專利名稱：博落回提取物在經(jīng)濟(jì)動物獸藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到從含芐基異喹啉類生物堿(Benzylisoquinoline Alkaloid)的植物 博落回(Macleaya cor data (Willd) R. Br.)得到的提取物在促進(jìn)經(jīng)濟(jì)動物生長和提高飼料 轉(zhuǎn)化率的飼料藥物添加劑和獸藥方面的應(yīng)用。提取物中主要含芐基異喹啉總生物堿，其中 包含血根堿、白屈菜紅堿、原阿片堿、別隱品堿、二氫血根堿、二氫別隱品堿等。
背景技術(shù)：
長期以來，由于動物飼料和獸藥中廣泛的使用抗生素、化學(xué)合成藥物、激素等促生 長保健劑，這類添加劑在促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展的同時，也帶給了人類很多危害。抗生素的濫用的 弊端越來越突出。主要表現(xiàn)在內(nèi)源性感染和二重感染、微生物產(chǎn)生抗藥性、機(jī)體的免疫力 下降、殘留毒副作用和環(huán)境污染。在這種形勢下，世界各國都紛紛制定了與飼料藥物添加劑 相關(guān)的法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)范和監(jiān)管藥物飼料添加劑的使用，從而維護(hù)國家和消費者的利 益。歐盟各成員國執(zhí)行最為嚴(yán)格的飼料藥物使用制度。歐盟2003年公布了最新的《飼料添 加劑準(zhǔn)則》，迫于消費者和醫(yī)學(xué)方面的壓力，該準(zhǔn)則規(guī)定，除了球蟲抑制劑和滴蟲抑制劑以 外的藥物于2006年1月1日起全部停止使用。當(dāng)今，人類迫切希望回歸自然，返璞歸真，順 應(yīng)這一世界潮流，圍繞“健康動物、安全食品、健康人類”這一主題，世界各國紛紛開始研究 抗生素安全替代品。天然植物源藥物結(jié)構(gòu)獨特，不易產(chǎn)生耐藥性，在環(huán)境中可自行降解，不 至于在農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品中長期殘留或通過食物鏈富集，不引起對環(huán)境的不可逆破壞，對人畜 相對低毒，符合綠色生態(tài)畜牧業(yè)對藥品的要求，是未來獸藥的重要發(fā)展方向。我國有極其豐 富的植物及天然產(chǎn)物資源，從天然產(chǎn)物資源中尋找新的抗生素替代物質(zhì)，確定其活性骨架， 發(fā)掘先導(dǎo)化合物，篩選其更有效的化合物，具有極其廣闊的發(fā)展前景和十分重要的意義。博落回(Macleaya cordata(Willd. ) R. Br.)，又名號筒草、號筒桿、泡桐桿、勃 勒回是罌粟科博落回屬多年生高大草本，最早記載博落回的本草文獻(xiàn)為《本草拾遺》?，F(xiàn) 統(tǒng)一命名為博落回。博落回提取物，主要分布在罌粟科、蕓香科、小檗科等天然植物中， 落回總生物堿中主要含有血根堿(Sanguinarine)、白屈菜紅堿(Chelerythrine)、博落 回堿(Bocconine)、博落回寧堿(Bocconoline)、甲氧基白屈菜紅堿(Chelilutine)、二 MilIHM (Dihydrosanguinarine)、白屈菜紅(Dihydrochelerythrine)等苯并 菲啶型生物堿及原阿片堿(Protopine), α-別隱品堿(α-Allocryptopine), 別隱 品堿(β-Allocryptopine)等原托品型生物堿禾口 Norsanguinarine、Oxysanguinarine、 Homoche 1 idonine、Coptisine、Berberine、Chelidonine、CheIirubine 等原生物喊?，F(xiàn)代藥 理研究表明博落回具有明顯的抗菌、殺蟲、改善肝功能、提高免疫力及抗腫瘤等作用。在博落回的應(yīng)用方面，農(nóng)業(yè)部獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中收錄的博落回注射液是由博落回果 經(jīng)提取、分離制成的生物堿硫酸鹽的滅菌水溶液，其具有抗菌消炎的功能，主治仔豬的白 痢、黃痢；郁建生(2007)將博落回果莢和根中經(jīng)提取的有效成份總生物堿制成注射液、口 服液用以治療仔豬白痢、禽霍亂疾病取得較好效果；郁建生等將博落回與穿心蓮配合制成 復(fù)方博落回注射液已申請專利(專利號ZL 200510020409.0)，其具有廣譜清熱解毒消腫、
