專利名稱：一種治療腫瘤的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療腫瘤的藥物。
背景技術(shù)：
組蛋白去乙?；?HDAC)家族由18個成員組成，被分為四個亞家族。其中家族 I的成員定位于細(xì)胞核內(nèi)，家族Π的成員可以在細(xì)胞質(zhì)-細(xì)胞核間穿梭。HDAC同時還可以 調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)除組蛋白之外的很多蛋白的乙?；?。組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACi)是近年來被廣泛關(guān)注、應(yīng)用的抗腫瘤藥物。 HDACi可以通過阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程、誘導(dǎo)分化和凋亡等多種手段殺傷腫瘤。研究者已經(jīng)發(fā) 現(xiàn)，HDACi誘導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞中很多促凋亡基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。這些HDACi 還可以導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞中的死亡受體及其配體的表達(dá)，而正常細(xì)胞中這些基因不能被HDACi 上調(diào)。已有十余種HDACi進(jìn)入了臨床試驗階段，比如說SAHA、VPA和PXD-101等。但是，人 們也發(fā)現(xiàn)一些腫瘤細(xì)胞對HDACi有抗性，但是機(jī)理還不明確。Autotaxin (ATX)，是核苷焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族中的一員。ATX作為一個分泌 蛋白，廣泛存在于血漿、腦脊液等生物體液中，它可以催化溶血磷脂酰膽堿(LPC)生成溶血 磷脂酸(LPA)。在ATX缺失的小鼠中，LPA不能產(chǎn)生，從而導(dǎo)致小鼠胚胎致死；而在ATX雜合 體小鼠血漿中LPA濃度減半，這一實驗進(jìn)一步表明ATX是生物體內(nèi)產(chǎn)生LPA的脂酶。目前 認(rèn)為ATX的生物學(xué)功能依賴于其產(chǎn)生LPA的能力。LPA是一個多功能磷脂分子，它通過其特 異的G蛋白偶聯(lián)受體(已發(fā)現(xiàn)9種LPA受體，其中對受體1-3的研究最為充分)將信號傳 遞進(jìn)細(xì)胞內(nèi)，促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化以及存活。LPA受體通過G蛋白(Gi，Gq, G12/13)激活包 括磷脂酶C，PI3K，Ras-MAPK, Rac和Rho等多條信號通路。人ATX有三種剪接體，其中在血漿中，腫瘤組織中表達(dá)的ATX為ATX-β，氨基酸序 列的 Genebank accession number :ΑΑΗ34961· 1。組蛋白去乙?；敢种苿?TSA是一種應(yīng)用廣泛的組蛋白去乙酰化酶抑制劑， 可以促進(jìn)胞內(nèi)蛋白乙酰化，全稱為 Trichostatin A([R-(E，Ε) ]-7-[4-(Dimethylamino) phenyl]-N-hydroxy-4,6-dimethyl-7-oxo_2,4-heptadienamide),分子式為 C17H22N2O3,,結(jié) 構(gòu)式如式I
(式I ) 組蛋白去乙?；敢种苿?NaB是一種應(yīng)用廣泛的組蛋白去乙?；敢种苿?以促進(jìn)胞內(nèi)蛋白乙?；?，全稱為Butyric acid sodium salt分子式為CH3CH2CH2COONa,，結(jié)
3構(gòu)式如式II
權(quán)利要求
一種預(yù)防和/或治療腫瘤的組合物，由組蛋白去乙酰化酶抑制劑和溶血磷脂酸抑制物組成；所述溶血磷脂酸抑制物為阻斷溶血磷脂酸信號進(jìn)入細(xì)胞的物質(zhì)和/或抑制溶血磷脂酸生成的物質(zhì)。
2.由組蛋白去乙?；敢种苿┖腿苎字嵋种莆锝M成的組合物在制備預(yù)防和/或 治療腫瘤的產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述溶血磷脂酸抑制物為阻斷溶血磷脂酸信號進(jìn)入細(xì)胞的物質(zhì) 和/或抑制溶血磷脂酸生成的物質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物或權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述阻斷溶血磷脂酸信號進(jìn)入細(xì)胞的物質(zhì)為抑制細(xì)胞中溶血磷脂酸受體表達(dá)的物質(zhì) 