專利名稱：多種化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及血管破壞劑的前體藥物，并涉及這些化合物在癌癥靶向治療上的用 途。
背景技術：
將腫瘤血管靶向為癌癥治療的分子生物學方法正在成為最高端的科學研究重點 之一。兩種藥物模式將合并，也就是，一種模式是避免在腫瘤中新血管的形成(抗血管生 成)，而另一種模式是破壞靶向血管。即使破壞一小部分腫瘤血管，已經(jīng)被證實會誘導寬范圍的腫瘤死亡和轉移遲緩， 因為單個血管是負責支持許多腫瘤細胞的生存的。作為形成血管的主要成分，內(nèi)皮細胞是 高度依賴于供它運動、浸潤、附著、排列和增殖的微管骨架((Denekamp，J, Br J Cancer, 45，136-139 (1982) )0因此，能破壞內(nèi)皮微管網(wǎng)絡的試劑可導致腫瘤血流的快速崩解和 延長血管關閉的時間，刺激廣泛的腫瘤細胞凋亡(Tozer et al.，Nat Rev Cancer, 5， 423-435 (2005)； Lippert Jff, Bioorg Med Chem, 15， 605-615 (2007)) 癌癥治療藥物的一個最有效類別是血管破壞劑(VDAs)，它們在體外有顯著好的 細胞毒性，但通常也顯示出在體內(nèi)對殺滅腫瘤的弱特異性(相對于正常組織)。而且，許多 VDAs，例如微管蛋白結合劑，是水不溶性的，并需要在臨床評價之前制備為劑型。本發(fā)明的 目標是處理上述的這些問題。秋水仙堿和它的類似物都是有效的VDAs，可在腫瘤中導致出血，繼而廣泛凋亡 (Tozer et al. , Nat Rev Cancer, 5，423-435 (2005))，作為一種微管蛋白結合的直接結 果，并誘導微管解聚(Oiaudri et al.，J Mol Biol, 303, 679-692 (2000) )0 然而，秋水 仙堿未顯示出作為一種可臨床應用的抗癌治療劑的內(nèi)在價值，因為其高水平的毒性和由此 產(chǎn)生的非常窄的治療指數(shù)(Tozer et al. , Nat Rev Cancer, 5，423-435 (2005) ； Quinn et al. , J Med Chem, 24，636-639 (1981))。因此，能使諸如秋水仙堿等VDA選擇性地靶 向于腫瘤是人們所期望的。本發(fā)明的發(fā)明人已開發(fā)出一種系統(tǒng)，用于克服在特定血管破壞劑內(nèi)的有效抗癌劑 的全身用藥的毒性反應。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是基于(至少是部分)蛋白裂解位點的選擇，這使得能在腫瘤血管選擇性地 釋放血管破壞劑，例如秋水仙堿。根據(jù)本發(fā)明的第一個方面，提供了一種化合物，或者它的在藥學上可接受的鹽，包 括與MMP蛋白裂解位點相關聯(lián)的血管破壞劑(VDA)。術語“相關聯(lián)(associated with)”在 本發(fā)明的內(nèi)容中是指包括所有直接和間接的聯(lián)接手段，通常是共價的，包括但不限于化學 交聯(lián)或肽鍵聯(lián)接。本發(fā)明所述的化合物可以是鹽的形式。特別地，這些鹽可以是藥學上可接受的鹽。本說明書所述的藥學上可接受的鹽可以是從母化合物中合成的，該母化合物包含由傳統(tǒng)化 學方法制備的堿性或酸性部分。通常，這些鹽可以通過這些化合物的游離酸或堿形式與化 學計算量的合適的堿或酸在水或有機溶劑中進行反應而得到，或者混合上述兩種反應而得 到。通常，非水介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈，都是優(yōu)選的。合適鹽的列表可在 Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed. , Mack Publishing Company, Easton, Pa., US, 1985，p. 1418中找到，該說明書在此整體引入作為參考。還可參見Mahl et al, Eds, “H禾口book of Pharmaceutical Salts Properties Selection 禾口 Use，，， Verlag Helvetica Chimica Acta 和 ffiley-VCH, 2002。因此，本說明書包括所揭示的化合物在藥學上可接受的鹽，其中，母化合物是通過 制成它們的酸鹽或堿鹽來被修飾。例如，從無機或有機酸或堿形成傳統(tǒng)的非毒性鹽或季銨 鹽。這樣的酸添加鹽的例子包括醋酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯 磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟磺酸鹽、環(huán)戊丙酸鹽、葡萄糖酸鹽、十二烷 基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、脲硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，鹽 酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，2"羥乙基磺酸鹽，乳酸鹽，馬來酸鹽，磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸 鹽，草酸鹽，羥萘酸鹽、梳狀鹽，過硫酸鹽，3-苯丙酸鹽，苦味酸鹽，三甲基乙酸鹽，丙酸鹽、琥 珀酸鹽、酒石酸鹽，甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。堿性鹽包括銨鹽，諸如鈉和鉀等堿金屬鹽，諸 如鈣和鎂等堿土金屬鹽，諸如二環(huán)己胺鹽、N-甲基-D-葡萄糖胺鹽等帶有機堿的鹽，帶有如 精氨酸、賴氨酸的氨基酸鹽，等。同時，堿性含氮基團可以被季銨化，帶有較低烷基鹵化物的 試齊U，例如，甲基、乙基、丙基和丁基氯，溴化物和碘化物；烷基硫酸鹽，例如二甲基、二乙酯、 二丁酯；以及二戊硫酸鹽，長鏈鹵化物，例如癸、月桂、十四酸和硬脂氯化物，溴化物和碘化 物，如苯和苯溴芳烷基鹵化物，以及其他。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，提供了式(I)的化合物 X-Y (I)
其中，X是血管破壞劑(VDA ) ； Y是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP )蛋白裂解位點。根據(jù)本發(fā)明所述的化合物提供了前體藥物，在腫瘤環(huán)境中通過過度表達ΜΜΡ，這些 前體藥物可被轉變?yōu)榛钚院陀行У腣DA。腫瘤對于本發(fā)明所述的前體藥物的選擇性活化會 增加腫瘤水平而降低系統(tǒng)水平，可選地添加活性成分，因而大為增強它們的治療指數(shù)和效率。VDA包括多環(huán)系統(tǒng)，例如融合的或未融合的雙環(huán)或三環(huán)系統(tǒng)。因此，X包括VDA的 任意多環(huán)系統(tǒng)，它能結合并破壞腫瘤血管。VDA可被劃分為三類
