專利名稱：一種復(fù)方骨肽注射液及注射用復(fù)方骨肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域
背景技術(shù)：
復(fù)方骨肽注射液及注射用復(fù)方骨肽是由健康的豬或胎牛四肢骨和全蝎制成的滅 菌水溶液及加入適量賦料凍干制成的凍干劑。主要成分為有機鈣、磷、無機鈣、無機鹽、微量 元素、氨基酸等。用于治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生、骨折。該品種為我國首例，其工藝過程文獻有多處報道，但通過我們的實際操作，均無法 制成合格產(chǎn)品，本發(fā)明詳細描述了一種制造方法，簡單、適用、安全，完全可以達到國家藥品 標準的具體要求。發(fā)明內(nèi)容是a、骨的提取、去脂、濃縮取健康新鮮豬或胎牛四肢骨，洗凈，打碎稱重。每公斤骨 加水l_3kg，于1. 1-1. 3kg/cm2熱壓1_3小時，用雙層紗布過濾，骨渣再加與原骨同量的水， 同上操作熱壓1-2小時，過濾，合并兩次濾液。于夾層鍋內(nèi)冷卻至室溫，放置于-10至-30°C 冷庫中，待冷卻至0 5°C轉(zhuǎn)入冷室中靜置12 24小時，撇去上層脂肪，加溫使凍狀物融成 液體，可加熱濃縮至每公斤提取物含相當(dāng)于0. 5公斤骨。b、水解將上述提取物調(diào)pH2. 5-3. 5左右，按骨重的1 3%加入胃蛋白酶，于 38°C至42°C水解3-5小時。c、酸沉將上述液于100°C加熱30分鐘左右，繼續(xù)酸水解，冷卻吸出上清。d、堿沉上述上清調(diào)PH8-9，加熱至沸騰，持續(xù)30分鐘左右，繼續(xù)堿水解冷卻，吸上清。e、超濾上述上清液調(diào)pH至7. 0-7. 5，過濾至清，過一萬分子量超濾1_3次，即得 骨提取物溶液。f·、蝎子的清洗，絞碎稱量適量全蝎，用純凈水洗滌二次，用剪刀剪碎.g、蝎子的乙醇提取按蝎重的二倍(W/V)加入95%乙醇，攪拌提取5小時左右，靜 止過夜后過濾，反復(fù)二次，合并兩次的乙醇提取液。h、回收乙醇乙醇提取物真空濃縮至一半左右，加入蒸餾水至全體積，再蒸出一半 體積，反復(fù)數(shù)次至無乙醇味，加水至全蝎重量的兩倍，得濃縮液。i、分層過濾將濃縮液靜止分層過夜，然后分出下層水溶液，上層脂肪層棄去，提 取的水溶液合并。j、超濾水溶液粗濾后1萬分子量超濾1-3次，稱量體積。k、骨提取液與蝎子提取液的混合按終體積每Iml中含0. 015g全蝎的提取物計，將全蝎提取物與骨提取物混合。1、超濾，濃縮上述混合液過1萬分子量超濾柱1-3次，將超濾液濃縮，至每ml中多肽和氮含量 合格，同時含全蝎提取物相當(dāng)于0. 015g全蝎。
m、制劑復(fù)方骨肽溶液稀釋或濃縮至所需濃度范圍，亦可加入適量氯化鈉調(diào)至等滲，調(diào)節(jié) PH值在標示范圍內(nèi)，除菌過濾，灌封，亦可過一萬分子量超濾器一次后，除菌過濾，灌封，于 100°C熱壓滅菌30分鐘或115°C 30分鐘、121°C 12分鐘、15分鐘滅菌，檢驗，燈檢，包裝即得 復(fù)方骨肽注射液。將復(fù)方骨肽溶液化透后，加入適量甘露醇或右旋糖酐做為賦型劑(一般 為溶液量的10% -15% )，過0. 22 μ m微孔濾膜，灌裝，冷凍干燥，即得注射用復(fù)方骨肽。其特征是a、制造過程簡便，適用性強。b、反復(fù)的酸堿熱沉，保證了制劑可見異物合格。C、本工藝采用121 °C 12-30分鐘熱壓，保證了病毒滅活條件，也對制劑的可見異物
