專利名稱：五加屬植物提取物、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明系關(guān)于中草藥提取物及其制備方法。本發(fā)明亦關(guān)于所述的提取物于治療或 預(yù)防代謝癥候群的用途。
背景技術(shù)：
代謝癥候群亦稱為X癥候群、胰島素阻抗癥候群、雷文氏癥候群(Reaven’ s syndrome)及致命四重奏(deadly quartet)，其代表心血管疾病危險(xiǎn)因子的匯集。美國(guó) 國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃(NCEP)、世界衛(wèi)生組織(WHO)、國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)及美國(guó)內(nèi)分泌 學(xué)學(xué)院等機(jī)構(gòu)針對(duì)代謝癥候群提出多種定義。一般而言，代謝癥候群的定義系指一個(gè)體 具有下述至少兩種或以上的特征依據(jù)腰圍所定義的中央肥胖、高血壓(例如大于或等于 140/90mmHg)、高三酸甘油酯、高空腹血糖及低量的高密度脂蛋白(HDL)膽固醇。一般而言，罹患代謝癥候群中的個(gè)別疾病系分別以不同的藥物治療。利尿劑及 ACE抑制劑可用于治療高血壓；膽固醇藥物則用于降低LDL膽固醇及三酸甘油脂，并可提 高HDL膽固醇濃度。緩解胰島素抗性的藥物，諸如甲福明(metformin)及胰島素增敏藥物 (thiazolidinediones (TZD))亦可用于治療代謝癥候群。原名 Acanthopanax senticosus(Araliaceae)的刺五力口 Eleutherococcus senticosus(Ruper. Et Maxim. )Maxime廣泛地單獨(dú)或與其它中草藥合并使用來治療疾病。 JP2003-277282 及 JP 2006—234603 揭示自刺五加 Acanthopanaxsenticosus Harms 提取醫(yī) 藥化合物的方法。JP 2007-277128關(guān)于利用五加屬植物粉末作為治療肥胖、糖尿病及高脂 血癥的中草藥的活性成分。JP 2006-348054則建議Acanthopanaxdieboldianus的水提取 物、醇提取物、醚提取物及酮提取物具有抑制脂酶的功效，且所述的提取物可有效預(yù)防或治 療肥胖及高脂血癥。然而，JP 2006-348054僅證明水提取物在活體外抑制脂酶的IC5tl為 170μ g/0. 5ml 值。Hikino H 等人(J. Nat. prod. , 1986,49(2) ；293-7)及 Medon P. J 等人 (Zhongguo YaoLi Xue Bao. , 1981,2(4) :281_5)揭示對(duì)老鼠投與 EleutheroCoccus sent Cosus提取物可有效降低血糖濃度。CN 101356968揭示臺(tái)灣何首烏Polygonum multiflorum Thunb. Ex Murrayvar. hypoleucum(Ohwi)具有改善代謝癥候群的功效。由于代謝癥候群患者有日益增加的趨勢(shì)，本發(fā)明因此關(guān)注于代謝癥候群的治療。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一目的為提供一種制備五加屬植物提取物的方法。本發(fā)明的另一目的為提供一種五加屬植物提取物。本發(fā)明的又一目的為提供一種包含本發(fā)明五加屬植物提取物的組合物。本發(fā)明的又一目的為提供一種預(yù)防或治療個(gè)體罹患代謝癥候群的至少一種病癥 的方法，其包括投與本發(fā)明組合物至有需要的個(gè)體。本發(fā)明的又一目的為提供一種預(yù)防或治療個(gè)體罹患脂聯(lián)素相關(guān)疾病的方法，其包 括投與本發(fā)明組合物至有需要的個(gè)體。
