專利名稱：：一種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種屬于中藥制劑用途領(lǐng)域，具體涉及一種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：骨質(zhì)疏松癥是以骨量減少，骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特征，致使骨的脆性增加以及易于發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。隨著社會(huì)老齡化進(jìn)程，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率逐年升高。據(jù)我國(guó)流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告，骨質(zhì)疏松癥50歲60歲發(fā)病率為21%，60歲70歲發(fā)病率為58%;尤其是絕經(jīng)后婦女，骨質(zhì)疏松癥和骨折并發(fā)癥發(fā)病率更高，男女比率約1:8。骨質(zhì)疏松癥主要分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類。原發(fā)性骨質(zhì)疏松是由于年齡增加或婦女絕經(jīng)后骨組織發(fā)生的一種生理性變化。因某些疾病(如內(nèi)分泌紊亂鈣吸收障礙等慢性疾病)、營(yíng)養(yǎng)不良及藥物誘發(fā)的骨質(zhì)疏松稱為繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。國(guó)內(nèi)外治療骨質(zhì)疏松癥通常采用鈣制劑或雌激素替代療法。但鈣制劑大多吸收不好或吸收后鈣磷不能在骨骼中沉積。雌激素替代療法，能直接改善絕經(jīng)后婦女骨代謝，有效地防止絕經(jīng)后頭幾年骨的進(jìn)行性丟失，但短期服用，其療效難以持久，長(zhǎng)期服用容易導(dǎo)致各種并發(fā)癥(如乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌等)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為了提供一種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。—種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥狗脊600份黑老虎360份千斤拔144份桑寄生180份女貞子30份雞血藤360份金櫻子192份牛大力240份菟絲子30份制備方法為取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎(皮部)與其余桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；加入輔料制成臨床上可接受的劑型?！N中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，所述中藥組合物還可以是由以下重量份配比的原料藥組成狗脊600份黑老虎360份千斤拔144份桑寄生180份女貞子30份雞血藤360份金櫻子192份牛大力240份菟絲子30份延胡索26份兩面針26份乳香12份沒藥20份。制備方法取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，濾過，合并濾液，濃縮成稠膏；其余牛大力等八味及黑老虎(皮部)共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，3混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；加入輔料制成臨床上可接受的劑型。上述治療骨質(zhì)疏松癥的藥物劑型可以是丸劑、膠囊劑和片劑。經(jīng)藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明所涉及的中藥組合物對(duì)老齡去勢(shì)老齡SD大鼠骨質(zhì)疏松癥均有一定的提高骨質(zhì)疏松大鼠血清鈣、磷含量的作用，提高骨形成指標(biāo)堿性磷酸酶，降低骨吸收的指標(biāo)羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶的作用；骨生物力學(xué)試驗(yàn)也表明壯腰健腎丸高劑量組雄性大鼠左側(cè)股骨彎曲試驗(yàn)中最大荷載有增加的趨勢(shì)；從骨組織計(jì)量學(xué)看，能明顯提高雌性大鼠骨小梁面積百分比及骨小梁的厚度。因此，從給藥后動(dòng)物的組織計(jì)量學(xué)、生物力學(xué)以及試驗(yàn)中測(cè)試的眾多指標(biāo)綜合分析，能對(duì)骨質(zhì)疏松癥有明顯的治療作用。具體實(shí)施例方式本發(fā)明所涉及的中藥組合物是得到國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的壯腰健腎丸和舒筋健腰丸。壯腰健腎丸是由以下重量份配比的原料藥組成(在本發(fā)明實(shí)施例中，重量份的單位是g):狗脊600g、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g。舒筋健腰丸是由以下重量配比的原料藥組成狗脊600g、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g、延胡索26g、兩面針26g、乳香12g、沒藥20g。藥效學(xué)試驗(yàn)1.