專利名稱：一種治療癌癥的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是一種治療癌癥的藥物組合物。
背景技術：
惡性腫瘤是人類生命健康的頭號殺手。腫瘤需要功能性的血管網(wǎng)絡提供氧氣、養(yǎng) 料并清除代謝產(chǎn)物。腫瘤除了通過與宿主血管融合而獲得部分血管外，還必須通過形成新 生血管網(wǎng)構建自己的血管系統(tǒng)，這樣才能持續(xù)地生長和發(fā)展。如果沒有血管系統(tǒng)提供氧氣 和養(yǎng)料，實體瘤的增長不會超過1mm3。鑒于其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的重要作用，腫瘤血管已 成為抗腫瘤治療的一個重要靶點。血管內皮生長因子(fvascular endothelial growth fact or, VEGF)可直接作用 于血管內皮細胞，刺激其發(fā)生有絲分裂。VEGF的過度表達已被證實與腫瘤的進展相關，且在 不同類型的腫瘤，如鼻咽癌和多發(fā)性骨髓瘤中均是預后不良的相關分子指標。此外，在結直 腸癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌和黑色素瘤中也起著重要作用。VEGF是目前所 知作用最強的促血管生長因子，還是最強的增加血管通透性的因子，它主要與內皮細胞上 的兩種受體Fh-l、Flk-2結合發(fā)揮促進內皮細胞的分裂增殖、遷移和血管重建的作用。由于 VEGF在血管新生中發(fā)揮主導性的作用，因此多數(shù)研究將VEGF或其受體作為治療的靶點。盡管抗血管生成藥物已取得一定的成功，但仍面臨許多問題。與其他多數(shù)治療方 案一樣，在臨床試驗及動物腫瘤模型中抗血管生成藥物很少達到持續(xù)完全的療效，幾乎都 會出現(xiàn)藥物抵抗現(xiàn)象，尤其是在動物腫瘤模型中抗VEGFR治療方案出現(xiàn)初期有效、后期無 效的狀況?？寡苌伤幬锇l(fā)生藥物抵抗的具體機制尚不清楚，可能與抗血管生成藥物的 持續(xù)作用使腫瘤產(chǎn)生持續(xù)性低氧和營養(yǎng)缺乏有關，低氧和營養(yǎng)缺失均能刺激自噬啟動，使 腫瘤細胞通過自噬對胞內物質的降解和循環(huán)利用而改變新陳代謝，從而對應激作出適應性 反應而得以生存。研究證實抑制自噬能提高營養(yǎng)缺乏和乏氧導致的細胞凋亡。因此自噬的 激活為腫瘤在低氧和營養(yǎng)缺失情況下作出的適應性改變(如重新產(chǎn)生各種血管生成因子， 促進血管生成)贏得了時間。安維汀(Avastin)是一種重組單克隆抗VEGF抗體，由瑞士制 藥商羅氏公司(ROCHE)研發(fā)，于2004年3月獲得了美國F DA批準上市，可與VEGF各種亞 型結合，能抑制VEGF介導的腫瘤血管生成，所以是一種抗血管生成藥物。氯喹是一種抗瘧 疾藥，目前被證實是一種自噬抑制劑。但至今未見將安維汀和氯喹組成藥物組合物用于治 療癌癥的報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供一種治療癌癥的藥物組合物，由抗血管生成藥物和自噬抑制劑組成， 所說的抗血管生成藥物為安維汀；自噬抑制劑為氯喹。藥物組合物是臨用時按安維汀和氯 喹各自的給藥劑量混合而成，它們給藥劑量按體重計算分別為安維汀7. 6mg/kg氯喹60mg/kg
使用時將安維汀和氯喹按給藥劑量混合，用生理鹽水稀釋到200 μ 1，然后按常規(guī) 通過腹膜內注射給藥。動物實驗結果表明，本發(fā)明藥物組合物能夠明顯抑制皮膚癌、肝癌細胞在小鼠體 內的生長，種植瘤體積及重量減少顯著，抑制腫瘤效果明顯高于單獨使用安維汀或氯喹。本發(fā)明藥物組合物制備方法簡單，使用方便，治療腫瘤的效果好。


