專利名稱：一種治療心血管疾病的植物藥澤蘭總黃酮及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體是一種活血散瘀、降血脂降血壓的植物藥中的澤蘭總 黃酮及其制備方法。
背景技術(shù)：
血脂主要是指血清中的膽固醇和甘油三酯。無論是膽固醇含量增高，還是甘油三 脂的含量增高，或是兩者皆增高，統(tǒng)稱為高脂血癥。調(diào)查顯示，高血脂已成為中老年人的常 見病，而由此引發(fā)的各種心腦血管病已成為威脅中老年人生命的主要的禍?zhǔn)?。心血管疾?cardiovascular disease, CVD)是一大類影響心臟和血管的疾病總 稱，包括冠心病(CHD)，腦血管疾病，高血壓和周圍血管病(PVD)；也包括其他疾病如風(fēng)濕性 心臟病(由于風(fēng)濕熱對心臟造成的損傷)和先天性心臟病(先天性心臟結(jié)構(gòu)異常)。CVD 與心肌梗死，心絞痛和腦卒中都有聯(lián)系。包括心肌梗死和腦卒中在內(nèi)的突發(fā)事件主要是由 于動脈粥樣硬化造成的，即脂肪物質(zhì)(如膽固醇，血小板和細(xì)胞碎片)在供應(yīng)心腦的動脈血 管壁的慢性沉積。堆積物形成局部損傷或粥樣斑塊。隨時間推移，這些局部損傷逐漸增大 增厚，致使血管管徑變細(xì)，減少了通過血管的血流量。血管也變得僵硬，彈性降低。全球每年因心血管病死亡約1700萬人，預(yù)計到2020年，因CVD死亡人數(shù)將達(dá)2500 萬人。高血壓是心腦血管疾病中最為多見的幾類疾病之一，是危害人類健康的主要“殺手”。 隨著不斷加劇的人口老齡化趨勢，高血壓病人的比例逐步上升。另一方面，現(xiàn)代人飲食口味 偏重導(dǎo)致攝入鹽量過多，工作繁忙而運動時間減少等因素也使得高血壓患病率越來越高。 目前，中國高血壓患者人數(shù)超過2億。多次大規(guī)模的高血壓人群抽樣調(diào)查顯示，中國高血壓 病患病率持續(xù)上升根據(jù)1958年、1979 1980年和1991年分別進行的3次調(diào)查，我國高 血壓患病率分別為5. 8%、7. 73%和13. 58%。到2002年，這一數(shù)字更是飆升至18. 8%。目前國內(nèi)外常用降血脂藥物為他汀類(舒降之、立普妥、血脂康等)、貝特類(力 平脂、必降脂和諾衡等)、煙酸類(煙酸、煙酸肌醇酯、樂脂平等)、膽酸螯合劑(消膽胺、降 膽寧和降膽葡胺等)、普羅布考(丙丁酚)等化學(xué)藥，但這些藥品在降低血脂的同時，對肝 腎的刺激和損害一直以來是令世界醫(yī)學(xué)界頭疼的一大難題！常用的降壓藥有血管緊張素 轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)、血管緊張素II受體阻斷藥(ARB)、β -受體阻斷劑(beta-blocker)、 鈣通道阻滯劑(CCB)、利尿藥(diuretic)。由于高血脂高血壓患者需要長期用藥或終身服 藥，藥物本身對肝腎器官既有損害，加上治療劑量更增加肝腎代謝負(fù)擔(dān)的弊端，故有長時間 的用藥后即出現(xiàn)諸多不良反應(yīng)和并發(fā)癥。中醫(yī)藥或天然藥物對該病與化學(xué)藥比較而言，不 僅顯示其較好療效，而且有副作用小、不良反應(yīng)發(fā)生率低、可以較長期服用等優(yōu)勢而日益收 到臨床青睞。因此，從中藥或天然藥物中以有效部位形式開發(fā)安全性高、療效確切、指標(biāo)成 分清晰的新藥即具有十分重要的現(xiàn)實意義，同時對我國中醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展能起到很大的 推動作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種活血散瘀、降血脂降血壓的中藥及其中藥中澤蘭總黃酮的制備 方法，所述的中藥能從根本上控制疾病，副作用小、不良反應(yīng)發(fā)生率低，且療效確切，可長期 服用。本發(fā)明的技術(shù)方案為本發(fā)明的有益效果和意義在于澤蘭總黃酮的植物來源為菊科澤蘭屬植物輪葉澤 蘭(Eupa totium lindleyanum DC.)的干燥地上部分。該植物主產(chǎn)于江蘇、安徽等省山區(qū)， 其它省也有分布，資源豐富且易于栽培，當(dāng)?shù)厮幱糜谥委熉灾夤苎椎群粑到y(tǒng)疾??；其 所含化學(xué)成分主要有黃酮類、生物堿類、揮發(fā)油和香豆精等。我們研究發(fā)現(xiàn)其黃酮類成分可 用作制備治療降血脂降血壓的有效藥物，這不僅為廣大病患者提供更好的用藥選擇，同時 對于進一步綜合利用環(huán)保型藥材資源，使山區(qū)人民致富帶動山區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展具有極大的現(xiàn)
