專(zhuān)利名稱(chēng)：新型激酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制生長(zhǎng)因子受體(如VEGFR-2和FGFR-1)酪氨酸激酶活性的化合 物，因此可用作抗癌藥。該化合物還可用于治療癌癥以外的疾病，所述疾病涉及通過(guò)生長(zhǎng)因 子和抗血管生成受體(如VEGFR-2)起作用的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。
背景技術(shù)：
正常的血管生成在各種過(guò)程中起重要的作用，包括胚胎發(fā)育、傷口愈合、肥胖和某 些女性生殖功能過(guò)程。不需要的或病理性血管生成涉及各種疾病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜 病、牛皮癬、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、卡波西肉瘤和血管瘤、哮喘、癌癥和轉(zhuǎn)移性疾 病(Fan et al, 1995, Trend Pharmacol. Sci· 16 :57_66 ；Folkman, 1995, Nature Medicine 1 :27-31)。血管滲透性改變被認(rèn)為在正常和病理性過(guò)程中都起重要作用(Cullinan-Bove et al,1993,,Endocrinology 133 829~837 ；Senger et al,1993 Cancer and Metastasis Reviews, 12 :303_324)。受體酪氨酸激酶(RTKs)在生化信號(hào)的跨細(xì)胞膜傳遞中十分重要。這些跨膜分子 特征性組成為從外至內(nèi)依次連接的胞外配體結(jié)合域、質(zhì)膜段以及胞內(nèi)酪氨酸激酶域。配體 與受體的結(jié)合導(dǎo)致受體相關(guān)酪氨酸激酶活性的刺激，導(dǎo)致受體和其它胞內(nèi)蛋白上酪氨酸殘 基的磷酸化，引起各種細(xì)胞應(yīng)答。至今，根據(jù)氨基酸序列同源性，鑒定了至少19種不同RTK 亞家族。其中一個(gè)亞家族目前由fms樣酪氨酸激酶受體Flt或Fl11 (VEGFR-I)、包含激酶插 入域的受體KDR(也稱(chēng)為Flk-I或VEGFR-2)和另一個(gè)fms樣酪氨酸激酶受體Flt4 (VEGFR-3) 組成。其中兩種RTK(Fit和KDR)表現(xiàn)為可與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)高親合力結(jié)合(De Vries et al,1992, Science 255 989~991 ；Terman et al,1992, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1992，187 1579-1586)。異源細(xì)胞表達(dá)的這些受體與VEGF的結(jié)合涉及細(xì)胞蛋白酪氨 酸磷酸化狀態(tài)和鈣流出的改變。VEGF與酸性和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF和bFGF) — 起，被鑒定為在體外具有內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)活性。值得注意的是aFGF和bFGF結(jié)合并激活名 為FGFR-I的受體酪氨酸激酶。由于其受體的限制性表達(dá)，與TOFS相比，VEGF的生長(zhǎng)因子活 性相對(duì)特異性的針對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞。最近的證據(jù)表明，VEGF是正常和病理性血管生成(Jakeman et al,1993, Endocrinology, 133 :848_859 ；Kolch et al,1995, Breast Cancer Research and Treatment, 36 139-155)和血管滲透性(Connolly et al, 1989, J. Biol. Chem. 264 20017-20024)中的重要刺激物。在成人中，除組織再建(如傷口愈合和女性生殖循環(huán))以及脂肪形成的情況之外， 內(nèi)皮細(xì)胞具有低增殖指數(shù)。但是在病理性狀態(tài)如癌癥、遺傳性血管疾病、子宮內(nèi)膜異位、牛 皮癬、關(guān)節(jié)炎、視網(wǎng)膜病和動(dòng)脈粥樣硬化中，內(nèi)皮細(xì)胞活躍增殖并形成血管。當(dāng)置于生長(zhǎng)因 子如VEGF和bFGF的血管生成刺激下時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期，增殖、遷移并組織形成三維網(wǎng)絡(luò)?，F(xiàn)在廣泛接受的是腫瘤擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移的能力依賴(lài)血管網(wǎng)絡(luò)的形成。VEGF或bFGF與其相應(yīng)受體的結(jié)合導(dǎo)致二聚化、酪氨酸殘基自身磷酸化和酶活化。 這些磷酸化酪氨酸殘基用作特殊下游信號(hào)分子的“對(duì)接”位點(diǎn)，酶的活化導(dǎo)致EC活化。這 些途徑的破壞會(huì)抑制內(nèi)皮細(xì)胞活化。FGFR-I途徑的破壞也會(huì)影響腫瘤細(xì)胞增殖，這是由于 除增殖的內(nèi)皮細(xì)胞外，該激酶還在許多腫瘤類(lèi)型中被活化。最后，最近的證據(jù)還表明，VEGF 信號(hào)途徑的破壞抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移，該遷移是血管網(wǎng)絡(luò)形成中決定性的過(guò)程。VEGFR-2和FGFR-I在腫瘤性血管系統(tǒng)中的過(guò)度表達(dá)和活化表明這些分子在腫瘤 血管生成中起重要作用。血管生成和隨后的腫瘤生長(zhǎng)被抗VEGF配體和VEGF受體的抗體抑 制，還可被截短的可溶性VEGFR-2受體(缺少跨膜序列和胞質(zhì)激酶域)抑制。在VEGFR-2 或FGFR-I中引入導(dǎo)致酶活性損失的顯性突變抑制體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)。這些受體或其關(guān)連配體 的靶向反義物也抑制血管生成和腫瘤生長(zhǎng)。最近的證據(jù)部分表明了腫瘤生長(zhǎng)中對(duì)這些受體 的時(shí)間性需求?？雌饋?lái)VEGF信號(hào)傳遞在早期腫瘤生長(zhǎng)中更重要，而bFGF在后期腫瘤擴(kuò)散 增大中更重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明下式I化合物， 它們的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑合物抑制生長(zhǎng)因 子受體如VEGFR-2的酪氨酸激酶活性。在式I和整個(gè)說(shuō)明書(shū)中，上述符號(hào)定義如下Z選自0、S、N、OH和Cl，前提條件為當(dāng)Z為0或S時(shí)，R41不存在；當(dāng)Z為OH或Cl 時(shí)，R41和R42都不存在；當(dāng)Z為N時(shí)，R41為H ；X和 Y獨(dú)立選自(KOaKSiSCKSOyCCKCOyNRlNRnaKNRUCONR^NRMCOyNRMSOy NR16SO2NR17, SO2NR18, CONR19,鹵素、硝基、氰基，或者X或Y不存在；R1 為氫、CH3、OH、OCH3> SH、SCH3> OCOR21, SOR22, SO2R23, SO2NR24R25, CO2R26, CONR27R28,
NH2, NR29SO2NR3qR31、NR32SO2R33、NR34COR35, NR36CO2R37, NR38CONR39R4ci、鹵素、硝基或氰基；R2和R3獨(dú)立為氫、烷基、取代烷基、烯基、取代烯基、炔基、取代炔基、芳基、取代芳 基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳烷基、取代芳烷基、雜芳基、取代雜芳基、雜環(huán)烷基或取代雜環(huán)烷 基；前提條件為當(dāng)X為鹵素、硝基或氰基時(shí)，R2不存在；當(dāng)Y為鹵素、硝基或氰基時(shí)，R3不存 在；R6為H、烷基、取代烷基、芳基、取代芳基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、NR7R8、OR9或鹵素；R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R21、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、 R31、R32、R34、R35、R36、R38、R39和R4°獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基、雜環(huán)基或取代雜環(huán)基；R22、R23、R33和R37獨(dú)立選自烷基、取代烷基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基、 雜環(huán)基或取代雜環(huán)基；R42 為 (R43)n中η等于0、1或2，每個(gè)R43獨(dú)立選自氫、氟、氯和甲基；R44為甲基或氫，進(jìn)一步前提條件為a.如果 X 為 SO、SO2、NR13CO2 或 NR14SO2, R2 可不為氫；且b.如果 Y 為 SO、SO2、NR13CO2 或 NR14SO2, R3 可不為氫。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1為氫或甲基；R6為氫；R3為低級(jí)烷基；Z為氧或氮。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1為氫；R3為低級(jí)烷基；Y不存在；X為氧或氮；R43為氟 或氫；R44為氫或甲基。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，X為氧；R2為取代烷基；R43為氟。本發(fā)明優(yōu)選化合物包括4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三 嗪-6-醇，1-[4-(4_ 氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4] 三嗪-6-基氧基]-4-(氨基磺?；?氨基丁 -2-醇，N-{3-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-2-羥基-丙基}-甲磺酰胺，(2S)-3-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1， 2,4]三嗪-6-基氧基]-丙-1，2-二醇，(2R)-3-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-1，2-二醇，(2R)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-醇，(2S)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-醇，(2R)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-3-甲氧基-丙-2-醇，(2S)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-3-甲氧基-丙-2-醇，2-[4-(4-氟-2-甲基_1Η_吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-基氧基]-乙醇，
N-{2-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-乙基}_甲磺酰胺，(2R)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1， 2,4]三嗪-6-基氧基]-4-甲磺酰-丁 -2-醇，(2S)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1， 2,4]三嗪-6-基氧基]-4-甲磺酰-丁 -2-醇，5-甲基-4- (2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-哌啶基丙氧基)-吡咯并 [2,1-f] [1,2,4]三嗪，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (2-哌啶_4_基-乙氧 基)-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (3_吡啶_4_基-丙氧 基)-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪，{1-[4-(4_ 氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4] 三嗪-6-基氧基甲基]-3-甲磺酰-丙基} _ 二甲基-胺，712-[4-(4-氟-2-甲基_1Η_吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-基氧基]-1-甲基乙胺，{2-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-基氧基]-1-甲基乙基}-甲胺，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (嗎啉_2_基甲氧基)-口比 咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪，[ (IR)，2S] -2- 二甲基氨基丙酸-[2- [4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧 基)-5_甲基吡咯并[2，l-f]-[l，2，4]三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙基酯，[ (IR)，2S] -2-氨基-4-甲基戊酸[2_ [4- (4-氟 _2_ 甲基-IH-吲哚 _5_ 基氧 基)-5_甲基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙基酯， [ (IR)，2S] -2-氨基丙酸2- [4_ (4_氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡 咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙基酯，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-甲磺酰-丙氧基)_5_甲基-吡 咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪，N-{3-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙基}-甲磺酰胺。本發(fā)明更優(yōu)選的化合物為4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三 嗪-6-醇，(2S)-3-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1， 2,4]三嗪-6-基氧基]-丙-1，2-二醇，(2R)-3-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-1，2-二醇，(2R)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-醇，
