專利名稱：含丹參、三七有效部位組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含丹參、三七有效部位組合物及其制備方法；以及該有效部位組合物 制備的藥物在防治心腦血管疾病、老年癡呆癥、腦梗塞、腦缺血及其由腦缺血引起的其他各 種疾病藥物中應(yīng)用，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心血管病是中老年人易患的常見病和多發(fā)病，嚴(yán)重危害著人類的健康。其中我國 的冠心病所發(fā)病例，每年超過100萬人，并且冠心病發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。據(jù)流行病 學(xué)研究表明，我國人群心血管病的死亡率在人口總死亡中約占40%。隨著我國人口老齡化 趨勢的加劇，老年心血管病日益突出，并成為致殘致死的首要原因，日益嚴(yán)重地威脅著人類 的健康和生命，因此對心血管病尤其冠心病的治療防治研究，是社會和醫(yī)學(xué)界關(guān)注的熱點 和難點之一，具有很好的開發(fā)前景。目前市場上治療同類疾病的制劑都沒有解決服用量大、生物利用度低、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 可控性不好、有效成分不能有效利用等問題，其工藝基本上都是傳統(tǒng)的技術(shù)，沒有什么新的 技術(shù)引進(jìn)，無法占有足夠的市場，更難以打開國際市場。因此，有必要深入研究含丹參、三七 有效部位及開發(fā)有效部位組合物制劑，從而為臨床上提供一種療效更好、更方便、質(zhì)量可 控、安全可靠的中藥有效部位復(fù)方制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是采用現(xiàn)代先進(jìn)的提取、大孔樹脂純化分離技術(shù)、制劑技術(shù)以及質(zhì) 量控制技術(shù)，制備一種成本低、藥效高、無毒副作用的治療心血管疾病的中藥制劑——含丹 參、三七有效部位組合物制劑及其制備方法。本發(fā)明公開含丹參、三七有效部位組合物具有 較好的抗心肌缺血作用，并有一定的抗血栓形成和抗凝血作用；其能通過降低心肌耗氧、改 善心肌供血供氧、提高心肌對缺血缺氧的耐受性、對抗心肌缺血時心肌組織的過氧化、改善 血液流變學(xué)的作用以及對凝血功能的影響等途徑發(fā)揮的功效。一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸10-99份 丹參酮0-50份三七總皂苷10-99份 降香總黃酮0-50份降香油總萜0-20份。一種含丹參、三七有效部位組合物的制備方法，其制備方法包括以下步驟A、重量份含量50%以上丹參總酚酸的制備方法將丹參藥材水提液經(jīng)大孔吸附 樹脂精制，先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥即得。B、重量份含量50%以上丹參酮的制備方法丹參藥材水提液，減壓濃縮，加水沉 淀，干燥既得。C、重量份含量50%以上三七總皂苷的制備方法三七藥材水提液上大孔吸附樹 脂柱，先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮，干燥即
