專利名稱：：一種用于防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥和天然藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物及其制備和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：痛風(fēng)是嘌呤代謝紊亂及/或尿酸排泄減少所引起的一組疾病，其臨床特點為高尿酸血癥，特征性反復(fù)發(fā)作的急性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石沉積、痛風(fēng)石性慢性關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)畸形，后期常累及腎臟而引起慢性間質(zhì)性腎炎和尿酸鹽性腎結(jié)石的形成。近年來，我國痛風(fēng)發(fā)病率呈顯著上升的趨勢1980年方圻等在北京、上海、廣州502名成年人中進行的調(diào)查沒有發(fā)現(xiàn)一例痛風(fēng)；1997-1998年，戴生明等在上海市楊浦區(qū)調(diào)查發(fā)現(xiàn)痛風(fēng)的發(fā)病率為0.22%;2002年，史方等報道這一數(shù)字已達0.28%。痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的臨床治療，原則概括起來主要有兩點一是迅速而有效地緩解其急性發(fā)作；二是降低血尿酸，預(yù)防其反復(fù)發(fā)作?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎急性期主要有三類藥物秋水仙堿、非甾體類抗炎藥及糖皮質(zhì)激素，雖然臨床療效可靠，但長期應(yīng)用有較大毒副作用。秋水仙堿常有腹痛、腹瀉、嘔吐等胃腸道反應(yīng)，大劑量應(yīng)用時可以引起骨髓抑制、肝細胞破壞以及神經(jīng)系統(tǒng)的毒性，而且其治療劑量與中毒劑量十分接近，很容易發(fā)生毒副反應(yīng)。至于非甾體類抗炎藥(NSAIDs)，是一類具有良好解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎作用的藥物。傳統(tǒng)的NSAIDs通過抑制環(huán)氧化酶(COX)的活性，使前列腺素(PGs)的生成減少，從而發(fā)揮解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎作用。但其無選擇性抑制C0X-1和C0X-2的活性，因此，消化道不良反應(yīng)較多見。1999年相繼上市的塞來昔布和羅非昔布等昔布類(coxibs)藥物能夠特異性地抑制C0X-2，而對C0X-1的活性沒有影響或很少影響，臨床用于治療骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，與傳統(tǒng)的NSAIDs相比，其胃腸道不良反應(yīng)明顯減少。然而，由于羅非昔布有嚴(yán)重的心血管不良反應(yīng)(包括心臟病發(fā)作和心肌梗死)，默克公司于2004年主動將羅非昔布撤出市場。新的臨床數(shù)據(jù)顯示其他昔布類藥物也有此類反應(yīng)，輝瑞公司的伐地昔布也已被FDA要求撤出市場。至于糖皮質(zhì)激素，其易引起骨質(zhì)疏松、消化道潰瘍、代謝紊亂、免疫抑制等一系列不良反應(yīng)已是眾所周知，僅在上述藥物治療無效或產(chǎn)生不良反應(yīng)或有較重的全身癥狀才考慮使用，在臨床上不作為一線首選藥物。在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的緩解期，治療的主要目的是降低血尿酸，目前臨床應(yīng)用的主要有抑制尿酸合成和促進尿酸排泄兩大類藥物，前者以別嘌呤醇為代表，后者以苯溴馬隆為代表。兩者都有著確切的臨床療效，但都存在著一些明顯的不良反應(yīng)或毒副作用，限制了其臨床應(yīng)用，如兩者都有可能誘發(fā)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生，別嘌呤醇有可能引起致命的剝脫性皮炎，苯溴馬隆則可能引發(fā)合并腎結(jié)石的患者發(fā)生腎絞痛等。