專利名稱：含有姜黃素的組合物及姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種組合物及其用途。
背景技術(shù)：
目前針對糖尿病的治療主要有飲食療法、運動療法和藥物療法。飲食療法和運動 療法起效慢。藥物療法主要采用中藥、胰島素、口服降糖藥對糖尿病進行治療，在市場上銷 售的治療糖尿病的藥物主要有雙胍類、磺脲類、葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷二酮類、IV酶抑 制劑，這些藥物在一定程度上都對人體造成不同程度上損害，如胃腸道不良反應、低血糖、 心臟缺血等。目前，市場上銷售的輔助降血糖產(chǎn)品，多為苦瓜粉、苦瓜提取物、蜂膠等成分， 單獨使用時為了達到降糖效果服用劑量都比較大，糖尿病病因復雜，病人體質(zhì)、疾病史、以 及并發(fā)癥也并不相同，降糖后，糖尿病并發(fā)癥無法同時得到改善，藥物治療糖尿病服用周期 長、服用劑量大、組方單一，易引起人體產(chǎn)生不同程度毒副作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了解決現(xiàn)有藥物治療糖尿病服用周期長、易引起 毒副作用的問題，提供了一種含有姜黃素的組合物及姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應 用。本發(fā)明含有姜黃素的組合物含有三價鉻和姜黃素，三價鉻為0. 001 0. 1重量份， 姜黃素為100 400重量份；其中所述三價鉻由鉻酵母、吡啶甲酸鉻、煙酸鉻及三氯化鉻中 的一種或其中幾種組成。本發(fā)明含有姜黃素的組合物還含有蜂膠和/或靈芝多糖，其中蜂膠為100 400 重量份，靈芝多糖為10 100重量份。本發(fā)明姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應用，用 于制備調(diào)節(jié)血糖組合物。本發(fā)明含有姜黃素的組合物用于治療糖尿病給藥1周后即有降糖效果，經(jīng)過7周 的治療，便有效地控制了血糖的上升，治療周期短，采用本發(fā)明含有姜黃素的組合物用于治 療糖尿病無毒副作用。本發(fā)明含有姜黃素的組合物可以促進TNF- α誘導的胰島素抵抗能夠刺激3T3-L1 脂肪細胞的胰島素攝取葡萄糖，能夠促進脂肪細胞對葡萄糖的攝取，改善胰島素抵抗；含 有姜黃素的組合物可通過調(diào)節(jié)游離脂肪酸(FFA)代謝相關(guān)酶蛋白的表達促進游離脂肪酸 (FFA)在骨骼肌內(nèi)氧化代謝，加速游離脂肪酸(FFA)在細胞內(nèi)清除，進而改善由于高游離脂 肪酸(FFA)導致的胰島素抵抗和脂毒性，從而治療2型糖尿??；含有姜黃素的組合物能夠增 加胰島素敏感性，改善2型糖尿病病人的胰島分泌功能。本發(fā)明含有姜黃素的組合物有較 為顯著的降低血糖的作用。本發(fā)明中的姜黃素與吡啶甲酸鉻有協(xié)同作用。


圖1是具體實施方式
一中含有姜黃素的組合物對2型糖尿病大鼠血糖水平的影響 圖/表示與模型對照組相比具有顯著差異；圖2是具體實施方式
一中含有姜黃素的組合物 對TNF-α誘導胰島素抵抗刺激3T3-L1脂肪細胞的胰島素攝取葡萄糖的影響圖；圖中1表 示對照組，2表示加入JNK抑制劑Sp600125和腫瘤壞死因子α (TNF- α )組，3表示TNF- α 組，4表示TNF- α和含有姜黃素的組合物含量5 μ mol/L組，5表示含有姜黃素的組合物含 量10 μ mol/L組，6表示含有姜黃素的組合物含量20 μ mol/L組，7表示含有姜黃素的組合 物含量50 μ mol/L組，"表示與模型對照組相比具有顯著差異，Δ表示與TNF-α組相比具 有顯著差異；圖3是具體實施方式
一中CD36的凝膠電泳圖；圖4是具體實施方式
一中含有 姜黃素的組合物治療對2型糖尿病大鼠骨骼肌CD36表達的影響圖，*表示與模型對照組相 比具有顯著差異，P < 0. 05圖5是具體實施方式