本發(fā)明的又一目的為提供一種預(yù)防或治療個(gè)體罹患過氧化體增殖劑活化受體 y (PPARy)相關(guān)疾病的方法，其包括投與本發(fā)明組合物至有需要的個(gè)體。本發(fā)明的又一目的為提供一種降低個(gè)體氧化壓力的方法，其包括投與本發(fā)明組合 物至有需要的個(gè)體。本發(fā)明的再一目的為提供一種本發(fā)明五加屬植物提取物于制備用于預(yù)防或治療 代謝癥候群的至少一種病癥的藥物的用途。本發(fā)明的再一目的為提供一種本發(fā)明五加屬植物提取物于制備用于預(yù)防或治療 脂聯(lián)素相關(guān)疾病的藥物的用途。本發(fā)明的再一目的為提供一種本發(fā)明五加屬植物提取物于制備用于預(yù)防或治療 過氧化體增殖劑活化受體Y (PPARy)相關(guān)疾病的藥物的用途。本發(fā)明的再一目的為提供一種本發(fā)明五加屬植物提取物于制備用于降低氧化壓 力的藥物的用途。本發(fā)明在以下部分中詳細(xì)描述。本發(fā)明的其它特征、目的及優(yōu)點(diǎn)可易見于本發(fā)明 的實(shí)施方式及申請(qǐng)專利范圍中。


圖1顯示本發(fā)明紅毛五加提取物不僅可促進(jìn)PPAR γ的活性，且可提高3T3-L1細(xì) 胞內(nèi)PPARy量，其中「Trog」及「EA16」分別代表曲格列酮及紅毛五加50% EtOH-EtOAc提 取物；及圖2顯示SD大鼠口服葡萄糖耐受性試驗(yàn)第四周的結(jié)果，其中所載數(shù)據(jù)以平均值士 標(biāo)準(zhǔn)偏差表示(η = 7 8)，*、#分別表示與正常對(duì)照組(C)、高果糖對(duì)照組(F)間具有統(tǒng)計(jì)上 明顯差異(P < 0. 05)。
具體實(shí)施例方式除非本文中另外定義，否則結(jié)合本發(fā)明使用的科技術(shù)語(yǔ)應(yīng)具有一般技術(shù)者通常理 解的含義。術(shù)語(yǔ)的含義及范疇?wèi)?yīng)為明確的；然而，若存在任何潛在含糊性，則本文所提供的 定義優(yōu)先于任何詞典或外來定義。除非上下文另外需要，否則單數(shù)術(shù)語(yǔ)應(yīng)包括復(fù)數(shù)且復(fù)數(shù)術(shù)語(yǔ)應(yīng)包括單數(shù)。除非另外指示，否則應(yīng)了解如本案所用的以下術(shù)語(yǔ)具有以下含義如本文所用的術(shù)語(yǔ)「預(yù)防」表示延緩易罹病個(gè)體的癥狀的起始或降低病癥的發(fā)生。術(shù)語(yǔ)「治療」表示減少及/或改善罹病個(gè)體的癥狀。術(shù)語(yǔ)「?jìng)€(gè)體」表示動(dòng)物，特別是哺乳動(dòng)物。根據(jù)本發(fā)明的較佳實(shí)施例，「?jìng)€(gè)體」系指 人類。術(shù)語(yǔ)「治療有效量」表示一活性成分單獨(dú)或與其它治療/藥物合并使用時(shí)的用量， 所述的用量足以顯示治療功效。術(shù)語(yǔ)「載劑」或「醫(yī)藥可接受的載劑」系指稀釋劑、賦形劑、接受體(acceptors)或 類似物，其為制造醫(yī)藥組合物技術(shù)中的一般技術(shù)者所熟知。術(shù)語(yǔ)「五加屬植物(Eleutherococcus sp.)」系指五加屬植物的根部、葉子、莖部及 /或整株植物，較佳者，五加屬植物為刺五加(E. senticosus(Ruper. Et Maxim)Maxim)、紅毛五加(E. giraldii)及三葉五加(E. trifoliatu)。根據(jù)本發(fā)明，植株系未經(jīng)加工或經(jīng)諸如干 燥、切片或研磨等加工處理。制備方法根據(jù)本發(fā)明，制備五加屬植物提取物的方法包括下述步驟a)以醇類溶液提取五加屬植物；及b)自步驟a)所得提取物中移除固體部分，即制得五加屬植物提取物。根據(jù)本發(fā)明的方法，五加屬植物的重量與醇類溶液體積的比例為約1/5至約 1/50，較佳者為約1/10至約1/30，更佳者則為約1/20。根據(jù)本發(fā)明的方法，術(shù)語(yǔ)「醇類溶液」系指絕對(duì)醇類或藉由混合醇類及水所得的溶 液。根據(jù)本發(fā)明，所述的醇類為具有1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基部分，較佳者為1至 4個(gè)碳原子，更佳者為1至3個(gè)碳原子。例如，所述的醇類為甲醇、乙醇、異丙醇或其混合物。 較佳者，所述的醇類為甲醇或乙醇。根據(jù)本發(fā)明方法，醇類溶液中醇類濃度為約30至100v/v%。本發(fā)明的一較佳實(shí)施 例，所述的醇類溶液為約30至100v/v%、較佳者為約40至90v/v%、更佳者為約50至70v/ 乂％的甲醇。另一較佳實(shí)施例，所述的醇類溶液為約30至100v/v%、較佳者為約40至90v/
