專利名稱：用于抑制g2細(xì)胞周期停滯和使細(xì)胞對dna損傷劑敏感的cbp501衍生制劑及基于其的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及肽化合物及其用途。更具體而言，本發(fā)明涉及具有抗腫瘤活性的肽化 合物及其用途，和使用該化合物的聯(lián)合治療。
背景技術(shù)：
在癌細(xì)胞中，Gl檢查點(diǎn)的喪失致使細(xì)胞更依賴于G2檢查點(diǎn)以修復(fù)受損DNA。因?yàn)?正常細(xì)胞主要在Gl檢查點(diǎn)時(shí)修復(fù)DNA，所以預(yù)期G2檢查點(diǎn)的破壞將對具有受損Gl檢查點(diǎn) 的腫瘤細(xì)胞比具有完整Gl檢查點(diǎn)的正常細(xì)胞具有更大影響(非專利文獻(xiàn)10、19和20)。CBP501是新型細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)取消物。它是穩(wěn)定的合成十二肽，其抑制涉及 G2停滯的幾種激酶的活性(圖1)。CBP501抑制Cdc25C的磷酸化，從而抑制14_3_3與這個(gè) 位點(diǎn)的結(jié)合。Cdc25C的磷酸化和/或14-3-3的結(jié)合阻止Cdc25C激活⑶C2/細(xì)胞周期蛋白 B,關(guān)于G2至M期過渡的主開關(guān)(非專利文獻(xiàn)21-23)。DNA損傷劑例如順鉬、博來霉素和喜樹堿已廣泛用于治療癌癥患者，并且用這 些試劑的治療觸發(fā)針對DNA損傷的細(xì)胞應(yīng)答，包括細(xì)胞周期停滯、DNA修復(fù)和細(xì)胞凋亡。 DNA損傷應(yīng)答途徑通過受損DNA經(jīng)由下述的直接或間接識(shí)別誘導(dǎo)傳感蛋白質(zhì)例如MRN、 MREll-RAD50-NBS1 (非專利文獻(xiàn) 1)和 9_1_1、RAD9-RAD1-HUSl (非專利文獻(xiàn) 2)，傳感蛋 白質(zhì)復(fù)合物以及5!3BP1 (非專利文獻(xiàn)3)、MDCl (非專利文獻(xiàn)4)、SMCl (非專利文獻(xiàn)5)和 TopBPl (非專利文獻(xiàn)6)。傳感蛋白質(zhì)召募至DNA雙鏈斷裂依賴于組蛋白H2AX即γ-H2AX 的磷酸化(非專利文獻(xiàn)7)。這些傳感蛋白質(zhì)可以充當(dāng)關(guān)于DNA修復(fù)的標(biāo)記，并且可以經(jīng)由 共焦免疫熒光顯微鏡檢查顯現(xiàn)為損傷誘導(dǎo)的病灶。傳感蛋白質(zhì)隨后誘導(dǎo)激活A(yù)TM和ATR的 途徑，這激活CHKl和CHK2，導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯(非專利文獻(xiàn)8)。MAPKAP-K2還可以通過特 定條件中的DNA損傷激活，包括響應(yīng)由順鉬和UV照射引起的損傷(非專利文獻(xiàn)9)。這些 下游激酶CHKl、CHK2或MAPKAP-K2使CDC2k中的幾個(gè)殘基磷酸化，包括CDC25C的絲氨酸 216，并且引起許多癌細(xì)胞中的G2期細(xì)胞周期停滯，因?yàn)榇蠖鄶?shù)癌細(xì)胞不具有完整的Gl檢 查點(diǎn)(非專利文獻(xiàn)10)。⑶C25C的磷酸化阻止其激活⑶C2/細(xì)胞周期蛋白B，從G2到M期 過渡的主調(diào)節(jié)物(非專利文獻(xiàn)11)。CBP501是由基于細(xì)胞周期表型的TAT-S216A最佳化鑒定的合成肽(非專利文獻(xiàn) 12)。TAT-S216A是G2檢查點(diǎn)取消融合肽，其包含圍繞⑶C25C的絲氨酸216的序列，充當(dāng) 使絲氨酸216磷酸化的激酶的底物模擬抑制劑，和充當(dāng)用于跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)的載體的HIV-TAT序 列(非專利文獻(xiàn)13)。最佳化鑒定減少博來霉素處理的Jurkat細(xì)胞中的G2期群體的肽， 而無對正常細(xì)胞和用秋水仙堿處理細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)展或細(xì)胞周期破壞的任何影響。發(fā)現(xiàn) CBP501抑制使CDC25C的絲氨酸216磷酸化多種激酶，例如MAPKAP-K2、CHKU C-TAK1,以及 抑制程度較少的CHK2，并且隨后減少在CDC25C上的絲氨酸216磷酸化(非專利文獻(xiàn)14)，與 其觀察到的作為細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)取消物的功能一致。CBP501目前處于臨床研究中(非 專利文獻(xiàn)15)。
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發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人已進(jìn)行了 G2檢查點(diǎn)取消物的深入研究，并且發(fā)現(xiàn)具有由下述序列所 示結(jié)構(gòu)的肽化合物(CBP501)和DNA損傷劑的組合使用提供更有效的抗癌治療(d-Bpa) (d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQID NO :1)，引起更少的副作用。此處，本發(fā)明人顯示CBP501通過增加DNA損傷在增強(qiáng)博來霉素和/或含鉬藥 物(例如，順鉬)的細(xì)胞毒性中的另外活性，通過增強(qiáng)的含ATM、NBSU DNA-PKcs, SMCl和 Y "H2AX病灶形成以及增加的檢查點(diǎn)信號(hào)證實(shí)。因此，本發(fā)明提供了下述。[ 1 ]通過下述序列表示的肽化合物的乙酸鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[2]用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括上述[1]的肽化合物的乙酸鹽 作為活性成分。[3]上述[2]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺癌、前列腺 癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、子宮體 癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺癌、甲狀旁腺 癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌下癌、骨瘤、血 管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的卡波濟(jì) 氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白血病。[4]上述[2]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi)膜癌、腹 膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[5]產(chǎn)生由SEQ ID NO :1所示肽化合物的乙酸鹽的方法，其包括使用含乙酸鹽溶 劑執(zhí)行液相層析的步驟。[6]用于預(yù)防或治療選自子宮內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤和心包間皮瘤的至少一種疾 病的試劑，其包括由下述序列表示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活 性成分(d-Bpa)(d-Ser) (d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2,3,4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[7]藥物組合物，其包括由下述序列表示的肽化合物的乙酸鹽和核酸損傷劑 (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg) (d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQID NO :1)。[8]上述[7]的藥物組合物，其用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥。[9]上述[8]的藥物組合物，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺癌、 前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、十二 指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、 子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺癌、甲 狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌下癌、骨 瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的 卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白 血病。[10]上述[8]的藥物組合物，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi) 膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[11]上述[7]_[10]中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中核酸損傷劑是選自博來霉素和 含鉬藥物的至少一種。[12]上述[7]_[10]中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中核酸損傷劑是選自博來霉素、順 鉬、卡鉬和奧沙利鉬的至少一種。[13]上述[7]_[10]中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中核酸損傷劑是順鉬。[14]上述[10]-[13]中任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步包括培美曲塞。[15]上述[14]的藥物組合物，其用于治療腹膜間皮瘤。[16]上述[10]-[13]中任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步包括吉西他濱。[17]上述[16]的藥物組合物，其用于治療胰腺癌。[18]用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括由下述序列顯示的肽化合 物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3, 4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ IDNO :1)，所述試劑與核酸損傷劑同時(shí)或在核酸損傷劑之前施用。[19]上述[18]的試劑，其中藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。[20]上述[18]或[19]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。[21]上述[18]或[19]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮 內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[22]上述[18]_[21]中任一項(xiàng)的試劑，其中核酸損傷劑是選自博來霉素和含鉬藥 物的至少一種。[23]上述[18]_[21]中任一項(xiàng)的試劑，其中核酸損傷劑是選自博來霉素、順鉬、卡 鉬和奧沙利鉬的至少一種。[24]上述[18]-[21]中任一項(xiàng)的試劑，其中核酸損傷劑是順鉬。[25]上述[22]_[24]中任一項(xiàng)的試劑，其與培美曲塞組合使用。[26]上述[25]的試劑，其用于治療腹膜間皮瘤。[27]上述[22]-[24]中任一項(xiàng)的試劑，其與吉西他濱組合使用。[28]上述[27]的試劑，其用于治療胰腺癌。