眉、ο
具體實施例方式一種活血散瘀、降血脂降血壓的中藥的有效成份為或者包括有從輪葉澤蘭 (Eupatotium lindleyanum DC.)的干燥地上部分中提取的澤蘭總黃酮。中藥為膠囊、顆粒劑、片劑、溶液劑、丸劑等劑型，或者為注射劑型。活血散瘀、降血脂降血壓的中藥中的澤蘭總黃酮的制備方法(1)、提取取輪葉澤蘭的干燥地上部分，凈選、切段，段長2 3cm，加入到10倍70%乙醇中 浸泡過夜、回流提取2小時、過濾；過濾后的藥渣再加8倍量同濃度乙醇提取1次、1小時， 過濾，合并濾液，然后將濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.20 1.30 (60°C熱測) 的浸膏，將濃縮液冷至室溫，加中性水?dāng)嚢枞芙庀♂屩烈欢ǖ纳庴w積比(1 3)，靜置，過 濾，得濾液。(2)、富集將上述濾液，加入中性水稀釋至含黃酮2. 5mg/mL的溶液，加0. 5mol/L鹽酸調(diào)節(jié) PH值5 6，再加于已處理好的DlOl型大孔吸附樹脂柱上(按濕樹脂動態(tài)吸附容量不大于 10mg/mL)，然后用水洗脫至洗脫液近無色，棄去洗脫液，然后用70%的乙醇洗至洗脫液不含 黃酮成分；(3)、精制①將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間，粉碎，過篩，鋁 塑密封包裝，得到澤蘭總黃酮。(以蘆丁為對照品，總黃酮含量不少于50% )②將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至浸膏，加入4 6的乙醇回流溶解，再加入 5 %的顆粒活性炭回流30分鐘，過濾，濾液減壓乙醇濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間，粉 碎，過篩，鋁塑密封包裝，得到澤蘭總黃酮。(以蘆丁為對照品，總黃酮含量不少于55% )本發(fā)明的藥效學(xué)試驗1降血脂1. 1、方法與結(jié)果1. 1. 1、對蛋黃乳所致小鼠高脂高膽固醇的影響
選取昆明種小鼠60只，隨機分為6組，每組10只。澤蘭總黃酮高、中、低劑量組分 別按1. 00,0. 50,0. 25g · kg-1的劑量灌服(批號091201，含量59.2% )；阿托伐他汀鈣片 組(陽性對照組)按2. 20mg · kg-1灌服；空白對照組及模型組分別灌服等容量的羥甲 基纖維素(CMC)，0. 5mL · IOg-I，1次· d_l，連續(xù)30d。于末次灌服藥后2h，各實驗組(空白 對照組除外)，小鼠分別腹腔注射75%蛋黃乳，0. 5mL ·只_l，20h后經(jīng)眼眶采血，用血清膽 固醇試劑盒、血清甘油三酯試劑盒和HDL-C、LDL-C試劑盒測定各組小鼠的相應(yīng)指標(biāo)，結(jié)果 詳見表1表1各組小鼠血清膽固醇、甘油三酯、HDL-C和LDL-C的水平比較(X士SD，n = 10)
組別
血清膽固醇血清甘油三脂 HDL-C
/mmol. L-I
/mmol. L-I
/mmol. L-
LDL-C /mmol. I
空白對照組 模型組
4. 13 ±0.26** 8. 09 士 0. 41
0.84 ±0.22ι 2. 94 ±0.27
2· 42 ±0.2” 2. 21 ±0.45
0.411 ±0.28·· 4. 30 ±1. 06
阿托伐他汀鈣片
組
澤蘭總黃酮高劑 量組
澤蘭總黃酮中劑 量組
澤蘭總黃酮低劑 量組
4
5
32 ±0. 31** .89 士 O· 20** 80 土 0. 79** 12 ±1. 24*
1.19 ±0.21** 2. 82 ± 0.33** 0. 23 ± 0. 11"
I. 76±. 026** 3. 62 ± 0.89** 0.56 ±0.20*··
1.88 ±0.18** 2. 63 ± 0.27* 1. 63 ± 0. 46"
2. 82 ±0.31
2. 30 ±0.41