由于痛風(fēng)目前來說是非根治性疾病，有可能終生都反復(fù)發(fā)作，因此本病的防治是一個長期乃至終身性的過程，而上述藥物的缺點都限制了其在臨床上的長期應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生與發(fā)展具有明顯治療和預(yù)防作用的3中藥配伍處方及其制備和應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物，該中藥組合物含有下列重量份的生藥組分防風(fēng)(S即oshnikoviadivaricate(Turcz.)Schischk.)9'15蒼術(shù)(RhizomaAtractylodis)6'9當(dāng)歸(Angelicasinensis(Oliv.)Diels)12'15茵陳蒿(ArtemisiacapillarisThunb.)15'30漢防己(StephaniatetrandraS.Moore)9'12憲活(RhizomaNotopterygii)6'9虎杖(ReynoutriajaponicaHoutt.)15'30獨活(AraliafargesiiFranch)6'9豬零(Polyporus)12'15生甘草(RadixGlycyrrhizae)9'12進一步的，本發(fā)明還公開了一種中藥提取物，為以上述中藥組合物為原料提取有效成分制得。本發(fā)明中，生藥的配方最為關(guān)鍵，在獲知生藥配方后，本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員可采用各種常規(guī)的中藥有效成分提取方法來提取其有效成分，如常規(guī)的煎煮、水提醇沉法、醇提水沉法、鹽析法等，由于上述提取方法均能獲得前述中藥配方中的主要藥效成分，因此均能對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎具有一定的療效。所述中藥組合物提取有效成分后可再經(jīng)常規(guī)的步驟濃縮、純化或干燥獲得中藥提取物。其中濃縮的方法包括但不限于常壓蒸發(fā)、減壓蒸發(fā)、薄膜蒸發(fā)、多效蒸發(fā)，純化的方法包括但不限于鹽析純化、大孔樹脂吸附純化、乙醇沉淀純化、離子交換樹脂純化、絮凝沉淀純化、膜分離純化、聚酰胺吸附純化、硅膠吸附層析純化等，干燥的方法包括但不限于烘干法、鼓式干燥法、帶式干燥法、吸濕干燥法、沸騰干燥法、噴霧干燥法、減壓干燥法、冷凍干燥法、紅外線干燥法、微波干燥法等。本發(fā)明的中藥組合物或中藥提取物可用于制備防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物。本發(fā)明還進一步提供了一種中藥制劑，包括治療有效量的前述中藥提取物及一種或多種常規(guī)的藥學(xué)上可接受的輔料。藥學(xué)上可接受的輔料包括(但并不限于)藥物可接受的載體、稀釋劑、填充劑、結(jié)合劑及其它賦形劑。本領(lǐng)域枝術(shù)人員已知的治療惰性的無機或有機的載體包括(但不限于)乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、植物油、蠟、脂肪、多羥基化合物例如聚乙二醇、水、蔗糖、乙醇、甘油，諸如此類，各種防腐齊U、潤滑齊U、分散齊iJ、矯味齊iJ。保濕劑、抗氧化劑、甜味齊U、著色齊U、穩(wěn)定齊U、鹽、緩沖液諸如此類也可加入其中，這些物質(zhì)根據(jù)需要用于幫助配方的穩(wěn)定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情況下產(chǎn)生可接受的口感或氣味。諸如顆粒劑和膏劑之類的中藥制劑，可通過常規(guī)方法進行制備。本發(fā)明的藥物組合物還可與其他治療劑一起使用。優(yōu)選的，所述的中藥制劑為口服制劑，包括但不限于顆粒劑、丸劑、片劑、膠囊劑、糖漿劑、噴霧劑等。在提取出中藥組合物中的有效成分后，可采用常規(guī)的藥用輔料及添加劑制備前述藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物的有效治療劑量為，以原料藥材的總重量計，口服安全有效量通常為1.69-2.54克/千克體重。當(dāng)然，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。臨床觀察、藥效和毒理研究結(jié)果表明，本發(fā)明的中藥組合物的有效成分，可以明顯緩解急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)疼痛和腫脹，改善關(guān)節(jié)功能，治療組總有效率達95%，對照組(秋水仙堿)總有效率94%，兩組比較無顯著性差異(P>0.05);同時發(fā)現(xiàn)該藥具有降低血尿酸，增加尿尿酸的排出，優(yōu)于對照組(P<0.05)，且臨床研究未發(fā)現(xiàn)明顯毒副反應(yīng)。