專(zhuān)利名稱(chēng)：當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥制劑領(lǐng)域，具體涉及一種補(bǔ)血膠囊及其制備方法。
背景技術(shù)：
中醫(yī)傳統(tǒng)補(bǔ)氣生血良方“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”，主治肌熱面赤，煩渴欲飲，脈洪大而虛，重 按無(wú)力等血虛陽(yáng)浮發(fā)熱證；亦治婦人經(jīng)期、產(chǎn)后血虛發(fā)熱頭痛；或瘡瘍潰后，久不愈合者。 據(jù)山東中醫(yī)學(xué)院聶克考證，該方首見(jiàn)于《內(nèi)外傷辯惑論·暑傷胃氣論》(公元1247年)，為 金元四大家之一李東垣所創(chuàng)，方用黃芪一兩，當(dāng)歸酒洗二錢(qián)，以水二盞，煎至一盞，去滓，空 腹食前溫服。該方簡(jiǎn)單，療效確切，歷來(lái)被醫(yī)家所推崇?，F(xiàn)代中醫(yī)在繼承傳統(tǒng)的基礎(chǔ)上，用 于治療各種貧血、白細(xì)胞減少癥等，取得了很好的療效，擴(kuò)大了治療范圍。當(dāng)今市場(chǎng)上出現(xiàn)了多種號(hào)稱(chēng)以“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”為基礎(chǔ)的當(dāng)歸補(bǔ)血產(chǎn)品，包括當(dāng)歸補(bǔ) 血丸、精、膏、液、沖劑等等。仔細(xì)研究這些產(chǎn)品及其工藝會(huì)發(fā)現(xiàn)，所有現(xiàn)售產(chǎn)品或?yàn)楫?dāng)歸黃 芪分煎后的調(diào)配品，或?yàn)楫?dāng)歸黃芪合煎后的酒沉提取物，或先將部分黃芪粉碎，再與當(dāng)歸和 剩余黃芪合煎后的濃縮液混合制成的固體顆粒等。顯然，上述產(chǎn)品已不是李東垣“當(dāng)歸補(bǔ)血 湯”的傳承，其療效當(dāng)然不能與古方相提并論。歷經(jīng)千年積累沉淀的中醫(yī)中藥，有著深厚的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。中藥復(fù)方的特 色在于講究陰陽(yáng)氣血的平衡及金木水火土的和諧。傳統(tǒng)中藥方劑用藥強(qiáng)調(diào)“共煎”，因其“炮 制-共煎”的過(guò)程融合了中藥的七情四性、君臣佐使的協(xié)同配伍，從而發(fā)揮中藥方劑的特殊 作用。而所有這些，僅靠現(xiàn)代技術(shù)手段測(cè)試幾個(gè)所謂專(zhuān)一理化指標(biāo)是不能說(shuō)明問(wèn)題的。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院的趙奎君與香港科技大學(xué)生物系及中藥研發(fā)中 心的李卓明教授等，利用化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)手段對(duì)“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”進(jìn)行了深入的研究，通過(guò) 比較共煎、分煎的當(dāng)歸補(bǔ)血湯的化學(xué)成分及生物學(xué)活性，發(fā)現(xiàn)無(wú)論是來(lái)源于黃芪的黃芪甲 苷、毛蕊異黃酮、芒柄花素，還是來(lái)源于當(dāng)歸的阿魏酸、藁本內(nèi)酯；或者總黃酮、總皂苷、總多 糖等有效組分，共煎的當(dāng)歸補(bǔ)血湯的含量均高于單煎的黃芪、當(dāng)歸及“黃芪+當(dāng)歸”分煎后 重組的混合物。此外，共煎當(dāng)歸補(bǔ)血湯不僅能促進(jìn)有效成分的溶出，而且可以增強(qiáng)免疫活 性、補(bǔ)血作用、類(lèi)雌激素活性、成骨細(xì)胞分化活性。在共煎過(guò)程中，黃芪和當(dāng)歸的化學(xué)成分之 間可能因?yàn)椤爸堋?、“增溶”、“吸附”、“沉淀”等過(guò)程促進(jìn)了復(fù)方成分間的相互作用、相互反 應(yīng)，從而改變活性成分的溶出率，而活性成分含量的變化可能產(chǎn)生特殊的活性，進(jìn)而直接引 起療效的改變。(《從當(dāng)歸補(bǔ)血湯的研究探討和分析中藥復(fù)方共煎的合理性》世界科學(xué)技 術(shù)·中醫(yī)藥現(xiàn)代化2009年2期)。可見(jiàn)，傳統(tǒng)中藥復(fù)方共煎有著深刻的含意，共煎過(guò)程是一個(gè)極其復(fù)雜的物理化學(xué) 反應(yīng)過(guò)程，只有共煎方能體現(xiàn)復(fù)方的療效，“單煎”再重組的復(fù)方，其活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到“共煎” 的效果。在共煎的作用機(jī)制尚未清楚的前提下盲目將復(fù)方拆分煎煮，或進(jìn)行所謂的有效成 分提取，很可能失去方中各種成分間物理或化學(xué)反應(yīng)的條件，從而改變復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)及 其含量，繼而改變中藥復(fù)方的治療效果，故應(yīng)慎而為之。因此，按中醫(yī)理論進(jìn)行分析，現(xiàn)有當(dāng) 歸補(bǔ)血產(chǎn)品及其制備方法是有明顯缺陷的。
無(wú)論是臨床驗(yàn)證還是用現(xiàn)代技術(shù)手段觀察分析，“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”確實(shí)是補(bǔ)氣生血 的代表良方。然而，湯劑不易保存和攜帶，服用也不方便，已不適應(yīng)現(xiàn)代生活節(jié)奏和用藥習(xí) 慣，迫切需要改進(jìn)。對(duì)“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”而言，目前的技術(shù)不能完全體現(xiàn)古方精髓的原因之一， 是當(dāng)歸補(bǔ)血湯的藥液濃縮去滓后再干燥成固體非常不易，這一方面是藥液中所含的大量糖 類(lèi)、酯類(lèi)和甙類(lèi)物質(zhì)很難用傳統(tǒng)的加熱方法干燥成固體，另一方面，由當(dāng)歸和黃芪共煎液制 得的全浸膏粉末，流動(dòng)性差，吸濕性強(qiáng)，吸濕后易粘結(jié)成塊，給進(jìn)一步生產(chǎn)和儲(chǔ)存都帶來(lái)了 困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種既完全按照中醫(yī)中藥理論進(jìn) 行調(diào)配，又符合現(xiàn)代人們要求簡(jiǎn)單、方便，易保管、易攜帶的當(dāng)歸補(bǔ)血產(chǎn)品，即一種藥物成分 保留好、制備工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)操作方便、浸膏顆粒流動(dòng)性好、吸濕性小且不易結(jié)塊，制劑質(zhì)量 穩(wěn)定，便于倉(cāng)儲(chǔ)、運(yùn)輸、攜帶和服用的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊及其制備方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，它包括 1000重量份的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒和5 20重量份的明膠顆粒，所述當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒為 10重量份的當(dāng)歸和50重量份的黃芪，經(jīng)水煮、真空干燥、粉碎得到的顆粒提取物。