(i)在微管蛋白的秋水仙堿結合位點與微球蛋白相互作用的那些化合物；
(ii)在微管蛋白上與長春花生物堿在微管蛋白上共享公共的結合位點的那些化合
物；
(iii)以類似于紫杉醇的方式促進穩(wěn)定的微管的形成，一個新的紫杉烷二萜從太平洋 紫杉樹皮中分離出來。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，VDA是微管蛋白結合劑。該微管蛋白結合劑可選 自i)在秋水仙堿結合位點與微球蛋白相互作用的那些化合物，包括但不限于秋水仙堿 (包括秋水仙堿的類似物，例如N-乙?；锼纱?0-磷酸(ZD6126 )，以及ABT-751)、colchicinoids、考布他汀phenstatin、鬼白毒素、五力口前古月月旨素、amphethinile禾口二苯乙 烯；以及ii)與微管蛋白的長春花結合位點相互作用的那些化合物，包括但不限于長春新 堿，長春堿，長春氟寧，美登醇，phomopson A、根瘤菌素、auristatin (包括它的類似物)和 多拉司他汀。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，VDA是一種微管蛋白結合劑，在微管內(nèi)的秋水仙堿結合 位點相互作用。在本發(fā)明的一個實施例中，該VDA是秋水仙堿或者它的類似物或衍生物。秋 水仙堿的類似物或衍生物可包括但不限于aza去甲基秋水仙堿、aza秋水仙堿、N-甲基去 乙基秋水仙堿、去乙基秋水仙堿。在本發(fā)明的一個實施例中，VDA是非多肽的VDA。例如，根據(jù)本發(fā)明所述的VDA可 以是一種微管蛋白結合劑，該接合劑不是auri statin或者它的衍生物?？蛇x地，所述VDA可以是一種微管蛋白結合劑，選自但不限于考布他汀(例如，考 布他汀A-4 3-0-磷酸)，auristatin (包括它的類似物)，多拉司他汀和黃酮類(例如，腫瘤 凋亡因子α和5，6—二甲基咕噸酮一4一乙酸(01^^4)、黃酮醋酸斤4々))。因此，在本發(fā)明 的可選實施例中，所述VDA是考布他汀。本發(fā)明包括MMP家族的任意成員。在所述MMP裂解位點進行蛋白裂解，通過一個 MMP釋放所述VDA，以及任意其他與該MMP裂解位點相關聯(lián)的活性劑，以其活性形式釋放。MMP家族可劃分為八個結構組其中五個是分泌型ΜΜΡ，另三個是膜型MMP (MT-MMP)0 MT-MMP是位于細胞表面。本發(fā)明包括分泌型MMP與膜型MMP。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，所述MMP是膜型ΜΜΡ(ΜΤ-ΜΜΡ)。因此，本發(fā)明提供了一
種式I的化合物，其中，Y包括多肽序列，它是由MT-MMP選擇性裂解而來。該MT-MMP可選 自
(i)I型轉膜型 MT-MMP，例如 MMP-14 (MT1_MMP)、MMP_15 (ΜΤ2_ΜΜΡ)、ΜΜΡ_16 (ΜΤ3-ΜΜΡ) 和 ΜΜΡ-24 (ΜΤ5-ΜΜΡ)；
(ii)糖基化磷脂酰肌醇(GPI)錨定型MT-MMP，例如MMP-17(MT4-MMP)和MMP-25 (MT6-MMP)；
(iii)II 型轉膜型 MT-MMP，例如 MMP-23。所述MMP裂解位點可包括任意多肽序列，該序列具有可被一個MMP裂解的一個氨 基鍵，典型的是一個肽鍵。優(yōu)選地，Y是一個包括2至20個氨基酸的多肽序列，例如，具有6 至10個氨基酸(例如，6、7或8個氨基酸)。這些氨基酸可以是D-氨基酸或者L-氨基酸。所述MMP蛋白裂解位點可包括以下序列
(i)P3，-P2，-P1，-P1-P2-P3
其中，ΡΓ到P3’與Pl到P3是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間的 鍵上發(fā)生蛋白裂解。優(yōu)選地，該MMP蛋白裂解位點是MT-MMP特異性裂解位點，以致在ΡΓ 與Pl之間由MT-MMP (例如MT-MMP14)選擇性發(fā)生裂解。所述MMP蛋白裂解位點可包括以下序列
(ii)P3，-P2，-ΡΓ -P1-P2-P3-P4
其中，ΡΓ到P3’與Pl到P4是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間發(fā)
生蛋白裂解。所述MMP蛋白裂解位點可包括以下序列(iii)P4，-P3，-P2，_ΡΓ -Ρ1-Ρ2-Ρ3-Ρ4
其中，ΡΓ到Ρ4’與Pl到Ρ4是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間發(fā)
生蛋白裂解。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，Pl與ΡΓ是不同的。優(yōu)選地，所述MMP裂解位點包括可由MT-MMP選擇性裂解的多肽序列。因此，本發(fā) 明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i)、序列(i i)或序列(i i i)，其 中，ΡΓ是疏水氨基酸。這里所采用的術語“疏水”是指具有疏水性大于或等于-1.10和/ 或凈電荷大于或等于0的氨基酸，正如在Fauchere和Pliska Eur. J. Med Chem. 10:39 (1983)中所描述。疏水性或非極性氨基酸也可指具有側鏈是在生理PH下不帶電荷的氨基 酸，是非極性的，通常是由水溶液所排斥。疏水性氨基酸可選自亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、 丙氨酸、色氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和酪氨酸。Ρ?？梢允菐в兄咀鍌孺湹?氨基酸?？蛇x地，Ρ?？梢允菐в蟹枷阕鍌孺湹陌被?。ΡΓ也可以包括非天然的疏水氨基 酸，例如苯基丁氨酸(Hof·)。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或 序列(iii)，其中，Pl是極性氨基酸，例如選自天冬酰胺(N)、絲氨酸(S)或甘氨酸。為改善 MT-MMP在所述裂解位點的選擇性，Pl優(yōu)選地不是脯氨酸。因此，在本發(fā)明的一個實施例中， Pl是除了脯氨酸之外的氨基酸。在本發(fā)明的進一步實施例中，Pl是甘氨酸。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或 序列(iii)，其中，P2’是選自極性、不帶電荷的氨基酸和/或堿性氨基酸，例如精氨酸(R)、 丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、天冬氨酸(D)、酪氨酸(Y)、蘇氨酸(T)、絲氨酸(S)和脯氨酸(P)。為 改善MT-MMP在所述裂解位點的選擇性，P2’可以是甲基氨基酸，例如N-甲基酪氨酸。本發(fā) 明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)當P2’是酪氨酸時，可由非MT-MMP (例如MMP2)在包括ΡΓ -P2’與P2’ -P3’ 位點發(fā)生裂解。