3得。D、重量份含量50%以上降香油揮發(fā)性總萜的制備方法降香藥材切斷，加水浸 泡，水蒸氣蒸餾，收集餾分，用無水硫酸鈉干燥，即得。E、重量份含量50%以上降香總黃酮的制備方法降香藥材醇提液，濃縮，加水定 容，上大孔吸附樹脂柱，水洗，乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮干燥既得。F、將上述提取物混合，分裝即得。該有效部位組合物制劑的劑型可以是片劑、膠囊劑、口服液、注射劑、粉針劑、經(jīng)皮 吸收制劑、粘膜吸收制劑。一種含丹參、三七有效部位組合物的用途在于用于防治心腦血管疾病、老年癡呆 癥、腦梗塞、腦缺血及其由腦缺血引起的其他各種疾病。鑒于藥物劑型和生產(chǎn)使用的需要，可以在上述配方的基礎(chǔ)上合理添加填充劑、賦 形劑、PH值調(diào)節(jié)劑、矯味劑、助溶劑、抗氧劑等藥用輔料，以滿足藥物生產(chǎn)和使用。以下是對發(fā)明所選擇的中藥提取物進(jìn)行介紹丹參總酚酸具有顯著擴(kuò)張冠狀動脈，增加冠脈血流量，降低心肌耗氧量，減慢心 率，增加心肌收縮力，降低中性脂肪，延長小鼠耐缺氧時間，減輕缺氧引起的心肌損傷，促進(jìn) 心肌再生，抑制ADP誘導(dǎo)血小板凝集、抑制血小板TXA2的合成與釋放縮血管物質(zhì)及促進(jìn)纖 維蛋白降解作用；丹參酮具有抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，抑制血管內(nèi)膜增生，改善冠狀動 脈，縮小心肌梗塞面積，減輕心肌缺血再灌注損傷，防止心肌肥厚，抗心率失常，減輕腦缺 血缺氧損傷，防治再灌注損傷，抗血栓形成、抗血小板聚集，制心和腦微粒體Na+，K+-ATP酶 Na+, K+-ATP酶與正性肌力作用以及抗炎抗菌抗腫瘤等作用；三七總皂苷具有具有提高機(jī)體對缺氧的耐受力，抑制血小板聚集，改善心肌缺血、 抗心率失常、降血脂、降血壓、抗血栓、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜等作用；降香揮發(fā)油具有提高血小板cAMP含量，具有抑制血栓形成的作用，能抗心肌缺血 和增加冠脈流量，其中橙花叔醇、氧化橙花叔醇等揮發(fā)性萜類是降香油的主要活性成分；降 香總黃酮具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌和松弛血管等作用。本發(fā)明公開含丹參、三七有效部位組合物具有較好的抗心肌缺血作用，并有一定 的抗血栓形成和抗凝血作用；其能通過降低心肌耗氧、改善心肌供血供氧、提高心肌對缺血 缺氧的耐受性、對抗心肌缺血時心肌組織的過氧化、改善血液流變學(xué)的作用以及對凝血功 能的影響等途徑發(fā)揮的功效。
具體實施例方式實施例1一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸10份 丹參酮20份 三七總皂苷10份降香總黃酮50份 降香油總萜10份。一種含丹參、三七有效部位組合物的制備方法，其制備方法包括以下步驟A、重量份含量50%以上丹參總酚酸的制備方法將丹參藥材水提液經(jīng)大孔吸附 樹脂精制，先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥即得。B、重量份含量50%以上丹參酮的制備方法丹參藥材水提液，減壓濃縮，加水沉淀，干燥既得。C、重量份含量50%以上三七總皂苷的制備方法三七藥材水提液上大孔吸附樹 脂柱，先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮，干燥即得。D、重量份含量50%以上降香油揮發(fā)性總萜的制備方法降香藥材切斷，加水浸 泡，水蒸氣蒸餾，收集餾分，用無水硫酸鈉干燥，即得。E、重量份含量50%以上降香總黃酮的制備方法降香藥材醇提液，濃縮，加水定 容，上大孔吸附樹脂柱，水洗，乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮干燥既得。F、將上述提取物混合，分裝即得。該有效部位組合物制劑的劑型可以是片劑、膠囊劑、口服液、注射劑、粉針劑、經(jīng)皮 吸收制劑、粘膜吸收制劑。一種含丹參、三七有效部位組合物的用途在于用于防治心腦血管疾病、老年癡呆 癥、腦梗塞、腦缺血及其由腦缺血引起的其他各種疾病。實施例2一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸50份 三七總皂苷50份降香總黃酮10份 降香油總萜20份。