專利名稱：紫草素及其組合物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及紫草素及其組合物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著癌癥發(fā)病率的不斷增高，化療藥物在臨床的應(yīng)用也越來越廣泛?；熓桥R床 治療各種癌癥、白血病、免疫性疾病的手段之一，化療藥物外滲是一種比較常見的并發(fā)癥， 多數(shù)化療藥物對局部組織均有較強的刺激作用，可引起靜脈炎，有的化療藥物如長春新堿 等可引起神經(jīng)毒性損害?；熕幬镬o脈注射外滲后，輕者可引起周圍組織輕度紅斑、局部疼 痛腫脹、灼熱，重者可引起周圍組織壞死、皮膚潰瘍及深部結(jié)構(gòu)如肌腱和關(guān)節(jié)損傷。藥物外 滲后采取積極的處理措施，對防止局部組織壞死及潰瘍形成、防止感染并發(fā)癥的發(fā)生，減輕 患者痛苦有重要意義。據(jù)統(tǒng)計，化療的滲漏率為0.1% 0.6%，而實際發(fā)生率則更高?；?療藥物外滲的發(fā)生原因主要是化療藥物本身的刺激性及患者血管質(zhì)量較差。由于化療藥物 刺激血管壁，引起血管通透性增加，組織炎性滲出，血管運動障礙(攣縮或擴張)等原因，腫 瘤患者常在化療后發(fā)生靜脈炎，輕者表現(xiàn)為局部紅腫脹痛，血管變硬或成條索狀。嚴(yán)重者可 形成水泡，潰瘍，甚至組織壞死?；熕幬餄B漏損傷血管及局部組織屬中醫(yī)“瘡瘍”范疇。中醫(yī)認(rèn)為，本病多責(zé)之于 局部脈絡(luò)受損，血溢肌膚或血熱內(nèi)蘊而出現(xiàn)局部發(fā)紅；氣血不暢，凝聚肌膚，津液輸布受阻 則腫脹；瘀血內(nèi)蘊，日久化熱則局部發(fā)熱；脈絡(luò)血行不暢，瘀血阻滯，不通則痛，而血瘀則貫 穿其始終?？傊?，本病癥的發(fā)生乃因外邪入侵，熱毒蘊結(jié)，氣血瘀滯而成，治宜涼血解毒、活 血通絡(luò)、化瘀止痛。紫草(RadixArnebiae)為紫草科植物新疆紫草 Arnebia educhroma (Royle) Johnst> 紫草 Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc.或內(nèi)蒙紫草 Arnebia guttataBimge的干燥根。紫草又稱紫草茸、山紫草、紫丹、紫草根、紅石根。主產(chǎn)于新 疆、西藏、甘肅、黑龍江、吉林、遼寧、河北、河南、廣西等地。紫草性味甘、咸、寒，歸心、肝 經(jīng)。功能涼血，活血，解毒透疹。主治血熱毒盛，斑疹紫黑，麻疹不透，瘡瘍，濕疹，水火 燙傷等。紫草主要含有紫草素(shikonin)、乙酰紫草素(acetylshikonin), β -羥基異 戊酰紫草素(β-hydro-xyisovalerylshikonin)、β , β，_二甲基丙烯酰紫草素(β， β ‘ -dimethylacrylshikonin)等。其中，紫草素分子量為288. 30，分子式C16H16O5,別名為5，8_二羥基-2-[ (IR)-I-羥 基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1，4-二酮，結(jié)構(gòu)如圖1所示，為紫褐色針狀結(jié)晶，熔點147°C， 旋光度aD2° = +135° (苯)。溶于苯乙醚、丙酮、氯仿、甲醇、乙醇、甘油、動植物油和堿性水 溶液，不溶于水。色調(diào)隨PH值變化，pH值4 6呈紅色，pH值8呈紫色，pH值10 12間 則呈藍(lán)色。