因此，在本發(fā)明的一個實施例中，P2’不是酪氨酸。正如這里所采用的，P3'殘基可包括任意氨基酸。在本發(fā)明的一個實施例中，P3' 是亮氨酸(L)。無論在哪里，P4'殘基可包括帶有親核側鏈的氨基酸，例如賴氨酸(L)、半胱 氨酸(C)、絲氨酸(S)、酪氨酸(Y)、蘇氨酸(T)、谷氨酸(E)或天門冬氨酸(D)。 本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或 序列(iii)，其中，P2是選自酸性氨基酸(例如谷氨酸)，堿性、疏水或極性氨基酸。P2也可 包括非天然疏水氨基酸，例如瓜氨酸(Cit)。為改善MT-MMP在所述裂解位點的選擇性，P2 優(yōu)選地不是脯氨酸。因此，在本發(fā)明的一個實施例中，P2是除了脯氨酸之外的氨基酸。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或 序列(iii)，其中，P3是極性氨基酸，例如選自甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、絲氨酸(S)、亮氨酸 (L)、異亮氨酸(I)和蘇氨酸(T)。優(yōu)選地，P3不是脯氨酸。因此，在本發(fā)明的一個實施例中， P3不是脯氨酸。在本發(fā)明的進一步實施例中，P3是絲氨酸。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(ii)或序列 (iii)，其中，P4是包含實質(zhì)側鏈的氨基酸，例如在它的側鏈上具有堿性基團的氨基酸，選 自精氨酸(R)和賴氨酸(K)。為改善MT-MMP在所述裂解位點的選擇性，P4優(yōu)選地是精氨 酸。因此，在本發(fā)明的一個實施例中，P4是精氨酸。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或序列(i i i )，其中，沒有一個殘基是脯氨酸，而P4是精氨酸。Pl到P3或P4的每個殘基可以是不同的?？蛇x地，P1’到P3’或P4’的每個殘 基也是不同的。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i )、序列(i i )或 序列(iii)，其中，Pl和/或P2和/或P3是除了脯氨酸之外的氨基酸。而且，在本例中，P4 是精氨酸。本發(fā)明的進一步實施例中提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i)、序列(ii) 或序列(iii)，其中，ΡΓ是疏水氨基酸，而Pl和/或P2和/或P3是除了脯氨酸之外的氨基酸。本發(fā)明的進一步實施例中提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(ii)或序列 (士^)，其中沖1’是疏水氨基酸，而P4是精氨酸。而且，在本例中，Pl和/或P2和/或P3 是除了脯氨酸之外的氨基酸。在另一個實施例中，ΡΓ是苯基丁氨酸。在更進一步或更優(yōu)選的實施例中，Pl是甘氨酸。所述MMP蛋白裂解位點Y可以包括氨基酸序列(iv) -Hof-Gly- (iv)
所述MMP蛋白裂解位點Y可以包括氨基酸序列(ν)
-P2， -Hof-Gly-P2- (ν)
其中，Ρ2和Ρ2’是如上述所定義的。所述MMP蛋白裂解位點Y可以包括氨基酸序列(vi) -Ρ2， -Hof-Gly-P2-P3-P4- (vi)
其中，P2’到P4’和P2’是如上述所定義的。優(yōu)選地，P4是精氨酸，P3不是脯氨酸。本發(fā)明的一個實施例中提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列-Leu-Tyr-Hof-Gly-Cit-Ser—Arg-o本發(fā)明的進一步實施例中提供了式(I)的化合物，其中Y不包括序列-Leu-Gly-Leu-Pro-，其中，在Leu-Gly殘基間發(fā)生裂解。本發(fā)明可提供式(I)的化合物，其中蛋白裂解位點Y包括氨基酸序列，其中，在該 序列中的一個或多個氨基酸是糖基化的，以增強疏水性以至溶解性。殘基的糖基化可以是 以下方式
序列中氨基酸的0-糖基化，通過側鏈的絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸； 序列中氨基酸的N-糖基化，通過側鏈的天門冬氨酸、谷氨酸；和/或 序列中氨基酸的S-糖基化，通過側鏈的半胱氨酸。本發(fā)明可提供式(I)的化合物，其中蛋白裂解位點Y包括氨基酸序列，其中，在該 序列中的一個或多個氨基酸是磷酸化的，以增強疏水性以至溶解性。合適的氨基酸包括絲 氨酸、蘇氨酸、酪氨酸。在本發(fā)明的一個實施例中，提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列 (i)、序列(ii)或序列(iii)，其中，P2’是磷酸化的，例如酪氨酸。本發(fā)明的進一步實施例中提供了式(I)的化合物，其中Y包括序列(i)、序列(ii) 或序列(iii)，其中，P3 (可選的P2’ )是磷酸化的氨基酸。本發(fā)明還提供了式(I)的化合物，其中蛋白裂解位點Y包括多肽類似物，例如模擬肽，例如，通過用烯鍵取代氨基鍵、用Na -和/或Ca -甲基氨基酸、非天然氨基酸取代，以 及本領域已知的其他途徑。這些擬肽方法是本領域常用的，以便增強裂解的特異性，因而用 作減少不想要的酶的水解。在本發(fā)明的一個實施例中，Y包括類似物，在該氨基酸序列內(nèi)的 一個或多個氨基酸是以N a -和/或C a -甲基氨基酸取代的。本發(fā)明的一個實施例中包括式(I)的化合物，其中Y包括C-端和N-端，其中C-端 是直接或間接連接到X，而N-端是直接或間接連接到另一半，例如下面所述的C或Z。本發(fā)明的一個可選實施例包括式(I)的化合物，其中Y包括C-端和N-端，其中 N-端是直接或間接連接到X，而C-端是直接或間接連接到另一半，例如下面所述的c或Z。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中包括式(I)的化合物，其中X是秋水仙堿或其類似 物，而￥是多肽，包括這里所定義的序列(1)、(^)、(1^)、(")、(0或(&)。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，提供了式(II)的化合物 X-Y-c (II)
其中，X和Y如上述所定義；
