專利名稱:Ang-(1-7) 受體激動(dòng)劑在急性肺損傷中的用途的制作方法
Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑在急性肺損傷中的用途本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療急性肺損傷,優(yōu)選急性呼吸窘迫綜合征的肽或非肽血管緊張素-(1-7) (Ang-(1-7))受體激動(dòng)劑,優(yōu)選Mas受體激動(dòng)劑。
背景技術(shù):
急性肺損傷(ALI)及其最嚴(yán)重的形式,即急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的年齡調(diào)整后的發(fā)病率是86. 2/100. 000人-年,總體死亡率是約43%,其仍然是重癥監(jiān)護(hù)中的主要死亡原因 (1,2)。該疾病的病理學(xué)標(biāo)志包括彌散性肺泡-毛細(xì)血管損傷和與強(qiáng)炎癥反應(yīng)相關(guān)的肺通透性增加(3,4)。這些改變是特征在于急性發(fā)作、嚴(yán)重低氧血癥和蛋白性肺水腫的臨床表現(xiàn)的基礎(chǔ)。盡管多個(gè)大型多中心臨床試驗(yàn)已經(jīng)用于探測(cè)多種治療策略(包括使用糖皮質(zhì)激素、 酮康唑、Iisofylline、前列地爾、吸入NO或補(bǔ)充的表面活性劑(5_7))的潛能,迄今為止還沒有治療性藥理學(xué)干預(yù)能夠改進(jìn)ALI/ARDS的臨床結(jié)局。迄今為止,通過實(shí)施與以前使用的高潮氣量相比,采用低潮氣量的最小介入性通氣策略,實(shí)現(xiàn)了 ARDS患者存活的唯一明顯改進(jìn)(S)0在一項(xiàng)最近的實(shí)驗(yàn)研究中,Imai和合作者能夠證明,通過切除一個(gè)氨基酸而將Ang II轉(zhuǎn)化為Ang-(l-7)的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)保護(hù)小鼠免受酸吸入或膿毒癥誘導(dǎo)的嚴(yán)重急性肺損傷(9)。作者將該發(fā)現(xiàn)歸因于以下事實(shí)ACE2將降低Ang II濃度,并因此減少 Ang II型1受體(ATI)的激活。該概念觸發(fā)了一系列研究,所述研究證明了 ATl受體阻斷劑或ACE抑制劑用于治療多種形式的實(shí)驗(yàn)性急性肺損傷的有效性(10-13)。但是,重要的是,ACE2切割A(yù)ng II的產(chǎn)物,即Ang-(1-7),不是血管緊張素途徑的惰性廢物,而是可以施加活性生物功能。Ang-(l-7)結(jié)合于G蛋白偶聯(lián)的受體Mas (14), 其似乎是ATla受體的生理學(xué)拮抗劑(15),并且可能是其它受體的生理學(xué)拮抗劑。因此, Ang-(1-7)與其受體的結(jié)合可能關(guān)鍵地導(dǎo)致以前證明的、血管緊張素途徑中的干預(yù)對(duì)于 ALI/ARDS病理的有益效果。專利US 6,235,766提到了 Ang- (1-7)受體的非肽激動(dòng)劑,并且具體公開了 1-(對(duì)-噻吩基芐基)咪唑?qū)ng-(l-7)受體具有顯著作用,并且模擬效應(yīng)物激素 Ang-(1-7)的生物活性。國(guó)際專利申請(qǐng)WO 2006/128266在控制生殖系統(tǒng)功能的上下文中提到了 Mas受體與Ang-(l-7)或其類似物之間的相互作用。國(guó)際專利申請(qǐng)WO 2007/000036提到了將肽或非肽Mas受體激動(dòng)劑和拮抗劑用作
凋亡活性調(diào)節(jié)劑。國(guó)際專利申請(qǐng)WO 2007/121546提到了肽或非肽Mas受體激動(dòng)劑在調(diào)節(jié)與代謝綜合征或其并發(fā)癥的臨床表現(xiàn)相關(guān)的代謝活性中的用途。我們推斷Ang-(l-7)或相關(guān)激動(dòng)劑可以代表用于治療ALI/ARDS的新的和有前途的策略。因此,本發(fā)明的目的是提供用于ALI/ARDS的基礎(chǔ)病理-生理事件中的藥理學(xué)干預(yù)的手段和方法。發(fā)明概述