3. 79 ±1.94與模型組比較*P< 0. 05，**P < 0. 011. 1. 2對大鼠實驗性高脂血癥的影響在基礎(chǔ)飼料中加入膽固醇2%、蛋黃粉5%、豬油10%、甲基硫氧嘧啶0.2%，配成 高脂飼料。選取Wistar大鼠分6組，每組10只?？瞻讓φ战M喂普通飼料，其余5組喂高 脂飼料，在喂養(yǎng)高脂飼料的同時給予受試藥物。澤蘭總黃酮高、中、低劑量組按0.50、0.25、 0. 125g · kg-1灌服，阿托伐他汀鈣片組按1. IOmg · kg-Ι灌服；空白對照組及模型組灌服等 容量的CMC。2組給藥容量為0. 5mL · 100g, 1次· d_l，連續(xù)30d。于末次灌服藥后禁食 24h，經(jīng)眼眶采血，測定各組大鼠的血清膽固醇、甘油三酯及HDL-C、LDL-C，結(jié)果詳見表2。表2各組大鼠血清膽固醇、甘油三酯、HDL-C和LDL-C的水平比較(X士SD，n = 10) 與模型組比較*P< 0. 05，**P < 0. 011. 2 結(jié)論澤蘭總黃酮具有明顯的降低血脂、降低膽固醇作用，同時顯示一定的劑量依賴關(guān) 系。2、降血壓2. 1、澤蘭總黃酮十二指腸給藥對Wistar大鼠血壓的影響取Wistar大鼠20只，雌雄不分，腹腔注射烏拉坦1. 25g/kg麻醉后，從胸鎖骨乳頭 肌內(nèi)緣分開，暴露頸后總動脈，行動脈插管；在四肢皮下插入針形電極；從腹正中線打開腹 腔，行十二指腸插管，然后關(guān)閉腹腔。將RM-6000多導(dǎo)生理記錄儀，與血壓換能器及動脈插 管等連接，記錄各項指標(biāo)。同時，按0. 5g/kg給藥，連續(xù)記錄給藥前后的收縮壓(SP)、舒張壓 (DP)、心電圖(ECG)等。取給藥降壓峰值與給藥前對比，收縮壓、舒張壓均降低且有非常顯 著性差異(P<0.001)。降壓百分率超過35%以上。降壓作用可持續(xù)Ih (見表3)。表3澤蘭總黃酮十二指腸給藥對大鼠血壓及心率的影響(X士SD ；η = 20) 與給藥前比較< 0. 0012. 3澤蘭總黃酮十二指腸給藥對急性實驗性腎型高血壓大鼠血壓的影響 取雌雄Wistar大鼠20只，隨機分組(給藥組、生理鹽水對照組)，乙醚吸入麻醉， 腹正中切口，分離左側(cè)腎臟，用小金屬夾夾住腎蒂部4 5h。用25%烏拉坦4ml/kg腹腔注 射麻醉。頸正中切口，頸動脈描記血壓；十二指腸插管備用。給藥組由十二指腸注入澤蘭總 黃酮水溶液。按0.5g/kg給藥，對照組十二指腸注入等容量的生理鹽水。松開動脈夾，同時 描記動脈血壓和記錄心電圖。實驗觀察到澤蘭總黃酮能明顯抑制其血壓的升高，與生理鹽 水對照組組間對比P < 0. 05或P < 0. 01，具有顯著性差異(見表4)。表4腎型高血壓大鼠給藥后血壓變化(X士SD ；單位kPa) 與對照組比較*P< 0. 05，**p < 0. 012. 2 結(jié)論澤蘭總黃酮具有明顯的降低血壓作用。
權(quán)利要求
一種活血散瘀、降血脂降血壓的中藥，其特征在于所述的中藥有效成份為或者包括有從輪葉澤蘭中提取的澤蘭總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活血散瘀、降血脂降血壓的中藥，其特征在于所述的中藥為 膠囊(軟膠囊)、顆粒劑(干混懸劑)、片劑(分散片、泡騰片、咀嚼片、口崩片)、溶液劑(糖 漿)、丸劑(濃縮丸、滴丸、微丸)，或者為注射劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活血散瘀、降血脂降血壓的中藥中的澤蘭總黃酮的制備方 法，其特征在于包括以下步驟(1)、提取取輪葉澤蘭的干燥地上部分，凈選、切段，加入到一定倍數(shù)的質(zhì)量濃度的乙醇中浸泡過 夜、回流提取、過濾；過濾后的藥渣再加水提取1 3次，過濾，合并濾液，然后將濾液減壓回 收乙醇并濃縮至相對密度為1. 10 1.30(60°C熱測)的浸膏，將濃縮液冷至室溫，加中性水 攪拌溶解稀釋至一定的生藥體積比，靜置，過濾，得濾液。(2)、富集將上述濾液，加入中性水稀釋至含黃酮一定濃度的溶液，加稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液 調(diào)至一定的PH值，再加于已處理好的D101型、AB-8型或D-201型大孔吸附樹脂柱上，然后 用水洗脫至洗脫液近無色，棄去洗脫液，然后用一定質(zhì)量濃度的乙醇洗至洗脫液不含黃酮 成分；⑶、精制①將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間，粉碎，過篩，鋁塑密 封包裝，得到澤蘭總黃酮。