c是末端基團或“加帽基團”。加帽基團可以是用于對藥用的肽鏈加帽，以便避免多肽 的非特異性降解，例如，在除了 MMP之外的其他酶作用下發(fā)生降解。c可以包括在N-端或 C-端的任意合適部分，用作阻斷基團，選自但不限于脂肪烴、芳烴、多環(huán)芳烴、碳水化合物 (例如，單糖)和氨基酸(包括D-氨基酸)。為改善溶解性，c可以是疏水基團，例如上述的任 意附加的極性功能基團(例如，酸、胺、醇、酚)。c可以由式(C)n表示，其中，η是1至5的整數(shù)。在本發(fā)明的一個實施例中，c是 由式(c)n表示，其中，c是氨基酸(例如，非天然氨基酸)而η是3。在本發(fā)明的一個實施例 中，c不是是絲氨酸，而η是3。在進一步的實施例中，c不是是絲氨酸或者奎尼酸。本發(fā)明進一步可提供“連接物(linker)”。該連接物可以是被提供在Y的C端和 /或N端。優(yōu)選地，該連接物是被提供在Y的C端。該連接物可以包括與Y相關聯(lián)的任意 部分，該部分可被化學去除、酶去除或者自發(fā)分解。該連接物可以包括單個氨基酸(例如，酪 氨酸)或者可包括氨基酸序列。當該連接物包括氨基酸序列時，該許可可提供一疏水區(qū)，可 便于由MMP在Y上進行裂解。在序列中合適氨基酸(也就是，絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸)的 0-糖基化可增強疏水性以致溶解性。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，提供了式(III)的化合物 X - a - Y (III)
其中，X和Y如上述所定義；以及 A是連接物，其中，該連接物是直接或間接與X相關聯(lián)。在本發(fā)明的一個實施例中，提供了式(IV)的化合物 X - a - Y - c (IV)
其中，X、a、Y和c是如上述所定義的。在本發(fā)明的進一步的優(yōu)選方面，提供了“間隔物(spacer)”，它可以與這里所述的 連接物相同或不同。該間隔物可被提供在Y的C端和/或N端。優(yōu)選地，該間隔物被提供 在Y的N端，用作避免在合成過程中c的不想要的移除。該間隔物可以直接或間接與Y相 關聯(lián)。該間隔物可包括單個氨基酸(例如β-丙胺酸)、氨基酸序列、琥珀酰基團。因此，本 發(fā)明優(yōu)選地提供了式(V)的化合物X - Y - b - c (V) 其中，X、Y和c是如這里所定義的； b是如這里所定義的間隔物。在本發(fā)明的進一步實施例中，提供了式(VI)的化合物 X-a-Y-b-c (VI)
其中，X、Y、a和b是如這里所定義的。在本發(fā)明的一個實施例中，提供了式(VI)的化合物，其中X是秋水仙堿(或其類似 物)，￥是多肽，包括這里所定義的氨基酸序列(0、(^)、(1^)、(")、(0或(^)，而3是 酪氨酸，b是丙胺酸。在本發(fā)明的第二個方面，提供了式(VII)的化合物或者它的藥學上可接受的鹽 X-Y-Z(VII)
其中，X和Y是如這里所定義的；Z是抗癌劑。優(yōu)選地，Z是抗癌劑，選自與X是相同或不同的血管破壞劑、抗代謝物(例如，5-氟 尿嘧啶)、細胞毒性劑或抗增殖劑(例如，蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素)、長春堿、taxane、細 胞毒素核苷)、生物毒素、放射治療劑和激素劑或者已知的可誘導生物毒性、細胞毒性、抗血 管生成或破壞血管效應的任意天然產(chǎn)物或試劑。在本發(fā)明的進一步優(yōu)選方面，提供了式(VIII)的化合物 X - a - Y - Z(VIII)
其中，X、a、Y和Z是如這里所定義的。在本發(fā)明的進一步優(yōu)選方面，提供了式(IX)的化合物 X-a-Y-b-Z(IX)
這里，X、a、Y、b和Z是如這里所定義的。在本發(fā)明的這個方面，間隔物b的目的是將 Y的N-端氨基轉變?yōu)轸人幔栽试S化合物Z的附著，其中，Z負載游離氨基(例如，Z是阿霉 素)。這里，Z負載游離羧酸，而b不需要。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，提供了式(VII)的化合物，其中，X是秋水仙堿或者其 衍生物，例如aza去甲基秋水仙堿，而Z是細胞毒性劑，例如阿霉素。優(yōu)選地，Y仍是多肽， 包括這里所定義的氨基酸序列(1)、(^)、(^1)、(&)、(0或(“)。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，提供了式(VII)的化合物，其中，X和Z是選自秋水仙 堿或者其類似物或衍生物。也提供了本發(fā)明所述的化合物，其中X和Z可以都是秋水仙堿。 在這個方面，￥可以是多肽，包括這里所定義的氨基酸序列(0、(^)、(^0、(&)、(0或 (vi)。根據(jù)本發(fā)明所述的化合物可以由固相法制備，例如，附著到聚合支持物，也可以由 液相合成，例如，在偶聯(lián)劑存在下，或者采用收斂合成。因此，本發(fā)明的進一步方面提供了一種制備根據(jù)本發(fā)明所述的化合物的方法，所 述方法包括以下步驟
i)提供附著于X的固體支持物；
ii)可選地將連接物a附著到X的C端或N端；
iii)將氨基酸殘基分步附著到X的C端或N端，或者附著到在步驟(ii)已附著X的連 接物a上，以提供包含MMP蛋白裂解序列的多肽序列Y ；iv)可選地將加帽基團c分別附著到Y的C端或N端。在一種優(yōu)選的方法中，該固體支持物是任意聚合支持物，例如，任意的聚苯乙烯基 樹脂或者PEG基樹脂(例如，三苯甲游基樹脂)。所述連接物可以是琥珀酸鹽或者丙二酸衍 生物，例如琥珀酰酐。本發(fā)明的進一步方面提供了一種制備根據(jù)本發(fā)明所述的化合物的方法，所述方法 包括以下步驟
i)制備多肽序列Y;
ii)將加帽基團c分別附著到Y的C端或N端；
iii)在偶聯(lián)劑存在下制備X與在步驟(ii)中已制備的加帽的多肽的溶液，分離想要的 化合物。在優(yōu)選的方法中，Y是通過將氨基酸分步附著到固體支持物上以提供多肽序列?？?選地，序列Y可以是在溶液中合成的。本領域已知的任意偶聯(lián)劑都可被用于本發(fā)明所述的方法，例如，在合適溶劑(例如 DMF、THF 等)中的 EDAC、DCC、DiC、PyBOP, HCTU 等。在可選的液相合成中，序列Y的C-端的一個或多個氨基酸可以是在溶液中被結合 到X，以使得該多肽序列的剩余殘基(例如，如前所述的在固體支持物上的預合成物)在溶液 中以收斂合成方式而被結合。本發(fā)明所述的優(yōu)選方法提供了將X附著到Y的C末端。而且，該方法可包括將Z 附著到Y的N末端。例如，該方法可包括以下步驟
i)將一個氨基基團引導到X，用于附著到Y的C末端；并可選地
ii)將一個羧酸基團(或異硫氰酸鹽或異氰酸鹽基團)引導到Z，用于附著到Y的N末端。進一步的方法提供用于將X附著到Y的N末端。同時，該方法也包括將Z附著到 Y的C末端。例如，該方法可包括以下步驟
i)將一個羧酸基團(或異硫氰酸鹽或異氰酸鹽基團)引導到X，用于附著到Y的N末端； 并可選地
ii)將一個氨基基團引導到Z，用于附著到Y的C末端。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方法中，X是秋水仙堿或者其類似物或衍生物，例如aza去甲 基秋水仙堿，而Z是細胞毒素劑，例如阿霉素。在本發(fā)明的進一步方面，提供了 MMP蛋白裂解位點的用途，尤其是這里所定義的 MT-MMP特異性裂解位點在VDA的位點特異性活化作用中的用途。這里所采用的術語“位點 特異性活化作用，，通常是指(但不限于)VDA通過在MMP蛋白裂解位點上的位點特異性裂解 而被活化。在蛋白裂解位點上的位點特異性裂解被期待為與VDA的釋放一同發(fā)生，因而使 VDA活化。藥物成分與用途