(2S)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-醇，(2R)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-3-甲氧基-丙-2-醇，(2S)-l-[4_(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-3-甲氧基-丙-2-醇，5-甲基-4- (2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-哌啶基丙氧基)-吡咯并 [2,1-f] [1,2,4]三嗪，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (2-哌啶_4_基-乙氧 基)-吡咯并[2,1-f] [1,2,4] 三嗪，2-[4-(4-氟-2-甲基_1Η_吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-基氧基]-1-甲基乙胺，[ (IR)，2S] -2- 二甲基氨基丙酸-[2- [4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧 基)-5_甲基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙基酯，[ (IR)，2S] -2-氨基-4-甲基戊酸[2_ [4- (4-氟 _2_ 甲基-IH-吲哚 _5_ 基氧 基)-5_甲基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙基酯，[ (IR)，2S] -2-氨基丙酸2_ [4_ (4_氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡 咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙基酯，4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-甲磺酰-丙氧基)_5_甲基-吡 咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪，N-{3-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2, 4]三嗪-6-基氧基]-丙基}-甲磺酰胺。本發(fā)明還提供包含式I或II化合物和藥學(xué)可接受載體的藥用組合物。本發(fā)明還提供包含式I或II化合物和藥學(xué)可接受載體以及其它抗癌或細(xì)胞毒 性藥物的藥用組合物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述抗癌或細(xì)胞毒性藥物選自利諾胺；整 聯(lián)蛋白α νβ 3功能抑制劑；血管生長(zhǎng)抑素；雷佐生；他莫昔芬；托瑞米芬；雷洛昔芬；屈 洛昔芬；iodoxifene ；醋酸甲地孕酮；阿那曲唑；來(lái)曲唑；硼嗪；依西美坦；氟他胺；尼魯米 特；比卡魯胺；醋酸環(huán)丙孕酮；醋酸戈舍瑞林；亮丙立德；非那雄胺；金屬蛋白酶抑制劑；尿 激酶型纖溶酶激活物功能抑制劑；生長(zhǎng)因子抗體；生長(zhǎng)因子受體抗體如Avastin (貝伐 單抗)和Erbitux (西妥昔單抗)；酪氨酸激酶抑制劑；絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑； 甲氨蝶呤；5-氟尿嘧啶；嘌呤；腺苷類(lèi)似物；阿糖胞苷；多柔比星；道諾霉素；表柔比星；伊 達(dá)比星；絲裂霉素C ；放線菌素D ；普卡霉素；順鉬；卡鉬；氮芥；美法侖；苯丁酸氮芥；白消 安；環(huán)磷酰胺；異環(huán)磷酰胺亞硝基脲；賽替派；長(zhǎng)春新堿；Taxol (紫杉醇)；Taxotere (多西他賽)；埃坡霉素類(lèi)似物；盤(pán)皮海綿內(nèi)酯類(lèi)似物；軟珊瑚醇類(lèi)似物；依托泊苷；替尼泊 苷；安吖啶；托泊替康；flavopyridols ；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和蛋白酶體抑制劑如Velcade (Bortezomib)0本發(fā)明提供抑制生長(zhǎng)因子受體蛋白激酶活性的方法，所述方法包括給予有需要的 哺乳動(dòng)物可有效抑制蛋白激酶活性劑量的式I化合物。此外，本發(fā)明公開(kāi)了抑制至少一種生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶活性的方法，例如包括給予有需要的哺乳動(dòng)物治療有效劑量的式I或式II化合物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所 述生長(zhǎng)因子受體選自VEGFR-2和FGFR-I。最后，本發(fā)明公開(kāi)了治療增殖性疾病的方法，所述方法包括給予有需要的哺乳動(dòng) 物治療有效劑量的式I化合物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，該增殖性疾病為癌癥。下面為可用于本發(fā)明說(shuō)明書(shū)的術(shù)語(yǔ)的定義。除另有說(shuō)明外，本文對(duì)基團(tuán)或術(shù)語(yǔ)最初的定義適用于整個(gè)本發(fā)明說(shuō)明書(shū)中單獨(dú)使用或作為其它基團(tuán)的一部分的該基團(tuán)或術(shù)語(yǔ)。術(shù)語(yǔ)“烷基”指1-20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈未取代烴基，優(yōu)選1-7個(gè)碳原子。詞 語(yǔ)“低級(jí)烷基”指1-4個(gè)碳原子的未取代烷基。術(shù)語(yǔ)“取代烷基”指被例如1-4個(gè)取代基取代的烷基，取代基如商基、羥基、烷氧 基、氧代、烷?；?、芳氧基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、二取代胺(其 中2個(gè)氨基取代基選自烷基、芳基或芳烷基)、烷?；被⒎减；被⒎纪轷；被⑷?代烷?；被?、取代芳基氨基、取代芳烷?；被?、巰基、烷硫基、芳硫基、芳烷硫基、烷硫羰 基、芳硫羰基、芳烷基硫羰基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、芳烷基磺?；?、氨磺?；鏢02NH2、 取代氨磺?；?、硝基、氰基、羧基、氨基甲?；鏑ONH2、取代氨基甲?；?如CONH-烷基、 CONH-芳基、CONH-芳烷基或氮上有2個(gè)選自烷基、芳基或芳烷基的取代基)、烷氧基羰基、芳 基、取代芳基、胍基和雜環(huán)基如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、 嘧啶基等。當(dāng)提及取代基被進(jìn)一步取代時(shí)，其可被烷基、烷氧基、芳基或芳烷基取代。術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵基”指氟、氯、溴和碘。術(shù)語(yǔ)“芳基”指環(huán)部分中有6-12個(gè)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)芳烴基，如苯基、萘基、聯(lián) 苯基和二苯基，各個(gè)基團(tuán)可被取代。術(shù)語(yǔ)“芳烷基”指通過(guò)烷基直接結(jié)合的芳基，如苯甲基。術(shù)語(yǔ)“取代芳基”指被例如1-4個(gè)取代基取代的芳基，取代基如烷基、取代烷基、鹵 基、三氟甲氧基、三氟甲基、羥基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、 二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、脲基、硝基、氰基、羧基、羧基烷基、氨基甲?；?、烷 氧基羰基、烷硫羰基、芳硫羰基、芳基磺酰胺基、磺酸基、烷基磺?；?、氨磺?；?、芳氧基等。 取代基可進(jìn)一步被羥基、烷基、烷氧基、芳基、取代芳基、取代烷基或芳烷基取代。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指任選取代的芳性基團(tuán)，例如4-7元單環(huán)、7-11元雙環(huán)或10_15元 三環(huán)系統(tǒng)，其含有至少一個(gè)雜原子和至少一個(gè)含碳環(huán)，例如吡啶、四唑、吲唑、吲哚。術(shù)語(yǔ)“烯基”指2-20個(gè)碳原子、具有1-4個(gè)雙鍵的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選2_15碳 原子，最優(yōu)選2-8個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“取代烯基”指被例如1-2個(gè)取代基取代的烯基，取代基例如商基、羥基、烷氧
基、烷?；⑼轷Ｑ趸?、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、烷硫羰基、 烷基磺?；被酋；⑾趸?、氰基、羧基、氨基甲?；?、取代氨基甲?；㈦一?、吲哚基、咪唑 基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等。術(shù)語(yǔ)“炔基”指2-20個(gè)碳原子、具有1-4個(gè)三鍵的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選2_15個(gè) 碳原子，最優(yōu)選2-8個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“取代炔基”指被例如1個(gè)取代基取代的炔基，取代基例如商基、羥基、烷氧
基、烷?；?、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被€基、烷硫基、烷硫羰基、 烷基磺?；被酋；?、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基、取代氨基甲?；㈦一?、雜環(huán)基(如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等)。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指任選取代的飽和環(huán)烴系統(tǒng)，優(yōu)選含有1-3個(gè)環(huán)，每個(gè)環(huán)3-7個(gè)碳原子，環(huán)可進(jìn)一步與不飽和C3-C7碳環(huán)稠合。示例性基團(tuán)包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己 基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)癸基、環(huán)十二烷基和金剛烷基。實(shí)例性取代基包括一個(gè)或多個(gè)上述烷 基，或一個(gè)或多個(gè)上述作為烷基取代基的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”、“雜環(huán)的”和“雜環(huán)基”指任選取代的飽和或不飽和的芳族或非芳族 環(huán)基，例如4-7元單環(huán)，7-11元雙環(huán)或10-15元三環(huán)系統(tǒng)，其中至少一個(gè)含碳環(huán)中含有至少 一個(gè)雜原子。每個(gè)含雜原子的雜環(huán)基可具有1、2或3個(gè)雜原子，所述雜原子選自氮原子、氧 原子和硫原子，其中氮和硫雜原子也可任選被氧化，氮雜原子還可任選被季銨化。雜環(huán)基可 于任何雜原子或碳原子相連。實(shí)例性單環(huán)雜環(huán)基包含吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧雜環(huán)丁烷基、吡唑啉基、咪唑 基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑啉基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻 唑烷基、異噻唑基、異噻唑烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、 2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧雜氮雜罩基、氮雜草基、4-哌啶酮 基、吡啶基，N-氧代-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫代嗎啉基 (thiamorpholinyl)、硫代嗎啉基亞砜、硫代嗎啉基砜、1，3- 二氧戊環(huán)基和四氫_1，1_ 二氧 代噻吩基、二噁烷基、異噻唑烷基、硫雜環(huán)丁烷基、硫雜丙環(huán)基、三嗪基和三唑基等。實(shí)例性雙環(huán)雜環(huán)基包括2，3- 二氫-2-氧代-IH-吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑 基、苯并噻吩基、奎寧環(huán)基、喹啉基、N-氧化喹啉基(quinolinyl-N-oxide)、四氫異喹啉基、 異喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、中氮茚基、苯并呋喃基、苯并二氫吡喃基、香豆基、肉啉 基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(如呋喃并[2，3_c]吡啶基、呋喃并[3， Ι-b]吡啶基或呋喃并[2，3-b]吡啶基)、二氫異吲哚基、二氫喹唑啉基(如3，4-二氫-4-氧 代-喹唑啉基)、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并二嗪基、苯并咪唑基、苯并呋咱基、苯并 硫代吡喃基、苯并三唑基、苯并吡唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并硫代吡 喃基、二氫苯并硫代吡喃基砜、二氫苯并吡喃基、二氫吲哚基、噴哚基、異苯并二氫吡喃基、 異二氫吲哚基、1，5_ 二氮雜萘基、2，3_ 二氮雜萘基、胡椒基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、喹唑啉 基、四氫喹啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基等。實(shí)例性取代基包含一個(gè)或多個(gè)上述烷基或芳烷基，或一個(gè)或多個(gè)上述烷基取代 基。還包括較小的雜環(huán)基，如環(huán)氧化物和環(huán)乙亞胺。術(shù)語(yǔ)“雜原子”應(yīng)包含氧、硫和氮。式I的化合物可形成鹽，該鹽也在本發(fā)明范圍以?xún)?nèi)。優(yōu)選藥學(xué)可接受的(即無(wú)毒、 生理學(xué)可接受的)鹽，雖然其它的鹽也可用于如分離或純化本發(fā)明化合物。式I的化合物可與堿金屬如鈉、鉀和鋰成鹽，可與堿土金屬如鈣和鎂成鹽，可與有 機(jī)堿如二環(huán)己胺、三丁胺、吡啶和氨基酸(如精氨酸和賴(lài)氨酸)等成鹽。這類(lèi)鹽可用本領(lǐng)域 技術(shù)人員已知的方法形成。式I的化合物可與各種有機(jī)或無(wú)機(jī)酸成鹽。這類(lèi)鹽包括與鹽酸、氫溴酸、甲磺酸、 硫酸、醋酸、三氟乙酸、草酸、順丁烯二酸、苯磺酸、甲苯磺酸和各種其它酸(如硝酸、磷酸、 硼酸、酒石酸、檸檬酸、丁二酸、苯甲酸、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽等)成鹽。這些鹽可用本領(lǐng)域 技術(shù)人員已知的方法形成。