合格有利。d、注射劑采用121 °C 12-30分鐘滅菌，保證了 Ftl值大于8，無菌保障水平高。具體實施實例取健康新鮮豬四肢骨75kg，洗凈，打碎稱重。加水75kg，于1.2kg/cm2熱壓2小時， 用雙層紗布過濾，骨渣再加與原骨同量的水75kg，同上操作熱壓1-2小時，過濾，合并兩次 濾液。于夾層鍋內(nèi)冷卻至室溫，放置于-10至_30°C冷庫中，待冷卻至0 5°C轉(zhuǎn)入冷室中 靜置12 24小時，撇去上層脂肪，加溫使凍狀物融成液體。將上述提取物調(diào)pH2. 5-3. 5左 右，按骨重的2%加入胃蛋白酶，于38°C至42°C水解4小時。將上述液于100°C加熱30分 鐘，繼續(xù)酸水解，冷卻吸出上清。上述上清調(diào)pH8. 5左右，加熱至沸騰，持續(xù)30分鐘，繼續(xù)堿 水解冷卻，吸上清。上述上清液調(diào)PH至7. 4，過濾至清，過一萬分子量超濾二次，即得骨提取 物溶液約150kg，測得多肽濃度為8. 5mg/ml。稱量300g全蝎，用純凈水洗滌二次，用剪刀剪碎.按蝎重的二倍(W/V)加入95% 乙醇，攪拌提取5小時，靜止過夜后過濾，反復(fù)二次，合并兩次的乙醇提取液。乙醇提取物 真空濃縮至一半左右，加入蒸餾水至全體積，再蒸出一半體積，反復(fù)數(shù)次至無乙醇味，加水 至全蝎重量的兩倍，得濃縮液。將濃縮液靜止分層過夜，然后分出下層水溶液，上層脂肪層 棄去，提取的水溶液合并。水溶液粗濾后1萬分子量超濾一次，稱量體積。得蝎提取物約 600ml ο取骨提取物溶液8000ml加入上述相當(dāng)于60g全蝎的提取物，過一萬分子量超濾器 二次，將上述混合液濃縮至4000ml。上述溶液調(diào)節(jié)pH值在標示范圍內(nèi)，并測定多肽濃度和氮濃度，合格后除菌過濾灌 封，于121°C熱壓滅菌15分鐘，燈檢、包裝即得復(fù)方骨肽注射液。將上述復(fù)方骨肽溶液加入 12%除熱源的甘露醇，過0. 22 μ m微孔濾膜，灌裝，冷凍干燥，即得注射用復(fù)方骨肽。
權(quán)利要求
在骨熱壓提取去脂濃縮的基礎(chǔ)上，用HCL調(diào)pH值2.5-3.5，按骨重的1-3％加入胃蛋白酶，于38至42℃水解3-5小時，于100℃加熱30分鐘，冷卻吸取上清，上清用NaOH調(diào)pH值8-9，于100℃加熱30分鐘，冷卻吸取上清液，用HCL調(diào)pH值7.0-7.5，過一萬分子量超濾器1-3次，得骨提取物溶液。
2.稱取適量全蝎，用純凈水洗滌兩次，剪碎，加入兩倍的(W/V)95%乙醇，攪拌提取5小 時左右，靜止過夜，反復(fù)兩次，合并兩次提取液，真空濃縮至無乙醇味，加水稀釋，靜止過夜 分層，得下層水液，澄清過濾，再過一萬分子量超濾器1-3次，得蝎提取物。
3.按終體積每ml含相當(dāng)于0.015g全蝎的提取物計，將全蝎提取物與骨提取物混合，過 一萬分子量超濾器1-3次，將超濾液加熱濃縮至每ml中多肽和氮含量合格，同時含全蝎提 取物相當(dāng)于0. 015g全蝎，將上述濃縮液調(diào)pH值在標示范圍內(nèi)，除菌過濾，灌封，亦可過一萬 分子量超濾器后再除菌過濾灌封，于121°C熱壓滅菌15分鐘，檢驗，燈檢，即得復(fù)方骨肽注 射液，上述濃縮液加入適量的甘露醇或右旋糖酐為賦型劑(一般為溶液量的10-15% )，除 菌過濾，灌裝，冷凍干燥，熔封，即得注射用復(fù)方骨肽。
全文摘要
復(fù)方骨肽注射液及注射用復(fù)方骨肽是由健康的豬或胎牛四肢骨與全蝎經(jīng)提取制成的滅菌水溶液及加入適量賦料凍干制成的凍干劑。主要成分為有機鈣、磷、無機鈣、無機鹽、微量元素、氨基酸等。用于治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生、骨折。本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。介紹了一種制造方法，其過程為骨的提取、去脂、濃縮、水解、酸沉、堿沉、超濾，得骨提取物原液。蝎子的清洗、絞碎、乙醇提取、回收乙醇、超濾得蝎提取物原液。將骨提取物與蝎提取物按比例混合，超濾濃縮，灌封，滅菌，即得復(fù)方骨肽注射液。上述濃縮液加入適量的賦型劑，除菌、凍干，即得注射用復(fù)方骨肽。整個過程簡便完整，保證產(chǎn)品符合國家標準，并且保證了病毒滅活，同時注射液滅菌F0大于8，無菌保證水平高。
文檔編號A61P29/00GK101822695SQ20101013776
公開日2010年9月8日 申請日期2010年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月2日
發(fā)明者石海 申請人:石海