此外，本發(fā)明還提供一種當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其實(shí)施步驟如下(1)選取當(dāng)歸10份、黃芪50份分別進(jìn)行切片，將切片的當(dāng)歸進(jìn)行酒洗制成酒洗當(dāng) 歸；(2)將酒洗當(dāng)歸和黃芪混合，進(jìn)行水煮、冷卻、過(guò)濾獲得當(dāng)歸補(bǔ)血藥液；(3)將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液進(jìn)行真空低溫干燥制成當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏，再將當(dāng)歸補(bǔ)血干浸 膏進(jìn)行粉碎得到當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒；(4)將當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒添加藥用明膠粉并混合均勻，然后往當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒 與藥用明膠粉混合物中噴入藥用乙醇溶液使之潤(rùn)濕，最后將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ) 血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物進(jìn)行加熱烘干、冷卻、整粒后灌裝成膠囊。作為本發(fā)明方法的進(jìn)一步改進(jìn)所述步驟(4)中添加的藥用明膠粉用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的0. 5% 2%， 藥用明膠粉的粒度不小于80目，且將當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合的溫度為18 26 0C ；所述步驟(4)中添加的藥用明膠粉用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的1%，將當(dāng)歸 補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合的溫度為18 20°C，所述步驟⑷中添加藥用明膠粉、混 合均勻以及噴入藥用乙醇溶液是在高效濕法制粒機(jī)中進(jìn)行的，且高效濕法制粒機(jī)的混合速 度為200 400轉(zhuǎn)/分，切割速度為1500 3000轉(zhuǎn)/分，混合時(shí)間為5 10分鐘，放置時(shí) 間為30 45分鐘；所述步驟(4)中噴入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混 合物的總重量的5% 8%，藥用乙醇溶液中乙醇的體積百分比為50% 80% ；所述步驟(4)中噴入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混 合物的總重量的6%，藥用乙醇溶液中乙醇的體積百分比為70% ；所述水煮是指使用重量為步驟(1)選取的黃芪與當(dāng)歸總重量的10倍的水，將酒洗當(dāng)歸和黃芪的混合物文火保持沸騰3 4小時(shí)，待藥液體積約為原藥液體積一半時(shí)停止加 熱，所述過(guò)濾采用的過(guò)濾材料為雙層本色綢布；所述真空低溫干燥是指將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液放在不超過(guò)60°C的真空環(huán)境中直至當(dāng)歸 補(bǔ)血藥液干燥；所述粉碎是指將當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏采用冷凍粉碎機(jī)粉碎，粉碎獲得的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏 顆粒的大小為30 40目；所述酒洗是指在10重量份當(dāng)歸中添加1重量份黃酒拌勻、悶透，然后用文火炒干 至微焦、冷卻后獲得酒洗當(dāng)歸；所述步驟(4)中將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合 物進(jìn)行加熱烘干是在孛薺式糖衣機(jī)里進(jìn)行，孛薺式糖衣機(jī)轉(zhuǎn)速為10 25轉(zhuǎn)/分，孛薺式糖 衣機(jī)內(nèi)部溫度為35 55°C，且孛薺式糖衣機(jī)開(kāi)啟引風(fēng)機(jī)將濕熱氣體排出；所述步驟(4)中的整粒是將烘干后的藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與 藥用明膠粉混合物顆粒通過(guò)40目篩。本發(fā)明具有下述優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明摒棄了所謂“分煎合藥”、“提取有效成分”等現(xiàn)代手段粗暴對(duì)待中藥方劑 的有其名而無(wú)其質(zhì)的所謂中藥改革，制備的膠囊中阿魏酸、黃芪甲甙等藥物成分保留較好， 制備工藝簡(jiǎn)單、制劑穩(wěn)定性好，完整地保留了古方“當(dāng)歸補(bǔ)血湯”的神韻和療效，相比傳統(tǒng)的 “當(dāng)歸補(bǔ)血湯”，劑型更為合理，服用、攜帶和保管更為方便，明顯提高了應(yīng)用價(jià)值，使其具有 更好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益；本發(fā)明添加的藥用明膠粉由18種氨基酸組成，是一種蛋白質(zhì) 結(jié)構(gòu)的高分子材料，有良好的生物相容性和可降解性，具有極好的成膜性，當(dāng)明膠膠凝時(shí)， 水被擠出蛋白質(zhì)矩陣，收縮為橡膠態(tài)的膜，干燥后即變?yōu)椴ＡB(tài)的明膠膜，是藥物膠囊和片 劑覆膜的主要成分，本發(fā)明中，明膠可以在當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒上形成防潮薄膜，從而改善當(dāng) 歸補(bǔ)血浸膏顆粒的流動(dòng)性和吸濕性，生產(chǎn)過(guò)程中，顆粒儲(chǔ)存、灌裝比較方便，制得的當(dāng)歸補(bǔ) 血膠囊的質(zhì)量更加穩(wěn)定；由于水煮的方法與古方一致，有利于最大限度地獲取藥物的有效 成分；真空低溫干燥可以有效克服當(dāng)歸補(bǔ)血藥液難以干燥的問(wèn)題，可以簡(jiǎn)單快速地實(shí)現(xiàn)當(dāng) 歸補(bǔ)血藥液的干燥并完整保留藥液的藥物成分；粉碎采用冷凍粉碎機(jī)粉碎，可以有效避免 干浸膏粉碎過(guò)程中溫度升高產(chǎn)生黏結(jié)甚至結(jié)焦，破壞有效成分，粉碎得到的顆粒更加均勻， 有利于增加制劑顆粒的流動(dòng)性。
具體實(shí)施例方式本實(shí)施例的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法包括如下步驟(1)選取當(dāng)歸10重量份、黃芪50重量份分別進(jìn)行切片，將切片的當(dāng)歸進(jìn)行酒洗制 成酒洗當(dāng)歸；(2)將酒洗當(dāng)歸和黃芪混合，進(jìn)行水煮、冷卻、過(guò)濾獲得當(dāng)歸補(bǔ)血藥液；(3)將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液進(jìn)行真空低溫干燥制成當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏，再將當(dāng)歸補(bǔ)血干浸 膏進(jìn)行粉碎得到當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒；(4)在當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒中添加藥用明膠粉并混合均勻，然后往當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆 粒與藥用明膠粉混合物中噴入藥用乙醇溶液使之潤(rùn)濕，最后將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸 補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物進(jìn)行加熱烘干、冷卻、整粒后灌裝成膠囊。