通過用于預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的Ang-a-7)受體激動(dòng)劑解決了本發(fā)明的目的。通過采用Ang-a-7)受體激動(dòng)劑預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的方法解決了本發(fā)明的目的。通過Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑在制備用于預(yù)防/或治療受試者中的急性肺損傷的藥物組合物中的用途進(jìn)一步解決了本發(fā)明的目的。通過預(yù)防/或治療急性肺損傷的方法進(jìn)一步解決了本發(fā)明的目的,所述方法是通過給受試者施用Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑。在一個(gè)實(shí)施方案中,Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑是Mas受體激動(dòng)劑。在一個(gè)實(shí)施方案中,Arig-(l-7)受體激動(dòng)劑與Mas受體或與Mas受體相關(guān)的受體相互作用。在一個(gè)實(shí)施方案中,Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑刺激與Mas受體物理相互作用的受體。在一個(gè)實(shí)施方案中,Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑刺激與Mas受體共有藥理學(xué)相似性的受體。在一個(gè)實(shí)施方案中,Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑是與Ang-(1_7)肽共有結(jié)構(gòu)相似性的 Ang II代謝物。在一個(gè)實(shí)施方案中,受體激動(dòng)劑是肽或非肽激動(dòng)劑。在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性Ang-(l-7)肽或是其衍生物或類似物,所述Ang-(1-7)肽包含根據(jù)SEQ ID NO: 1的氨基酸序列Asp1-Arg2-VaI3-Tyr4-Ile '-His6-Pro70在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是Ang-(l-7)肽的衍生物或類似物,所述衍生物或類似物包含氨基酸交換、缺失或插入。優(yōu)選地,所述衍生物或類似物具有保守的或更佳的激動(dòng)特性。在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是Ang-(1-7)肽的衍生物或類似物,所述衍生物或類似物包含根據(jù)SEQ ID NO: 2的氨基酸序列Asp1-Arg2-Val3-Ser4-Ile5-His6-Pro7、根據(jù) SEQ ID NO: 3 的氨基酸序列 Asp1-Arg2-Val3-Tyr4-Ile5-His6-Cys7 或根據(jù) SEQ ID NO: 4 的氨基酸序列 Asp1-Arg2-Val3Ier4-11 e5_Hi S6-Cys7。在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3或SEQ ID NO: 4的氨基酸序列的肽。在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性N0rLeu3-Ang-(l-7)肽或是其衍生物或類似物,所述N0rLeu3-Ang-(l-7)肽包含根據(jù)SEQ ID N0: 5的氨基酸序列Asp1-Arg2-NorLeu3-Tyr4-I Ie5-Hi S6-Pro7。在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性Ang IV肽或是其衍生物或類似物,所述 Ang IV 肽包含根據(jù) SEQ ID N0: 6 的氨基酸序列 Val1-Tyr2-Ile3-His4-Pro5-Phe6tj在一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性Ang III肽或是其衍生物或類似物,所述Ang III肽包含根據(jù)SEQ ID N0: 7的氨基酸序列Arg1-Val2-Tyr3-Ile4-His5-Pr O6-Phe70在一個(gè)實(shí)施方案中,非肽激動(dòng)劑選自1_(對(duì)-噻吩基芐基)咪唑化合物,優(yōu)選是 Ave 0991 (即,5-甲酰-4-甲氧基-2-苯基_1_[ W-[2-(乙基氨基羰基亞磺酰氨基)-5-異
4丁基-3-噻吩基]苯基]甲基]-咪唑)。在一個(gè)實(shí)施方案中,急性肺損傷是急性呼吸窘迫綜合征。在一個(gè)實(shí)施方案中,急性呼吸肺損傷與肺的(直接)或肺外的(間接)肺損傷相關(guān)。在一個(gè)實(shí)施方案中,肺的肺損傷選自吸入性損傷(inhalation trauma)、誤吸性損傷(asp irat ion trauma )、中毒性肺水腫、肺感染,優(yōu)選肺炎、肺挫傷和栓塞。在一個(gè)實(shí)施方案中,肺外的肺損傷與選自下組的病癥相關(guān)膿毒癥、全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)、多發(fā)性損傷(polytrauma)、休克、燒傷、急性胰腺炎、藥物中毒、酗酒、慢性肺疾病、大量輸血、彌散性血管內(nèi)凝血、紅斑和自身免疫性肺疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中,受試者是哺乳動(dòng)物,優(yōu)選人,最優(yōu)選成人。