其制備方法和用途與實施例1 一致。實施例3一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸99份 丹參酮20份 三七總皂苷99份降香油總萜20份。其制備方法和用途與實施例1 一致。實施例4一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸50份 丹參酮20份 三七總皂苷99份降香總黃酮20份。其制備方法和用途與實施例1 一致。實施例5一種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸99份 三七總皂苷50份。其制備方法和用途與實施例1 一致。實施例6—種含丹參、三七有效部位組合物，所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸10份 三七總皂苷99份降香油總萜10份。其制備方法和用途與實施例1 一致。本發(fā)明效果見如下實驗例實驗例1 冠心丹參有效部位組合物對垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血作用的影
5響實驗分組與劑量設(shè)計，實驗動物隨機(jī)分為6組①模型動物組實驗動物10只。每日灌服0. 25 % CMC (溶劑對照)，lml/100g體
重，連續(xù)5天。②陽性藥冠心丹參片高劑量組實驗動物10只。每日灌服冠心丹參片80mg/100g 體重，連續(xù)5天。③陽性藥冠心丹參片中劑量組實驗動物10只。每日灌服冠心丹參片40mg/100g 體重，連續(xù)5天。④含丹參、三七有效部位組合物高劑量組實驗動物10只。每日灌服含丹參、三七 有效部位組合物80mg/100g體重，連續(xù)5天。⑤含丹參、三七有效部位組合物中劑量組實驗動物10只。每日含丹參、三七有效 部位組合物40mg/100g體重，連續(xù)5天。⑥含丹參、三七有效部位組合物低劑量組實驗動物10只。每日含丹參、三七有效 部位組合物20mg/100g體重，連續(xù)5天。實驗步驟，末次給藥1小時后，用25%的烏拉坦(4ml/kg)，腹腔麻醉，仰位固定于 鼠臺上，用心電圖機(jī)標(biāo)II導(dǎo)聯(lián)。電壓定標(biāo)Imv= 10mm，紙速50mm/s。測得給藥前的心電圖。 然后尾靜脈注射垂體后葉素(lU/kg)，要求5S內(nèi)注射完畢。立即記錄0S、15S、30S、lmin、 3min、5min、10min時的心電圖。測量給垂體后葉素前后J點(大鼠ST段不明顯，故以J點 的變化表示ST段的變化)高度，計算位移變化的絕對值(AJ)，同時測量給垂體后葉素前以 及給垂體后葉素后30秒內(nèi)T波高度，計算變化值(Δ T)，進(jìn)行t檢驗；記錄各組發(fā)生心律失 常的動物數(shù)和給垂體后葉素后30秒后T波的異常率(高聳、雙向、倒置、低平均為異常)，進(jìn) 行X2檢驗。實驗結(jié)果見表1、2表1含丹參、三七有效部位組合物對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血的影響(ΔΤ 波變化，I±SD，n = 10)
A 、，Θ 給pit后T波變化(ΔΤ波，mv)或異常(倒置、高聳、雙向、低平均為異常) 1 且劑I例數(shù)
力,J15s30sImin3min5minIOmin含丹高0.11士0.05***0.09±0.03***2**1 **0參,三中0.16 士 0.08*0.13±0.04**1 **0七有效部 位組低0.23±0.130.21±0.07*62**1合物陽性高0.13±0.05**0.11±0.03***2****0藥冠心丹中0.20±0.09*0.16±0.07*5*3**ι**0參片模型 組一0.41 士 0.120.35±0.1010993
