專利名稱：：拉米夫定硬脂酸酯及合成方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬藥物合成，涉及拉米夫定前體藥物的合成方法與應(yīng)用，具體為拉米夫定硬脂酸的合成方法、以及在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：病毒性疾病作為傳染性疾病已經(jīng)成為人類健康的主要威脅之一。慢性乙型肝炎是危害嚴(yán)重的病毒性傳染病，是引起肝纖維化、肝硬化和肝癌的最主要原因。全球每年有超過50萬人死于原發(fā)性肝癌，而其中多達(dá)80%的原發(fā)性肝癌是由慢性乙肝引起的。由于現(xiàn)有的抗病毒藥物不能完全抑制、清除病毒，存在著給藥劑量大、療效低、毒副作用和易產(chǎn)生耐藥的問題，因此，對(duì)于病毒性疾病的治療，尤其是病毒慢性感染的治療仍然是醫(yī)學(xué)上的難題?，F(xiàn)有的抗病毒化療藥物，具有一般化療藥物的體內(nèi)非特異性分布特點(diǎn)，同時(shí)受到體內(nèi)生物膜吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)屏障，酶代謝的影響，藥物無法大量進(jìn)入其分子靶標(biāo)，從而導(dǎo)致療效低、劑量大、毒副作用以及耐藥性的產(chǎn)生。通過靶向制劑技術(shù)，改變以藥物自身性質(zhì)為主導(dǎo)的藥物體內(nèi)分布模式，將外源性的藥物輸送到藥物作用的分子靶標(biāo)，可最大限度地提高藥物作用的療效，降低藥物在正常臟器的分布和毒副作用?？笻BV化療藥物的分子作用位點(diǎn)，除HBV吸附抑制劑外，均作用于宿主細(xì)胞內(nèi)的亞細(xì)胞器，因此理想的抗HBV靶向制劑應(yīng)具有高效的肝臟、肝細(xì)胞和肝細(xì)胞內(nèi)的亞細(xì)胞器靶向功能。國內(nèi)外的科學(xué)家，通過對(duì)藥物載體大小、表面理化性質(zhì)的調(diào)控、以及在此基礎(chǔ)上的配體或抗體修飾技術(shù)，目前已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了藥物向肝臟細(xì)胞的靶向輸送，亞細(xì)胞器靶向載體技術(shù)已成為當(dāng)前實(shí)現(xiàn)藥物分子靶向治療的核心環(huán)節(jié)。殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束是一種新型膠體給藥系統(tǒng)。通過硬脂酸的羧基與殼寡糖(低分子量殼聚糖)上活性氨基的化學(xué)嫁接，所合成的“糖脂結(jié)構(gòu)”兩親性陽離子嫁接物，能夠在水性介質(zhì)中自聚集形成膠束，并具有負(fù)載親、疏水性化療藥物和生物大分子藥物的能力。該嫁接物膠束能快速被細(xì)胞快速攝取，同時(shí)具有毒性低、生物相容性好的優(yōu)點(diǎn)。采用嫁接物載體材料，已經(jīng)分別實(shí)現(xiàn)了高效的抗腫瘤治療與基因轉(zhuǎn)染。但是，嫁接物膠束也存在一些潛在的局限性，如有限的載藥能力、難于包載親水性藥物等問題。本發(fā)明通過對(duì)拉米夫定進(jìn)行親酯性修飾合成拉米夫定的前體藥物(拉米夫定硬脂酸酯)，提高水溶性藥物拉米夫定在膠束給藥系統(tǒng)中的包封率；利用殼聚糖硬脂酸嫁接物載體具有快速的細(xì)胞攝取功能，負(fù)載拉米夫定等抗病毒藥物，以提高藥物分子靶標(biāo)部位的藥物濃度，從而達(dá)到提高該類藥物的抗乙肝病毒療效的目的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的是提高親水性抗病毒藥物拉米夫定的疏水性，提供一種拉米夫定硬脂酸酯，是拉米夫定的脂溶性前體藥物，使其能夠被大量包載于嫁接物膠束納米給藥系統(tǒng)中，從而增加細(xì)胞內(nèi)藥物濃度并顯著提高抗病毒療效。所述拉米夫定硬脂酸酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供拉米夫定硬脂酸酯的合成方法，具體通過以下步驟實(shí)現(xiàn)精密稱取干燥的1.29g拉米夫定，2.778g二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)及142mg4-二甲基氨基吡啶(DMAP)置于50mL無水二氯甲烷中溶解，另精密稱取3.18g硬脂酸置于50mL無水二氯甲烷中溶解，在400rpm磁力攪拌條件下將硬脂酸溶液滴加至拉米夫定的混合有機(jī)溶液中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下30°C加熱回流反應(yīng)4天，反應(yīng)結(jié)束后，蒸餾除去溶劑二氯甲烷，得到粗產(chǎn)物拉米夫定硬脂酸酯(I)和拉米夫定硬脂酸酯(II)，以甲醇/二氯甲烷(120，ν/ν)作為洗脫劑，通過硅膠柱層析對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，得到目的產(chǎn)物拉米夫定硬脂酸酯(I)。拉米夫定硬脂酸酯的合成路線如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種拉米夫定硬脂酸酯在制備具有高效抗乙肝病毒活性的藥物中的應(yīng)用，所述藥物組分為0.0022-0.07%重量比的拉米夫定硬脂酸酯、0.1%重量比的殼聚糖硬脂酸嫁接物、99.9-99.83%重量比的純水，具體通過以下途徑實(shí)現(xiàn)(1)首先制備殼聚糖硬脂酸嫁接物(該嫁接物已為發(fā)明專利ZL200610051601.O所公開)稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?；另稱取硬脂酸0.Sg和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中，殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液，維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h，將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲，透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物；(2)稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物置于25mL去離子水中溶解，稱取0.ll_35mg拉米夫定硬脂酸酯置于7mL二甲亞砜中溶解，在400r·mirf1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液全部注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)，得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液，所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL,即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。