專利名稱：藏茵陳提取物及其制備方法、藥物組合物和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種藏茵陳提取物及其制備方法，包含 該藏茵陳提取物的藥物組合物和用途。
背景技術(shù)：
藏茵陳是我國傳統(tǒng)藏藥，在藏藥經(jīng)典著作《晶珠本草》及《藏藥晶鏡本草》中均有記 載，在藏藥中稱為“蒂達(dá)”，原植物來源主要包括龍膽科植物印度獐牙菜、川西獐牙菜、抱莖 獐牙菜、普蘭獐牙菜、花錨、扁蕾以及十字花科植物長果糖芥、虎耳草科植物垂頭虎耳草等， 其中川西獐牙菜(S.mussotii)和抱莖獐牙菜(S. franchetiana)作為藏茵陳原植物被收載 于國家衛(wèi)生部藏藥標(biāo)準(zhǔn)或地方標(biāo)準(zhǔn)中。藏茵陳主要功能為清熱消炎、利膽退黃，主治各種熱 病，尤其對肝膽實熱性疾病具有獨特療效。龍膽科獐牙菜屬植物是藏茵陳的主要來源，在我國歷代中醫(yī)本草中均無記載。但 獐牙菜屬植物有多種生理活性，在我國西南少數(shù)民族地區(qū)長期以來用于治療肝膽濕熱性疾 病，亞洲許多國家也用于各種疾病的民間治療。藏茵陳(獐牙菜屬)主要含環(huán)烯醚萜、口山酮和三萜類等成分，其中環(huán)烯醚萜和口 山酮類成分因其特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)和多種生物活性，備受人們的關(guān)注；現(xiàn)代藥理實驗證明，三 類成分均具有抗肝炎藥理活性。目前，與藏茵陳提取物相關(guān)的專利已有報道，列述如下中國專利Q00410055462. X)公開了一種從獐牙菜屬主要藥用植物中提取抗肝炎 活性部位的方法，該方法包括如下步驟(1)粉碎植物，稱取植物粉末，放入水或親水性有 機溶劑中，植物粉末與有機溶劑的總量比為1 2 20，在50-100°C下回流提取2-4次， 依次遞減溶劑用量，過濾，得合并濃縮液，置室溫或0-4°C冷藏12-48小時，離心或過濾，得 澄清提取液；(2)使提取液以0. 5-3BV/h的流速緩慢流過大孔吸附樹脂的樹脂柱；(3)用 0. 5-3BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，得到抗肝炎活性部位。該專利未對提取 物的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行控制，未開展提取物的藥效學(xué)實驗。中國專利Q00710061832.4)公開了一種藏茵陳有效成分的提取方法，它由提取、 除雜、濃縮、干燥、粉碎、進(jìn)一步精制等工藝制備而成，提取方法采用水、乙醇溶劑提取或超 聲輔助提??；采用離心或大孔樹脂等方法進(jìn)行除雜和精制，可以方便地處理成多種劑型。該 專利未對提取物的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行控制，未開展提取物的藥效學(xué)實驗。中國專利Q00710163097. 8)公開了一種藏茵陳提取物，包含獐牙菜苦苷、龍膽苦 苷、獐牙菜苷、芒果苷、異紅草苷，所述五種成分的質(zhì)量比為0.04-0. 71 20-40 1-15 1.6 -26 0.01-0. 16。在該提取物的制備工藝中，采用了溶劑提取、有機溶劑萃取、樹脂吸附分離 等方法。該專利還公開了藏茵陳提取物能夠改善肝損傷造成的各項指標(biāo)，促進(jìn)肝纖維化過 程的逆轉(zhuǎn)，較好得預(yù)防肝硬化。該專利制備得到的藏茵陳提取物只包含部分環(huán)烯醚萜類成 分和山酮類成分，未包含三萜類成分，藥理實驗列述了提取物的改善肝損傷和促進(jìn)肝纖維 化過程的逆轉(zhuǎn)的相關(guān)活性，未開展其他方面的藥理活性實驗。
3