*P < 0. 05，**P < 0. 01與空白對照組比較表2含丹參、三七有效部位組合物對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血損傷的影響 (心律失常發(fā)生例數(shù)，X±SD，n= 10)

*，**，與空白組比較，ρ < 0. 05，ρ < 0. 01含丹參、三七有效部位組合物各劑量組對垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血J點 變化和T波變化有顯著對抗作用，與模型對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0. 05或ρ < 0. 01)， 并有一定劑量相關(guān)性；含丹參、三七有效部位組合物各劑量組可不同程度的對抗垂體后葉 素(Pit)所致大鼠心律失常(主要表現(xiàn)為房室傳導(dǎo)阻滯和室性早搏)。其中含丹參、三七有 效部位組合物中劑量組的發(fā)生率為30%，與空白對照組比較ρ <0. 05，冠心丹參有效部位 群高劑量組的發(fā)生率為0 %，與模型組比較ρ < 0. 01，冠心丹參片相應(yīng)劑量組亦能對抗垂體 后葉素(Pit)所致大鼠心電圖J點變化、T波變化和心律失常，同劑量相比，其作用弱于含 丹參、三七有效部位組合物，但組間無統(tǒng)計學(xué)意義，這些結(jié)果均提示含丹參、三七有效部位 組合物具有對抗垂體后葉素引起的急性心肌缺血作用，其功效稍強(qiáng)于冠心丹參片。實施例2 含丹參、三七有效部位組合物對麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞的影響實驗 分組，實驗動物隨機(jī)分為6組 ①模型動物組實驗動物6只。②陽性藥冠心丹參片高劑量組實驗動物6只。③陽性藥冠心丹參片中劑量組實驗動物6只。④含丹參、三七有效部位組合物高劑量組實驗動物6只。⑤含丹參、三七有效部位組合物中劑量組實驗動物6只⑥含丹參、三七有效部位組合物低劑量組實驗動物6只。實驗步驟，動物經(jīng)戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈麻醉，氣管插管，連接SC-3型電動 呼吸機(jī)；左側(cè)第4、5肋間開胸，暴露心臟，剪開心包，做心包床；分離冠狀動脈左側(cè)前降支中 段下1/2處，穿線以備結(jié)扎用，結(jié)扎后，結(jié)扎線以下心肌立刻出現(xiàn)黑紫，表明結(jié)扎成功，即造 成急性心肌缺血模型；縫制多點固定式心外膜電極，描記心外膜電圖。結(jié)扎冠脈前及后15 分鐘后進(jìn)行記錄，作為給藥前對照值，十二指腸給予實驗藥物或生理鹽水，于給藥后15、30、 60、120、180、240分鐘記錄30個標(biāo)測點心外膜電圖，以S-T段升高大于2mv為判斷標(biāo)準(zhǔn)， 以此計算心肌缺血程度(s-τ段升高總mv數(shù)Σ -ST)及心肌缺血程度(S-T段升高總點數(shù) N-ST)，并于給藥后60min、120min、180min、240min于冠脈竇取血，分離血清分別測CK、LDH 含量。實驗結(jié)束后，立即取下心臟，生理鹽水沖洗，稱量全心重，在心臟結(jié)扎線以下，平行于 冠狀溝均勻地將心室部分橫斷切成5片，然后，置于硝基四氮唑(N-BT)染液中，37°C水浴染
7色15分鐘。稱重每片心肌雙側(cè)的梗死區(qū)(N-BT染色區(qū))的重量。計算梗塞區(qū)占心室及占 心臟重量的百分比。實驗結(jié)果1.含丹參、三七有效部位組合物對犬急性心肌梗死范圍(N-BT染色法)的影響含丹參、三七有效部位組合物高、中兩個劑量組能明顯縮小心肌梗死范圍。以 N-BT染色法顯示心肌梗死范圍，模型對照組梗塞區(qū)分別占心室及心臟重量的34. 2士4. 5% 和21. 3士3. 3 %，含丹參、三七有效部位組合物高劑量組梗塞區(qū)分別占心室及心臟的 15. 8 士 3. 4%和9.8士2.1%，與模型對照組比較P < 0.01 ；含丹參、三七有效部位組合 物中劑量組梗塞區(qū)分別占心室及心臟的23. 9 士 4. 1 %和16. 4 士 1. 9 %，與模型對照組比 較P < 0.05 ；冠心丹參片中、高劑量組也能明顯縮小心肌梗死范圍，與模型對照組比較P <0. 05，同劑量相比，冠心丹參片作用弱于含丹參、三七有效部位組合物，但同劑量組間比 較無統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)果見表3。