此外，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)。本發(fā)明包括所有所述化合物的立體異構(gòu)體，無(wú)論是混合物還是純或大致純的形 式。本發(fā)明化合物的定義包括所有可能立體異構(gòu)體及其混合物。該定義還特別包括外消旋 形式和分離的具有特殊活性的光學(xué)異構(gòu)體。外消旋形式可用物理方法拆分，如分級(jí)結(jié)晶、非 對(duì)映異構(gòu)體衍生物的分離或結(jié)晶、或手性柱層析分離。各種光學(xué)異 構(gòu)體可用傳統(tǒng)方法從外 消旋體獲得，所述方法如與光學(xué)活性酸成鹽后結(jié)晶。式I的化合物還可具有前藥形式。任何可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為生物活性藥物(即式I的 化合物)的化合物為本發(fā)明范圍和精神內(nèi)的前藥。各種前藥形式是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。該前藥衍生物的實(shí)例見(jiàn)a)DesiRn of ProdruRS, H. BundRaard Ξ 編，(Elsevier, 1985)禾口 Methods in Enzvmology, Vol. 42，p. 309—396, K. Widder 等主編，(Academic Press, 1985)；b)A Textbook of DruR DesiRn and Development, Krosgaard-Larsen 禾口 H. Bundgaard 主編，Chapter 5, " Design andApplication of Prodrugs, " H. Bundgaard, p. 113-191(1991)；c)H. BundRaard, Advanced DruR Delivery Reviews,8,1-38(1992)；應(yīng)進(jìn)一步理解的是式I化合物的溶劑合物(如水合物)也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。 溶劑化方法是本領(lǐng)域已知的。應(yīng)用與用途本發(fā)明基于這一發(fā)現(xiàn)某些吡咯并三嗪是蛋白激酶的抑制劑。更具體的說(shuō)，它們 抑制VEGF的效果，這一性質(zhì)的價(jià)值在于可用于治療涉及血管生成和/或增加血管滲透性的 疾病狀態(tài)，如癌癥。本發(fā)明涉及式I化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或水合物與藥學(xué)可接受載 體的藥用組合物，該藥用組合物用于治療哺乳動(dòng)物高增殖性失調(diào)。具體的說(shuō)，所述藥用組合 物可抑制原發(fā)性和復(fù)發(fā)性實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)，所述腫瘤與VEGF有關(guān)，尤其是生長(zhǎng)和擴(kuò)散明顯 依賴(lài)VEGF的腫瘤，包括例如膀胱癌、鱗狀細(xì)胞癌、頭癌、結(jié)腸直腸癌、食道癌、婦科癌癥(如 卵巢癌)、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、外陰癌、皮膚癌、腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統(tǒng) 癌(如甲狀腺癌)、胃癌、喉癌和肺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物還可用于治療非 癌性失調(diào)，如糖尿病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、牛皮癬、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肥胖病、卡波西肉瘤、血 管瘤、急性和慢性腎病(包含增殖性腎小球性腎炎和糖尿病引起的腎臟疾病)、動(dòng)脈粥樣硬 化、動(dòng)脈再狹窄、自身免疫疾病、急性炎癥、視網(wǎng)膜血管增殖性眼病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、早 產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病和黃斑退化。本發(fā)明還涉及阻止哺乳動(dòng)物的胚細(xì)胞植入以及動(dòng)脈粥樣硬化、 excema、硬皮病和血管瘤的治療。本發(fā)明化合物具有良好的抗VEGF受體酪氨酸激酶活性， 并具有某些抗其它酪氨酸激酶的活性。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了式I化合物或其藥學(xué)可接受鹽在制備藥物中的 用途，所述藥物用于在哺乳動(dòng)物如人類(lèi)中產(chǎn)生抗血管生成和/或降低血管滲透性的作用。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了在需要這種治療的哺乳動(dòng)物如人類(lèi)中產(chǎn)生抗血管生 成和/或降低血管滲透性作用的方法，所述方法包括給予所述動(dòng)物有效量的如本文前面定 義的式I化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。本文介紹的化合物也抑制其它受體酪氨酸激酶，包括HERl和HER2，因此可用 于治療增殖性失調(diào)(如牛皮癬和癌癥)。HERl受體激酶在許多實(shí)體腫瘤中表達(dá)和活化，包括非小細(xì)胞性肺癌、結(jié)腸直腸癌和乳腺癌。類(lèi)似的，HER2受體激酶在乳腺癌、卵巢癌、 肺癌和胃癌中過(guò)度表達(dá)。下調(diào)HER2受體豐度或抑制HERl受體信號(hào)傳導(dǎo)的單克隆抗體 在臨床前和臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出抗腫瘤活性。因此預(yù)期HERl和HER2激酶抑制劑具有治 療依賴(lài)兩種受體中任一種受體信號(hào)傳導(dǎo)的腫瘤的活性。這些抑制化合物抑制HERl的 能力進(jìn)一步有助于其用作抗血管生成藥物?？蓞⒁?jiàn)下述文件和其中引用的參考文獻(xiàn) Cobleigh, M. A. , Vogel, C. L. , Tripathy, D. , Robert, N. J. , Scholl, S. , Fehrenbacher, L., ffolter, J. Μ. , Paton, V. , Shak, S. , Lieberman, G. and Slamon, D. J. , " Multinational study of the efficacy and safety ofhumanized anti-HER2 monoclonal antibody in women who haveHER2-overexpressing metastatic breast cancer that has progressed afterchemotherapy for metastatic disease" , J. of Clin. Oncol. 17(9), p. 2639-2648(1999) ；Baselga, J.，Pfister, D.，Cooper, Μ. R.，Cohen, R.，Burtness, B.， Bos, Μ. , D' Andrea, G. , Seidman, Α. , Norton, L. , Gunnett, K. , Falcey, J. , Anderson, V., Waksal, H. and Mendelsohn, J. , " Phase Istudies of anti-epidermal growth factor receptor chimeric antibody C225alone and in combination with cisplatin ", J. Clin. Oncol. 18 (4)，p. 904-914 (2000)。此外，本發(fā)明的式I化合物可用作哺乳動(dòng)物的避孕藥。本文前面定義的抗增殖、抗血管生成和/或降低血管滲透性治療可單獨(dú)用于治 療，或除本發(fā)明化合物外還涉及一種或多種其它物質(zhì)和/或治療。這種聯(lián)合治療可通過(guò)同 時(shí)、依次或分別給予各個(gè)治療成分的方式完成。本發(fā)明的化合物還可與已知的抗癌和細(xì)胞 毒性藥物和治療(包括放射療法)聯(lián)合應(yīng)用。若制成固定劑量，這種組合產(chǎn)品中的本發(fā)明 化合物使用劑量范圍見(jiàn)下文，其它藥學(xué)活性藥物的用量為在其獲得批準(zhǔn)的劑量范圍。當(dāng)組 合制劑不適用時(shí)，可依次使用式I化合物與已知抗癌或細(xì)胞毒性藥物和治療(包括放射療 法)。在醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，使用不同形式治療的組合治療每個(gè)癌癥患者是常見(jiàn)的方 法。醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)中，除本文前面定義的抗增殖性、抗血管生成和/或降低血管滲透性治療 外，所述聯(lián)合治療的其它治療可為外科手術(shù)、放射療法和化學(xué)療法。所述化學(xué)療法可包括三 種主要治療藥物(i)通過(guò)與前面定義不同的機(jī)制起作用的抗血管生成藥物(例如利諾胺、整聯(lián)蛋 白α νβ 3功能抑制劑、血管生長(zhǎng)抑素、雷佐生)；(II)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制性藥物，如抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈 洛昔芬、iodoxifene)、孕激素(例如醋酸甲地孕酮)、芳化酶抑制劑(例如阿那曲唑、來(lái)曲 唑、硼嗪、依西美坦)、抗激素、抗孕激素、抗雄激素(例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、醋酸 環(huán)丙孕酮)、LHRH激動(dòng)劑和拮抗劑(例如醋酸戈舍瑞林、亮丙立德)、睪丸酮5 α - 二氫還原 酶抑制劑(例如非那雄胺)、法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、抗侵襲藥(例如金屬蛋白酶抑制劑如馬 立馬司它和尿激酶型纖溶酶激活物受體功能抑制劑)和生長(zhǎng)因子功能抑制劑(所述生長(zhǎng)因 子包括例如EGF、FGF、血小板衍生生長(zhǎng)因子和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子，所述抑制劑包括生長(zhǎng)因子抗 體、生長(zhǎng)因子受體抗體例如Avastin (貝伐單抗)和Erbitux (西妥昔單抗)；酪氨酸 激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑)；以及(iii)如醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)中使用的抗增殖/抗腫瘤藥及其聯(lián)合藥物，例如抗代謝物(例
12如抗葉酸代謝物如甲氨蝶呤、氟嘧啶如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷類(lèi)似物、阿糖胞苷)；嵌入 性抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)霉素如多柔比星、道諾霉素、表柔比星和伊達(dá)比星、絲裂霉素C、 放線菌素D、普卡霉素)；鉬衍生物(例如順鉬、卡鉬)；烷基化藥物(例如氮芥、美法侖、苯 丁酸氮芥、白消安、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝基脲、賽替派)；抗有絲分裂藥物(例如長(zhǎng) 春花生物堿如長(zhǎng)春新堿和紫杉類(lèi)如Taxol (紫杉醇)、Taxotere (多西他賽)和新的 微管藥物如埃坡霉素類(lèi)似物、盤(pán)皮海綿內(nèi)酯類(lèi)似物和軟珊瑚醇類(lèi)似物)；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制 劑(例如表鬼臼毒素如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康)；細(xì)胞周期抑制劑(例如 flavopyridols)；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和蛋白酶體抑制劑如Velcade (Bortezomib)。如上所述，對(duì)本發(fā)明式I化合物的興趣在于其抗血管生成和/或降低血管滲透 性作用。預(yù)期本發(fā)明所述化合物可用于各種疾病，包括癌癥、糖尿病、牛皮癬、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān) 節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、肥胖、急性和慢性腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈再狹窄、自身免疫疾 病、急性炎癥和與視網(wǎng)膜血管增殖性眼病如糖尿病性視網(wǎng)膜病。更具體的說(shuō)，式I化合物可用于治療各種癌癥，包括(但不限于)下列癌癥-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括小細(xì)胞性肺癌)、食道 癌、膽囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌和皮膚癌(包括鱗狀細(xì)胞 癌)；-淋巴系造血腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、 B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤和伯基特淋巴 瘤；_骨髓系造血腫瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生異常綜合癥和早幼粒 細(xì)胞性白血病；-間質(zhì)性腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；-中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng) 鞘瘤；以及-其它腫瘤，包括黑色素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮 瘤(keratoctanthoma)、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。由于激酶普遍性在調(diào)控細(xì)胞增殖中起關(guān)鍵作用，抑制劑可作為反向細(xì)胞抑制劑， 可用于治療特征為異常細(xì)胞增殖的任何疾病，如良性前列腺增生、家族性腺瘤病性息肉病、 神經(jīng)纖維瘤病、動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維化、關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、腎小球性腎炎、血管成形術(shù)或血 管手術(shù)后的再狹窄、肥大性疤痕形成、炎性腸疾病、移植排斥、內(nèi)毒素休克和真菌感染。式I的化合物可誘導(dǎo)或抑制凋亡。凋亡反應(yīng)在各種人類(lèi)疾病中是異常的。式I 化合物作為凋亡調(diào)節(jié)劑，可用于治療癌癥(包括但不限于上述提到的癌癥類(lèi)型)、病毒感染 (包括但不限于皰疹病毒、痘病毒、Epstein-Barr病毒、Sindbis病毒和腺病毒)、阻止HIV 感染個(gè)體的AIDS進(jìn)展、自身免疫疾病(包括但不限于系統(tǒng)性狼瘡、紅斑、自身免疫性腎小球 性腎炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸疾病和自身免疫性糖尿病)、神經(jīng)變性失調(diào)(包括 但不限于阿爾茨海默病、AIDS相關(guān)癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng) 膜炎、脊柱肌萎縮和小腦退化)、脊髓增生異常綜合癥、再生障礙性貧血、與心肌梗塞、中風(fēng) 和再灌注損傷有關(guān)的局部出血性損傷、心律失常、動(dòng)脈粥樣硬化、毒素或酒精性肝病、血液 疾病(包括但不限于慢性貧血和再生障礙性貧血)、肌肉骨骼系統(tǒng)的退化性疾病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎)、阿司匹林敏感的鼻竇炎、囊性纖維化、多發(fā)性硬化、腎病和癌癥疼痛。式I化合物尤其可用于治療常見(jiàn)酪氨酸激酶活性的腫瘤，如結(jié)腸腫癌、肺癌和胰 腺癌。通過(guò)給予本發(fā)明的組合物(或聯(lián)合藥物)，阻止哺乳動(dòng)物腫瘤的進(jìn)展。式I化合物可用于治療癌癥以外的疾病，所述疾病涉及通過(guò)生長(zhǎng)因子受體(如 VEGFR-2和FGFR-1)起作用的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。本發(fā)明化合物可與藥用賦形劑或稀釋劑配制，用于口服、靜脈內(nèi)或皮下給藥。所述 藥用組合物可用適合所需給藥模式的固體或液體賦形劑、稀釋劑和添加劑，以經(jīng)典方法配 制?？诜r(shí)，所述化合物可以片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑等形式給予。所述化合物也可使用 適合給藥形式的懸浮液載體，以懸浮液的形式給予。所述化合物可以單劑量或2-4分劑量 形式，在約0. 05-300mg/kg/日的劑量范圍內(nèi)給藥，優(yōu)選少于200mg/kg/日。生物測(cè)定
VEGFR-2和FGFR-I激酶測(cè)定
試劑最終濃度
儲(chǔ)存溶液VEGFR-2FGFR-I
Tris pH 7. 020mM20mM
BSA 10mg/ml25 μ g/ml25 μ g/ml
MnCl2(IM)1. 5mM0. 5mM
MgCl2(IM)0. 5mM