中國專利(200910078578.8)公開了一種藏茵陳提取物，其中包含總黃酮成分，以 該藏茵陳提取物總重為100%計，該總黃酮占該藏茵陳提取物的20-75% ；該藏茵陳提取物 是通過溶劑提取和有機溶劑萃取獲得的，具有治療肝膽疾病的活性。該專利制備得到的藏 茵陳提取物只是包括黃酮類成分。如上所述，目前關(guān)于 茵陳類藥物(包括獐牙菜屬藥用植物)的中國專利報道的 發(fā)明、方法所獲得的藏茵陳類植物的制品均成分還比較復(fù)雜，藥效作用特點還不太突出。因 此，提供一種質(zhì)量可控、成分相對明確、藥效作用特點突出、符合現(xiàn)代藥物要求的獐牙菜抗 肝炎提取物，仍是本領(lǐng)域研究的熱點和難點之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于，提供一種具有顯著抗肝炎療效、成分相對明確、質(zhì)量可 控、符合現(xiàn)代藥物要求的藏茵陳提取物；本發(fā)明的另一個目的在于，提供一種制備上述藏茵 陳提取物的方法；本發(fā)明的又一個目的在于，提供一種包含上述藏茵陳提取物的藥物組合 物；本發(fā)明的再一個目的在于，提供上述藏茵陳提取物的用途。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的一方面，本發(fā)明提供一種藏茵陳提取物，該提取物包含環(huán)烯醚萜，其含量為10 50% ；山酮，其含量為10 50% ；和三萜，其含量為5 20% ；以上三種成分的總含量為 25-90% (重量)，優(yōu)選為50%-90% (重量)。上述藏茵陳提取物中，所述環(huán)烯醚萜包括獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷；所述 山酮包括芒果苷、當(dāng)藥醇苷、1，5，8-三羥基-3-甲氧基山酮和1-三羥基-3，5- 二甲氧基山 酮；所述三萜包括齊墩果酸、熊果酸。另一方面，本發(fā)明提供上述藏茵陳提取物的制備方法，該制備方法包括如下步 驟(1)取藏茵陳藥材，粉碎或切斷，用7-15倍重量的體積濃度為55-95%的醇，優(yōu)選 為乙醇回流提取2-4次，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到濃縮液；(2)將步驟(1)制備的濃縮液在攪拌狀態(tài)下加入3-5倍的水，并用NaOH調(diào)節(jié)pH值 為6-8，水沉12-48小時，離心過濾，得到上清液和沉淀；(3)取步驟(2)獲得的上清液，使其以0. 5-3BV/h的流速流過預(yù)處理好的大孔吸 附樹脂進(jìn)行吸附，然后以0. 5-3BV/h的流速，先用2-5倍水進(jìn)行洗脫除雜，然后再用3-8BV 的10% -30%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得環(huán)烯醚萜類成分，再用3-8BV的 50% -80%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得山酮苷類成分；取步驟(2)獲得的 沉淀，加入5-30倍石油醚(沸程60-90°C )，進(jìn)行攪拌或超聲提取30-90分鐘，過濾，濾液棄 去，濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，即得三萜類和山酮苷元類成分；(4)將步驟(3)獲得的環(huán)烯醚萜類成分、山酮苷類成分、三萜類和山酮苷元類成分 相混合，即得到本發(fā)明的藥物組合物。上述步驟(1)中，所述藏茵陳藥材包括川西獐牙菜(S.mussotii)和抱莖獐牙菜 (S. franchetiana)。上述步驟(3)中，所述大孔吸附樹脂包括HPD-100、HPD-300、AB-8和D-101型大孔 吸附樹脂。
又 一方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，該藥物組合物含有上述藏茵陳提取物以 及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。本發(fā)明的上述藥物組合物為固體口服制劑、液體口服制劑或注射劑。本發(fā)明的上述藥物組合物為膠囊、顆粒、片劑、滴丸、口服溶液劑、注射用水針、注 射用凍干粉針、大輸液或小輸液。再一方面，本發(fā)明提供上述藥物組合物在制備用于預(yù)防和/或治療肝炎，例如黃 疸型肝炎的藥物中的用途。