專利名稱：吡咯并三嗪激酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用作抗癌藥物/抗增殖藥物的新穎化合物。本發(fā)明還涉及使用所述化合物治療增殖性疾病(諸如癌癥)的方法及含有所述化合物的藥物組合物。
背景技術(shù)：
蛋白激酶在針對一些細(xì)胞功能的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，所述細(xì)胞功能包括細(xì)胞增殖、致癌作用、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞分化。這些酶的抑制劑可用于治療或預(yù)防依賴于這些酶的增殖性疾病。流行病學(xué)證據(jù)有力地表明，導(dǎo)致組成性有絲分裂信號傳導(dǎo)的受體蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的過表達(dá)或活化在數(shù)量持續(xù)增加的人類惡性腫瘤中是重要的因素。參與這些過程的蛋白激酶包括 Abl、CDK，s、EGF、EMT、FGF、FAK、Flk-l/KDR、Flt_3、GSK-3、GSK β -3、 HER-2、IGF-1R、IR、Jak2、LCK、MET、PDGF、Src、Tie_2、TrkA、TrkB、SRC、CK2 和 VEGF。因此， 一直需要研究出可用于調(diào)節(jié)或抑制酪氨酸激酶的新穎化合物。蛋白激酶抑制劑可用于治療以酪氨酸激酶活性過表達(dá)或上調(diào)為特征的疾病，所述疾病為例如癌癥、糖尿病、再狹窄、動脈硬化、牛皮癬、血管形成性疾病及免疫性疾病(Powis，G. ；Workman P. Signaling Targets For The Development of Cancer Drugs. Anti-Cancer Drug Design(1994),9 :263-277 ; Merenmies, J. ；Parada, L. F. ；Henkemeyer, Μ. Receptor Tyrosine Kinase Signaling in Vascular Development. Cell Growth Differ (1997)8 3~10 ；Shawver, L. K. ；Lipsosn, K. Ε. ；Fong, Τ. Α. Τ. ；McMahon, G. ；Plowman, G. D. ；Strawn, L. Μ. Receptor Tyrosine Kinases As Targets For Inhibition of Angiogenesis. Drug Discovery Today(1997) 2 :50-63 ；^ 所有這些文獻(xiàn)并入本申請作為參考)。受體酪氨酸激酶(RTK)在生物化學(xué)信號傳遞經(jīng)過細(xì)胞質(zhì)膜中是重要的。這些跨膜分子特有地由細(xì)胞外配體結(jié)合域和細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶域構(gòu)成，這二者通過質(zhì)膜中的片段來連接。通常，RTK通過由配體引起的低聚化和特異性細(xì)胞內(nèi)底物(例如PLCY、PI3激酶、ras 和raf/MEK/Erkl)的酪氨酸自磷酸化來活化。就通過該類受體進(jìn)行的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)而言，酪氨酸激酶活性是必不可少的。Janus激酶(Jak)通過整合由細(xì)胞因子受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來調(diào)節(jié)多種細(xì)胞類型的增殖、存活和分化。Jak家族的酪氨酸激酶包括四個家族成員即Tyk2、Jakl、Jak2和Jak3。 該激酶家族共有一些結(jié)構(gòu)特征，包括一些Jak同源(JH)結(jié)構(gòu)域。羧基端JHl結(jié)構(gòu)域含有與偽激酶(pseudokinase) JH2結(jié)構(gòu)域相鄰的活性激酶結(jié)構(gòu)域。這些結(jié)構(gòu)域的氨基端為JH3-4 和JH5-7，其分別編碼與SH2和FERM結(jié)構(gòu)域類似的結(jié)構(gòu)域。SH2樣結(jié)構(gòu)域在Jak家族成員中就功能而言沒有充分表征，而包含JH5-7的FERM結(jié)構(gòu)域已被證實(shí)介導(dǎo)與細(xì)胞因子受體的結(jié)合。細(xì)胞因子受體缺乏內(nèi)在激酶活性，當(dāng)結(jié)合配體時，Jak家族成員被募集至這些受體且被活化以使受體復(fù)合物和下游信號傳導(dǎo)分子上的酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化。細(xì)胞因子受體信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵下游介質(zhì)為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化(STAT)蛋白。