一中CPT-I的凝膠電泳圖；圖6是具體實施 方式一中含有姜黃素的組合物治療對2型糖尿病大鼠骨骼肌CPT-I表達的影響圖/表示與 模型對照組相比具有顯著差異，其中P < 0. 05圖7是具體實施方式
一中含有姜黃素的組合 物治療前后各組大鼠胰島素水平比較圖，■表示含有姜黃素的組合物治療前大鼠胰島素水 平，■表示含有姜黃素的組合物治療后大鼠胰島素水平；圖8是具體實施方式
一中含有姜 黃素的組合物對胰島素抵抗3T3-L1脂肪細胞TNF-a的mRNA的影響圖，圖中1表示對照組， 2表示模型組，3表示含有姜黃素的組合物低劑量組(含有姜黃素的組合物加入量5 μ mol/ L)，4表示含有姜黃素的組合物中劑量組(含有姜黃素的組合物加入量10 μ mol/L)，5表示 含有姜黃素的組合物高劑量組(含有姜黃素的組合物加入量20 μ mol/L)；圖9是具體實施 方式一中的含有姜黃素的組合物對胰島素抵抗3T3-L1脂肪細胞陪養(yǎng)上清液的TNF-a蛋白 水平的影響圖，圖中1表示對照組，2表示模型組，3表示含有姜黃素的組合物低劑量組(含 有姜黃素的組合物加入量5 μ mol/L)，4表示含有姜黃素的組合物中劑量組(含有姜黃素的 組合物加入量10 μ mol/L)，5表示含有姜黃素的組合物高劑量組(含有姜黃素的組合物加 入量20ymOl/L)；圖10是具體實施方式
一中的含有姜黃素的組合物對胰島素抵抗3T3-L1 脂肪細胞IL-6的mRNA影響圖，圖中1表示對照組，2表示模型組，3表示含有姜黃素的組合 物低劑量組(含有姜黃素的組合物加入量5 μ mol/L)，4表示含有姜黃素的組合物中劑量組 (含有姜黃素的組合物加入量10 μ mol/L)，5表示含有姜黃素的組合物高劑量組(含有姜黃 素的組合物加入量20 μ mol/L)；圖11是具體實施方式
一中的含有姜黃素的組合物對胰島 素抵抗3T3-L1脂肪細胞陪養(yǎng)上清液IL-6的蛋白水平的影響，圖中1表示對照組，2表示模 型組，3表示含有姜黃素的組合物低劑量組(含有姜黃素的組合物加入量5 μ mol/L)，4表 示含有姜黃素的組合物中劑量組(含有姜黃素的組合物加入量10 μ mol/L)，5表示含有姜 黃素的組合物高劑量組(含有姜黃素的組合物加入量20 μ mol/L)；圖12是具體實施六中 治療后各組2型糖尿病大鼠血糖水平比較圖，*表示與模型對照組相比，其中P < 0. 05，圖 中^^表示對照組大鼠血糖水平曲線，■表示模型組2型糖尿病大鼠血糖水平曲線， ^fcr表示吡啶甲酸鉻組2型糖尿病大鼠血糖水平曲線，^^表示姜黃素組2型糖尿病大 鼠血糖水平曲線，—表示復方組2型糖尿病大鼠血糖水平曲線；圖13是具體實施六中 各組大鼠葡萄糖耐受血糖水平比較圖，*表示與模型對照組相比，其中P <0. 05，圖中_表示 灌胃前各組大鼠葡萄糖耐受血糖水平比較圖，■表示灌胃后各組大鼠葡萄糖耐受血糖水平 比較圖。
具體實施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的 任意組合。
具體實施方式
一本實施方式中含有姜黃素的組合物由三價鉻和姜黃素組成，三 價鉻為0.001 0. 1重量份，姜黃素為100 400重量份；其中所述三價鉻由鉻酵母、吡啶 甲酸鉻、煙酸鉻及三氯化鉻中的一種或其中幾種組成。本實施方式將含有姜黃素的組合物用于以下藥效學試驗(一)受試對象患有2型糖尿病的大鼠、正常大鼠。所用大鼠購于北京維通利華實驗動物技術(shù)有 限公司，合格證號為SCXK (京)2007-0001。(二)試驗方法將正常大鼠組成對照組(10只)，將患有2型糖尿病的大鼠分成糖尿病模型組(10 只)、低劑量組(10只)、中劑量組(10只)、高劑量組(10只)，其中低、中、高劑量組分別按 照大鼠每千克體重給予25mg、50mg、IOOmg的含有姜黃素的組合物治療45天。(三)結(jié)果1、含有姜黃素的組合物具有降血糖作用由圖1可以看出含有姜黃素的組合物治療組(低、中、高劑量組)的空腹血糖與糖 尿病模型對照組相比差異顯著，P < 0. 05，可見含有姜黃素的組合物治療組空腹血糖有明 顯降低，說明含有姜黃素的組合物有較為顯著的降低血糖的作用。