動物實驗研究表明與模型組比較，能明顯減少醋酸致炎小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)，且能明顯提高熱致痛小鼠的痛閾值(P<0.05);可以抑制致炎物質(zhì)所致小鼠的耳廓腫脹和大鼠的足跖腫脹，降低致炎小鼠炎癥滲出液中的白細胞數(shù)量；能抑制尿酸鈉所致大鼠的踝關(guān)節(jié)腫脹、降低次黃嘌呤致高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平，并具有增加高尿酸血癥小鼠尿尿酸排出的趨勢。急性毒性實驗結(jié)果表明，給藥后連續(xù)觀察7日，未見動物死亡與明顯毒性反應(yīng)。在長期的臨床實踐中發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明的中藥組合物制成的制劑對于急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎有著確切的療效，從臨床和動物實驗方面都證實了其具有抗炎、鎮(zhèn)痛、拮抗痛風(fēng)急性發(fā)作的功效，且毒理研究未見明顯毒副作用。根據(jù)本發(fā)明組合物的作用機理及其活性強度，有望將其研發(fā)成新型的防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的六類新藥。具體實施例方式實施例1:藥物組合物顆粒劑的制備按表1的配方稱取生藥。表中，所有材料的取量單位均為kg。表1配方123456789防風(fēng)1212910141591215蒼術(shù)876679986當(dāng)歸141312151215141312茵陳蒿233015172130162018漢防己111091191210911羌活8769698795<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>提取、濃縮按表1中的配方1將各味中藥飲片核對正確后，放入1.0m3多功能提取罐中。第一次提取，加純水超過藥面三寸，煮沸后，85t:保溫循環(huán)提取45分鐘，通過輸液泵把藥液輸入貯液罐，再輸入DN350外循環(huán)單效蒸發(fā)器中濃縮，真空度0.02-0.04Mpa，蒸汽壓0.06-0.1Mpa。第二次提取，加純水超過藥面一寸，煮沸后，85t:保溫循環(huán)提取30分鐘。把藥液輸入貯液罐，然后輸入外循環(huán)單效蒸發(fā)器中濃縮，濃縮至相對密度1.20-1.23(80°C熱測)，待配。制浸膏藥液中按處方量加入糊精、防腐劑，拌勻，裝子，放入真空烘箱中烘干20小時左右。干燥至能打粉為度，打粉。制粒處方組成干浸膏730g糊精370g95%乙醇溶夜100ml共制成的顆粒劑約1000g將細粉狀浸膏加入適量95%乙醇，拌勻至一定濕度，放入搖擺式顆粒機中制粒，放入循環(huán)排風(fēng)烘箱中干燥至含水5%以下，整粒。分裝、貼簽。其他配方也采用同樣的方法配制浸膏及顆粒劑。實施例2:顆粒劑對尿酸鈉致大白鼠足跖腫脹的影響1.受試物顆粒劑實施例1配方1制備的顆粒劑，陽性對照藥物為秋水仙堿，西雙版納制藥廠生產(chǎn)，O.5mg/片，批號020814。2.實驗動物SD大鼠，均購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-002號(大鼠)。3.儀器與設(shè)備游標(biāo)卡尺，武漢教學(xué)儀器廠生產(chǎn)。4.實驗方法取體重200250g雄性SD大鼠50只，每組10只，隨機分成①蒸餾水組、②1.6g/kg實施例1的顆粒組、③3.2g/kg實施例1的顆粒組、6.4g/kg實施例1的顆粒組、⑤0.5mg/kg秋水仙堿組共六組。每鼠每日灌胃給藥20ml/kg，蒸餾水組給等體積的蒸餾水，每日l次，連續(xù)7天。第7天先測量每鼠右后足的足跖厚度，給藥1小時后，于大鼠右后足足跖皮下注射尿酸鈉(100mg/ml)混懸液O.lml/只，并分別于致炎后第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8h時測量大鼠右后足足跖厚度，計算足跖腫脹度、腫脹率，結(jié)果進行T檢驗，并計算給藥組的腫脹抑制率。5.實驗結(jié)果實施例1的顆粒1.6g/kg以上劑量，對尿酸鈉致大白鼠足跖腫脹有明顯抑制作用。與蒸餾水組比較，致炎后lh至7h能降低足跖腫脹度(p<0.05p<0.01)。