專利名稱：經(jīng)嗅區(qū)通路遞送腦內(nèi)藥物的液態(tài)脂質(zhì)微粒、制備方法及其制劑的制作方法
經(jīng)嗅區(qū)通路遞送腦內(nèi)藥物的液態(tài)脂質(zhì)微粒、制備方法及其
制劑
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑學(xué)領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種經(jīng)鼻嗅區(qū)通路實(shí)現(xiàn)腦內(nèi)藥物遞送的液態(tài)脂質(zhì)微粒、制備方法及其制劑。
背景技術(shù)：
血腦屏障是藥物經(jīng)外周給藥入腦治療中樞性疾病的最主要瓶頸，尤其針對(duì)治療腦部疾病的激素、多肽、蛋白、基因或疫苗藥物。目前，主要通過(guò)結(jié)構(gòu)或劑型改造以實(shí)現(xiàn)藥物突破血腦屏障。由于鼻腔和腦組織的特殊聯(lián)系，多肽或蛋白類藥物可經(jīng)嗅區(qū)直接入腦和腦脊液，因此鼻腔給藥是藥物入腦的便捷途徑。研究發(fā)現(xiàn)一些多肽或蛋白類藥物單次或連續(xù)鼻腔內(nèi)給藥可被直接遞送藥物入腦，如生長(zhǎng)激素神經(jīng)月太Yu H, Kim K. Direct nose-to-brain transfer of a growth hormone releasing neuropeptide, hexarelin after intranasal administration to rabbits. Int J Pharm 2009 ；378 (1-2) :73_79、神經(jīng)生長(zhǎng)因子Vaka SR, Sammeta SM, Day LB, Murthy SN. Delivery of nerve growth factor to brain via intranasal administration and enhancement of brain uptake. J Pharm Sci 2009 ；98 (10) 3640-3646 禾口 Capsoni S, Covaceuszach S, Ugolini G, Spirito F, Vignone D, Stefanini B, et al. Delivery of NGF to the brain intranasal versus ocular administration in anti-NGF transgenic mice. J Alzheimers Dis 2009 ； 16 (2) :371_388、胰島素樣生長(zhǎng)因子-I劉新峰，管亞?wèn)|，周?chē)?guó)慶，II WHF.胰島素樣生長(zhǎng)因子-I經(jīng)鼻給藥可進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)并有效治療實(shí)驗(yàn)性腦梗死.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)2004 ;37 (2) :149-153、干擾素Thorne RG, Hanson LR, Ross TM, Tung D, Frey WH, 2nd. Delivery of interferon-beta to the monkey nervous system following intranasal administration. Neuroscience. 2008 ； 152(3) :785-797以及某些抗體如抗Αβ抗體翟蘊(yùn)新.抗Αβ樣淀粉蛋白抗體經(jīng)鼻腔給藥治療癡呆大鼠的作用分析.中國(guó)藥科大學(xué)2008;碩士學(xué)位論文可以繞過(guò)血腦屏障進(jìn)入腦內(nèi)，顯著增加腦內(nèi)藥物含量。但其單靠藥物自身作用，入腦遞送效果較差，且藥物穩(wěn)定性很難保證。傳統(tǒng)中醫(yī)應(yīng)用一些植物揮發(fā)油或精油熏鼻，可以達(dá)到芳香開(kāi)竅和醒腦的治療效果，但大多數(shù)藥物無(wú)法溶解于植物揮發(fā)油或精油中，從而不能保證藥物進(jìn)入腦內(nèi)。目前經(jīng)鼻給藥制劑有滴鼻劑、噴霧劑或噴鼻劑、凝膠劑，這些制劑常用作局部治療，藥物遞送入腦的生物利用度較低。研究發(fā)現(xiàn)，納米粒對(duì)生物體具有明顯腦靶向特點(diǎn)程巧鴛，李范珠.神經(jīng)毒素納米粒大鼠鼻腔給藥的腦藥物動(dòng)力學(xué)研究.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，38(1) :77-79], 因此近年來(lái)利用納米球、脂質(zhì)體和納米粒等進(jìn)行鼻腔給藥的研究越來(lái)越多。