通過用于預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的藥物組合物進(jìn)一步解決了本發(fā)明的目的,所述組合物包含Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑。通過使用包含Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑的藥物組合物來預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的方法進(jìn)一步解決了本發(fā)明的目的。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑是Mas受體激動(dòng)劑。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,受體激動(dòng)劑是肽或非肽激動(dòng)劑。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的Ang-(l-7)肽或是其衍生物或類似物。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID NO: 2,SEQ ID NO: 3或SEQ ID NO: 4的氨基酸序列的肽。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID N0: 5的氨基酸序列的肽或是其衍生物或類似物。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID N0: 6的氨基酸序列的Ang IV肽或是其衍生物或類似物。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQ ID N0: 7的氨基酸序列的Ang III肽或是其衍生物或類似物。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,非肽激動(dòng)劑選自1_(對(duì)-噻吩基芐基)咪唑化合物,優(yōu)選是Ave 0991 (即,5-甲酰-4-甲氧基-2-苯基_1_[ [2-(乙基氨基羰基亞磺酰氨基)-5-異丁基-3-噻吩基]苯基]甲基]-咪唑)。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,急性肺損傷是急性呼吸窘迫綜合征。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,急性肺損傷與肺的(直接)或肺外的(間接)肺損傷相關(guān)。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肺的肺損傷選自吸入性損傷、誤吸性損傷、中毒性肺水腫、肺感染,優(yōu)選肺炎、肺挫傷和栓塞。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,肺外的肺損傷與選自下組的病癥相關(guān)膿毒癥、 多發(fā)性損傷、休克、燒傷、急性胰腺炎、藥物中毒、酗酒、慢性肺疾病、大量輸血、彌散性血管內(nèi)凝血、紅斑和自身免疫性肺疾病。在藥物組合物的一個(gè)實(shí)施方案中,受試者是哺乳動(dòng)物,優(yōu)選人,最優(yōu)選成人。在一個(gè)實(shí)施方案中,藥物組合物配制用于腸胃外或腸施用,優(yōu)選用于通過吸入、輸注或注射的途徑腸胃外施用。也考慮配制用于口服、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、局部、經(jīng)皮、直腸、陰道、肺、鼻內(nèi)、頰內(nèi)或舌下施用的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中,藥物組合物配制為片劑、丸劑、膠囊、顆粒、糖漿、噴霧、氣溶膠、脂質(zhì)體組合物、軟膏、栓劑、植入物、藥膏或緩釋制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中,藥物組合物進(jìn)一步包含一種或多種藥理學(xué)惰性的和藥學(xué)可接受的賦形劑,如聚合物載體、崩解劑、潤(rùn)滑劑、溶劑或溶脹劑。術(shù)語(yǔ)“受體激動(dòng)劑”是指能夠激活受體,即引起受體應(yīng)答的試劑。術(shù)語(yǔ)“Ang-(l-7) 受體激動(dòng)劑”是指能夠激活也被Ang-(1-7)激活的受體的試劑。術(shù)語(yǔ)“Mas受體激動(dòng)劑”是指能夠激活G蛋白偶聯(lián)的Mas受體的試劑。作為足夠的受體應(yīng)答,啟動(dòng)了受體下游的直接或間接(由于與Mas物理相互作用的受體)G蛋白介導(dǎo)的信號(hào)傳遞級(jí)聯(lián),導(dǎo)致例如花生四烯酸釋放、PGI2形成、NO形成和/或cGMP產(chǎn)生。