3A)基質(zhì)膠(Matrigel)中 的MDA-MB-231細胞被注射進scid小鼠的乳腺脂肪墊中，當腫瘤達到IOOmm3時，每天的肽 治療(hPMIP或PTD4，50 μ g/g體重)開始(PTD4和hPMIP η = 8)，并且評價原發(fā)腫瘤生長 (*，ρ = 0. 028)。圖3Β)治療結束之后，測量腫瘤發(fā)展到IOOOmm3需要的時間量(AN0VA, **， ρ = 0. 03)。圖3C切除之后，觀察小鼠在原發(fā)位點或繼發(fā)乳腺的腫瘤再生長(PTD4n = 8和 hPMIP η = 7)。圖3D)基質(zhì)膠中的MDA-MB-231細胞被注射進scid小鼠的乳腺脂肪墊中， 當腫瘤達到500mm3時，每天的肽治療(hPMIP或PTD4, 50 μ g/g)開始(PTD4n = 4和hPMIP η = 6),并且評價原發(fā)腫瘤生長Γ，ρ = 0. 028)。圖3Ε)治療21天之后腫瘤被立即切除，監(jiān) 測在原發(fā)位點的腫瘤再生長和傳播到繼發(fā)乳腺(PTD4n = 4和hPMIP η = 4)。誤差條代表 標準誤差。圖4A-4D。PMIP顯著地減慢MMTV-pyV mT誘導的乳腺腫瘤的進展。圖4A)MMTV_pyV mT轉基因小鼠被注射以FITC-msPMIP(50 μ g/g體重)，四小時之后被處死，使用熒光顯微 鏡顯現(xiàn)各種組織。FITC-msPMIP在小鼠乳腺腫瘤中的定位被顯示(2.5X和8X)。圖4B)
6允許乳腺腫瘤(直徑> 0. 5cm)發(fā)展，小鼠每天注射msPMIP (7只小鼠)或PTD4 (6只小鼠) (50 μ g/g體重，21天治療，腹膜內(nèi)(i. p.)注射，IX每天)。在治療結束時，動物被處死，腫 瘤制成的蛋白裂解物用于后來的分析。在治療期間，msPMIP處理小鼠所有腫瘤位點(msPMIP η = 70, PTD4n = 60)的腫瘤總生長顯著低于PTD4小鼠(193.8% 士 77. 7 %對589. 5 % 士283. 6%,*AN0VA ρ = 0. 039)。圖4C)msPMIP處理小鼠的乳腺腫瘤以較PTD4處理腫瘤顯 著低的速率生長(ANOVA p = 0. 0076)。圖4D)msPMIP或PTD4處理轉基因小鼠的腫瘤大小 分布顯示，與27% (70個可能腫瘤位點中的19個)的msPMIP處理腫瘤相比，47% (60個可 能腫瘤位點中的28個)的PTD4處理腫瘤大于100mm3。上面數(shù)據(jù)的數(shù)目是滿足超過總潛在 腫瘤位點的大小標準的腫瘤數(shù)目。圖5A-5B。MMTV-pyV mT腫瘤對msPMIP具有差示反應。圖5A)來自圖3中描述的 動物的每個腫瘤位點的單獨的生長(每一條是來自一只小鼠的乳腺脂肪墊/腫瘤位點)每 天用msPMIP (深灰色)或PTD4(淺灰色)以50 μ g/g體重處理，持續(xù)21天。在21天的治 療過程中，每3天觀察腫瘤進展(PTD4，n = 60，PMIP，n = 70)。在4個實例中(*)，msPMIP 處理腫瘤完全消退，然而對照(PTD4)處理腫瘤沒有一個消退。MFP=乳腺脂肪墊。圖5B) 來自msPMIP(l，左2圖)和PTD4(2，右2圖)處理小鼠的腫瘤被切除(3μπι)，接下來被用于 蘇木素_伊紅染色和分裂的caspase-3免疫組織化學術(200X)。圖6A-6B。PMIP與減少的Mucl表達相關聯(lián)。圖6A)代表性的MMTV-pyV mTmsPMIP (P)處理小鼠和PTD4小鼠(C)在處死前30分鐘每只被注射表皮生長因子 (1 μ g/g體重)和肽。處死之后，腫瘤被收集，產(chǎn)生蛋白裂解物。對于磷酸酪氨酸(PY99)、 EGFR (1005), Mucl (CT2)和 β-肌動蛋白(AC-15)的表達，蛋白(50 μ g)通過 SDS-PAGE 分 離、轉移和免疫印跡。圖6B)來自MDA-MD-231異種移植物腫瘤(未用EGF處理；圖2中描 述的)的裂解物被相似地分析以確定EGFR和MUCl蛋白表達的水平。Mucl的相對蛋白水平 通過光密度測定法測量并繪圖(Mucl/β-肌動蛋白，ANOVAZp = 0.014)。分子量被顯示在 右側。IB=免疫印跡。通過印跡的白線表示相同的凝膠和暴露，但是不連續(xù)的。發(fā)明詳述支持本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)是MUCl模擬肽在系統(tǒng)給藥后選擇性地保留在乳腺腫瘤、結腸 和皮膚中。