本發(fā)明的有益之處是通過拉米夫定的親脂性修飾合成拉米夫定硬脂酸酯，有利于靶向載體材料對(duì)藥物的負(fù)載，在此基礎(chǔ)上采用具有高效細(xì)胞攝取和低毒性的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束對(duì)分子靶標(biāo)位于細(xì)胞內(nèi)的抗病毒藥物的包封，可大大增加病毒細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，以及藥物分子靶標(biāo)部位的藥物濃度。增加病毒細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，有利于減小藥物在正常組織或細(xì)胞的分布，降低藥物的毒副作用；而藥物分子靶標(biāo)部位的藥物濃度的增加，有利于提高抗病毒藥物的療效。圖1為拉米夫定硬脂酸酯㈧、拉米夫定⑶、硬脂酸(C)、和殼聚糖硬脂酸嫁接物(D)的核磁氫譜。圖2為不同藥物濃度的拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束、拉米夫定溶液和拉米夫定硬脂酸酯溶液與H印G2.2.15細(xì)胞共孵育后，對(duì)HBsAg的抑制率變化。圖3為不同藥物濃度的拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束、拉米夫定溶液和拉米夫定硬脂酸酯溶液與H印G2.2.15細(xì)胞共孵育后，對(duì)HBeAg的抑制率變化。圖4為不同藥物濃度的拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束、拉米夫定溶液和拉米夫定硬脂酸酯溶液與H印G2.2.15細(xì)胞共孵育后，對(duì)HBV-DNA表達(dá)的抑制率變化。具體實(shí)施例方式本發(fā)明結(jié)合附圖和實(shí)施例作進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1拉米夫定的前體藥物拉米夫定硬脂酸酯的合成精密稱取干燥的1.29g拉米夫定，2.778g二環(huán)己基碳二亞胺及142mg4_二甲基氨基吡啶置于50mL無水二氯甲烷中溶解；精密稱取3.18g硬脂酸置于50mL無水二氯甲烷中溶解。在400rpm磁力攪拌條件下將硬脂酸有機(jī)溶液滴加至拉米夫定的混合有機(jī)溶液中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下30°C加熱回流反應(yīng)4天。反應(yīng)結(jié)束后，蒸餾除去溶劑二氯甲烷，得到粗產(chǎn)物。以甲醇/二氯甲烷(120，ν/ν)作為洗脫劑，通過硅膠柱層析對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，得到目的產(chǎn)物拉米夫定硬脂酸酯(I)。圖1為拉米夫定硬脂酸酯、拉米夫定、硬脂酸的核磁共振圖譜，由圖可確定拉米夫定硬脂酸酯的合成。質(zhì)譜的結(jié)果顯示拉米夫定硬脂酸酯的ESI-MS:m/z=496.31[M+1]+；拉米夫定的ESI-MS:m/z=230.30[M+l]+，459.03[2M+1]+，進(jìn)一步證明拉米夫定硬脂酸酯的合成。經(jīng)測定拉米夫定硬脂酸酯的合成的熔點(diǎn)為115-117°C，油水分配系數(shù)為67.77遠(yuǎn)高于拉米夫定的0.11，在水中的飽和溶解度為2.23g/ml。實(shí)施例2拉米夫定硬脂酸酯殼聚糖硬脂酸膠束的制備1)殼聚糖硬脂酸嫁接物的合成稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?；另稱取硬脂酸0.8g和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中。殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液。維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h。將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲。透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物。圖ID為殼聚糖硬脂酸嫁接物的核磁氫譜。2)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備精密稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物載體材料置于25mL去離子水中溶解；精密稱取35mg拉米夫定硬脂酸酯置于7mL二甲亞砜中溶解。在400rpm機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液全部注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液。所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。表1為所制備得到的負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率等理化性質(zhì)。表1-----1-<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>3)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的體外抗乙肝病毒療效取H印G2.2.15細(xì)胞，在含有約10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)(5%CO2,37°C孵箱)。當(dāng)細(xì)胞達(dá)對(duì)數(shù)生長期時(shí)，即可進(jìn)行接種。取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，PBS潤洗后，加入胰酶消化并用培養(yǎng)液稀釋，按每孔1XIO5個(gè)細(xì)胞的密度接種于24孔培養(yǎng)板內(nèi)，孵箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)。24孔培養(yǎng)板內(nèi)細(xì)胞貼壁生長后，棄去舊培養(yǎng)液，使用pH7.4的緩沖溶液(PBS)潤洗2遍后分別加入含不同藥物濃度的拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束和拉米夫定溶液，繼續(xù)培養(yǎng)2-5天后，收集培養(yǎng)液，酶免疫測定試劑盒測定細(xì)胞培養(yǎng)液中的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)含量，即時(shí)PCR定量法測定乙肝病毒DNA(HBVDNA)含量。