表3含丹參、三七有效部位組合物對冠脈結(jié)扎犬心肌梗死范圍的影響
(I 土 SD, n=6) 與空白組比較*P < 0. 05 **P < 0. 01 ***P < 0. 0012.含丹參、三七有效部位組合物對急性心肌梗死犬心肌血清酶CPK、LDH的影響與模型對照組比較，含丹參、三七有效部位組合物高、中劑量組與冠心丹參片高、 中劑量組對血清酶CPK、LDH均能明顯顯抑制冠脈結(jié)扎犬血清CPK及LDH活性的升高；但同 劑量的含丹參、三七有效部位組合物作用優(yōu)于冠心丹參片，但同劑量組間比較無統(tǒng)計學(xué)意 義。表4、5。表4冠心丹參有效部位群對冠脈結(jié)扎犬血清肌酸磷酸激酶(CK)的影響(U/ πι1)(Φ>χ士SD，η=6) *p < 0. 05，**p < 0.01 與對照組比較表5含丹參、三七有效部位組合物對冠脈結(jié)扎犬血清乳酸脫氫酶(LDH)的影響(U/ 1) (Φ>χ士SD，η=6) *p < 0. 05，**p < 0.01 與對照組比較3.含丹參、三七有效部位組合物對冠脈結(jié)扎犬心外膜電圖的影響含丹參、三七有效部位組合物經(jīng)十二指腸給藥對冠狀動脈結(jié)扎犬心肌缺血有明顯 改善作用，表現(xiàn)為含丹參、三七有效部位組合物高、中劑量組與冠心丹參片高、中劑量組給 藥后心外膜電圖ST段偏移總合(Σ -ST)及ST移位超過2mv導(dǎo)聯(lián)數(shù)(N-ST)的變化與模型 對照組比較有顯著差異(P <0.05或0.01或0.001)；同劑量相比，冠心丹參片作用弱于含 丹參、三七有效部位組合物，但組間無統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)果見表6、7。表6含丹參、三七有效部位組合物對實驗性急性心肌缺血犬心肌缺血程度的影響 (E-ST)(J±SD，n:6) 與空白組比較< 0. 05 林P < 0. 01 < 0. 001表7冠心丹參有效部位群對實驗性急性心肌缺血犬心肌缺血程度的影響 (N-ST)(叉士 SD, n:6)
11 與空白組比較*P < 0. 05 **P < 0. 01實施例3含丹參、三七有效部位組合物對小鼠常壓耐缺氧作用的影響實驗分組與劑量設(shè)計，實驗動物隨機(jī)分為6組①模型動物組實驗動物10只。每日灌服0. 25% CMC (溶劑對照)，lml/100g體
重，連續(xù)5天。②陽性藥冠心丹參片高劑量組實驗動物10只。每日灌服冠心丹參片80mg/100g 體重，連續(xù)5天。③陽性藥冠心丹參片中劑量組實驗動物10只。每日灌服冠心丹參片40mg/100g 體重，連續(xù)5天。④含丹參、三七有效部位組合物高劑量組實驗動物10只。每日灌服含丹參、三七 有效部位組合物80mg/100g體重，連續(xù)5天。⑤含丹參、三七有效部位組合物中劑量組實驗動物10只。每日含丹參、三七有效 部位組合物40mg/100g體重，連續(xù)5天。⑥含丹參、三七有效部位組合物低劑量組實驗動物10只。每日含丹參、三七有效 部位組合物20mg/100g體重，連續(xù)5天。實驗步驟，末次給藥后1小時后將小鼠分別移入底部盛有15g鈉石灰的150ml廣 口瓶中，加蓋密封。觀察其呼吸停止即死亡所用時間，進(jìn)行t檢驗。另取6組小鼠同上，分組和給藥同上，末次給藥后1小時，各組動物分別尾靜脈注 射給予鹽酸異丙腎上腺素2mg/kg，并立即放入廣口瓶內(nèi)密封。觀察方法同前。