有人用環(huán)糊精納米粒、PLGA(乳酸-羥基乙酸共聚物)微球、殼聚糖納米粒等提高藥物經(jīng)鼻給藥后入腦的生物利用度VakaSRK，Sammeta SM, Day LB, et al. Delivery of Nerve Growth Factor to brain via intranasal administration and enhancement of brain uptake. J PharmSci. 2009 ；98(, 10) =36403646和陳新梅，李心沁.殼聚糖載體對(duì)藥物鼻腔吸收的促進(jìn)作用.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2008 ;13(9) :981-984，但環(huán)糊精、PLGA和殼聚糖分子量大， 生物相容性因材料來(lái)源和處理方法不同存在較大差異，體內(nèi)降解速度慢，腦內(nèi)遞送存在潛在安全性隱患。有報(bào)道通過(guò)對(duì)納米粒進(jìn)行修飾可提高靶向性并提高生物利用度，如專利“一種凝集素修飾的經(jīng)鼻入腦的藥物傳遞系統(tǒng)”(申請(qǐng)?zhí)?006100230500. 2)公布了使用凝集素對(duì)載藥納米粒進(jìn)行了修飾后，能明顯延長(zhǎng)載藥系統(tǒng)在鼻黏膜上的滯留時(shí)間，提高經(jīng)鼻嗅區(qū)入腦藥物的含量。有研究采用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建攜帶融合報(bào)告基因的病毒將其導(dǎo)入鼻腔內(nèi)，然后利用其表達(dá)的蛋白通透嗅區(qū)，以解決半衰期短的問(wèn)題吳昊.PSSHG/NT4-GFP-Ant 重組腺相關(guān)病毒的構(gòu)建和體內(nèi)分泌表達(dá)大分子蛋白經(jīng)“鼻-腦”通路入腦的研究.吉林大學(xué)，碩士學(xué)位論文。但是以上方法容易引入多種異種蛋白質(zhì)形成抗原，從而產(chǎn)生潛在安全性問(wèn)題。脂質(zhì)體(liposomes)是一種由排列有序的脂質(zhì)雙分子層組成的單層或多層微囊。 脂質(zhì)體屬于膠體系統(tǒng)，具有類似細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，與細(xì)胞膜親和力強(qiáng)，可以增加被包封藥物透過(guò)細(xì)胞膜的能力。脂質(zhì)體生物相容性好，可實(shí)現(xiàn)藥物體內(nèi)靶向遞送，具有延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間、 增加藥物的體內(nèi)外穩(wěn)定性、降低藥物毒性，增強(qiáng)藥理作用等諸多優(yōu)點(diǎn)。利用脂質(zhì)體遞送藥物入腦的安全性較高。如專利“神經(jīng)生長(zhǎng)因子(FGF)脂質(zhì)體”(申請(qǐng)?zhí)?200410078378. X)公布了應(yīng)用逆相蒸發(fā)法制備的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(FGF)脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體鼻腔給藥后NGF腦內(nèi)濃度提高，半衰期延長(zhǎng)。脂質(zhì)體制備方法較多，但包括逆相蒸發(fā)法等大多數(shù)脂質(zhì)體制備方法較復(fù)雜，處理?xiàng)l件不利于保持激素、多肽、蛋白、基因或疫苗藥物的穩(wěn)定性，得到的脂質(zhì)體也不能保證高包封率且容易滲漏。冷凍干燥處理可以提高這類藥物穩(wěn)定性，但冷凍干燥處理過(guò)程較長(zhǎng)，并且冷凍干燥后的脂質(zhì)體粒徑會(huì)增大數(shù)倍，且無(wú)法有效控制，降低藥物經(jīng)鼻嗅區(qū)進(jìn)入腦內(nèi)的效率。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有的通過(guò)鼻嗅區(qū)通路實(shí)現(xiàn)腦內(nèi)藥物遞送的微粒載體的不足之處，提供一種新型液態(tài)脂質(zhì)微粒及其制劑，該液態(tài)脂質(zhì)微粒變形能力強(qiáng)、制備方法簡(jiǎn)便，藥物包封率高，有利于藥物通過(guò)鼻嗅區(qū)進(jìn)入腦內(nèi)，發(fā)揮療效。這種新型液態(tài)脂質(zhì)微粒適用藥物范圍廣，特別適合于激素、多肽、基因或疫苗藥物，可制成噴霧劑、滴鼻劑和凝膠劑等多種制劑，滿足腦部疾病藥物治療的需要。發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，已有報(bào)道的腦內(nèi)藥物遞送方法存在操作條件要求高、載藥量小、 適用藥物范圍窄、載體微粒穩(wěn)定性差等不足。而應(yīng)用自主研制的液態(tài)脂質(zhì)微粒載藥量大、放置穩(wěn)定性好，粒徑處于納米級(jí)，變形性好，具有較好的鼻黏膜滲透性，可以通過(guò)鼻嗅區(qū)通路將藥物遞送入腦。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，將液態(tài)脂質(zhì)微粒配合黏膜促滲劑可以提高藥物進(jìn)入腦內(nèi)的效率。由此，本發(fā)明的一種通過(guò)鼻嗅區(qū)通路實(shí)現(xiàn)腦內(nèi)藥物遞送的液態(tài)脂質(zhì)微粒，該液態(tài)脂質(zhì)微粒及其制劑中至少包含藥物、脂質(zhì)材料、促滲劑、羥乙基淀粉、丙二醇和水，藥物與脂質(zhì)材料的質(zhì)量比在1 1至1 10之間，丙二醇與水的體積比在2 1至1 10之間。