圖1.本發(fā)明藥物組合物對皮膚癌細胞種植瘤小鼠體重的影響比較圖。圖2.本發(fā)明藥物組合物抑制小鼠皮膚癌細胞種植瘤的生長比較圖。圖3.本發(fā)明藥物組合物抑制小鼠皮膚癌細胞種植瘤的增殖比較圖。圖4.本發(fā)明藥物組合物對肝癌細胞種植瘤小鼠體重的影響比較圖。圖5.本發(fā)明藥物組合物抑制小鼠肝癌細胞種植瘤生長比較圖。圖6.本發(fā)明藥物組合物抑制小鼠肝癌細胞種植瘤增殖比較圖。
具體實施例方式現(xiàn)結合實施例和附圖對本發(fā)明作詳細描述。實施例1.制備本發(fā)明藥物組合物安維汀(Roche公司，批號S20100023)，用生理鹽水配制成一定濃度的安維汀溶 液；氯喹(SIGMA公司.批號C6628-25G)，用生理鹽水配制成一定濃度的氯喹溶液；
根據(jù)體重按給藥劑量安維汀7. 6mg/kg+氯喹60mg/kg將安維汀溶液和氯喹溶液于 臨用前混合即成。動物實驗實驗1.本發(fā)明藥物組合物對小鼠黑色素瘤療效觀察實驗60只C57小鼠，由第二軍醫(yī)大學動物實驗中心提供(下同)，雄性，平均體重 20g,隨機分成六組，每組10只，按常規(guī)腋下接種小鼠黑色素瘤細胞B16，接種量2X106個 /200 μ 1，接種9天后，種植瘤長至約150立方毫米，第10天開始給藥處理。空白對照組種植瘤成瘤后，小鼠不接受任何給藥處理。生理鹽水組腹膜內注射生理鹽水200 μ 1，每天一次，連續(xù)注射10天；安維汀組按小鼠體重給藥，安維汀給藥劑量為7. 6mg/kg，所需安維汀用生理鹽 水稀釋到200μ 1，腹膜內注射，每天一次，連續(xù)給藥10天。氯喹組按小鼠體重給藥，氯喹給藥劑量為60mg/kg，所需氯喹用生理鹽水稀釋到 200 μ 1，每天一次，連續(xù)給藥10天。本發(fā)明藥物組合物組按小鼠體重給藥，安維汀劑量為7.6mg/kg，氯喹劑量為 60mg/kg，所需藥物組合物用生理鹽水稀釋到200 μ 1，每天一次，按體重，連續(xù)給藥10天。每次給藥時，測量小鼠瘤體的體積大小(V = l/2aXb2 ；其中V為腫瘤體積，a為腫 瘤最短徑長度，b為腫瘤最長徑長度)，給藥10天后，第11天處死C57小鼠，觀測各組之間 小鼠體重、種植瘤重量和體積的差異。實驗結果如圖1 3所示。由圖1可見，各組小鼠體重變化無明顯差異，說明小鼠對本實驗的不同給藥方案具有良好的耐受性。由圖2可見，本發(fā)明組合物組能夠顯著抑制小鼠皮膚癌細胞移植瘤重量的增加， 與空白對照組及生理鹽水組相比有顯著差異(P < 0.01)，空白對照組及生理鹽水組的腫瘤 重量為5克左右，而本發(fā)明組合物組的腫瘤重量為2克左右；本發(fā)明組合物組與單獨使用氯 喹組或安維汀組相比，抑制腫瘤重量增加的作用具有顯著性差異(P <0.05)，氯喹組或安 維汀組腫瘤的重量分別為3. 9克和3. 8克左右，而本發(fā)明組合物組的腫瘤重量僅為2左右， 差異顯著。這說明氯喹和安維汀具有協(xié)同抑制腫瘤生長的作用。由圖3可見，在治療周期中，伴隨著時間的推移，本發(fā)明組合物能夠顯著減緩小鼠 皮膚癌細胞移植瘤體積的增長，與空白對照組及生理鹽水組比有顯著差異(P <0.01)；治 療結束時，空白對照組及生理鹽水組的腫瘤體積為5000立方毫米左右，而本發(fā)明組合物組 的腫瘤體積為2000立方毫米左右；而且本發(fā)明組合物組與氯喹組或安維汀組相比，同樣具 有顯著性差異(P <0.05)；氯喹組或安維汀組腫瘤的體積為4000立方毫米左右，而本發(fā)明 組合物組的腫瘤體積僅為2000立方毫米，差異顯著。