DTT(IM)0. 5mM0. 5mM
10%甘油中的酶原液(lmg/ml)7. 5ng/rxn30ng/rxn
聚谷氨酸/酪氨酸(10mg/ml)75 μ g/ml30 μ g/ml
ATP(ImM)2. 5μΜ1. ΟμΜ
Y-ATP(10 μ Ci/μ 1)0. 5μ Ci/ml0.5 μ Ci/ml
用于VEGFR-2或FGFR-I測(cè)定的保溫混合物包含合成底物聚谷氨
(4 1)、ATP、ATP- y -33P和含有Mn++和/或Mg++、DTT、BSA和Tris的緩沖液。加入酶開(kāi)始 反應(yīng)，室溫60分鐘后加入30% TCA至終濃度為15%，中止反應(yīng)。抑制劑制成IOmM的100% DMSO溶液。測(cè)定在96孔板上進(jìn)行，一式四份?；衔镌?00% DMSO中1 500稀釋?zhuān)缓?1 10稀釋于水至DMSO終濃度為10%。96孔板的B-H排加入10μ 1的10% DMSO。A排 加入20 μ 1化合物，其濃度比測(cè)定環(huán)境高5倍。6次連續(xù)稀釋混和后每排轉(zhuǎn)移入10 μ 1，F(xiàn)排 棄去10 μ 1。G排為沒(méi)有化合物的對(duì)照，H排為沒(méi)有化合物和酶的對(duì)照。酶和底物用Tomtec Quadra工作站傳遞。板用粘性板蓋覆蓋，在27°C保溫60分鐘，然后在冰上用TCA酸沉淀20分鐘。沉 淀用Tomtec或Packard FilterMate收集器轉(zhuǎn)移到UniFilter-96，GF/C微量板。在每個(gè) UniFilter微量板的干孔中加入Microscint-20混合物，用Packard TopCount微量板閃爍 計(jì)數(shù)儀定量摻入放射性，從而測(cè)定活性。本發(fā)明化合物抑制VEGFR-2和FGFR-I激酶，其IC5tl值在0. 001-10 μ M之間。優(yōu)選 化合物的IC5tl值小于0.3 μ Μ。所述化合物選擇性針對(duì)VEGFR-2和FGFR-I激酶。它們對(duì)HER_2、CDK激酶、LCK和Src激酶的活性最低。它們對(duì)這些激酶的活性> 2 μ Μ。制備方法某些式I化合物可通過(guò)以下反應(yīng)流程和本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)制備。除另有說(shuō)明外，所有溫度表示為攝氏度(°C )。制備性反相(RP)HPLC純化在C18 反相(RP)柱上進(jìn)行，用含0. 1% TFA的水/甲醇混合物為緩沖溶液。所有合成的化合物至 少通過(guò)質(zhì)子NMR和LC/MS鑒定。除另有說(shuō)明外，在進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)時(shí)，有機(jī)提取物用無(wú)水硫酸 鎂(MgSO4)干燥。使用常用試劑的下述縮寫(xiě)。NMM ；N-甲基嗎啉，DIBAL ；氫化二異丁基鋁，BOP試劑； 苯并三唑-1-基氧基-三(三甲基氨基)磷鐺六氟磷酸鹽，DCE ；二氯乙烷，K2CO3 ；碳酸鉀， Κ0Η;氫氧化鉀，DCC;二環(huán)己基碳二亞胺，EDCI ； 1_( 二甲基氨基丙基)_3_乙基碳二亞胺鹽 酸鹽，RT ；室溫，HOBt ；羥基苯并三唑，DCM ；二氯甲烷，CbzCl ；氯苯甲酰氯，mCPBA ；間-氯過(guò) 苯甲酸，NaHCO3 ；碳酸氫鈉，HCl ；氫氯酸，TFA ；三氟乙酸，NH4Cl ；氯化銨，DIPEA ；二異丙基胺， Et3N ；三乙基胺，Na2SO4 ；硫酸鈉，DEAD ；偶氮二甲酸二乙酯，DPPA ；二苯氧基磷酰疊氮，DMF ； 二甲基甲酰胺，THF ；四氫呋喃。反應(yīng)流程1 第1步第1步用任選取代的丙二酸酯(1)(例如XR2為酯，YR3為甲基)在溫和堿的存在 下與甘氨酸酯進(jìn)行反應(yīng)，獲得化合物2。第2步本流程的化合物2可在堿如叔丁醇鉀存在下環(huán)化，獲得化合物3。
第3步本流程的產(chǎn)物3在堿如KOH或氫化鈉存在下與氨基化試劑如羥胺-0-磺酸或氯胺 反應(yīng)，形成產(chǎn)物4。第4步通過(guò)在堿(如甲醇鈉的甲醇溶液)存在下用甲酰胺加熱處理，本流程的化合物4 環(huán)化形成流程1的產(chǎn)物5。

物7。
第5步
本流程的化合物5鹵化(例如在高溫下與氯氧化磷反應(yīng))形成流程1的產(chǎn)物6。 第6步
化合物6在有機(jī)溶劑如乙腈或DMF中與胺(如苯胺)或酚反應(yīng)，形成流程1的產(chǎn) 反應(yīng)流稈2第1步流程1的化合物7(其中YR3為烷基如甲基，XR2基團(tuán)為酯)可用親核試劑如甲基 鎂化溴或甲基鎂化氯在低溫下處理，獲得流程2的化合物2。第2步本流程化合物2然后可在Lewis酸如三氟化硼存在下用過(guò)氧化物如過(guò)氧化氫或過(guò) 硼酸鈉于低溫下處理，獲得流程2的酚類(lèi)化合物3。第3步用烷基化試劑如溴乙烷在堿如氫化鈉存在下將本流程化合物3的酚羥基烷基化， 獲得流程2的化合物4?；蛘撸贛itsimobu條件下用醇處理化合物3 (其中化合物3和醇 在三苯基膦和DEAD存在下攪拌)，獲得流程2的化合物4。反應(yīng)流稈3 其中X = NR10, NR11CO, NR12CONRI3, NR14COO, NR15SO2 或 NR16SO2NR17,如上文所述。第1步流程2的化合物1用堿如KOH水溶液處理，轉(zhuǎn)化為羧酸。該酸在有機(jī)溶劑如1， 4-二氧六環(huán)中，在醇如苯甲醇存在下用二苯氧基磷酰疊氮處理，經(jīng)歷Curtius重排，獲得本 流程的化合物1。第2步當(dāng)任選被例如苯甲氧甲?；?Cbz)保護(hù)時(shí)，氨基甲酸酯基團(tuán)通過(guò)催化(如鈀)氫 化去保護(hù)，獲得本流程的化合物2。第3步將本流程化合物2的氨基?；?例如在偶聯(lián)試劑如DCC存在下用羧酸處理)或磺 ?；?例如用磺酰氯處理)?；蛘撸玖鞒袒衔?的氨基用烷基鹵烷基化，或在還原劑如 氰基硼氫鈉或氫硼化鈉存在下，與醛還原氨基化。反應(yīng)流程4 醇2。
第7步
7
X1=鹵基
Rd=Re=R6如上文所述
第1步
流程1的化合物6在4位轉(zhuǎn)化為醚(醚化)(例如用酚陰離子或甲醇陰離子處理)。 第2步
在有機(jī)溶劑如甲苯中，用還原劑如氫化二異丁基鋁(DIBAL)還原，獲得本流程的
第3步
處理本流程的化合物2(例如在有機(jī)溶劑如甲苯中，高溫下用二氧化錳(MnO2)處 理)，使醇氧化。第4步在有機(jī)溶劑如二氯甲烷(DCM)中，用氧化劑如間氯過(guò)苯甲酸(m-CPBA)處理本流程 的化合物3，然后用堿如碳酸氫鉀水解，獲得含羥基化合物4。第5步
在堿如NaH存在下，在0°C -100°C之間，用親電子試劑如碘代甲烷使化合物4的酚 羥基烷基化，獲得化合物5。第6步在高溫下用酸如HCl水溶液處理本流程的化合物5，使其水解，獲得化合物6。第7步本流程的化合物6用與流程1類(lèi)似的方法轉(zhuǎn)化為化合物7。反應(yīng)流稈5 第1步流程1的化合物5 (其中XR2 =羧酸)可在偶聯(lián)劑如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)存 在下，用胺如氨、N，0- 二甲基羥胺或取代胼處理，獲得酰胺或酰胼類(lèi)化合物1。第2 步 當(dāng)?shù)?步中所用的胺為N，0- 二甲基羥胺時(shí)，所得化合物可用烷基化試劑如甲基鋰 處理，獲得化合物2。第3 步本流程化合物2可如流程1所述轉(zhuǎn)化為化合物3。反應(yīng)流稈6 第1 步當(dāng)流程5的第1步所用的胺為氨時(shí)，所得化合物可用脫水劑如氯氧化磷處理，獲得 化合物1。第2 步本流程化合物1可在醇如乙醇中用強(qiáng)酸如硫酸處理，獲得亞氨酸，該亞氨酸可再 用取代胼如甲基胼處理，獲得化合物2。第3步本流程的化合物2可再用脫水劑如氯氧化磷處理，得到中間體亞氨酰氯，該中間 體可進(jìn)一步如流程1所述用合適的苯胺或酚處理，獲得本流程的化合物3。反應(yīng)流程7 第1 步當(dāng)流程5的步驟1使用的胺為胼時(shí)，所得化合物可在脫水劑如氯氧化磷或取代乙亞氨酸酯或二氯亞甲基· 二甲基氯化銨存在下用酸如二氟乙酸處理，獲得化合物1。第2步化合物1可如流程2中所述轉(zhuǎn)化為化合物2。此外，其它式I化合物可用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。具體的說(shuō)，下述實(shí)施 例提供了其它制備本發(fā)明化合物的方法。
具體實(shí)施例方式下列工作實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，所述實(shí)施例是本發(fā)明的優(yōu)選方案。這些實(shí)施 例為說(shuō)明性而不是限制性，并且應(yīng)理解的是，在本文后權(quán)利要求所定義的本發(fā)明精神和范 圍內(nèi)還存在其它實(shí)施方案。實(shí)施例1 4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪-6-醇A. 4-氯-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_甲酸乙酯4-羥基-5-甲基吡咯并[2，l-f] [1，2，4]三嗪 _6_ 甲酸乙酯(60. Og, 271. 2mmol, 制備參見(jiàn) WO 0071129)、氯氧化磷(30. 3ml, 325. 4mmol)和二異丙基乙胺(37. 7ml,217mmol) 的甲苯混合物(800ml)在氬氣中加熱至回流，持續(xù)18小時(shí)，然后冷卻至室溫?；衔镌谛D(zhuǎn) 蒸發(fā)儀(rotovap)上濃縮，殘留物用二氯甲烷(1000ml)和冷碳酸氫鈉溶液(300ml)稀釋。 所得混合物在室溫下攪拌10分鐘。分離的有機(jī)相用冷鹽水(300ml)洗滌，干燥，真空濃縮。 粗品硅膠層析純化，用二氯甲烷洗脫，獲得所需化合物黃色固體(64. Sg,99% )。B. 4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_甲酸乙酯0°C下在氬氣中，向本實(shí)施例化合物A(23g，96mmol)四氫呋喃(0. 6L)溶液中加入 乙醇鈉的乙醇溶液(21 Ww，43ml，115. 2mmol)，用20分鐘滴完。反應(yīng)物在0°C攪拌1小時(shí)， 用乙酸乙酯稀釋?zhuān)寐然@溶液和鹽水洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮，殘留物用硅膠層析純化，依 次用二氯甲烷和50%乙酸乙酯/己烷洗脫，獲得所需化合物白色固體(23.5g，98%)。LC/ MS ； (M+H)+ = 250. 17。C. 2-(4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_基)-丙_2_醇0°CT,向本實(shí)施例化合物B的THF(2. 5L)溶液中用加液漏斗緩慢加入甲基鎂化溴 (3M的Et2O溶液，360ml, 1. 08mol)?；衔锷潦覝?，攪拌持續(xù)4小時(shí)。反應(yīng)物用氯化銨溶 液猝滅，用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用氯化鈉溶液洗滌，干燥，獲得所需化合物黃色固體(78g， 100% ) ο LC/MS ； (M+H)+ = 236. 1。D. 4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_醇
過(guò)氧化氫(30%,10. 3ml, 178. 5mmol)和二乙醚合三氟化硼(271. 4ml, 2. 14mol) 的混合物在0°C攪拌30分鐘。將其冷卻至-20°c，加入-15°c的本實(shí)施例化合物C(30g， 129. 5mmol)的二氯甲烷(1. 45L)溶液。使反應(yīng)混合物達(dá)到_3°C，然后冷卻至_40°C。邊攪 拌邊向該混合物中加入飽和亞硫酸鈉溶液。所得混合物用乙酸乙酯提取，干燥，真空濃縮， 獲得化合物 D(26g，76% )。LC/MS ； (M+H)+ = 194. 2。E. 6-苯甲氧氧基-4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪室溫下攪拌本實(shí)施例化合物D (lg，5. 2mmol)、苯甲基溴(0. 62ml, 5. 2mmol)和碳酸 鉀(2. Ig, 15. 5mmol)的二甲基甲酰胺(IOml)混合溶液12小時(shí)。反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)?用水、10%氯化鋰溶液和鹽水洗滌。干燥有機(jī)相(Na2SO4),真空濃縮獲得化合物E黃色固體 (Ig)，該固體無(wú)需進(jìn)一步純化可直接用于下一步驟。F. 6-苯甲氧基-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_4_醇本實(shí)施例化合物E (90g，粗品)的IN HCl (600ml)和乙醇(800ml)溶液加熱至回 流，持續(xù)4小時(shí)。過(guò)濾收集固體沉淀，用混合溶劑(水/乙醇/甲醇=4/4/2)洗滌，干燥 得到黃白色固體，用二氯甲烷洗滌該固體，得到化合物F白色固體(65g)。LC/MS ； (M+H)+ = 256. 2οG. 6-苯甲氧基-4-氯-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪本實(shí)施例化合物F(10g，39. 2mmol)、氯氧化磷(4. 4ml,47. Immo 1)和二異丙基乙 胺(5.5ml，31. 4mmol)的甲苯混合物(150ml)在85°C攪拌2小時(shí)，然后再次加入氯氧化磷 (1. Iml, 11. 8mmol)。2小時(shí)后，再加入氯氧化磷(1. Iml, 11. 8mmol)。反應(yīng)混合物在85°C持 續(xù)攪拌1小時(shí)，然后濃縮。殘留物溶于二氯甲烷，用冷碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥，真空濃縮。 粗品用硅膠層析純化，用二氯甲烷洗脫，獲得化合物G黃色固體(9. 9g,93%)0H. 6-苯甲氧基-4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并[2，1-f] [1,2,4]三嗪4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-醇(6. 47g，39. 2mmol，制備見(jiàn)下文)的二甲基甲酰胺 (IOOml)溶液用氬氣脫氣，然后冷卻至_20°C。一次性加入氫化鈉(60%的油懸浮液，1.57g， 39. 2mmol)。使反應(yīng)混合物升至0°C，并攪拌30分鐘，再冷卻至-20°C，然后一次性加入本 實(shí)施例化合物G的二甲基甲酰胺溶液(100ml)。反應(yīng)物升至室溫。30分鐘后，混合物用IN HCl (200ml)酸化，用乙酸乙酯(1. 8L)稀釋?zhuān)来斡?0%氯化鋰溶液(0. 4LX2)、1N NaOH溶 液(0. 3LX2)、緩沖液(pH = 2,200ml)和NaCl溶液(0. 4L)洗滌。干燥有機(jī)相，真空濃縮， 獲得化合物H黃褐色固體(15g,95% )。LC/MS ； (M+H)+ = 403. 1。Ι·4-(4_氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-醇本實(shí)施例化合物H(15g，37.3mmol)、甲酸銨(12g, 190mmol)和 Pd/C(10%，l. 5g)混 合物的二甲基甲酰胺(IOOml)溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。混合物用Celite 過(guò)濾，濾液用 乙酸乙酯稀釋?zhuān)来斡?0%氯化鋰溶液(2X)、5%碳酸氫鈉溶液(2X)和鹽水洗滌。干燥 有機(jī)相(Na2SO4),真空濃縮獲得淺褐色固體，該固體用二氯甲烷洗滌，獲得標(biāo)題化合物黃白 色固體(7. 8g，64% )。MS [M+H]+= 313. 2。1H NMR(CDCl3) δ 2. 44 (s，3H)，2. 51 (s，3H)， 6. 31 (s，1H)，6. 95 (dd, 1H)，7. 07 (d, 1H, J = 8. 8Hz)，7. 38 (s, 1H)，7. 78 (s, 1H)。實(shí)施例1可通過(guò)下述另外的途徑制備。