②將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至浸膏，加入一定體積的乙醇回流溶解，再加入一 定量的活性炭回流10 60分鐘，過濾，濾液減壓乙醇濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間， 粉碎，過篩，鋁塑密封包裝，得到澤蘭總黃酮。③將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至浸膏，然后加入一定體積0.01 0. Imol/LNaOH 飽和正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液攪拌溶解、濾過，濾液移至萃取罐中，用乙 酸乙酯飽和的0. 01 0. Imol/LNaOH水溶液提取至堿液層至近無色，合并堿提取液，移至另一萃取罐中，邊攪拌邊加入稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1 3，用水飽和的正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液提取至近無色，合并提取液，然 后用乙酸乙酯飽和水溶液洗滌1 3次，棄去水層，將提取液減壓回收溶劑至干，取出，通風(fēng) 干燥一定時間，粉碎，過篩，鋁塑密封包裝，得到澤蘭總黃酮。
4.根據(jù)權(quán)利要求1活血散瘀、降血脂降血壓的中藥中的澤蘭總黃酮的制備方法，其特 征在于具體包括以下步驟(1)、提取取輪葉澤蘭的干燥地上部分，凈選、切段，段長2 3cm，加入到8 10倍50 80%乙 醇中浸泡過夜、回流提取1 2小時、過濾；過濾后的藥渣再加同濃度乙醇提取1 2次，過 濾，合并濾液，然后將濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1. 10 1. 30(60°C熱測)的浸 膏，將濃縮液冷至室溫，加中性水?dāng)嚢枞芙庀♂屩烈欢ǖ纳庴w積比(1 1 3)，靜置，過 濾，得濾液。(2)、富集將上述濾液，加入中性水稀釋至含黃酮1 5mg/mL的溶液，加0. 1 1. Omol/L鹽酸調(diào) 節(jié)pH值4 7，再加于已處理好的D101型大孔吸附樹脂柱上，然后用水洗脫至洗脫液近無 色，棄去洗脫液，然后用50 80%的乙醇洗至洗脫液不含黃酮成分；(3)、精制①將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間，粉碎，過篩，鋁塑密 封包裝，得到澤蘭總黃酮。②將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至浸膏，加入一定體積的乙醇回流溶解，再加入一 定量的活性炭回流10 60分鐘，過濾，濾液減壓乙醇濃縮至干，取出，通風(fēng)干燥一定時間， 粉碎，過篩，鋁塑密封包裝，得到澤蘭總黃酮。③將上述乙醇洗脫液繼續(xù)減壓濃縮至浸膏，然后加入一定體積0.01 0. Imol/LNaOH 飽和正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液攪拌溶解、濾過，濾液移至萃取罐中，用乙 酸乙酯飽和的0. 01 0. Imol/LNaOH水溶液提取至堿液層至近無色，合并堿提取液，移至另 一萃取罐中，邊攪拌邊加入稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1 3，用水飽和的正丁醇或一定比例的正丁 醇乙酸乙酯混合液提取至近無色，合并提取液，然后用乙酸乙酯飽和水溶液洗滌1 3次， 棄去水層，將提取液減壓回收溶劑至干，加入一定量75% 85%乙醇回流溶解、減壓回收 溶劑至干，反復(fù)1 2次，取出，通風(fēng)干燥一定時間，粉碎，過篩，鋁塑密封包裝，得到澤蘭總 黃酮。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種活血散瘀、降血脂將血壓的中藥及其中藥中澤蘭總黃酮的制備方法，中藥有效成份為從輪葉澤蘭中提取的澤蘭總黃酮，澤蘭總黃酮的制備方法主要包括提取、富集和精制。本發(fā)明所述的中藥能從根本上控制疾病，副作用小、不良反應(yīng)發(fā)生率低，且療效確切，可長期服用。
文檔編號A61P3/06GK101926841SQ20101024544
公開日2010年12月29日 申請日期2010年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月28日
發(fā)明者余世春 申請人:安徽科創(chuàng)中藥天然藥物研究所有限責(zé)任公司