專利名稱：復(fù)合麻醉劑及其制備方法和在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及麻醉劑及其制備方法和在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用的技術(shù)領(lǐng)域，是 一種復(fù)合麻醉劑及其制備方法和在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
缺血性心臟疾病——心臟肌肉供血不足——是世界的首要死亡原因，包括大多數(shù) 低收入和中等收入國家。在心臟缺血性疾病領(lǐng)域中，動(dòng)物模型的建立被廣泛運(yùn)用到發(fā)病機(jī) 制，藥物治療，細(xì)胞治療中，根據(jù)研究目的的不同，動(dòng)物平臺(tái)的選擇也不盡相同，而且，動(dòng)物 模型的成功建立是開展實(shí)驗(yàn)性研究的第一步，冠狀動(dòng)脈結(jié)扎可以造成梗死部位相對一致， 其左室功能和病理生理改變與臨床心肌梗死的病理特征符合。因此，在實(shí)驗(yàn)研究中，我們需 要制作較為穩(wěn)定的心肌梗死動(dòng)物模型，來評價(jià)各種治療方法的療效，然而，因其模型建立方 法均是以開胸為基礎(chǔ)，后結(jié)扎左前降支冠狀動(dòng)脈，動(dòng)物死亡率較高，不利于進(jìn)行進(jìn)一步的研 究，而且造成巨大的資源浪費(fèi)。于是怎樣提高模型中動(dòng)物的存活率已經(jīng)成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)工作 者的一項(xiàng)緊迫任務(wù)。有研究者認(rèn)為，在心肌梗死動(dòng)物模型建立過程中造成大鼠死亡率較高的原因有以 下幾點(diǎn)1.藥物麻醉深度藥物麻醉過淺，動(dòng)物蘇醒較快，無法完成結(jié)扎手術(shù)；藥物麻醉過 深，大鼠不易蘇醒，難以脫離呼吸機(jī)，可能導(dǎo)致肺水腫，肺部感染，甚至有麻醉過量死亡的危 險(xiǎn)。2.氣道阻塞氣管切開后切開區(qū)域滲血，動(dòng)物麻醉過程中氣道分泌物增多可阻塞氣道 且影響恢復(fù)自主呼吸后動(dòng)物的氣道通氣。有報(bào)道稱氣道阻塞是術(shù)后24小時(shí)內(nèi)動(dòng)物致死的 主要原因。3.手術(shù)過程肺部損傷手術(shù)過程中手術(shù)器械及縫合針的不當(dāng)操作均可傷及肺組 織，造成額外損傷，增加大鼠死亡率。4.梗死面積的大小。5.術(shù)后護(hù)理舌后墜的發(fā)生，感 染，溫度不適均能影響大鼠的存活。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種復(fù)合麻醉劑及其制備方法和在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用，克 服了上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，其具有廉價(jià)易得，操作簡單，在心肌梗死動(dòng)物模型中應(yīng)用能 有效提高存活率。本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過以下措施來實(shí)現(xiàn)的一種復(fù)合麻醉劑，其按體積份 組成為3份的質(zhì)量百分比濃度為2%的戊巴比妥鈉水溶液；2份的質(zhì)量百分比濃度為10%水 合氯醛水溶液；1份的濃度為0. lmg/ml的阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥物水溶液。本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過以下措施來實(shí)現(xiàn)的一種上述的復(fù)合麻醉劑的制備 方法，其將3體積份的質(zhì)量百分比濃度為2%的戊巴比妥鈉水溶液、2體積份的質(zhì)量百分比 濃度為10%水合氯醛水溶液、1體積份的濃度為0. lmg/ml的阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥 物水溶液充分混合得到復(fù)合麻醉劑。對上述本發(fā)明的技術(shù)方案之二可進(jìn)一步進(jìn)行如下的選擇或/和優(yōu)化 上述復(fù)合麻醉劑經(jīng)過0. 22mm濾紙過濾保證無菌，在4°C保存。