由圖2可知含有姜黃素的組合物可以促進TNF-α誘導的胰島素抵抗能夠刺激 3T3-L1脂肪細胞的胰島素攝取葡萄糖，表明含有姜黃素的組合物能夠促進脂肪細胞對葡萄 糖的攝取，改善胰島素抵抗。這是因為在C2C12骨骼肌細胞胰島素抵抗狀態(tài)時含有姜黃素 的組合物能夠促進葡萄糖轉(zhuǎn)運因子4(GLUT4)的轉(zhuǎn)位，促進細胞對葡萄糖的攝取，從而改善 了胰島素抵抗。2、含有姜黃素的組合物有降低游離脂肪酸(FFA)的作用由圖3可知含有姜黃素的組合物可以增加2型糖尿病大鼠骨骼?、?6的表達，進 而促進骨骼肌對游離脂肪酸的攝??；由圖5可知含有姜黃素的組合物可以通過增加2型糖 尿病大鼠骨骼肌CPT-I的表達，促進游離脂肪酸在線粒體內(nèi)的氧化。從圖3、圖4、圖5和圖 6可以看出含有姜黃素的組合物可通過調(diào)節(jié)游離脂肪酸(FFA)代謝相關(guān)酶蛋白的表達促進 游離脂肪酸(FFA)在骨骼肌內(nèi)氧化代謝，加速游離脂肪酸(FFA)在細胞內(nèi)清除，進而改善由 于高游離脂肪酸(FFA)導致的胰島素抵抗和脂毒性，從而治療2型糖尿病。該結(jié)果與體外 C2C12骨骼肌細胞胰島素抵抗模型的結(jié)果一致，從而證實含有姜黃素的組合物具有降低游 離脂肪酸(FFA)的作用，能夠改善胰島素抵抗的作用。3、含有姜黃素的組合物能夠增加胰島素敏感性，改善2型糖尿病大鼠的胰島分泌 功能。由圖7可知各組糖尿病大鼠經(jīng)過含有姜黃素的組合物治療45天后，治療組血清胰 島素水平明顯高于模型對照組，P < 0. 05，含有姜黃素的組合物能夠增加胰島素敏感性，改 善2型糖尿病大鼠的胰島分泌功能。
5
4、姜黃素具有通過抗炎機制改善胰島素抵抗作用。由圖8 圖11的結(jié)果表明含有姜黃素的組合物能明顯降低軟脂酸誘導的胰島素 抵抗的脂肪細胞膜型中的TNF- α及IL-6的表達水平，并呈劑量-依賴效應，證實抗炎是含 有姜黃素的組合物改善胰島素抵抗的一個機制。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是含有姜黃素的組合物還 含有蜂膠和/或靈芝多糖，其中蜂膠為100 400重量份，靈芝多糖為10 100重量份。其 它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一或二之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物按照重量份數(shù)由0. 03 0. 08份吡啶甲酸鉻、110 300份蜂膠、40 70份靈 芝多糖和200 390份姜黃素組成。其它與具體實施方式
一或二之一相同。本實施方式中所述蜂膠中黃酮的質(zhì)量含量為20%以上。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一至三之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物按照重量份數(shù)由0. 06份吡啶甲酸鉻、200份蜂膠、50份靈芝多糖和150份姜黃 素組成。其它與具體實施方式
一或三之一相同。本實施方式中所述蜂膠中黃酮的質(zhì)量含量為20%以上。
具體實施方式
五本實施方式中姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應用，用于制 備調(diào)節(jié)血糖組合物。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物按照重量份數(shù)由150份姜黃素、0. 075份吡啶甲酸鉻419. 6份微晶纖維素、150 份微粉硅膠、30份羧甲淀粉鈉、5份硬脂酸鎂和45份羥丙甲纖維素組成。本實施方式將姜黃素、吡啶甲酸鉻、含有姜黃素的組合物用于以下藥效學試驗(一 )受試對象患有2型糖尿病的大鼠、正常大鼠。所用大鼠購于北京維通利華實驗動物技術(shù)有 限公司，合格證號為SCXK (京)2007-0001。