[29]用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括由下述序列顯示的肽化合 物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3,4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)，所述試劑在核酸損傷劑施用之后施用。[30]上述[29]的試劑，其中藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。[31]上述[29]或[30]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。[32]上述[29]或[30]的試劑，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮 內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[33]上述[29]-[32]中任一項(xiàng)的試劑，其中核酸損傷劑是卡鉬或奧沙利鉬。[34]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括與核酸損傷劑 同時(shí)或在核酸損傷劑之前給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[35]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括在核酸損傷劑 之前給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可 接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2, 3,4, 5,6-F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[36]上述[34]或[35]的方法，其中藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。[37]上述[34]_[36]中任一項(xiàng)的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一 種乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食 管癌、十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜 癌、宮頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、 甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、 下頌下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起 因于AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā) 性骨髓瘤和白血病。[38]上述[34]_[36]中任一項(xiàng)的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一 種子宮內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[39]上述[34]_[38]中任一項(xiàng)的方法，其中核酸損傷劑是選自博來霉素和含鉬藥 物的至少一種。[40]上述[34]-[38]中任一項(xiàng)的方法，其中核酸損傷劑是選自博來霉素、順鉬、卡 鉬和奧沙利鉬的至少一種。[41]上述[34]-[38]中任一項(xiàng)的方法，其中核酸損傷劑是順鉬。[42]上述[39]_[41]中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括施用培美曲塞。[43]上述W2]的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是腹膜間皮瘤。[44]上述[39]_[41]中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括施用吉西他濱。[45]上述W4]的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是胰腺癌。[46]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括執(zhí)行下述步驟 a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)，每周一次，共3周；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其 藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。[47]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括執(zhí)行下述步驟 a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)，每天一次，共連續(xù)5天；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其 藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。[48]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括每3周執(zhí)行下述步驟a)-步驟c)作為一個(gè)循環(huán)；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其 藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的培美曲塞的步驟，和c)在步驟b)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。[49]用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括在核酸損傷劑施 用后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可 接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2, 3,4, 5,6-F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[50]上述W9]的方法，其中藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。[51]上述W9]或[50]的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。[52]上述W9]或[50]的方法，其中細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮 內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。[53]上述W9]-[52]中任一項(xiàng)的方法，其中核酸損傷劑是卡鉬或奧沙利鉬。[54]用于加強(qiáng)含鉬制劑的細(xì)胞增殖抑制作用的試劑，其包括由下述序列顯示 的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3,4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg) (SEQ ID NO 1)ο[55]上述[54]的試劑，其中含鉬藥物是順鉬、卡鉬或奧沙利鉬。[56]上述[54]的試劑，其中含鉬藥物是順鉬。[57]上述[54]-[56]中任一項(xiàng)的試劑，其包括在組合中使用培美曲塞。[58]上述[54]-[56]中任一項(xiàng)的試劑，其包括在組合中使用吉西他濱。[59]用于加強(qiáng)含鉬制劑的細(xì)胞增殖抑制作用的方法，其包括給哺乳動(dòng)物施用 治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。[60]上述[59]的方法，其中含鉬藥物是順鉬、卡鉬或奧沙利鉬。[61]上述[59]的方法，其中含鉬藥物是順鉬。[62]上述[59]_[61]中任一項(xiàng)的方法，其包括在組合中使用培美曲塞。[63]上述[59]_[61]中任一項(xiàng)的方法，其包括在組合中使用吉西他濱。


圖1顯示細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)相關(guān)信號(hào)級(jí)聯(lián)的圖解。圖2顯示用不同治療方案的多中心劑量按比例上升研究的給藥方案的圖解。圖3顯示2個(gè)患者中的腫瘤標(biāo)記CA-125的評估。在組合研究中以24. ^ig/ m2CBP501/75mg/m2順鉬治療的具有子宮內(nèi)膜癌的患者中，CA-125從基線時(shí)的1117U/mL減 少到循環(huán)9時(shí)的最低值350U/mL ；這個(gè)患者還經(jīng)歷根據(jù)RECIST標(biāo)準(zhǔn)證實(shí)的部分應(yīng)答。在具 有卵巢腺癌(36. 4mg/m2CBP501/75mg/m2順鉬)的患者中，CA-125在基線時(shí)是75U/mL，并且 在循環(huán)4時(shí)達(dá)到最低值31U/mL ；發(fā)現(xiàn)腫瘤標(biāo)記水平從循環(huán)5向前增加。這個(gè)患者經(jīng)歷根據(jù) RECIST標(biāo)準(zhǔn)的SD (穩(wěn)定疾病)的最佳腫瘤應(yīng)答。RECIST 實(shí)體瘤中的應(yīng)答評估標(biāo)準(zhǔn)。圖4顯示了特征性CBP501濃度時(shí)間譜。小菱形=治療第1天矩形=治療第15天圖5顯示了平均CBP501AUC。_inf。條是標(biāo)準(zhǔn)差，線是線性插值。圖6顯示了平均CBP501Cma。條是標(biāo)準(zhǔn)差，線是線性插值。圖7顯示了在CBP501的存在或不存在下響應(yīng)用順鉬處理在G2/M期中細(xì)胞的劑量 依賴性增加。Y軸如通過FACS分析測定的在4N DNA含量時(shí)的細(xì)胞％，X軸以μ g/ml表 示的順鉬劑量。圖7a.細(xì)胞在第1天時(shí)用所示劑量的CBP501處理3小時(shí)，并且在第2天時(shí) 用所示劑量的順鉬處理3小時(shí)，并且隨后在第4天時(shí)通過FACS分析。圖7b.細(xì)胞在第1天 時(shí)用所示劑量的順鉬和CBP501處理3小時(shí)，并且隨后在第3天時(shí)通過FACS分析。圖8顯示了在細(xì)胞中和在DNA上的鉬定量分析。圖8a.用順鉬和CBP501處理的 細(xì)胞中的鉬濃度。NCI-H2^細(xì)胞在CBP501的存在或不存在下用順鉬以所示劑量處理3小 時(shí)，并且在處理后(左圖)立即收獲或在不含順鉬和CBP501培養(yǎng)另外48小時(shí)后(右圖)收 獲。X軸順鉬量，Y軸以ng/ΙΟ5細(xì)胞表示的鉬濃度/細(xì)胞。圖8b.在MIAPaCa2、HTj9和 HUVEC細(xì)胞中在提取的基因組DNA上的鉬量。ΜΙΑ ^0&2、Η ^9和HUVEC細(xì)胞用10 μ M CBP501 和3 μ g/ml順鉬處理3小時(shí)。通過ICP-MS測定基因組DNA的鉬數(shù)量。圖9顯示在CBP501的存在或不存在下用博來霉素處理3小時(shí)的細(xì)胞中通過共焦 免疫熒光顯微鏡檢查測定的病灶形成。圖9a.在CBP501的存在或不存在下用(BLM)或不 用(NT)博來霉素處理的NCI-H2^5細(xì)胞。綠色熒光(高亮度區(qū))指示特異性抗體染色，并 且核用Hoechst 33342復(fù)染(藍(lán)色熒光；低亮度區(qū))。圖9b.在CBP501的存在或不存在下 用博來霉素處理的NCI-H2^細(xì)胞中的病灶數(shù)目。圖10顯示了在用DNA損傷劑和CBP501處理的NCI-H2^細(xì)胞中的DNA損傷傳感器 和G2檢查點(diǎn)相關(guān)蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)印跡分析。1-!12沈細(xì)胞用2 48/1111博來霉素(圖IOa) 或10 μ g/ml順鉬(圖IOb)連同或不連同2 μ M CBP501處理，并且在所示時(shí)間點(diǎn)時(shí)收獲。膜 用所示抗體探測。圖11顯示NCI-H226和MST0-21IH細(xì)胞的WST分析。細(xì)胞用所示量的順鉬和CBP501 處理，并且培養(yǎng)72小時(shí)。實(shí)驗(yàn)一式三份地執(zhí)行。誤差條結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差。圖12顯示NCI-H226的皮下異種移植腫瘤模型中的順鉬和CBP501的體內(nèi)活性。 CBP501 (7. 5mg/kg)在第1天時(shí)2次和第2天時(shí)1次靜脈內(nèi)彈丸注射至所示組。順鉬在第2 天時(shí)1次腹膜內(nèi)注射至所示組。