3抗菌抗病毒消炎功效，主要用于治療畜禽患流行性感冒、腹瀉痢疾、仔豬白痢和黃痢等。綜 合文獻(xiàn)可以得出博落回提取物的應(yīng)用現(xiàn)主要是以治療畜禽動物消化道疾病的獸藥，且給藥 方式多以注射為主。本發(fā)明的所提到的博落回提取物，是60%以上的總生物堿作為獸藥原 料添加在飼料中進(jìn)行日常飼喂，用以促進(jìn)經(jīng)濟(jì)動物的生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率，這種作為獸 藥和藥物飼料添加劑的應(yīng)用尚未見相關(guān)報道。今年來，隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展和集約化水平的提高，養(yǎng)殖密度越來越大，導(dǎo)致 了一些疾病的發(fā)生率越來越高。病原微生物對畜禽養(yǎng)殖業(yè)的危害性十分嚴(yán)重，常引起消化 道、呼吸道的疾病，使幼畜幼禽生長發(fā)育遲緩，成年畜禽育肥困難。給畜禽養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重 的經(jīng)濟(jì)損失。選擇高效低毒、使用方便的藥劑來防治，成了人們普遍關(guān)心的問題。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人從博落回植物中提取出博落回總生物堿對其進(jìn)行生物活性研究發(fā)現(xiàn)具有 廣泛的抑菌，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)動物生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率作用，具體試驗見后。本發(fā)明所提到的博落回提取物用于制備促進(jìn)經(jīng)濟(jì)動物生長獸藥中的藥物飼料添 加劑或?qū)π笄莩Ｒ姴≡褪蠗U菌、李氏桿菌和嗜血桿菌有較好的抑制作用和殺滅作用的獸藥。本發(fā)明是通過將博落回提取物用于制備成獸藥或藥物飼料添加劑。博落回提取物 中主要有效成份為天然活性成分芐基異喹啉類生物堿類可用于抑制和殺滅體內(nèi)的病原微 生物，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)動物生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率；或者是作為制備獸藥的原料。所述博落回提取物來源于罌粟科植物博落回植物，將其成熟的果莢或葉或兩者的 混合體經(jīng)提取制備而成。因本發(fā)明博落回提取物包含血根堿、白屈菜紅堿、原阿片堿、別隱 品堿、二氫血根堿、二氫別隱品堿等。本發(fā)明所提到的博落回提取物是從博落回植物中提取分離、精制獲得高純度博落 回提取物組分；采用酸水提取，堿水沉淀后，將沉淀后用醇提取，濃縮后用濃酸沉鹽制備總 生物堿的在60%以上。其博落回提取物含量是通過HPLC方法檢測，以血根堿和白屈菜紅堿 的合計含量來計算博落回提取物中總生物堿原堿的含量。博落回提取物主要含芐基異喹啉生物堿，并可以以芐基異喹啉生物原堿、它的鹽 酸鹽、硫酸氫鹽或磷酸二氫鹽的形式存在。本發(fā)明是將博落回提取物作為有效成分制成的抑制和殺滅病原微生物，促進(jìn)經(jīng)濟(jì) 動物生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率作用有良好效果。博落回提取物的應(yīng)用是包括單獨使用，或者 與其他抗菌藥物共同使用。在與其他抗菌獸藥配合使用時也具有良好抗寄生蟲作用。博落 回提取物在獸藥或藥物飼料添加劑中的給藥濃度優(yōu)選為0. l-30ppm。作為藥物飼料添加劑 添加到豬、雞飼料中的濃度以總生物堿計為較為優(yōu)選的是0. l-5ppm。作為藥物飼料添加劑添加到豬、雞飼料中的濃度以總生物堿計最為優(yōu)選的是 l-5ppm。本發(fā)明所述的獸藥可以通過混飼、飲水等形式給藥。將博落回提取物加稀釋劑相 應(yīng)的輔料可制成的各種劑型-預(yù)混劑或水劑等，應(yīng)用于抑制和殺滅病原微生物，促進(jìn)經(jīng)濟(jì) 動物豬、雞生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率等方面具有良好的市場前景。
具體實施例方式以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進(jìn)一步限定。實施例1博落回提取物的制備方法取博落回果莢，用20倍量的0. 5%硫酸水溶液提取，然后用堿調(diào)pH到8_10，分離 沉淀后，再用90%乙醇提取，部分濃縮提取液過濾后，加濃硫酸析出大量桔紅色沉淀物，干 燥后得到博落回提取物，經(jīng)過HPLC測定總生物含量約為66. 4% (以原血根堿和白屈菜紅堿 的含量合計，以下同)，其中血根堿約為46. 4%,白屈菜紅堿約為20%。實施例2博落回提取物預(yù)混劑的制備實施例1方法制得的博落回提取物稱取100g，，使用藥物粉碎機(jī)粉碎，過120目蹄， 備用；再稱取藥用淀粉3900g。將博落回提取物與藥用淀粉使用小型混合機(jī)充分混合15分 鐘，檢查變異系數(shù)< 0. 