而且，MUCl模擬肽減少腫瘤開始。此外，MUCl模擬肽能與其它抗EGFR治療結合 用于在輔助的環(huán)境中，即手術后。任何蛋白轉導結構域(PTD)能被用在融合蛋白中。這些包括先前已被鑒定 并用于蛋白轉導的任何結構域。參見例如Dietz and Bahr, Molecular and Cellular Neuroscience, 27 (2004) 85-131的廣泛表1，該文獻被清楚地并入本文。某些這樣的結構域 被顯示在SEQ ID NO :3、4、5和6中，但是熟練的技術人員不受限于這些使用?？梢允褂冒?括合成的PTDs在內(nèi)的其它PTDs。這些結構域促進細胞攝取附著肽。融合蛋白中使用的間隔區(qū)是附加的氨基酸殘基，它們被用在融合蛋白中典型地促 進制造或合成。這些可以是相當無害的，并典型地是0至5個殘基長度。連接體可以是單 一的或混合的殘基。殘基可以是隨機的或從其它蛋白獲得的序列或為特定的性質(zhì)而設計， 例如物理的、化學的或生物的性質(zhì)。MUCl胞質(zhì)域肽諸如SEQ ID NO 14增加乳腺癌細胞的侵襲。Schroeder，2003。令 人驚奇的地，這樣的肽的較短部分實際上具有相反的作用。這些肽包括選自SEQ IDNO 1的6至15個連續(xù)的氨基酸殘基并包括SEQ IDNO :2顯示的氨基酸序列。來自精確序列的微小 差異可被用于優(yōu)化活性，諸如通過一個、兩個或三個殘基的替換來進行保守改變或通過用 丙氨酸替換。保守改變互相替換相似的殘基，諸如無電荷極性的替換無電荷極性的、或非極 性的替換非極性的、或酸性的替換酸性的殘基。因此G或S殘基能用G、S、T、C、Y、N和Q替 換。L殘基能用A、V、I、P、F、W和M替換。A、V和P殘基能用A、V、L、I、P、F、W和M殘基替 換。Y或N殘基能用G、S、T、C、Y、N和Q殘基替換。E殘基能用D殘基替換。K殘基能用R 或H殘基替換。任何殘基能用丙氨酸殘基替換，除非這樣的替換被發(fā)現(xiàn)破壞侵襲和轉移抑 制活性。這樣替換的肽能被容易地測試，例如使用侵襲測定法、腫瘤生長測定法、腫瘤開始 測定法等。癌細胞，體外或體內(nèi)，能與本發(fā)明的融合肽接觸或供給本發(fā)明的融合肽。它們能夠 作為肽被直接提供，或它們能夠通過提供給細胞在細胞中表達并產(chǎn)生融合肽的核酸載體而 被內(nèi)源性地產(chǎn)生。對于體內(nèi)給予，能使用任何本領域已知的遞送技術，包括但并不限于直接 的腫瘤內(nèi)注射、肌肉內(nèi)注射、血管內(nèi)注射、皮下注射、腹膜內(nèi)注射等。體外遞送能，例如，簡單 地通過向培養(yǎng)基補給融合肽而完成。可被治療的癌癥和癌細胞包括乳腺、皮膚、結腸、卵巢、前列腺、子宮頸、結腸直腸、 肺、腦、頭和頸、胰腺、腎臟和肝臟癌癥和癌細胞。給予后觀察的作用是開始、生長、侵襲和轉 移的減少的程度或延緩的速度。測量這些過程的合適的測定法在實施例中被描述。本領域 已知的其它測定法同樣能被使用。融合肽能被配制或修飾，如本領域已知的。這可包括共價修飾，諸如加帽、PEG化 或與膠束或脂質(zhì)體結合。這樣的修飾和配制可增加在身體內(nèi)的穩(wěn)定性，因此允許較高百分 比的輸入劑量到達靶癌癥。融合蛋白還能與其它的治療結合使用，包括但并不限于EGFR抑 制劑。治療可被同時或連續(xù)地給予。治療癌癥的其它合適的治療包括化學治療藥給藥或輸 注、抗腫瘤抗體、抗受體抗體、輻照治療、放射性標記的藥物和手術。以不同方式起作用的兩 種形式的使用可向患者提供增加的益處。合適的EGFR抑制劑可以是抗體或激酶抑制劑，諸 如帕尼單抗(panitumumab)、西妥昔單抗、吉非替尼和厄洛替尼。對MUCl與β-聯(lián)蛋白結合的相似抑制作用能通過將抗體遞送到細胞或癌癥患者 而被獲得?？贵w可以是任何類型，單克隆的或多克隆的、單鏈或多鏈抗體?？贵w可以在宿主 哺乳動物中、在細胞培養(yǎng)物中或在重組的細胞中制備?？贵w結合SEQ ID NO :1中含有的表 位。使用根據(jù)SEQ ID NO :1的肽作為免疫原，例如，或使用根據(jù)發(fā)明的融合蛋白作為免疫原 或使用其它融合蛋白作為免疫原，能產(chǎn)生抗體。遞送編碼本發(fā)明融合蛋白的核酸的載體可以是任何本領域已知的載體。腺病毒載 體和腺相關載體是已知的和廣泛使用的。非病毒載體也能被使用，諸如納米顆粒、脂質(zhì)體和 膠束。在一些實施方式中可以使用逆轉錄病毒載體。本領域的技術人員能選擇適合其目的 的載體。相似地，為了培養(yǎng)物中重組制造本發(fā)明的融合蛋白，本領域的技術人員能選擇載體 和宿主細胞系統(tǒng)。被鑒定為具有與癌癥相關的遺傳基因的人處于增加的發(fā)展癌癥的危險中。這樣 的人能被治療以減小他們癌癥開始的危險。相似地，那些已被暴露于環(huán)境危險——諸如原 子彈放射性塵埃、核燃料廢物和其它的污染物——中的人，處于增加的發(fā)展癌癥的危險中。 可被突變的基因和它們引起的常染色體顯性疾病包括但并不限于BRCAl 乳腺癌，BRCA2