、更佳者為約50至乙醇。根據(jù)本發(fā)明方法，提取步驟a)可用任何習(xí)知方法實(shí)施，例如煎煮、浸泡、超音波提 取法、攪拌、搖晃或其組合。提取時(shí)間為約1至約48小時(shí)、較佳者為約12至36小時(shí)、更佳 者為約24小時(shí)。提取溫度為約20至45°C、較佳者為約25至35°C。根據(jù)本發(fā)明方法，步驟b)中所述的固體部分可由任何習(xí)知方法移除，例如經(jīng)由紗 布過濾、離心或其組合。根據(jù)本發(fā)明方法，其可進(jìn)一步包括步驟C)以任何習(xí)知方法濃縮五加屬植物提取 物，例如冷凍干燥或蒸發(fā)(J. Pharmacol. Sci.，99 294-300，2005 及 J. Chromatography, 932 =91-95,2001)以獲得經(jīng)濃縮的五加屬植物提取物。根據(jù)本發(fā)明方法，自步驟C)所得的所述的經(jīng)濃縮的五加屬提取物可進(jìn)一步藉由 具有中度至高度極性的溶劑提取/分配，以獲得第二五加屬植物提取物。根據(jù)本發(fā)明，所述 的具有中度至高度極性的溶劑可為技藝人士所熟知者，例如醚類、醇類、酯類或其混合物。 可作為溶劑的實(shí)例包括，但不限于異丁醇、正丁醇、乙酸丁酯、氯仿、乙酸乙酯及其混合物。 經(jīng)濃縮的五加屬植物提取物與溶劑的ν/ν比為約1 1至1 4。根據(jù)本發(fā)明方法的一較佳實(shí)施例，所述的溶劑為乙酸乙酯且藉由液液提取法進(jìn) 行提取(Free Radic Res. ,38(1) :97_103，2004 及 J. Herb. Pharmacother.，7 107-128， 2007)。一般系將經(jīng)濃縮的五加屬植物提取物與乙酸乙酯接觸，隨后以約1 lv/v的比例 加入0. 5%碳酸氫鈉至酯層以移除脂肪酸(Biosci. Biotechnol. Biochem. 62 (3) =532-534, 1998)。組合物本發(fā)明提供一種包含治療有效量的本發(fā)明五加屬植物提取物的組合物。本發(fā)明組 合物可作為食品組合物或醫(yī)藥組合物。本發(fā)明組合物可藉由任何適當(dāng)途徑投與至個(gè)體，例如口服投與。本發(fā)明組合物適 當(dāng)調(diào)配形式包括，但不限于錠劑、喉片、硬式或軟式膠囊、水性或油性懸浮液、乳劑、可分散粉末或顆粒、糖漿或酏劑(elixir)。如需要，可針對(duì)所述的組合物滅菌或與任何醫(yī)藥可接受 的載劑，例如安定劑、濕化劑等混合。本發(fā)明組合物可藉由任何習(xí)知方法與習(xí)知醫(yī)藥可接受的賦形劑予以混合。因此， 欲用于口服的本發(fā)明組合物可包含，例如一或多種呈色劑、甜味劑、增味劑及/或保存劑。本發(fā)明組合物可與其它一或多種目前正在使用的藥物(例如，降脂藥物、抗糖尿 病藥物及抗氧化藥物)并用，以治療代謝癥候群。用途本發(fā)明組合物可用于預(yù)防或治療至少一種、較佳為二或多種代謝癥候群的癥狀。 代謝癥候群的主要癥狀包括，但不限于肥胖、腹部肥胖、血脂異常、葡萄糖耐受異常、心血管 疾病、胰島素阻抗及II型糖尿病(Life Sci.，2003，73 =2395-2411)。本發(fā)明組合物可用于抑制乙酰輔酶A羧化酵素(acety 1-CoAcarboxyIase，ACC)的 活性。ACC是脂肪酸合成的關(guān)鍵酵素，其產(chǎn)物丙二?