由于Ang-(l-7)信號(hào)傳遞被A779 ([D-Ala7-Ang-(1-7) ; Asp1-Arg2-Val3-Tyr4-Ile '-His6-D-Ala7, SEQ ID NO: 8)和 / 或 D-Pro7-Ang-(1-7) (Asp1-Arg2-Val3-Tyr4-Ile5-His 6-D-Pro7, SEQ ID NO: 9阻斷,Ang-(l-7)激動(dòng)劑的進(jìn)一步的特征是其效果被A779和/或 D-Pro7-Ang-(1-7)抑制。也考慮其它的非競(jìng)爭(zhēng)性或競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。術(shù)語(yǔ)“肽激動(dòng)劑”是指包含一個(gè)或多個(gè)肽鍵的化合物。該術(shù)語(yǔ)包含由純肽結(jié)構(gòu)組成的化合物,即,由兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸組成的肽,以及包含肽和非肽結(jié)構(gòu)的化合物。術(shù)語(yǔ)“非肽激動(dòng)劑”是指不包含肽鍵的化合物。優(yōu)選地,所述化合物具有低分子量, 即,是小分子。術(shù)語(yǔ)“衍生物”表示這樣的化合物由于結(jié)構(gòu)修飾,例如,由于一個(gè)原子或一組原子或功能性基團(tuán)被另一個(gè)原子或另一組原子或功能基團(tuán)取代而與另一化合物不同。術(shù)語(yǔ)“類似物”表示在結(jié)構(gòu)或功能上與另一化合物相似的化合物。術(shù)語(yǔ)“外源性Ang-(l-7)”表示在要治療的受試者的身體外產(chǎn)生并且外源性應(yīng)用的 Ang-(1-7)。但這并不排除在例如不治療的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中產(chǎn)生該Ang-(l-7)。通常考慮的是通過生物合成或常規(guī)實(shí)驗(yàn)室合成,例如,固相合成來產(chǎn)生Ang-(1-7)。術(shù)語(yǔ)“內(nèi)源性Ang-(1-7) ”表示該Ang-(l-7)是由要治療的受試者的身體內(nèi)源性產(chǎn)生。Ang-(l-7)的(增加的)內(nèi)源性產(chǎn)生可以是刺激其從Ang II產(chǎn)生的結(jié)果,所述刺激例如通過藥理學(xué)激活A(yù)CE2、通過阻斷ATla受體或通過抑制APA將Ang II降解為Ang III。類似地, 內(nèi)源性Ang-(l-7)產(chǎn)生可以通過刺激其通過NEP從Ang I產(chǎn)生而增加。(增加的)內(nèi)源性產(chǎn)生也可以是基因治療干預(yù)的結(jié)果,所述干預(yù)例如通過超量表達(dá)ACE2或直接產(chǎn)生Ang-(l-7) 或其前體之一的構(gòu)建體。內(nèi)源性產(chǎn)生的Ang-(1-7)的濃度增加也可以由Ang-(1-7)的降解減少導(dǎo)致,所述減少例如是通過藥理學(xué)抑制將Ang-(1-7)降解為Ang-(l-5)的ACE。重組或超量表達(dá)的ACE2將直接增加Ang-(1-7)的濃度,這是通過刺激其從Ang II 的轉(zhuǎn)化。ACE抑制劑將減少Ang-(1-7)降解為Ang-(1_5),而ATla受體阻斷劑將通過提高 ACE2底物利用度來提高Ang-(1-7)水平。進(jìn)一步考慮包含Ang-(1-7)肽序列或化學(xué)結(jié)構(gòu)的分子,例如肽或蛋白?!凹毙苑螕p傷”(ALI)和“急性呼吸窘迫綜合征”(ARDS)是最通常由膿毒癥、肺炎、創(chuàng)傷和/或吸入導(dǎo)致的肺的炎性病癥。炎癥可以局部限于肺,或肺的炎癥可以是全身炎癥過程的一部分。ALI和ARDS的特征在于不存在左房壓升高的情況下的低氧血癥和胸部X-光片上的彌散性浸潤(rùn)。ALI和ARDS的區(qū)別僅僅在于低氧血癥的程度,其中ALI定義為動(dòng)脈氧分壓與吸入氧分壓的比值(Pa02/Fi02) < 300,ARDS定義為I^a02/Fi02 < 200 (16)。診斷是通過臨床表現(xiàn)、ABk (動(dòng)脈血?dú)夥治?和成像研究。治療是采用肺保護(hù)性、低潮氣量機(jī)械通氣、支持療法和基礎(chǔ)病因的治療。發(fā)明詳述
Si顯示了 Ang-(1-7)和非肽Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑AVE0991對(duì)油酸誘導(dǎo)的急性肺損傷中肺MPO活性(
圖1 (A))、濕重與干重比(圖1 (B))、平均動(dòng)脈壓(圖1 (C))和肺血管阻力(圖1(D))的作用。所有數(shù)據(jù)都是來自每組n=6只動(dòng)物的平均值士 SEM;*與對(duì)照相比 ρ <0. 05;#與(^ 相比 p<0. 05。