具體實(shí)施例方式在本發(fā)明中，使用具有下述結(jié)構(gòu)的肽化合物(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1, CBP501)。CBP501抑制細(xì)胞增殖。CBP501因此用于治療細(xì)胞增殖病癥或特征在于不希望或 不需要的細(xì)胞增殖的生理學(xué)病狀，例如良性和惡性腫瘤細(xì)胞。CBP501抑制細(xì)胞增殖的能力 看起來至少部分是由于細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)的取消。因?yàn)榧?xì)胞可以響應(yīng)核酸損傷而誘導(dǎo)進(jìn) 入細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)，以允許細(xì)胞在DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂發(fā)生前修復(fù)損傷，通過抑制G2檢 查點(diǎn)，CBP501使細(xì)胞對核酸損傷劑和處理方案致敏。積累足夠核酸損傷的細(xì)胞將無法完成 損傷核酸的修復(fù)，因?yàn)镚2檢查點(diǎn)被破壞。此類細(xì)胞將顯示減少的增殖(例如，由于未修復(fù) 的對于存活關(guān)鍵的基因突變)且最終經(jīng)歷細(xì)胞凋亡。具有正常Gl的細(xì)胞對積累的損傷核酸更不敏感，因?yàn)楹怂嵝迯?fù)也可以在Gl過程 中發(fā)生。因此，正常細(xì)胞對CBP501的效應(yīng)更不敏感。然而，具有損害或破壞的細(xì)胞周期Gl 檢查點(diǎn)的細(xì)胞更可能積累損傷核酸，因?yàn)镚l檢查點(diǎn)被損害或破壞，使得細(xì)胞可以完全修復(fù) 損傷核酸更不可能。因此，用破壞G2檢查點(diǎn)的CBP501處理Gl損害或破壞的細(xì)胞使得細(xì)胞 更加不可能能夠完全修復(fù)損傷核酸。Gl損害或破壞的細(xì)胞因此對CBP501特別敏感。因此， CBP501可以用于抑制或阻止一般而言的細(xì)胞增殖且特別抑制具有損害或破壞的Gl檢查點(diǎn) 的細(xì)胞增殖。具有損害或破壞的Gl細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的細(xì)胞包括但不限于快速增殖的細(xì)胞。細(xì) 胞增殖病癥和生理學(xué)病狀通常具有損害或破壞的Gl細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，所述生理學(xué)病狀特 征在于快速生長的細(xì)胞、不希望生長的細(xì)胞或存活而不是經(jīng)歷細(xì)胞凋亡的細(xì)胞。因此，因?yàn)?看起來CBP501抑制增殖或刺激細(xì)胞凋亡的能力至少部分是由于破壞G2細(xì)胞周期檢查點(diǎn)， 所以由于損害或破壞的Gl細(xì)胞周期檢查點(diǎn)而快速或不希望增殖的細(xì)胞是特別有吸引力的 靶。CBP501還可以單獨(dú)抑制細(xì)胞增殖無需損傷核酸或具有抗增殖活性的另外處理，因 為破壞G2檢查點(diǎn)將可能導(dǎo)致在細(xì)胞分裂時(shí)的核酸損傷積累。因此，異常或不希望的增殖或 存活細(xì)胞可以用CBP501單獨(dú)處理，或與核酸損傷處理(例如，化學(xué)試劑或處理方案)組合 處理，以抑制或阻止細(xì)胞增殖或刺激細(xì)胞凋亡/災(zāi)變。優(yōu)選地，用CBP501處理與核酸損傷處理同時(shí)或在核酸損傷處理之前執(zhí)行。更優(yōu)選 地，用CBP501處理在核酸損傷處理之前執(zhí)行。與靶向快速增殖細(xì)胞的常規(guī)抗細(xì)胞增殖試劑不同，不管細(xì)胞是正常還是異常的 (例如，癌細(xì)胞)，CBP501優(yōu)先靶向具有損害或破壞的細(xì)胞周期Gl檢查點(diǎn)的細(xì)胞。CBP501 更不可能產(chǎn)生與常規(guī)抗細(xì)胞增殖處理相關(guān)的過量不希望的副作用，例如骨髓抑制、惡心、食 欲缺乏、腹瀉和脫發(fā)。此外，因?yàn)榻^大多數(shù)癌細(xì)胞具有損害或破壞的細(xì)胞周期Gl檢查點(diǎn)，所 以癌細(xì)胞將顯示對于取消細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)的CBP501增加的敏感性。正常細(xì)胞更不敏感 也意味著CBP501可以以更大量使用。在本發(fā)明中，使用具有抗細(xì)胞增殖活性和/或取消G2細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的CBP501。 CBP501包括抑制細(xì)胞增殖或刺激細(xì)胞凋亡的序列。CBP501還包括取消細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)的序列。在本發(fā)明中，CBP501的新活性增加由核酸損傷處理(例如，化學(xué)試劑(博來霉素例 如博來霉素、含鉬藥物例如順鉬等)或處理方案)引起的細(xì)胞毒性。CBP501增強(qiáng)博來霉素 處理的細(xì)胞中損傷誘導(dǎo)的病灶形成和DNA損傷檢查點(diǎn)信號(hào)。CBP501增加在G2中的細(xì)胞數(shù) 目，以及在順鉬處理的細(xì)胞中的鉬濃度、鉬-DNA加合物和檢查點(diǎn)信號(hào)。這種現(xiàn)象在各種癌 細(xì)胞系中觀察到，包括所有4種測試的惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系和MIAPaCa2、胰腺癌細(xì)胞系， 而不是人臍靜脈內(nèi)皮(HUVEC)細(xì)胞。CBP501增強(qiáng)核酸損傷處理的體外細(xì)胞毒性和體內(nèi)抗腫瘤活性。如同CBP501，還優(yōu)選使用其各種衍生物和類似物。衍生物的例子是美國專利號(hào) 6995135中所述的那些。如下所述，如同CBP501，還優(yōu)選使用其藥物前體和藥學(xué)上可接受的 鹽。除非另有說明，簡單提及CBP501包括此類化合物系列的整體。如所討論的，CBP501單獨(dú)具有抗細(xì)胞增殖活性或G2取消活性?？辜?xì)胞增殖活性 可以通過使CBP501與直接或間接引起核酸損傷的處理組合得到增加?？辜?xì)胞增殖活性還 可以通過使CBP501與抑制細(xì)胞增殖的處理組合得到增加，無論所述處理是否損傷核酸。本 發(fā)明因此進(jìn)一步提供了包括CBP501和核酸損傷劑的組合物，和包括CBP501和抗增殖試劑 的組合物。如本文使用的，術(shù)語“取消細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)”、“破壞細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)”、“損害 細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)”及其語法變化意指抑制細(xì)胞，以使細(xì)胞周期在G2檢查點(diǎn)時(shí)停滯。其中 細(xì)胞周期G2檢查點(diǎn)取消的細(xì)胞顯示細(xì)胞處于G2檢查點(diǎn)的時(shí)間長度方面的減少，這可以從 G2檢查點(diǎn)完全不存在到在合適條件下具有持續(xù)時(shí)間方面數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)、數(shù)天、數(shù)周或更長 時(shí)間的減少的G2檢查點(diǎn)。因此，與CBP501接觸的細(xì)胞具有在長度方面比在不存在化合物 的情況下細(xì)胞通常將具有的更短的G2檢查點(diǎn)時(shí)間。例如，G2檢查點(diǎn)時(shí)間長度中的減少將 意指處于G2中特定時(shí)間例如4小時(shí)的細(xì)胞，當(dāng)與CBP501接觸時(shí)，處于G2中小于4小時(shí)，例 如3. 5、3、2. 5、2、1或更少小時(shí)。如本文使用的，術(shù)語“細(xì)胞凋亡”指程序性細(xì)胞死亡和細(xì)胞生理學(xué)中的相關(guān)改變， 例如核酸斷裂、半胱天冬酶激活等，如本領(lǐng)域理解的。術(shù)語“災(zāi)變”意指起因于有絲分裂過程 中的誤差的細(xì)胞死亡。在災(zāi)變中，存在細(xì)胞凋亡特征性的更少特征，例如半胱天冬酶激活、 染色體濃縮等。如本文使用的，術(shù)語“肽”、“多肽”和“蛋白質(zhì)”可互換使用，并且指通過酰胺鍵或 非酰胺等價(jià)物共價(jià)連接的2個(gè)或更多個(gè)氨基酸。肽可以包括一般與蛋白質(zhì)的翻譯后加工相 關(guān)的修飾，例如環(huán)化(例如，二硫化物或酰胺鍵)、磷酸化、糖基化、羧化、遍在蛋白化、十四 烷基化或脂質(zhì)化。如上所述，CBP501具有加強(qiáng)由核酸損傷處理(例如，化學(xué)試劑(博來霉素例如博 來霉素、含鉬藥物例如順鉬等)或處理方案)引起的細(xì)胞毒性的效應(yīng)。博來霉素處理的細(xì) 胞顯示對通過DNA損傷誘導(dǎo)的DNA損傷檢查點(diǎn)信號(hào)或病灶形成的加強(qiáng)作用，并且順鉬處理 的細(xì)胞顯示增加G2期細(xì)胞數(shù)目的效應(yīng)，增加細(xì)胞中的鉬濃度和鉬-DNA加合物，并且增強(qiáng)檢 查點(diǎn)信號(hào)。增加的檢查點(diǎn)信號(hào)可以通過檢查檢查點(diǎn)信號(hào)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平中的變異加以證 實(shí)。檢查點(diǎn)信號(hào)蛋白質(zhì)的具體例子包括ATM、H2AX、MAPKAPK2、CHK2、CHK1、Cdc25C等，以及 其磷酸化產(chǎn)物(ATMp4erl981、γ -Η2Α, MAPKAPK2p_Thr222、CHK2-p_Thr68、CHKlp-Ser317和 Cdc-25p-Ser21β 等)。CBP501可以使用本領(lǐng)域已知的任何方法產(chǎn)生且分離。CBP501可以使用本領(lǐng) 域已知的化學(xué)方法全部或部分合成(參見例如，Caruthers(1980)Nucleic Acids Res. Symp. Ser. 215—223 ；Horn(1980)Nucleic Acids Res. Symp. Ser. 225—232 ；禾口 Banga， A. K. , Therapeutic Peptides and Proteins, Formulation, Processing and Delivery Systems (1995) Technomic PublishingCo.，Lancaster，Pa.)。肽合成可以使用各種固 相技術(shù)執(zhí)行(參見例如 Roberge (1995) Science 269 :202 ；Merrif ield (1997) Methods Enzymol. 289 :3-13)，并且例如使用 ABI 431A Peptide Synthesizer (Perkin Elmer)依照 制造商的說明書可以達(dá)到自動(dòng)化合成。CBP501還可以作為融合蛋白合成且表達(dá)，所述融合蛋白具有與之連接的一個(gè)或多 個(gè)另外結(jié)構(gòu)域，用于產(chǎn)生更免疫原性的肽，以更快速分離重組合成的肽，或鑒定且分離抗體 或抗體表達(dá)B細(xì)胞。促進(jìn)檢測和純化的結(jié)構(gòu)域包括例如允許在固定金屬上純化的金屬螯合 肽，例如多組氨酸束和組氨酸-色氨酸模塊；允許在固定免疫球蛋白上純化的蛋白質(zhì)A結(jié) 構(gòu)域；和在FLAGS延伸/親和力純化系統(tǒng)(Immunex Corp, Seattle Wash.)中利用的結(jié)構(gòu) 域。在純化結(jié)構(gòu)域和肽之間包括可切割接頭序列例如因子)(a或腸激酶(Invitrogen，San Diego Calif.)