6.實驗結(jié)論本發(fā)明的中藥組合物制備的顆粒劑對尿酸鈉致大白鼠足跖腫脹有明顯改善作用。實施例3:顆粒劑對實驗性高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響1.受試物顆粒劑實施例1配方1制備的顆粒劑，陽性對照藥物為別嘌醇片，廣東彼迪藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，lOOmg/片，批號20030203。2.實驗動物NIH小鼠，購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-001號(小鼠)。3.儀器與設(shè)備BECKMANCX9ALX全自動生化儀。4.實驗方法取NIH小鼠60只，雌雄各半，體重1822g，隨機分成6組蒸餾水組、次黃嘌呤+蒸餾水組、次黃嘌呤+2.31g/kg顆粒劑組、次黃嘌呤+4.62g/kg顆粒劑組、次黃嘌呤+9.24g/kg實施例1的顆粒劑組、次黃嘌呤+39mg/kg別嘌醇組。每鼠每日口服給藥40ml/kg，連續(xù)4天。末次給藥1小時后，除蒸餾水組外其余各組動物均腹腔注射次黃嘌呤lg/kg造成小鼠高尿酸血癥模型，蒸餾水組注射等容量生理鹽水。注射后30分鐘，各組動物摘眼球取血，3000RPM離心15min，取血清測血尿酸值。5.實驗結(jié)果9.24g/kg顆粒劑能明顯降低實驗性高尿酸血癥小鼠血尿酸水平，與次黃嘌呤+蒸餾水組比較有顯著性差異(P<0.05)，見表1:表1顆粒劑對實驗性高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響G士SD，iimol/ml，n=10)幼別血尿酸蒸餾水組246.40±101.95次黃嘌呤+蒸餾水組552.30±147.77次黃嘌呤+2.31g/kg顆粒劑組509.70±68.36次黃嘌呤+4.62g/kg顆粒劑組479.90±72.81次黃嘌P令+9.24g/kg顆粒劑組433.60±70.50*次黃嘌呤+39mg/kg別嘌醇組6.40±2.076.實驗結(jié)論本發(fā)明的顆粒劑有一定的降低血尿酸作用。實施例4:顆粒劑對實驗性高尿酸血癥小鼠尿尿酸水平的影響1.受試物顆粒劑實施例1配方1制備的顆粒劑，陽性對照藥物為別嘌醇片，廣東彼迪藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，100mg/片，批號20030203。2.實驗動物NIH小鼠，購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-001號(小鼠)。3.儀器與設(shè)備BECKMANCX9ALX全自動生化儀。4.實驗方法取NIH小鼠60只，雌雄各半，體重1822g，隨機分成6組，分別為蒸餾水組、次黃嘌呤+蒸餾水組、次黃嘌呤+2.31g/kg顆粒劑組、次黃嘌呤+4.62g/kg顆粒劑組、次黃嘌呤+9.24g/kg顆粒劑組、次黃嘌呤+39mg/kg別嘌醇組，每鼠每日口服給藥40ml/kg，連續(xù)4天。末次給藥1小時后，除蒸餾水組外，其余各組動物均腹腔注射次黃嘌呤lg/kg造成小鼠高尿酸血癥模型，蒸餾水組注射等容量生理鹽水。注射后各組動物均灌服lml蒸餾水，注射后1小時，開始收集各組動物的尿液，測定尿尿酸值。數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計處理，結(jié)果見表6。5.實驗結(jié)果9.24g/kg顆粒劑能明顯降低實驗性高尿酸血癥小鼠尿尿酸水平，與次黃嘌呤+蒸餾水組比較有顯著性差異(P<0.05)。見表2:表2顆粒劑對實驗性高尿酸血癥小鼠尿尿酸水平的影響G士SD，iimol/ml，n=10)組別尿尿酸蒸餾水組次黃嘌呤+蒸餾水組次黃嘌呤+2.31g/kg顆粒劑組次黃嘌呤+4.62g/kg顆粒劑組次黃嘌呤+9.24g/kg顆粒劑組次黃嘌呤+39rag/kg別喂醇組169.70±20.28359.20±147.74348.80±111.52453.60±95.22486.90±114.905.20±2.306.實驗結(jié)論顆粒劑有一定的促進尿酸排泄的作用。實施例5:顆粒劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響1.受試物顆粒劑實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑，陽性對照藥物為阿司匹林，湖南南光藥業(yè)有限公司，規(guī)格500mg/片，批號20010901。2.