不同藥物濃度的拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束和拉米夫定溶液與H印G2.2.15細(xì)胞共孵育后，對(duì)HBsAg，HBeAg和HBV-DNA表達(dá)的抑制率變化結(jié)果見圖2_4。結(jié)果顯示拉米夫定經(jīng)酯化反應(yīng)制成前體藥物拉米夫定硬脂酸酯，該前體藥物由殼聚糖硬脂酸嫁接物包封后，與拉米夫定溶液相比，對(duì)HBsAg，HBeAg和HBV-DNA表達(dá)的抑制率顯著增加，揭示拉米夫定硬脂酸酯殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的顯著抗病毒效果。實(shí)施例3負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備1)殼聚糖硬脂酸嫁接物的合成稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?；另稱取硬脂酸0.8g和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中。殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液。維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h。將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲。透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物。圖ID為殼聚糖硬脂酸嫁接物的核磁氫譜。2)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備精密稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物載體材料置于25mL去離子水中溶解；精密稱取25mg拉米夫定硬脂酸酯置于5mL二甲亞砜中溶解。在400r·mirf1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液全部注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液。所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL，搖勻后即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。表2為所制備得到的負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率等理化性質(zhì)。表2Z均粒徑表面電位藥物包封率載藥量(nm)(-mV)(%)(%)272.851.998.6132.25實(shí)施例41)殼聚糖硬脂酸嫁接物的合成稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙猓涣矸Q取硬脂酸0.8g和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中。殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液。維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h。將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲。透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物。圖ID為殼聚糖硬脂酸嫁接物的核磁氫譜。2)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備精密稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物載體材料置于25mL去離子水中溶解；精密稱取Ilmg拉米夫定硬脂酸酯置于2.2mL二甲亞砜中溶解。在400r·mirT1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液全部注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液。所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL，搖勻后即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。表3為所制備得到的負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率等理化性質(zhì)。表3Z均粒徑表面電位藥物包封率載藥量(nm)(-mV)(%)(%)271.448.797.8516.77實(shí)施例51)殼聚糖硬脂酸嫁接物的合成稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?；另稱取硬脂酸0.8g和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中。殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液。維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h。將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲。透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物。圖ID為殼聚糖硬脂酸嫁接物的核磁氫譜。2)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備精密稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物載體材料置于25mL去離子水中溶解；精密量取0.22mL拉米夫定硬脂酸酯的二甲亞砜溶液(5mg/mL)，在400r^irT1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液。所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL，搖勻后即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。表4為所制備得到的負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率等理化性質(zhì)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例61)殼聚糖硬脂酸嫁接物的合成稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?