實(shí)施例動(dòng)物在體重(bw)為 330-360 g 的雄性 Sprague-Dawley 大鼠(Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Germany)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。根據(jù)管理和使用實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物的指導(dǎo) (Institute of Laboratory Animal Resources,1996 年第 7 版)使動(dòng)物接受管理。該研究得到地區(qū)動(dòng)物管理和使用委員會(huì)的批準(zhǔn)。手術(shù)準(zhǔn)備和血液動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)按照以前的描述(17),通過腹膜內(nèi)注射美托咪定 (0. 5 mg/kg bw, Domitor⑨,Dr. Ε. Graeub AG, Basel, Switzerland)、芬太尼(0. 05 mg/ kg bw, JanssenCilag, Neuss, Germany)禾口咪達(dá)唑倉(cāng)(5 mg/kg bw, Dormicum , Roche, Basel, Switzerland)麻醉大鼠。氣管切開術(shù)后,在氣管中插管,并且以80次呼吸/分鐘, 用6 ml/kg Iw的潮氣量建立通氣(高級(jí)動(dòng)物呼吸機(jī)(Advanced Animal Respirator), TSE Systems GmbH, Bad Homburg, Germany)。按照以前的描述(18),將導(dǎo)管(內(nèi)徑 0. 58 mm; Sims Portex Ltd. , Hythe, United Kingdom)引入左頸動(dòng)脈和右頸內(nèi)靜脈,用于監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓(AP)、流體置換(fluid replacement)和藥物送遞。將超聲流動(dòng)探針(flowprobe) (Transonic , Transonic Systems Inc. , Ithaca, UY)置于冠狀動(dòng)脈分支遠(yuǎn)端的升主動(dòng)脈周圍,用于連續(xù)監(jiān)測(cè)心輸出量(C0)。在正中胸廓切開術(shù)后,通過右心室將導(dǎo)管引入肺動(dòng)脈,用于測(cè)量肺動(dòng)脈壓(PAP)。通過軟件包DasyLab 32 (DasyLab, Moenchengladbach, Germany)連續(xù)記錄AP、PAP和CO。假設(shè)恒定左房壓是2 mmHg,肺血管阻力(PVR)計(jì)算為流動(dòng)中的動(dòng)靜脈壓差。實(shí)驗(yàn)組和方案將大鼠隨機(jī)分為4組,每組6只動(dòng)物第1組中的動(dòng)物(對(duì)照)沒有接受任何藥理學(xué)干預(yù)。在第2組(OA)中,在無任何治療的情況下通過在30分鐘的時(shí)間中靜脈內(nèi)輸注0.2 mg/kg油酸(Sigma, Munich, Germany)而誘導(dǎo)ALI。在第3組 (0A+Ang-(l-7))中,如第II組中那樣誘導(dǎo)ALI,并且在ALI誘導(dǎo)后立即開始以每分鐘5 pmol/kg輸注Ang-(l-7)。在第4組(0A+AVE0991)中,如第II組中那樣誘導(dǎo)ALI,并且在 ALI誘導(dǎo)后立即開始以每分鐘500 pmol/kg輸注AVE0991。在另外兩組(每組n=6)中,僅僅測(cè)量了髓過氧化物酶(MPO)活性,其中在ALI誘導(dǎo)后立即開始輸注單獨(dú)的(第5組)或與 Ang-(1-7)組合的(每分鐘5 pmol/kg ;第6組)Ang-(l-7)受體阻斷劑A779 (每分鐘 10 pmol/kg)ο手術(shù)準(zhǔn)備和至少15分鐘的血液動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定后,記錄基線血液動(dòng)力學(xué),并且分析動(dòng) JiCiil^ (RapidLab 348; Chiron Diagnostics GmbH, Fernwald, Germany) 。¢([JB 白勺