8乳腺癌，APC 結腸癌HNPCC 結腸癌，CDKN2 黑色素瘤。其它的常染色體顯性遺傳癌癥危險 包括基底細胞痣綜合征、神經(jīng)纖維瘤病2型、卡奈綜合征、骨軟骨瘤病、多發(fā)的、脊索瘤、家 族的、副神經(jīng)節(jié)瘤、家族的、考登綜合征、普-杰二氏綜合征、具有胼胝形成的食管癌、前列 腺癌、胃癌、家族的、腎癌、家族的、李弗勞明綜合征、視網(wǎng)膜母細胞瘤、多發(fā)性內(nèi)分泌瘤病1 型、結節(jié)性硬化癥、多發(fā)性內(nèi)分泌瘤病2型、希-林二氏病、神經(jīng)纖維瘤病1型和腎母細胞 瘤。易患癌癥的常染色體隱性疾病包括運動失調(diào)性毛細血管擴張癥、Bloom綜合征著色性 干皮病、維納綜合征和Fanconi ‘ s貧血。與蛋白轉導結構域(PTD)連接的MUCl模擬肽(MIP)能自由地進入轉化的細胞并 抑制它們的體外侵襲。這些相同的肽能抑制原發(fā)的腫瘤生長、腫瘤傳播和切除后腫瘤的復 發(fā)，例如，在同位植入的乳腺癌模型中。PMIP模擬肽，諸如SEQ ID NO :17和18，能以組織特 異性保留在循環(huán)中幸存并沒有可檢測到的毒性。重要地是，PMIP能顯著地抑制腫瘤生長， 例如，在模擬人乳腺癌的自發(fā)小鼠模型中。在機制上，這種腫瘤抑制作用與EGFR和MUCl表 達的降低密切相關。這些數(shù)據(jù)共同證明，這些基于肽的細胞內(nèi)藥物顯示作為癌癥非毒性治 療的強效性。人MUCl在小鼠乳腺中的過表達促進轉化，在多個轉基因模型中MUCl的喪失能顯 著地延遲腫瘤開始(6、10、12)。這可歸因于致癌性配偶體MUCl的數(shù)目已被證明與，即β -聯(lián) 蛋白、src和EGFR相互作用[(8)中評論的]。這個模擬肽被設計以阻斷MUC1、β-聯(lián)蛋白 和EGFR之間的相互作用，并且我們已證明PMIP處理確實阻斷MUCl與這些蛋白之間的相互 作用。此外，我們觀察到在某些情況下對PMIP處理的反應是MUCl表達喪失，這可能是EGFR 下調(diào)的結果。吸引人的是推測在PMIP存在時，MUCl和EGFR被可選地運輸(trafficked)并 進入溶酶體降解途徑，導致它們增強的降解。在CMV啟動子下過表達MUCl的MDA-MB-231 細胞在培養(yǎng)物中只3小時的PMIP處理誘導MUCl過表達的喪失，表明這種作用不是轉錄調(diào) 節(jié)的(未顯示數(shù)據(jù))。一個重要的觀察結果是與PMIP處理相關的毒性的缺乏(沒有重量減輕、痛苦的跡 象或器官衰竭)。盡管這不是使用內(nèi)源肽的意外不到的結果，但它指出在患者中潛在的低水 平的毒性。我們還檢查了 PMIP在免疫缺陷的MMTV-pyV mT轉基因動物中已激活免疫反應 的概率。使用作為標記物的CD45的蛋白水平檢查白細胞浸潤，我們發(fā)現(xiàn)與對照比較，在那 些用PMIP處理的腫瘤中沒有增加((37)；未顯示數(shù)據(jù))。此外，通過分組調(diào)查蛋白轉導結構 域潛在輔助活性的研究已發(fā)現(xiàn)TAT蛋白轉導結構域不是免疫原性的(38)。我們最近已證明MUCl抑制配體依賴的EGFR降解，導致增強的受體穩(wěn)定性(9)。此 外，我們已證明這種相互作用促進EGFR的致癌性質(zhì)(10)。這些實驗中使用的小鼠模型先 前也都沒有顯示是依賴EGFR進展的，然而，PMIP在每個模型中是顯著有效的。這表明PMIP 對過表達MUCl的腫瘤可具有寬廣的應用，這包括大多數(shù)上皮瘤形成(39)。此外，PMIP可充 當與抗EGFR治療的重要輔助治療[(40)中評論的，該文獻被清楚地并入用于此目的]。我 們的數(shù)據(jù)表明MUCl誘導內(nèi)化、改變的運輸和增強的EGFR信號傳導(9)。因此，如果PMIP阻 斷這些相互作用，依賴EGFR表面定位的抗EGFR治療能通過PMIP共遞送被增強。我們已證明癌癥，特別是乳腺癌中PTD連接肽基藥物的有效性和MUCl定向靶標的 價值。重要地是，這些數(shù)據(jù)表明PMIP是在腫瘤進展的所有階段有活性的強效藥抑制開始、 抑制生長、誘導消退和抑制轉移性傳播。