；o酶AOiialonyl-CoA)為脂肪酸合成 酵素(fattyacid synthase,FAS)的受質(zhì)，且是肉酸素棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(carnitin palmitoyl CoA transferase，CPT)的抑制劑。因此抑制ACC不但可以降低三酸甘油脂的合成，也可 減少脂肪酸的合成。(Kusunoki 等人，Endocrine, 29 :91_100，2006、Abu-Elheigh 等人， PNAS, 100 :10207-10212、Arbeeny 等人，J. Lipid Res. ,33(6) :843_851，1992、Rose_kahn 及 Bar-Tana, Biochem. Biophys. Acta. 1042 :259_264,1990 及 Harwood, Expert. Opin. Ther. Targets,9(2) :267_281，2005)。本發(fā)明組合物可用于預(yù)防或治療脂聯(lián)素相關(guān)的疾病，其包括，但不限于肥胖、胰 島素阻抗、高血糖癥及動(dòng)脈粥狀硬化(J. Cardiometab. Syndr.，2007，2 (4) :288_294及 J. Clin.Endocrinol. Metab.，2005,90 :4792_4796)。本發(fā)明組合物可用于活化PPAR y。PPAR γ的活化可誘發(fā)前脂肪細(xì)胞的分化及脂 肪的代謝，亦可改善細(xì)胞的胰島素敏感性(Endocrine Rev. ,1999,20 =649-688) 0本發(fā)明組合物可用于清除活性氧化物質(zhì)(reactive oxygenspecies (ROS))，例如 用作抗氧化劑。ROS過量是有害且對(duì)細(xì)胞及組織具毒性，其在糖尿病、動(dòng)脈粥狀病變、腎病變 及視網(wǎng)膜病變的發(fā)生上扮演重要角色(Am. J. Nephrol. ,29 :62_70，2009及Cardiovascular Diabetology,l =3-32,2002) 0膳食抗氧化劑，其對(duì)于抗氧化壓力具保護(hù)作用，已被視為抵 抗肝損害、視網(wǎng)膜損害及動(dòng)脈粥狀硬化的治療劑(Crit. Rev. FoodSci. Nutr. ,44 =575-586, 2004、Diabetes Metab. Rev.，22 38-45,2006 及 J. Pharmacol. Sci.，99 :294_300，2005)。本領(lǐng)域的技藝人士當(dāng)可無困難地選擇適當(dāng)?shù)耐杜c途徑及劑量以進(jìn)行治療。根據(jù)本 發(fā)明，較佳途徑為口服投與。劑量則根據(jù)疾病的本質(zhì)及其狀況、個(gè)體的年紀(jì)及健康狀況、投 與途徑及前處理等情形而定。技藝人士當(dāng)了解劑量會(huì)隨著個(gè)體的年紀(jì)、體重、健康狀況及其 它相關(guān)因素而變化。以下的非限制性的實(shí)例有助于本發(fā)明技術(shù)領(lǐng)域所屬的技術(shù)人員實(shí)施本發(fā)明。所述 的等實(shí)例不應(yīng)視為過度地限制本發(fā)明。本發(fā)明技術(shù)領(lǐng)域所屬的技術(shù)人員可在不背離本發(fā)明 的精神或范疇的情況下對(duì)本文所討論的實(shí)施例進(jìn)行修改及變化，而仍屬于本發(fā)明的范圍。實(shí)例實(shí)例1五加屬植物提取物的制備(1)醇類提取物
五力口屬植物，包括刺五力口 (Eleutherococcus senticosus (Ruper. et Maxim.) Maxim.)、紅毛五加(E. giraldii)及三葉五加(E. trifoliatus)以磨碎機(jī)研磨后，以例如 50%或70%的甲醇或乙醇(W/V= 1/20)等溶劑萃制24小時(shí)，4層紗布過濾后，以減壓機(jī)予 以濃縮。(2)醇類/乙酸乙酯提取物取上述50%或70%的甲醇或乙醇提取物，加入等體積乙酸乙酯進(jìn)行提取。將乙酸 乙酯層用5%碳酸氫鈉處理以移除脂肪酸后，再濃縮乙酸乙酯層部分，得到甲醇或乙醇/乙 酸乙酯(MeOH 或 EtOH-EtOAc extracts)提取物。實(shí)例2五加屬植物取物提取物對(duì)ACC的抑制活性自大鼠肝分離并純化ACC，以測(cè)試自實(shí)例1所制得的提取物對(duì)于ACC活性的抑制 功效，其測(cè)試步驟為參考Tanabe等人的方法(Tanabe等人，1981. Methods in Enzymology 71 (Pt C) :5-16.)。結(jié)果如表1所示，所有提取物均具有抑制ACC的作用。表1、五加屬植物提取物對(duì)于ACC活性的抑制功效