；另稱取硬脂酸0.8g和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中。殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液。維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5h。將終反應(yīng)液置于透析袋(分子量為7kDa)，去離子水透析24h，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲。透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物。圖ID為殼聚糖硬脂酸嫁接物的核磁氫譜。2)負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束的制備精密稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物載體材料置于25mL去離子水中溶解；精密量取0.022mL拉米夫定硬脂酸酯的二甲亞砜溶液(5mg/mL)，在400r·mirT1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5min，之后在冰浴條件下探頭超聲30次(400W，工作2s停3s)得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液。所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋(分子量為7kDa)中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL，搖勻后即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。表5為所制備得到的負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率等理化性質(zhì)。表5負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束的粒徑、表面電位和藥物包封率。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權(quán)利要求一種拉米夫定硬脂酸酯，具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)FSA00000072617600011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種拉米夫定硬脂酸酯，其特征在于，通過以下步驟合成稱取干燥的1.29g拉米夫定，2.778g二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)及142mg4_二甲基氨基吡啶(DMAP)置于50mL無水二氯甲烷中溶解，另稱取3.18g硬脂酸置于50mL無水二氯甲烷中溶解，在400rpm磁力攪拌條件下將硬脂酸溶液滴加至拉米夫定的混合有機(jī)溶液中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下30°C加熱回流反應(yīng)4天，反應(yīng)結(jié)束后，蒸餾除去溶劑二氯甲烷，得到粗產(chǎn)物拉米夫定硬脂酸酯(I)和拉米夫定硬脂酸酯(II)，以120，ν/ν的甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑，通過硅膠柱層析對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，得到目的產(chǎn)物拉米夫定硬脂酸酯(I)，合成路線<image>imageseeoriginaldocumentpage2</image>3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種拉米夫定硬脂酸酯在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種拉米夫定硬脂酸酯的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物組分為0.0022-0.07%重量比的拉米夫定硬脂酸酯、0.重量比的殼聚糖硬脂酸嫁接物、99.9-99.83%重量比的純水，通過以下步驟獲得(1)制備殼聚糖硬脂酸嫁接物稱取2.Og分子量為1.SKDa的殼寡糖，加入50mL去離子水?dāng)嚢枞芙?，另稱取硬脂酸0.Sg和碳二亞胺5.5g溶解在40ml乙醇中，殼寡糖溶液加熱至80°C，在攪拌條件下逐滴加入硬脂酸溶液，維持反應(yīng)溫度為80°C，在400rpm磁力攪拌條件下反應(yīng)5小時(shí)，將終反應(yīng)液置于透析袋，去離子水透析24小時(shí)，除去殘留的碳二亞胺及反應(yīng)副產(chǎn)物異脲，透析液冷凍干燥，即得殼寡糖硬脂酸嫁接物；(2)稱取50mg殼聚糖硬脂酸嫁接物置于25mL去離子水中溶解，稱取0.ll_35mg拉米夫定硬脂酸酯置于7mL二甲亞砜中溶解，在400r·mirT1機(jī)械攪拌條件下，將藥物溶液全部注入膠團(tuán)溶液中，攪拌5分鐘，冰浴條件下400W探頭，得到負(fù)載拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液，所得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束分散液置于透析袋中，純凈水透析過夜，將透析袋內(nèi)的膠體分散液定容至50mL，即得到拉米夫定硬脂酸酯的嫁接物膠束。全文摘要本發(fā)明提供一種拉米夫定硬脂酸酯，通過拉米夫定的親脂性修飾合成拉米夫定硬脂酸酯，有利于靶向載體材料對(duì)藥物的負(fù)載，在此基礎(chǔ)上采用具有高效細(xì)胞攝取和低毒性的殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束對(duì)分子靶標(biāo)位于細(xì)胞內(nèi)的抗病毒藥物的包封，可大大增加病毒細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，以及藥物分子靶標(biāo)部位的藥物濃度。增加病毒細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，有利于減小藥物在正常組織或細(xì)胞的分布，降低藥物的毒副作用；而藥物分子靶標(biāo)部位的藥物濃度的增加，有利于提高抗病毒藥物的療效，可在制備具有高效抗乙肝病毒活性的藥物中的應(yīng)用；所述拉米夫定硬脂酸酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為下式。文檔編號(hào)A61P31/20GK101805334SQ20101014102公開日2010年8月18日申請(qǐng)日期2010年4月6日優(yōu)先權(quán)日2010年4月6日發(fā)明者李茜,杜永忠,胡富強(qiáng),袁弘申請(qǐng)人:浙江大學(xué)