5，得到博落回提取物預(yù)混劑4000克。實施例3博落回提取物對畜禽常見病原菌體外抑制試驗選用博落回提取物，并測定其含量為進(jìn)行試驗研究，將實施例1制得博落回提取 物配制的溶液分別對嗜血桿菌、李氏桿菌、巴氏桿菌、鏈球菌等畜禽常見的動物致病菌進(jìn)行 體外抑菌試驗。按無菌操作規(guī)程，在無菌條件下，傾倒相應(yīng)的菌種對應(yīng)的培養(yǎng)基平板，上面 涂布相應(yīng)的菌種接種物，待平板凝固后，貼加藥敏試紙片，用無菌鑷子使紙片和平板結(jié)合緊 密。同時用浸有金霉素的濾紙片做對照。每份樣品做3份，結(jié)果取平均值。37°C倒置培養(yǎng)， 并于24h觀察抑菌效果，測定抑菌圈的直徑，判斷敏感度。判斷標(biāo)準(zhǔn)抑菌環(huán)直徑大于7mm者判斷為有抑菌作用，抑菌環(huán)直徑小于或等于7mm 無抑菌作用，抑菌直徑越大說明抑菌效果越好。結(jié)果檢測表明博落回提取物和金霉素的濃度均為lOOug/ml條件下，嗜血桿菌、 李氏桿菌、及巴氏桿菌和鏈球菌4種畜禽常見病原菌的抑菌直徑均大于7mm，顯示出很好的 的抑菌作用表(1)。表1博落回提取物對抑菌直徑的影響(單位mm)
項目嗜血桿菌李氏桿菌巴氏桿菌鏈球菌博落回組15.5121513金霉素組2021.52215采用試管稀釋法，以金霉素作對照，測定有抑菌活性的藥液的最低抑菌濃度 (MIC)。博落回提取物為試驗組，每組取無菌試管13支，排成一排，除第1管加入1. SmlMH 用肉湯稀釋1000倍的菌液，其余每管加入MH肉湯1ml，在第1管加入由實例1所得博落回 提取物配制的溶液原液0. 2ml混勻，然后吸取Iml至第2管，混勻后再吸取Iml至第3管， 如此連續(xù)倍比稀釋至第12管，并從第12管中吸取Iml棄去，第13管為不含藥物的生長對 照。37°C培養(yǎng)24h，以無細(xì)菌生長的最低濃度為最小抑菌濃度(MIC)。最小抑菌濃度的檢測結(jié)果表明博落回提取物對嗜血桿菌、李氏桿菌、巴氏桿菌、 鏈球菌4種畜禽常見病原菌菌株的均有良好的抑菌效果，對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌均 有良好的抑菌效果。可見博落回提取物具有廣譜的抑菌作用。試驗結(jié)果表明雖然博落回提 取物的最小抑菌效果濃度高于金霉素組(表2)，作為替代抗生素的藥物，其來源天然、降解 快、殘留低、副作用小等優(yōu)點，良好的市場前景。
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表2博落回提取物對最小、抑菌濃度MIC (單位:ug/ml)
權(quán)利要求
博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物獸藥中的應(yīng)用，其特征在于博落回提取物用于制備對畜禽常見病原菌李氏桿菌、嗜血桿菌、巴氏桿菌或鏈球菌有較好的抑制作用和殺滅作用的獸藥；或?qū)⒉┞浠靥崛∥镉糜谥苽漕A(yù)防腹瀉的作用的獸藥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物獸藥中的應(yīng)用，其特征在于 所述博落回提取物由來源于罌粟科植物博落回，從其成熟的果莢或葉或兩者的混合物中提 取制備而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物獸藥中的應(yīng)用，其特征在 于博落回提取物中主要含有芐基異喹啉類生物堿，在提取物中以芐基異喹啉類生物堿原 堿或它的鹽酸鹽、硫酸氫鹽或磷酸二氫鹽的任何一種形式存在。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物獸藥的應(yīng)用，其特征在于作 為獸藥添加到豬、雞飼料中的濃度以總生物堿計為0. l-30ppm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物飼料中獸藥的應(yīng)用，其特征在 于，所述的獸藥以飼料拌喂口服的方式給藥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的博落回提取物在制備經(jīng)濟(jì)動物獸藥的應(yīng)用，其特征在于所 述的獸藥是以預(yù)混劑或水劑的使用方式。
全文摘要
博落回提取物在經(jīng)濟(jì)動物獸藥中的應(yīng)用，博落回提取物用于制備對畜禽常見病原菌李氏桿菌、嗜血桿菌和巴氏桿菌有較好的抑制作用和殺滅作用的獸藥。
文檔編號A61P31/04GK101972309SQ201010293039
公開日2011年2月16日 申請日期2009年4月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月17日
發(fā)明者曾建國, 蔡鵬 , 饒華 申請人:湖南美可達(dá)生物資源有限公司