耐光、耐熱、耐氧化性好，對還原劑量不穩(wěn)定，遇鐵離子呈深紫色。本品具有一定 的抗癌、抗炎、抗菌等作用。臨床用于治療急、慢性肝炎、肝硬化(腹水)。皮膚科用于治療 扁平疣、銀屑病，局部應(yīng)用治療燒傷和促進傷口愈合。滴眼劑用于治療單純皰疹病毒性角膜 炎，對上皮型樹枝狀和淺實質(zhì)層樹枝狀角膜炎有一定療效；油劑用于治療嬰兒皮炎、濕疹、陰道炎、子宮頸炎等；含有紫草素的牙膏可防治牙齲和牙齦炎；此外紫草素亦可用于藥物、 化妝品及食品的著色劑。但紫草素單體在防治化療藥物滲漏損傷血管及局部組織的作用與 功效，尚未見文獻(xiàn)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種紫草素的醫(yī)藥新用途，具體而言，是提供紫草素在制 備防治/治療化療藥物滲漏引起的血管及局部組織損傷的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的在于提供一種紫草素組合物的醫(yī)藥新用途，具體而言，是提供 紫草素組合物在制備防治/治療化療藥物滲漏引起的血管及局部組織損傷的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明應(yīng)用紫草素對采用阿霉素等造成的大鼠化療藥物滲漏損傷模型進行處理， 應(yīng)用紫草素對阿霉素等造成的化療藥物損傷患者進行處理，證實紫草素具有顯著的治療作 用，因此紫草素及其組合物均能夠用于制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管及局部組 織損傷作用的藥物。


圖1為紫草素的結(jié)構(gòu)式。圖2為大鼠背部狀態(tài)圖片，其中al和a2為未處理組7天和14天時的圖片，bl和 b2為大豆油組7天和14天時的圖片，cl和c2為喜遼妥組7天和14天時的圖片，dl和d2 為紫草素組7天和14天時的圖片。圖3為HE染色顯微鏡圖片，其中al和a2為未處理組3天和7天時的圖片，bl和 b2為大豆油組3天和7天時的圖片，cl和c2為喜遼妥組3天和7天時的圖片，dl和d2為 紫草素組3天和7天時的圖片。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明做進一步說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本 發(fā)明而非用于限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明所述紫草素可從紫草根中提取得來，也可應(yīng)用現(xiàn) 有技術(shù)中已公開的人工合成的方法獲得。在以下實施例中以是從紫草根中提取得來的紫草 素為例，進行了系列在體藥理和臨床研究，為開拓紫草素防治化療藥物滲漏損傷血管及局 部組織的新用途提供了科學(xué)依據(jù)。本領(lǐng)域人員可知，應(yīng)用現(xiàn)有技術(shù)中已公開的人工合成的 方法獲得的紫草素也具有相同的用途。實施例1紫草素的制備收集干燥紫草根5kg，粉碎，以95%乙醇超聲提取3次，提取液合并，減壓濃縮，用 石油醚超聲脫脂后，再用乙酸乙酯萃取，過濾，乙酸乙酯萃取液減壓，濃縮，干燥，得粗提物， 乙酸乙酯粗提物經(jīng)硅膠柱層析1400g(粒度200-300目，IOcmX20cm)，石油醚-乙酸乙酯 (1 9 1 5)梯度洗脫，用TLC跟蹤檢測、合并，第8份餾份減壓、濃縮至干，再經(jīng)甲醇淋 洗，以除去雜質(zhì)。真空干燥后得紫草素粉末，經(jīng)HPLC檢測，純度大于95%，用于隨后的臨床 和在體藥理實驗。實施例2紫草素對大鼠化療藥物滲漏損傷的防治作用