A-1. 4-氯-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪_6_甲酸乙酯向IOL反應(yīng)器中加入4-羥基-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_甲酸 乙酯(155. Ig, 0. 70mol)和甲苯(2. 7L)。然后加入氯氧化磷(128. 8g，78ml，0. 84mol)和二 異丙基乙胺(94. 2g，127ml,0. 70mol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，然后加熱回流，持 續(xù)20小時(shí)。HPLC分析表明起始原料完全消失。反應(yīng)混合物冷卻至0°C，加入冷K2HPO4溶液 (527g溶于2. 4L水)，調(diào)整其加入速率使反應(yīng)混合物內(nèi)部溫度保持在5°C以下?；旌衔镒?終PH為8。混合物在0°C 5°攪拌20分鐘，然后室溫?cái)嚢?小時(shí)。分離有機(jī)相，用1(2朋04 溶液(85g溶于405ml水)和水(345ml)洗滌，然后過(guò)濾并真空濃縮至開(kāi)始析出黃色固體。 加入二甲基甲酰胺(1L)，真空除去剩余甲苯(溫度=38°C，壓力=9Τοπ·)。濃縮后，通過(guò) HPLC觀察到約4%的甲苯。J.4-(4_氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-甲酸乙酯前一步驟A-I的殘留物轉(zhuǎn)移到IOL反應(yīng)器中，加入二甲基甲酰胺(1. 1L)、 K2CO3 (276g，2. Imo 1)和 4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-醇(109. 5g，0. 70mol)。反應(yīng)混合物在 環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)，然后冷卻至0°C。加入水(2. 0L)和乙酸乙酯(2L)，調(diào)整其加入速 率使內(nèi)部溫度保持在20°C以下。分離各相，水相用乙酸乙酯(2L)提取。合并有機(jī)提取物， 依次用水(2L)、10% LiCl水溶液(2L)和水(2L)洗滌。然后加入甲苯(IL)，真空濃縮有機(jī) 提取物。再加入甲苯(500ml)，真空濃縮混合物。LC/MS ;(M+H)+= 369. 4。1H NMR(CDCl3) δ 1. 41 (t, 3H, J = 7. 15Hz)，2. 45 (s, 3H)，2. 87 (s, 3H)，4. 39 (q, 2H, J = 7. 15Hz)，6. 34 (s, 1H)，6. 98 (dd, 1H)，7. 08 (d, 1H, J = 8. 25Hz)，7. 90 (s, 1H)，8. 15 (s, 1H)。K. 2-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1，2， 4]三嗪-6-基]-丙-2-醇前一步驟(步驟J)的殘留物轉(zhuǎn)移到IOL反應(yīng)器中，加入足夠量的甲苯，使總反應(yīng) 體積達(dá)到1. IL0然后依次加入THF (1. 1L)和LiCl (140g)，反應(yīng)混合物冷卻至0°C。然后加 入甲基鎂化溴(1.4M的甲苯/THF (75 25)溶液，2. 1L，2. 8mol)，調(diào)整其加入速率使內(nèi)部溫 度保持在5°C以下?？偧尤霑r(shí)間約為2小時(shí)。反應(yīng)混合物在0°C再攪拌2小時(shí)，然后經(jīng)3小 時(shí)升至15°C，此時(shí)HPLC仍觀察到5%的起始原料。然后反應(yīng)混合物重新冷卻至5°C，再加 入IOOml甲基鎂化溴，混合物再攪拌1. 5小時(shí)。然后加入乙酸乙酯(1. 5L和15% NH4Cl溶 液(3.2L))，使內(nèi)部溫度保持在5°C以下。分離各相，水相用乙酸乙酯(2L)提取。合并有機(jī) 相，用15% NH4Cl (2X 2L)和水(2X2L)洗滌，真空濃縮，獲得所需產(chǎn)物的無(wú)定形黃色固體。 粗品溶于二氯甲烷(5L)，水浴(T = 370C )幫助溶解。溶液通過(guò)短硅膠墊(400g)，用二氯甲 烷(7L)和5%乙酸乙酯/ 二氯甲烷(1.2L)洗滌墊板。蒸干濾液，獲得黃白色固體，向其中 加入乙酸乙酯(1.2L)。所得漿液轉(zhuǎn)移至IOL反應(yīng)器中，50°C攪拌2小時(shí)后獲得澄清溶液。 溶液冷卻至環(huán)境溫度，有白色固體析出。然后加入庚烷(2. 6L)，混合物在室溫下攪拌20小 時(shí)。過(guò)濾所得固體，用庚烷(IL)洗滌，在50°C下減壓干燥24小時(shí)。獲得2-[4-(4-氟-2-甲 基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l-f] [1,2,4]三嗪_6_基]-丙-2-醇的白色 固體(186g，75%，3 步反應(yīng))。LC/MS ； (M+H)+ = 355. 4。1-1. 4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-醇
0°C下向 BF3 · OEt2 (120ml,0. 948mol)的二氯甲烷溶液(200ml)中加入 H2O2 (50% 水溶液，4. 6ml, 0. 0790mol)。反應(yīng)混合物在0°C攪拌30分鐘，然后冷卻至_20°C。在另一個(gè) 燒瓶中，前一步驟的2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪-6-基]-丙-2-醇(20g,0. 0564mol)溶于二氯甲烷(400ml)，用間接加熱使 其完全溶解。該溶液通過(guò)套管快速加入過(guò)氧化物溶液中(加入時(shí)間=20分鐘)。加入時(shí)反 應(yīng)物溫度為-15 °C -25 °C。加入完成后，反應(yīng)物溫度升至-15 °C，再保持該溫度40分鐘。 反應(yīng)混合物通過(guò)加入Na2SO3 (200ml，20%水溶液)和乙醇胺(33%水溶液，300ml)猝滅。加 入兩種反應(yīng)試劑的速度應(yīng)使反應(yīng)物內(nèi)部溫度保持在0°C以下。除去冷浴，反應(yīng)混合物攪拌 2小時(shí)，然后傾入分液漏斗。分離各相，水相用乙酸乙酯(IOOml)提取。合并有機(jī)相，依次 用 5% 檸檬酸水溶液(IOOml), 10 % NaHCO3 (IOOml), /K (2 X 100ml)和鹽水(IOOml)洗滌， 然后干燥，過(guò)濾，真空濃縮獲得橙色泡沫。粗品上樣于Florisil柱，用四氫呋喃作為上樣 溶劑，柱用30%乙酸乙酯/庚烷洗脫。收集含有所需產(chǎn)物的級(jí)分，真空濃縮，用乙酸乙酯/ 庚烷重結(jié)晶。收集固體，用庚烷洗滌，獲得9. lg(52%)所需產(chǎn)物的黃白色固體。真空濃縮 濾液，用40%乙酸乙酯/庚烷作為洗脫液在硅膠上純化，獲得另外2. 5g(14% )所需產(chǎn)物。 4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪_6_醇總產(chǎn) 率為 11. 6g,66%0反相HPLC :3. 75min(YMC 55005柱，4.6\50讓?zhuān)?.2%磷酸的 10-90% 甲醇水溶 液，梯度變化時(shí)間4分鐘，4ml/分鐘，220nm處監(jiān)測(cè))。LC/MS ； (M+H)+ = 313. 2。4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_醇的制備 L. 1-(2，3- 二氟 _6_ 硝基苯基)_ 丙 _2_ 酮向IOL反應(yīng)器中裝入叔丁醇鉀(570. 6g，5. 082mol)和四氫呋喃(2L)。開(kāi)始頂部攪 拌，所得懸浮液冷卻至11°C，然后加入乙酰乙酸乙酯(668ml，5.082mol)。乙酰乙酸乙酯的 加入需要1小時(shí)，可觀察到放熱現(xiàn)象。控制加入速率，使反應(yīng)器內(nèi)部溫度不超過(guò)25°C。所 得混合物變?yōu)閯蛸|(zhì)，顏色變?yōu)榈S色。加入完成后，反應(yīng)混合物冷卻至10°C 15°C，然后滴 加1，2，3_三氟硝基苯(260ml,600g,2. 259mol)的四氫呋喃溶液(IL)。加入需35分鐘，可 觀察到放熱現(xiàn)象?？刂萍尤胨俾?，使內(nèi)部溫度不超過(guò)21°C。加入完成后，所得褐色反應(yīng)混合 物升至室溫，攪拌2. 5小時(shí)，此時(shí)LC分析表明沒(méi)有1，2，3-三氟硝基苯殘留痕跡，達(dá)到100% 轉(zhuǎn)化率。反應(yīng)混合物再冷卻至15°C，用15分鐘緩慢加入3L IN HC1，褐色溶液最終成為澄 清黃色溶液。水相的PH約為4?；旌衔镉靡宜嵋阴?2X1L)提取，合并有機(jī)提取物，用鹽水 (IL)洗滌，真空濃縮獲得橙色油狀物。獲得的油狀物加入IOL反應(yīng)器，溶于冰乙酸(IL)。然后加入硫酸(濃硫酸，1L)，可 觀察到劇烈的氣體釋放和輕微的放熱。開(kāi)始機(jī)械攪拌，反應(yīng)混合物在70°C加熱3小時(shí)，加 熱后LC分析表明達(dá)到100%轉(zhuǎn)化。反應(yīng)混合物冷卻至15°C 20°C，加入乙酸乙酯(3L)和 水(6L)。沒(méi)有觀察到可見(jiàn)的界面。分離7L的水相，用乙酸乙酯(2X2L)提取。此時(shí)，可觀 察到可見(jiàn)的界面。合并有機(jī)提取物，用IN NaOH (6 XlL)(水相的pH為6. 6)和鹽水(3 XlL)
24洗滌。減壓濃縮褐色有機(jī)提取物(溫度35°C，36torr)約10小時(shí)，獲得569g所需化合物的 褐色油狀粗品，經(jīng)HPLC分析AP為82 %。GC分析顯示，殘留乙酸乙酯為3%。KF:0. 25%。1H和13C NMR與報(bào)道資料相符。 主要雜質(zhì)對(duì)位區(qū)域異構(gòu)體(para regioisomer)。Μ. 1-(2，3-二氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮(183g)和碳酸鉀(IOOg)混合物的甲醇 溶液(IL)加熱回流3小時(shí)。然后冷卻反應(yīng)混合物，真空濃縮除去大部分甲醇。殘留物用乙 酸乙酯(IL)稀釋?zhuān)^(guò)濾并用水洗滌。分離的水相用2N HCl中和，用乙酸乙酯(2X500ml) 提取。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4),真空濃縮，獲得褐色固體。固體用二乙醚研 磨，過(guò)濾獲得1- (2-氟-3-甲氧基-6-硝基苯基)-丙-2-酮的黃色固體(121g，71 % )。LC/ MS ； (M+H)+ = 228. 2。N.前一步驟的1-(2_氟-3-甲氧基_6_硝基苯基)-丙_2_酮(454mg, 21mmol) 和氯化吡啶鐺(0. 9g，7. 8mmol)的混合物在180°C攪拌75分鐘。反應(yīng)物冷卻至室溫，用IN HCl (3ml)和乙酸乙酯(IOml)稀釋?zhuān)^(guò)濾。濾液用鹽水(2x)洗滌，干燥并真空濃縮，獲得 1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)-丙-2-酮的灰色固體(410mg，96%),該固體無(wú)需進(jìn)一步 純化可用于下一步驟。LC/MS ； (M+H)+= 214。1H NMR(CDCl3) δ 2. 37 (s，3H)，4. 22 (s，2H)， 6. 95 (dd, 1H)，7. 95 (d, 1H, J = 9. 35Hz)。0.前一步驟的1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)-丙-2-酮(50g，0. 234mol)加 入到2L圓底燒瓶中。加入水(IL)，所得黃色懸浮液在室溫下攪拌。一次性加入連二亞硫 酸鈉(225g，5. 5當(dāng)量)，攪拌反應(yīng)混合物并使其保持< 30°C，直到HPLC分析表明無(wú)起始原 料殘留(通常少于1小時(shí))。完成后，反應(yīng)混合物冷卻至0°C，真空過(guò)濾收集黃褐色固體 產(chǎn)物。濕產(chǎn)物在<50°C時(shí)真空(under house vacuum)干燥，獲得4-氟-2-甲基-IH-吲 哚-5-醇(31. 4g，81%產(chǎn)率)，該產(chǎn)物分離為黃褐色晶狀粉末。該產(chǎn)物的HPLC純度>99. 8。 1H NMR(CDCl3,400MHz) δ 7. 8(s, 1H)，6. 9—6. 7 (m，2H)，6. 2 (s，1H)，4. 7(s，1H)，2. 4 (s，3H)。13C NMR(CDCl3,100MHz) δ 145. 7，143. 4，137. 5，136. 7，134. 4，120. 1，112. 7，106. 8,95. 4，13. 3。
而且，1- (2，3- 二氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮可通過(guò)下述其它方法轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化 合物。P. 1-(3-苯甲氧基-2-氟-6-硝基-苯基)_丙_2_酮向1-(2，3-二氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮(2. 5g，HPLC分析的純度為82 %， 9. 54mmol)的溶液中加入苯甲醇(2.5ml)和LiOH · H2O(1. 07g，25. 58mmol)。然后加熱反 應(yīng)混合物至100 110°C，攪拌4小時(shí)，直到HPLC分析表明反應(yīng)完全。冷卻至室溫后，用二 氯甲烷(18ml)稀釋反應(yīng)混合物，用IN HCl中和至pH6_7。分離各相，用鹽水洗滌并收集有 機(jī)相。邊攪拌邊向有機(jī)溶液中加入庚烷(30-25ml)，因此開(kāi)始結(jié)晶。所得漿液冷卻至0 5°C，再攪拌1小時(shí)。然后過(guò)濾漿液，濾餅用庚烷洗滌。在50°C真空干燥黃褐色固體12-15 小時(shí)，獲得1. 6g所需化合物，HPLC分析其純度為95%。HPLC方法柱YMC Pack Cyano3um 4. 6 X 50mm，溶劑 A :0. 05% TFA 的 MeOH 溶液水(20 80)，溶劑 B :0. 05% TFA 的 MeOH 溶 液水(20 80)，波長(zhǎng):254匪，流速:3ml/min。梯度時(shí)間3分鐘。最終％ B 100，起始溶 劑保留0. 5分鐘。起始％ B :0。典型保留時(shí)間起始原料，1. 2分鐘；產(chǎn)物，2. 2-2. 3分鐘。Q. 4-氟-2-甲基-IH-吲哚 _5_ 醇在氮?dú)猸h(huán)境中，室溫下向前一步驟化合物P(20.00g，66.03.30mmol)的甲醇溶液(300ml)避光加入10% Pd/C(2. Og)和甲酸銨(60. Og,0. 95mol)。反應(yīng)混合物攪拌3. 5小 時(shí)，然后用乙酸乙酯(200ml)稀釋?zhuān)肅elite /硅膠墊過(guò)濾。殘留物用任一種下述方法純 化真空濃縮后，所得殘留物用層析純化，用30%乙酸乙酯/己烷洗脫，用二氯甲烷/ 己烷研磨后，獲得(7. 32g,67% )所需化合物的白色固體。真空濃縮后，殘留物溶于二氯甲烷，流過(guò)硅膠墊，用二氯甲烷洗滌。濾液真空濃縮， 獲得(6. 66g,61% )標(biāo)題化合物的白色固體。1-(3-苯甲氧基-2-氟-6-硝基-苯基)-丙_2_酮也可用下述兩種其它的方法轉(zhuǎn) 化為1- (2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)-丙-2-酮。 1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)_丙-2-酮方法R-I 室溫下向1-(3-苯甲氧基-2-氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮(3. 03g， 1 Ommol)的乙酸酐(5ml)和乙酸(5ml)溶液中加入氫溴酸(48%水溶液，3ml)。加入后，反 應(yīng)物100°C加熱30分鐘，然后冷卻至室溫。邊攪拌邊向該混合物中加入IOml己烷。倒出溶 液并濃縮。殘留物用乙酸乙酯(50ml)稀釋?zhuān)名}水(3X20ml)洗滌。干燥有機(jī)相，真空濃 縮，獲得I-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)-丙-2-酮的褐色固體(1. 70g, 80%),該固體無(wú) 需純化即可用于下一步驟。LC/MS ； (M+H)+ = 213. 2。方法R-2 :1-(3_苯甲氧基-2-氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮(65. 0g，0. 214mol)和 氯化吡啶鐺(60. 74g，0. 