本發(fā)明的技術(shù)方案之三是通過以下措施來實(shí)現(xiàn)的一種上述的復(fù)合麻醉劑在心肌 梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用。對上述本發(fā)明的技術(shù)方案之二可進(jìn)一步進(jìn)行如下的選擇或/和優(yōu)化 上述復(fù)合麻醉劑使用量為30ml/Kg。上述動(dòng)物模型中的動(dòng)物為大鼠或小鼠或新西蘭兔。 上述應(yīng)用的具體步驟可為復(fù)合麻醉劑給動(dòng)物腹腔注射麻醉后連接標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)心電 圖檢測，胸部及頸部備皮75%酒精常規(guī)消毒鋪巾，頸部正中橫切口，行氣管切開術(shù)并插管， 縫合線固定后連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，以第二乳頭為標(biāo)志縱行切開皮膚，鈍性分離各層組織直 至第3肋下緣，小動(dòng)物擴(kuò)胸器撐開3、4肋間肌，充分暴露心臟，剪開心包，于肺動(dòng)脈圓錐和左 心耳之間，以左冠狀動(dòng)脈主干為標(biāo)志，于左心耳根部下方2-3mm處進(jìn)針，深度為0. 5mm左右， 6/0縫合針穿過心肌表層，肺動(dòng)脈圓錐旁出針，小心結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)；逐層縫 合，術(shù)畢腹腔注射40U青霉素預(yù)防感染。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1采用復(fù)合麻醉液，尤其是加入適量阿托品能夠有效抑制 呼吸道腺體分泌，降低氣道阻塞程度，提高大鼠存活率。2本發(fā)明具有價(jià)格低廉，操作簡單， 大鼠存活率較高，心梗成功率高，效果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可作為大鼠心肌梗死動(dòng)物模型的常規(guī)麻 醉劑；為行其他小動(dòng)物手術(shù)提供指導(dǎo)性麻醉方案。本發(fā)明適用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)動(dòng)物研究及相關(guān) 領(lǐng)域。


附圖1為本發(fā)明與對照組的大鼠存活曲線。從下述實(shí)驗(yàn)和附圖1中得知復(fù)合麻 醉組及對照組各30只，冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)后24小時(shí)，復(fù)合麻醉組存活27只，存活率為90%，對 照組存活21只，存活率為70% ；術(shù)后4周，復(fù)合麻醉組存活22只，存活率為73%，對照組存活 14只，存活率為47%。附圖2為本發(fā)明的超聲心動(dòng)圖檢測心功能(二尖瓣水平短軸切面)。附圖3為本發(fā)明中大鼠心肌梗死區(qū)域HE染色劑染色切片圖。從附圖3可看出LAD 結(jié)扎術(shù)后4周梗死區(qū)可見纖維組織增生明顯，排列無序，明顯可見炎癥細(xì)胞浸潤，部分心肌 細(xì)胞伊紅染色增強(qiáng)。附圖4為本發(fā)明的大鼠心肌梗死區(qū)域Masson染色劑染色切片圖。從附圖4可看 出MI組梗死區(qū)膠原纖維增生明顯，成條索狀，包繞心肌束，膠原纖維融合明顯
附圖5為本發(fā)明的大鼠心臟Masson染色劑染色切片圖。附圖6為對照組的大鼠心臟Masson染色劑染色切片圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案和實(shí)際情況來確定具體 的實(shí)施方式。下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述
實(shí)施例1，該復(fù)合麻醉劑按體積份組成為3份的質(zhì)量百分比濃度為2%的戊巴比妥鈉水 溶液；2份的質(zhì)量百分比濃度為10%水合氯醛水溶液；1份的濃度為0. lmg/ml的阿托品水溶 液或抗膽堿酯酶藥物水溶液。