可以用于促進(jìn)肽純化。例如，表達(dá)載體可以包括與6個(gè)組氨酸殘基連接的 CBP501編碼核酸序列，隨后為硫氧還蛋白和腸激酶切割位點(diǎn)(參見例如，Williams (1995) Biochemistry34 :1787-1797 ；Dobeli (1998)Protein Expr. Purif. 12 :404-14)。組氨酸殘 基促進(jìn)融合蛋白的檢測和純化，同時(shí)腸激酶切割位點(diǎn)提供了用于從融合蛋白的其余部分中 純化肽的方法。關(guān)于編碼融合蛋白的載體的技術(shù)和融合蛋白的應(yīng)用是本領(lǐng)域已知的(參見 例如，Kroll (1993)DNA Cell. Biol.，12 :441-53)。如本文使用的，術(shù)語“核酸損傷處理”和“核酸損傷劑”意指直接或間接損傷核酸 (例如，DNA、cDNA、基因組DNA、mRNA、tRNA或rRNA)的任何處理方案。此類試劑的具體例子 包括烷化劑、亞硝基脲、抗代謝藥、植物生物堿、植物提取物和放射性同位素。試劑的具體例 子還包括核酸損傷藥物，例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他濱、S-I (替加氟、5-氯-2，4-二 羥基吡啶和氧尼酸)、5_乙炔尿嘧啶、阿糖胞苷(ara-C)、5-氮胞苷(5-AC)、2' ,2' -二 氟-2 ‘-脫氧胞苷(dFdC)、嘌呤抗代謝藥(巰嘌呤、硫唑嘌呤、硫鳥嘌呤)、鹽酸吉西他濱 (健擇)、噴司他丁、別嘌呤醇、2-氟-阿糖腺苷OF-ara-A)、羥基脲、硫芥子(雙氯乙硫醚)、 氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、噻替派、AZQ、絲裂霉素C、衛(wèi)康醇、二溴衛(wèi) 矛醇、烷基磺酸鹽(白消安)、亞硝基脲(BCNU、CCNU、4-甲基CCNU或ACNU)、丙卡巴胼、氮烯 咪胺、蝴蝶霉素、蒽環(huán)例如多柔比星(阿霉素；ADR)、道諾霉素(柔紅霉素)、伊達(dá)比星(依 達(dá)比星)和表柔比星(Ellence)、蒽環(huán)類似物例如米托蒽醌、放線菌素D、非插入拓?fù)洚悩?gòu)酶 抑制劑例如表鬼臼毒素(依托泊苷=VP16、替尼泊苷=VMj6)、鬼臼毒素、博來霉素(Bleo、 BLM)、培洛霉素、與核酸形成加合物的化合物包括鉬衍生物(例如，順鉬(CDDP)、順鉬的反 式類似物、卡鉬、異丙鉬、四鉬、沙鉬和奧沙利鉬)、喜樹堿、托泊替康、伊立替康(CPT-Il)和 SN-38。核酸損傷處理的具體例子包括輻射(例如，紫外線(UV)，紅外線(IR)，或α、β或 Y射線)和環(huán)境休克(例如，過高熱)。作為與CBP501處理組合使用的“核酸損傷處理”或“核酸損傷劑”，“用鉬衍生物的 處理”或“鉬衍生物”是優(yōu)選的，并且“用順鉬處理”或“順鉬”是更優(yōu)選的。盡管根據(jù)所需作用點(diǎn)適當(dāng)選擇待與CBP501處理組合使用的“核酸損傷處理”或“核酸損傷劑”，但還優(yōu)選 使用除上述“用順鉬處理”或“順鉬”外的“用博來霉素處理”或“博來霉素”。如本文使用的，術(shù)語“抗增殖處理”和“抗增殖劑”意指直接或間接抑制細(xì)胞、病毒、 細(xì)菌或其他單細(xì)胞或多細(xì)胞生物增殖的任何處理方案，與處理或試劑是否損傷核酸無關(guān)。 抗增殖劑的特定例子是抗腫瘤和抗病毒藥物，其抑制細(xì)胞增殖或病毒增殖或復(fù)制。具體例 子尤其包括環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤、環(huán)孢素A、潑尼松龍、美法侖、苯丁酸氮芥、氮芥、白消安、氨 甲蝶呤、培美曲塞、培美曲塞-鈉(力比泰)、巰嘌呤、硫鳥嘌呤、阿糖胞苷、泰素、長春 堿、長春新堿、多柔比星、博來霉素、放線菌素D、光輝霉素、卡莫司汀、羅莫司汀、司莫司汀、 鏈脲霉素、羥基脲、順鉬、米托坦、丙卡巴胼、達(dá)卡巴嗪和二溴甘露醇。還例示了引起核酸復(fù) 制誤差或抑制核酸復(fù)制例如核苷和核苷酸類似物(例如AZT或5-AZC)的任何增殖試劑。作為待與CBP501處理組合使用的“抗增殖處理”或“抗增殖試劑”，“用順鉬處理” 或“順鉬”是更優(yōu)選的。盡管根據(jù)所需作用點(diǎn)適當(dāng)選擇待與CBP501處理組合使用的“抗增殖處理”或“抗 增殖試劑”，但還優(yōu)選使用除上述“用順鉬處理”或“順鉬”外的“用博來霉素處理”或“博來
毒素”。復(fù)數(shù)種類的“核酸損傷處理”或“核酸損傷劑”可以與CBP501處理組合使用。類 似地，復(fù)數(shù)種類的“抗增殖處理”或“抗增殖試劑”可以與CBP501處理組合使用。此外，(i) CBP501處理、(ii) “核酸損傷處理”或“核酸損傷劑”、和(iii) “抗增殖處理”或“抗增殖 試劑”可以組合使用。例如，可以采用CBP501、順鉬和吉西他濱的組合使用或組合試劑， CBP501、順鉬和培美曲塞的組合使用或組合試劑等。CBP501還可以增加微管穩(wěn)定劑或去穩(wěn)定劑的抗細(xì)胞增殖活性，所述微管穩(wěn)定劑或 去穩(wěn)定劑例如長春花生物堿(長春堿=VLB、長春新堿=VCR、長春瑞濱=VRLB、長春氟寧= VFL)、和紫杉烷(紫杉醇和多西他賽=泰素帝)。因此，此類試劑可以進(jìn)一步包括在本發(fā)明 的組合物中且用于本發(fā)明的方法中?？梢杂肅BP501處理的細(xì)胞包括希望在體外、先體外后體內(nèi)或在體內(nèi)抑制或阻止 其增殖的任何細(xì)胞。特定靶細(xì)胞顯示短于正常的細(xì)胞周期Gl檢查點(diǎn)時(shí)間或具有損害的細(xì) 胞周期Gl檢查點(diǎn)，從而使得細(xì)胞在經(jīng)過足夠時(shí)間以完成核酸修復(fù)前離開Gl檢查點(diǎn)。候選 細(xì)胞因此包括快速增殖的細(xì)胞，無論細(xì)胞是正常還是異常的。具體例子是良性或腫瘤的、轉(zhuǎn) 移或非轉(zhuǎn)移性細(xì)胞。另外候選細(xì)胞可以通過測量其增殖速率或細(xì)胞保留在Gl期中的時(shí)間 長度進(jìn)行鑒定。候選細(xì)胞還可以通過使測試細(xì)胞和單獨(dú)或與核酸損傷處理組合的CBP501 接觸，并且測定接觸細(xì)胞是否顯示減少的增殖或增加的細(xì)胞死亡或細(xì)胞凋亡/災(zāi)變。CBP501因此用于在體外、先體外后體內(nèi)和在體內(nèi)抑制細(xì)胞增殖。像這樣，可以用單 獨(dú)或與直接或間接引起核酸損傷的處理或抗增殖處理組合的CBP501治療具有病癥或生理 條件或處于具有病癥或生理?xiàng)l件危險(xiǎn)中的受試者，所述病癥或生理?xiàng)l件的特征在于異?；?不希望或不需要的細(xì)胞增殖或細(xì)胞存活，或異常或缺陷細(xì)胞分化。因此，依照本發(fā)明，提供了用于抑制細(xì)胞增殖的方法，用于增加細(xì)胞對于核酸損傷 劑或處理的敏感性的方法，和用于在體外、先體外后體內(nèi)和在體內(nèi)增加對于細(xì)胞的核酸損 傷的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括使細(xì)胞(例如，培養(yǎng)細(xì)胞或受試者中存在的細(xì)胞) 與足以抑制細(xì)胞增殖的CBP501量接觸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括使細(xì)胞與足以增加細(xì)胞對于核酸損傷劑或處理的敏感性的CBP501量接觸。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括 使細(xì)胞與足以增加細(xì)胞的核酸損傷的CBP501量接觸。在各種方面，方法進(jìn)一步包括使細(xì)胞 與核酸損傷劑接觸或使細(xì)胞暴露于核酸損傷處理。優(yōu)選地，用CBP501處理與核酸損傷處理 同時(shí)或在核酸損傷處理之前執(zhí)行(組合處理)。更優(yōu)選地，用CBP501處理在核酸損傷處理 之前執(zhí)行。例如，CBP501與核酸損傷劑同時(shí)施用，或緊在核酸損傷劑施用前或10分鐘-6小 時(shí)前施用、優(yōu)選緊在核酸損傷劑施用前或10分鐘-2小時(shí)前施用、更優(yōu)選緊在核酸損傷劑施 用前或10分鐘-1小時(shí)前施用。用CBP501處理和核酸損傷處理的組合處理可以在CBP501 的單次施用后給定時(shí)期后執(zhí)行。給定時(shí)期一般是約1-7天?？紤]受試者的施用條件等，它 可以適當(dāng)增加或降低。例如，用CBP501處理和用順鉬處理的組合施用時(shí)間表如下。[時(shí)間表1]下述步驟a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)重復(fù)每周一次，共3周；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。[時(shí)間表2]下述步驟a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)重復(fù)每天一次，共連續(xù)5天；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。此外，例如，用CBP501處理、用順鉬處理和用培美曲塞處理的組合施用時(shí)間表如 下。[時(shí)間表3]下述步驟a)_步驟C)作為一個(gè)循環(huán)每3周重復(fù)；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的培美曲塞的步驟，和c)在步驟b)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。基于時(shí)間表3的更具體的施用時(shí)間表如下。1. CBP50125mg/m2將作為1小時(shí)i. v.輸注施用。2.培美曲塞500mg/m2將作為i. v.輸注經(jīng)過10分鐘施用，緊在CBP501輸注后。3.順鉬75mg/m2將作為1小時(shí)i. v.輸注施用，緊在培美曲塞輸注后。在本發(fā)明中，依賴于CBP501或待與CBP501處理組合使用的“核酸損傷處理”種類 的所需作用，用CBP501的處理可以在核酸損傷處理后執(zhí)行。其例子是奧沙利鉬或卡鉬的組
合使用。進(jìn)一步提供的是治療受試者中的細(xì)胞增殖病癥或分化病癥的方法，包括特征在于 不希望或不需要的細(xì)胞增殖或細(xì)胞存活的病狀、特征在于缺陷或異常細(xì)胞凋亡的病狀、特 征在于異?；蛉毕菁?xì)胞存活的病狀、以及特征在于異?；蛉毕菁?xì)胞分化的病狀。在一個(gè)實(shí) 施方案中，方法包括給具有細(xì)胞增殖病癥或處于具有細(xì)胞增殖病癥危險(xiǎn)中的受試者施用有效治療細(xì)胞增殖病癥的CBP501量。在一個(gè)方面，量足以改善受試者的病狀。在特定方面，改 善包括在靶細(xì)胞(例如，異常增殖細(xì)胞)的至少部分中降低的細(xì)胞增殖、降低的細(xì)胞數(shù)目、 抑制細(xì)胞數(shù)目中的增加、增加細(xì)胞凋亡或降低存活。在另外一個(gè)方面，受試者在施用(或執(zhí) 行)抑制細(xì)胞增殖的處理之前、同時(shí)或之后施用CBP501。優(yōu)選地，受試者在施用(或執(zhí)行) 抑制細(xì)胞增殖的處理之前或同時(shí)施用CBP501。更優(yōu)選地，受試者在施用(或執(zhí)行)抑制細(xì) 胞增殖的處理之前施用CBP501。在另外特定方面，細(xì)胞增殖病癥的至少部分細(xì)胞位于血液、 乳腺、肺、甲狀腺、頭或頸、腦、淋巴液、胃腸道、泌尿生殖道、腎、胰腺、肝、骨、肌肉或皮膚中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括給受試者施用CBP501量以治療實(shí)體瘤。在另外 一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括給受試者施用CBP501量以治療液體腫瘤。在各種方面，具有腫 瘤的受試者在另一種抗腫瘤療法之前、同時(shí)或之后用CBP501施用。優(yōu)選地，受試者在另一 種抗腫瘤療法之前或同時(shí)施用CBP501。更優(yōu)選地，受試者在另一種抗腫瘤療法之前施用 CBP501。如本文使用的，術(shù)語“增殖病癥”和“增殖病狀”意指特征在于異?；虿幌Ｍ脑?殖(例如，細(xì)胞、病毒、細(xì)菌、真菌等的)的任何病理或非病理生理?xiàng)l件。術(shù)語“細(xì)胞增殖病 癥”和“細(xì)胞增殖病狀”意指特征在于異?