( 二)試驗方法采用高糖高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型，將40只成模大鼠 分成模型組、吡啶甲酸鉻組、姜黃素組及含有姜黃素的組合物4組，每組10只，另用10只正 常大鼠組成對照組，吡啶甲酸鉻組按大鼠每千克體重給予200 μ g/kg. Bff吡啶甲酸鉻的劑 量灌胃，姜黃素組按大鼠每千克體重給予50mg姜黃素的劑量灌胃，含有姜黃素的組合物按 大鼠每千克體重給予220mg含有姜黃素的組合物的劑量灌胃，將各組灌胃6周，每周記錄體 重，監(jiān)測血糖。各組大鼠均禁食過夜(12小時，不禁水)，待血糖和血漿胰島素達到穩(wěn)定狀態(tài) 后，在清醒狀態(tài)下按Ikg體重給予lg50%的葡萄糖溶液的劑量腹腔注射，在注射0、30、60、 90和120分鐘后從尾靜脈采血檢測血糖，記錄血糖變化情況。(三)結(jié)果由圖12和圖13可知各組2型糖尿病大鼠治療后，結(jié)果顯示治療組空腹血糖低于 糖尿病模型對照組，降糖效果含有姜黃素的組合物優(yōu)于姜黃素組和吡啶甲酸鉻組的單獨干 預，表明姜黃素與吡啶甲酸鉻有協(xié)同作用。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物按照重量份數(shù)由150份姜黃素、40份蜂膠、6份靈芝多糖、0. 075份吡啶甲酸鉻、419. 6份微晶纖維素、150份微粉硅膠、30份羧甲淀粉鈉、5份硬脂酸鎂和45份羥丙甲纖維
素組成。本實施方式中所述蜂膠中黃酮的質(zhì)量含量為20%以上。本實施方式中給8名志愿者口服2g姜黃素，然后檢測人血清中姜黃素含量很低或 檢測不到，峰值濃度僅為(01006士01005)mg · L—1，當3h時濃度就達到零。
具體實施方式
八本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、419. 6mg微晶纖維素、150mg微粉硅膠、30mg羧甲 淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維素組成。
具體實施方式
九本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、0. 075mg卩比啶甲酸鉻、419. 6mg微晶纖維素、150mg 微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維素組成。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜黃 素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、0. 075mg卩比啶甲酸鉻、419. 6mg微晶纖維素、150mg 微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維素組成。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜 黃素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、40mg蜂膠、6mg靈芝多糖、419. 6mg微晶纖維素、 150mg微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維素組成。
具體實施方式