試驗(yàn)方法劑量設(shè)計(jì)根據(jù)其臨床擬用法用量，本專題選用壯腰健腎丸低劑量1.Og/kg、壯腰健腎丸高劑量3.Og/kg，舒筋健腰丸低劑量1.35g/kg、舒筋健腰丸高劑量4.Og藥丸/kg進(jìn)行藥效學(xué)篩選(壯腰健腎丸、舒筋健腰丸低、高劑量組按等效劑量折算法均約相當(dāng)于成人臨床日用量的1、3倍)。陽性藥選用已上市的仙靈骨葆膠囊，該藥是在貴州民間驗(yàn)方的基礎(chǔ)上發(fā)掘整理而成的苗族藥，該產(chǎn)品療效明確，銷售狀況良好，故選用其為陽性對(duì)照藥。給藥劑量為1.0g/kg(均按藥丸計(jì)，按等效劑量折算法約相當(dāng)于成人臨床日用量的4倍，臨床人用最大劑量為3g/天)。以上各組給藥途徑均為灌胃給藥，給藥容積均為15ml/kg。2.分組與給藥試驗(yàn)選用檢疫合格11-12月齡SD大鼠分為7組除偽手術(shù)組外，其余大鼠行去勢(shì)手術(shù)后2周按體重進(jìn)行隨機(jī)均衡分組模型對(duì)照組，陽性藥組(仙靈骨葆膠囊)，壯腰健腎丸高、低劑量組，舒筋健腰丸高、低劑量組。各組在檢疫期結(jié)束后施行去勢(shì)手術(shù)雌性大鼠切除雙側(cè)卵巢及輸卵管；雄性大鼠摘除兩側(cè)睪丸。偽手術(shù)組僅切除包裹卵巢的一小團(tuán)脂肪組織。除偽手術(shù)組、去勢(shì)模型組給予等量蒸餾水外，其余各組每天給藥一次，本試驗(yàn)給藥周期設(shè)為連續(xù)給藥12周。3.動(dòng)物的末次處理試驗(yàn)結(jié)束前大鼠禁食一夜，次日上午用10%水合氯醛腹腔注射麻醉動(dòng)物(擬定劑量為3.Oml/kg，具體的劑量麻醉人員可以根據(jù)動(dòng)物的情況作相應(yīng)的調(diào)整)腹主動(dòng)脈采血制備血清，采血后盡快分離血清。血清樣本在-2(TC保存待測(cè)。血清用于測(cè)定血清鈣(Ca)、磷(IP)、堿性磷酸酶(ALT)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、羥輔氨酸(HOP)、骨鈣素等指標(biāo)。采血后腹主動(dòng)脈放血處死大鼠，制作骨標(biāo)本取下大鼠左右股骨，脛骨，除凈附在骨上的肌肉和軟組織。取脛骨在室溫下，于4%福爾馬林中固定用于骨組織計(jì)量學(xué)的檢測(cè)，其余骨標(biāo)本制取后用生理鹽水紗布包裹，置于_201:低溫冰箱保存待測(cè)。4.統(tǒng)計(jì)分析方法由于考慮到12月齡的雌性大鼠與雄性大鼠體重相差太大，相應(yīng)的雌雄大鼠之間骨指數(shù)、生物力學(xué)及組織計(jì)量學(xué)應(yīng)該進(jìn)行雌雄分開統(tǒng)計(jì)，而血清生化指標(biāo)由于雌雄之間差異較小，故合并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。統(tǒng)計(jì)時(shí)所有數(shù)據(jù)均輸入EXCEL2003統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)處理，各組計(jì)量數(shù)據(jù)均采用又土S表示。對(duì)SD大鼠血清生化指標(biāo)的影響1.試驗(yàn)從_201:冰箱中取出動(dòng)物末次處理后保存的血清，分別檢測(cè)血清f丐(Ca)、血清磷(IP)、堿性磷酸酶(ALP)、肌酐(Cre)活性采用生化自動(dòng)分析儀測(cè)定。血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及羥脯氨酸(HOP)，血清骨鈣素根據(jù)試劑盒使用說明書測(cè)定。本試驗(yàn)骨吸收的指標(biāo)選血清抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)及羥脯氨酸(HOP)，骨形成的指標(biāo)選血清堿性磷酸酶及骨鈣素。2.結(jié)果(附表1)附表1壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對(duì)老齡去勢(shì)大鼠血清生化指標(biāo)的影響(X土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與模型對(duì)照組相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。試驗(yàn)結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)中與偽手術(shù)組相比，模型組大鼠血清鈣、磷水平稍低于偽手術(shù)組，壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量均有一定的提高骨質(zhì)疏松大鼠血清鈣或血清磷的作用，推測(cè)壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量可能是通過提高鈣、磷水平途徑從而增加骨的強(qiáng)度。與模型對(duì)照組相比，壯腰健腎丸高劑量組血清羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶明顯減少，堿性磷酸酶明顯升高，骨鈣素亦有增加的趨勢(shì)；舒筋健腰丸高劑量組抗酒石酸酸性磷酸酶明顯減少，堿性磷酸酶明顯升高，上述試驗(yàn)結(jié)果提示，壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量組均具有一定的降低骨吸收的作用和提高骨形成的作用。對(duì)SD大鼠骨組織計(jì)量學(xué)的測(cè)定1材料與儀器病理圖像分析軟件Image-ProPlus6.O，編制單位MediaCybernetics公司2骨病理片的制作對(duì)于動(dòng)物末次處理后的脛骨，骨病理片采用脫鈣法制作。