以下將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述本發(fā)明提供一種具有較好抗肝炎活性、符合現(xiàn)代中藥5類新藥要求的藏茵陳提取 物，該提取物包含環(huán)烯醚萜、山酮和三萜類成分，經(jīng)紫外分光光度計法和高效液相色譜檢 測，其可控成分(包括環(huán)烯醚萜、山酮和三萜類成分)的含量在20% 80% (重量)之間。在上述藏茵陳提取物中，所述環(huán)烯醚萜、山酮和三萜類成分包括獐牙菜苦苷、獐牙 菜苷、龍膽苦苷、芒果苷、當(dāng)藥醇苷、1，5，8_三羥基-3-甲氧基山酮、1-三羥基-3，5_ 二甲氧 基山酮、齊墩果酸等。本發(fā)明所述的獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷、芒果苷、當(dāng)藥醇苷、1，5，8_三羥 基-3-甲氧基山酮、1-三羥基-3，5-二甲氧基山酮、齊墩果酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)式分別如下α α° Ct
丨丨 OC6H11O5' OC6H11O5OC6H11O5
獐牙菜苦苷獐牙菜苷龍膽苦苷
G|U 9 ？HOH OHO OH
V-Ο^^ΟΜβ HO^VV ^O-llJ-OMe
OHΛ OCH3丄
uOMe
當(dāng)藥醇苷 1,5,8-三羥基-3-曱氧基山酮 1 -三羥基-3,5-二曱氧基山酮
OH/·
HO^^k^OH OHOH
I Ihησ^χ^^
芒果苷齊墩果酸本發(fā)明還提供了上述藏茵陳提取物的制備方法，其包括如下步驟(1)取藏茵陳藥材，粉碎或切斷，用7-15倍重量的體積濃度為55-95%的醇回流提 取2-4次，合并提取液，減壓濃縮至無醇味；(2)濃縮液在攪拌狀態(tài)下加入3-5倍水，并用NaOH調(diào)ρΗ值為6_8，水沉12-48小 時，離心過濾，得到上清液和沉淀；(3)取上清液，使其以0.5_3BV/h(其中，BV表示樹脂床層 的體積)的流速流過預(yù) 處理好的大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，然后以0. 5-3BV/h的流速，先用2-5倍水進(jìn)行洗脫除雜， 然后采用3-8BV的10% -30%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得環(huán)烯醚萜類成分， 再用3-8BV德50% -80%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得山酮苷類成分；取沉 淀，加入5-30倍石油醚(沸程60-90°C)進(jìn)行攪拌或超聲提取30-90分鐘，過濾，濾液棄去， 濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，即得三萜類和山酮苷元類成分；(5)將以上環(huán)烯醚萜類成分、山酮苷類成分、三萜類和山酮苷元類成分混合，即得 藏茵陳提取物。上述藏茵陳藥材可以是多種藏茵陳類的藥材，優(yōu)選的是具有法定標(biāo)準(zhǔn)的川西獐牙菜及抱莖獐牙菜。 上述制備方法中，所使用的大孔吸附樹脂材料包括HPD-100、HPD-300、AB-8、D-101
等型號的大孔樹脂。本發(fā)明的藏茵陳提取物可采用如下方法進(jìn)行分析檢測高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實驗色譜柱為Diamonsil C18 (250 X 4. 6mm，5 μ m)，流速為 lml/min,柱溫為35°C，環(huán)烯醚萜類成分的流動相為甲醇_0. 04%磷酸水(23 77)，檢測波 長為237nm ；山酮苷類成分的流動相為甲醇-0. 04%磷酸水(45 55)，檢測波長為254nm ； 三萜類成分的流動相為乙腈-甲醇-0.2%冰醋酸水(65 15 20)，檢測波長為210nm。