上面的公開內(nèi)容概括地描述本發(fā)明。本文公開的所有參考文獻被清楚地并入作為 參考。通過參考下面的具體實施例，能獲得更完全的理解，本文提供的這些具體實施例只是 為了舉例說明的目的，而并不是要限制本發(fā)明的范圍。實施例I-方法 細胞培養(yǎng)。轉移性乳腺癌細胞系MDA-MD-231和BT20從美國組織培養(yǎng)物保 藏中心(American Tissue Culture Collection)獲得。這些細胞系用10%胎牛血清 (Cellgro, Herndon, VA)、1 %青霉素-鏈霉素 _ 谷氨酰胺(Invitrogen, Eugene, OR)和 RPMI 1640 (Cellgro)培養(yǎng)基在37°C、5% CO2的增濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。侵襲測定。膠原基質(zhì)(0. 9mg/ml I型大鼠尾膠原(BD Biosciences, Billerica, ΜΑ)、83· 0% (ν/ν)Μ-199 培養(yǎng)基(Life Technologies)和 0. 18% NaHCO3(Fisher,Hampton, NH))被倒入24孔板。在膠原聚合之前，0. 8μπι孔的transwell插入物(Corning Inc.， Corning, NY)被放在基質(zhì)頂部。使用化學吸引劑(具有l(wèi)OOng/mL EGF的20 % FBS/ RPMI 1640)，將聚合的膠原再水化。用在無血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中的50 μ M肽 處理MDA-MB-231細胞17小時。將細胞加載到transwell插入物上之前，它們用 Calcein-AM(Invitrogen)熒光標記30分鐘，然后用PBS洗滌。細胞然后在50 μ M肽/RPMI 1640無血清培養(yǎng)基中被再懸浮，并被加載到每孔中的插入物上(266，000細胞/孔)。細胞 在37°C、5% CO2的增濕培養(yǎng)箱中被允許侵入到基質(zhì)中12小時。12小時之后，用40% FBS/ PBS中的0. 25%膠原酶處理膠原基質(zhì)，并且移去插入物(Calbiochem，San Diego, CA)。使 用Molecular Devices分光光度計(Ex :485，Em :538，截止530)測量已侵入到膠原中的熒 光標記細胞的數(shù)目。免疫沉淀和免疫印跡。蛋白如(9)所描述進行處理。光密度測定法。如(9)所描述進行免疫印跡分析?？贵w和生長因子。CT2(抗-MUCl胞質(zhì)尾)從 Neomarkers Inc. (Fremont, CA)購買。抗磷酸化酪氨酸抗體(PY99)和EGFR/erbBl (1005)都從Santa Cruz Biotechnologies (Santa Cruz, CA)購買。β -肌動蛋白抗體來自 Sigma Chemical Company (St. Louis，M0)。與 HRP 結合的二抗從 Molecular Probes(Invitrogen)獲得,抗倉 鼠HRP結合的抗體從Jackson Labs (West Grover，PA)購買。表皮生長因子(EGF)以IOOng/ μ 1 的濃度儲存在 _20°C (Invitrogen)。免疫熒光。8了20細胞用20(^11 FITC標記的hPMIP處理2小時，并在4%多聚甲 醛/PBS中固定。固定的細胞用0. 02% NaN3/PBS洗3次，并與具有DAPI的SlowfadeGold 抗衰退試劑(Invitrogen)溫育。用熒光DMLB Leica復式顯微鏡使細胞可視化。肽合成。hPMIP(SEQ ID NO 17)、FITC—hPMIP、msPMIP (SEQ ID N0:18)、 FITC-msPMIP和PTD4 多月太(SEQ ID NO 16)通過GenScript (Scotch Plains，NJ)合成并被凍 干遞送。這些肽以500 μ M的濃度在PBS中再懸浮并以一次性使用的等分試樣儲存在-80°C。人乳腺腫瘤異種移植物。測試免疫減弱的(scid)小鼠(Taconic，Rockville, MD)血清IgG的存在并發(fā)現(xiàn)< 20μ g/ml IgG。