上述的藥物是指在腦部發(fā)揮治療、預(yù)防、免疫、診斷、造影應(yīng)用的中藥、化學(xué)藥物、 生物技術(shù)藥物、生物制品、診斷試劑、放射性或磁性物質(zhì)。上述的脂質(zhì)材料是指藥學(xué)公知的磷脂和類脂材料，包括膽固醇、天然卵磷脂、氫化磷脂、合成磷脂及其聚乙二醇修飾衍生物、碳數(shù)在10至30范圍內(nèi)的脂肪醇、脂肪酸或脂肪酸酯。上述的促滲劑為藥學(xué)上公知的黏膜促滲劑，包括乙醇、氮酮、表面活性劑、膽酸及其鹽、植物揮發(fā)油、精油、冰片或薄荷醇。上述的液態(tài)脂質(zhì)微粒及其制劑中可以包含藥學(xué)上公知的抗氧劑、抑菌劑、粘合劑、 PH調(diào)節(jié)劑或pH緩沖鹽、穩(wěn)定劑中的一種或幾種。一種上述液態(tài)脂質(zhì)微粒的制備方法，將藥物、脂質(zhì)材料和促滲劑共同溶解于丙二醇中，加入1-10倍丙二醇體積量的羥乙基淀粉的水溶液，形成載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒，可通過(guò)不同孔徑規(guī)格的濾膜進(jìn)一步加壓過(guò)濾，得到相應(yīng)粒徑范圍內(nèi)的納米粒子。上述的藥物可以通過(guò)藥學(xué)公知的固體分散體技術(shù)、冷凍干燥技術(shù)或微粉化工藝預(yù)處理，促進(jìn)藥物在丙二醇中的溶解。一種應(yīng)用上述的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備噴霧劑的方法，將所述載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒灌封于定量噴霧瓶中作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的噴霧劑。一種應(yīng)用上述的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備氣霧劑的方法，將所述載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒與拋射劑壓封于耐壓容器內(nèi)，作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的氣霧劑。一種應(yīng)用上述的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備凝膠劑的方法，將所述載藥脂質(zhì)體與凝膠基質(zhì)混合，充分混勻，封裝，作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的凝膠劑。上述的凝膠基質(zhì)為生物相容性或生物可降解的聚合物，包括纖維素衍生物、卡波姆、海藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、黃原膠、結(jié)冷膠(gellan gum)、瓊脂、卡拉膠(Carrageenan)、 聚維酮、泊洛沙姆、殼聚糖、乙烯聚合物、丙烯酸樹(shù)脂、聚乙烯醇、聚羧乙烯、液狀石蠟、聚氯乙烯、脂肪油、鋁皂、鋅皂。本發(fā)明的載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒及其制劑，具有下述優(yōu)點(diǎn)(1)液態(tài)脂質(zhì)微粒粒徑處于納米范圍，變形性好，載藥量大，形態(tài)圓整，不易聚集；(2)制備方法簡(jiǎn)便，無(wú)需冷凍干燥、 加熱蒸發(fā)、高壓均質(zhì)等處理過(guò)程，藥物穩(wěn)定性高；C3)藥物可以繞過(guò)血腦屏障進(jìn)入腦內(nèi)，避免體內(nèi)首過(guò)效應(yīng)；(4)處方中的丙二醇既起到溶媒作用，又參與脂質(zhì)微粒組成，還發(fā)揮防凍、抑菌、促進(jìn)藥物吸收的作用；(5)處方中的羥乙基淀粉，有利于脂質(zhì)微粒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，保持粒徑均勻，延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間；(6)液態(tài)脂質(zhì)微粒包載藥物范圍廣，尤其適合于分子量大的蛋白、多肽、基因或疫苗藥物；(7)在腦部發(fā)揮速釋和長(zhǎng)效雙重作用，滿足腦部疾病的治療需要。