實(shí)施例2，該復(fù)合麻醉劑的制備方法是將3體積份的質(zhì)量百分比濃度為2%的戊 巴比妥鈉水溶液、2體積份的質(zhì)量百分比濃度為10%水合氯醛水溶液、1體積份的濃度為 0. lmg/ml的阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥物水溶液充分混合得到復(fù)合麻醉劑。實(shí)施例3，與實(shí)施例2的不同之處在于實(shí)施例3的復(fù)合麻醉劑經(jīng)過0. 22mm濾紙 過濾保證無菌，在4°C保存。實(shí)施例4，該復(fù)合麻醉劑在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用。一 .材料。1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級spreague-dawley (SD)大鼠60只，雌雄不限，體重220_240g 由由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為復(fù)合麻醉組(30只)和戊巴比妥鈉對照組 (30 只)。2.手術(shù)器械顯微外科手術(shù)器械一套(上海手術(shù)器械廠)，基礎(chǔ)外科手術(shù)器械若 干，醫(yī)用無損傷縫合線6-0和9-0若干(上海醫(yī)用縫合針廠)紗布，棉球，75%酒精，醫(yī)用碘酒。3.麻醉劑戊巴比妥鈉，水合氯醛，阿托品。二 .復(fù)合麻醉劑為實(shí)施例1至3所得的復(fù)合麻醉劑。三.麻醉過程30只SD大鼠嚴(yán)格稱重，以30ml/Kg劑量的復(fù)合麻醉劑行腹腔注射， 剩余30只大鼠以35mg/kg劑量行常規(guī)麻醉術(shù)(用單一麻醉劑)，作為對照。注射時(shí)注意回抽 注射器，防止麻醉劑進(jìn)入血管。四大鼠心肌梗死模型的制備大鼠進(jìn)入麻醉狀態(tài)后連接標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測，胸 部及頸部備皮75%酒精常規(guī)消毒鋪巾，頸部正中橫切口，行氣管切開術(shù)并插管，縫合線固定 后連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，調(diào)整潮氣量3-5ml/100g，呼吸70次/min，以第二乳頭為標(biāo)志縱行切 開皮膚，鈍性分離各層組織直至第3肋下緣，小動(dòng)物擴(kuò)胸器撐開3、4肋間肌，充分暴露心臟， 無菌棉球放入左側(cè)胸腔保護(hù)左肺，鑷子提取心包壁層，剪開心包，于肺動(dòng)脈圓錐和左心耳之 間，以左冠狀動(dòng)脈主干為標(biāo)志，于左心耳根部下方2-3mm處進(jìn)針，深度為0. 5mm左右，6/0縫 合針穿過心肌表層，肺動(dòng)脈圓錐旁出針，小心結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)。根據(jù)心電圖 I avL導(dǎo)聯(lián)ST段弓背向上抬高大于0. Imv以及室壁顏色變白、活動(dòng)度減弱為標(biāo)志確定冠脈 結(jié)扎成功。取出保護(hù)左肺的棉球后逐層縫合，關(guān)閉胸腔，待自主呼吸恢復(fù)后拔出通氣導(dǎo)管， 拉攏氣管軟骨并縫合。術(shù)畢腹腔注射40U青霉素預(yù)防感染。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.大鼠存活曲線描述復(fù)合麻醉組及對照組各30只，冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)后24小 時(shí)，復(fù)合麻醉組存活27只，存活率為90%，對照組存活21只，存活率為70% ；術(shù)后4周，復(fù)合 麻醉組存活22只，存活率為73%，對照組存活14只，存活率為47%，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如附圖1 所示。2.大鼠心肌梗死大鼠心功能超聲檢測超聲結(jié)果如附圖2所提示結(jié)扎后四周， 左室前壁可見間斷性室壁活動(dòng)減弱，LVEDD、LVESD明顯增大，F(xiàn)S，EF明顯下降。這說明 使用本發(fā)明復(fù)合麻醉劑不影響心肌梗死的發(fā)生。3.大鼠心肌梗死區(qū)域組織病理學(xué)檢測LAD結(jié)扎術(shù)后4周梗死區(qū)可見纖維組織增 生明顯，排列無序，明顯可見炎癥細(xì)胞浸潤，部分心肌細(xì)胞伊紅染色增強(qiáng)，結(jié)果見附圖3。MI 組梗死區(qū)膠原纖維增生明顯，成條索狀，包繞心肌束，膠原纖維融合明顯，結(jié)果見附圖4。這 說明使用本發(fā)明復(fù)合麻醉劑與使用常規(guī)麻醉劑(即單一麻醉劑)對心肌梗死的影響是相一致。 4.大鼠心臟Masson三色染色從實(shí)驗(yàn)、附圖5和附圖6得知根據(jù)IPP軟件計(jì)算 心梗面積，復(fù)合麻醉組心梗面積為48. 45 士 2. 38%,對照組心梗面積為50. 04 士 3. 74%,兩 組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示梗死面積兩組相對均一。
權(quán)利要求