將包埋在Matri-gel (BD Biosciences)中的 IXlO7細胞注射到雌性小鼠(4至6周齡)的乳腺脂肪墊中并允許生長到IOOmm3或500mm3， 基于公式a2Xb/2，其中a是較小的直徑，而b是較大的直徑。小鼠腹膜內(nèi)注射(i.p.)50yg/ g體重的PMIP或PTD4對照肽，持續(xù)21天，并用測徑器每兩天測量。在21天結束時或腫瘤已達到800mm3之后，通過在切除之前至少一小時給小鼠注射丁丙諾啡(2. 5mg/kg體重， Infusion Solutions, Totowa, NJ)和用異氟醚(Abbott，Abbott Park, II)麻醉小鼠，切除 腫瘤。手術之后，小鼠在術后8和16小時用丁丙諾啡(2.5mg/kg體重)處理。然后跟蹤動 物10天以檢測在原發(fā)腫瘤位點或繼發(fā)的乳腺處的再生長，然后被處死。轉基因小鼠。MMTV-pyV mT小鼠(33)，從Jackson實驗室獲得)進入腫瘤發(fā)展的 研究，腫瘤被測量至少一個直徑> 0. 5cm。只有大于七周齡的小鼠被包括在本研究中，并排 除發(fā)生液體囊腫的小鼠。動物被腹膜內(nèi)注射50 μ g/g體重的msPMIP或PTD4，每天一次，持 續(xù)21天。使用測徑器每兩天測量十個乳腺中的每一個，測量結果被用于基于公式a2Xb/2確 定腫瘤體積，a是較小的直徑，b是較大的直徑。處理21天之后，小鼠通過CO2吸入被處死， 組織被切除。在處死之前一至四小時，給幾個msPMIP處理小鼠注射FITC-msPMIP(50y g/g 體重)，用熒光MZFLIII Leica解剖顯微鏡使未受損的組織可視化。異種移植物和轉基因小鼠研究都在亞利桑那大學的Institutional Animal Care andUse Committee 批準的規(guī)禾呈下通過Experimental Mouse Shared Services (University ofArizona, Tucson)進行。統(tǒng)計學分析。所有統(tǒng)計數(shù)字都在Excel (Microsoft)中進行。實施例2-PMIP被保留在細胞中，減少EGFR磷酸化并抑制MUCl和β -聯(lián)蛋白相互作用。MUCl 胞質(zhì)域由72個氨基酸組成，這里面存在含有EGFR磷酸化位點(人=YEKVdn^= YEEV)和 β-聯(lián)蛋白結合位點(人=SAGNGGS SLS (SEQ ID NO :9)，小鼠=SAGNGSSSLS(SEQ ID NO: 19)，圖1A)的15個氨基酸的結構域(11、29)。我們合成了 15個氨基酸的肽以測定是否它 能以顯性負性方式起作用，阻斷MUCl和EGFR/ β -聯(lián)蛋白/src之間的相互作用。為了允許 這個肽進入細胞，我們將它與蛋白轉導結構域[PTD4，圖IA (30)，(31)所評論的]串聯(lián)合成。 在體外與結合到MIP肽的FITC標記PTD4 (FITC-hPMIP)脈沖的細胞被發(fā)現(xiàn)含有熒光肽，并 且該肽隨著時間推移被保留(圖1B)。因為MUCl和聯(lián)蛋白的相互作用在轉移進展過程中增加，我們接下來檢測了在 ΒΤ20細胞系中hPMIP處理對這些相互作用的體外影響(12、32)。實施例3-PMIP抑制侵襲。當這些細胞分別代表高和低MUCl表達模型時，它們被選出(數(shù)據(jù) 未顯示)。我們發(fā)現(xiàn)當與用對照肽(PTD4)或PBS處理的細胞相比，PMIP處理顯著地抑制細 胞通過8.0μΜ濾器侵入到I型膠原基質(zhì)中的能力(圖IC和D)。為了確定是否hPMIP還 能影響增殖和/或凋亡，我們對人乳腺癌細胞系MDA-MB-231進行了 Armexin V和細胞數(shù)目 定量。當細胞在塑料上生長時，hPMIP處理被發(fā)現(xiàn)對凋亡或細胞生長沒有可檢測到的影響 (數(shù)據(jù)未顯示)。實施例4-PMIP在異體移植物乳腺癌模型中抑制腫瘤生長并抑制復發(fā)。由于hPMIP在體外 強烈地抑制細胞侵入，我們接下來評價了 hPMIP在體內(nèi)抑制腫瘤復發(fā)和轉移的能力。我 們檢測了是否hPMIP能改變被植入到嚴重的組合免疫缺陷(scid)小鼠乳腺脂肪墊中的 MDA-MB-231乳腺癌細胞的轉移潛力。我們發(fā)現(xiàn)用hPMIP處理在對原發(fā)腫瘤切除后腫瘤再生 長和播散到繼發(fā)性乳腺產(chǎn)生了基本抑制(圖2B和2E)。此外，我們發(fā)現(xiàn)hPMIP處理還減慢