實驗動物NIH小鼠，購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-001號(小鼠)。3.儀器與設(shè)備JD200-3電子天平，沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司。4.實驗方法取雄性小鼠50只，體重2530g，隨機分成6組，分別為蒸餾水組、2.31g/kg顆粒劑組、4.62g/kg顆粒劑組、9.24g/kg顆粒劑組、200mg/kg阿司匹林組，各組鼠灌胃給藥40ml/kg，每日一次，連續(xù)5天。第五天給藥30分鐘后，于小鼠左耳涂0.05m1/只二甲苯致炎，30分鐘后斷頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑6mm打孔器敲下左、右耳圓片，在分析天平上稱重，計算每鼠耳腫脹度(腫脹度=左耳重_右耳重)，將數(shù)據(jù)進行成組T檢驗，并計算腫脹抑制率[腫脹抑制率=(蒸餾水組腫脹度平均值-藥物組腫脹度平均值)/蒸餾水組腫脹度平均值]。5.實驗結(jié)果顆粒劑2.31g/kg以上劑量對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用(p<0.05p<0.001)，見表3:表3顆粒劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響G士SD，n=10)8組另lj左耳重量右耳重量腫脹度腫脹(mg)(mg)(左耳-右耳，mg)抑制率％蒸餾水組23.14±3.598.93±1.3314.21±2.582.31g/kg顆粒劑組21.43±2.389.64±2.2711.79±2.3117.084.62g/kg顆粒劑組19.64±3.489.64±1.8110.00±3.4029.659.24g/kg顆粒劑組17.21±5.699.57±3.167.64±4.2446.23200mg/kg阿司匹林組19.86±4.708.64±0.9310.21土4.56*28.146.實驗結(jié)論顆粒劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有抑制作用。實施例6:顆粒劑對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響1.受試物顆粒劑實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑，陽性對照藥物為阿司匹林，湖南南光藥業(yè)有限公司，規(guī)格500mg/片，批號20010901。2.實驗動物SD大鼠，均購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-002號(大鼠)。3.儀器與設(shè)備游標(biāo)卡尺，武漢教學(xué)儀器廠生產(chǎn)。4.實驗方法取雄性大鼠50只，體重200250g，每組10只隨機分成蒸餾水組、1.6g/kg顆粒劑組、3.2g/kg顆粒劑組、6.4g/kg顆粒劑組、100mg/kg阿司匹林組，每鼠每日灌胃給藥20ml/kg，蒸餾水組給等體積的蒸餾水，每日l次，連續(xù)5天。第5天先用游標(biāo)卡尺測量每鼠右后足的足跖厚度，給藥30分鐘后，于大鼠右后足跖腱膜下注射1%角叉菜膠溶液(滅菌生理鹽水配制)O.lml/只，并分別于致炎后第0.5、l、2、3、4、5、6、7、8h時測量大鼠右后足足跖厚度，計算各組鼠不同時段的足跖腫脹率[腫脹率=(致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度)/致炎前足跖厚度]，數(shù)據(jù)進行成組T檢驗。5.實驗結(jié)果顆粒劑1.6g/kg以上劑量，對角叉菜膠致大白鼠足跖腫脹有明顯抑制作用。與蒸餾水組比較，1.6g/kg、3.2g/kg劑量在致炎后lh至6h能降低足跖腫脹度(p<0.05p<0.01)，6.4g/kg劑量在致炎后0.5h至8h均能降低足跖腫脹度(p<0.05p<0.001)。6.實驗結(jié)論顆粒劑對角叉菜膠致大白鼠炎癥有明顯改善作用。實施例7:顆粒劑對大鼠棉球肉芽腫生成的影響1.受試物實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑，陽性對照藥物為醋酸潑尼松龍注射液，湖北中天愛百顆藥業(yè)有限公司(原湖北制藥廠)生產(chǎn)，規(guī)格125mg/支，批號200206092.實驗動物SD大鼠，均購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-002號(大鼠)。