；虿幌Ｍ募?xì)胞增殖的任何病理或非病理生理?xiàng)l 件，還包括特征在于不希望或不需要的細(xì)胞增殖或細(xì)胞存活的病狀(例如，由于缺陷細(xì)胞 凋亡)、特征在于缺陷或異常細(xì)胞凋亡的病狀、以及特征在于異常或不希望或不需要的細(xì)胞 存活的病狀。術(shù)語“分化病癥”意指特征在于異常或缺陷分化的任何病理或非病理生理?xiàng)l 件。順應(yīng)治療的增殖或分化病癥包括良性和贅生性的疾病和非病理生理?xiàng)l件，特征在 于異?；虿幌Ｍ募?xì)胞數(shù)目、細(xì)胞生長或細(xì)胞存活。此類病癥或病狀因此可以構(gòu)成疾病狀 態(tài)，并且包括所有類型的癌性生長或致癌過程，轉(zhuǎn)移組織或惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞、組織或器官，或 可以是非病理性的，即偏離正常但一般與疾病無關(guān)?？梢砸勒毡景l(fā)明治療的非病理?xiàng)l件的 具體例子是導(dǎo)致瘢痕來自創(chuàng)傷修復(fù)的組織再生長。包括增殖或分化病癥的細(xì)胞可以在細(xì)胞群中聚集或分散。術(shù)語“實(shí)體瘤”指一般聚集在一起且形成團(tuán)塊的贅生物或轉(zhuǎn)移灶。特定例子包括 內(nèi)臟腫瘤例如胃或結(jié)腸癌、肝瘤、腎癌、肺和腦瘤/癌?！耙后w腫瘤”指造血系統(tǒng)的贅生物，例 如淋巴瘤、骨髓瘤和白血病，或在性質(zhì)中彌散的贅生物，因?yàn)樗鼈円话悴恍纬蓪?shí)體。白血病 的特定例子包括急性和慢性成淋巴細(xì)胞、成髓細(xì)胞和多發(fā)性骨髓瘤。此類病癥包括贅生物或癌癥，其可以影響基本上任何細(xì)胞或組織類型，例如癌、肉 瘤、黑素瘤、轉(zhuǎn)移性病癥或造血贅生性病癥。轉(zhuǎn)移性腫瘤可以起于許多原發(fā)性腫瘤類型，包 括但不限于乳腺、肺、甲狀腺、頭與頸、腦、淋巴樣、胃腸道(口、食管、胃、小腸、結(jié)腸、直腸)、 泌尿生殖道(子宮、卵巢、子宮頸、膀胱、睪丸、陰莖、前列腺)、腎、胰腺、肝、骨、肌肉、皮膚寸。癌指上皮或內(nèi)分泌組織的惡性腫瘤，并且包括呼吸系統(tǒng)癌、胃腸道系統(tǒng)癌、生殖泌 尿系統(tǒng)癌、睪丸癌、乳腺癌、前列腺癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌和黑素瘤。示例性癌包括由子宮頸、肺、 前列腺、乳腺、頭與頸、結(jié)腸、肝和卵巢形成的那些。該術(shù)語還包括癌肉瘤，例如其包括由癌 和肉瘤組織組成的惡性腫瘤。腺癌包括腺組織的癌，或其中腫瘤形成腺樣結(jié)構(gòu)。肉瘤指間充質(zhì)細(xì)胞起源的惡性瘤。示例性肉瘤包括例如淋巴肉瘤、脂肪肉瘤、骨肉瘤和纖維肉瘤。如本文使用的，術(shù)語“造血增殖病癥”意指涉及造血起源的增生/贅生性細(xì)胞的疾 病，例如起于骨髓樣、淋巴樣或紅細(xì)胞系統(tǒng)譜系，或其前體細(xì)胞。一般地，疾病起于低分化急 性白血病，例如成紅細(xì)胞白血病和急性成巨核細(xì)胞白血病。另外的示例性骨髓樣病癥包括 但不限于急性前髓細(xì)胞樣白血病(APML)、急性髓性白血病(AML)和慢性髓性白血病(CML)； 淋巴樣惡性腫瘤包括但不限于急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)，其包括B譜系A(chǔ)LL和T譜系 ALL、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、早幼淋巴細(xì)胞性白血病(PLL)、多毛細(xì)胞白血病(HLL)和 沃爾登斯特倫(Waldenstrom' s)巨球蛋白血癥(WM)。另外的惡性淋巴瘤包括但不限于非 霍奇金淋巴瘤及其變種、外周T細(xì)胞淋巴瘤、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(ATL)、皮膚T細(xì)胞 淋巴瘤(CTCL)、巨粒淋巴細(xì)胞白血病(LGF)、霍奇金氏病和Reed-Stemberg病。因此，在本發(fā)明中，待治療的疾病可以選自各種癌癥[特別是，乳腺癌(例如，侵襲 性導(dǎo)管型乳腺癌、非侵襲性導(dǎo)管型乳腺癌、炎性乳腺癌等)、前列腺癌(例如，激素依賴性前 列腺癌、激素非依賴性前列腺癌等)、胰腺癌(例如，胰管癌等)、胃癌(例如，乳頭狀腺癌、 粘液腺癌、腺鱗狀癌等)、肺癌(例如，非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、惡性間皮瘤(胸膜間皮 瘤、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤等)等)、結(jié)腸癌(例如，胃腸道間質(zhì)瘤等)、直腸癌(例如，胃腸 道間質(zhì)瘤等)、大腸癌(例如，家族性大腸癌、遺傳性非息肉病性結(jié)腸癌、胃腸道間皮瘤等)、 小腸癌(例如，非霍奇金淋巴瘤、胃腸道間質(zhì)瘤等)、食管癌、十二指腸癌、舌癌、咽癌(例如， 鼻咽癌、中咽癌、下咽癌等)、唾液腺癌、腦瘤(例如，松果體星形細(xì)胞瘤、纖維狀細(xì)胞性星形 細(xì)胞瘤、彌漫性星形細(xì)胞瘤、間變性星形細(xì)胞瘤等)、許旺細(xì)胞瘤、肝癌(例如，原發(fā)性肝癌、 肝外膽管癌等)、腎癌(例如，腎細(xì)胞癌、輸尿管和腎盂移行細(xì)胞癌等)、膽管癌、子宮內(nèi)膜 癌、宮頸癌、卵巢癌(例如，上皮卵巢癌、性腺外生殖細(xì)胞腫瘤、卵巢生殖細(xì)胞腫瘤、卵巢低 度潛在惡性腫瘤等)、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌(例如，眼內(nèi)黑素瘤、梅克爾(Merkel)細(xì)胞癌 等)、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺癌(例如，髓性甲狀腺癌等)、甲狀旁腺癌、鼻 癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌下癌、骨瘤(例如，骨 肉瘤、尤因氏(Ewing' s)腫瘤、子宮肉瘤、軟組織肉瘤等)、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖 癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌(例如，腎母細(xì)胞瘤、兒科腎腫瘤等)、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的 卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白 血病(例如，急性髓細(xì)胞性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病等)等]。用于與CBP501組合使用的治療包括如本文公開或本領(lǐng)域已知的任何抗增殖、核 酸損傷或抗腫瘤治療。例如，抗細(xì)胞增殖或抗腫瘤治療可以包括任選與藥物治療組合的輻 射治療或手術(shù)切除。治療可以包括施用化學(xué)物質(zhì)例如放射性同位素、藥物例如化學(xué)治療劑、 或遺傳治療例如抗癌基因(例如，Rb、DCC、p53等)、顯性失活癌基因或針對癌基因的反義。 化合物可以在其他治療方案之前、同時(shí)或之后施用。例如，用于抗細(xì)胞增殖療法(例如，輻 射療法、化學(xué)療法、基因療法、手術(shù)切除等)的候選受試者可以在起始抗細(xì)胞增殖療法前施 用CBP501。因此，提供了預(yù)防治療方法。此外，用于與CBP501組合使用的治療包括如本文公開或本領(lǐng)域已知的任何預(yù)防 抗變態(tài)反應(yīng)治療。例如，抗變態(tài)反應(yīng)治療可以包括施用化學(xué)物質(zhì)例如抗變應(yīng)性試劑(例如， denocorticotropic激素(例如，地塞米松等)、抗組胺藥(例如，苯海拉明、氯雷他定等) 等)。抗變應(yīng)性試劑可以在CBP501施用之前、同時(shí)或之后施用。
術(shù)語“受試者”指動(dòng)物，一般是哺乳動(dòng)物，例如靈長類(人、類人猿、長臂猿、黑猩 猩、猩猩、彌猴)、馴養(yǎng)動(dòng)物(犬和貓)、農(nóng)場動(dòng)物(馬、牛、山羊、綿羊、豬)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(小 鼠、大鼠、兔、豚鼠)。受試者包括動(dòng)物疾病模型(例如，荷瘤小鼠)。適合于治療的受試者包括目前經(jīng)歷的那些或是用于就增殖或分化病癥治療(例 如，抗腫瘤治療)的候選物。另外候選受試者包括例如處于發(fā)展細(xì)胞增殖病癥危險(xiǎn)中的受 試者。本發(fā)明的方法因此可應(yīng)用于治療處于發(fā)展細(xì)胞增殖病癥危險(xiǎn)中但仍未顯示病癥的明 顯癥狀的受試者。處于危險(xiǎn)中的受試者可以鑒定為具有發(fā)展細(xì)胞增殖病癥的遺傳素質(zhì)或家 族史。例如，具有活化癌基因或具有腫瘤抑制基因突變或缺失的受試者是候選受試者。處 于危險(xiǎn)中的受試者因此可以使用常規(guī)遺傳篩選就遺傳傷痕的存在進(jìn)行鑒定，或查詢受試者 的家族史以確定他們處于病癥危險(xiǎn)中。處于危險(xiǎn)中的受試者的特定例子將是具有家族史或 指示對于癌癥的素質(zhì)的其他遺傳特征的受試者，在所述癌癥中贅生性或藥物抗性贅生性細(xì) 胞表達(dá)CD40。遺傳疾病的特定具體例子是成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤，其由Rb腫瘤抑制基因中的缺陷 引起。所施用的量一般以“有效量”或“足夠量”，其是足以產(chǎn)生所需效應(yīng)的量。有效量因 此包括下述中的一種或多種細(xì)胞包括增殖細(xì)胞(例如，至少某些靶細(xì)胞)的至少部分降低 細(xì)胞增殖、降低細(xì)胞數(shù)目、抑制增加的增殖、抑制增加的細(xì)胞數(shù)目、增加細(xì)胞凋亡、或降低存 活。因此，例如，當(dāng)希望抑制細(xì)胞增殖時(shí)，有效量將是可檢測地降低增殖細(xì)胞的細(xì)胞增殖或 數(shù)目，或增加細(xì)胞凋亡或降低細(xì)胞存活的量。量因此可以足以減少靶細(xì)胞數(shù)目，穩(wěn)定靶細(xì)胞 數(shù)目或抑制靶細(xì)胞數(shù)目中的增加。例如，當(dāng)病癥包括實(shí)體瘤時(shí)，腫瘤的至少部分(例如，抑 制5-10%細(xì)胞或10-20%或更多細(xì)胞包括腫瘤團(tuán)塊的生長)減少腫瘤大小、穩(wěn)定腫瘤大小 或阻止腫瘤的進(jìn)一步生長，是令人滿意的臨床終點(diǎn)。當(dāng)病癥包括液體腫瘤時(shí)，腫瘤細(xì)胞的至 少亞群(例如，抑制5-10%細(xì)胞或10-20%或更多細(xì)胞的生長)減少腫瘤細(xì)胞數(shù)目、穩(wěn)定腫 瘤細(xì)胞數(shù)目或抑制腫瘤細(xì)胞數(shù)目中的進(jìn)一步增加，是令人滿意的臨床終點(diǎn)。 此外，視為有效的量可以阻止或抑制病狀或病癥的進(jìn)展。例如，特定腫瘤在它們進(jìn) 展時(shí)變得越來越攻擊性，包括進(jìn)展至轉(zhuǎn)移形式。因此，也視為有效的量將導(dǎo)致減少或阻止腫 瘤變得越來越攻擊性或轉(zhuǎn)移。因此，抑制或阻止病癥或病狀的惡化，即穩(wěn)定病狀，是另外令 人滿意的臨床終點(diǎn)。包含液體腫瘤的生物樣品(例如，血液或組織樣品)的檢查可以確定是已減少腫 瘤細(xì)胞團(tuán)塊或數(shù)目，還是已發(fā)生腫瘤細(xì)胞增殖的抑制。對于實(shí)體瘤，侵襲性和非侵襲性成像 法可以確定腫瘤大小中的減少，或抑制腫瘤大小中的增加。受體陽性腫瘤的受體計(jì)數(shù)降低 可以用于評估腫瘤細(xì)胞增殖的減少或抑制。激素產(chǎn)生腫瘤例如乳腺、睪丸或卵巢癌的激素 量可以用于評估腫瘤增殖的減少或抑制。有效量還可以是客觀或主觀減少或降低與病癥或病狀相關(guān)癥狀的嚴(yán)重性或頻率。 例如，減少疼痛、惡心或其他不適，或增加食欲或受試者幸福的CBP501量是令人滿意的臨 床終點(diǎn)。有效量還包括減少用另一種方案的治療量(例如，用量)或頻率，這被視為令人滿 意的臨床終點(diǎn)。例如，用CBP501治療的癌癥患者可能需要更少的核酸損傷處理，以便抑制 癌細(xì)胞增殖。在這個(gè)例子中，與不用CBP501處理施用的給藥頻率或量比較，有效量將包括 減少受試者施用的核酸損傷劑的給藥頻率或量的量。