在本發(fā)明的其他方面，提供了前面所述的化合物或其在藥學上可接受的鹽用作藥物的 用途。在進一步的方面，提供了包括前面所述的化合物的藥物制劑。該制劑可包括至少一 種附加的在藥學上可接受的成分，例如賦形劑、稀釋劑或載體。優(yōu)選地，該制劑是用于腸胃 外注射用藥的。
本發(fā)明提供了 一種包括根據(jù)本發(fā)明所述的化合物的藥物制劑。在一個優(yōu)選實施例 中，該化合物是式(VII)的化合物。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，所述成分包括藥學上可接受的載體或稀釋液。本發(fā)明所述的成分通常是以有效量用藥的?！坝行Я俊笔侵冈摮煞謫为毣蚺c進一 步劑量一起的量產(chǎn)生想要的反應。當用藥時，本發(fā)明所述的藥物成分是以藥學上可接受的 制備物來用藥的。這些制備物通?？砂ㄋ帉W上可接受濃度的鹽、緩沖劑、防腐劑、兼容載 體，以及可選的其他治療劑(例如，順鉬、卡鉬、環(huán)磷酰胺、馬法蘭、卡氯芥、甲氨蝶呤、5-氟脲 嘧啶、阿糖胞苷、巰嘌呤、柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、長春堿、長春新堿、更生霉素、絲裂霉 素C、紫杉醇、L-天冬酰胺酶、G-CSF、依托泊苷、秋水仙堿、derferoxamine甲磺酸，和喜樹 堿)。本發(fā)明所述的成分可通過任意傳統(tǒng)途徑來用藥，包括注射或者一定時間內(nèi)逐步輸 液。例如，該用藥途徑可以是口服，靜脈、腹腔、肌肉注射，內(nèi)腔、皮下或經(jīng)皮吸收。在治療 特定疾病(例如癌癥)的例子中，想要的反應是抑制疾病的發(fā)展。這將僅涉及暫時減緩疾病 的發(fā)展，雖然更希望能涉及長期地停止疾病的發(fā)展。這能通過本領域已知的常規(guī)方法來監(jiān) 測。這些成分用藥于人類以外的哺乳動物(例如，用于測試目的或者獸醫(yī)治療目的)， 是在如上所述的基本相同條件下進行。這里所采用的對象是哺乳動物，優(yōu)選是人，也包括非 人的靈長類動物、牛、馬、豬、綿羊、山羊、狗、貓或鼠。當用藥時，本發(fā)明所述的藥物制劑是以藥學上可接受的量并以藥學上可接受的成 分來用藥的。術語“藥學上可接受”是指非毒性材料，不會干擾活性成分的生物學活性的效 力。如果需要的話，這些藥物成分可以結合藥學上可接受的載體。這里所采用的“藥學 上可接受的載體”是指一個或多個兼容的固體或液體裝填物、稀釋物或膠囊物質(zhì)，它們都適 用于用藥于人體內(nèi)。術語“載體”是指有機或無機成分，天然或合成的，與活性成分結合，以 便于用藥。這些藥物成分可包括合適的緩沖劑，包括醋酸鹽、檸檬酸鹽、硼酸鹽及磷酸鹽。可選地，這些藥物成分也可包括合適的防腐劑，例如苯扎氯、三氯叔丁醇、苯甲酸 酯和硫柳汞。適用于口服的成分可被表示為離散單元，例如膠囊、片劑、菱形劑，每種都包 含預定量的活性化合物。其他成分包括在水溶液或非水溶液中的懸浮劑，例如糖漿、西也 劑或乳劑。適用于腸胃外用藥的成分包括化合物的無菌水或非水制備物，優(yōu)選地是與受體的 血液等滲的。這個制備物可以是根據(jù)已知方法采用合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑來進行 制劑的。無菌注射制備物液可以是無菌注射液或者在非毒性腸胃外可接受的稀釋液或溶劑 內(nèi)的懸浮物，例如，在1，3-丁烷二醇中作為溶液。在可接受的載體與溶劑之間，也可應用 水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌的不揮發(fā)的油通常也可應用為溶劑或懸浮介 質(zhì)。為了這個目的，任意牌子的不揮發(fā)的油可被應用，包括合成的單甘油或雙甘油。此外， 諸如油酸等脂肪酸可被用于注射劑的制備。適用于口服、皮下用、靜脈注射、肌肉注射等的 載體制劑可在 Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. , Easton, PA中找到。
根據(jù)本發(fā)明所述的化合物可被用于治療與組織過度表達MT-MMP尤其是MT-MMP相 關聯(lián)的疾病或癥狀。因此，本發(fā)明提供了一種在對象中治療癌癥的方法，包括給藥有效量的 根據(jù)本發(fā)明所述的化合物。在本發(fā)明的優(yōu)選方法中，所述對象是人。這里所采用的術語“癌癥”是指細胞支配自主生長的能力，也就是，由于快速增值 的細胞生長的特征而導致不正常的狀態(tài)或癥狀。該術語是指包括所有類型的癌變生長或者 瘤原性過程、轉移性組織或惡性轉變細胞、組織或器官，入侵的無論哪種組織病理學類型或 階段。該術語“癌癥”包括上皮的、內(nèi)皮的和間葉細胞來源的惡性病變，尤其是癌和肉瘤，例 如那些影響呼吸系統(tǒng)(嘴、鼻、氣管、肺)、消化系統(tǒng)(舌頭、食道、胃、小腸、結腸、肝臟、胰腺、 膽囊、直腸)、內(nèi)分泌系統(tǒng)(甲狀腺、腦垂體、腎上腺)、生殖泌尿系統(tǒng)(尿道膀胱、腎臟)、生殖系 統(tǒng)(乳腺癌、卵巢、子宮、宮頸、前列腺、陰莖、陰囊、睪丸)、皮膚(黑色素細胞、表皮、內(nèi)皮)、神 經(jīng)系統(tǒng)(腦、脊髓、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、神經(jīng)元)和淋巴系統(tǒng)。術語“癌(carcinoma)”是本領域熟知的，是指上皮來源的惡性腫瘤，包括呼吸系 統(tǒng)癌、消化系統(tǒng)癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、生殖泌尿系統(tǒng)癌、皮膚癌、生殖系統(tǒng)癌。術語“癌”還包 括“腺癌”，指源于腺體組織的癌；“鱗片狀癌”，指鱗片狀來源的癌；“癌肉瘤”，指癌瘤和肉 瘤組織組成的癌癥。示例性的癌包括那些從宮頸、前列腺癌、乳腺癌、鼻、頭部和頸部、口腔、 食道、胃、肝臟、胰腺、結腸、卵巢、膀胱和肺形成的癌，尤其是非小細胞肺癌。術語“肉瘤(sarcoma)"是本領域熟知的，是指軟組織或連接或支持組織(包括骨、 軟骨、脂肪組織、平滑肌、骨骼肌、神經(jīng)、血管、間皮和胃腸道間質(zhì))的惡性腫瘤。癌癥的進一 步類型包括“白血病”，是指來源與白細胞的腫瘤；以及“淋巴瘤”，指淋巴系統(tǒng)的腫瘤。包括根據(jù)本發(fā)明所述的化合物的藥物制劑可以是結合用藥，或者順序用藥，或者 在基本相近時間內(nèi)用藥，它作為一種抗癌劑(化學治療劑)包括但不限于抗代謝物(例如 5-氟二氧嘧啶)、細胞毒性劑或抗增殖劑(例如，蒽環(huán)類抗生素、長春堿、taxane、細胞毒素核 苷)、生物毒素、放射治療劑和激素劑或者已知的可誘導生物毒性、細胞毒性、抗血管生成或 破壞血管效應的任意天然產(chǎn)物或試劑。