526mol)的混合物在180°C攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫， 用3N HCl(IOOml)和乙酸乙酯(500ml)稀釋?zhuān)^(guò)濾。水相用乙酸乙酯(2X)提取，合并有機(jī) 相，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，用硅膠墊過(guò)濾，真空濃縮。殘留物用活性碳/甲醇脫色，過(guò)濾， 真空濃縮，獲得1- (2-氟-3-羥基-6-硝基苯基)-丙-2-酮的褐色固體(37g，81 % )。LC/ MS ； (M+H)+ = 213. 2?；蛘撸?-(3-苯甲氧基-2-氟-6-硝基苯基)_丙_2_酮可如下述環(huán)化為5_苯甲氧 基-4-氟-2-甲基-IH-吲哚，該產(chǎn)物可如前述去苯甲基。S. 1-(3-苯甲氧基-2-氟-6-硝基苯基)_丙-2-酮(9. 09g，30mmol)和阮內(nèi)鎳 ( 5g)混合物的甲醇溶液(IOOml)加熱至40°C，然后劇烈攪拌下用30分鐘滴加胼的甲醇 溶液(15ml)。回流1小時(shí)后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用Celite過(guò)濾，濃縮。粗品流過(guò)硅膠 墊，用二氯甲烷洗脫，真空濃縮，獲得5-苯甲氧基-4-氟-2-甲基-IH-吲哚的淡黃油狀物 (6. Ig,80% )。LC/MS ； (M+H)+ = 256. 3+。實(shí)施例2 4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基_6_環(huán)氧乙烷基甲氧基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三 嗪-6-醇(實(shí)施例 1) (200mg，0. 64mmol)、3-氯 1，2-環(huán)氧丙烷(297mg,3. 21mmol)和碳酸鉀 (445mg, 3. 21mmol)混合物的DMF溶液(Iml)在50°C攪拌6小時(shí)。冷卻至室溫后，真空濃縮， 粗品用硅膠層析純化，用50%乙酸乙酯/己烷洗脫，獲得標(biāo)題化合物的淡黃色固體(190mg， 81% )。MS (M+H)+ = 369。實(shí)施例3 1-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2，1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基]-3-甲磺酰-丙_2_醇實(shí)施例2 (IOmg,0. 027mmol)和甲磺酸鈉(120mg，85%, 1. Ommo 1)混合物的 DMSO溶 液105°C加熱1小時(shí)。濃縮混合物，用硅膠層析純化，用5%甲醇/乙酸乙酯洗脫，獲得標(biāo)題 化合物的白色固體(5. 5mg,45% )。MS :_)+ = 449. 3。實(shí)施例4 1-[4-(4_ 氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-4- ( 二甲基氨基磺酰)氨基丁 -2-醇實(shí)施例2 化合物(40mg，0. llmmol)、N，N- 二甲基磺酰胺(94mg，0. 66mmol)和碳酸 鉀(91mg，0. 66mmol)混合物的DMF溶液(0. 5ml)在80°C攪拌1. 5小時(shí)?；旌衔镉枚燃淄?稀釋?zhuān)^(guò)濾并真空濃縮。粗品用制備性HPLC和硅膠層析純化，硅膠層析時(shí)用10%甲醇/乙 酸乙酯洗脫，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(13.7!1^，25%產(chǎn)率)。MS :(M+H)+= 493.1。用與實(shí)施例4所述類(lèi)似的方法，使用表中所示的合適的親核試劑制備下列化合物。
實(shí)施例13 (2S) -3-[4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)-5_甲基-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪 _6_ 基氧基]-丙-1，2-二醇實(shí)施例1 化合物(45mg，0. 14mmol)、S_(_)縮水甘油(330mg，4. 2mmol)和三乙胺(5yL)混合物的乙醇溶液(15ml)在75°C加熱2小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)物。粗品用硅膠層析 純化，用100%乙酸乙酯洗脫，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(26!1^，48%產(chǎn)率)。1^:^+!1)+ = 387. 2。用與實(shí)施例13所述類(lèi)似的方法，使用合適的環(huán)氧化物制備下列化合物。對(duì)于實(shí)施 例15和16，使用合適的手性氧化丙烯(10當(dāng)量)。對(duì)于實(shí)施例17和18，使用合適的手性縮 水甘油甲醚(7當(dāng)量)。
實(shí)施例14 的元素分析=C19H19FN4O4 的計(jì)算值；C 59. 06%, H4. 95%, N 14. 50%,測(cè) 定值；C 58. 96%, H 4. 96%, N 14. 43%。HRMS ； (M+H)+ 387. 1455。實(shí)施例15 的元素分析=C19H19FN4O3 的計(jì)算值；C 61. 61%, H5. 17%, N 15. 12%, F 5. 13%，測(cè)定值；C 61. 35%, H 5. 06%, N 14. 99%, F 4. 88%。HRMS ； (M+H)+ 371. 1522。實(shí)施例17 的元素分析=C20H21FN4O4 的計(jì)算值，C 59. 99%, H5. 28%, N 13. 99%,測(cè) 定值；C 60. 19%, H 5. 12%, N 13. 91%。HRMS(M+H)+ 401. 1638。實(shí)施例18 的元素分析=C20H21FN4O4 的計(jì)算值，C 59. 99%, H5. 28%, N 13. 99%,測(cè) 定值；C 59. 98%, H 5. 23%, N 13. 88%。HRMS(M+H)+ 401. 1621。實(shí)施例19 3-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-丙-1-醇實(shí)施例1化合物(50mg，0. 16讓ol)、3-溴-1-丙醇(100 μ L，1. Immol)和碳酸鉀 (100mg,0. 72mmol)混合物的乙腈溶液(1.5ml)在35°C攪拌過(guò)夜。過(guò)濾混合物，濃縮，用硅 膠層析純化，用30%乙酸乙酯/ 二氯甲烷洗脫，獲得標(biāo)題化合物的淡棕色固體(26mg，39% 產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 371。實(shí)施例20 2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪-6-基氧基]-乙醇實(shí)施例1化合物采用與實(shí)施例19類(lèi)似的方法，用溴代乙醇(13當(dāng)量)處理，獲得 標(biāo)題化合物(49% ) ο LC/MS ； (M+H)+ = 357。實(shí)施例21 6- (2-溴乙氧基)-4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪實(shí)施例l(300mg，0.96mmol)、l，2-二溴乙烷(1.5ml, 17. 4mmol)和碳酸鉀(1. Og, 7. 2mmol)混合物的乙腈溶液(IOml)在50°C加熱6小時(shí)?；旌衔镉枚燃淄橄♂?zhuān)^(guò)濾并 真空濃縮。粗品用硅膠層析純化，用10%乙酸乙酯/ 二氯甲烷洗脫，獲得標(biāo)題化合物的白色 固體(405mg，100% )。MS :(M+H)+= 419。用與實(shí)施例21所述類(lèi)似的方法，使用合適的溴化物制備下列化合物。
實(shí)施例24 N-{2-[4-(4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2，1-f]三嗪-6-基氧基]}-(二甲基氨基磺酰基)乙胺在氬氣中，實(shí)施例21化合物(80mg，0. 19mmol)、N，N-二甲基磺酰胺(150mg， 1. 2mmol)和碳酸鉀(400mg，2. 9mmol)混合物的DMF溶液(1. 5ml)在80°C攪拌2小時(shí)。反 應(yīng)混合物冷卻至室溫，用CH2Cl2稀釋?zhuān)^(guò)濾并濃縮。粗品用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合 物的白色固體(48mg，55%產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 463.2。用與實(shí)施例24所述類(lèi)似的方法，使用合適的親核試劑制備下列化合物。使用甲酰 脲制備實(shí)施例27化合物。
II [2,l-f][l,2,4] Ξ嘆-6-基氧基]-乙基}-甲酰胺I實(shí)施例28 {3-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-丙基} _膦酸二乙酯A. 6- (3-溴-丙氧基)-4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基吡咯并 [2,1-f] [1,2,4]三嗪在氬氣中0°C下，向?qū)嵤├?化合物(40mg，0. 13mmol)、3-溴-1-丙醇(36mg， 0. 26mmol)和三苯基膦(68mg,0. 26mmol)的溶液中加入DEAD (45mg，0. 26mmol)?；旌衔镌?室溫下攪拌3小時(shí)，真空濃縮。殘留物用硅膠層析純化，用20%乙酸乙酯/ 二氯甲烷洗脫， 獲得化合物A的白色固體(37mg,66% )。LC/MS ； (M+H)+ = 433。B. {3-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]
三嗪-6-基氧基]-丙基}-膦酸二乙酯化合物A(8mg，0. 018mmol)的亞磷酸三乙酯溶液(0. 5ml)在110°C加熱過(guò)夜。粗品 用硅膠層析純化，用乙酸乙酯和10%甲醇/乙酸乙酯洗脫，獲得澄清油狀標(biāo)題化合物(7mg， 79% )。MS (M+H)+ = 491。
34
實(shí)施例29 4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (3-甲硫基-丙氧基)-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪除使用3-甲硫基-1-丙醇作為醇外，用與實(shí)施例28步驟A所述類(lèi)似的方法制備 (32% )標(biāo)題化合物。LC/MS ； _)+ = 400。實(shí)施例30 4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-甲基亞磺?；?丙氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪0°C下，向?qū)嵤├?9(25mg，0. 0625mmol)的二氯甲烷溶液中加入m_CPBA(77 %， 14mg，0. 0625mmol)。在0°C攪拌混合物30分鐘后，加入三苯基膦(5mg，0. 019mmol)。在0°C 再攪拌30分鐘后，真空濃縮反應(yīng)混合物。粗品用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合物的白色 固體(llmg，42%產(chǎn)率)。MS :(M+H)+= 417。實(shí)施例31 (2S) -4- (4-氟 _2_ 甲基-IH-吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基 _6_環(huán)氧乙烷基甲氧基-吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪實(shí)施例1化合物(31 lmg, lmmol), (2S) -(+)-對(duì)硝基苯磺酸縮水甘油酯(311mg， 1. 2mmol)和K2CO3(200mg, 1. 45mmol)的DMF溶液(3ml)在室溫下攪拌4小時(shí)?；旌衔镉靡?酸乙酯稀釋?zhuān)^(guò)濾固體。濾液用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘留物用快速柱層析純化(硅膠， 50%乙酸乙酯/己烷)，獲得標(biāo)題化合物(34011^，92%產(chǎn)率)。LC/MS ； (M+H) + = 369. 1。
實(shí)施例32 (2R) -4- (4-氟 _2_ 甲基-IH-吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基 _6_環(huán)氧乙烷基甲氧基-吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪通過(guò)與實(shí)施例31類(lèi)似的方法，將實(shí)施例1化合物用(2R)-(-)_對(duì)硝基苯磺酸縮水 甘油酯處理，獲得標(biāo)題化合物。LC/MS ； (M+H)+ = 369. 2。實(shí)施例33 (2R)-l-[4-(4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪 _6_ 基氧基]_4_ 甲磺酰-丁 _2_ 醇在氬氣中-78°C下，向二甲砜(282mg，3mmol)的THF溶液(2ml)中加入正丁基鋰 (1. 6M的己烷溶液，1. 12mmol)。反應(yīng)物在_78°C攪拌10分鐘，加入實(shí)施例32化合物(30mg, 0. OSmmol)。所得化合物在0°C攪拌30分鐘，用二氯甲烷稀釋?zhuān)? % NaH2PO4溶液洗滌。粗 品用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(20mg,53% )。MS _)+ = 463. 2。實(shí)施例34 (2S)-1-[4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪 _6_ 基氧基]_4_ 甲磺酰-丁 _2_ 醇實(shí)施例31化合物用實(shí)施例33所述方法轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物(40% )。LC/MS ； (M+H) + =463. 2。用實(shí)施例2化合物轉(zhuǎn)化為實(shí)施例4化合物類(lèi)似的方法，用三唑處理實(shí)施例31和實(shí) 施例32手性環(huán)氧化物，制備下列實(shí)施例化合物。
實(shí)施例43 5-甲基-4- (2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3_哌啶基丙氧基)-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪A.5-甲基-4-苯氧基-6-(3-哌啶-1-基-丙氧基)_吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三