制作方法如下①取右側(cè)脛骨近端1/3，室溫置于10%福爾馬林中固定24h，流水沖洗24小時(shí)后移入10%EDTA溶液中脫鈣，至骨組織無氣泡發(fā)生或軟化為宜，或用大頭針輕輕能剌進(jìn)為度，自來水沖洗24小時(shí)(脫f丐過程注意避光)，②然后轉(zhuǎn)入70%酒精內(nèi)脫水3小時(shí)，再以80%酒精脫水3小時(shí)，90%、95%酒精三次脫水各1小時(shí)，100%酒精三次脫水各1小時(shí)，③投入苯甲酸甲酯中透明過夜，浸石蠟50分鐘包埋，切片厚度5iim。⑤H-E染色。3.結(jié)果在顯微鏡下可見偽手術(shù)組的脛骨近端骨小粱較為密集，互相連接成立體網(wǎng)狀，骨小梁表面光滑，骨小粱的間距小，而模型對(duì)照組動(dòng)物的骨小梁大多數(shù)表現(xiàn)為骨小梁數(shù)量明顯減少，骨小粱排列稀疏.骨小梁之間的間隙增寬，骨髓腔擴(kuò)大，并出現(xiàn)骨小梁的空缺區(qū)域。骨小粱粗細(xì)不均.有較多的骨吸收陷窩，部分區(qū)域的骨小粱出現(xiàn)斷裂、殘端游離，骨小粱的連接中斷，三維結(jié)構(gòu)受到破壞。偽手術(shù)祖及去勢(shì)大鼠骨小梁之間的間隙中均有較多的脂肪細(xì)胞。試驗(yàn)結(jié)果(附表2、3):附表2.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對(duì)老齡去勢(shì)雌性大鼠組織計(jì)量的影響(X土S)組別劑量(g/kg)動(dòng)物數(shù)骨小梁面積百分比(％)骨小梁厚度骨小梁數(shù)目(個(gè)/mm2)骨小梁分離度(拜)偽手術(shù)-922.49±4.13**57.05±10.843.98±0.60**199.91±37.42*模型對(duì)-813.26±4.5552.48±9.172.48±0.69398.13±199.37陽性對(duì)1.01012.55±3.4653.32士6.512.38±0.7713±I34.29壯腰健腎丸高3.01120.49±5.7廣64.96±6.17**3.18±0.81270.52±85.02壯腰健腎丸低1.0914.91±3.1756.28±9.842.67±0.53335息69.54舒筋健腰丸高4.01115.16±4.7754.46±10.892.82±0.95344.57±141.94劑量組舒筋健腰丸低1.35917.79±4.2551.44±3.693.44±0.73*255.01±75.33與模型對(duì)照組相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。附表3.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對(duì)老齡去勢(shì)雄性大鼠組織計(jì)量的影響(文土S)7<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與模型對(duì)照組相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。本試驗(yàn)的骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)顯示模型組雌雄大鼠均表現(xiàn)出骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)目明顯減少，骨小梁分離度明顯增大，雌、雄性大鼠的骨小梁厚度都有減少的趨勢(shì)。本試驗(yàn)結(jié)果提示雌雄老齡大鼠去勢(shì)后成功地復(fù)制了骨質(zhì)疏松癥模型。經(jīng)治療后，壯腰健腎丸高劑量組雌性骨質(zhì)疏松大鼠的骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度明顯增加，骨小梁數(shù)目有增加趨勢(shì)和骨小梁分離度有減少的趨勢(shì)；壯腰健腎丸低劑量組雌性骨質(zhì)疏松大鼠的骨小梁數(shù)目明顯增加，骨小梁面積百分比有增加和骨小梁分離度有減少的趨勢(shì)；壯腰健腎丸低劑量組雄性骨質(zhì)疏松大鼠的骨小梁厚度明顯增加；試驗(yàn)結(jié)果提示壯腰健腎丸高劑量、舒筋健腰丸低劑量能減少雌性大鼠去勢(shì)所引起的骨丟失，改善骨小梁的形態(tài)，起到的骨質(zhì)疏松癥的目的。對(duì)SD大鼠骨生物力學(xué)的影響1材料與儀器YLS-16A小動(dòng)物骨骼強(qiáng)度測(cè)定儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站生產(chǎn)。2方法與結(jié)果從-2(TC冰箱中取出股骨、脛骨和腰椎骨，室溫自然解凍。方法使用YLS-16小動(dòng)物骨骼強(qiáng)度測(cè)定儀依照使用說明進(jìn)行下列測(cè)定①左側(cè)股骨最大荷載測(cè)試(三點(diǎn)彎曲試驗(yàn))。③左側(cè)脛骨骨最大荷載測(cè)試(三點(diǎn)彎曲試驗(yàn))。每個(gè)樣本放置在儀器上的位置及方向保持一致。試驗(yàn)結(jié)果(附表4、5):附表4.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對(duì)老齡去勢(shì)雌性大鼠生物力學(xué)指標(biāo)d土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與模型對(duì)照組相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。附表5.