專(zhuān)利名稱(chēng)：一種可護(hù)發(fā)的薏仁多肽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可保護(hù)頭發(fā)的薏仁多肽及其制備方法，即一種氨基酸組成與頭發(fā) 極其相似的薏仁多肽及其制備方法。
背景技術(shù)：
薏仁主要成分為蛋白質(zhì)、維生素B1、B2，有使皮膚光滑，減少皺紋，消除色素斑點(diǎn)的 功效，長(zhǎng)期食用，能治療褐斑、雀斑、面皰，使斑點(diǎn)消失并滋潤(rùn)肌膚。而且它能促進(jìn)體內(nèi)血液 和水分的新陳代謝，有利尿、消水腫的作用，也被當(dāng)作節(jié)食用品。近年來(lái)，具有護(hù)發(fā)的獨(dú)特生理活性的薏仁生物活性肽，引起了人們的極大關(guān)注，它 具有安全性高，無(wú)副作用、來(lái)源廣泛等優(yōu)點(diǎn)。植物蛋白以其不可替代的優(yōu)點(diǎn)成為人們研究活 性肽的主要來(lái)源。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種保護(hù)頭發(fā)的薏仁多肽及其制備方法。本發(fā)明所提供的制備可護(hù)發(fā)的多肽的方法，包括下述步驟1)預(yù)處理將薏仁粉懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH到10-11，在55°C加熱處理。2)酶處理在經(jīng)過(guò)步驟1)預(yù)處理后的液體中加入堿性蛋白酶，溫度為55°C下攪拌 酶解3小時(shí)；加入高溫淀粉酶，溫度為80°C下攪拌酶解0. 5小時(shí)。3)純化將步驟2得到的酶解液離心，取上清液，經(jīng)濾徑為0. 8 μ m的濾膜過(guò)濾，將 濾液用大孔吸附樹(shù)脂吸附后，用去離子水沖洗去糖和鹽，再用體積百分含量為75%的乙醇 溶液洗脫，得到可護(hù)發(fā)的純化多肽。所述方法中，所述大孔樹(shù)脂為DA201-C吸附樹(shù)脂。所述方法中，所述步驟2)中，所述堿性蛋白酶的添加量，E/S(酶/薏苡仁)= 1% _9%，優(yōu)選為7%。所述方法中，所述步驟1)中，所述加熱處理的時(shí)間為1小時(shí)。為了提高提取率，所述方法中，所述步驟1)中，所述薏苡仁經(jīng)過(guò)粉碎，使薏苡仁的 顆粒大小為50目。所述方法中，所述步驟1)中，所述薏苡仁與水的重量份數(shù)比為1 25。所述方法中，所述步驟3)中，所述水為去離子水；所述乙醇溶液的體積百分濃度 優(yōu)選為75%。所述方法中，所述步驟2)中，所述所述高溫淀粉酶的添加量，E/S = 0. 5%-1.5%, 優(yōu)選為1%。所述方法中還包括將所述乙醇溶液洗脫得到的含有可護(hù)發(fā)的多肽的洗脫液濃縮， 冷凍干燥得到可護(hù)發(fā)的多肽粉末。本發(fā)明所提供的可護(hù)發(fā)的多肽包括上述任一方法制備的多肽。本發(fā)明的可護(hù)發(fā)的薏仁多肽是應(yīng)用酶法降解薏仁蛋白，通過(guò)膜過(guò)濾、大孔吸附樹(shù)脂吸附等制成，85%的多肽分子量在278. 61至943. 32。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的可護(hù)發(fā)的薏仁 多肽具有很強(qiáng)的護(hù)發(fā)的活性，可以廣泛應(yīng)用于護(hù)發(fā)產(chǎn)品等領(lǐng)域。本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單，具有較高的純度和得率。


圖1為75%乙醇洗脫純化薏仁多肽的洗脫峰曲線(xiàn)；圖2為薏仁多肽相對(duì)分子量的分布；圖3a為損傷頭發(fā)；圖3b為薏仁多肽修復(fù)后頭發(fā)。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中的方法，如無(wú)特別說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所述的百分含量，如無(wú)特別說(shuō)明，均為質(zhì)量百分含量。實(shí)施例1、可護(hù)發(fā)的薏仁多肽的制備提取薏仁多肽的工藝流程，具體步驟如下1、薏仁處理為了更多獲得薏仁多肽，薏苡仁選用50目的粉末。2、預(yù)處理將30g上述薏仁粉與去離子水按重量比1 25混合制成薏仁粉懸浮液，用NaOH 調(diào)節(jié)pH值到10-11，加熱到55°C，均勻攪拌1小時(shí)。3、酶處理將步驟2預(yù)處理后的懸浮液，測(cè)定pH值，結(jié)果表明pH值8. 0-8. 5 (酶解的pH值應(yīng) 為8. 0-8. 5，如果懸浮液pH值不在這個(gè)范圍內(nèi)，用NaOH調(diào)節(jié)懸浮液pH值)，加入2. lml比 活力為100萬(wàn)U/g的堿性蛋白酶(Alcalase酶，Novozymes公司)，溫度55°C繼續(xù)攪拌加溫 3小時(shí)。4、加入高溫淀粉酶(Novozymes公司)反應(yīng)0. 5小時(shí)，在0. 8 y m的濾徑下進(jìn)行膜 過(guò)濾，加入20g硅藻土助濾，得到600ml棕色澄清液體。5、將步驟4得到的澄清液體按照液體與樹(shù)脂體積的比5 3倍體積(通常60ml 樹(shù)脂對(duì)應(yīng)100ml酶解液)加入到DA201-C吸附樹(shù)脂的吸附柱( 2. 5*60cm)(江陰市有機(jī)化 工廠(chǎng))中，用去離子水沖洗至洗脫液沒(méi)有糖和鹽(通過(guò)測(cè)定糖含量和電導(dǎo)率值反映)。