存在7種哺乳動物STAT蛋白 (STATl、2、3、4、5ajb、6和7)，其整合在細(xì)胞因子受體活化下游的信號傳導(dǎo)。當(dāng)募集至細(xì)胞因子受體-Jak復(fù)合物時，STAT通過Jak激酶而在羧基端進(jìn)行酪氨酸磷酸化。該磷酸化通過磷酸化酪氨酸和SH2結(jié)構(gòu)域的相互作用而導(dǎo)致STAT同或異二聚體的形成。通過二聚化而活化后，STAT蛋白易位至細(xì)胞核，其中它們與啟動子中的響應(yīng)元件結(jié)合以活化參與增殖和分化的關(guān)鍵基因的轉(zhuǎn)錄。除調(diào)節(jié)STAT外，也已報道Jak的活化作用還調(diào)節(jié)其它關(guān)鍵的生長/存活途徑(包括由^S-I、Ras-MAPK、PI3K和Src激酶介導(dǎo)的那些途徑)。已在多種疾病中報道了 Jak信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的變化。就白血病(leukemia)而言，已在非典型性慢性髓細(xì)胞性白血病中觀察到產(chǎn)生組成性活性Jak激酶的染色體重排(Tel_Jak2)。 已在急性成巨核細(xì)胞性白血病中觀察到Jak3的活化點(diǎn)突變及已在急性骨髓性白血病和骨髓增殖性障礙(諸如紅細(xì)胞增多癥、特發(fā)性血小板增多癥和髓樣化生)中觀察到Jak2的活化點(diǎn)突變。最近證實(shí)Jak2突變(Jak2V617F)是多種骨髓增殖性疾病(例如紅細(xì)胞增多癥、 特發(fā)性血小板減少癥和骨髓纖維化)的原因。Jak激酶在實(shí)體瘤中的作用也被大量有關(guān)很多種癌癥中具有組成性STAT3活化的報道所支持。已在乳腺、前列腺、頭/頸和黑素瘤腫瘤樣品和細(xì)胞系中觀察到增加性或組成性STAT3活性，其中藥理學(xué)或遺傳學(xué)證據(jù)表明在所觀察的STAT3活化中涉及Jak活性。另外，Jak信號傳導(dǎo)通過活化其它關(guān)鍵信號傳導(dǎo)途徑(諸如PI3K、Src、Bcl2和Ras-ΜΑΡΚ)而參與惡性轉(zhuǎn)化。Jak信號傳導(dǎo)與這些關(guān)鍵途徑的聯(lián)系潛在地使該激酶家族參與很多種惡性腫瘤。原肌球蛋白相關(guān)激酶(Trk)為包括三個家族成員即TrkA、TrkB和TrkC的受體酪氨酸激酶家族。Trk以高親合力與神經(jīng)營養(yǎng)蛋白家族中的配體結(jié)合并介導(dǎo)后者所引起的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，所述配體的原型成員為神經(jīng)生長因子(NGF)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)及神經(jīng)營養(yǎng)蛋白-3、神經(jīng)營養(yǎng)蛋白-4和神經(jīng)營養(yǎng)蛋白-5(NT-3、NT-4和NT-5)。另外，已鑒定了缺乏酶活性的共受體即P75，其以低親合力與所有神經(jīng)營養(yǎng)蛋白(NT)結(jié)合并調(diào)節(jié)神經(jīng)營養(yǎng)蛋白信號傳導(dǎo)。Trk及其配體在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育期間的關(guān)鍵作用已通過在小鼠中進(jìn)行的基因破壞研究來確認(rèn)。具體地，證實(shí)了 TrkA-NGF相互作用就介導(dǎo)疼痛信號傳導(dǎo)中涉及的某些外周神經(jīng)元群落的存活而言是必需的。除Trk信號傳導(dǎo)在發(fā)育中的這些重要作用外，該受體及其信號傳導(dǎo)途徑在某些惡性腫瘤中遭到破壞也是有案可查的。應(yīng)該特別注意以下報道即NGF和TrkA受體激酶的異常表達(dá)參與人前列腺癌和胰管腎上腺癌(pancreatic ductal adrenocarcinoma)的發(fā)展和進(jìn)展、參與急性骨髓性白血病(AML)、甲狀腺癌和乳腺癌中Trk染色體重排的活化及參與結(jié)腸腫瘤中預(yù)示組成性活化的受體點(diǎn)突變。除這些活化機(jī)制外，還在包括多發(fā)性骨髓瘤、黑素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、卵巢癌和胰腺癌的多種腫瘤類型中報道了 Trk受體和配體的增加。已證實(shí)神經(jīng)營養(yǎng)蛋白及其相應(yīng)的Trk受體亞型對惡性細(xì)胞施加多種多效應(yīng)答，包括提高腫瘤侵入性和趨化性、活化凋亡、刺激克隆生長和改變細(xì)胞形態(tài)。已在前列腺癌、乳腺癌、甲狀腺癌、結(jié)腸癌、惡性黑素瘤、肺癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胰腺類癌(pancreatic carcinoid)及很多種兒科和神經(jīng)外胚層源性腫瘤(包括維爾姆斯腫瘤 (Wilm' s tumor)、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和成神經(jīng)管細(xì)胞瘤)中觀察到這些作用。