具體實(shí)施方式現(xiàn)結(jié)合下列實(shí)例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明。實(shí)施例1 許多中藥植物如千層塔、益智仁、遠(yuǎn)志、人參、芹菜籽、紅花等含有治療腦中風(fēng)、老年癡呆的有效成分。但由于湯劑、片劑、膠囊、注射劑等普通中藥制劑缺乏腦選擇性，應(yīng)用時(shí)毒副作用大，治療效果差。本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案以千層塔植物生物堿有效成分石杉?jí)A甲為主藥，乙醇和吐溫80為促滲劑，利用天然磷脂材料大豆磷脂和膽固醇為主要脂質(zhì)材料制備液態(tài)脂質(zhì)微粒。石杉?jí)A甲的標(biāo)記參考文獻(xiàn)石森林，徐蓮英，吳瑾瑾等.燈盞花素不同給藥途徑腦內(nèi)藥物分布的比較.藥學(xué)學(xué)報(bào).2009，44 (5) :515 □ 518，應(yīng)用Na]125I標(biāo)記石杉?jí)A甲制成 125I-石杉?jí)A甲。石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒的制備膽固醇8mg溶于1，2_丙二醇aiil中，加熱至80°C全部溶解，冷至室溫，加入125I-石杉?jí)A甲5mg、大豆磷脂20mg、吐溫80 (表面活性劑)2mg和乙醇1ml，溶解，形成澄明溶液，冷至室溫，加入2%羥乙基淀粉(型號(hào)130/0. 4) 水溶液7ml，混勻，制成包載125I-石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒。石杉?jí)A甲的普通脂質(zhì)體制備逆相蒸發(fā)法制備石杉?jí)A甲的普通脂質(zhì)體，將大豆磷脂20mg、膽固醇8mg、吐溫80 (表面活性劑)2mg加3ml氯仿使溶解，再加入7ml乙醚，然后加入IOml含125I-石杉?jí)A甲5mg的0. lmol/L鹽酸水溶液，浴式超聲使形成均一單相體系， 減壓蒸發(fā)去除氯仿和乙醚至凝膠形成，繼續(xù)減壓蒸發(fā)10分鐘，渦旋振蕩至水性懸濁液即脂質(zhì)體形成。微觀形態(tài)和粒徑分析取Iml新制備的包載125I-石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒，室溫放置，并于0h、0. 5h、lh、24h應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察微觀形態(tài)，應(yīng)用庫(kù)爾特粒徑分析儀測(cè)定粒徑。包封率測(cè)定=125I-石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒，室溫放置，并于0h、0. 5hUh,24h分別取Iml上樣于kphadex G_50凝膠柱，以蒸餾水為洗脫液，接取不同體積的洗脫部分，分離接收包載125I-石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒的洗脫部分，冷凍干燥，凍干粉用乙醇溶解，用 Y-計(jì)數(shù)器測(cè)定溶液的放射性計(jì)數(shù)，然后換算成樣品中相應(yīng)的125I-石杉?jí)A甲含量。利用“包封率(％)=[(液態(tài)脂質(zhì)微粒中121-石杉?jí)A甲的量)/125I-石杉?jí)A甲的總量]X100”公式計(jì)算125I-石杉?jí)A甲的包封率。同法測(cè)定石杉?jí)A甲的普通脂質(zhì)體的包封率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，對(duì)比包載石杉?jí)A甲的普通脂質(zhì)體，本發(fā)明的包載石杉?jí)A甲的液態(tài)脂質(zhì)微粒粒徑在納米范圍內(nèi)，無(wú)聚團(tuán)和藥物結(jié)晶析出，藥物包封率高，放置24h無(wú)顯著變化，說(shuō)明其穩(wěn)定性高。表1包載125I-石杉?jí)A甲的脂質(zhì)微粒的微觀形態(tài)和粒徑分析結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種經(jīng)嗅區(qū)通路遞送腦內(nèi)藥物的液態(tài)脂質(zhì)微粒，其特征在于該液態(tài)脂質(zhì)微粒中至少包含藥物、脂質(zhì)材料、促滲劑、羥乙基淀粉、丙二醇和水，藥物與脂質(zhì)材料的質(zhì)量比在 1 1至1 10之間，丙二醇與水的體積比在2 1至1 10之間。
2.如權(quán)利要求1所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒，其特征在于所述的藥物是指在腦部發(fā)揮治療、 預(yù)防、免疫、診斷、造影應(yīng)用的中藥、化學(xué)藥物、生物技術(shù)藥物、生物制品、診斷試劑、放射性或磁性物質(zhì)。