再用 75%的乙醇洗脫，洗脫液體積為柱體積的2倍，在220nm下利用紫外分光光度計(jì)測(cè)量吸光度 值的變化情況，制作吸光度值-洗脫體積曲線(xiàn)測(cè)定吸附樹(shù)脂洗脫曲線(xiàn)，結(jié)果如圖1所示。將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至固形物的質(zhì)量百分含量約20%，可得到薏仁護(hù)發(fā)肽，冷 凍干燥得可護(hù)發(fā)的薏仁多肽粉末。二、可護(hù)發(fā)的薏仁多肽粉末的分子量分析將上述獲得的薏仁多肽粉末，取5mg溶于lml雙蒸水中，采用高效液相色譜 (HPLC)法測(cè)定其相對(duì)分子量分布；測(cè)定色譜條件安杰侖效液相色譜儀1100 ；色譜柱為T(mén)SK gel2000SWXL體積排阻色譜柱(300mmX7. 8mm)；流動(dòng)相為乙腈、冰醋酸和三氟乙酸的混合 液，乙腈/冰醋酸/三氟乙酸=30/70/0. 1 (體積比)；檢測(cè)UV280nm ；流速lml/min ；柱溫30°C。結(jié)果如圖2所示，所得薏仁護(hù)發(fā)肽85%的分子量在lOOODa以下。三、上述制備的薏仁多肽修復(fù)損傷頭發(fā)的效果實(shí)驗(yàn)損傷發(fā)質(zhì)及利用薏仁多肽進(jìn)行修復(fù)的方法，具體方法如下所述1、材料準(zhǔn)備利用染發(fā)劑在制作損傷頭發(fā)模型用濃度30 %雙氧水占7. 40 %比例，濃度28 %的氨水占4. 45 %比例和占88. 15 %比 例的水組成的混合液來(lái)處理2、使用方法將損傷頭發(fā)浸泡在5%水解薏苡仁液中20分鐘，然后取出洗凈，晾干。3、按上述試驗(yàn)方法對(duì)頭發(fā)處理，利用電鏡對(duì)頭發(fā)的表面細(xì)微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀(guān)察，結(jié)果 如圖3所示。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，薏仁護(hù)發(fā)肽對(duì)損傷頭發(fā)有明顯的改善作用，其中含有的成分， 如氨基酸，能夠被吸收，并且用來(lái)修復(fù)損傷的頭發(fā)，因此薏苡仁護(hù)發(fā)肽具有很好的護(hù)發(fā)作用。
權(quán)利要求
一種可護(hù)發(fā)的薏仁多肽制備方法，包括下述步驟1)預(yù)處理將薏仁粉懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH到10-11，在55℃加熱處理；2)酶處理在經(jīng)過(guò)步驟1)預(yù)處理后的液體中加入堿性蛋白酶，在pH值為8.5，溫度為55℃下攪拌酶解3-5小時(shí)；加入高溫淀粉酶，溫度為80℃下攪拌酶解0.5小時(shí)；3)純化將步驟2得到的酶解液離心，取上清液，經(jīng)濾徑為0.8μm的濾膜過(guò)濾，將濾液用大孔吸附樹(shù)脂吸附后，用去離子水沖洗去糖和鹽，再用體積百分含量為75％的乙醇溶液洗脫，得到可護(hù)發(fā)的多肽；
2.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟2)中，所述堿性蛋白酶的添加 量，E/S = 1% -9%，優(yōu)選為 % ；
3.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述步驟1)中，所述薏苡仁與水的重量 份數(shù)比為1 25 ；
4.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述步驟3)中，所述水為去離子水；所述 乙醇溶液的體積百分濃度為75% ；
5.根據(jù)權(quán)利求7所述的方法，其特征在于所述步驟2)中，所述高溫淀粉酶的添加量， E/S = 0. 5-1. 5%，優(yōu)選為 1%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種可保護(hù)頭發(fā)的薏仁多肽及其制備方法。該方法，包括下述步驟1)將薏仁粉末懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH到10-11，在55℃加熱處理；2)在預(yù)處理后的液體中加入堿性蛋白酶，在55℃下攪拌酶解3-5小時(shí)；3)將步驟2得到的酶解液加入高溫淀粉酶反應(yīng)0.5小時(shí)，離心4000rpm，10min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使固體含量達(dá)到20％，過(guò)濾，得到可護(hù)發(fā)的薏仁多肽液。將濾液用大孔吸附樹(shù)脂吸附后，用去離子水沖洗去糖和鹽，再用體積百分含量為75％的乙醇溶液洗脫，得到可護(hù)發(fā)的純化多肽。本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，制備的產(chǎn)物具有較高的純度，產(chǎn)率高。該方法制備的薏仁多肽，可以廣泛應(yīng)用于護(hù)發(fā)產(chǎn)品等領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61K8/64GK101875956SQ20101017201
公開(kāi)日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2010年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月14日
發(fā)明者岳文明, 王雙, 王成濤, 王昌濤, 王靜, 黃鵬 申請(qǐng)人:北京工商大學(xué)