專利名稱：使用選擇性細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6抑制劑對(duì)抗化療化合物的造血防護(hù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開的主題涉及保護(hù)健康細(xì)胞免受因細(xì)胞毒性化合物如DNA損傷性化合物導(dǎo)致的損傷的方法。具體地，本發(fā)明公開的主題涉及向已暴露于、正在或?qū)⒈┞队?、或者有風(fēng)險(xiǎn)暴露于細(xì)胞毒性化合物的對(duì)象給藥的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6(CDK6)抑制劑的保護(hù)作用?？s寫
權(quán)利要求
1.減輕或預(yù)防細(xì)胞毒性化合物對(duì)已暴露于、將暴露于或有風(fēng)險(xiǎn)遭受暴露于細(xì)胞毒性化合物的對(duì)象中的健康細(xì)胞的效應(yīng)的方法，其中所述健康細(xì)胞是造血干細(xì)胞或造血祖細(xì)胞， 所述方法包括向所述對(duì)象給藥有效量的抑制劑化合物或其藥學(xué)可接受的形式，其中所述抑制劑化合物選擇性地抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 6(CDK6)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物選擇性地抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 4(CDK4)和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6 (CDK6)。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物是非天然的化合物。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物基本上沒有脫靶效應(yīng)。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述脫靶效應(yīng)是長期毒性、抗氧化效應(yīng)、雌激素效應(yīng)、酪氨酸激酶抑制、抑制除細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6(CDK4/6)之外的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)、和非CDK4/6依賴性細(xì)胞中的細(xì)胞周期停滯中的一種或多種。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物選擇性地誘導(dǎo)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 4(CDK4)依賴性細(xì)胞和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6 (CDK6)依賴性細(xì)胞中的Gl停滯。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述抑制劑化合物在細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)依賴性細(xì)胞和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6 (CDK6)依賴性細(xì)胞中誘導(dǎo)基本上純粹的Gl停滯。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物選自吡啶并[2，3-d]嘧啶、三氨基嘧啶、 芳基[a]吡咯并[3，4-c]咔唑、含氮的雜芳基取代的脲、5-嘧啶基-2-氨基噻唑、苯并噻二嗪和吖啶硫酮。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶是吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮或 2-氨基-6-氰基吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮是2- ’-吡啶基)氨基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮是6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶_7_酮。
12.權(quán)利要求8的方法，其中所述芳基[a]吡咯并[3，4_c]咔唑選自萘基[a]吡咯并 [3,4-c]咔唑、吲哚并[a]吡咯并[3，4_c]咔唑、喹啉基[a]吡咯并[3，4_c]咔唑和異喹啉基[a]吡咯并[3,4-c]咔唑。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述芳基[a]吡咯并[3，4-c]咔唑是2-溴-12，13-二氫-5H-吲哚并[2,3-a]吡咯并[3,4]咔唑-5，6-二酮。
14.權(quán)利要求1的方法，其中所述對(duì)象是哺乳動(dòng)物。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述抑制劑化合物通過口服給藥、局部給藥、鼻內(nèi)給藥、吸入和靜脈內(nèi)給藥之一向所述對(duì)象給藥。
16.權(quán)利要求1的方法，其中在暴露于所述細(xì)胞毒性化合物之前、在暴露于所述細(xì)胞毒性化合物期間、在暴露于所述細(xì)胞毒性化合物之后或其任何組合向所述對(duì)象給藥所述抑制劑化合物。
17.權(quán)利要求16的方法，其中在暴露于所述細(xì)胞毒性化合物之前M小時(shí)或更短時(shí)間向所述對(duì)象給藥所述抑制劑化合物。
18.權(quán)利要求16的方法，其中在暴露于所述細(xì)胞毒性化合物之后M小時(shí)或更長時(shí)間向所述對(duì)象給藥所述抑制劑化合物。
19.權(quán)利要求1的方法，其中所述細(xì)胞毒性化合物是DNA損傷性化合物。
20.權(quán)利要求1的方法，其中所述健康細(xì)胞選自長期造血干細(xì)胞(LT-HSC)、短期造血干細(xì)胞(ST-HSC)、多能祖細(xì)胞(MPP)、髓共同祖細(xì)胞(CMP)、淋巴共同祖細(xì)胞(CLP)、粒細(xì)胞-單核細(xì)胞系祖細(xì)胞(GMP)和巨核細(xì)胞-紅細(xì)胞系祖細(xì)胞(MEP)。