積由羥乙基淀粉(6%羥乙基淀粉200/0,6; Fresenius, Bad Homburg, Germany)替換?;€記錄后立即在30分鐘的時(shí)間中在第II-VI組中靜脈內(nèi)輸注0. 2 mg/kg油酸,或在第I組中靜脈內(nèi)輸注等體積的0.9% NaCl。在所有組中,以60分鐘的間隔重復(fù)測(cè)量,最多到總共4 小時(shí),此時(shí)通過放血處死動(dòng)物。原位結(jié)扎右主支氣管后,切除肺,進(jìn)行處理,用于按照下面的描述測(cè)定濕重與干重的比值和髓過氧化物酶(MPO)活性。評(píng)估肺水和炎癥反應(yīng)為了測(cè)定肺水含量,通過采用微波干燥技術(shù)(18)測(cè)量濕重與干重的比值。按照以前的描述(19),通過測(cè)量肺勻漿中的MPO活性分析炎癥細(xì)胞的募集。 簡(jiǎn)言之,通過基于3,3'-5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的光度測(cè)定法來確定MPO活性,與合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,并且表示為單位/克肺組織(U/g)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)表示為平均值士 SEM。通過Kruskal-Wallis檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行檢驗(yàn),得到組間差異。統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性定為p<0. 05。結(jié)果通過以下情況表征油酸誘導(dǎo)的ALI 與對(duì)照相比在4小時(shí)后MPO活性(圖 1(A))、肺濕重與干重的比值(圖1(B))和肺血管阻力(圖1(D))增加而全身動(dòng)脈壓降低 (圖1(C))。如Ang-(1-7)輸注消除了 OA誘導(dǎo)的肺濕重與干重的比值、MPO活性和肺血管阻力的改變這一事實(shí)所證明的,Ang-(l-7)完全阻止了 OA-誘導(dǎo)的ALI發(fā)展。Ang-(l-7)的保護(hù)作用明顯不是歸因于其描述的在全身血管中的血管擴(kuò)張作用,因?yàn)锳ng-(l-7)輸注減輕了 OA輸注的大鼠中的全身低血壓。非肽Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑AVE0991相似地減輕了 OA誘導(dǎo)的ALI。在第4和5組中的另外的MPO分析表明A779對(duì)Mas受體的阻斷加重了 OA 誘導(dǎo)的ALI,并且阻斷了 Ang-(l-7)輸注的挽救作用。結(jié)論本發(fā)現(xiàn)顯示Ang-(l-7)或非肽Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑的輸注在油酸誘導(dǎo)的 ALI的實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭型耆乐沽朔嗡[和炎癥。這種保護(hù)作用是通過G-蛋白偶聯(lián)的受體Mas 介導(dǎo)的,因?yàn)樗贏779阻斷Mas后喪失。內(nèi)源形成的Ang-(1_7)作為抗ALI (其在A779阻斷Mas后加重)的內(nèi)在保護(hù)機(jī)制。參考文獻(xiàn)
1.Rubenfeld GD, Caldwell Ε, Peabody Ε, Weaver J, Martin DP, Neff M, Stern EJ, Hudson LD (2005) Incidence and outcomes of acute lung injury. N Engl J Med 353:1685-1693
2.Zambon M, Vindent J-L (2008) Mortality rates for patients with ALI/ARDS have decreased over time. Chest, Epub ahead of print
3.BachofenM, Weibel ER (1982) Structural alterations of lung parenchyma in the adult respiratory distress syndrome. Clin Chest Med 3:35-56
4.Ware LB, Matthay MA (2000) The acute respiratory distress syndrome. N Engl J Med 342:1334-1349
5.Steinberg KP, Hudson LD, Goodman RB, Hough CL, Lanken PN, Hyzy R, Thompson BT, Ancukiewicz M; National Heart, Lung, and Blood Institute Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) Clinical Trials Network (2006) Efficacy and safety of corticosteroids for persistent acute respiratory distress syndrome. N Engl J Med 354:1671-1684.