十二 本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜 黃素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、0. 075mg吡啶甲酸鉻、40mg蜂膠、6mg靈芝多糖、 419. 6mg微晶纖維素、150mg微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維 素組成。本實施方式中將含有姜黃素的組合物用于輔助降血糖功能試驗，試驗過程如下1、對象與方法1. 1受試對象按自愿原則選擇經(jīng)飲食控制或口服降糖藥物治療后病情穩(wěn)定，不需要更換藥物品 種及劑量、僅服用維持量的2型糖尿病患者，空腹血糖>每升7. 8毫摩爾；排除1型糖尿病 和嚴重心、肝、腎臟等主要臟器疾患者。符合上述標準的患者80例隨機分為試食組和對照 組，2組病程、服藥種類、臨床表現(xiàn)等經(jīng)均衡性檢驗，具有可比性。每組受試者40例，最后試 驗有效病例38例。1. 2 方法試驗前對每一位受試者按性別、年齡和勞動強度、理想體重，參照原來生活習慣， 規(guī)定相應的飲食。試驗期間2組堅持飲食控制、原有藥物種類和劑量不變。試驗組加服含 有姜黃素的組合物，每天3次，每次2片，連續(xù)觀察30天。1. 3觀察指標各項指標在試驗開始及結(jié)束時各檢查1次。測定所用生化試劑全部為中生公司產(chǎn) 品。貝科曼全自動生化分析儀、美國庫爾特GT型血球計數(shù)儀、美國AMES200型尿分析儀。1. 3. 1功效性觀察按有關(guān)標準觀察臨床癥狀改善率，主要臨床癥狀包括口渴多飲、多食易饑、倦怠乏 力和多尿等。測定試驗前后空腹血糖、餐后2h血糖(受試者食用IOOg精粉饅頭，2h后采血
表2試驗前后安全性指標檢測結(jié)果
測定)及試食前后尿糖。1. 3. 2安全性觀察①一般癥狀體征的觀察包括精神、睡眠、飲食、血壓等；②血生化指標包括總膽固 醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白尿素氮、肌酐等測定；③血常規(guī)檢查 包括白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白的檢查；④胸透、心電圖、腹部B超。1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS 10. Ofor Windows，分別采用x2檢驗和重復測量方差分析，α = 0. 05。2 結(jié)果2. 1本發(fā)明組合物對糖尿病主要臨床癥狀的影響試食組糖尿病主要臨床癥狀口渴多飲5. 3% (2/38)、多食易饑18.4% (7/38)、 倦怠乏力 7. 9% (3/38)和多尿 5. 3% (2/38)；對照組分別為 76. 3 (29/38)，50% (19/38)， 92. 1% (35/38)和39. 5% (15/38)。試食含有姜黃素的組合物組均優(yōu)于對照組(P < 0. 05)。2. 2本發(fā)明組合物對血糖、尿糖的影響見表1。由表1可見，2組試驗前空腹血糖及餐后血糖差異無統(tǒng)計學意義(P > 0. 05)，試驗后試食組空腹血糖、餐后血糖及尿糖下降幅度分別為21.2%，17.0%和 64. 3%，均高于對照組的 6. 3%，6. 3%和 7. (P < 0. 01)。表1試驗前后空腹餐后血糖及尿糖測定結(jié)果(mmol/L) 表2顯示2組血生化指標、血常規(guī)試驗前后均在正常范圍內(nèi)，經(jīng)重復測量數(shù)據(jù)的方 差分析，差異無統(tǒng)計學意義(P >0.05)。胸透、心電圖、腹部B超試驗前后均正常。3、結(jié)果結(jié)果表明本實施方式組合物能降低空腹血糖、餐后血糖和尿糖，受試者試食后血 常規(guī)、肝腎功能無明顯改變。根據(jù)國家食品與藥品監(jiān)督管理局《保健食品檢驗和技術(shù)評價規(guī) 范》，本實施方式組合物具有輔助調(diào)節(jié)血糖作用。
具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜 黃素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、0. 05mg吡啶甲酸鉻、40mg蜂膠、6mg靈芝多糖、 419. 6mg微晶纖維素、150mg微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維 素組成。
具體實施方式
