專利名稱：一種菥蓂總芥子甙的提取方法及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。更具體地涉及菥蓂提取物的制備方法及其應(yīng)用，特別是菥蓂總芥子甙的制備方法及其在制備防止高尿酸血癥和痛風(fēng)的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
痛風(fēng)是一種由于嘌呤代謝紊亂產(chǎn)生過(guò)多尿酸及(或)尿酸排泄減少，并在體內(nèi)蓄積沉淀所致的一組代謝性疾病。臨床表現(xiàn)為高尿酸血癥、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)畸形、腎臟病變和尿酸結(jié)石、痛風(fēng)結(jié)石等。尿酸是人類嘌呤代謝的產(chǎn)物，高尿酸血癥是痛風(fēng)的主要生化基礎(chǔ)。痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是血清尿酸水平增高后，尿酸鹽沉積在關(guān)節(jié)組織，刺激關(guān)節(jié)并引發(fā)一系列的炎癥反應(yīng)，痛風(fēng)癥狀以反復(fù)下肢關(guān)節(jié)紅腫熱痛為主，在中醫(yī)上多屬于濕熱范疇?，F(xiàn)有西醫(yī)針對(duì)痛風(fēng)患者在不同時(shí)期所變現(xiàn)的癥狀選擇性進(jìn)行治療。如抗炎鎮(zhèn)痛藥秋水仙堿和消炎鎮(zhèn)痛藥用于痛風(fēng)急性發(fā)作治療，排泄尿酸藥物如丙磺舒、苯溴馬隆用于間歇期及慢性期治療，黃嘌呤氧化酶抑制劑藥物別嘌醇抑制尿酸合成。但上述藥物毒副作用大，患者往往不能堅(jiān)持長(zhǎng)期服用，以致不易控制病情。如秋水仙堿和消炎痛具有胃腸道刺激作用，前者還產(chǎn)生白細(xì)胞降低和脫發(fā)等。丙磺舒、苯溴馬隆具有胃腸道反應(yīng)、腎絞痛及激發(fā)痛風(fēng)急性發(fā)作等副作用。別嘌醇有致變態(tài)反應(yīng)骨髓抑制等嚴(yán)重的毒副作用。這些藥物副作用大，病人常常不能忍受，在一定程度上限制了其使用。因此，尋找新型的高效低毒的抗痛風(fēng)和高尿酸血癥藥物依然是目前藥學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。CN97116712.5公開(kāi)了茶色素可抑制高尿酸血癥，預(yù)防痛風(fēng)發(fā)作，并具有治療作用；CN98110667. 6公開(kāi)了由木通、益母草、車前子、米仁、倉(cāng)術(shù)、黃柏、牛膝組成的物質(zhì)，具有清熱利濕、活血化濁的作用，可以降低尿酸，治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，預(yù)防關(guān)節(jié)畸形及腎病變; CN200410034933. 9公開(kāi)了主要未總黃酮、總生物堿、揮發(fā)油構(gòu)成的組合物，具有降低高尿酸的效果。W^AThlaspi ar陽(yáng)從Zi/w)為雙子葉十字花科菥蓂屬一年生草本植物，又叫遏藍(lán)菜、蘇敗醬(江蘇)、南敗醬(湖北)、苦芥子、敗醬草、瓜子草、野榆樹(shù)、菥目(陜西)，分布全國(guó)各地，但是在川藏地區(qū)資源最為豐富。菥蓂的主要化學(xué)成分為揮發(fā)油和芥子甙。目前關(guān)于菥蓂子的研究較少，但卻是一種重要的川藏道地藥材。2010版藥典記載，菥蓂辛， 微寒。歸肝、胃、大腸經(jīng)。主治清肝明目，和中利濕，解毒消腫。用于目赤腫痛，腕腹脹痛，脅痛，腸癰，水腫，帶下，瘡癤癰腫，目前尚無(wú)治療痛風(fēng)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種單味藏藥菥蓂的提取物-總芥子甙的新用途，其可以降低高尿酸血癥血清尿酸水平、制備抑制黃嘌呤氧化酶和次黃嘌呤氧化酶活性、制備保護(hù)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的炎癥組織和制備抗關(guān)節(jié)炎腫脹的治療或預(yù)防的藥物。本發(fā)明還提供了一種簡(jiǎn)便的菥蓂的總芥子甙的制備方法，確切地說(shuō)是菥蓂的總芥子甙的濃縮純化的方法，其技術(shù)方案是將菥蓂粉碎至10-100目，采用A:用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法；乙醇或甲醇(50-90%)提取，乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；B 將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時(shí)，形成沉淀；C 過(guò)濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙。總芥子甙作為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑可用于制備治療急慢性痛風(fēng)的藥物。氧嗪酸鉀鹽是一種尿酸酶抑制劑，可誘導(dǎo)導(dǎo)致尿酸分解，增加體內(nèi)血清尿酸水平， 造成高尿酸血癥動(dòng)物模型，國(guó)際上普遍用其評(píng)價(jià)藥物的抗高尿酸血癥和痛風(fēng)作用。本發(fā)明亦采用此高尿酸血癥動(dòng)物模型，驗(yàn)證菥蓂提取物的抗痛風(fēng)療效。結(jié)果表明，其療效確切，效果顯著，總有效率為91. 7%，未見(jiàn)明顯的毒副作用。該發(fā)明獲得的治療和預(yù)防高尿酸血癥和痛風(fēng)病的藥物菥蓂為一傳統(tǒng)藏藥，來(lái)源廣泛。所涉及的制備工藝簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的另一優(yōu)點(diǎn)在于，本發(fā)明以菥蓂的總芥子甙為主要成分，藥效成分明確，并可分別用黑芥子甙和芥子甙等成分作為質(zhì)量控制指標(biāo)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1傳統(tǒng)提取方法
取菥蓂10kg，粉碎至10-100目，加水50L，在60_75°C的條件下提取三次，每次提取5_8 小時(shí)，將3次水提液合并，濃縮成浸膏，干燥，得到0. 8 kg浸膏，即為樣品A。實(shí)施例2水提醇沉法