這說明本發(fā)明組合物中氯喹和安維汀 具有協(xié)同抑制腫瘤生長的作用。實驗2.本發(fā)明藥物組合物對小鼠肝癌細胞瘤抑制效應實驗60只C57小鼠，雄性，平均重量20g，隨機分成六組，每組10只，按常規(guī)腋下接種小 鼠肝癌細胞H印1-6，接種量5X106個/300 μ 1，接種10天后，種植瘤長至約150立方毫米， 第11天開始給藥處理。分組與給藥同實驗1，連續(xù)給藥12天。每次給藥時，測量瘤體體積大小(V = l/2aXb2 ；其中V為腫瘤體積，a為腫瘤短徑 長度，b為腫瘤長徑長度)，給藥12天，第13天處死C57小鼠，觀測各組小鼠的體重、瘤體體 積和重量的差異。實驗結果如圖4 6所示。由圖4可見，各組小鼠體重變化無明顯差異，說明小鼠對本實驗的不同給藥方案 具有良好的耐受性。由圖5可見，本發(fā)明組合物能夠顯著抑制小鼠肝癌細胞移植瘤重量的增加，與空 白對照組及生理鹽水組比有顯著差異(P < 0. 05)，空白對照組及生理鹽水組的腫瘤重量為 1. 5克左右，而本發(fā)明組合物組的腫瘤重量為0. 5克左右；本發(fā)明組合物與氯喹組或安維 汀組相比同樣具有顯著性差異(P < 0. 05)，氯喹組或安維汀組腫瘤的重量分別為1. 3克和 1. 2克左右，而本發(fā)明組合物組的腫瘤重量僅為0. 5克左右，差異顯著。這說明氯喹和安維 汀具有協(xié)同抑制腫瘤生長的作用。由圖6可見，在治療周期中，伴隨著時間的推移，本發(fā)明組合物能夠顯著減緩小鼠 肝癌細胞移植瘤體積的增長，與空白對照組及生理鹽水組比有顯著差異(P < 0.01)，治療 結束時，空白對照組及生理鹽水組的腫瘤體積分別為1100和1000立方毫米左右，而本發(fā)明 組合物組的腫瘤體積為500立方毫米左右；本發(fā)明組合物組與氯喹組和安維汀組相比，抑 制腫瘤體積增長的作用同樣差異顯著(P < 0. 05)，在治療結束后，氯喹組和安維汀組腫瘤 的體積分別為800和750立方毫米左右，而本發(fā)明組合物組的腫瘤體積僅為500立方毫米 左右。這說明本發(fā)明組合物中氯喹和安維汀具有協(xié)同抑制腫瘤生長的作用。
權利要求
一種治療癌癥的藥物組合物，由抗血管生成藥物和自噬抑制劑組成，所說的抗血管生成藥物為安維??；自噬抑制劑為氯喹，臨用時將安維汀和氯喹按各自的給藥劑量混合而成。
2.按權利要求1所述的一種治療癌癥的藥物組合物，其特征在于各組分的給藥劑量按 體重計算分別為安維汀 7.6mg/kg 氯喹 60mg/kg。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是一種由抗血管生成藥物安維汀和自噬抑制劑氯喹組成的治療癌癥的藥物組合物，臨用時按安維汀和氯喹各自的給藥劑量混合而成，它們給藥劑量按體重計算分別為安維汀7.6mg/kg；氯喹60mg/kg。動物實驗結果表明，本發(fā)明藥物組合物能夠明顯抑制皮膚癌、肝癌細胞在小鼠體內的生長，抑制腫瘤效果顯著高于單獨使用安維汀或氯喹，說明安維汀和氯喹具有協(xié)同抑制腫瘤生長的作用，因此可用于治療腫瘤。本發(fā)明藥物組合物制備方法簡單，使用方便，治療腫瘤的效果好。
文檔編號A61P35/00GK101920015SQ20101025712
公開日2010年12月22日 申請日期2010年8月13日 優(yōu)先權日2010年5月25日
發(fā)明者衛(wèi)立辛, 吳孟超, 宋建瑞, 李丁, 郭獻靈 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學