步驟(1)中，酒洗是指在10重量份當(dāng)歸中添加1重量份黃酒，拌勻、悶透，然后用 文火炒干至微焦、冷卻后獲得酒洗當(dāng)歸。本實(shí)施例中，當(dāng)歸取符合《中國(guó)藥典》(2005年版) 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的當(dāng)歸60克，切成1 2mm的薄片，加黃酒6克，拌勻，密閉放置2小時(shí)后，置鍋內(nèi)， 用文火炒干，切片略有焦斑后，取出，放涼，制成酒洗當(dāng)歸。本實(shí)施例中黃芪取符合《中國(guó)藥 典》(2005年版)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的黃芪300克，切成2 4mm的薄片。步驟(2)中，水煮是指使用重量為步驟(1)選取的黃芪與當(dāng)歸總重量的10倍的 水，將酒洗當(dāng)歸和黃芪的混合物文火保持沸騰3 4小時(shí)，待藥液體積約為原藥液體積一半 時(shí)停止加熱；過(guò)濾采用的過(guò)濾材料為雙層本色綢布。本實(shí)施例中，水煮時(shí)加飲用水3600ml， 加熱煮沸，文火保持沸騰狀態(tài)，待藥液體積為1800ml時(shí)，停止加熱，自然冷卻至室溫，用雙 層本色綢布過(guò)濾，棄藥渣得到當(dāng)歸補(bǔ)血藥液。步驟(3)中，真空低溫干燥是指將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液放在不超過(guò)60°C的真空環(huán)境中直 至當(dāng)歸補(bǔ)血藥液干燥；粉碎是指將當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏采用冷凍粉碎機(jī)粉碎，粉碎獲得的當(dāng)歸 補(bǔ)血浸膏顆粒的大小為30 40目。本實(shí)施例中，將當(dāng)歸黃芪藥液倒在不銹鋼盤(pán)上，放入真 空干燥箱內(nèi)，減壓，并逐步加熱，控制真空干燥箱內(nèi)溫度不能超過(guò)60°C，直至藥液干燥，冷卻 至室溫，取出，用冷凍粉碎機(jī)粉碎成40目。步驟(4)中，添加藥用明膠粉的用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的0.5% 2%，藥 用明膠粉的粒度不小于80目，且將當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合的溫度為18 26°C，優(yōu)選為18 20°C。優(yōu)選的，添加藥用明膠粉的用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的1%， 當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合的溫度為19°C。噴入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血 浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物的總重量的5% 8%，藥用乙醇溶液中乙醇的體積百分比 為50% 80%。優(yōu)選的，噴入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合 物的總重量的6%，藥用乙醇溶液中乙醇的體積百分比為70%，且噴入藥用乙醇溶液是在 高效濕法制粒機(jī)中進(jìn)行的，且高效濕法制粒機(jī)的混合速度為200 400轉(zhuǎn)/分，切割速度為 1500 3000轉(zhuǎn)/分，混合時(shí)間為5 10分鐘，放置時(shí)間為30 45分鐘。本實(shí)施例中，藥 用明膠粉的用量為1.2g，粒度大小為80目，當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與80目的藥用明膠粉在高 效濕法制粒機(jī)里進(jìn)行混合，且高效濕法制粒機(jī)的混合速度為200轉(zhuǎn)/分，切割速度為1500 轉(zhuǎn)/分，混合時(shí)料溫為19°C，混合時(shí)間為5分鐘，然后噴入70 %乙醇溶液(ν/ν) 7. 5g將物 料潤(rùn)濕，放置30分鐘后，取出。所述步驟(4)將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒 與藥用明膠粉混合物加熱烘干，優(yōu)選的，是在孛薺式糖衣機(jī)里進(jìn)行，且孛薺式糖衣機(jī)轉(zhuǎn)速為 10 25轉(zhuǎn)/分；孛薺式糖衣機(jī)內(nèi)部溫度為35 55°C，并開(kāi)啟引風(fēng)機(jī)將濕熱氣體排出。本 實(shí)施例中，將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物置孛薺式糖衣 機(jī)內(nèi)，且孛薺式糖衣機(jī)轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/分；加熱溫度是物料溫度為40°C，并開(kāi)啟引風(fēng)機(jī)將濕 熱氣體排出，將顆粒烘干，冷卻至室溫，取出，置40目篩進(jìn)行整粒，整粒是將烘干后的藥用 乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物顆粒通過(guò)40目篩，整粒后用全自 動(dòng)膠囊灌裝機(jī)將顆粒裝入1號(hào)硬膠囊殼內(nèi)(得300粒)，每粒膠囊含干浸膏顆粒0. 4g (干浸 膏收率33%)，相當(dāng)于生藥1.2g。實(shí)施例1.當(dāng)歸補(bǔ)血湯制備取符合《中國(guó)藥典》(2005年版)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的當(dāng)歸60克，切成1 2mm的薄片，加黃酒6克，拌勻，密閉放置2小時(shí)后，置鍋內(nèi)，用文火炒干，切片略有焦斑后，取出，放涼，制成酒洗當(dāng)歸。另取符合《中國(guó)藥典》(2005年版)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的黃芪300克，切成 2 4mm的薄片，與酒洗當(dāng)歸片混勻后，加飲用水3600ml，加熱煮沸，文火保持沸騰狀態(tài)，待 藥液體積為1800ml時(shí)，停止加熱，自然冷卻至室溫，用雙層本色綢布過(guò)濾，棄藥渣得“當(dāng)歸 補(bǔ)血湯”。實(shí)施例2.當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊制備按上述當(dāng)歸補(bǔ)血湯制備方法制得當(dāng)歸補(bǔ)血藥液，將藥液倒在 不銹鋼盤(pán)上，放入真空干燥箱內(nèi)，減壓，并逐步加熱，控制真空干燥箱內(nèi)溫度不能超過(guò)60°C， 直至藥液干燥，冷卻至室溫，取出，用冷凍粉碎機(jī)粉碎成40目，與80目的藥用明膠粉1.2g 在高效濕法制粒機(jī)中進(jìn)行混合，高效濕法制粒機(jī)混合速度為200轉(zhuǎn)/分，切割速度為1500 轉(zhuǎn)/分，混合5分鐘，混合溫度為19°C ；噴入70%藥用乙醇溶液7. 5g，混合5分鐘，高效濕 法制粒機(jī)混合速度為200轉(zhuǎn)/分，切割速度為1500轉(zhuǎn)/分，混合結(jié)束放置30分鐘，置孛薺 式糖衣機(jī)里控制孛薺式糖衣機(jī)轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/分，加熱至40°C，并開(kāi)啟引風(fēng)機(jī)將濕熱氣體排 出，將顆粒烘干，冷卻至室溫，取出，用40目篩進(jìn)行整粒，再用全自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)灌裝入1號(hào) 硬膠囊殼內(nèi)，得當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊300粒。效果實(shí)驗(yàn)一、藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)1.對(duì)小鼠失血性貧血的影響取健康小白鼠60只(體重18 22g)，性別均衡隨機(jī)分為5組，按等容積(0. 2ml體 積/IOg體重)每天灌胃給藥1次給藥組分別給以當(dāng)歸補(bǔ)血湯0. 12g/10g和0. 03g/10g(生 藥量/體重)兩種劑量，當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊0. 12g/10g和0. 03g/10g(生藥量/體重)兩種劑量， 對(duì)照組灌服等體積0.5% GMC(羥甲基纖維素鈉)液，共七天。