取0. 5 kg的樣品A，向其中加入2. 5 L 85%乙醇，經(jīng)醇沉過(guò)濾后，將乙醇濾液回收溶劑濃縮至1. 5 L，所得濃縮液置于4°C冷藏10小時(shí)，過(guò)濾，收集沉淀，干燥，即得樣品B，總芥子試 0. 15 kg。實(shí)施例3醇提醇沉法
取菥蓂10 kg，粉碎至10-100目，加50L 75%乙醇，在40-55°C的條件下提取三次，每次 4-6小時(shí)，將醇提液濃縮成浸膏，加4L倍量85%乙醇，置于4°C冷藏15小時(shí)，過(guò)濾，收集沉淀， 干燥，即得樣品C，總芥子甙0. 18 kg。實(shí)施例4
通過(guò)一系列動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，分別測(cè)定樣品A、B和C對(duì)高尿酸血癥和正常小鼠血清尿酸水平、 大鼠尿酸鈉引起痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎組織和角叉菜膠引起關(guān)節(jié)腫脹的影響。雄性昆明種小鼠，體重對(duì)士2 g，隨機(jī)分組，每天給藥一次，連續(xù)4天，其中生理鹽水組合高尿酸血癥模型空白組每天均按100 ml/kg劑量生理鹽水，各高尿酸血癥模型空白組在采血前2小時(shí)氧嗪酸鉀鹽，給藥模型組在最后一次給藥前一小時(shí)氧嗪酸鉀鹽。最后一次給藥2小時(shí)后從動(dòng)物眼眶后靜脈叢采血，測(cè)定血清尿酸水平。雄性昆明種小鼠，體重對(duì)士2 g，隨機(jī)分組，每天給藥一次，連續(xù)7天，處死動(dòng)物，取肝臟測(cè)定次黃嘌呤氧化酶UDH)和黃嘌呤氧化酶(XO)活力。雄性昆明大鼠，體重200士25 g，隨機(jī)分組。每天給藥一次，連續(xù)7天，并于第4天給藥前1小時(shí)用尿酸鈉致炎造模，72小時(shí)后測(cè)量大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹程度，或造模M小時(shí)處死， 取受試關(guān)節(jié)周圍軟組織，測(cè)定鉀離子(K+)、5-羥色胺(5-HT)含量。雄性昆明大鼠，體重200-250 g，隨機(jī)分組，分別灌胃給藥，給藥后1小時(shí)，將1%角叉菜膠0. Iml注入大鼠右后趾腱膜下致炎，以容量測(cè)量法觀察各鼠踝關(guān)節(jié)致炎后lh、2h、4h和他的腫脹程度。樣品A、B和C對(duì)高尿酸血癥和正常小鼠血清尿酸水平的影響結(jié)果分別見(jiàn)表1和表 2。在實(shí)驗(yàn)條件下，樣品A、B和C均能降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平；其中，樣品B和樣品C可將高尿酸血癥小鼠血清水平恢復(fù)至正常，作用強(qiáng)度與陽(yáng)性藥物別嘌呤醇相近。樣品A、B和C對(duì)正常小鼠血清尿酸水平無(wú)顯著性影響，而別嘌呤醇可顯著地降低正常小鼠血清尿酸水平。樣品A、B和C對(duì)大鼠尿酸鈉引起痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型的影響結(jié)果見(jiàn)表3。數(shù)據(jù)顯示， 樣品B和C能顯著地抑制尿酸鈉引起的大鼠痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎腫脹，作用于秋水仙堿相當(dāng)。受試關(guān)節(jié)周圍軟組織組織血研究表明，樣品A、B、C和秋水仙堿均能保護(hù)炎癥組織。樣品B和 C能顯著地減低炎癥組織中K+含量和5-HT含量，作用強(qiáng)度于秋水仙堿相當(dāng)。樣品A、B和C對(duì)大鼠角叉菜膠致炎引起的足趾腫脹的影響結(jié)果見(jiàn)表4。數(shù)據(jù)顯示， 樣品B和樣品C能顯著抑制角叉菜引起的足腫脹，降低腫脹率，于陽(yáng)性藥強(qiáng)地松作用相當(dāng)。
權(quán)利要求
1.一種菥蓂提取物浸膏的制備方法，其步驟為1)用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；2)將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時(shí)，形成沉淀；3)過(guò)濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其步驟為1)用乙醇或甲醇(50-90%)提取乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；2)將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時(shí)，形成沉淀；3)過(guò)濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙。
3.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制備用于治療或預(yù)防痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制備用于制備 (a)降低血尿酸和/或(b)治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了菥蓂提取物特別是菥蓂總芥子甙的制備方法，用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；或再用乙醇或甲醇(50-90%)提取乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；將浸膏置于4-10℃下冷藏8-24小時(shí)，形成沉淀；過(guò)濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙；本發(fā)明還公開(kāi)了菥蓂提取物在用于制備治療或預(yù)防高尿酸血癥藥物中的應(yīng)用，通過(guò)這種方法可產(chǎn)生治療或預(yù)防痛風(fēng)的功效。
文檔編號(hào)A61K36/31GK102552367SQ20101050387
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月12日
發(fā)明者余紅偉, 馬燕如 申請(qǐng)人:云南滇虹藥業(yè)股份有限公司, 四川滇虹醫(yī)藥開(kāi)發(fā)有限公司, 滇虹藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司