這里所采用的術語“治療”是指臨床干涉以試圖改變被治療的個體或細胞的自然 過程，也可用于預防或在臨床病理學的過程中進行。在本發(fā)明的一個進一步方面，提供了根據(jù)本發(fā)明所述的化合物在制備治療癌癥的 藥物的用途。在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明所述的化合物或成分可被用于治療炎癥疾病和/或 炎癥反應。因此，根據(jù)本發(fā)明的進一步方面，提供了一種在對象中治療炎癥疾病的方法，包 括給藥有效量的根據(jù)本發(fā)明所述的化合物。所述炎癥疾病可選自動脈粥樣硬化、類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、痛風、紅斑狼 瘡、硬皮病、Sjorgen氏癥、多發(fā)皮肌炎和皮肌炎、血管炎、肌腱炎、滑膜炎、細菌性心內(nèi)膜炎、 牙周炎、骨髓炎、牛皮癬、肺炎、致纖維性肺泡炎、慢性支氣管炎、肺氣腫、硅肺、支氣管擴張、 塵肺、肺結核、潰瘍性結腸炎、克羅恩病、慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)根神經(jīng)病、慢性炎癥 性脫髓鞘性多神經(jīng)病、多發(fā)性硬化、Guillan-Barre綜合癥和重癥肌無力、乳房炎、蹄葉炎、 喉炎、慢性膽囊炎、橋本氏甲狀腺炎以及炎癥性乳房疾病。在一個實施例中，所述炎癥疾病 可以是在移植后組織或器官的排斥反應。在特定實施例中，所述炎癥疾病是選自動脈粥樣 硬化、類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、膿毒癥和多發(fā)性關節(jié)炎。
本發(fā)明的化合物可以被用于治療心臟衰竭。這里所述的化合物的用途也提供用于 制備治療心臟衰竭的藥物。在本發(fā)明的一個實施例中，本發(fā)明所述的化合物可被用于治療受傷狀況(例如，潰 瘍、包括皮膚的或燒傷等損傷)。因此，本發(fā)明提供了一種在對象中治療受傷的方法，包括給 藥有效量的根據(jù)本發(fā)明所述的化合物。在本發(fā)明的優(yōu)選方法中，所述對象是人。本發(fā)明所述化合物也可被用于治療與月經(jīng)有關的疾病和癥狀。進一步提供了治療包或治療盒，包括
(1)這里所描述的化合物或成分；以及
(2)這里所描述的使用該化合物用途或方法的說明書。這里所定義的治療包可包括多于一個劑量單元，以便提供用于重復用藥。如果存 在多于一個劑量單元，這些單元可以是相同的，或者是不同的，根據(jù)該劑量的化合物成分和 /或物理形態(tài)而定。本發(fā)明保護范圍還包括偽造品或欺詐產(chǎn)品，它們包含或聲稱包含本發(fā)明所述的化 合物，無論它們是否實際包含這樣的化合物，也無論這樣的化合物是否具有治療上的有效量。本發(fā)明的包含范圍包括包裝，它包括指示以下內(nèi)容的說明書或用法說明該包裝 包含本發(fā)明所述的種類或藥物制劑，它包括或聲稱包括這樣的劑型或種類。這樣的包裝可 以是(但不是必需)被偽造或欺詐的。貫穿本說明書和權利要求書，術語“包括”和“包含”以及這些詞的變化，例如“包 括但不限于”，都是不試圖(不是)排除其他部分、添力口、元件、整體或步驟。貫穿本說明書和權利要求書，單數(shù)包括復數(shù)，除非內(nèi)容上另有要求。特別地，當采 用不定冠詞時，本說明書應被理解為包括復數(shù)以及單數(shù)，除非內(nèi)容上另有要求。與本發(fā)明的特定方面、實施例或例子結合描述的特征、整體、特色、化合物、化學部 分或基團都應被理解為可應用于這里所描述的其他方面、實施例或例子，除非它們不兼容。


現(xiàn)在，本發(fā)明將通過實施例結合附圖的方式進行說明，在附圖中
圖1是圖表，顯示體外在腫瘤和非腫瘤組織中前體藥物-1的代謝對于時間的關系； 圖2是圖表，顯示在腹膜內(nèi)給藥之后，在帶有腫瘤的小鼠內(nèi)前體藥物-1的聚集和水
平；
圖3是圖表，顯示在對帶有腫瘤的小鼠給藥前體藥物-1之后，VDA聚集的水平； 圖4是圖表，顯示前體藥物-2的不同代謝，在腫瘤組織勻漿表達高MTl-MMP水平 (HT1080)對比腫瘤組織勻漿表達低MTl-MMP水平(MCF-7)的關系；
圖5是圖表，顯示在在腹膜內(nèi)給藥之后，在帶有HT1080腫瘤的小鼠中前體藥物-2的聚 集和水平；
圖6是圖表，顯示在對帶有HT1080腫瘤的小鼠給藥前體藥物-2之后，VDA聚集的水平； 圖7 在劑量增加研究過程中，相對小鼠的體重； 圖8 在以ICT-2522 (彈頭)治療過程中，腫瘤的生長； 圖9 在以ICT-2588 (前體藥物)治療過程中，腫瘤的生長；圖10 以前體藥物(ICT-2588)治療小鼠與以彈頭(ICT-2552)治療小鼠進行比較，當用 藥等摩爾劑量的藥物時的腫瘤生長曲線；a)ICT-2588，37. 5mg/kg與ICT-2552，7. 5mg/kg ； b) ICT-2588,50. Omg/kg 與 ICT-2552,10. Omg/kg ；c) ICT-2588,62. 5mg/kg 與 ICT-2552, 12. 5mg/kg;以及 d) ICT-2588，75. Omg/kg 與 ICT-2552，15. Omg/kg ;
圖11 前體藥物ICT-2588顯示修飾，包括磷酸化氨基酸殘基，末端加帽，彈頭和P2’ 選擇；
圖12:圖表，顯示ICT 3053 (P2，= Ala)在腫瘤(HT1080)與肝臟(鼠)勻漿中的穩(wěn)定 性。這是一個數(shù)據(jù)的示例，所獲得的用于這個系列的分子的數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)的總結在表1中給 出；以及
圖13 對于以磷酸附著到絲氨酸的分子(ICT3047)、以磷酸附著到酪氨酸的分子(ICT 3048)，以及以磷酸同時附著到絲氨酸與酪氨酸的分子(ICT3(^8)的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)顯示， 在與腫瘤(HT1080，關閉符號)和鼠肝(打開符號)勻漿孵育指定時間之后，母分子的比例保 持情況。這是來自多個實驗的代表性數(shù)據(jù)。建立色譜分離，以監(jiān)控每個分子的脫磷酸作用。
具體實施方式

材料與方法
權利要求
1.一種化合物，或者它的在藥學上可接受的鹽，包括與MMP蛋白裂解位點相關聯(lián)的血 管破壞劑(VDA)。
2.根據(jù)權利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(I)的 X-Y (I)其中，X是血管破壞劑(VDA )；以及Y是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP )蛋白裂解位點。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的化合物，其特征在于所述VDA是微管蛋白結合劑。