對照品溶液的制備精密稱取獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷、芒果苷、當(dāng)藥醇苷、 1，5，8_三羥基-3-甲氧基山酮、1-三羥基-3，5-二甲氧基山酮、齊墩果酸對照品適量，分置 25mL量瓶中，均用甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。供試品溶液的制備精密稱取藏茵陳提取物適量，置50ml量瓶中，加甲醇并稀釋至 刻度，搖勻，濾過，取濾液即得。通過以上方法測定本發(fā)明制備的藏茵陳提取物中各成分的含量，上述化合物的總 和占藏茵陳提取物重量的20% -80%本發(fā)明還提供包含上述藏茵陳提取物以及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑的 藥物組合物，該藥物組合物可以為口服制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸等。本發(fā)明還提供上述藏茵陳提取物在制備治療預(yù)防和/或治療肝炎，例如黃疸型肝 炎的藥物中的用途。本發(fā)明的藏茵陳抗肝炎提取物具有明顯利膽作用，對化學(xué)物質(zhì)所致急 性肝損傷和阻塞性黃疸的肝功能異常有明顯的保護(hù)和改善作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果1、本發(fā)明選用資源豐富的藏茵陳為原料藥，對于藏藥的深入研究、開發(fā)與合理應(yīng) 用將產(chǎn)生一定的推動作用；2、現(xiàn)有技術(shù)的制備方法所制備的藏茵陳提取物只包括黃酮類成分，或者只包含部 分環(huán)烯醚萜類成分和山酮類成分，本發(fā)明采用大孔吸附樹脂等現(xiàn)代提取方法與手段，不僅 可以獲得環(huán)烯醚萜類成分和山酮類成分，而且還可得到三萜類成分；3、本發(fā)明在一種方法中，將提取液得到的濾液和沉淀同時進(jìn)行處理，未丟棄任何 活性成分，充分利用了原料藥；4、本發(fā)明通過一種方法，提取出多種活性成分，降低了成本，節(jié)約了資源，本發(fā)明 的活性成分合并應(yīng)用，對于肝病可發(fā)揮綜合的治療作用(參見實施例9)。


圖1為四氯化碳誘發(fā)的大鼠急性肝損傷病理組織學(xué)圖，其中a為空白組大鼠肝正 常肝臟，b為模型組大鼠肝細(xì)胞彌漫性氣球樣變，c為藏茵陳提取物低劑量組大鼠局部肝細(xì) 胞輕度氣球樣變，d為藏茵陳提取物低劑量組大鼠局部肝細(xì)胞輕度氣球樣變，e為藏茵陳提 取物高劑量組大鼠局部肝細(xì)胞輕度氣球樣變，f為聯(lián)苯雙酯滴丸組大鼠局部肝細(xì)胞輕度氣 球樣，g為茵桅黃顆粒組大鼠局部肝細(xì)胞輕度氣球樣變；圖2為α _異硫氰酸奈酯(ANIT)誘發(fā)的大鼠急性肝損傷病理組織學(xué)圖，其中，其中a為空白組大鼠肝正常肝臟；b為空白組大鼠肝正常肝臟匯管區(qū)膽管；c為模型組大鼠 膽管上皮壞死管腔阻塞、中央靜脈淤血；d為模型組組大鼠局部肝細(xì)胞片狀壞死；e為藏茵 陳提取物低劑量組大鼠局部膽管上皮輕度變性及碎片脫落；f為藏茵陳提取物低劑量組大 鼠局部肝細(xì)胞散在壞死；g為藏茵陳提取物中劑量組大鼠局部膽管上皮輕度變性及碎片脫 落；h為藏茵陳提取物中劑量組大鼠局部肝細(xì)胞散在壞死；i為藏茵陳提取物高劑量組大 鼠局部膽管上皮輕度變性及碎片脫落；j為藏茵陳提取物高劑量組大鼠局部肝細(xì)胞散在變 性；k為聯(lián)苯雙酯滴丸組大鼠局部膽管上皮輕度變性及碎片脫落；1為聯(lián)苯雙酯滴丸組大鼠 局部肝細(xì)胞小片狀壞死；m為茵桅黃顆粒組大鼠局部膽管上皮輕度變性及碎片脫落；η為茵 桅黃顆粒組大鼠局部肝細(xì)胞散在壞死；以上照片均為HE染色放大10倍。