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在此實施例中，實驗動物為3月齡SPF級SD雄性大鼠60只，體質(zhì)量180_200g，由 第二軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心提供，合格證號為SCXK[滬2007-0003]。主要藥物為注射用 鹽酸多柔比星(簡稱阿霉素，深圳萬樂藥液有限公司，國藥準(zhǔn)字H44024359)，多磺酸粘多 糖乳膏(簡稱喜遼妥，德國三共藥業(yè)，批準(zhǔn)文號H20030014)，大豆油(江西金海棠藥用油有 限公司，批準(zhǔn)文號贛食藥準(zhǔn)字20050003)，紫草素(從紫草根中提取得到)，生理鹽水，10% 甲醛。藥物配制方法為10mg阿霉素用6ml生理鹽水稀釋成1. 67mg/ml溶液備用，用大豆 油將紫草素稀釋成4mg/ml混懸液，4°C保存?zhèn)溆谩?.1造模與分組采用剪刀和電推剪將SD大鼠脫毛后，于每只大鼠左后背部皮下注射 0. 4ml(1.67mg/ml)阿霉素，制成化療藥物滲漏損傷動物模型。編號后按隨機數(shù)字表法將60 只SD大鼠隨機分為4組，即未處理組、大豆油輔料組、紫草素實驗組和喜遼妥陽性對照組， 每組15只。2. 2干預(yù)措施造模30min后進行相應(yīng)干預(yù)，除未處理組不做任何處理外，其他組用相應(yīng)藥物在 損傷處涂擦。外敷面積直徑為15 20mm，均勻涂滿為度。每天外敷2次，連續(xù)用藥3周。2. 3 觀察每次換藥前觀察并記錄每組大鼠局部組織的皮膚顏色變化，腫脹或瘀血消退時 間，用油標(biāo)卡尺測量局部隆起面積，算出各組腫脹消退指數(shù)(消退指數(shù)=局部隆起面積/隆 起完全消退所需時間，腫脹面積=^ /4X長徑X短徑)。并測量各組大鼠皮下硬結(jié)和潰瘍 面積大小(長徑和短徑)，選擇性拍照，結(jié)果如圖2所示。另外，于換藥的第1、3、5、7天每組 各取1只處死，分別以穿刺點及距穿刺點Icm處為中心，切下0. 25cm的皮膚組織，10%甲醛 固定24h，常規(guī)病理制片，HE染色，光鏡組織學(xué)觀察并分析炎細(xì)胞浸潤、水腫、壞死、出血、血 栓以及纖維組織增生等病理表現(xiàn)，結(jié)果如圖3所示。病理程度分輕、中、重3級。輕度彌散 性炎細(xì)胞浸潤，表皮完好；中度組織水腫，散在出血，明顯炎性細(xì)胞浸潤；重度潰瘍，組織 壞死，出血。大體觀察主要是皮損淺紅或發(fā)白、深紅、水腫以及潰瘍。3. 4統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 13. Ofor Windows軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，所有計數(shù)資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn) 差(χ 士S)表示，組間比較采用配對t檢驗。P < 0. 05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果如表1 表3所示。表1腫脹消退指數(shù) *P < 0. 05，vs 未處理組.