導(dǎo)致受試者的病狀或治療利益中的改善的本發(fā)明方法在持續(xù)時(shí)間中可以相對短， 例如改善可以持續(xù)數(shù)小時(shí)、數(shù)天或數(shù)周，或延長超過更長時(shí)間段，例如數(shù)月或數(shù)年。有效量 無需是病狀或病癥的任何或所有癥狀的完全消除。因此，使用對于測定病癥或病狀狀態(tài)合 適的前述標(biāo)準(zhǔn)或本領(lǐng)域已知的其他標(biāo)準(zhǔn)中的任何，經(jīng)過短或長時(shí)間段，如測定的當(dāng)存在受 試者的病狀中的主觀或客觀改善時(shí)，達(dá)到關(guān)于有效量的令人滿意的臨床終點(diǎn)。如本文描述 或本領(lǐng)域已知的，有效提供一種或多種有利效應(yīng)的量被稱為受試者病狀的“改善”或?qū)τ谑?試者的“治療利益”。CBP501的有效量可以基于動(dòng)物研究或任選在人臨床試驗(yàn)中進(jìn)行測定。技術(shù)人員 應(yīng)當(dāng)理解可以影響治療特定受試者所需的用量和時(shí)間選擇的各種因素，包括例如受試者的 一般健康、年齡或性別，病癥或病狀的嚴(yán)重性或狀態(tài)，各種治療，對不希望的副作用的敏感 性，所需臨床結(jié)果和其他病癥或病狀的存在。此類因素可以影響提供對于治療利益足夠 的量所需的用量和時(shí)間選擇。給藥方案還考慮藥代動(dòng)力學(xué)，即藥物組合物的吸收速率、生 物利用度、代謝和清除率(參見例如，Egleton(1997) 〃 Bioavailability and transport of peptides and peptide drugs into the brain " Peptides 18 :1431-1439 ；禾口 Langer (1990) Science 249 :1527-1533)。此外，劑量或治療方案可以對于受試者具體修改 或基于藥物基因組數(shù)據(jù)修飾。CBP501因此可以單獨(dú)或作為藥物組合物，全身性、區(qū)域性(例如，針對器官或組 織，例如通過注射到門靜脈內(nèi)用于治療肝的細(xì)胞增殖病癥)、局部地(例如，直接進(jìn)入腫瘤 團(tuán)塊內(nèi))，依照達(dá)到所需效應(yīng)的任何方案或途徑施用。CBP501及其藥物組合物可以作為單 次或多次劑量每天(例如，以低劑量)、或間歇地(例如，以較高劑量每隔一天、每周一次 等)施用。CBP501及其藥物組合物可以經(jīng)由吸入(例如氣管內(nèi))、經(jīng)口、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、血 管內(nèi)、鞘內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腔內(nèi)、經(jīng)皮(例如，局部)、經(jīng)粘膜(例如，頰、膀胱、陰道、子 宮、直腸或鼻)、通過多次施用、持續(xù)釋放(例如，隨著時(shí)間過去逐步灌注)或快速灌注施用。 用于施用藥物的可植入裝置包括微制造裝置是眾所周知的，并且也可應(yīng)用于將本發(fā)明的化 合物遞送給受試者。靜脈內(nèi)施用(IV)的CBP501將是經(jīng)過數(shù)小時(shí)(一般1、3或6小時(shí))約1. Omg/小 時(shí)-約75mg/小時(shí)，這可以重復(fù)一周或更多周伴隨間歇循環(huán)?？梢允褂孟喈?dāng)高的用量(例 如，范圍高達(dá)約10mg/ml)，特別是當(dāng)藥物施用于隔離部位且不進(jìn)入血流內(nèi)時(shí)，例如進(jìn)入體腔 內(nèi)或進(jìn)入器官的內(nèi)腔內(nèi)例如腦脊髓液(CSF)。如上所述，CBP501可以與核酸損傷劑和/或抗細(xì)胞增殖試劑組合使用，并且組合 使用是優(yōu)選的。當(dāng)在組合使用中，CBP501可以根據(jù)上述CBP501單一施用(單一試劑)施 用。因?yàn)橥ㄟ^組合使用可以預(yù)期更優(yōu)良的效應(yīng)，所以可以減少CBP501的劑量、給藥期、施用
頻率等。待與CBP501組合的核酸損傷劑和/或抗細(xì)胞增殖試劑可以分別根據(jù)臨床上采用 的施用標(biāo)準(zhǔn)施用。因?yàn)橥ㄟ^組合使用可以預(yù)期更優(yōu)良的效應(yīng)，所以可以減少核酸損傷劑和 /或抗細(xì)胞增殖試劑的劑量、給藥期、施用頻率等。例如，采用下述施用時(shí)間表。[時(shí)間表1]下述步驟a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)重復(fù)每周一次，共3周；
a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。[時(shí)間表2]下述步驟a)和步驟b)作為一個(gè)循環(huán)重復(fù)每天一次，共連續(xù)5天；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。此外，例如，用CBP501處理、用順鉬處理和用培美曲塞處理的組合方案如下。[時(shí)間表3]下述步驟a)-步驟c)作為一個(gè)循環(huán)每3周重復(fù)；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué) 上可接受的鹽的步驟，b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的培美曲塞的步驟，和c)在步驟b)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟?；跁r(shí)間表3的更具體的施用時(shí)間表如下。1. CBP50125mg/m2將作為1小時(shí)i. v.輸注施用。2.培美曲塞500mg/m2將作為i. v.輸注經(jīng)過10分鐘施用，緊在CBP501輸注后。3.順鉬75mg/m2將作為1小時(shí)i. v.輸注施用，緊在培美曲塞輸注后。本發(fā)明因此進(jìn)一步提供了藥物組合物。此類藥物組合物用于在體內(nèi)或先體外后體 內(nèi)施用于受試者，并且例如用于由CBP501治療受試者。如本文使用的，“藥物組合物”或“藥物制劑”意指CBP501 (包括其藥學(xué)上可接受的 鹽或藥物前體)與一種或多種另外化學(xué)組分的混合物，所述另外化學(xué)組分例如藥學(xué)上可接 受的或生理學(xué)上可接受的載體和賦形劑。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”和“生理學(xué)上可接受的” 包括與藥物施用相容的溶劑(水性或非水性)、溶液、乳狀液、分散介質(zhì)、包衣、等滲和吸收 促進(jìn)或延遲劑。“藥物組合物”或“藥物制劑”因此指適合于施用于受試者的組合物?！八帉W(xué) 上可接受的鹽”意指以連同抗衡離子的荷電形式的化合物。作為CBP501的生理學(xué)上可接受的鹽，例如，可以提及具有無機(jī)堿的鹽、具有有機(jī) 堿的鹽、具有無機(jī)酸的鹽、具有有機(jī)酸的鹽、具有堿性或酸性氨基酸的鹽等。此類鹽可以通 過本身已知的方法產(chǎn)生(例如，乙酸鹽可以通過液相層析步驟使用含乙酸鹽溶劑產(chǎn)生，關(guān) 于更多細(xì)節(jié)參見實(shí)施例)。具有無機(jī)堿的鹽的優(yōu)選例子包括堿金屬鹽例如鈉鹽、鉀鹽等，堿土金屬鹽例如鈣 鹽、鎂鹽等，和鋁鹽、銨鹽等。具有有機(jī)堿的鹽的優(yōu)選例子包括具有三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二 乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇[三(羥甲基)氨基甲烷]、叔丁胺、環(huán)己胺、苯胺、二環(huán)己胺、 N, N' -二芐乙烯二胺等的鹽。具有無機(jī)酸的鹽的優(yōu)選例子包括具有鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等的鹽。具有有機(jī)酸的鹽的優(yōu)選例子包括具有甲酸、乙酸、三氟乙酸、苯二甲酸、延胡索酸、 草酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、琥珀酸、蘋果酸、甲磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸等的鹽。
具有堿性氨基酸的鹽的優(yōu)選例子包括具有精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸等的鹽。具有酸性氨基酸的鹽的優(yōu)選例子包括具有天冬氨酸、谷氨酸等的鹽。優(yōu)選的是具有有機(jī)酸例如乙酸等的鹽。與CBP501附著的乙酸數(shù)目可以不同，并且優(yōu)選附著4或5個(gè)乙酸。可替代地，可 以使用具有與之附著的不同數(shù)目乙酸的CBP501乙酸鹽混合物(例如，4個(gè)乙酸鹽或5個(gè)乙 酸鹽等的混合物)。如本文使用的，“藥物前體”是在體內(nèi)代謝、轉(zhuǎn)變或修飾為活性形式例如CBP501其 自身的化合物。藥物前體通常有用的，因?yàn)樗鼈兛梢员饶阁w藥物更容易施用，或與母體藥物 比較顯示增加的生物利用度或可溶性。藥物前體的特定非限制性例子是通過氨基或羧基末 端基團(tuán)與CBP501鍵合的多肽。多肽在體內(nèi)水解或代謝以釋放CBP501。本發(fā)明化合物和方 法因此包括在體內(nèi)代謝、轉(zhuǎn)變或修飾為CBP501的活性形式的CBP501藥物前體。除CBP501外，組合物還可以包含核酸損傷劑和/或抗細(xì)胞增殖試劑作為活性成 分。作為核酸損傷劑，可以使用上文例示的那些。作為抗細(xì)胞增殖試劑，可以使用上文例示 的那些(在下文中除CBP501外，還包含核酸損傷劑和/或抗細(xì)胞增殖試劑的組合物也被稱 為本發(fā)明的組合試劑)。考慮其用于個(gè)別使用的量，可以適當(dāng)測定本發(fā)明的組合試劑中CBP501的量和核 酸損傷劑和/或抗細(xì)胞增殖試劑的量。因?yàn)橥ㄟ^CBP501提供的加強(qiáng)核酸損傷劑的細(xì)胞毒 性的效應(yīng)，以及通過抗細(xì)胞增殖試劑提供的加強(qiáng)細(xì)胞增殖抑制作用的效應(yīng)，可以預(yù)期更優(yōu) 良的治療效應(yīng)，所以量可以設(shè)定低于用于個(gè)別使用的那些。例如，可以提及CBP501 (25mg)和順鉬(75mg)的組合試劑，CBP501 (25mg)、順鉬 (75mg)和培美曲塞(500mg)的組合試劑，兩者都根據(jù)體表面積(/m2)。藥物組合物可以配制為與特定施用途徑相容，全身或局部。因此，藥物組合物包括 適合于通過各種途徑施用的載體、稀釋劑或賦形劑。制劑或腸(經(jīng)口)施用可以包含在片劑(包被或未包被的)、膠囊(硬或軟)、微球 體、乳狀液、粉劑、顆粒劑、晶體、懸浮液、糖漿劑或酏劑中。可以使用常規(guī)無毒固體載體，其 包括例如藥物級(jí)別的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳 酸鎂，以制備固體制劑。補(bǔ)充性活性化合物(例如，防腐劑、抗菌劑、抗病毒劑和抗真菌劑) 也可以摻入制劑內(nèi)。液體制劑也可以用于腸施用。載體可以選自各種油，包括石油、動(dòng)物、 蔬菜或合成的，例如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油。合適的藥物賦形劑包括例如淀粉、纖 維素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、稻、面粉、白堊、硅膠、硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、單硬 脂酸甘油酯、氯化鈉、脫脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇。用于腸、腸胃外或經(jīng)粘膜遞送的藥物組合物包括例如水、鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、 漢克氏溶液、林格氏溶液、右旋糖/鹽水和葡萄糖溶液。制劑可以包含輔助物質(zhì)以接近生理 條件，例如緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑、濕潤劑、去污劑等。添加劑還可以包括另外活性成分例如殺 菌劑或穩(wěn)定劑。例如，溶液可以包含乙酸鈉、乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、脫水山梨醇單 月桂酸酯或三乙醇胺油酸酯。另外的腸胃外制劑和方法在Bai (1997) J. Neuroimmunol. 80 65-75 ；Warren(1997)J. Neurol. Sci.