十四本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是所述含有姜 黃素的組合物為片劑，每片由150mg姜黃素、0. Img吡啶甲酸鉻、40mg蜂膠、6mg靈芝多糖、 419. 6mg微晶纖維素、150mg微粉硅膠、30mg羧甲淀粉鈉、5mg硬脂酸鎂和45mg羥丙甲纖維 素組成。本實施方式中將具體實施方式
十三的含有姜黃素的組合物、本實施方式的含有姜 黃素的組合物用于輔助降血糖功能試驗，試驗過程如下1材料與方法1. 1試驗材料具體實施方式
十三的含有姜黃素的組合物、本實施方式的含有姜黃素的組合物， 體重為(350士30)g的雄性SD大鼠，雄性SD大鼠由中國科學院上海試驗動物中心提供(動 物質(zhì)量合格證中科動管第003號)，四氧嘧啶(美國Sigma公司產(chǎn)品，規(guī)格10gP瓶，分析 純)，葡萄糖試劑盒(由衛(wèi)生部上海生物制品研究所提供)，果糖胺試劑盒(由上海復旦張 江生物醫(yī)藥有限公司提供，其他試劑均為國產(chǎn)分析純。1. 2糖尿病動物模型的建立和試驗動物分組雄性SD大鼠禁食不禁水24h，測空腹血糖值后，按照每千克體重40mg的劑量尾靜 脈注射四氧嘧啶，7d后動物禁食不禁水12h，測定血糖值，選擇血糖值在20mmolPL左右的為
9糖尿病大鼠。將糖尿病大鼠隨機分為4組(各組動物平均血糖值相差不應大于11 ImmolPL)， 每組12只，分別為模型組具體實施方式
十三含有姜黃素的組合物組(WSPl)，本實施方式 組合物組(WSP2)。陽性對照組(拜糖蘋)，另取12只雄性SD大鼠組成正常對照組。1. 3糖尿病動物的給藥方法將3. 3g具體實施方式
十三組合物(用WSPl表示)溶于IOOOml質(zhì)量濃度為1 %羧 甲基纖維素鈉中，制成受試藥液，然后按每IOOg體重ImL灌胃。將6. 6g本實施方式組合物(用WSP2表示)溶于IOOOml質(zhì)量濃度為羧甲基纖 維素鈉中，制成受試藥液，然后按每IOOg體重ImL灌胃。陽性對照組拜糖蘋用生理鹽水配成溶液(濃度為IgPL)，按每IOOg體重ImL灌
田
冃°正常組、模型組每天用質(zhì)量分數(shù)為0. 9%的生理鹽水按每IOOg體重ImL灌胃。所有動物每天加一次飼料，自由飲水。每天早上9 00和下午3 00前2次灌胃給藥，持續(xù)8周。1.4測定方法每周動物禁食不禁水12h后，尾靜脈取血一次，經(jīng)過37 °C水浴加熱lh，以 3000rPmin離心lOmin，分離血清，測各組血糖值。給藥7周后所有SD大鼠眼球取血，經(jīng)過 37°C水浴加熱lh，以3000rPmin離心lOmin，分離血清，測定血糖和果糖胺。1. 5數(shù)據(jù)統(tǒng)計用NDST818W軟件統(tǒng)計，計量資料用t檢驗評價試驗結(jié)果。2結(jié)果與分析2. 1本發(fā)明組合物對糖尿病大鼠血糖影響本發(fā)明組合物對糖尿病大鼠血糖影響結(jié)果見表3。表3糖尿病及正常對照組SD大鼠血糖濃度8周的變化■餘》 單位mol/L 從統(tǒng)計結(jié)果可以看出，第1周糖尿病模型組與組合物組(WSP1及WSP2)的血糖統(tǒng) 計結(jié)果差異不顯著，與正常對照組相比差異極顯著，說明糖尿病模型的復制是成功的。糖 尿病模型組的血糖水平在試驗期間處于穩(wěn)步上升狀態(tài)，而給予組合物治療的糖尿病大鼠血 糖上升的趨勢平緩，經(jīng)過7周的治療，在一定程度上有效地控制了糖尿病大鼠血糖的上升， 說明組合物可以延緩糖尿病血糖值的升高，對于治療糖尿病起到重要的作用。給藥1周