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對(duì)老齡去勢(shì)雄性大鼠生物力學(xué)指標(biāo)(^土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與模型對(duì)照組相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。試驗(yàn)結(jié)果(附表4、5)表明在本實(shí)驗(yàn)中，模型組雄性大鼠的股骨、脛骨彎曲試驗(yàn)最大負(fù)荷均顯著低于偽手術(shù)組，表明雄性大鼠去勢(shì)后可導(dǎo)致大鼠骨生物力學(xué)性能的降低；與模型組相比，壯腰健腎丸高、低劑量組雄性大鼠左側(cè)股骨、脛骨彎曲試驗(yàn)(折斷)的最大荷載有增加的趨勢(shì)。以上試驗(yàn)結(jié)果表明壯腰健腎丸、舒筋健腰丸均有一定的提高骨質(zhì)疏松大鼠血清鈣、磷含量的作用，提高骨形成指標(biāo)堿性磷酸酶，降低骨吸收的指標(biāo)羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶的作用；從生物力學(xué)試驗(yàn)也表明壯腰健腎丸高劑量組雄性大鼠左側(cè)股骨彎曲試驗(yàn)中最大荷載有增加的趨勢(shì)；從組織計(jì)量學(xué)看，壯腰健腎丸高劑量組明顯提高雌性大鼠骨小梁面積百分比及骨小梁的厚度。因此，從給藥后動(dòng)物的組織計(jì)量學(xué)、生物力學(xué)以及試驗(yàn)中測(cè)試的眾多指標(biāo)綜合分析，在本試驗(yàn)條件下，對(duì)12月齡的老齡SD大鼠去勢(shì)所致的骨質(zhì)疏松經(jīng)壯腰健腎丸、舒筋健腰丸14周的給藥后的表現(xiàn)出一定的抗骨質(zhì)疏松的作用，其中壯腰健腎丸高劑量組的作用強(qiáng)于其它給藥劑量組，壯腰健腎丸的抗骨質(zhì)疏松作用亦優(yōu)于陽性藥仙靈骨葆膠囊。具體實(shí)施例如下所示實(shí)施例1狗脊600g、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g。取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎(皮部)與其余桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；每100g粉末用煉蜜115135g制成大蜜丸；或每100g粉末用煉蜜5060g，用適量水泛丸，制成水蜜丸。實(shí)施例2狗脊600g、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g。取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎(皮部)與其余桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；加入適量硬脂酸鎂，用壓片機(jī)壓制成片劑。實(shí)施例3狗脊600、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g、延胡索26g、兩面針26g、乳香12g、沒藥20g。取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，濾過，合并濾液，濃縮成稠膏；其余牛大力等八昧及黑老虎(皮部)共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；每100g粉末用煉蜜3540g，用適量的水泛丸制成水蜜丸。實(shí)施例4狗脊600g、黑老虎360g、千斤拔144g、桑寄生180g、女貞子30g、雞血藤360g、金櫻子192g、牛大力240g、菟絲子30g、延胡索26g、兩面針26g、乳香12g、沒藥20g。取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎(木部)加水煎煮二次，濾過，合并濾液，濃縮成稠膏；其余牛大力等八味及黑老虎(皮部)共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；將粉末裝入膠囊，制成膠囊劑。權(quán)利要求一種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥狗脊600份黑老虎360份千斤拔144份桑寄生180份女貞子30份雞血藤360份金櫻子192份牛大力240份菟絲子30份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物還包含以下重量份配比的原料藥延胡索26份兩面針26份乳香12份沒藥20份。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述治療骨質(zhì)疏松癥的藥物劑型可以是丸劑、膠囊劑或片劑。全文摘要本發(fā)明是關(guān)于一種中藥組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥狗脊600份、黑老虎360份、千斤拔144份、桑寄生180份、女貞子30份、雞血藤360份、金櫻子192份、牛大力240份、菟絲子30份。本發(fā)明從給藥后動(dòng)物的組織計(jì)量學(xué)、生物力學(xué)以及試驗(yàn)中測(cè)試的眾多指標(biāo)綜合分析，能對(duì)骨質(zhì)疏松癥有明顯的治療作用。文檔編號(hào)A61K36/758GK101791341SQ20101013950公開日2010年8月4日申請(qǐng)日期2010年3月30日優(yōu)先權(quán)日2010年3月30日發(fā)明者何風(fēng)雷,李卓璐,莫國(guó)強(qiáng),郭鐘慧申請(qǐng)人:廣州陳李濟(jì)藥廠