3.儀器與設(shè)備ES-C600電子天，湖南湘儀天平儀器廠生產(chǎn)。4.實驗方法取SD雄性大鼠50只，體重150180g。用戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉后固定，于腹部剪一小口，用止血鉗擴充皮下組織，在大鼠左、右腹股溝處埋入一滅菌棉9球(重量50mg，放入前滴氨芐青霉素注射液lmg/O.1ml1滴)，縫合，術(shù)后將大鼠隨機分成5組，每組10只，分別為蒸餾水組、1.6g/kg顆粒劑組、3.2g/kg顆粒劑組、6.4g/kg顆粒劑組、9mg/kg醋酸潑尼松龍組，并肌注PNC(160萬u/100ml)0.4ml/只，連續(xù)2天以防感染。前4組均灌胃給藥20ml/kg，醋酸潑尼松龍組肌注9mg/kg，每日1次，連續(xù)7天。第7天稱重后給藥，并于給藥后1小時將大鼠斷頸椎處死，取出肉芽棉球，剝干凈脂肪組織，在6(TC烤箱中干燥12小時后稱重，計算每100g體重肉芽組織重量[每100g體重肉芽組織重量二(肉芽棉球干重_棉球重量)/體重X100]，數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理，5.實驗結(jié)果顆粒劑1.6g/kg以上劑量，即對大鼠棉球肉芽腫生成有非常明顯的抑制作用，與蒸餾水組比有非常顯著性差異(p<0.01p<0.001)，見表4:表4顆粒劑對大鼠棉球肉芽腫生成的影響G士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>6.實驗結(jié)論顆粒劑對大鼠棉球肉芽腫生成有非常明顯的抑制作用。實施例8:顆粒劑對熱源致痛小鼠的影響(熱板法)1.受試物實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑，陽性對照藥物為鹽酸哌替啶，沈陽第一制藥廠，規(guī)格100mg/支，批號021109-2。2.實驗動物NIH小鼠，購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-001號(小鼠)。3.儀器與設(shè)備機械秒表，鉆石牌MC，上海秒表廠生產(chǎn)。4.實驗方法取體重1822gNIH雌性小鼠，篩選30秒內(nèi)舔后足的小鼠50只，按痛閾值隨機分為5組，即蒸餾水組、2.31g/kg顆粒劑組、4.62g/kg顆粒劑組、9.24g/kg顆粒劑組、20mg/kg鹽酸哌替啶組，每組10只。將小鼠置于55±0.5°C的恒溫?zé)岚迳希瑴y量給藥前痛閾值(從接觸熱板開始到第一次舔后足為止的時間)兩次，以平均值作為給藥前痛閾值。每鼠給藥20ml/kg，于給藥后第30分鐘、第45分鐘、第60分鐘、第90分鐘、第120分鐘、第150分鐘、第240分鐘測量小鼠痛閾值(藥后測量中60秒內(nèi)不舔后足者取出，痛閾按60秒算)。數(shù)據(jù)進行成組t檢驗。5.實驗結(jié)果顆粒劑2.31g/kg以上劑量能明顯延長小鼠痛閾值，增加痛閾提高百分率，與蒸餾水組比較有顯著性差異(P<0.05P<0.001)。6.實驗結(jié)論顆粒劑對熱源所致小鼠疼痛具有一定的鎮(zhèn)痛作用。實施例9:顆粒劑對冰醋酸致痛小鼠的影響(扭體法)1.受試物實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑，陽性對照藥物為阿司匹林，湖南南光藥業(yè)有限公司，規(guī)格500mg/片，批號20010901。2.實驗動物NIH小鼠，購自湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號湘醫(yī)動字第20-001號(小鼠)。3.儀器與設(shè)備機械秒表，鉆石牌MC，上海秒表廠生產(chǎn)。4.實驗方法取體重1822gNIH小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，分別為蒸餾水組、2.31g/kg顆粒劑組、4.62g/kg顆粒劑組、9.24g/kg顆粒劑組、200mg/kg阿司匹林組，各組鼠分別給藥20ml/kg。給藥30分鐘后各鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.lml/10g，觀察小鼠扭體反應(yīng)發(fā)生的潛伏期及30分鐘內(nèi)扭體次數(shù)，數(shù)據(jù)進行成組t檢驗。5.實驗結(jié)果結(jié)果表明，9.24g/kg顆粒劑能明顯延長冰醋酸致痛小鼠扭體反應(yīng)的潛伏期，顆粒劑4.62g/kg以上均能減少30分鐘內(nèi)扭體的次數(shù)。