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于給藥前眶后取血 測(cè)定小白鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)(實(shí)驗(yàn)前對(duì)照值)；在給藥的第1 3天，每日 用特制的毛細(xì)管由小鼠眶后靜脈叢放血約0. 5ml，第四天復(fù)測(cè)動(dòng)物RBC、Hb (失血后值)；繼 續(xù)給藥至第八天，再測(cè)各組動(dòng)物RBC、Hb值(恢復(fù)后值)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，給藥組動(dòng)物失血后和恢復(fù)后的RBC、Hb值高于對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)有 顯著性或極顯著性差異，表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯和當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊在0. 12g/10g、0. 03g/10g(生藥 量/體重)兩種實(shí)驗(yàn)劑量下，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的失血性貧血有保護(hù)和促進(jìn)恢復(fù)的作用，并且作用 相當(dāng)，詳細(xì)數(shù)據(jù)如下表所示(I±SD η =I0):
藥物劑量 (/IOg)實(shí)驗(yàn)前失血后恢復(fù)后RBC (1012/L)Hb (10g/L)RBC (1012/L)Hb (10g/L)RBC (1012/L)Hb (10g/L)0.5% GMC0.2ml7.98±0.9619.86±1.474.11+0.7310.96±1.387.05±0.6416.58 士 1.29當(dāng)歸補(bǔ)血湯0.12g8.28±0.9218.03±1.475.28±0.76**13.63±1.10**8.59±0.85**18.33±1.29*當(dāng)歸補(bǔ)血湯0.03g8.47±1.0320.90±1.015.24±0.93**12.36±2.998.52+0.82**17.78±1.01*當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊0_12g7.86+1.1719.12±1.985.35±0.97**13.96±2.11**8.78±0.61**18.08±1.47*當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊0.03g8.77+0.4919.30±2.116.50±0.79**##&&12.47±1.38*8.71±0.81**17.78±1.47*
t 檢驗(yàn)與 0.5% GMC 組比較*p < 0. 05 **p < 0. 01與0. 12g當(dāng)歸補(bǔ)血湯組比較#p < 0. 05 ##p < 0. 01與0. 03g當(dāng)歸補(bǔ)血湯組比較<0.05 ·ρ < 0. 01實(shí)驗(yàn)2.對(duì)乙酰苯胼處理小鼠紅細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥，在給藥的第六日和第七日，各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮下 注射乙酰苯胼(14ml/kg)每日一次，第八日眶后采血測(cè)定RBC值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，給藥組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有顯著差異，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分 別給予0. 12g/10g、0. 03g/10g(生藥量/體重)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯和當(dāng)歸補(bǔ)血膠 囊對(duì)由乙酰苯胼(14ml/kg sc. X 2)所致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞膜損傷有相似的保護(hù)作用，詳細(xì)數(shù) 據(jù)如下表所示(IT士SD η =8) t 檢驗(yàn)與 0.5% GMC+乙酰苯胼組比較 +p < 0. 05 ++p < 0. 01實(shí)驗(yàn)3.對(duì)環(huán)磷酰胺處理小鼠的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥，各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于給藥后第五日開(kāi)始皮下注射 環(huán)磷酰胺(CTX 70mg/kg)，連續(xù)三日，于第八日眶后取血測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血 紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)CTX處理的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在當(dāng)歸補(bǔ)血湯或當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊0. 12g/10g、 0. 03g/10g(生藥量/體重)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)劑量作用下，末梢血象RBC、WBC、TP值高于0. 5 % GMC+CTX組，統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)給藥組與對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之間有顯著差異，表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯或當(dāng)歸補(bǔ) 血膠囊對(duì)經(jīng)CTX(70Mg/kg sc. X3)處理過(guò)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物其上述指標(biāo)有相同明顯的保護(hù)作用， 詳細(xì)數(shù)據(jù)如下表所示(I士 SD η =8) t 檢驗(yàn)與 0.5% GMC+CTX 組比較 +p < 0. 05 ++p < 0. 01實(shí)驗(yàn)4.對(duì)環(huán)磷酰胺處理小白鼠骨髓有核細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥，于給藥后第五日開(kāi)始注射環(huán)磷酰胺(CTX 70mg/kg)，連續(xù)三日，第八日用頸椎脫臼法處死動(dòng)物，取出股骨，用稀釋液沖出股骨骨髓有 核細(xì)胞，顯微鏡下計(jì)數(shù)，觀察藥物的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在當(dāng)歸補(bǔ)血湯或當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊0. 12g/10g、0. 03g/10g(生 藥量/體重)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)劑量作用下，骨髓有核細(xì)胞數(shù)顯著高于0. 5% GMC+CTX組，表明藥物 對(duì)CTX(70Mg/kg sc. X3)所致小白鼠骨髓有核細(xì)胞的抑制有相同明顯的保護(hù)作用，詳細(xì)數(shù) 據(jù)如下表所示(1T±SD η =8) t 檢驗(yàn)與 0· 5% GMC+CTX 組比較 +p < 0. 05 ++p < 0. 01實(shí)驗(yàn)5.對(duì)小鼠X放射線損傷的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥。實(shí)驗(yàn)前小白鼠眶后取血測(cè)定WBC值(試驗(yàn)前 值)。給藥第四天，在BJ-4型加速器以4mv，250cGY劑量率照射實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(源軸距為80cm)， 次日復(fù)測(cè)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物WBC值(照射后值)，繼續(xù)給藥至第八日，再測(cè)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的WBC 值(恢復(fù)后值)及骨髓有核細(xì)胞數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)X射線照射后及恢復(fù)后，給藥組實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物的WBC值和骨髓有核細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組，表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯或當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的兩種 實(shí)驗(yàn)劑量對(duì)由X射線照射造成動(dòng)物的損傷有相同的明顯保護(hù)和促進(jìn)恢復(fù)作用，詳細(xì)數(shù)據(jù)如 下表所示(I±SD η =10) 實(shí)驗(yàn)6.免疫功能實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥。連續(xù)給藥七天，末次給藥后每鼠腹腔注射5% 雞紅細(xì)胞懸液0. 2ml (ν/ν)，十小時(shí)后頸椎脫白法處死小白鼠，剪開(kāi)腹腔皮膚，用生理鹽水 沖洗腹腔，取腹腔液點(diǎn)片，Giemas染色計(jì)算腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表明，給藥組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)明顯高于對(duì)照組，表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯或當(dāng) 歸補(bǔ)血膠囊的兩種實(shí)驗(yàn)劑量有相同的增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞免疫功能，詳細(xì)數(shù)據(jù)如下表所示 結(jié)語(yǔ)當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的藥效學(xué)研究證實(shí)，該藥在0. 12g/10g、0. 03g/10g(生藥量/ 體重)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)劑量下，對(duì)失血、乙酰苯胼造成“血虛癥”模型動(dòng)物，以及經(jīng)環(huán)磷酰胺和放射 損傷造成的白細(xì)胞和骨髓有核細(xì)胞減少的模型動(dòng)物均有明顯的保護(hù)和促進(jìn)恢復(fù)作用，并能 提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞免疫功能，相關(guān)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)與當(dāng)歸補(bǔ)血湯作用相當(dāng)。根據(jù)“中藥新藥研究指 南”和“中藥藥理研究方法學(xué)”有關(guān)內(nèi)容的規(guī)定，上述實(shí)驗(yàn)選用的動(dòng)物模型和觀察指標(biāo)可作 為治療血虛癥和補(bǔ)血升白新藥研究的藥效學(xué)指標(biāo)。二、毒理學(xué)研究實(shí)驗(yàn)7.急性毒性試驗(yàn)(藥物最大耐受量試驗(yàn))取小白鼠20只(體重20. 1 士 1.52g)雌雄各半，分籠飼養(yǎng)給水，禁食16小時(shí)后，以 當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊溶液最高濃度(1.2g生藥/ml)及小鼠最大灌胃體積(0. 4ml/10g體重)灌 服，于上午六時(shí)，十二時(shí)，下午六時(shí)各一次，即每次給藥量為0. 48g生藥/IOg體重，每日給藥 量為1.44g生藥/IOg體重，相當(dāng)于70kg成人每次用藥量(口服，每次5粒，一日2次)的 560倍，每日用藥量的840倍。每次給藥后觀察動(dòng)物反應(yīng)，末次給藥后恢復(fù)進(jìn)食。定時(shí)測(cè)定
11動(dòng)物體重，記錄進(jìn)食量，連續(xù)觀察七天。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物除給藥后活動(dòng)減少在數(shù)分鐘恢復(fù)，未見(jiàn)其它異常反應(yīng)，連續(xù)七 天中觀察中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)一死亡，活動(dòng)、進(jìn)食、糞便未見(jiàn)異常。體重平均增長(zhǎng)11. 69%，每鼠平 均每日攝食量1.36g，動(dòng)物尸體解剖，主要臟器肉眼檢查未見(jiàn)病理變化，當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊最大 耐受量實(shí)驗(yàn)小白鼠體重的變化如下表所示(X 土SD) 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊對(duì)小白鼠以最大灌胃給藥，每次最大耐受量為 48g生藥/kg體重以上，每日最大耐受量在144g生藥/kg以上。實(shí)驗(yàn)8.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組、高劑量給藥組、低劑量給藥組，每組雌雄動(dòng)物各半。 觀察一周后，高劑量組用當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊配成的2. 4g生藥/ml溶液，以2ml/100g體重劑量灌 胃給藥；低劑量組用當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊配成的0. 24g生藥/ml溶液，以2ml/100g體重劑量灌胃 給藥；對(duì)照組灌服等體積生理鹽水(2ml/100g體重)，每周六天，每天一次，連續(xù)給藥13周， 每周稱(chēng)體重一次并記錄每鼠每日平均進(jìn)食量，觀察動(dòng)物外觀、活動(dòng)、糞便等情況。末次給藥 后各組處死一半動(dòng)物(停藥后動(dòng)物)，另一半動(dòng)物，停藥恢復(fù)兩周后處死(恢復(fù)后動(dòng)物)，兩 批動(dòng)物均進(jìn)行血液學(xué)，血液生化學(xué)和病理組織學(xué)檢查。結(jié)果1.對(duì)大鼠一般狀態(tài)的影響給藥期間和停藥后各組大鼠毛色、行為、進(jìn)食量 及糞便均無(wú)異常，兩個(gè)給藥組體重與對(duì)照組比較均無(wú)顯著差異。結(jié)果2.藥物對(duì)大鼠血液學(xué)的影響停藥后動(dòng)物和恢復(fù)后動(dòng)物禁食12小時(shí)后，復(fù)稱(chēng) 體重?cái)囝^取血，取少量血樣作紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC，顯微鏡計(jì)數(shù))、血紅蛋白定量(Hh，氰化高鐵 法)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC，顯微鏡計(jì)數(shù))和分類(lèi)(DC，瑞氏染色，顯微鏡分類(lèi))。藥物灌服13周， 給藥組與對(duì)照組，停藥組與恢復(fù)組各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著差異，說(shuō)明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊灌服13周在 實(shí)驗(yàn)劑量下對(duì)血液學(xué)指標(biāo)RBC，Hh, WBC, DC，均無(wú)影響。