6.The Acute Respiratory Distress Syndrome Network (2002) Randomized, placebo-controlled trial of lisofylline for early treatment of acute lunginjury and acute respiratory distress syndrome. Crit Care Med 30:1-6.
7.The Acute Respiratory Distress Syndrome Network (2000) Ketoconazole for early treatment of acute lung injury and acute respiratory distress syndrome: a randomized controlled trial. JAMA 283:1995-2002
8.The Acute Respiratory Distress Syndrome Network (2000) Ventilation with lower tidal volumes as compared with traditional tidal volumes for acute lung injury and the acute respiratory distress syndrome. N Engl J Med 342:1301-1308
9.Imai Y,Kuba K,Rao S,Huan Y,Guo F,Guan B,Yang P,Sarao R,Wada T, Leong-Poi H,Crackower MAj Fukamizu A,Hui CCj Hein L,Uhlig S,Slutsky AS, Jiang C, Penninger JM (2005) Angiotensin-converting enzyme 2 protects from severe acute lung failure. Nature 436:112-116.
10.Wosten-van Asperen RMj Lutter R,Haitsma JJj Merkus MP, van Woensel JBj van der Loos CM, Florquin S,Lachmann B,Bos AP (2008) ACE mediates ventilator-induced lung injury in rats via angiotensin II but not bradykinin. Eur Respir J 31:363-371.
11.Yao S,F(xiàn)eng D,Wu Q, Li K,Wang L (2008) Losartan attenuates ventilator-induced lung injury. J Surg Res 145:25-32.
12.He X,Han B,Mura M,Xia S,Wang S,Ma T,Liu M,Liu Z (2007) Angiotensin-converting enzyme inhibitor captopril prevents oleic acid-induced severe acute lung injury in rats. Shock 28:106-11.
13.Jiang JSj Wang LFj Chou HCj Chen CM (2007) Angiotensin-converting enzyme inhibitor captopril attenuates ventilator-induced lung injury in rats. J Appl Physiol 102:2098-2103.
14.Santos RAj Simoes e Silva AC, Marie C, Silva DM, Machado RPj de Buhr I,Heringer-Walther S,Pinheiro SVj Lopes MTj Bader M,Mendes EPj Lemos VSj Campagnole-Santos MJj Schultheiss HP, Speth R, Walther T (2003) Angiotensin-(1-7) is an endogenous ligand for the G protein-coupled receptor Mas. Proc Natl Acad Sci USA 100:8258-8263.
15.KostenisE, Milligan G, ChristopouIos A, Sanchez-Ferrer CF, Heringer-Walther S, Sexton PMj Gembardt F, Kellett E, Martini L, Vanderheyden P, Schultheiss HP, Walther T (2005) G-protein-coupled receptor Mas is a physiological antagonist of the angiotensin II type 1 receptor. Circulation 111:1806-1813.
16.MatthayMA (1999) Acute lung injury: conference summary. Chest 116:119S - 126S.