21.權(quán)利要求1的方法，其中給藥所述抑制劑化合物產(chǎn)生造血干細(xì)胞和造血祖細(xì)胞的短暫藥理性靜止。
22.權(quán)利要求1的方法，其中所述對(duì)象已接受、正在接受或預(yù)定要接受用細(xì)胞毒性化合物的醫(yī)學(xué)治療以治療疾病。
23.權(quán)利要求22的方法，其中給藥所述抑制劑化合物不影響患病細(xì)胞的生長。
24.權(quán)利要求22的方法，其中所述疾病是癌癥。
25.權(quán)利要求對(duì)的方法，其中所述癌癥的特征在于以下一個(gè)或多個(gè)方面細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶I(CDKl)活性增高、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2 (CDD)活性增高、喪失或缺乏視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑癌蛋白(RB)、高水平的MYC表達(dá)、細(xì)胞周期蛋白E增多和細(xì)胞周期蛋白AJ·日夕O
26.權(quán)利要求22的方法，其中與在不給藥所述抑制劑化合物的情況下會(huì)使用的劑量相比，給藥所述抑制劑化合物允許使用更高劑量的所述細(xì)胞毒性化合物來治療所述疾病。
27.權(quán)利要求1的方法，其中所述對(duì)象已意外地暴露于所述細(xì)胞毒性化合物或者過量的所述細(xì)胞毒性化合物。
28.權(quán)利要求1的方法，其中所述方法沒有長期的血液毒性。
29.權(quán)利要求1的方法，其中與在不給藥所述抑制劑化合物的情況下暴露于所述細(xì)胞毒性化合物后預(yù)期的狀況相比，給藥所述抑制劑化合物致使貧血減輕、淋巴細(xì)胞減少減輕、 血小板減少減輕或中性白細(xì)胞減少癥減輕。
30.篩選用于預(yù)防細(xì)胞毒性劑在健康細(xì)胞中的效應(yīng)的化合物的方法，所述方法包括 使細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)依賴性細(xì)胞群和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6(CDK6)依賴性細(xì)胞群與測(cè)試化合物接觸一段時(shí)間； 進(jìn)行所述細(xì)胞群的細(xì)胞周期分析；和選擇選擇性地誘導(dǎo)所述細(xì)胞群中的Gl停滯的測(cè)試化合物。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)依賴性細(xì)胞群和 /或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6 (CDK6)依賴性細(xì)胞群包括調(diào)聚的人類二倍體成纖維細(xì)胞或缺少INMa/ARF的黑素瘤細(xì)胞。
32.權(quán)利要求30的方法，其中使用選自流式細(xì)胞術(shù)、熒光測(cè)定法、細(xì)胞成像和熒光光譜法的一種或多種技術(shù)進(jìn)行所述細(xì)胞周期分析。
33.權(quán)利要求30的方法，其中所述細(xì)胞周期分析包括用選自5-溴-2-脫氧尿苷(BrdU) 和碘化丙錠的一種或多種標(biāo)記劑標(biāo)記所述細(xì)胞群。
34.權(quán)利要求30的方法，其中所述方法還包括使另一種細(xì)胞群與選擇性地誘導(dǎo)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4 (CDK4)依賴性細(xì)胞和/或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6(CDK6)依賴性細(xì)胞中的Gl停滯的測(cè)試化合物接觸一段時(shí)間，其中所述另一種細(xì)胞群包括非⑶K4和/或⑶K6依賴性細(xì)胞； 進(jìn)行所述另一種細(xì)胞群的細(xì)胞周期分析；和選擇沒有選擇性地誘導(dǎo)所述另一種細(xì)胞群中的Gl停滯的測(cè)試化合物。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述另一種細(xì)胞群是癌細(xì)胞系。
36.權(quán)利要求34的方法，其中所述另一種細(xì)胞群是視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑癌蛋白(RB)無效的。
37.權(quán)利要求30的方法，其中所述方法還包括通過評(píng)價(jià)所述測(cè)試化合物在與細(xì)胞毒性劑接觸的離體細(xì)胞群中減輕DNA損傷的能力、維持細(xì)胞活力的能力或此二者來證實(shí)所述化合物的預(yù)防能力。
38.權(quán)利要求37的方法，其中通過進(jìn)行Y-H2AX測(cè)定評(píng)價(jià)所述細(xì)胞群中的DNA損傷。
39.權(quán)利要求37的方法，其中通過進(jìn)行細(xì)胞增殖測(cè)定評(píng)價(jià)細(xì)胞活力。
40.權(quán)利要求37的方法，其中所述細(xì)胞毒性劑是DNA損傷性化合物。
41.權(quán)利要求40的方法，其中所述DNA損傷性化合物選自多柔比星、依托泊苷和卡鉬。
全文摘要
提供減輕或預(yù)防細(xì)胞毒性化合物對(duì)健康細(xì)胞的效應(yīng)的方法。所述方法涉及使用選擇性細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)4/6抑制劑來誘導(dǎo)CDK4/6依賴性細(xì)胞例如造血干細(xì)胞和/或造血祖細(xì)胞中的暫時(shí)靜止。還描述選擇用于減輕或預(yù)防細(xì)胞毒性劑化合物在健康細(xì)胞中的效應(yīng)的化合物的方法。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102231984SQ200980148408
公開日2011年11月2日 申請(qǐng)日期2009年10月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月1日
發(fā)明者J·C·斯特魯姆, J·E·比希, M·R·拉姆齊, N·E·沙普爾斯, P·J·羅伯茨 申請(qǐng)人:北卡羅來納大學(xué)查珀?duì)栂柗中?br>