具體實施例方式以下實施例是為了更詳細(xì)地說明本發(fā)明，并非對本發(fā)明構(gòu)成限制。實施例1藏茵陳提取物的制備工藝取川西獐牙菜藥材20kg，粉成小段，置于300升提取罐中，加入10倍量90%乙醇， 提取三次，每次2小時，收集提取液，減壓回收乙醇至無醇味，得到濃縮液；向上述濃縮液中加入2倍藥材量的水，邊加水邊攪拌，靜置24小時，離心過濾，濾 液和濾渣分別收集，備用；稱取HPD-100樹脂20kg，置于樹脂柱中，分別用95 %乙醇和水進(jìn)行預(yù)處理，然后加 入上面得到的濾液，流速lBV/h，流出液棄去；然后用3BV的水洗脫，流速lBV/h，棄去水洗脫 液；然后用8BV的30%乙醇洗脫，流速lBV/h，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，并進(jìn)行減壓 干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為環(huán)烯醚萜類成分，含量為65% ；然后用5BV的70%乙醇洗脫，流速lBV/h，收集70%乙醇洗脫液；最后用95%乙醇 進(jìn)行樹脂再生。將70%乙醇洗脫液減壓濃縮，并進(jìn)行減壓干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液 相色譜檢測，其為山酮苷類成分，含量為50% ；取沉淀，加入10倍量石油醚(沸程60_90°C )，超聲提取30分鐘，過濾，濾液棄去， 濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為三萜類和山酮苷元 類成分，含量為30% ；將以上三部分固體粉末混合，即得藏茵陳提取物。實施例2藏茵陳提取物的制備工藝取抱莖獐牙菜藥材20kg，粉成小段，置于300升提取罐中，加入12倍量80%乙醇， 提取2次，每次3小時，收集提取液，減壓回收乙醇至無醇味，得到濃縮液；向上述濃縮液中加入5倍藥材量的水，邊加水邊攪拌，靜置12小時，離心過濾，濾 液和濾渣分別收集，備用；稱取D-101樹脂20kg，置于樹脂柱中，分別用95 %乙醇和水進(jìn)行預(yù)處理，然后加入 上面得到的濾液，流速2BV/h，流出液棄去；然后用5BV的水洗脫，流速lBV/h，棄去水洗脫 液；然后用6BV的20%乙醇洗脫，流速lBV/h，收集20%乙醇洗脫液，減壓濃縮，并進(jìn)行減壓 干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為環(huán)烯醚萜類成分，含量為40% ；然后用8BV的60%乙醇洗脫，流速2BV/h，收集60%乙醇洗脫液；最后用95%乙醇進(jìn)行樹脂再生。將60%乙醇洗脫液減壓濃縮，并進(jìn)行減壓干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液 相色譜檢測，其為山酮苷類成分，含量為35% ；取沉淀，加入20倍量石油醚(沸程60_90°C )，攪拌提取60分鐘，過濾，濾液棄去， 濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為三萜類和山酮苷元 類成分，含量為15% ；將以上三部分固體粉 末混合，即得藏茵陳提取物。實施例3藏茵陳提取物的制備工藝取川西獐牙菜藥材20kg，粉成小段，置于300升提取罐中，加入15倍量65%乙醇， 提取2次，每次1. 5小時，收集提取液，減壓回收乙醇至無醇味，得到濃縮液；向上述濃縮液中加入3倍藥材量的水，邊加水邊攪拌，靜置36小時，離心過濾，濾 液和濾渣分別收集，備用。稱取HPD-300樹脂20kg，置于樹脂柱中，分別用95%乙醇和水 進(jìn)行預(yù)處理，然后加入上面得到的濾液，流速3BV/h，流出液棄去；然后用4BV的水洗脫，流 速1. 5BV/h,棄去水洗脫液；然后用8BV的10%乙醇洗脫，流速1. 5BV/h,收集10%乙醇洗脫 液，減壓濃縮，并進(jìn)行減壓干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為環(huán)烯醚萜類成 分，含量為46% ；然后用6BV的70%乙醇洗脫，流速1. 5BV/h，收集70%乙醇洗脫液；最后用95%乙 醇進(jìn)行樹脂再生。將70%乙醇洗脫液減壓濃縮，并進(jìn)行減壓干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效 液相色譜檢測，其為山酮苷類成分，含量為34% ；取沉淀，加入30倍量石油醚(沸程60-90°C )，攪拌提取90分鐘，過濾，濾液棄去， 濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為三萜類和山酮苷元 類成分，含量為8% ；將以上三部分固體粉末混合，即得藏茵陳抗肝炎提取物。