11了原發(fā)腫瘤的生長(圖2C)。在第一個實驗(圖2A和2B)中，細胞被允許建立大的腫瘤團塊(500mm3)，小鼠用 hPMIP或?qū)φ针?PTD4)注射(i. p. )21天(圖2A)。在處理結束時，原發(fā)乳腺腫瘤被切除， 并跟蹤動物以檢測腫瘤再生長和/或轉移到繼發(fā)乳腺的速度。盡管再生長和繼發(fā)乳腺腫瘤 被發(fā)現(xiàn)對于兩處理組數(shù)目相同，但對照處理動物的腫瘤體積平均為760mm3，而PMIP處理動 物平均只有73mm3 (圖2B)。注意，小鼠在接下來再生長的10天過程中沒有用藥物處理。我 們還注意到與對照相比，在hPMIP處理動物中腫瘤大小減少，并接下來設計將允許我們測 定是否hPMIP在這個模型中影響腫瘤生長速度的實驗。為了測定hPMIP對原發(fā)性腫瘤生長的潛在的影響，我們重復了 MDA-MB-231異種移 植實驗(藥物處理21天)，但在較小腫瘤體積(IOOmm3)時開始治療。我們允許21天藥物 處理之后腫瘤繼續(xù)生長并當它們到達800mm3的體積時進行原發(fā)性腫瘤的手術切除，這允許 我們也評價在這個實驗中腫瘤的擴散(圖2D)。用hPMIP處理導致與對照處理動物相比腫 瘤大小的顯著減少(圖2C，p = 0. 028)。這對應于hPMIP處理小鼠達到800mm3的切除大小 需要的時間長度的顯著的增加(圖2D，ρ = 0. 03)。盡管處理在切除之前大約20天結束， 但是我們發(fā)現(xiàn)hPMIP處理基本上減少了切除之后10天腫瘤再生長和擴散的量(圖2E)。這 些數(shù)據(jù)共同證明了在高度轉移性乳腺癌模型中，hPMIP處理能抑制腫瘤生長、擴散和復發(fā)。實施例5PMIP在自發(fā)性乳腺癌中抑制腫瘤生長并誘導消退。盡管異種移植模型已經(jīng)證明 了 hPMIP處理對建立的細胞系的生長和進展的影響，我們想要測定在更好地重演人乳腺癌 的小鼠模型中msPMIP如何影響腫瘤開始和進展。乳腺癌的MMTV-py V mT轉基因小鼠模型 與人乳腺癌非常相似，都活化多種信號傳導通路，包括AKT、src和shc(33、34)。研究已經(jīng) 證明產(chǎn)生的乳腺癌在病理上和分子上模擬在人類疾病中觀察到的增生、原位導管癌和腺癌 的全部進展(35、36)。為了測定是否肽能被遞送到這些動物的乳腺和腫瘤，我們注射FITC 標記的msPMIP并分析肽的保留(圖3A)。在注射后一個小時時，F(xiàn)ITC被檢測到遍及動物體 腔，包括所有的器官(數(shù)據(jù)未顯示)。四個小時之后，F(xiàn)ITC-msPMIP被發(fā)現(xiàn)選擇性地保留在 乳腺腫瘤中以及結腸和皮膚中(圖3A，數(shù)據(jù)未顯示)。為了測定msPMIP對自發(fā)性乳腺癌進展的影響，負荷有直徑> 0. 5cm的乳腺腫瘤 的MMTV-py V mT小鼠用msPMIP或PTD4對照肽處理21天。處理對腫瘤生長具有顯著的影 響，通過21天的處理，msPMIP將總腫瘤生長從 590%顯著地減緩至 194% (ρ = 0. 038 ； 圖3Β)。此外，與在對照(PTD4)處理腫瘤中的60mm3/天相比，msPMIP處理將腫瘤生長速度 顯著地減小到只有25mm7天(ρ = 0. 007 ；圖3C)。注意到用hPMIP(與msPMIP相反)對 MMTV-py V mT小鼠的處理對腫瘤生長沒有影響，這強調(diào)PMIP的氨基酸特異性。我們接下來分析出現(xiàn)在本研究中各處的腫瘤的總尺寸。這個分析顯示對照(PTD4) 組中13%的腫瘤在研究結束時生長大于500mm3，在msPMIP處理組中只有的腫瘤達到這 個尺寸(圖3D)。由于這個轉基因模型具有多瘤居中T轉基因的連續(xù)表達，該多瘤居中轉基 因在整個本研究驅(qū)動腫瘤發(fā)生，我們接下來檢測藥物處理對新腫瘤形成的影響。盡管在處 理開始時msPMIP和對照(PTD4)組具有相似數(shù)目的、尺寸100_300mm3的腫瘤，但是這個數(shù) 目在處理結束時在對照組中增加一倍，而在msPMIP組中保持相同(圖3D)。這些數(shù)據(jù)表明 msPMIP處理在這個模型中抑制腫瘤開始。為了進一步分析腫瘤開始，我們評價了在藥物處理過程中開始的腫瘤百分比(開始等于腫瘤從Omm3轉變至IOOmm3的百分比)。這個分析 顯示在msPMIP組中，研究過程中腫瘤開始顯著地減少(ρ = 0. 0045 ；圖3E)。