或抑制細(xì)胞中溶血磷脂酸受體活性的物質(zhì)或者溶血磷脂酸受體拮抗劑；所述抑制溶血磷脂酸生成的物質(zhì)為阻斷ATX介導(dǎo)溶血磷脂酸生成途徑的物質(zhì)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的組合物或權(quán)利要求2或3所述的應(yīng)用，其特征在于所述阻斷ATX介導(dǎo)溶血磷脂酸生成途徑的物質(zhì)為抑制ATX表達(dá)的物質(zhì)或者抑制ATX活 性的物質(zhì)；所述抑制ATX表達(dá)的物質(zhì)或者抑制ATX活性的物質(zhì)為如下分子 GUGGACCAAUCUUCGACUATT ；所述抑制細(xì)胞中溶血磷脂酸受體表達(dá)的物質(zhì)為如下(1)和/或(2)所示分子(1) GAAAUGAGCGCCACCUUUATT ； (2)G⑶CAAUGCUGCUGUGUACTT ；所述組蛋白去乙?；敢种苿門SA、NaB和/或VPA ；所述溶血磷脂酸抑制物為BrP-LPA ；所述腫瘤細(xì)胞為結(jié)腸癌細(xì)胞或人乳腺癌細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或3或4所述的組合物或權(quán)利要求2或3或4所述的應(yīng)用，其特征 在于所述組蛋白去乙?；敢种苿┖退鋈苎字嵋种莆铼?dú)立包裝或混合包裝；所述結(jié)腸癌細(xì)胞優(yōu)選為SW480細(xì)胞和/或colo320細(xì)胞；所述人乳腺癌細(xì)胞優(yōu)選為 MDA-MB-231 細(xì)胞和 / 或 MDA-MB-435 細(xì)胞。
6.HDAC3和/或HDAC7在制備抑制細(xì)胞中ATX表達(dá)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；HDAC3和/或HDAC7 在抑制細(xì)胞中ATX表達(dá)中的應(yīng)用。
7.組蛋白去乙?；敢种苿┰谥苽浯龠M(jìn)細(xì)胞中ATX表達(dá)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；組蛋白去乙 ?；敢种苿┰诖龠M(jìn)細(xì)胞中ATX表達(dá)中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的應(yīng)用，其特征在于所述細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞；所述組蛋白去乙酰化酶抑制劑為TSA、NaB和/或VPA。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤細(xì)胞為結(jié)腸癌細(xì)胞、人 乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞、人肺癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞和/或前列腺癌細(xì)胞。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述人乳腺癌細(xì)胞為MDA-MB-231，MCF-7、MDA-MB-468或MDA-MB-435 ；所述宮頸癌細(xì)胞 為Hela ；所述人肺癌細(xì)胞為A549 ；所述卵巢癌細(xì)胞為A2780，HEY或OCCl ；所述前列腺癌細(xì) 胞為PC3或Dul45 ；所述結(jié)腸癌細(xì)胞為SW480細(xì)胞、colo320或HT-29。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療腫瘤的藥物。該藥物由組蛋白去乙?；敢种苿┖腿苎字嵋种莆锝M成；所述溶血磷脂酸抑制物為抑制溶血磷脂酸與溶血磷脂酸受體結(jié)合的物質(zhì)或抑制溶血磷脂酸生成的物質(zhì)。本發(fā)明表明HDACi可以在多種腫瘤細(xì)胞中通過抑制HDAC3和HDAC7的活性上調(diào)ATX表達(dá)。HDACi誘導(dǎo)產(chǎn)生的ATX通過催化LPC生成LPA，減弱了HDACi對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。如果通過RNAi的方法抑制ATX表達(dá)，或者加入ATX-LPA信號通路抑制劑BrP-LPA阻斷ATX-LPA信號，HDACi對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用都會進(jìn)一步增強(qiáng)。本發(fā)明研究提出了溶血磷脂酸抑制物和HDACi聯(lián)合用藥治療腫瘤的新思路。本發(fā)明在腫瘤治療中有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A61K45/06GK101979090SQ201010291038
公開日2011年2月23日 申請日期2010年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月25日
發(fā)明者張俊杰, 李頌, 王寶璐 申請人:北京師范大學(xué)