與蒸餾水組比較，具有顯著性差異(p<0.05p<0.01)，見表5:表5顆粒劑對冰醋酸致痛小鼠的影響G士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>6.實驗結(jié)論顆粒劑對冰醋酸所致小鼠疼痛具有一定的鎮(zhèn)痛作用。實施例10:顆粒劑動物急性毒性試驗1.受試物實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑。2.實驗動物小白鼠，體重1822g，雌雄各半，由湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，動物合格證號為湘醫(yī)動字20-001號。動物置于清潔級空調(diào)實驗室中飼養(yǎng)，室溫2025"，相對濕度5570%。3.實驗方法經(jīng)預(yù)試，口服求不出！A。，故測定其最大耐受量(MTD)。取NIH小鼠40只，雌雄各半，體重1822g，適應(yīng)環(huán)境后，隨機分成2組，每組20只，禁食12小時，不禁水，給藥組按0.4ml/10g體重灌胃70%的顆粒劑浸膏液，對照組灌胃等體積的蒸餾水，當(dāng)日2次，間隔8小時，給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，連續(xù)觀察7天，記錄小鼠死亡、飲食、活動、毛發(fā)及二便情況。4.實驗結(jié)果灌胃8小時后可見藥物樣糞便，活動正常。一周內(nèi)連續(xù)觀察，動物行為活動、飲食、飲水正常，毛色光亮，眼、口、鼻、陰道、肛門無異常分泌物，無一死亡。藥物組體重增長與對照組相比無顯著性差異(P>0.05)，第8天處死動物并解剖，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、子宮等臟器組織，兩組動物均未見明顯病變。小鼠l日耐受量為56g浸膏/kg，相當(dāng)于70kg成人每公斤體重1日用量0.25g浸膏/kg的224倍。5.實驗結(jié)論本試驗結(jié)果顯示，小鼠口服顆粒劑的MTD為56g浸膏/kg(386.4g生藥/kg)，相當(dāng)于70kg成人臨床一日用量0.25g浸膏/kg(1.73g生藥/kg)的224倍。動物一切正常，無一死亡，提示顆粒劑無明顯的急性毒性反應(yīng)，在推薦的臨床劑量范圍內(nèi)一次性給藥基本安全。實施例11:顆粒劑動物長期毒性試驗1.受試物實施例1配方1制備的藥物組合物顆粒劑。2.實驗動物SD大鼠，體重5090g，雌雄各半，由湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，動物合格證號為湘醫(yī)動字20-002號。動物置于清潔級空調(diào)實驗室中飼養(yǎng)，室溫2025"，相對濕度5570%。3.儀器及設(shè)備BECKMANCX9ALX全自動生化儀，KX-21血細胞分析儀。4.實驗方法取SD大鼠96只，體重5090g，雌雄各半，隨機分成4組空白對照組(蒸餾水)、3.5g/kg顆粒劑組(低劑量，臨床等效量的13.78倍)、7.Og/kg顆粒劑組(中劑量，臨床等效量的27.56倍)、14.Og/kg顆粒劑組(高劑量，臨床等效量的55.12倍)。各組大鼠每天灌胃給藥一次，體積為20ml/kg，連續(xù)給藥3個月。給藥期間觀察記錄動物的外觀體征、行為活動、糞便性狀等，記錄攝食量，每周稱重一次并調(diào)整給藥劑量。末次給藥后，各組隨機處理10只動物，剩余動物停藥觀察2周后處理，方法同第一批。觀察一般體征(行為活動、毛色、糞便性狀、粘膜處分泌物、攝食量、體重變化)、血細胞分析(采血測定紅細胞、白細胞、白細胞分類、血紅蛋白、血小板、凝血時間)、血液生化學(xué)檢驗(取血清測定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨基酸轉(zhuǎn)換酶、肌酐、尿素氮、總膽紅素、直接膽紅素、堿性磷酸酶、葡萄糖、總膽固醇、甘油三脂、總蛋白、白蛋白等血液生化指標(biāo))、系統(tǒng)尸解和病理組織學(xué)檢查(取心、肝、脾、肺、腎、子宮、卵巢、睪丸、腎上腺、胸腺肉眼觀察并稱重，計算臟器系數(shù)；除胸腺外，對上述器官進行病理組織學(xué)觀察)。5.實驗結(jié)果一般觀察指標(biāo)連續(xù)灌胃給藥顆粒劑3個月，停藥恢復(fù)觀察15天，大鼠外觀體征、行為活動、糞便性狀均正常，攝食量及各劑量組體重增長與空白對照組比較無明顯差異(P>0.05)。