實施例4藏茵陳提取物的制備工藝取抱莖獐牙菜藥材20kg，粉成小段，置于300升提取罐中，加入8倍量55%乙醇， 提取4次，每次1小時，收集提取液，減壓回收乙醇至無醇味，得到濃縮液；向上述濃縮液中加入4倍藥材量的水，邊加水邊攪拌，靜置48小時，離心過濾，濾 液和濾渣分別收集，備用；稱取AB-8樹脂20kg，置于樹脂柱中，分別用95 %乙醇和水進(jìn)行預(yù)處理，然后加入 上面得到的濾液，流速3BV/h，流出液棄去；然后用5BV的水洗脫，流速2BV/h，棄去水洗脫 液；然后用6BV的30%乙醇洗脫，流速2BV/h，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，并進(jìn)行減壓 干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為環(huán)烯醚萜類成分，含量為35% ；然后用8BV的50%乙醇洗脫，流速2BV/h，收集50%乙醇洗脫液；最后用95%乙醇 進(jìn)行樹脂再生。將50%乙醇洗脫液減壓濃縮，并進(jìn)行減壓干燥，得到的固體粉末，經(jīng)高效液 相色譜檢測，其為山酮苷類成分，含量為20% ；取沉淀，加入25倍量石油醚(沸程60_90°C )，超聲提取45分鐘，過濾，濾液棄去， 濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，得到的固體粉末，經(jīng)高效液相色譜檢測，其為三萜類和山酮苷元 類成分，含量為10% ；將以上三部分固體粉末混合，即得藏茵陳提取物。實施例5藏茵陳提取物的制備
取實施例1所制備的藏茵陳提取物14g和淀粉40g，混合均勻，用85%乙醇制粒， 60°C干燥，整粒，裝膠囊，即制得含有藏茵炎提取物的膠囊劑型的藥物組合物。實施例6藏茵陳抗肝炎片的制備 取實施例2所制備的藏茵陳提取物8g和蔗糖40g，混合均勻，制粒，干燥，即制得含 有藏茵炎提取物的顆粒劑型的藥物組合物；或?qū)⒅频玫念w粒經(jīng)進(jìn)一步壓片，即制得含有藏 茵陳抗肝炎提取物的片劑劑型的藥物。實施例7藏茵陳抗肝炎顆粒的制備取實施例3制得的藏茵陳提取物250g，葡萄糖100g，糊精200g，以稀淀粉糊為粘合 劑制粒，分裝，即得。實施例8藏茵陳抗肝炎滴丸的制備取實施例4所制備的藏茵陳提取物20g，混合均勻，加入40g熔融的聚乙二醇6000 中，攪拌均勻，保溫90°C狀態(tài)下倒入滴丸裝置中，以30d/min的滴速滴入10°C的液體石蠟 中，制成滴丸，即制得含有藏茵陳抗肝炎的滴丸劑型的藥物。實施例9本實施例用于證明本發(fā)明藏茵陳提取物的藥效。一.藥效篩選試驗1.材料和方法1. 1 動物Wistar大鼠，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所生產(chǎn)，許可證編號 SCXK (京)2005-0013。1.2試驗樣品樣品1，為藏茵陳藥材經(jīng)90%乙醇提取后得到的提取物(藏茵陳醇提物)；樣品2， 為本發(fā)明實施例1的藏茵陳提取物；樣品3，為在發(fā)明實施例1分離純化過程中舍棄的部分 (無效部位)。1. 3試驗方法Wistar大鼠，雄性，250_400g，禁食12h后，腹腔注射25%烏拉坦麻醉，固定，腹部 切口，做膽總管插管，術(shù)后穩(wěn)定30min后，收集Ih空白膽汁，然后經(jīng)十二指腸給藥。藏茵陳 醇提物、有效部位、無效部位均為10. Sg生藥/kg，陽性藥(熊去氧膽酸)為0. 12g/kg。給藥后每小時收集1次膽汁，共5h。膽汁以Iml注射器測量各次膽汁量并記錄。 以各時間點與給藥前的膽汁量差值進(jìn)行t-檢驗。2.結(jié)果試驗數(shù)據(jù)如表1、表2所示。表1藏茵陳利膽試驗各組大鼠膽汁流量(χ士 sd) (η = 10)
權(quán)利要求