神經(jīng)營養(yǎng)蛋白及其受體亞型通過涉及癌細(xì)胞及周圍實(shí)質(zhì)和基質(zhì)組織的自分泌或旁分泌機(jī)制而與這些癌癥相關(guān)。另外，最近已通過使用抗NGF抗體而極度或顯著地減輕了由前列腺癌轉(zhuǎn)移引起的骨疼痛?？偟恼f來，Trk信號傳導(dǎo)在多種腫瘤類型中的致癌性使對Trk受體信號傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)成為在不同惡性腫瘤中具有潛在吸引力的治療介入點(diǎn)。Trk家族的RTK經(jīng)常表達(dá)在肺癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌中及表達(dá)在某種類型的急性骨髓性白血病和先天性纖維肉瘤中。據(jù)信Trk的酪氨酸激酶活性促進(jìn)細(xì)胞增殖機(jī)制的無節(jié)制活化。據(jù)信單獨(dú)使用或組合使用的TrkA激酶抑制劑、TrkB激酶抑制劑或TrkC激酶抑制劑具有對抗一些最常見癌癥的功效，這些癌癥為諸如腦部癌癥、黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、頭部癌癥、頸部癌癥、食道癌、前列腺癌、結(jié)腸直腸癌、肺癌、腎癌、卵巢癌、婦科癌癥、甲狀腺癌和某種類型的血液惡性腫瘤。酪蛋白激酶2(( 為參與多種致癌或腫瘤抑制蛋白穩(wěn)定性調(diào)節(jié)的絲氨酸/蘇氨酸激酶。已被確認(rèn)為癌細(xì)胞中信號傳導(dǎo)途徑重要組成的蛋白質(zhì)(諸如β-聯(lián)蛋白和c-Myc) 已被證實(shí)通過CK2來磷酸化且已提出這些磷酸化事件是穩(wěn)定這些蛋白質(zhì)所需要的。也已證實(shí)腫瘤抑制蛋白(諸如PML和ΡΤΕΝ)通過CK2來磷酸化且已表明這些修飾促進(jìn)這些蛋白質(zhì)的降解。對CK2酶活性的抑制(諸如通過小分子來抑制)可使致癌基因產(chǎn)物不穩(wěn)定且使腫瘤抑制蛋白穩(wěn)定，這引起對腫瘤細(xì)胞的抗增殖作用。另一個重要的激酶家族為Src激酶家族。這些激酶參與癌癥、免疫系統(tǒng)功能障礙和骨再造疾病。一般綜述請參見Thomas and Brugge,Annu. Rev. Cell Dev. Biol. (1997) 13， 513 ；Lawrence and Niu, Pharmacol.Ther. (1998)77,81 ；Tatosyan and Mizenina, Biochemistry(Moscow)(2000)65,49 ；Boschelli et al. , Drugs of the Future 2000, 25 (7)，717，(2000)。Src家族的成員包括哺乳動物中的以下8種激酶Src、Fyn、Yes、Fgr、 Lyn、Hck、Lck 禾口 Blk0美國專利公開文本US20080045496披露了 Trk受體激酶。所述公開文本中的實(shí)施例74如下所示。該化合物對Jak2的IC50為0. 031 μ M及對Jak3的IC50為0. 46 μ Μ。
權(quán)利要求
1.式I的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、藥用鹽或溶劑化物
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成環(huán)，所述環(huán)為
3.權(quán)利要求3的化合物，其中R1為氫、CV4烷基、取代有0-1個Ra的C3_6環(huán)烷基或-CONR12R13 ；R12和R13為氫、Cp6烷基或C3_6環(huán)烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R7和R8獨(dú)立為氫、C1^6烷基、C3_6環(huán)烷基或-(CH2) r-苯基。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R14為氫；取代有0-3個Rwa的CV6烷基；取代有0-3個R14a的Cp6烯基；取代有0_3個 R14a的-(CHR) ,_C3_6環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基；取代有0-5 個Rwa的-(CH2)^C6,芳基，其中所述芳基為苯基；取代有0-3個R14a的二環(huán)[4. 2. 0]辛三烯基、取代有0-3個R14a的茚基或取代有0-3個Rwa的二氫茚酮基；或含有選自N、0和S的 1-4個雜原子的取代有0-3個R14a的-(CH2)廠5至10元雜環(huán)系統(tǒng)；；Cl ；Br ；OCF3 ；CF3 ；CHF2 ；CN ；NO2 ；-(CH2)rORb ；-(CH2)rSRb ；-(CH2) rC (O)Rb ；-(CH2) rC (0) ORb ；-(CH2) r0C (0) Rb ；-(CH2) ,NR7R8 ； - (CH2) rC (0) NR7R8 ； - (CH2) rNRbC (0) Rb ；-(CH2) rNRbC (0) ORc ；-NRbC (0) NR7R8 ；-S (0) PNR7R8 ；-NRbS (0) PRC ；-S (0) Rc ；-S (0) 2RC ；取代有 0-1 個 Ra 