10后，WSPl, WSP2，陽性組與模型組相比差異不顯著，但是與模型組相比分別下降了 13.2%， 11.0%和15.9% ；給藥2周后，各組與模型組相比分別下降了 22.3%,17.8%,^P 16.5%, 其中WSPl與模型組相比差異顯著(P < 0. 05)，其他組與模型組相比差異不顯著；給藥3周 后，各組與模型組相比分別下降了 22. 2%, 28. 0%和14. 2%，其中WSP1，WSP2及陽性對照組 與模型組相比差異極顯著(P <0.01)；給藥4周后，各組與模型組相比分別下降了 17.9%， 12. 8%和14.5%，其中15 1，陽性組與模型組相比差異顯著(P < 0. 05)；給藥5周后，各組 與模型組相比分別下降了 27. 3%，13. 4%和2419%，其中WSPl，陽性組與模型組相比差異 極顯著(P <0.01)，給藥6周后，各組與模型組相比分別下降了 33. 8%,27. 和18.2%, 其中WSP1，WSP2及陽性對照組與模型組相比差異極顯著(P < 0. 01)，給藥7周后，各組與 模型組相比分別下降了 30. 4%,26. 4%和23. 5%，其中WSP1，WSP2，及陽性對照組與模型組 相比差異極顯著(P <0.01)。由此可以看出，隨著時間的延長，不論WSPl組還是WSP2組均 能較好地控制血糖，并且控制血糖的效果與給藥時間成正相關(guān)。2. 2組合物對糖尿病大鼠果糖胺(FRU)的影響結(jié)果見表4。表 4 從FRU的統(tǒng)計結(jié)果可以看出，WSP1，WSP2，陽性對照組與模型組相比分別下降 T 21.5%，19. 4%和17.0%，其中WSP1，WSP2，陽性對照組與模型組相比差異極顯著(P < 0. 01)，這一結(jié)果與空腹血糖值測定結(jié)果一致。結(jié)論從本試驗的結(jié)果可以看出，不同比例的組合物組(WSP1及WSP2)大鼠的果糖胺水 平均比模型組低，而且組合物的降血糖效果與拜糖蘋差異不顯著。從每周的空腹血糖水平 可以看出，在試驗期間，組合物組的血糖上升程度比模型組趨勢要緩和，而且隨著時間的延 長，效果越來越明顯。本實施方式中將本實施方式的含有姜黃素的組合物用于急性毒性試驗，試驗過程 如下(1)試驗材料a、樣品(受試物)本實施方式組合物b、試驗動物Wistar品系大鼠(許可證號SCXK_(吉)2003_0001)均購自吉林大 學醫(yī)學院基礎醫(yī)學部試驗動物中心，體重60-80g，雌雄各半。(2)樣品的制備將330mg本實施方式組合物(用WSP2表示)溶于Iml濃度為羧甲基纖維素鈉 中制成受試物。(3)試驗設計根據(jù)保健食品安全性毒理學評價程序和檢驗方法規(guī)范，采用最大 耐受量法，即24小時內(nèi)用最大使用濃度和最大灌胃容量，經(jīng)口給予受試物。
(4)試驗方法動物購買后在本試驗室條件下飼養(yǎng)(飼養(yǎng)條件為溫度22 25°C; 濕度45% 55%;光照自然光照)，觀察動物的一般狀況，3日后挑選健康狀況良好的大、 小鼠各20只，雌雄各半，投入試驗，大、小鼠體重分別為180 220g和18 22g，給予最大 灌胃容量和最大使用濃度，試驗前將大、小鼠稱重編號，禁食16小時后，經(jīng)口分兩次于1日 內(nèi)灌胃，灌胃容量為20ml/kg. bw，劑量相當于13. 32g/kg. bw，觀察期為14天。(5)觀察指標中毒表現(xiàn)及死亡時間(6)試驗結(jié)果在14天觀察期內(nèi)，兩性別大、小鼠狀態(tài)良好，未出現(xiàn)任何中毒癥狀， 無動物死亡，根據(jù)試驗劑量設計，觀察的結(jié)果及大、小鼠急性毒性判定標準，可以認為該受 試物的大、小鼠經(jīng)口急性毒性均大于13. 32g/kg. bw，屬無毒物質(zhì)。2、采用本實施方式含有姜黃素的組合物喂養(yǎng)30天試驗(1)試驗材料a、樣品(受試物)姜黃素由河北食品添加劑有限公司提供，為橙黃色粉末，具有 姜黃特別的香辛味，感官未見異常，生產(chǎn)批號為080111 ；吡啶甲酸鉻由沈陽還中天精細化 工廠提供，為深紅色細小結(jié)晶性粉末，感官未見異常，生產(chǎn)批號為20070605 ；胡椒堿由西 安華萃生物技術(shù)有限責任公司提供，為類白色粉末，有辛辣味，感官未見異常，生產(chǎn)批號為 SH080510。b、試驗動物Wistar品系大鼠(許可證號SCXK_(吉)2007-0003)均購自吉林大 學醫(yī)學院基礎醫(yī)學部試驗動物中心，體重60-80g，雌雄各半。