嗪在氬氣中0°C下，向5-甲基-4-苯氧基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_醇(1.47g，6. lmmol，制備參見(jiàn) WO 0071129)、1_ 哌啶基丙醇(1. 74g, 12. 2mmol)和三苯基膦 (3. 2g,12. 2mmol)混合物的四氫呋喃溶液(20ml)中加入DEAD(1. 9ml，12. 2mmol)。所得混 合物在0°C攪拌30分鐘，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。真空除去揮發(fā)物。殘余物用硅膠快速柱 層析純化，用5% (2M NH3 WMeOH溶液)/20%乙酸乙酯/CH2Cl2洗脫，獲得所需產(chǎn)物的淡棕 色固體(1. 6g，72%產(chǎn)率)。MS (M+H)+= 367。B. 5-甲基-4-羥基-6-(3-哌啶-1-基-丙氧基)-吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪上述化合物A (1. 7g，5. 05mmol)在HCl水溶液(1N，15mmol)中的混和液于70°C加 熱3小時(shí)。真空除去溶劑。產(chǎn)物用快速柱層析純化[硅膠，2M NH3的MeOH溶液/EtOAc = 2/8 (ν/ν)]，獲得5-甲基-4-苯氧基-6- (3-哌啶-1-基-丙氧基)-吡咯并[2，1-f] [1,2, 4]三嗪的白色固體(1. 18，75%產(chǎn)率)。MS :_)+ = 291。C. 4-氯-5-甲基-6-(3-哌啶-1-基-丙氧基)_吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪化合物B(0. 45g，1. 55mmol)的POCl3溶液(8ml)在80°C攪拌5小時(shí)。真空除去揮 發(fā)物。殘留物溶于二氯甲烷，依次用冰冷卻的NaHCO3溶液和鹽水洗滌，干燥，過(guò)濾。濃縮濾 液，獲得4-氯-5-甲基-6-(3-哌啶-1-基-丙氧基)-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪的黃 色固體(0. 47g，98%產(chǎn)率)。LC/MS ； (M+H)+ = 309。D. 5-甲基-4- (2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-哌啶基丙氧基)-吡咯 并[2,1-f] [1,2,4]三嗪化合物C(40mg，0. 13mmol)、2-甲基 _5_ 羥基噴哚(40mg，0. 27謹(jǐn)ol)和 K2CO3(100mg，0. 72mmol)混合物的DMF溶液(Iml)在80°C加熱2小時(shí)。過(guò)濾固體，用CH2Cl2 洗滌，濃縮濾液。殘留物用快速柱層析純化[硅膠，20% NH3 (2M的MeOH溶液)/乙酸乙酯]， 獲得標(biāo)題化合物的黃色固體(24mg，44%產(chǎn)率)。LC/MS ； (M+H)+ = 420. 2。用與實(shí)施例43所述類(lèi)似的方法，使用合適的羥基吲哚或氨基吲哚制備下列化合 物。
實(shí)施例51 4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基_6_ (2_哌啶_4_基-乙氧基)_吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪0 °C下，向三苯基膦(168mg，0. 640mmol)的THF溶液(1. 5ml)中緩慢加入 DEAD (76 μ L，0. 48mmol)。攪拌5分鐘后，加入4-哌啶基乙醇(0. 48mmol)，所得混合物再攪 拌5分鐘。然后加入實(shí)施例1化合物，反應(yīng)混合物緩慢升至室溫，攪拌18小時(shí)。真空濃縮 反應(yīng)混合物，用制備性HPLC和快速柱層析純化。加入IN HCl水溶液，真空濃縮混合物，獲 得粉紅色固體(30mg,74% )。MS (M+H)+ = 424. 23。用與實(shí)施例51類(lèi)似的方法，用合適的醇處理實(shí)施例1化合物，制備下列實(shí)施例化合物。
實(shí)施例71 {!-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)_5_甲基-吡咯并[2，1-f]
[1,2,4]三嗪-6-基氧基甲基]-3-甲磺酰-丙基}_ 二甲基-胺步驟A 0°C下，向?qū)嵤├?64 化合物(20mg，0. 0336mmol)的 DMF/THF 溶液(1 1， Iml)中加入NaH(lmg，0.0336mmOl)，所得化合物攪拌20分鐘。然后加入碘代甲烷(0.2ml， 過(guò)量)，反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘，傾入水(20ml)和二氯甲烷(20ml)的混合物中，分離各 相。水相用二氯甲烷(IOml)提取，合并有機(jī)相，Na2SO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，無(wú)需純化可用 于下一步驟。步驟B向前一步驟獲得產(chǎn)物的DMF溶液(Iml)中加入NH4CO2H(2lmg，0. 336mmol) 和5% Pd/C(3mg)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。再加入NH4CO2H(2lmg)和Pd/C(5mg)， 反應(yīng)混合物加熱至70°C，持續(xù)15分鐘，然后室溫保持14小時(shí)。反應(yīng)混合物用Celte 過(guò)濾， 用二氯甲烷(50ml)洗滌。濾液用水(20ml)洗滌，Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮。殘留物用 制備性HPLC純化，溶于二氯甲烷(20ml)，用NaHCO3 (20ml)洗滌，真空濃縮，獲得標(biāo)題化合物 (3. 5mg，21%，2 步)。MS (M+H) + = 490。制備實(shí)施例64化合物所需的中間體制備如下。 (1-羥甲基-3-甲磺酰-丙基)_氨基甲酸苯甲酯在0°C下，向Cbz-L-甲硫氨酸甲酯(500mg, 1. 68mmol)的MeOH溶液(12ml)中加 入Oxone (1. 53g，5. 044mmol)的水溶液(8ml)。除去冰浴，反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，真空 濃縮除去揮發(fā)物，然后殘留物傾入二氯甲烷(50ml)和水(50ml)。分離各相，水相用二氯甲 烷(2 X 40ml)提取，合并有機(jī)提取物，用水(40ml)洗滌，MgSO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，獲得 612mg產(chǎn)物(產(chǎn)率> 100% )，該產(chǎn)物無(wú)需純化可直接使用。-78°C下，向前一步驟獲得產(chǎn)物(350mg)的二氯甲烷溶液(6ml)中加入DIBAL(1. OM 己烷溶液，2. 33ml, 2. 33mmol)，反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，然后在低溫下用Rochelle鹽猝滅 (鹽的水溶液，IOml)，再在室溫下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物倒入分液漏斗，分離各相。水相 用二氯甲烷(2 X 25ml)提取，合并提取物，Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，獲得醛和醇混合物 的白色固體。將該物質(zhì)溶于二氯甲烷(6ml)，冷卻至-78°C，加入DIBAL-H(1. OM己烷溶液， 1.59ml，1.41mm0l)，重新反應(yīng)。反應(yīng)混合物用2小時(shí)緩慢升至0°C，然后用Rochelle鹽(鹽 的水溶液，IOml)猝滅，再在室溫下攪拌1小時(shí)。分離各相，水相用二氯甲烷(2X25ml)提 取，合并提取物，Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮。殘留物與二氯甲烷己烷(1 2)研磨，獲 得(I-羥甲基-3-甲磺酰-丙基)_氨基甲酸苯甲酯的白色固體(118mg，42%產(chǎn)率)。實(shí)施例72 5-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪 _6_ 基氧基]-戊 _2_ 醇0°C下，向?qū)嵤├?58 化合物(16mg，0. 0404mmol)的 THF 溶液(Iml)禾口 Me0H(0. 1ml) 中加入NaBH4(3mg，0. 0808mmol)，反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。再加入5mg NaBH4,混合物在 10°C攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物傾入NaHCO3(20ml)和二氯甲烷 (30ml)中。分離各相，有機(jī)相干燥，過(guò)濾并真空濃縮。殘留物吸收于硅膠，用快速柱層析純 化(50%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)，獲得標(biāo)題化合物(1011^，63%產(chǎn)率)。1^:^+!1) +
399·5 ο實(shí)施例73 2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙胺A. 1-[4-(4_ 氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4] 三嗪-6-基氧基]-丙-2-酮實(shí)施例1 化合物(3. lg, IOmmol)、氯丙酮(1. 02g, llmmol)和 K2CO3 (4. lg,30mmol) 混合物的丙酮溶液(IOOml)在50°C加熱6小時(shí)。冷卻混合物，濃縮獲得淡棕色固體，該固體 用乙酸乙酯/ 二氯甲烷(1 1)洗滌。濾液通過(guò)流經(jīng)短硅膠墊純化，獲得所需產(chǎn)物的淡棕 色固體(3. 34g，91%產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 369。B. 2-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4] 三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙胺上述化合物A(56mg，0. 15mmol)、甲酸銨(lOOmg, 1. 6mmol)、NaBH (OAc) 3(84mg， 0.4mmol)、乙酸(0.2ml)和分子篩(IOOmg)混合于THF(2ml)中，室溫下攪拌過(guò)夜。再加入 一部分甲酸銨(lOOmg, 1. 6mmol)和NaBH(OAc) 3 (84mg，0. 4mmol)，混合物再攪拌5小時(shí)。過(guò) 濾固體，濾液用制備性HPLC純化。冷凍干燥所需級(jí)分，獲得所需化合物的TFA鹽的白色固 體(20mg，28%產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 370。實(shí)施例74 {2-[4-(4-氟-2-甲基 _1Η_ 吲哚 _5_ 基氧基)_5_ 甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙基}_甲胺
實(shí)施例73 化合物 A(56mg，0. 15mmol)、甲胺(2M 的 THF 溶液，0. 2mmol)、 NaBH (OAc) 3 (42mg，0. 2mmol)、乙酸(20 μ L)和3人分子篩(IOOmg)的混合于 THF (2ml)，在室 溫下攪拌20小時(shí)。過(guò)濾固體，濾液用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(21mg， 37%產(chǎn)率)。MS :(M+H)+= 384。實(shí)施例75 [4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪-6-基]-甲醇-78°C在氬氣中，向4-(4_氟-2-甲基_1Η_吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并 [2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-甲酸乙酯(68mg 0. 19mmol)的無(wú)水二氯甲烷溶液(2. 0ml)中滴加 DIBAL(0. 48mmol,0. 48ml, 1. 0M，2. 5當(dāng)量)。在5分鐘后，混合物升至_15°C，再攪拌15分 鐘。加入一滴乙醇淬滅反應(yīng)，然后加入IN氫氧化鈉(0. 2ml)和1. Oml乙酸乙酯和1. OmlTHF0 30分鐘后，過(guò)濾混合物除去得到的固體。干燥濾液，真空濃縮，硅膠層析，用40-75%乙酸乙 酯/己烷(梯度)洗脫。濃縮所需級(jí)分，獲得澄清油狀標(biāo)題化合物(39mg，63%)。LC/MS ； (M+H)+ = 327. 3。實(shí)施例76 [5-甲基-4-(2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)_ 吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸3-哌啶-1-基-丙酯A.在氬氣中，邊攪拌邊向4-氯-5-甲基-吡咯并[2，Ι-f] [1，2，4]三嗪-6-甲酸 甲酯(0. 5g，2. 22mmol)和2-甲基_5_羥基吲哚(424mg，2. 9mmol)的乙腈溶液(10. Oml)中 加入三乙胺(6. 65mmol,0. 93ml)。在室溫下攪拌混合物17小時(shí)后，真空除去溶劑，殘留物用 硅膠層析，用20-30%乙酸乙酯(梯度)/己烷洗脫。真空除去溶劑，獲得5-甲基-4-(2-甲 基-IH-吲哚-5-基氧基)-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯的白色固體(0. 58g， 85% )。LC/MS ； (M+H)+ = 337. 2。B.向化合物A(575mg，l. 71mmol)的吡啶溶液(20ml)中加入碘化鋰(17mmol, 2.3g)。混合物在回流溫度下攪拌45小時(shí)。冷卻混合物，真空除去吡啶。殘留的固體用制 備性HPLC純化。真空除去洗脫劑，獲得5-甲基-4-(2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)吡咯 并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-甲酸的褐色固體(228mg,41% )0 LC/MS ； (M+H) + = 323. 1。
C.向化合物B(35mg，0. Ilmmol)的二氧六環(huán)溶液(7ml)中加入約5mg粉碎的4人 分子篩、三乙胺(0. 13讓ol，18 μ L)和DPPA(0. 13mmol,28y L)?；旌衔镌跉鍤庵?0°C下力口 熱6小時(shí)，然后加入3-哌啶基丙醇(1. lmmol, 156mg)的二氧六環(huán)溶液(2. Oml)，升至76°C， 攪拌約16小時(shí)。反應(yīng)混合物用制備性HPLC純化。獲得的產(chǎn)物溶于乙酸乙酯(100ml)，用 30ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥，過(guò)濾并真空濃縮。所得油狀物用硅膠層析，用三 乙胺/10%甲醇/氯仿洗脫。真空除去溶劑，獲得橙色油狀標(biāo)題化合物(9. 2mg,18%)0 LC/ MS ； (M+H)+ = 323. 2。實(shí)施例77 4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基_6_(嗎啉_2_基甲氧基)-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪A. 0°C下，向(2S)-4-叔丁氧基羰基-2-羥基甲基嗎啉[28. 6mg,0. 13mmol，制備參 見(jiàn) Heterocycles (1993)，35(1)，105]和三乙胺(16mg，0. 16mmol)的二氯甲烷溶液(0.5ml) 中加入甲磺酰氯(18mg，0. 157mmol)?；旌衔镌贠°C攪拌1小時(shí)，然后用乙酸乙酯(5ml)稀 釋?；旌衔镆来斡肐M KHSO4溶液和鹽水洗滌。分離有機(jī)相，干燥，濃縮獲得油狀粗產(chǎn)物 38mg (99 % )，該產(chǎn)物可直接用于下一步。該化合物粗品(38mg，0. 13mmol)、實(shí)施例1化合物(45mg，0. 14mmol)和 K2CO3 (50mg,0. 36mmol)混合物的DMF溶液(0.5ml)在室溫下攪拌48小時(shí)?；旌衔镉枚?甲烷稀釋?zhuān)^(guò)濾。濾液用水洗滌，干燥并濃縮。殘留物用制備性HPLC純化，獲得(2S)-2-甲 磺酰氧基甲基_嗎啉-4-甲酸叔丁酯的凝膠(15mg，22.6% )0 LC/MS ； (M+H)+ = 512。B. 0°C下，化合物A(15mg)溶于4M HCl的二氧六環(huán)溶液(0. Iml)，在此溫度下攪拌 10小時(shí)，在冰箱中儲(chǔ)存72小時(shí)?；旌衔镉肗aHCO3水溶液中和，用制備性HPLC純化。含有 所需產(chǎn)物的級(jí)分用NaHCO3中和，用乙酸乙酯提取。干燥提取物，濃縮，冷凍干燥殘留物，獲 得標(biāo)題化合物的固體(2mg, 16% ) ο LC/MS ； (M+H) + = 412。實(shí)施例78 6-(5-二氟甲基-[1，3，4]噁二唑 _2_ 基)_4_ (4-氟 _2_ 甲基-IH-吲哚-