的CV6烷基；取代有0-1個Ra的Cp6炔基；CV6鹵代烷基；任選取代有0-2個Ra的-(CH2) r-3至14元碳環(huán)，其中所述碳環(huán)殘基為環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、芴基或苯基；或包含碳原子和選自N、0和S(O)p的1-4個雜原子的-(CH2^-5至7元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)取代有0_2 個Ra，其中所述雜環(huán)為吡啶基、吡啶基、異噁唑基、噻吩基、吡唑基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、 咪唑基、吡嗪基、噻二唑基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、二氫茚酮基、哌嗪基、吡喃基或吡咯基。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，其中r為0、1或2。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中R14為氫；取代有0-3個Rwa的C^6烷基；C^6烯基；取代有0-3個R14a的-(CHR)「C3_6環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基為環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基；取代有0-5個R14a的-(CH2),-C6,芳基， 其中所述芳基為苯基、二環(huán)[4. 2. 0]辛三烯基、茚基或二氫茚酮基；或含有選自N、0和S的 1-4個雜原子的取代有0-3個R14a的-(CH2)^雜環(huán)系統(tǒng)，其中所述雜環(huán)系統(tǒng)為吡啶基、吡啶基、哌啶基、異噁唑基、噻吩基、吡唑基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、咪唑基、吡嗪基、噻二唑基、 嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、二氫茚酮基、哌嗪基、吡喃基或吡咯基；R14a 為 F ；Cl ；Br ；OCF3 ；CF3 ；CHF2 ；CN ；NO2 ；-(CH2)rORb ；-C(O) Rb ；-C(O) ORb ；-OC(O) Rb ；-(CH2)rNR7R8 ；-C(O) NR7R8 ；-NRbC (O)Rb ；-NRbC(O) ORc ；-C(O) NR7R8 ；-S (O)pNR7R8 ；-NRbS(O) PRC ；"S (O)Rc ；-S (O)2Rc ；取代有0-1個Ra的C^6烷基；-C ^ CH ；C1^2鹵代烷基；任選取代有 0-2個Ra的-(CH2^-3至7元碳環(huán)，其中所述碳環(huán)殘基為環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、芴基或苯基；或包含碳原子和選自N、0和S(O)p的1-4個雜原子的-(CH2^-5至7元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)取代有0-2個Ra，其中所述雜環(huán)為吡啶基、吡啶基、異噁唑基、噻吩基、吡唑基、呋喃基、 吡咯基、噻唑基、咪唑基、吡嗪基、噻二唑基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、 二氫茚酮基、哌嗪基、吡喃基或吡咯基。
8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的化合物，其中R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成環(huán)，所述環(huán)為
9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為甲基或取代有0-1個甲基或三氟甲基的環(huán)丙基。
10.一種藥物組合物，其包含一種或多種權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物及藥用載體。
11.一種治療骨髓增殖性疾病(紅細(xì)胞增多癥、特發(fā)性血小板減少癥或骨髓纖維化)或多發(fā)性骨髓瘤的方法，其包括對有此需要的哺乳動物物種給藥治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的化合物。COR1全文摘要
本發(fā)明提供式I的化合物及其藥用鹽。所述式I的化合物抑制諸如Jak2和CK2的酪氨酸激酶活性，由此使它們可用作用于治療癌癥和其它疾病的抗增殖藥物。
文檔編號A61P35/00GK102245610SQ200980149134
公開日2011年11月16日 申請日期2009年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月8日
發(fā)明者戴維.B.弗倫尼森, 拉爾古迪.S.哈里克里什南, 穆索尼.G.卡莫, 阿肖克.V.普蘭達(dá)爾, 馬克.G.索爾尼爾 申請人:百時美施貴寶公司