盡管從用msPMIP對荷瘤MMTV-pyV mT小鼠的處理中觀察到腫瘤形成和生長非常 顯著的降低，但是本研究中不是所有的腫瘤對處理都有反應(圖4)。每個乳腺的分析顯示， 盡管響應于msPMIP的大多數(shù)腫瘤生長速度明顯減慢，但許多腫瘤繼續(xù)生長，表明在這個模 型中有隨機的通路活化。重要的是，用msPMIP處理的建立的腫瘤亞組(四個腫瘤)在治療 下完全消退，盡管對照處理的腫瘤沒有一個完全消退(圖4，。實施例6-msPMIP處理導致EGFR和Mucl水平降低。先前地，我們觀察到MUCl表達抑制配 體依賴的EGFR降解，而其它的人顯示SAGNGGSSLS序列促進MUCl/ β -聯(lián)蛋白相互作用(9、 11)。為了測定是否msPMIP影響EGF依賴的EGFR降解，我們產(chǎn)生了來自MMTV-pyV mT動物 的腫瘤的蛋白裂解物，在動物處死前30分鐘，給動物注射EGF和肽(標準的21天藥物處理 之后)。我們觀察到與對照處理的動物相比，在msPMIP處理的小鼠中EGFR的表達和相應的 磷酸酪氨酸顯著減少(圖5A)。注意在這個小鼠中，21天msPMIP處理之后沒有剩余的空白 腫瘤，而我們從對照處理的動物中獲得了 6個大于400mm3的腫瘤。為了測定是否msPMIP阻斷Mucl和β -聯(lián)蛋白之間的相互作用，我們通過在腫瘤 裂解物中建立Mucl蛋白表達的水平開始。有趣的是，我們發(fā)現(xiàn)msPMIP處理誘導MMTV-pyV mT模型(圖5A禾口 5B)中和MDA-MB-231異種移植物模型(圖5C禾口 5D)中Mucl蛋白表達的 喪失。雖然這種喪失的機制尚未知，但它將一定導致Mucl依賴的致癌信號傳導的喪失。參考文獻弓I用的每篇參考文獻的公開內(nèi)容被清楚地并入本文。1. 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1權利要求
治療具有鑒定的高癌癥危險的人的方法，包括將具有A B C或C B A結構的融合肽給予具有鑒定的高癌癥危險的人，借此癌癥開始的概率被減小，其中A是增強附著的大分子跨細胞膜轉運的蛋白轉導結構域；其中B是0 5個氨基酸殘基的間隔區(qū)；其中C是6 15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含PYEKVSAGNGGSSLS(SEQ IDNO1)的全部或部分，其中所述C的部分包含GGSSLS(SEQ ID NO2)，或其中所述6 15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或其中所述6 15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。
2.權利要求1所述的方法，其中所述鑒定的高危險歸咎于遺傳素因。
3.權利要求1所述的方法，其中所述鑒定的高危險歸咎于環(huán)境暴露。
4.權利要求1所述的方法，其中所述鑒定的高危險歸咎于職業(yè)暴露。
5.權利要求1所述的方法，其中所述的人具有歸咎于乳腺癌遺傳素因的高危險。
6.權利要求1所述的方法，其中所述的人具有歸咎于結腸癌遺傳素因的高危險。
7.權利要求1所述的方法，其中所述的人具有歸咎于皮膚癌遺傳素因的高危險。
8.權利要求1所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個至三個之間被保守地替換。
9.權利要求1所述的方法，其中C是6-15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含 PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ ID NO :1)的全部或部分，其中所述C的部分包含GGSSLS (SEQ ID NO: 2)。
10.權利要求1所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換，這 樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基，或 酸性氨基酸置換酸性氨基酸。
11.權利要求1所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。