1.一種藏茵陳提取物，該提取物包含環(huán)烯醚萜，其含量為10 50% ；山酮，其含量為 10 50% ；和三萜，其含量為5 20% ；以上三種成分的總含量為20% -80% (重量)，優(yōu) 選為50% -80% (重量)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藏茵陳提取物，其特征在于，所述環(huán)烯醚萜包括獐牙菜苦苷、 獐牙菜苷、龍膽苦苷；所述山酮包括芒果苷、當(dāng)藥醇苷、1，5，8_三羥基-3-甲氧基山酮和 1-三羥基_3，5- 二甲氧基山酮；所述三萜包括齊墩果酸、熊果酸。
3.—種權(quán)利要求1或2所述的藏茵陳提取物的制備方法，該制備方法包括如下步驟(1)取藏茵陳藥材，粉碎或切斷，用7-15倍重量的質(zhì)量濃度為55-95%的醇，優(yōu)選為乙 醇回流提取2-4次，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到濃縮液；(2)將步驟(1)制備的濃縮液在攪拌狀態(tài)下加入3-5倍的水，并用NaOH調(diào)節(jié)pH值為 6-8，水沉12-48小時，離心過濾，得到上清液和沉淀；(3)取步驟( 獲得的上清液，使其以0.5-;3BV/h的流速流過預(yù)處理好的大孔吸附 樹脂進(jìn)行吸附，然后以0. 5-3BV/h的流速，先用2-5倍水進(jìn)行洗脫除雜，然后再用3-8BV 的10% -30%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得環(huán)烯醚萜類成分，再用3-8BV的 50% -80%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集并濃縮至干，獲得山酮苷類成分；取步驟( 獲得的 沉淀，加入5-30倍沸程60-90°C的石油醚，進(jìn)行攪拌或超聲提取30-90分鐘，過濾，濾液棄 去，濾渣揮發(fā)石油醚，并粉碎，即得三萜類和山酮苷元類成分；(4)將步驟C3)獲得的環(huán)烯醚萜類成分、山酮苷類成分、三萜類和山酮苷元類成分相混 合，即得到本發(fā)明的藥物組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述藏茵陳藥材包括川 西獐牙菜(S. mussotii)和抱莖獐牙菜(S. franchetiana)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4中所述的制備方法，其特征在于，步驟⑶中，所述大孔吸附樹 脂包括HPD-100、HPD-300、AB-8和D-101型大孔吸附樹脂。
6.一種藥物組合物，該藥物組合物含有權(quán)利要求1或2所述的藏茵陳提取物以及藥學(xué) 上可接受的載體和/或賦形劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物為固體口服制劑、 液體口服制劑或注射劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物為膠囊、顆粒、 片劑、滴丸、口服溶液劑、注射用水針、注射用凍干粉針、大輸液或小輸液。
9.權(quán)利要求1或2所述的藏茵陳提取物在制備用于預(yù)防和/或治療肝炎，例如黃疸型 肝炎的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種藏茵陳提取物，其包含環(huán)烯醚萜、山酮和三萜類成分，上述三種成分總含量為20％-80％(重量)。本發(fā)明還提供了制備上述藏茵陳提取物的方法。本發(fā)明還提供了含有上述藏茵陳提取物的藥物組合物。本發(fā)明的藏茵陳提取物具有明顯利膽作用，對化學(xué)物質(zhì)所致急性肝損傷和阻塞性黃疸的肝功能異常有明顯的保護(hù)和改善作用。
文檔編號A61K9/08GK102138966SQ20101010623
公開日2011年8月3日 申請日期2010年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月29日
發(fā)明者劉瑩, 張鐵軍, 朱雪瑜, 王麗莉, 田成旺, 韓冬, 龔蘇曉 申請人:天津藥物研究院