用于真皮內(nèi)或皮下施用的藥物組合物可以包括無菌稀釋劑，例如水、鹽水溶液、不 揮發(fā)性油、聚乙二醇、丙三醇、丙二醇或其他合成溶劑；抗菌劑例如苯甲醇或?qū)αu基苯甲酸 甲酯；抗氧化劑例如抗壞血酸、谷胱甘肽或亞硫酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸；緩沖液 例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽，和用于調(diào)節(jié)張力的試劑例如氯化鈉或右旋糖。用于注射的藥物組合物包括水溶液(其中水可溶)或分散系和無菌粉末用于 臨時(shí)制備無菌可注射溶液或分散系。對于靜脈內(nèi)施用，合適載體包括生理鹽水、抑菌水、 Cremophor EL(TM) (BASF, Parsippany, N. J.)或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。載體可以是溶劑或 分散介質(zhì)，包含例如水、乙醇、多羥基化合物(例如，甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)及其 合適混合物。流動(dòng)性可以通過下述得到維持，例如通過使用包衣例如卵磷脂，在分散系的情 況下通過維持所需粒子大小和通過使用表面活性劑?？咕鷦┖涂拐婢鷦┌ɡ鐚αu基苯 甲酸、三氯叔丁醇、苯酚、抗壞血酸和硫柳汞。等滲劑例如糖、多元醇例如甘露醇、山梨醇、氯 化鈉可以包括在組合物中。所得到的溶液可以包裝用于像這樣使用或凍干，凍干制劑隨后 可以在施用前與無菌溶液組合。藥學(xué)上可接受的載體可以包含穩(wěn)定、增加或延遲吸收或清除率的化合物。此類化 合物包括例如碳水化合物，例如葡萄糖、蔗糖或右旋糖酐；低分子量蛋白質(zhì)；減少肽清除率 或水解的組合物；或賦形劑或其他穩(wěn)定劑和/或緩沖液。延遲吸收的試劑包括例如單硬 脂酸鋁和明膠。去污劑也可以用于穩(wěn)定或增加或降低藥物組合物的吸收，包括脂質(zhì)體載 體。為了保護(hù)不受消化，化合物可以與組合物復(fù)合，以致使其對酸和酶促水解有抵抗力， 或化合物可以在適當(dāng)有抵抗力的載體例如脂質(zhì)體中復(fù)合。保護(hù)化合物不受消化的方法是 本領(lǐng)域已知的(參見例如，F(xiàn)ix(1996)Pharm Res. 13 :1760-1764 ；Samanen(1996) J. Pharm. Pharmacol. 48 :119-135 ；和美國專利號(hào)5，391，377，描述了用于經(jīng)口遞送治療劑的脂質(zhì)組 合物)。對于經(jīng)粘膜或經(jīng)皮施用，在制劑中使用對于待滲透的屏障合適的穿透劑。此類 穿透劑是本領(lǐng)域一般已知的，并且對于經(jīng)粘膜施用，包括例如，去污劑、膽汁鹽和梭鏈孢 酸衍生物。經(jīng)粘膜施用可以通過鼻腔噴霧或栓劑(參見例如，Sayani (1996) “ Systemic delivery of peptides and proteins across absorptive mucosae" Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. 13 :85-184)。對于經(jīng)皮施用，如本領(lǐng)域一般已知的，活性化合物可以配 制成乳膏、藥膏、凝膠劑或乳膏。經(jīng)皮遞送系統(tǒng)還可以使用貼劑來達(dá)到。對于吸入遞送，藥物制劑可以以氣溶膠或薄霧的形式施用。對于氣溶膠施用，制 劑可以連同表面活性劑或推進(jìn)劑一起以精細(xì)分開的形式供應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用 于將制劑遞送給呼吸組織的裝置使其中制劑汽化。本領(lǐng)域已知的其他遞送系統(tǒng)包括干粉 氣溶膠、液體遞送系統(tǒng)、吸入器、空氣噴射噴霧器和推進(jìn)劑系統(tǒng)(參見例如，Patton(1998) Biotechniquesl6 141 — 143 ;Dura Pharmaceuticals, San Diego, Calif. ；Aradigm, Hayward, Calif. ；Aerogen, Santa Clara, Calif.；禾口 Inhale Therapeutic Systems, San Carlos, Calif.)?？梢允褂蒙锟山到?、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、 膠原、聚原酸酯和聚乳酸。用于制備此類制劑的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。材料還可 以從Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals, he商購獲得。還可以使用脂質(zhì)體懸 浮液(包括使用抗體或病毒衣殼蛋白質(zhì)靶向細(xì)胞或組織的脂質(zhì)體)作為藥學(xué)上可接受的載體。這些可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制備，例如如美國專利號(hào)4，235，871 ；4, 501，728 ； 4，522，811 ；4，837，028 ；6，110，490 ；6，096，716 ； 5，283，185 ； 5，279，833 ；Akimaru (1995) Cytokines Mol. Ther. 1 :197-210 ；Alving(1995)Immunol. Rev. 145 :5-31；和 Szoka(1980) Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9 :467)中所述。能夠持續(xù)遞送小分子包括肽的生物可降解的 微球體或膠囊或其他生物可降解的聚合物配置是本領(lǐng)域已知的(參見例如，Putney(1998) Nat. Biotechnol. 16 :153-157)。CBP501 可以摻入膠束內(nèi)(參見例如，Suntres (1994) J. Pharm. Pharmacol. 46 :23-28 ；Woodle (1992) Pharm. Res, 9 :260-265)。CBP501 可以與脂質(zhì) 單層或雙層表面附著。例如，CBP501可以與含酰胼-PEG-(二硬脂酰磷脂酰)乙醇胺脂質(zhì)體 附著(參見例如，Zalipsky (1995)Bioconjug. Chem. 6 :705-708)?？商娲?，可以使用任何 形式的脂質(zhì)膜，例如平面脂質(zhì)膜或完整細(xì)胞例如紅血細(xì)胞的細(xì)胞膜。脂質(zhì)體和含脂質(zhì)制劑 可以通過任何方法遞送，包括例如靜脈內(nèi)、經(jīng)皮(參見例如，Vutla (1996) J. Pharm. Sci. 85 5-8)、經(jīng)粘膜或經(jīng)口施用。藥學(xué)上可接受的制劑可以摻入約-99. 9%活性成分(例如，CBP501)。藥物組 合物可以通過常規(guī)、眾所周知的滅菌技術(shù)進(jìn)行滅菌，或可以無菌過濾。另外的藥物制劑和遞送系統(tǒng)是本領(lǐng)域已知的，并且可應(yīng)用于本發(fā)明的方法和 組合物中(參見例如，Remington' s Pharmaceutical Sciences (1990)第 18 版，Mack Publishing Co. ,Easton,Pa. ；The Merck Index(1996)第 12版,Merck Publishing Group, ffhitehouse, N. J. ；Pharmaceutical Principles of Solid Dosage Forms, Technonic Publishing Co.，Inc.，Lancaster, Pa.， (1993)；禾口 Poznansky 等人’ Drug Delivery Systems, R. L. Juliano，編輯，Oxford, N. Y. (1980)，第 253-315 頁)。藥物制劑可以以單位 劑型包裝用于容易施用和用量的統(tǒng)一性。如本文使用的，“單位劑型”指用于施用于待治療 的受試者的物理上不連續(xù)的單元用量；每個(gè)單位包含預(yù)定數(shù)量的化合物，其與藥物載體或 賦形劑組合產(chǎn)生所需效應(yīng)。除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技 術(shù)人員通常理解相同的含義。盡管本文描述了合適方法和材料，但在本發(fā)明的實(shí)踐或測試 中可以使用與本文描述那些相似或等價(jià)的方法和材料。本文引用的所有出版物、專利和其他參考文獻(xiàn)整體引入作為參考。在沖突的情況 下，以本說明書包括定義為準(zhǔn)。如本文使用的，單數(shù)形式“a”、“an”、“the”和“is”包括復(fù)數(shù)參考，除非上下文另有 明確說明。因此，例如提及“化合物”包括多種化合物，并且提及“殘基”或“氨基酸”包括提
及一個(gè)或多個(gè)殘基和氨基酸。本發(fā)明的許多實(shí)施方案已得到描述。然而，應(yīng)當(dāng)理解可以進(jìn)行各種修飾而不背離 本發(fā)明的精神和范圍。因此，下述實(shí)施例預(yù)期舉例說明但不限制權(quán)利要求中所述的本發(fā)明 范圍。實(shí)施例 實(shí)施例1. H-⑶對苯甲酰苯基丙氨酰-⑶絲氨酰-⑶色氨酰-⑶絲氨酰-⑶ 五氟苯基丙氨酰-(D)環(huán)己基丙氨酰-(D)精氨酰-(D)精氨酰-(D)精氨酰-(D)谷氨酰胺 ?；?(D)精氨酰-(D)精氨酸乙酸鹽[即，H-(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3, 4,5,6-F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) -OH 乙酸鹽；(CBP501 乙酸鹽)]的產(chǎn)生CBP501 的特件分子式=C86H122N29O17F5平均分子量1929. 1 (無水游離堿)一般性質(zhì)CBP501乙酸鹽(CBP501-原料藥)是白色至灰白色無定形粉末。當(dāng)在水中以50mg/mL溶解時(shí)，CBP501形成澄清無色溶液。CBP501的產(chǎn)生通過常規(guī)化學(xué)反應(yīng)執(zhí)行。肽生產(chǎn)自始至終使用的所有方法基于在肽 化學(xué)中使用多年的充分證明的有機(jī)反應(yīng)。與合成和分析相關(guān)的肽化學(xué)的這些方面例如在眾所周知的系列中充分證明《The Peptides，Analysis，Synthesis，Biology》，第 1-9 卷，S. Udenfried,J. Meienhofer,1977 至 1987，Academic Press, New York。下文提供了總體過程的圖示，隨后為詳細(xì)流程圖。過程流程圖表權(quán)利要求
1.通過下述序列顯示的肽化合物的乙酸鹽(d-Bpa)(d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO 1)。
2.用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括權(quán)利要求1的肽化合物的乙酸鹽作為 活性成分。
3.權(quán)利要求2的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺癌、前列腺 癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、十二指腸癌、 舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、子宮體 癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺癌、甲狀旁腺 癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌下癌、骨瘤、血 管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的卡波濟(jì) 氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白血病。
4.權(quán)利要求2的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi)膜癌、腹 膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
5.產(chǎn)生由SEQID NO :1所示肽化合物的乙酸鹽的方法，其包括使用含乙酸鹽溶劑執(zhí)行 液相層析的步驟。
6.用于預(yù)防或治療選自子宮內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤和心包間皮瘤的至少一種疾病的試 劑，其包括由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分 (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg) (d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
7.藥物組合物，其包括由下述序列顯示的肽化合物的乙酸鹽和核酸損傷劑(d-Bpa) (d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQID NO :1)。
8.權(quán)利要求7的藥物組合物，其用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥。
9.權(quán)利要求8的藥物組合物，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺癌、 前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、十二 指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、 子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺癌、甲 狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌下癌、骨 瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的 卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白 血病。
10.權(quán)利要求8的藥物組合物，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi) 膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
11.權(quán)利要求7-10中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素和含 鉬藥物的至少一種。