血液學(xué)指標(biāo)檢測給藥期和恢復(fù)期各劑量組大鼠與空白對照組相比，所測各項指標(biāo)沒有顯著性差異。給藥期和恢復(fù)期各劑量組大鼠與空白對照組相比，所測各項指標(biāo)均無顯著性差異(P>0.05)。臟器系數(shù)給藥30天后及停藥2周后，對處死的兩批動物測量其臟器系數(shù)，給藥組與對照組相比無顯著性差異(P>0.05)。病理組織學(xué)檢查給藥期及恢復(fù)期大鼠解剖時經(jīng)肉眼觀察，各臟器均未見異?；虿∽?，大鼠心、肝、脾、肺、腎、睪丸、子宮、卵巢、腎上腺、胃、小腸等組織經(jīng)病理切片檢查，結(jié)果對照組和實驗各組大鼠的心肌橫紋清楚，肌漿豐富，胞核染色質(zhì)細致；肝細胞、肝小葉、肝間質(zhì)正常；脾白髓、紅髓結(jié)構(gòu)正常；支氣管、肺泡、肺間質(zhì)正常；腎小球分布均勻，毛血管清楚，腎小囊腔和腎小管腔空虛，大小正常，腎小管上皮細胞正常；各組大鼠的曲精管飽滿，生精上皮厚度和層次正常，間質(zhì)正常；子宮內(nèi)膜、肌層、漿膜層正常；卵巢各級卵泡正常；腎上腺皮質(zhì)和髓質(zhì)正常；胃及小腸粘膜、粘膜下層、肌層、漿膜層均正常。6.實驗結(jié)論顆粒劑3.5g/kg、7.0g/kg、14g/kg三個劑量連續(xù)對大鼠灌胃給藥三個月和停藥恢復(fù)半個月，觀察可見大鼠一般狀況、外觀體征、血液學(xué)及血液生化指標(biāo)、主要臟器系數(shù)等均與對照組無明顯差異(p>0.05);肉眼觀察及組織形態(tài)學(xué)觀察其心、肝、脾、肺、腎、睪丸、子宮、卵巢、腎上腺、胸腺、腦、胃、小腸均無明顯病理改變。提示顆粒劑長期用藥無明顯慢性及遲發(fā)性毒性反應(yīng)，按現(xiàn)在推薦的成人臨床用藥劑量長期服用是安全的。權(quán)利要求一種防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物，該中藥組合物含有下列重量份的生藥組分防風(fēng)9～15蒼術(shù)6～9當(dāng)歸12～15茵陳蒿15～30漢防己9～12羌活6～9虎杖15～30獨活6～9豬苓12～15生甘草9～12。2.如權(quán)利要求1所述中藥組合物在制備防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。3.—種中藥提取物，為以權(quán)利要求1所述中藥組合物為原料提取有效成分制得。4.如權(quán)利要求3所述中藥提取物在制備防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。5.—種中藥制劑，包括治療有效量的權(quán)利要求3所述中藥提取物及一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料。6.如權(quán)利要求5所述中藥制劑，其特征在于，所述中藥制劑為口服制劑。7.如權(quán)利要求6所述中藥制劑，其特征在于，所述口服制劑為顆粒劑、丸劑、片劑、膠囊劑、糖漿劑或噴霧劑。全文摘要本發(fā)明屬于中藥和天然藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，公開了一種防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物及其應(yīng)用。本發(fā)明的防治痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥組合物，含有下列重量份的生藥組分防風(fēng)9～15；蒼術(shù)6～9；當(dāng)歸12～15；茵陳蒿15～30；漢防己9～12；羌活6～9；虎杖15～30；獨活6～9；豬苓12～15；生甘草9～12。采用本發(fā)明的中藥組合物制成的制劑對于急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎有著確切的療效，從臨床和動物實驗方面都證實了其具有抗炎、鎮(zhèn)痛、拮抗痛風(fēng)急性發(fā)作的功效，且毒理研究未見明顯毒副作用。文檔編號A61P19/06GK101780154SQ20101012959公開日2010年7月21日申請日期2010年3月19日優(yōu)先權(quán)日2010年3月19日發(fā)明者周敏,周蓉,張明,徐文彬,徐蓉,李斌,李福倫,王一飛,范斌,陳潔,顧荻青申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院