結(jié)果3.藥物對(duì)大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響取上項(xiàng)剩余血樣，離心，分離血清測(cè) 定。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT乳酸脫氫酶動(dòng)力學(xué)法)，天門(mén)冬氨酶氨基轉(zhuǎn)移酶(AST蘋(píng)果酸脫 氫酶動(dòng)力學(xué)法)、肌肝(Crea苦味酸法)、血脲素氨(BUN血脲酶法)以觀察長(zhǎng)期給藥對(duì)大鼠 肝腎功能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明藥物灌服13周，給藥組與對(duì)照組，停藥組與恢復(fù)組各項(xiàng)指 標(biāo)均在正常范圍之內(nèi)，t檢驗(yàn)各組指標(biāo)組間均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊灌服13周 在實(shí)驗(yàn)劑量下對(duì)大鼠肝腎功能無(wú)影響。結(jié)果4.藥物對(duì)大鼠主要臟器的影響(1)藥物對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響
解剖各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腎上腺，胸腺有無(wú)病變，并稱(chēng)重各 臟器重量，計(jì)算臟器系數(shù)(臟器重量mg/100g體重)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要臟器(心、肝、脾、肺、腎、腎上腺，胸腺)肉眼檢查均未見(jiàn)病理改 變，給藥組與對(duì)照組相同器官臟器系數(shù)經(jīng)t檢驗(yàn)未見(jiàn)顯著差異，說(shuō)明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊在實(shí)驗(yàn) 劑量下灌服13周對(duì)動(dòng)物臟器系數(shù)無(wú)影響。(2)組織學(xué)檢查以10%福爾馬林固定各鼠心、肝、脾、肺、腎、腎上腺和胸腺標(biāo)本。取空白對(duì)照組和 高劑量組上述器官，石蠟包埋，切片，HE染色，光纖顯微鏡下進(jìn)行病理檢查病理檢查結(jié)果表明高劑量組和對(duì)照組組織切片均屬正常，未見(jiàn)基本結(jié)構(gòu)異常改變。綜上所述，大鼠在48g生藥/kg，即相當(dāng)于70kg成人每日用藥量(口服，每次5粒， 一日2次)的280倍；4. Sg生藥/kg即相當(dāng)于70kg成人每日用藥量的28倍劑量下，灌服13 周，對(duì)整體動(dòng)物外觀，生理行為以及血液學(xué)指標(biāo)(RBC，Hh, WBC, DC)，血液生化學(xué)指標(biāo)(AST， ALT, Crea, BUN)，內(nèi)臟臟器系數(shù)，病例組織學(xué)指標(biāo)均均未見(jiàn)藥源性改變。表明藥物在上述劑 量下使用是安全的。三、產(chǎn)品質(zhì)量對(duì)比檢查實(shí)驗(yàn)9.鑒別對(duì)比試驗(yàn)(1)阿魏酸鑒別對(duì)比試驗(yàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯及當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊中主要藥材之一的當(dāng)歸，為傘形科植物當(dāng)歸 Angelica sinensis (Oliv. )Diels 的干燥根。含蒿本內(nèi)脂(Ligustilide)、正丁烯酰內(nèi)酯 (n-butylidene phthalide)、阿魏酸、煙酸、蔗糖和多種氨基酸以及倍半萜類(lèi)化合物等?，F(xiàn) 已證實(shí)阿魏酸(Fumalic acid)具有抗血小板聚集、抑制血小板5_羥色胺釋放、抑制血小板 血栓素A2(TXA2)的生成、增強(qiáng)前列腺素活性、鎮(zhèn)痛、緩解血管痙攣等作用，是生產(chǎn)用于治療 心腦血管疾病及白細(xì)胞減少等癥藥品的基本原料?，F(xiàn)已作為藥材及成藥中是否含有當(dāng)歸及 其品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。本試驗(yàn)先按實(shí)施例1制得3批當(dāng)歸補(bǔ)血湯，實(shí)施例2制得3批當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，進(jìn)行 3次相同試驗(yàn)。取上述當(dāng)歸補(bǔ)血湯75ml (相當(dāng)于15g生藥)，置索氏提取器中，加入醋酸乙酯-甲 酸(9. 5 0.5) 100ml，回流提取4小時(shí)，揮去醋酸乙酯，加甲醇5ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為 當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試品溶液。另取上述當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容物)5g(相當(dāng)于15g生藥)，置索氏 提取器中，加入醋酸乙酯-甲酸(9.5 0.5) 100ml，回流提取4小時(shí)，揮去醋酸乙酯，加甲醇 5ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊供試品溶液。再取阿魏酸對(duì)照品2. 5mg，加甲醇制 成每Iml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄 VIB)試驗(yàn)，吸取當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試品溶液5 μ 1，當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊供試品溶液5 μ 1，對(duì)照品溶液 2μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以苯-三氯甲烷-冰醋酸(6 5 1)為展開(kāi)劑展開(kāi)， 取出晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑 點(diǎn)。表明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊與當(dāng)歸補(bǔ)血湯一樣，都含有阿魏酸。(2)黃芪甲甙鑒別對(duì)比試驗(yàn)
當(dāng)歸補(bǔ)血湯及當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊中的黃芪，是豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch. )Bge. var. mongho-licus(Bge.)Hsiao 或膜英黃蔑 Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。含有甙類(lèi)、多糖、氨基酸和微量元素，實(shí)驗(yàn)表明其中 一些成分有明顯的藥理作用，黃芪甲甙已作為藥材及成藥中是否含有黃芪及其品質(zhì)的重要 指標(biāo)之一。本試驗(yàn)取上述實(shí)施例1、2制得的3批當(dāng)歸補(bǔ)血湯和當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，進(jìn)行3次相同試驗(yàn)。取當(dāng)歸補(bǔ)血湯75ml (相當(dāng)于15g生藥)，加甲醇50ml混勻過(guò)夜，再加甲醇置索氏 提取器中提取4小時(shí)，提取液水浴濃縮至干，殘?jiān)语柡褪雏}水20ml使溶解，用水飽和的正 丁醇提取(10ml X 2，5ml X 2)，合并正丁醇提取液，加氧化鎂2g，攪拌，水浴蒸干。