表2瘀斑發(fā)生率
組別標(biāo)本數(shù)(只)瘀斑發(fā)生數(shù)(只)瘀斑發(fā)生率(％)紫草素組11436.36喜遼妥組11872.73大豆油組11763.64未處理組11981.82
表3 I
S痕脫落率組別標(biāo)本數(shù)(只)瘢痕脫落數(shù)(只)瘢痕脫落率(％)紫草素組44100.00喜遼妥組8562.50大豆油組7457.14未處理組9444.44由上述圖表可見，未處理組大鼠背部皮損深紅、水腫、潰瘍明顯，且水腫消退時間 明顯延長，瘢痕發(fā)生率高但其脫落率低，病理切片顯示明顯潰瘍、組織壞死、嚴(yán)重出血。大豆 油組大鼠背部皮損深紅、水腫、潰瘍，且水腫消退時間較長，瘢痕發(fā)生率高而其脫落率相對 較低，病理切片顯示組織水腫，散在出血，炎性細(xì)胞浸潤，部分潰瘍和組織壞死。喜遼妥組大 鼠背部皮損深紅、水腫、潰瘍，且水腫消退時間明顯延長，瘢痕發(fā)生率高而其脫落率低，病理 切片顯示組織水腫，散在出血，明顯炎性細(xì)胞浸潤，部分潰瘍、組織壞死。紫草素組大鼠背部 皮損淺紅、輕度水腫、潰瘍較小，且水腫消退時間較短，瘢痕發(fā)生率低而其脫落率較高，病理 切片顯示彌散性炎細(xì)胞浸潤，表皮完好。綜上所述，紫草素具有涼血解毒、活血通絡(luò)、化瘀止痛等作用，對化療藥物滲漏引 起局部組織損傷具有很好的治療作用。實施例3紫草素對患者因化療造成局部組織損傷的作用中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院經(jīng)化療患者，因化療藥物滲漏引起 血管損傷引發(fā)靜脈炎和局部組織損傷，共122人，隨機分組，其中62人為喜遼妥對照組， 將喜遼妥均勻涂擦在損傷處，60人為紫草素治療組，將紫草素溶于適宜基質(zhì)均勻涂擦在損 傷處。每天給藥一次，并利用肉眼觀察和游標(biāo)卡尺測量損傷部位變化，采用數(shù)碼拍照結(jié)合 Image-Pro Plus 5. 0圖像分析軟件進行分析，結(jié)果如表4所示。表4紫草素與喜遼妥在治療因化療造成局部組織損傷的患者中的作用比較
6組別η痊愈好轉(zhuǎn)治愈率(％)
喜遼妥對照組62323051.61紫草素治療組6056493兩組療效進行X2檢驗，P <0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。從表4結(jié)果可見，紫草素對化療性靜脈炎及局部滲漏損傷有顯著地治療作用，并 較現(xiàn)行使用最廣泛的喜遼妥效果更為明顯，表明該化合物具有治療化療藥物滲漏損傷作用。本發(fā)明通過在體藥理研究和臨床研究發(fā)現(xiàn)并證明紫草素具有縮短化療藥物滲漏 造成的局部組織水腫消退時間，促進局部組織創(chuàng)口愈合，防止瘢痕形成，治療化療藥物滲漏 損傷血管及局部組織的作用，為臨床指導(dǎo)紫草素治療化療藥物滲漏損傷血管及局部組織更 加安全、合理使用提供一定的實驗依據(jù)，同時也為紫草素進一步開發(fā)成化療藥物滲漏損傷 治療用藥提供實驗基礎(chǔ)，證實可選擇紫草素來制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管及 局部組織損傷作用的藥物，紫草素相應(yīng)的組合物也可以用來制備具有防治因化療藥物滲漏 引起的血管及局部組織損傷作用的藥物，所述紫草素組合物含有紫草素以及藥學(xué)上可接受 的載體或賦形劑、如溶劑、稀釋劑等，紫草素與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑混 合，從而形成紫草素組合物。紫草素制備簡便，成本低廉，用其制備防治化療藥物滲漏損傷 血管及局部組織的藥物，市場前景廣闊，蘊藏著巨大的社會和經(jīng)濟效益。
權(quán)利要求
一種紫草素的應(yīng)用，其特征在于，制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管及局部組織損傷作用的藥物。
2.一種紫草素組合物的應(yīng)用，其特征在于，制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管 及局部組織損傷作用的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種紫草素及其組合物的應(yīng)用，用于制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管及局部組織損傷作用的藥物。經(jīng)大鼠在體藥理研究和臨床研究表明紫草素具有顯著地治療化療藥物滲漏對血管及局部組織損傷并促進愈合作用，可明顯縮短局部組織腫脹消退時間，加速局部組織損傷愈合過程，表明紫草素及其組合物可以用于制備具有防治因化療藥物滲漏引起的血管及局部組織損傷作用的藥物。
文檔編號A61P43/00GK101904831SQ201010247778
公開日2010年12月8日 申請日期2010年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月6日
發(fā)明者凌昌全, 楊延龍, 蘇永華 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)