ACC的抑制
(%)
70%乙醇提取物(于0.5 mg/mL)
權(quán)利要求
一種制備五加屬植物提取物的方法，其包括以下步驟a)以醇類溶液提取五加屬植物；及b)自步驟a)所得的提取物中移除固體部分以獲得五加屬植物提取物。
2.如權(quán)利要求1的方法，其中所述的五加屬植物為刺五加Eleutherococcus senticosus (Ruper. et Maxim. )Maxim> 紅毛五力口 (E. giraldii)或三 口十五力口 (E. trifoliateus)。
3.如權(quán)利要求1的方法，其中五加屬植物對(duì)醇類溶液的重量比為約1/5至1/50。
4.如權(quán)利要求1的方法，其中所述的醇類溶液為乙醇、甲醇或異丙醇溶液。
5.如權(quán)利要求1的方法，其中所述的醇類的濃度為約30%至約100v/v%。
6.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的方法，其系進(jìn)一步包括步驟c)濃縮五加屬植物提取物。
7.如權(quán)利要求6的方法，其系進(jìn)一步包括步驟d)以具有中度至高度極性的溶劑提取/ 分配所述的經(jīng)濃縮的五加屬提取物，以獲得第二五加屬植物提取物。
8.如權(quán)利要求7的方法，其中所述的具有中度至高度極性的溶劑系選自異丁醇、正丁 醇、乙酸丁酯、氯仿、乙酸乙酯或其混合物。
9.如權(quán)利要求8的方法，其中所述的具有中度至高度極性的溶劑為乙酸乙酯。
10.一種五加屬植物提取物，其為如權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的方法所制得。
11.一種組合物，其包含治療有效量的如權(quán)利要求10的五加屬植物提取物及視情形的 醫(yī)藥可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
12.如權(quán)利要求11的組合物，其系食品組合物或醫(yī)藥組合物。
13.—種如權(quán)利要求10的五加屬植物提取物于制備預(yù)防或治療代謝癥候群的至少一 種癥狀的藥物的用途。
14.如權(quán)利要求13的用途，其中所述的癥狀為中央肥胖(腹部肥胖)、血脂異常、心血 管疾病、葡萄糖耐受異?；蛞葝u素抗阻。
15.一種如權(quán)利要求10的五加屬植物提取物于制備抑制乙酰輔酶A羧化酵素 (acetyl-CoA carboxylase)的藥物的用途。
16.一種如權(quán)利要求10的五加屬植物提取物于制備預(yù)防或治療與脂聯(lián)素相關(guān)疾病的 藥物的用途。
17.—種如權(quán)利要求10的五加屬植物提取物于制備活化過氧化體增殖劑活化受體 Y (PPARY)的藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明關(guān)于五加屬植物(Eleutherococcus spp.)提取物及其制備方法。本發(fā)明亦關(guān)于使用本發(fā)明五加屬植物提取物于治療或預(yù)防至少一種代謝癥候群癥狀的用途。
文檔編號(hào)A61P9/00GK101953862SQ201010110158
公開日2011年1月26日 申請(qǐng)日期2010年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月15日
發(fā)明者張?jiān)戳x, 蔡蕙蕓, 陳秀雯, 陳紀(jì)樺 申請(qǐng)人:財(cái)團(tuán)法人食品工業(yè)發(fā)展研究所