加少量甲 醇將粉末濕潤(rùn)后裝入濾紙筒，置索氏提取器中，加甲醇回流提取4小時(shí)，回收溶劑至干，殘 渣加甲醇5ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試品溶液。另取當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容 物)5g(相當(dāng)于15g生藥)，加甲醇30ml浸泡過(guò)夜，用上述方法制成當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊供試品溶 液。再取黃芪甲甙對(duì)照品5mg，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層 色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)。吸取吸取當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試品溶液及當(dāng) 歸補(bǔ)血膠囊供試品溶液各5 μ 1，對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲 烷-甲醇-水(65 35 10)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，噴以10%硫酸乙醇溶 液，105°C烘約5分鐘。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點(diǎn)； 置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)，表明當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊與當(dāng)歸補(bǔ)血湯 一樣，都含有黃芪甲苷。實(shí)驗(yàn)10.含量對(duì)比試驗(yàn)(1)阿魏酸含量對(duì)比試驗(yàn)取上述按實(shí)施例制得的3批當(dāng)歸補(bǔ)血湯和當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，采用高效液相色譜法進(jìn) 行測(cè)定。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.085%磷酸溶液(17 83)為流動(dòng) 相，檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm ；柱溫為35°C。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。取當(dāng)歸補(bǔ)血湯6ml (相當(dāng)于0. 2克當(dāng)歸生藥)，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加 70%甲醇20ml，密塞，稱(chēng)定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失 的重量，搖勻，靜置，取上清液用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試 品溶液。取當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容物)0.4克(相當(dāng)于0.2克當(dāng)歸生藥)，按上述方法制得當(dāng) 歸補(bǔ)血膠囊供試品溶液。精密稱(chēng)取阿魏酸對(duì)照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加70%甲醇使 溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取3ml，置50ml棕色量瓶中，加70 %甲醇至刻度，搖勻，得 阿魏酸對(duì)照品溶液(每Iml含阿魏酸12 μ g)。分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 10μ1，注入液相色譜，測(cè)定。試驗(yàn)證明，6ml當(dāng)歸補(bǔ)血湯與0. 4g當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容物)所含阿魏酸相當(dāng)，說(shuō)明 采用本發(fā)明方法制備得到的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊所含阿魏酸在制備過(guò)程中幾乎沒(méi)有損失。詳細(xì)情 況如下表所示 (2)黃芪甲甙含量對(duì)比試驗(yàn)取上述按實(shí)施例制得的3批當(dāng)歸補(bǔ)血湯和當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，采用高效液相色譜法進(jìn) 行測(cè)定。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(32 68)為流動(dòng)相，蒸發(fā)光散射 檢測(cè)器。理論板數(shù)按黃芪甲甙峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。取當(dāng)歸補(bǔ)血湯24ml (相當(dāng)于4克黃芪生藥)精密稱(chēng)定，置索氏提取器中，加甲醇適 量，加熱回流4小時(shí)，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘?jiān)铀?0ml。微熱使溶解，用水飽和的 正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨 液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，放冷，通過(guò)DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑1. 5cm, 長(zhǎng)12cm)，以水50ml洗脫，繼用70%乙醇80ml洗脫，棄去洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移 至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制得當(dāng)歸補(bǔ)血湯供試品溶液。取當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容 物)1. 6克(相當(dāng)于4克黃芪生藥)，按上述方法制得當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊供試品溶液。精密稱(chēng)取黃芪甲甙對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的黃芪甲甙對(duì)照品溶 液。分別精密吸取對(duì)照品溶液10μ 1、20μ 1，供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜，測(cè) 定，以外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算。試驗(yàn)證明，26ml當(dāng)歸補(bǔ)血湯與1. 6g當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊(內(nèi)容物)所含黃芪甲甙相當(dāng)， 說(shuō)明采用本發(fā)明方法制備得到的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊所含黃芪甲甙在制備過(guò)程中幾乎沒(méi)有損失。 詳細(xì)情況如下表所示 四、當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊穩(wěn)定性試驗(yàn)按常溫留樣觀察法，對(duì)三批樣品進(jìn)行12個(gè)月的性狀、鑒別、裝量差異、水分、溶散 時(shí)限、含量及衛(wèi)生學(xué)檢查，結(jié)果如下表所示 經(jīng)以上實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明所述當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊質(zhì)量穩(wěn)定，藥效確切，各項(xiàng)指標(biāo)均符合 《中國(guó)藥典》相關(guān)要求，其制備工藝簡(jiǎn)單易行，檢測(cè)手段先進(jìn)，具有開(kāi)發(fā)價(jià)值。