12.權(quán)利要求7-10中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素、順 鉬、卡鉬和奧沙利鉬的至少一種。
13.權(quán)利要求7-10中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述核酸損傷劑是順鉬。
14.權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步包括培美曲塞。
15.權(quán)利要求14的藥物組合物，其用于治療腹膜間皮瘤。
16.權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步包括吉西他濱。
17.權(quán)利要求16的藥物組合物，其用于治療胰腺癌。
18.用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括由下述序列顯示的肽化合物、其藥物 前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3, 4,5,6-F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)，所述試 劑與核酸損傷劑同時(shí)或在核酸損傷劑之前施用。
19.權(quán)利要求18的試劑，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。
20.權(quán)利要求18或19的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。
21.權(quán)利要求18或19的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi) 膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
22.權(quán)利要求18-21中任一項(xiàng)的試劑，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素和含鉬藥 物的至少一種。
23.權(quán)利要求18-21中任一項(xiàng)的試劑，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素、順鉬、卡 鉬和奧沙利鉬的至少一種。
24.權(quán)利要求18-21中任一項(xiàng)的試劑，其中所述核酸損傷劑是順鉬。
25.權(quán)利要求22-24中任一項(xiàng)的試劑，其與培美曲塞組合使用。
26.權(quán)利要求25的試劑，其用于治療腹膜間皮瘤。
27.權(quán)利要求22-24中任一項(xiàng)的試劑，其與吉西他濱組合使用。
28.權(quán)利要求27的試劑，其用于治療胰腺癌。
29.用于預(yù)防或治療細(xì)胞增殖病癥的試劑，其包括由下述序列顯示的肽化合物、其藥物 前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3, 4,5,6-F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)，所述試 劑在核酸損傷劑施用之后施用。
30.權(quán)利要求四的試劑，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。
31.權(quán)利要求四或30的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。
32.權(quán)利要求四或30的試劑，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi) 膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
33.權(quán)利要求四-32中任一項(xiàng)的試劑，其中所述核酸損傷劑是卡鉬或奧沙利鉬。
34.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括與核酸損傷劑同時(shí)或 在核酸損傷劑之前給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體 或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
35.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括在核酸損傷劑之前 給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接 受的鹽(d-Bpa)(d-Ser) (d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2,3,4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
36.權(quán)利要求34或35的方法，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。
37.權(quán)利要求34-36中任一項(xiàng)的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種 乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管 癌、十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、 宮頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀 腺癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。
38.權(quán)利要求34-36中任一項(xiàng)的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種 子宮內(nèi)膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
39.權(quán)利要求34-38中任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素和含鉬藥 物的至少一種。
40.權(quán)利要求34-38中任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸損傷劑是選自博來霉素、順鉬、卡 鉬和奧沙利鉬的至少一種。
41.權(quán)利要求34-38中任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸損傷劑是順鉬。
42.權(quán)利要求39-41中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括施用培美曲塞。
43.權(quán)利要求42的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是腹膜間皮瘤。
44.權(quán)利要求39-41中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括施用吉西他濱。
45.權(quán)利要求44的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是胰腺癌。
46.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括執(zhí)行下述步驟a)和步 驟b)作為一個(gè)循環(huán)，每周一次，共3周；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥 物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。
47.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括執(zhí)行下述步驟a)和步 驟b)作為一個(gè)循環(huán)，每天一次，共連續(xù)5天；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥 物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，和b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。
48.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括每3周執(zhí)行下述步驟 a)_步驟c)作為一個(gè)循環(huán)；a)通過靜脈內(nèi)輸注給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥 物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2，3，4，5，6_F) (d-Cha) (d-Arg) (d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg) (d-Arg) (SEQ ID NO :1)的步驟，b)在步驟a)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的培美曲塞的步驟，和c)在步驟b)完成后給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的順鉬的步驟。
49.用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的細(xì)胞增殖病癥的方法，其包括在核酸損傷劑施用后 給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接 受的鹽(d-Bpa)(d-Ser) (d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2,3,4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg) (d-Arg) (d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
50.權(quán)利要求49的方法，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽是乙酸鹽。
51.權(quán)利要求49或50的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種乳腺 癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、胸膜間皮瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、大腸癌、小腸癌、食管癌、 十二指腸癌、舌癌、咽癌、唾液腺癌、腦瘤、許旺細(xì)胞瘤、肝癌、腎癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮 頸癌、子宮體癌、卵巢癌、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌、血管瘤、惡性淋巴瘤、惡性黑素瘤、甲狀腺 癌、甲狀旁腺癌、鼻癌、鼻側(cè)癌、聽覺器官癌癥、口底癌、喉癌、未知原發(fā)性癌、腮腺癌、下頌 下癌、骨瘤、血管纖維瘤、視網(wǎng)膜肉瘤、陰莖癌、睪丸瘤、兒科實(shí)體癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、起因于 AIDS的卡波濟(jì)氏肉瘤、上頌竇腫瘤、纖維組織細(xì)胞瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、多發(fā)性骨髓 瘤和白血病。
52.權(quán)利要求49或50的方法，其中所述細(xì)胞增殖病癥是選自下述的至少一種子宮內(nèi) 膜癌、腹膜間皮瘤、心包間皮瘤、子宮體癌和卵巢癌。
53.權(quán)利要求49-52中任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸損傷劑是卡鉬或奧沙利鉬。
54.用于加強(qiáng)含鉬制劑的細(xì)胞增殖抑制作用的試劑，其包括由下述序列顯示的肽化 合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分(d-Bpa) (d-Ser) (d-Trp) (d-Ser) (d-Phe-2,3, 4,5,6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
55.權(quán)利要求M的試劑，其中所述含鉬藥物是順鉬、卡鉬或奧沙利鉬。
56.權(quán)利要求M的試劑，其中所述含鉬藥物是順鉬。
57.權(quán)利要求討-56中任一項(xiàng)的試劑，其包括在組合中使用培美曲塞。
58.權(quán)利要求討-56中任一項(xiàng)的試劑，其包括在組合中使用吉西他濱。
59.用于加強(qiáng)含鉬制劑的細(xì)胞增殖抑制作用的方法，其包括給哺乳動(dòng)物施用治療有 效量的由下述序列顯示的肽化合物、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽(d-Bpa) (d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6_F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg) (d-Arg)(SEQ ID NO :1)。
60.權(quán)利要求59的方法，其中所述含鉬藥物是順鉬、卡鉬或奧沙利鉬。
61.權(quán)利要求59的方法，其中所述含鉬藥物是順鉬。
62.權(quán)利要求59-61中任一項(xiàng)的方法，其包括在組合中使用培美曲塞。
63.權(quán)利要求59-61中任一項(xiàng)的方法，其包括在組合中使用吉西他濱。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法，其包括給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的CBP501、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中CBP501、其藥物前體或其藥學(xué)上可接受的鹽與核酸損傷劑施用同時(shí)或在核酸損傷劑施用之前施用。
文檔編號(hào)A61K38/04GK102149725SQ200980127908
公開日2011年8月10日 申請日期2009年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月14日
發(fā)明者佐藤卓治, 河邊拓己, 石垣真知代 申請人:三井有限公司