4.根據(jù)權利要求3所述的化合物，其特征在于所述微管蛋白結合劑是與微管蛋白的 秋水仙堿結合位點相互作用的。
5.根據(jù)權利要求4所述的化合物，其特征在于所述微管蛋白結合劑是秋水仙堿或者 它的類似物或衍生物。
6.根據(jù)前述任意權利要求所述的化合物，其特征在于所述MMP是一種膜型MMP (MT-MMP)0
7.根據(jù)權利要求6所述的化合物，其特征在于所述MT-MMP是I型轉膜型MT-MMP。
8.根據(jù)權利要求7所述的化合物，其特征在于，所述MT-MMP是選自MMP-14 (MT1-MMP),MMP-15 (MT2-MMP)、MMP-16 (MT3-MMP)和 MMP-24 (MT5-MMP)。
9.根據(jù)權利要求6所述的化合物，其特征在于所述MT-MMP是糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)錨定型 MT-MMP。
10.根據(jù)權利要求9所述的化合物，其特征在于所述MT-MMP是選自MMP-17(Μ4-ΜΜΡ) 和 ΜΜΡ-25 (ΜΤ6-ΜΜΡ)。
11.根據(jù)權利要求6所述的化合物，其特征在于所述MT-MMP是II型轉膜型ΜΤ-ΜΜΡ。
12.根據(jù)權利要求11所述的化合物，其特征在于所述MT-MMP是ΜΜΡ-23。
13.根據(jù)權利要求2至12任一權利要求所述的化合物，其特征在于Υ是具有6至10 個氨基酸的多肽序列。
14.根據(jù)權利要求13所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序列(i)Ρ3，-Ρ2，-Ρ1，-Ρ1-Ρ2-Ρ3其中，ΡΓ到Ρ3’與Pl到Ρ3是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間的 鍵上發(fā)生蛋白裂解。
15.根據(jù)權利要求14所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序列(ii)-P3，-P2，-ΡΓ -P1-P2-P3-P4其中，ΡΓ到P3’與Pl到P4是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間發(fā)生蛋白裂解。
16.根據(jù)權利要求15所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序列(iii)P4，-P3，-P2，-ΡΓ -P1-P2-P3-P4其中，ΡΓ到P4’與Pl到P4是相同或不同的氨基酸殘基，而在殘基ΡΓ與Pl之間發(fā)生蛋白裂解。
17.根據(jù)權利要求14至16的任一權利要求所述的化合物，其特征在于ΡΓ與Pl是 不同的。
18.根據(jù)權利要求14至17的任一權利要求所述的化合物，其特征在于ΡΓ是疏水氨基酸，選自亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苯基丁氨酸、色氨酸和纈氨酸。
19.根據(jù)權利要求18所述的化合物，其特征在于ΡΓ是苯基丁氨酸。
20.根據(jù)權利要求14至19的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Pl是極性氨 基酸，選自天冬酰胺、絲氨酸和甘氨酸。
21.根據(jù)權利要求20所述的化合物，其特征在于P1是甘氨酸。
22.根據(jù)權利要求14至19的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Pl不是脯氨酸。
23.根據(jù)權利要求14至22的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P2’是極性的、 不帶電荷的氨基酸或者堿性氨基酸，選自精氨酸、丙氨酸、亮氨酸、天門冬氨酸、酪氨酸、蘇 氨酸、絲氨酸和脯氨酸。
24.根據(jù)權利要求23所述的化合物，其特征在于P2’是甲基氨基酸。
25.根據(jù)權利要求14至22的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P2’不是酪氨酸。
26.根據(jù)權利要求14至25的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P3’不是亮氨酸。
27.根據(jù)權利要求16至沈的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，P4’是帶有親 核側鏈的氨基酸，選自賴氨酸、半胱氨酸、絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、谷氨酸或天門冬氨酸。
28.觀、根據(jù)權利要求14至27的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，P2是選自 酸性、堿性、疏水性和極性氨基酸。
29.根據(jù)權利要求14至27的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P2不是脯氨酸。
30.根據(jù)權利要求14至四的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，P3是不帶電荷 的氨基酸，選自甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和蘇氨酸。
31.根據(jù)權利要求14至四的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P3不是脯氨酸。
32.根據(jù)權利要求14至31的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P3是絲氨酸。
33.根據(jù)權利要求15至32的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P4是包含堿性 側鏈的氨基酸，選自精氨酸和賴氨酸。
34.根據(jù)權利要求33所述的化合物，其特征在于P4是精氨酸。
35.根據(jù)權利要求14至34的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P1到P3的每 個殘基是不同的。
36.根據(jù)權利要求14至35的任一權利要求所述的化合物，其特征在于ΡΓ到Ρ3’的 每個殘基是不同的。
37.根據(jù)權利要求14至36的任一權利要求所述的化合物，其特征在于P1和/或P2 和/或P3是除了脯氨酸之外的氨基酸。
38.根據(jù)權利要求37所述的化合物，其特征在于P4是精氨酸。
39.根據(jù)權利要求37或38所述的化合物，其特征在于ΡΓ是疏水氨基酸。
40.根據(jù)權利要求34所述的化合物，其特征在于ΡΓ是疏水氨基酸。
41.根據(jù)權利要求40所述的化合物，其特征在于P1和/或P2和/或P3是除了脯氨 酸之外的氨基酸。
42.根據(jù)權利要求14至41的任一權利要求所述的化合物，其特征在于ΡΓ是苯基丁 氨酸，而Pl是甘氨酸。