17.TabuchiA, Mertens M, Kuppe H, Pries ARj Kuebler WM (2008) Intravital microscopy of the murine pulmonary microcirculation. J Appl Physiol 104:338-346.
18.Hentschel T,Yin N,Riad A,Habbazettl H,Weimann J,Koster A,TschopeC, Kuppe H, Kuebler WM (2007) Inhalation of the phosphodiesterase-3 inhibitor milrinone attenuates pulmonary hypertension in a rat model of congestive heart failure. Anesthesiology 106:124-131.
19. Kuebler WMj Abels C, Schuerer L, Goetz AE (1996) Measurement of neutrophil content in brain and lung tissue by a modified myeloperoxidase assay. Int J Microcirc Clin Exp 16:89-97.
權(quán)利要求
1.用于預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的Ang-a-7)受體激動(dòng)劑。
2.權(quán)利要求1的受體激動(dòng)劑,其中所述受體激動(dòng)劑是Mas受體激動(dòng)劑。
3.權(quán)利要求1或2的受體激動(dòng)劑,其中所述受體激動(dòng)劑是肽或非肽激動(dòng)劑。
4.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性Ang-(l-7)肽或是其衍生物或類似物,所述Ang-(1-7)肽包含根據(jù)SEQ ID NO: 1的氨基酸序列。
5.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述肽激動(dòng)劑是包含根據(jù)SEQID NO: 2,SEQ ID NO: 3或SEQ ID NO: 4的氨基酸序列的肽。
6.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性NorAng-a-7)肽或是其衍生物或類似物,所述NorAng-(1-7)肽包含根據(jù)SEQ ID NO: 5的氨基酸序列。
7.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性AngIV肽或是其衍生物或類似物,所述Ang IV肽包含根據(jù)SEQ ID NO: 6的氨基酸序列。
8.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述肽激動(dòng)劑是外源性或內(nèi)源性AngIII肽或是其衍生物或類似物,所述Ang III肽包含根據(jù)SEQ ID NO: 7的氨基酸序列。
9.權(quán)利要求3的受體激動(dòng)劑,其中所述非肽激動(dòng)劑選自1_(對(duì)-噻吩基芐基)咪唑化合物,優(yōu)選是Ave 0991。
10.權(quán)利要求1-9的任一項(xiàng)的受體激動(dòng)劑,其中所述急性肺損傷是急性呼吸窘迫綜合征。
11.權(quán)利要求1-10的受體激動(dòng)劑,其中所述急性肺損傷與肺的或肺外的肺損傷相關(guān)。
12.權(quán)利要求11的受體激動(dòng)劑,其中所述肺的肺損傷選自吸入性損傷、誤吸性損傷、中毒性肺水腫、肺感染,優(yōu)選肺炎、肺挫傷和栓塞。
13.權(quán)利要求11的受體激動(dòng)劑,其中所述肺外的肺損傷與選自下組的病癥相關(guān)膿毒癥、多發(fā)性損傷、休克、燒傷、急性胰腺炎、藥物中毒、酗酒、慢性肺疾病、大量輸血、彌散性血管內(nèi)凝血、紅斑和自身免疫性肺疾病。
14.權(quán)利要求1-13的任一項(xiàng)的受體激動(dòng)劑,其中所述受試者是哺乳動(dòng)物,優(yōu)選人,最優(yōu)選成人。
15.用于預(yù)防和/或治療受試者中的急性肺損傷的藥物組合物,其包含權(quán)利要求1-14 的任一項(xiàng)的Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療急性肺損傷,優(yōu)選急性呼吸窘迫綜合征的肽或非肽血管緊張素-(1-7)(Ang-(1-7))受體激動(dòng)劑,優(yōu)選Mas受體激動(dòng)劑。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102164614SQ200980135629
公開日2011年8月24日 申請(qǐng)日期2009年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月12日
發(fā)明者瓦爾特 T., 庫(kù)布勒 W. 申請(qǐng)人:柏林夏洛蒂醫(yī)科大學(xué)