在本試驗室條件下飼養(yǎng)，觀察 動物的一般狀況。(2)劑量設計按照《保健食品毒理學評價程序》規(guī)定。下設兩個劑量組及另設一 個空白對照組，采用經(jīng)口灌胃方法給予受試物，按10ml/kg. bw容量進行灌胃，連續(xù)30天。各 劑量組灌胃體積一致，每天灌胃的時間點相似。(3)觀察指標A. 一般情況觀察每天觀察并記錄動物的一般表現(xiàn)、行為、中毒表現(xiàn)和死亡情況。 每周稱一次體重和2次食物攝入量，計算每周及總的食物利用率。B.血液學指標于試驗結(jié)束時測定血紅蛋白、紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)及分類。C.血液生化學指標谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、血清白蛋白、 總蛋白、總膽固醇和甘油三酯。D.病理檢查大體解剖、臟器稱重(肝、腎、脾、睪丸的絕對重量和相對重量)、組織 病理學檢查(肝、腎、脾、胃腸、睪丸及卵巢)。(4)數(shù)據(jù)處理將所觀察到的結(jié)果，計量資料采用方差分析或t檢驗，計數(shù)資料采 用X2檢驗、泊松分布。(5)試驗結(jié)果30天喂養(yǎng)的整個試驗過程中，各組動物一般狀況良好，行為正常， 未見任何中毒表現(xiàn)，亦動物死亡，試驗結(jié)果表明，姜黃素復方受試物對大鼠體重增長，大鼠 各周及總食物利用率，血紅蛋白含量，紅細胞及白細胞分類計數(shù)以及各項生化指標，各臟器 絕對重量，臟/體比值等均無明顯影響，病理組織學檢查亦未見異常。
權(quán)利要求
一種含有姜黃素的組合物，其特征在于含有姜黃素的組合物含有三價鉻和姜黃素，三價鉻為0.001～0.1重量份，姜黃素為100～400重量份；其中所述三價鉻由鉻酵母、吡啶甲酸鉻、煙酸鉻及三氯化鉻中的一種或其中幾種組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有姜黃素的組合物，其特征在于含有姜黃素的組合物還含 有蜂膠和/或靈芝多糖，其中蜂膠為100 400重量份，靈芝多糖為10 100重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含有姜黃素的組合物，其特征在于所述含有姜黃素的組合物 按照重量份數(shù)含有0. 03 0. 08份吡啶甲酸鉻、110 300份蜂膠、40 70份靈芝多糖和 200 390份姜黃素。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含有姜黃素的組合物，其特征在于所述含有姜黃素的組合物 按照重量份數(shù)含有0. 06份吡啶甲酸鉻、200份蜂膠、50份靈芝多糖和150份姜黃素。
5.權(quán)利要求1所述姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應用，其特征在于姜黃素用于制 備調(diào)節(jié)血糖組合物。
全文摘要
含有姜黃素的組合物及姜黃素作為制備調(diào)節(jié)血糖組合物的應用，它涉及一種組合物及其用途。本發(fā)明解決了現(xiàn)有藥物治療糖尿病服用周期長、易引起毒副作用的問題。本發(fā)明含有姜黃素的組合物含有三價鉻和姜黃素。本發(fā)明的組合物用于調(diào)節(jié)血糖。本發(fā)明含有姜黃素的組合物用于治療糖尿病給藥1周后即有降糖效果，經(jīng)過7周的治療，便有效地控制了血糖的上升，治療周期短，采用本發(fā)明含有姜黃素的組合物用于治療糖尿病無毒副作用。
文檔編號A61K36/064GK101879190SQ20101022119
公開日2010年11月10日 申請日期2010年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月8日
發(fā)明者孫長顥, 孟祥云, 張玉嶺, 李穎, 牛玉存, 那立欣, 金鉉煜 申請人:孫長顥;哈藥集團制藥六廠