專利名稱：制備基于煙堿的半抗原的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為戒煙疫苗有用成分的基于煙堿的半抗原的制備方法。
背景技術(shù)：
煙草是世界上最廣泛使用的成癮藥物。煙草的主要成癮成分是煙堿，一種源于煙 草葉的生物堿。以香煙的形式吸入煙草是美國和許多其他國家中可預(yù)防死亡的單一首要原 因。同時，大多數(shù)吸煙者意識到肺癌、冠心病、慢性肺病和中風(fēng)可能由吸煙引起，大多數(shù)吸煙 者嘗試戒煙但失敗。各種行為和藥物治療可用于幫助吸煙者戒煙，包括煙堿替代療法(例如，使用煙 堿口香糖或透皮貼劑)和抗抑郁治療(例如，使用安非他酮)。但是結(jié)果是喜憂參半。它們 可能發(fā)生了不利的副作用。并且它們極大地依賴吸煙者保持不吸煙的意志力。美國專利6，932，971公開了用于戒煙的治療性疫苗。當(dāng)施用時，該疫苗誘導(dǎo)高水 平的煙堿特異性抗體產(chǎn)生，其與血中的煙堿結(jié)合。因為附著在抗體的煙堿復(fù)合物太大，因而 不透過血腦屏障，據(jù)信吸收至腦中的煙堿和相繼的大腦中感知煙堿的神經(jīng)元的刺激被顯著 地降低或者甚至阻止了。以此方式，煙堿驅(qū)動成癮并誘發(fā)滿足感的刺激被降至最低。美國693^71的疫苗包含基于煙堿的半抗原，其通過化學(xué)橋接連接于由大腸埃 希菌產(chǎn)生的噬菌體Q0重組病毒樣粒子的表面?；跓焿A的半抗原是已知的煙堿衍生物 1-(反式-3’-羥甲基-煙酰基)-6-羥基-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯(C19H23N3O6)。這一半 抗原通過反式-3’-羥甲基煙堿與琥珀酸酐反應(yīng)合成得到琥珀?；牧u甲基-煙堿、0-琥珀 ?；?3’ -羥甲基-煙堿，以Langone等人公開的方法“Radioimunno-assay of nicotine, cotine and γ -(3-pyridyl)-y-oxo-N-methylbutyramideMethods Enzymol. 84, 第 628-640頁，Academic Press 1982為基礎(chǔ)。然后將該化合物與1_乙基_3_(3-二甲基氨 基丙基)_碳二亞胺(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)混合，得到0-琥珀?；?3’ -羥甲 基-煙堿的N-羥基琥珀酰亞胺酯，即上文提及的1-(反式-3’-羥甲基-煙?；?-6-羥基 琥珀酰亞氨基-琥珀酸酯。在US 6，932，971中公開的方法對于工業(yè)化生產(chǎn)是不可取的，因為由這種方法制 備的半抗原可能包含殘留量的EDC，其是有毒的和致突變的。半抗原還是本質(zhì)上不穩(wěn)定的分 子。這使得半抗原的處理與制備困難。因此需要避免或至少盡量使這些問題減至最少的用 于制備半抗原的方法。發(fā)明概述第一方面，本發(fā)明涉及用于制備式I或其鹽或溶劑合物的基于煙堿的半抗原的方 法O其中η是0至5的整數(shù)，并且R1和R2 —起構(gòu)成包含1至4個環(huán)氮原子并任選1至 4個選自氧和硫的其他雜原子的N-鍵合的5至10元雜環(huán)基團(tuán)。所述的雜環(huán)基任選在1、 2、3或4位上被鹵素、氰基、羥基、氧代、氨基、氨基羰基、硝基、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或 C3-C6-環(huán)烷基取代；所述方法包括以下步驟(a)式II化合物或其鹽或溶劑合物與式III化合物或其鹽和聚合物支撐的偶聯(lián)劑
反應(yīng)；
權(quán)利要求
1.制備式I或其鹽或溶劑合物的基于煙堿的半抗原的方法
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中式II化合物的η是1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法，其中式III化合物的R1和R2—起構(gòu)成包含 1或2個環(huán)氮原子和任選包含1至2個選自氧和硫的其他雜原子的N-鍵合的5至6元雜 環(huán)基團(tuán)，所述的雜環(huán)基任選在1或2位上被商素、氰基、羥基、氧代、氨基、氨基羰基、硝基、 C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或C3-C6-環(huán)烷基取代。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中式III化合物的R1和R2—起構(gòu)成在2位和5位被氧代取代的吡咯烷基團(tuán)。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求的任意一項的方法，其中所述的聚合物支撐的偶聯(lián)劑是式IV化合物
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中式IV的R3是乙基、異丙基或環(huán)己基。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求的任意項的方法，其中步驟(a)在40°C至60°C的溫度下進(jìn)行。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求的任意項的方法，其中步驟(a)在作為溶劑的2-丁酮中進(jìn)行。
9.制備如權(quán)利要求1所定義的式I、其也是式Λ的化合物的基于煙堿的半抗原或其鹽 或溶劑合物的方法
10.用于制備基于煙堿的半抗原載體結(jié)合物的方法，該方法包括將通過權(quán)利要求1至9 的任意一項獲得的式I的基于煙堿的半抗原與一種或多種病毒樣粒子的包衣蛋白(VLP)共 價結(jié)合。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述的VLP包含RNA噬菌體的包衣蛋白。
全文摘要
制備式(I)或其鹽或溶劑合物的基于煙堿的半抗原的方法，其中n、R1和R2具有說明書所指明的含義。該基于煙堿的半抗原形成戒煙疫苗的部分。
文檔編號A61K39/385GK102119155SQ200980130505
公開日2011年7月6日 申請日期2009年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月8日
發(fā)明者B·馬丁 申請人:諾瓦提斯公司