權(quán)利要求
一種當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊，其特征在于它包括1000重量份的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒和5～20重量份的明膠顆粒，所述當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒為10重量份的當(dāng)歸和50重量份的黃芪經(jīng)水煮、真空干燥、粉碎得到的顆粒提取物。
2.一種當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于其實(shí)施步驟如下(1)選取當(dāng)歸10重量份、黃芪50重量份分別進(jìn)行切片，將切片的當(dāng)歸進(jìn)行酒洗制成酒 洗當(dāng)歸；(2)將酒洗當(dāng)歸和黃芪混合，依次進(jìn)行水煮、冷卻、過(guò)濾獲得當(dāng)歸補(bǔ)血藥液；(3)將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液進(jìn)行真空低溫干燥制成當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏，再將當(dāng)歸補(bǔ)血干浸膏進(jìn) 行粉碎得到當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒；(4)在當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒中添加藥用明膠粉并混合均勻，然后往當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與 藥用明膠粉混合物中噴入藥用乙醇溶液使之潤(rùn)濕，最后將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血 浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物進(jìn)行加熱烘干、冷卻、整粒后灌裝成膠囊。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中添 加的藥用明膠粉用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的0. 5% 2%，藥用明膠粉的粒度不小于 80目，且將當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉進(jìn)行混合時(shí)的溫度為18 26°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中添 加的藥用明膠粉用量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒重量的1%，將當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉 混合的溫度為18 20°C，所述步驟(4)中添加藥用明膠粉、混合均勻以及噴入藥用乙醇溶 液是在高效濕法制粒機(jī)中進(jìn)行的，且高效濕法制粒機(jī)的混合速度為200 400轉(zhuǎn)/分，切割 速度為1500 3000轉(zhuǎn)/分，混合時(shí)間為5 10分鐘，放置時(shí)間為30 45分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中噴 入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物的總重量的5% 8%， 藥用乙醇溶液中乙醇的體積百分比為50% 80%。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中噴 入的藥用乙醇溶液的量為當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物的總重量的6 %，藥用乙 醇溶液中乙醇的體積百分比為70%。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述水煮是指使用 重量為步驟(1)選取的黃芪與當(dāng)歸總重量的10倍的水，將酒洗當(dāng)歸和黃芪的混合物文火保 持沸騰3 4小時(shí)，待藥液體積約為原藥液體積一半時(shí)停止加熱，所述過(guò)濾采用的過(guò)濾材料 為雙層本色綢布。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述真空低溫干燥 是指將當(dāng)歸補(bǔ)血藥液放在不超過(guò)60°C的真空環(huán)境中直至當(dāng)歸補(bǔ)血藥液干燥。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述粉碎是指將當(dāng) 歸補(bǔ)血干浸膏采用冷凍粉碎機(jī)粉碎，粉碎獲得的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒的大小為30 40目。
10.根據(jù)權(quán)利要求2 9任一所述的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊的制備方法，其特征在于所述酒洗 是指在10重量份當(dāng)歸中添加1重量份黃酒拌勻、悶透，然后用文火炒干至微焦、冷卻后獲得 酒洗當(dāng)歸；所述步驟(4)中將經(jīng)藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合 物進(jìn)行加熱烘干是在孛薺式糖衣機(jī)里進(jìn)行，孛薺式糖衣機(jī)轉(zhuǎn)速為10 25轉(zhuǎn)/分，孛薺式糖 衣機(jī)內(nèi)部溫度為35 55°C，且孛薺式糖衣機(jī)開(kāi)啟引風(fēng)機(jī)將濕熱氣體排出；所述步驟(4)中的整粒是將烘干后的藥用乙醇溶液潤(rùn)濕的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒與藥用明膠粉混合物顆粒通 過(guò)40目篩。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊及其制備方法，當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊包括1000重量份的當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒和5～20重量份的明膠顆粒，所述當(dāng)歸補(bǔ)血浸膏顆粒為10重量份的當(dāng)歸和50重量份的黃芪經(jīng)水煮、真空干燥、粉碎得到的顆粒提取物；制備方法包括選取當(dāng)歸10重量份、黃芪50重量份，經(jīng)水煮、真空低溫干燥、粉碎、添加藥用明膠粉并混合均勻、噴入藥用乙醇溶液、烘干、冷卻、整粒后灌裝成膠囊。本發(fā)明的當(dāng)歸補(bǔ)血膠囊既完全按照中醫(yī)中藥理論進(jìn)行調(diào)配，又符合現(xiàn)代人們希望簡(jiǎn)單、方便，易保管、易攜帶的要求，具有藥物成分保留好、制備工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)操作方便、浸膏顆粒流動(dòng)性好、吸濕性小且不易結(jié)塊，制劑質(zhì)量穩(wěn)定，便于倉(cāng)儲(chǔ)、運(yùn)輸、攜帶和服用的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K47/42GK101904893SQ20101022168
公開(kāi)日2010年12月8日 申請(qǐng)日期2010年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月8日
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