12.治療切除腫瘤的人的方法，包括將具有A-B-C或C-B-A結構的融合肽和EGFR抑制劑給予切除腫瘤的人，借此所述腫瘤 復發(fā)或轉移的概率被減小，其中A是增強附著的大分子跨細胞膜轉運的蛋白轉導結構域； 其中B是0-5個氨基酸殘基的間隔區(qū)；其中C是6-15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ IDNO 1)的全 部或部分；其中C的部分包括GGSSLS (SEQ ID NO 2),或其中所述6_15個氨基酸殘基的至 少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置 換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或其中所述6-15個氨基酸殘基的一 個用A殘基替換。
13.權利要求12所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個至三個之間被保守地替換。
14.權利要求12所述的方法，其中所述EGFR抑制劑是帕尼單抗。
15.權利要求12所述的方法，其中所述EGFR抑制劑是西妥昔單抗。
16.權利要求12所述的方法，其中所述EGFR抑制劑是吉非替尼。
17.權利要求12所述的方法，其中所述EGFR抑制劑是埃羅替尼。
18.權利要求12所述的方法，其中C是6-15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含 PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ ID NO 1)的全部或部分，其中所述C的部分包含GGSSLS (SEQ ID NO: 2)。
19.權利要求12所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換， 這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基， 或酸性氨基酸置換酸性氨基酸。
20.權利要求12所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。
21.治療具有結腸癌或皮膚癌的患者的方法，包括將具有A-B-C或C-B-A結構的融合肽給予結腸癌或皮膚癌患者，借此所述癌癥的侵襲 力被減小或延緩，其中A是增強附著的大分子跨過細胞膜轉運的蛋白轉導結構域；其中B是0-5個氨基酸殘基的間隔區(qū)；其中C是6-15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ IDNO 1)的全 部或部分，并且其中C的部分包含GGSSLS (SEQ ID NO :2)，或其中所述6_15個氨基酸殘基 的至少一個被保守地替換，這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基 酸置換非極性氨基酸殘基，或酸性氨基酸置換酸性氨基酸，或其中所述6-15個氨基酸殘基 的一個用A殘基替換。
22.權利要求21所述的方法，其中所述患者患有結腸癌。
23.權利要求21所述的方法，其中所述患者患有皮膚癌。
24.權利要求21所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個至三個之間被保守地替換。
25.權利要求21所述的方法，其中C是6-15個氨基酸殘基的多肽，其中C包含 PYEKVSAGNGGSSLS (SEQ ID NO 1)的全部或部分，其中所述C的部分包含GGSSLS (SEQ ID NO: 2)。
26.權利要求21所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的至少一個被保守地替換， 這樣無電荷極性氨基酸置換無電荷極性氨基酸，或非極性氨基酸置換非極性氨基酸殘基， 或酸性氨基酸置換酸性氨基酸。
27.權利要求21所述的方法，其中所述6-15個氨基酸殘基的一個用A殘基替換。全文摘要
MUCl(DF3、CD227、上皮唾液蛋白、PEM)是＞300kDa的重度O-糖基化的異二聚體蛋白質(zhì)，通常大量表達于腺上皮的頂端表面。全身給藥后，MUCl模擬肽選擇性地保留在乳腺腫瘤、結腸和皮膚中。而且，MUCl模擬肽減少腫瘤的開始。此外，MUCl模擬肽能與其它抗-EGFR治療結合用于輔助的情況中，即手術后。
文檔編號A61K39/395GK101977623SQ200980109625
公開日2011年2月16日 申請日期2009年2月19日 優(yōu)先權日2008年2月20日
發(fā)明者J·A·施羅德 申請人:亞利桑那生物醫(yī)學研究委員會