43.根據(jù)權利要求15至42的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序 列(vi)-Ρ2， -Hof-Gly-P2-P3-P4- (vi) 其中，P4是精氨酸，而P3不是脯氨酸。
44.根據(jù)權利要求2至43的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序 列-Leu-Tyr-Hof-Gly-Cit-Ser-Arg-o
45.根據(jù)權利要求1至16的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，Y包括以下序 列-Leu-Gly-Leu-Pro-。
46.根據(jù)權利要求2至45的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Y包括氨基酸序 列，在該序列中的一個或多個氨基酸是糖基化的。
47.根據(jù)權利要求2至46的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Υ包括氨基酸序 列，在該序列中的一個或多個氨基酸是磷酸化的。
48.根據(jù)權利要求14至47的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Ρ2’是磷酸化 的氨基酸。
49.根據(jù)權利要求48所述的化合物，其特征在于Ρ2’是酪氨酸。
50.根據(jù)權利要求14至49的任一權利要求所述的化合物，其特征在于Ρ3是磷酸化的氨基酸。
51.根據(jù)權利要求2至50的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(II)的 X-Y-c (II) 其中，c是加帽基團。
52.根據(jù)權利要求51所述的化合物，其特征在于，c選自脂肪烴、芳烴、多環(huán)芳烴、碳水 化合物和氨基酸。
53.根據(jù)權利要求51或52所述的化合物，其特征在于c是疏水基團。
54.根據(jù)權利要求51至53的任一權利要求所述的化合物，其特征在于c是由式(C)n 表示，其中，η是1至5的整數(shù)。
55.根據(jù)權利要求M所述的化合物，其特征在于c是非天然氨基酸，而η是3。
56.根據(jù)權利要求2至55的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(III)的X - a - Y (III)其中，a是直接或間接與X相關聯(lián)的連接物。
57.根據(jù)權利要求56所述的化合物，其特征在于所述連接物是單個氨基酸或者氨基 酸序列。
58.根據(jù)權利要求56所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(IV)的 X - a - Y - c (IV)其中，c是如權利要求51所定義的。
59.根據(jù)權利要求51所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(V)的X - Y - b - c (V)其中，b是直接或間接連接到Y的間隔基團。
60.根據(jù)權利要求59所述的化合物，其特征在于所述間隔基團是選自單個氨基酸、 氨基酸序列和琥珀?；鶊F。
61.61、根據(jù)權利要求58所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式(VI)的 X-a-Y-b-c (VI)其中，b是直接或間接連接到Y的間隔基團。
62.根據(jù)權利要求2至61的任一權利要求所述的化合物，其特征在于，所述化合物是式 (VII)的X-Y-Z (VII) 其中，Z是抗癌劑。
63.根據(jù)權利要求62所述的化合物，其特征在于，Z是選自血管破壞劑、抗代謝物、細 胞毒性劑、生物毒素、放射治療劑和激素劑。
64.根據(jù)權利要求63所述的化合物，其特征在于Z是細胞毒性劑。
65.根據(jù)權利要求64所述的化合物，其特征在于所述細胞毒性劑是阿霉素。
66.根據(jù)權利要求62至65的任一權利要求所述的化合物，其特征在于X是秋水仙堿 或其衍生物。
67.根據(jù)權利要求62所述的化合物，其特征在于，X和Z是選自秋水仙堿或者它的類 似物或衍生物。
68.一種制備根據(jù)權利要求2至67之一所述的化合物的方法，所述方法包括以下步驟i)提供附著于X的固體支持物；ii)可選地將連接物a附著到X的C端或N端；iii)將氨基酸殘基分步附著到X的C端或N端，或者附著到在步驟(ii)已附著X的連 接物a上，以提供包含MMP蛋白裂解序列的多肽序列Y ；iv)可選地將加帽基團c分別附著到Y的C端或N端。
69.一種制備根據(jù)權利要求2至67之一所述的化合物的方法，所述方法包括以下步驟i)制備多肽序列Y;ii)將加帽基團c分別附著到Y的C端或N端；iii)在偶聯(lián)劑存在下制備X與在步驟(ii)中已制備的加帽的多肽的溶液，分離想要的 化合物。
70.一種制備根據(jù)權利要求2至67之一所述的化合物的方法，所述方法包括在溶液 中，將序列Y的C端的一個或多個氨基酸結合到X，繼而使得多肽序列Y的剩余殘基在溶液 中以收斂合成方式而被結合。
71.MMP蛋白裂解位點在VDA的位點特異性活化作用中的應用。
72.根據(jù)權利要求1至67之一所述的化合物或其在藥學上可接受的鹽用作藥物的用途。
73.一種藥物制劑，包括根據(jù)權利要求1至67之一所述的化合物，以及至少一種附加的在藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
74.根據(jù)權利要求1至67之一所述的化合物在制備治療與組織過度表達MT-MMP相關 聯(lián)的疾病或癥狀的藥物的用途。
75.根據(jù)權利要求74所述的用途，其特征在于，所述疾病或癥狀是選自癌癥、炎癥性 疾病、心臟衰竭和受傷。
76.根據(jù)權利要求75所述的用途，其特征在于所述疾病是癌癥。
77.—種在對象中治療與組織過度表達MT-MMP相關聯(lián)的疾病或癥狀的方法，包括給 藥有效量的根據(jù)權利要求1至67之一所述的化合物或者根據(jù)權利要求73所述的藥物制 劑。
78.根據(jù)權利要求77所述的方法，其特征在于所述疾病或癥狀是癌癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及血管破壞劑的前體藥物，包括與MMP蛋白裂解位點相關聯(lián)的血管破壞劑(VDA)。本發(fā)明還涉及這些前體藥物在癌癥的靶向治療上的用途。
文檔編號A61P35/00GK102143762SQ200980141703
公開日2011年8月3日 申請日期2009年10月20日 優(yōu)先權日2008年10月22日
發(fā)明者保羅·羅德曼, 勞倫斯·帕特森, 珍妮弗·阿特金森, 羅伯特·安德魯·福爾克納, 賈森·吉爾, 邁克爾·畢比 申請人:布拉德福德大學