3.如權(quán)利要求1所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒，其特征在于所述的脂質(zhì)材料是指藥學(xué)公知的磷脂和類脂材料，包括膽固醇、天然卵磷脂、氫化磷脂、合成磷脂及其聚乙二醇修飾衍生物、 碳數(shù)在10至30范圍內(nèi)的脂肪醇、脂肪酸或脂肪酸酯。
4.如權(quán)利要求1所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒，其特征在于所述的促滲劑為藥學(xué)上公知的黏膜促滲劑，包括乙醇、氮酮、表面活性劑、膽酸及其鹽、植物揮發(fā)油、精油、冰片或薄荷醇。
5.如權(quán)利要求1所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒，其特征在于所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒及其制劑中包含藥學(xué)上公知的抗氧劑、抑菌劑、粘合劑、PH調(diào)節(jié)劑或pH緩沖鹽、穩(wěn)定劑中的一種或幾種。
6.一種如權(quán)利要求1 5所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒的制備方法，其特征在于將藥物、脂質(zhì)材料和促滲劑共同溶解于丙二醇中，加入1-10倍丙二醇體積量的羥乙基淀粉的水溶液，形成載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒，通過(guò)不同孔徑規(guī)格的濾膜進(jìn)一步加壓過(guò)濾，得到相應(yīng)粒徑范圍內(nèi)的納米粒子。
7.如權(quán)利要求6所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備方法，其特征在于所述的藥物可以通過(guò)藥學(xué)公知的固體分散體技術(shù)、冷凍干燥技術(shù)或微粉化工藝預(yù)處理，促進(jìn)藥物在丙二醇中的溶解。
8.一種應(yīng)用如權(quán)利要求6所述的制備方法制備所得的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備噴霧劑或氣霧劑的方法，其特征在于將所述載藥液態(tài)脂質(zhì)微粒灌封于定量噴霧瓶中作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的噴霧劑，或?qū)⑺鲚d藥液態(tài)脂質(zhì)微粒與拋射劑壓封于耐壓容器內(nèi)，作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的氣霧劑。
9.一種應(yīng)用如權(quán)利要求6所述的制備方法制備所得的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備凝膠劑的方法，其特征在于將所述載藥脂質(zhì)體與凝膠基質(zhì)混合，充分混勻，封裝，作為鼻嗅區(qū)應(yīng)用的凝膠劑。
10.如權(quán)利要求9所述的液態(tài)脂質(zhì)微粒制備凝膠劑的應(yīng)用方法，其特征在于所述的凝膠基質(zhì)為生物相容性或生物可降解的聚合物，包括纖維素衍生物、卡波姆、海藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、黃原膠、結(jié)冷膠、瓊脂、卡拉膠、聚維酮、泊洛沙姆、殼聚糖、乙烯聚合物、丙烯酸樹(shù)脂、聚乙烯醇、聚羧乙烯、液狀石蠟、聚氯乙烯、脂肪油、鋁皂、鋅皂。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種通過(guò)鼻嗅區(qū)通路實(shí)現(xiàn)腦內(nèi)藥物遞送的液態(tài)脂質(zhì)微粒、制備方法及其制劑，該液態(tài)脂質(zhì)微粒中至少包含藥物、脂質(zhì)材料、促滲劑、羥乙基淀粉、丙二醇和水，藥物與脂質(zhì)材料的質(zhì)量比在1∶1至1∶10之間，丙二醇與水的體積比在2∶1至1∶10之間。該液態(tài)脂質(zhì)微粒載藥量大、變形能力強(qiáng)、制備方法簡(jiǎn)便，藥物包封率高，有利于藥物通過(guò)鼻嗅區(qū)進(jìn)入腦內(nèi)，發(fā)揮療效。該液態(tài)脂質(zhì)微粒適用藥物范圍廣，特別適合于激素、多肽、基因或疫苗藥物，可制成噴霧劑、滴鼻劑和凝膠劑等多種制劑，滿足腦部疾病藥物治療的需要。
文檔編號(hào)A61K49/18GK102370623SQ20101025182
公開(kāi)日2012年3月14日 申請(qǐng)日期2010年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月6日
發(fā)明者趙子逸, 趙應(yīng)征, 魯翠濤 申請(qǐng)人:魯翠濤