實驗結(jié)果經(jīng) 統(tǒng)計學(xué)處理，作t檢驗判斷顯著性。實驗結(jié)果表明，含丹參、三七有效部位組合物各劑量組均能顯著延長常壓耐缺氧 動物的存活時間(P <0.05或0.01)；同時含丹參、三七有效部位組合物各劑量組劑量組也能明顯延長給予異丙腎上腺素小鼠常壓耐缺氧存活時間(P < 0. 05或0. 01)，提示含丹參、 三七有效部位組合物具有調(diào)節(jié)異丙腎上腺素增加心肌耗氧量的作用；冠心丹參片亦有此功 效，結(jié)果見表8。表8含丹參、三七有效部位組合物對常壓耐缺氧小鼠存活時間的影響 0· 5% CMC 比 *P < 0· 05 **P < 0· 01 ；與0. 5% CMC+異丙腎比 #P < 0. 05，##P < 0. 0權(quán)利要求
一種含丹參、三七有效部位組合物，其特征在于所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸10 99份丹參酮0 50份三七總皂苷10 99份降香總黃酮0 50份降香油總萜0 20份。
2.一種含丹參、三七有效部位組合物的制備方法，其特征在于其制備方法包括以下步驟A、重量份含量50%以上丹參總酚酸的制備方法將丹參藥材水提液經(jīng)大孔吸附樹脂 精制，先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥即得；B、重量份含量50%以上丹參酮的制備方法丹參藥材水提液，減壓濃縮，加水沉淀，干 燥既得；C、重量份含量50%以上三七總皂苷的制備方法三七藥材水提液上大孔吸附樹脂柱， 先用水洗脫，棄掉水洗液，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮，干燥即得；D、重量份含量50%以上降香油揮發(fā)性總萜的制備方法降香藥材切斷，加水浸泡，水 蒸氣蒸餾，收集餾分，用無水硫酸鈉干燥，即得；E、重量份含量50%以上降香總黃酮的制備方法降香藥材醇提液，濃縮，加水定容，上 大孔吸附樹脂柱，水洗，乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮干燥既得；F、將上述提取物混合，分裝即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含丹參、三七有效部位組合物，其特征在于該有效部位組合 物制劑的劑型可以是片劑、膠囊劑、口服液、注射劑、粉針劑、經(jīng)皮吸收制劑、粘膜吸收制劑。
4.一種如權(quán)利要求1所述的含丹參、三七有效部位組合物的用途，其特征在于用于防 治心腦血管疾病、老年癡呆癥、腦梗塞、腦缺血及其由腦缺血引起的其他各種疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及含丹參、三七有效部位組合物及其制備方法；以及該有效部位組合物制備的藥物在防治心腦血管疾病、老年癡呆癥、腦梗塞、腦缺血及其由腦缺血引起的其他各種疾病藥物中應(yīng)用，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。所用藥材組份重量配比為丹參總酚酸10-99份、丹參酮0-50份、三七總皂苷10-99份、降香總黃酮0-50份、降香油總萜0-20份。本發(fā)明公開含丹參、三七有效部位組合物具有較好的抗心肌缺血作用，并有一定的抗血栓形成和抗凝血作用；對抗心肌缺血時心肌組織的過氧化、改善血液流變學(xué)的作用以及對凝血功能的影響等途徑發(fā)揮的功效。
文檔編號A61P9/10GK101912441SQ20101025645
公開日2010年12月15日 申請日期2010年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月18日
發(fā)明者張愛玲, 楊世林, 王金錢, 簡暉, 胡宏輝, 范玫玫, 錢霞, 魏惠珍 申請人:江西本草天工科技有限責(zé)任公司