一種復(fù)合麻醉劑，其特征在于按體積份組成為3份的質(zhì)量百分比濃度為2%的戊巴比妥鈉水溶液；2份的質(zhì)量百分比濃度為10%水合氯醛水溶液；1份的濃度為0.1mg/ml的阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥物水溶液。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合麻醉劑的制備方法，其特征在于將3體積份的質(zhì) 量百分比濃度為2%的戊巴比妥鈉水溶液、2體積份的質(zhì)量百分比濃度為10%水合氯醛水溶 液、1體積份的濃度為0. lmg/ml的阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥物水溶液充分混合得到復(fù) 合麻醉劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復(fù)合麻醉劑的制備方法，其特征在于復(fù)合麻醉劑經(jīng)過 0. 22mm濾紙過濾保證無菌，在4°C保存。
4.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合麻醉劑在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合麻醉劑在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合 麻醉劑使用量為30ml/Kg。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合麻醉劑在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用，其特征在于動(dòng)物 模型中的動(dòng)物為大鼠或小鼠或新西蘭兔。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的復(fù)合麻醉劑在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用，其特征在于將復(fù) 合麻醉劑給動(dòng)物腹腔注射麻醉后連接標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測，胸部及頸部備皮75%酒精常規(guī) 消毒鋪巾，頸部正中橫切口，行氣管切開術(shù)并插管，縫合線固定后連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，以第 二乳頭為標(biāo)志縱行切開皮膚，鈍性分離各層組織直至第3肋下緣，小動(dòng)物擴(kuò)胸器撐開3、4肋 間肌，充分暴露心臟，剪開心包，于肺動(dòng)脈圓錐和左心耳之間，以左冠狀動(dòng)脈主干為標(biāo)志，于 左心耳根部下方2-3mm處進(jìn)針，深度為0. 5mm左右，6/0縫合針穿過心肌表層，肺動(dòng)脈圓錐旁 出針，小心結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支LAD ；逐層縫合，術(shù)畢腹腔注射40U青霉素預(yù)防感染。
全文摘要
一種復(fù)合麻醉劑及其制備方法和在心肌梗死動(dòng)物模型中的應(yīng)用，該復(fù)合麻醉劑組成為戊巴比妥鈉水溶液；水合氯醛水溶液；阿托品水溶液或抗膽堿酯酶藥物水溶液。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1采用復(fù)合麻醉液，尤其是加入適量阿托品能夠有效抑制呼吸道腺體分泌，降低氣道阻塞程度，提高大鼠存活率。2本發(fā)明具有價(jià)格低廉，操作簡單，大鼠存活率較高，心梗成功率高，效果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可作為大鼠心肌梗死動(dòng)物模型的常規(guī)麻醉劑；為行其他小動(dòng)物手術(shù)提供指導(dǎo)性麻醉方案。本發(fā)明適用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)動(dòng)物研究及相關(guān)領(lǐng)域。
文檔編號A61P23/00GK101947223SQ20101026252
公開日2011年1月19日 申請日期2010年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月25日
發(fā)明者劉芬, 張雪蓮, 王寶珠, 袁山, 謝翔, 馬依彤, 馬翔 申請人:新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院