5-基氧基)-5-甲基吡咯并-[2，l-f] [1,2,4]三嗪A. 4-羥基-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪 _6_ 甲酸乙酯(1. 5mmo 1,33Img) 溶于胼/乙醇的4 1混合物(2ml)中，混合物在90°C加熱8小時(shí)。冷卻混合物至室溫，真 空濃縮，獲得4-[[2，4-二氟-5-[(甲氧基氨基)羰基]苯基]氨基]-5-(1-甲基乙基)吡 咯并[2，l-f][l，2，4]三嗪-6-甲酰胼的黃白色固體(300mg,97% )0B.向氯氧化磷(3ml)中加入化合物A(lOOmg，0. 43mmol)和二氟乙酸，所得混合物 在120°C加熱10小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，真空濃縮。殘留物在乙酸乙酯和飽 和NaHCO3溶液之間分配。分離有機(jī)相，干燥(Na2SO4),過(guò)濾并濃縮。所得油狀殘留物溶于 DMF (2ml)，加入4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-醇(0. 13g，0. 63mmol)和碳酸鉀。所得混合物在 50°C攪拌5小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，用二氯甲烷稀釋。用水洗滌有機(jī)相，干燥(Na2SO4), 過(guò)濾，濃縮。用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(22mg，31%總產(chǎn)率)。LC/MS ； (M+H)+ = 415. 14。實(shí)施例79 [ (IR)，2S] -2- 二甲基氨基丙酸-[2_ [4_ (4_氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)-
5-甲基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙酯實(shí)施例15 化合物(80mg, 0. 22mmol)、N, N- 二甲基 丙氨酸(41mg, 0. 35mmol)、 HATU(132mg,0. 69mmol)、DIPEA (91mg，0. 69mmol)和 DMAP (3mg)混合物的 DMF 溶液(1. 5ml) 攪拌16小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，殘留物用制備性HPLC純化。收集所需級(jí)分，用HCl水溶 液(IM)處理，冷凍干燥，獲得標(biāo)題化合物的白色固體(69mg，63%產(chǎn)率)。LC/MS ;(M+H) + =470。1HNMR(CD3OD) δ 1. 45(d,3H, J = 6. 6Hz) ；2.43(s，3H) ；2.45(s，3H) ；2.98(s，6H)； 3.65(s，2H) ;4.19(d，2H，J = 2. 75Hz) ；5. 10 (m 1H) ；6. 23 (s, 1H) ；6. 90 (m, 1H) ；7.10 (d， 1H) ；7. 66 (s，1H)，7· 75 (s, 1H)。實(shí)施例80 [ (IR)，2S] -2-氨基_4_甲基戊酸[2_ [4- (4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)-5-甲基吡咯并[2，lf] [[1，2，4]三嗪_6_基氧基]]甲基乙酯步驟A實(shí)施例15 化合物(93mg，0. 3mmol)、N-Cbz-L-亮氨酸(159mg，0. 6mmol)、 HATU(228mg,0. 6mmol)、DIPEA(154mg, 1. 2mmol)和 DMAP(5mg)混合物的 DMF 溶液(1. 5ml) 攪拌過(guò)夜。真空除去揮發(fā)物，殘留物用制備性HPLC純化，獲得2-苯甲氧基羰基氨基-4-甲 基戊酸[2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三 嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙酯的白色固體(145mg，78%產(chǎn)率，單一非對(duì)映異構(gòu)體)。ν 步驟 B前一步驟A 的化合物(130mg，0. 21mmol)、Pd/C (10%, 26mg)和甲酸銨(400mg)的 DMF溶液(4ml)在室溫下攪拌4小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)?jīng)Celite 板過(guò)濾，濃縮。殘 留物用制備性HPLC純化。收集所需級(jí)分，與IN HCl水溶液混和，冷凍干燥，獲得標(biāo)題化合物 的白色固體(92mg，84%產(chǎn)率)。MS (M+H)+= 484。1HNMR(CD3OD) δ 0. 99(m,6H), 1. 45 (d, 3H, J = 8. 2Hz)，1. 70 (m, 1H)，1. 80 (m, 2H)，2. 44 (s, 3H)，2. 46 (s, 3H)，4. 03 (t, 1H)，4. 20 (d, 2H, J = 4. 40Ηζ), 5. 45 (m 1H)，6· 23 (s, 1H)，6· 90 (m, 1H)，7· 11 (d, 1H, J = 10. 4Hz)，7· 67 (s, 1Η)，7· 75 (s，1Η)。實(shí)施例81 [ (IR)，2S] -2-氨基丙酸 2_ [4_ (4_ 氟 _2_ 甲基-IH-吲哚 _5_ 基氧基)_5_甲基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪_6_基氧基]甲基乙酯步驟A實(shí)施例15 化合物(60mg，0. 0. 16mmol)、N-Cbz-L-丙氨酸(89mg，0. 4mmol)、 HATU(253mg,0. 4mmol)、DIPEA (103mg, 0. 8mmol)和 DMAP (5mg)混合物的 DMF 溶液(Iml) 攪拌過(guò)夜。真空除去揮發(fā)物，殘留物用制備性HPLC純化，獲得純手性2-苯甲氧基羰基氨 基-丙酸[2-[4-(4_氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，l_f] [1,2,4] 三嗪-6-基氧基]]-1-甲基乙酯的白色固體(77!1^，84%產(chǎn)率)。步驟B上面步驟A的化合物(60mg，0. llmmol)、Pd/C(6mg)和甲酸銨(200mg)的DMF溶液 (1.5ml)在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂?zhuān)缓罅鹘?jīng)Celite 墊板過(guò)濾。濾 液用水洗滌，Na2SO4干燥，濃縮。產(chǎn)物與IN HCl水溶液混和，冷凍干燥，獲得標(biāo)題化合物的白 色固體(53mg，99%產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 442。1H 匪R(CD3OD) δ 1. 45(d，3H，J = 6. 60Hz)， 1. 56 (d, 3H, J = 7. 47Hz)，2. 44 (s, 3H)，2. 46 (s, 3H)，4. 13 (q, 1H)，4. 18 (d, 2H, J = 3. 96Hz)， 5. 45 (m 1H) ；6. 23 (s, 1H) ；6. 90(dd，lH) ；7. 10 (d, 1H) ；7. 66 (s，1H)，7. 75 (s，1H)。
4- (4-氟-2-甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_6_ (3-甲磺酰-丙氧基)_5_甲基-吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪
A.0°C下，向4-苯氧基-5-甲基-6-羥基吡咯并[2，l_f] [1,2,4]三嗪(1. Og, 4. 15mmol，制備參見(jiàn)WO 00/71129，該文獻(xiàn)通過(guò)引用結(jié)合到本文中)、3_甲磺酰丙-1-醇 (1. 15g，8. 3mmol)和 PPh3 (2. 17g，8. 3mmol)混合物的 THF 溶液(12ml)中加入 DEAD (1. 42g, 8.3mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。真空除去溶劑。殘留物溶于二氯甲烷，用鹽水洗 滌，干燥(Na2SO4)。真空除去揮發(fā)物，獲得的固體與二氯甲烷研磨，獲得6-(3_甲磺?；?基)-5_甲基-4-苯氧基吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪的白色固體(1. 18，73%產(chǎn)率)。MS (M+H)+ = 362。B. 6-(3-甲磺酰_丙氧基)-5-甲基_4_苯氧基吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪 (1. lg，3. 04mmol)、HCl(lN，20ml)和乙醇(20ml)在80°C加熱3小時(shí)。真空除去揮發(fā)物。所 得白色固體與二乙醚/己烷(2 1)研磨，獲得6-(3_甲磺酰-丙氧基)-5_甲基吡咯并 [2,1-f] [1,2,4]三嗪-4-醇的白色固體(820mg,95% ) MS :_)+ = 286。C. 6-(3-甲磺酰-丙氧基)-5-甲基-吡咯并[2，l_f] [1，2，4]三嗪 _4_ 醇(620mg, 2. 17mmol)和POCl3 (IOml)的混合物在85°C加熱3小時(shí)。真空除去POCl3，獲得黃色固體，該 固體溶于二氯甲烷，依次用冷的NaHCO3溶液和鹽水洗滌。干燥有機(jī)物，過(guò)濾，濃縮，獲得亞氨 酰氯中間體的粗品(610mg)，0°C下將該粗品加入預(yù)先混和的4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-醇 (664mg, 4. 02mmol)和NaH(60%的礦物油懸浮液，160mg, 4. 02mmol)的DMF溶液。所得混合 物在室溫下攪拌30分鐘，用二氟甲烷稀釋?zhuān)?0% LiCl水溶液洗滌，干燥并濃縮。殘留物 用快速柱層析(硅膠，用從10%乙酸乙酯/ 二氯甲烷到30%乙酸乙酯/ 二氯甲烷洗脫)純 化。合并所需級(jí)分，真空濃縮得到固體，該固體用MeOH洗滌，獲得標(biāo)題化合物的白色固體 (610mg，65%產(chǎn)率)。HRMS(M+H)+C2tlH21FN4O4S 的計(jì)算值432· 12675 ；測(cè)定值433. 1329。1H NMR(d-DMSO) δ 11. 36 (br, 1H)，7· 94 (s，1H)，7· 93 (s, 1H)，7· 15 (d, 1H, J = 8. 4Ηζ)，6· 99 (m, 1H)，6. 24 (s，1H)，4. 16 (t, 2H, J = 6. 16Hz) ,3. 31(t,2H, J = 5. 7Hz)，3. 05 (s, 3H)，2. 42 (s, 3H)，2. 41 (s，3H)，2. 50 (m, 2H) C20H21FN4O4S 0. 4 H2O 的計(jì)算值:C 54. 58 ；H 4. 84 ；N 12. 56 ； S 7. 29。測(cè)定值=C 54. 61 ；H 4. 92 ；N 12. 65 ；S 7. 33。實(shí)施例83 實(shí)施例82 N-{3-[4-(4-氟_2_甲基-IH-吲哚_5_基氧基)_5_甲基-吡咯并[2，1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基]-丙基}_甲磺酰胺A. 4-苯氧基-5-甲基-6-羥基吡咯并-[2，1-f] [1,2,4]三嗪(1. 05g, 4. 35mmol)、 1，3-二溴丙烷(4. 0g,20mmol)和K2CO3 (3g，22mmol)的混合液在70°C加熱2小時(shí)。真空除 去溶劑。殘留物用快速柱層析(硅膠，用從二氯甲烷到20%乙酸乙酯/ 二氯甲烷洗脫)純 化，獲得中間體粗品(1.358，86%產(chǎn)率)。該中間體(1.3g，3.59mm0l)與甲磺酰胺(2. 0g， 21mmol)和K2CO3 (4g，29mmol)的DMF溶液(15ml)加熱2小時(shí)。冷卻混合物，用二氯甲烷稀 釋?zhuān)?% Na2CO3溶液洗滌兩次，干燥并濃縮。殘留物用快速柱層析(硅膠，20%乙酸乙酯/ 二氯甲烷)純化，獲得N-[3-(5-甲基-4-苯氧基-吡咯并[2,1-f] [1,2,4]三嗪-6-基氧 基)_丙基]_甲磺酰胺的白色固體(1. lg，81% )。MS :(M+H)+ = 377。B.通過(guò)與實(shí)施例24所述類(lèi)似的方法，用甲磺酰胺處理上面步驟A的化合物，獲得 N-[3-(4-羥基-5-甲基-吡咯并[2，l-f][l，2，4]三嗪_6_基氧基)-丙基]-甲磺酰胺 (64%產(chǎn)率)。MS (M+H)+= 301。C. N-[3-(4-羥基-5-甲基-吡咯并[2，1-f] [1，2，4]三嗪_6_基氧基)-丙 基]-甲磺酰胺(530mg，1. 77mmol)和POCl3在80°C加熱1. 5小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，殘 留物用二氯甲烷稀釋?zhuān)来斡美涞腘aHCO3溶液和鹽水洗滌，干燥，真空濃縮，獲得亞氨酰 氯中間體的粗品(6IOmg)，該中間體與4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-醇(495mg, 3. Ommo 1) ^P K2CO3(3. 0g,22mmol)的DMF溶液(8ml)在80-85°C下加熱2小時(shí)?；旌衔镉枚燃谉?稀釋?zhuān)^(guò)濾固體。濃縮濾液，殘留物用硅膠快速柱層析純化，用30%乙酸乙酯/ 二氯甲燒 洗脫。所需產(chǎn)物進(jìn)一步用制備性HPLC純化，獲得標(biāo)題化合物的黃褐色固體(290mg，34% 產(chǎn)率)。HRMS(M+H)+C2tlH22FN5O4S 的計(jì)算值447· 1376 ；測(cè)定值448· 1476。1H NMR(CDCl3) δ 7. 75(s, 1H)，7· 24(s, 1H)，7· 03 (d, 1Η, J = 8. 32Ηζ)，6· 88 (m, 1Η)，4· 04(t，2H，J = 5. 72Ηζ) ,3. 31 (t,2H, J = 6. 16Ηζ)，2. 90 (s,3H)，2. 42 (s,3H)，2. 37 (s, 3H)，2. 04 (m, 2H)。 C20H21FN4O4S 1. OH2O 0. 18TFA 的計(jì)算值:C 50. 57 ；H 4. 73 ；N 14. 61 ；S 6. 80。測(cè)定值:C 50. 44 ；H 4. 87 ；N 14. 51 ；S 6. 70。
權(quán)利要求
一種下式化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，F(xiàn)SA00000059622000011.tif
2. 一種下式化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，
3.治療有需要的哺乳動(dòng)物的VEGFR-2和/或FGFR-I相關(guān)疾病的方法，所述方法包括給 予所述有需要的哺乳動(dòng)物有效劑量的下式化合物
4.治療有需要的哺乳動(dòng)物的VEGFR-2和/或FGFR-I相關(guān)疾病的方法，所述方法包括給 予所述有需要的哺乳動(dòng)物有效劑量的下式化合物
5.權(quán)利要求3的方法，其中所述VEGFR-2和/或FGFR-I相關(guān)疾病為癌癥。
6.權(quán)利要求4的方法，其中所述VEGFR-2和/或FGFR-I相關(guān)疾病為癌癥。
7.權(quán)利要求5的方法，其中所述癌癥為肝癌、結(jié)腸直腸癌、非小細(xì)胞性肺癌、軟組織肉瘤、胰腺癌或胃/食道腺癌。
8.權(quán)利要求6的方法，其中所述癌癥為肝癌、結(jié)腸直腸癌、非小細(xì)胞性肺癌、軟組織肉 瘤、胰腺癌或胃/食道腺癌。
9.權(quán)利要求7的方法，其中所述癌癥為肝癌、結(jié)腸直腸癌或非小細(xì)胞性肺癌。
10.權(quán)利要求8的方法，其中所述癌癥為肝癌、結(jié)腸直腸癌或非小細(xì)胞性肺癌。
全文摘要
本發(fā)明提供新型激酶抑制劑。本發(fā)明提供式(I)化合物及其藥學(xué)可接受的鹽。式(I)化合物抑制生長(zhǎng)因子受體如VEGFR-2和FGFR-1的酪氨酸激酶活性，從而可用作抗癌藥物。式(I)化合物還可用于治療與通過(guò)生長(zhǎng)因子受體起作用的信號(hào)傳導(dǎo)途徑有關(guān)的其它疾病。
文檔編號(hào)A61P19/00GK101880283SQ20101014289
公開(kāi)日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2003年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月19日
發(fā)明者J·羅布, L·洛姆巴多, L·錢(qián), R·比希德, S·巴博薩, Z·-W·蔡 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司