專(zhuān)利名稱(chēng)：一種顯微注射針用緩沖柱的制備方法及其制備的緩沖柱的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，涉及顯微受精，尤其涉及一種顯微注射針用緩沖柱的制備方法及其制備的緩沖柱。
背景技術(shù)：
顯微受精被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)的生殖研究和人的輔助生殖技術(shù)中來(lái)治療不孕癥。 從歷史上講，在哺乳動(dòng)物，顯微受精最早開(kāi)始于金黃地鼠；自此之后，顯微受精對(duì)于哺乳動(dòng)物受精機(jī)制的研究提供了無(wú)價(jià)的信息。由于動(dòng)物基因工程和生殖技術(shù)的進(jìn)步，現(xiàn)在，顯微受精技術(shù)已經(jīng)被廣泛的使用，來(lái)鑒別特定基因在生物學(xué)上的意義或證實(shí)在體外通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作后的配子其基因的正常形態(tài)。顯微操作工具尤其是注射針的配置是影響顯微受精的重要因素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)單、實(shí)用的顯微注射針用緩沖柱的制備方法。本發(fā)明提供的顯微注射針用緩沖柱的制備方法，主要包括步驟1)從顯微注射針的后端注入水銀，使水銀柱在顯微注射針針管中長(zhǎng)度為2 3mm ；2)用注射器把顯微注射針中的水銀柱推至顯微注射針針管的前端；3)在低倍顯微鏡下調(diào)整顯微注射針針管的位置與角度，降低顯微注射針的位置至石蠟油中，吹出水銀柱前端殘留空氣，用油洗尖端數(shù)次；4)把顯微注射針移到聚乙烯吡咯酮(PVP)液滴中，抽吸水銀柱3 5次，使聚乙烯吡咯酮液進(jìn)入顯微注射針的針管潤(rùn)滑針管內(nèi)壁，直到水銀在針管內(nèi)平滑地移動(dòng)且沒(méi)有時(shí)間延遲；5)吸取聚乙烯吡咯酮液進(jìn)入顯微注射針內(nèi)用于顯微注射針的壓力緩沖，把顯微注射針移至聚乙烯吡咯酮滴外的石蠟油中，吸取石蠟油密封聚乙烯吡咯酮柱，形成所述緩沖柱。所述步驟4)所述聚乙烯吡咯酮液是濃度為10%的聚乙烯吡咯酮液。本發(fā)明提供的聚乙烯吡咯酮液，其包含聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液。10%聚乙烯吡咯酮液包含聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液，其中聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液的比例為Ig聚乙烯吡咯酮IOml D-PBS緩沖液。所述10%聚乙烯吡咯酮液通過(guò)下述方法制備 將Ig聚乙烯吡咯酮倒入IOml D-PBS液中溶解而成。所述的聚乙烯吡咯酮液可以用于制備顯微注射針用緩沖柱。本發(fā)明還提供通過(guò)上述方法制備的顯微注射針用緩沖柱。本發(fā)明提供的緩沖柱的制備方法簡(jiǎn)單、實(shí)用，且制備的緩沖柱的緩沖效果優(yōu)良。為讓本發(fā)明的上述和其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，下文特舉較佳實(shí)施例， 并配合附圖，作詳細(xì)說(shuō)明如下。


圖1是吹出注射針內(nèi)水銀柱前端殘留空氣的示意圖；圖2是使PVP液進(jìn)入針管潤(rùn)滑針管內(nèi)壁的示意圖；圖3是形成的緩沖柱的示意圖。
具體實(shí)施例方式用一根前端細(xì)長(zhǎng)的水銀塑料吸管吸取1 Ul水銀，把水銀吸管前端細(xì)長(zhǎng)的部分從注射針1后端伸入進(jìn)注射針1在離注射針1段1. 0 .5cm的位置緩慢吹出吸管內(nèi)的水銀， 使水銀柱在注射針1針管中長(zhǎng)度在2 mm之間即可。用微注射器加上一定的正壓，把注射針中的水銀柱推至注射針1針管的前段，在低倍顯微調(diào)整注射針1針管的位置與角度降低注射針1位置至石蠟油中，吹出水銀柱前端殘留空氣，用油洗尖端數(shù)次(圖1)，然后把注射針1移到10% PVP液滴中(10% PVP液包含PVP和D-PBS緩沖液，其中PVP和D-PBS緩沖液的比例為Ig PVP IOml D-PBS緩沖液。 所述10% PVP液通過(guò)下述方法制備將Ig PVP倒入IOml D-PBS液中溶解而成)，抽吸水銀柱3 5次，使PVP液進(jìn)入針管潤(rùn)滑針管內(nèi)壁，直到水銀能在管內(nèi)平滑地移動(dòng)且沒(méi)有滯后感 (時(shí)間延遲)，注意要將吸附在管內(nèi)的油完全去除(圖2)。吸取一定體積的PVP液進(jìn)入注射針1內(nèi)用于注射針1的壓力緩沖，移動(dòng)載物臺(tái)，把注射針1移至PVP滴外的石蠟油中，吸取一定量的石蠟油密封PVP柱，既起到緩沖作用也防止水銀污染顯微操作液(圖3)。雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例披露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，其中任何所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，當(dāng)可作些許的更動(dòng)與改進(jìn)，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視權(quán)利要求所界定者為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種顯微注射針用緩沖柱的制備方法，其特征在于，包括步驟1)從顯微注射針的后端注入水銀，使水銀柱在顯微注射針針管中長(zhǎng)度為2 3mm；2)用注射器把顯微注射針中的水銀柱推至顯微注射針針管的前端；3)在低倍顯微鏡下調(diào)整顯微注射針針管的位置與角度，降低顯微注射針的位置至石蠟油中，吹出水銀柱前端殘留空氣，用油洗尖端數(shù)次；4)把顯微注射針移到聚乙烯吡咯酮液滴中，抽吸水銀柱3 5次，使聚乙烯吡咯酮液進(jìn)入顯微注射針的針管潤(rùn)滑針管內(nèi)壁，直到水銀在針管內(nèi)平滑地移動(dòng)且沒(méi)有時(shí)間延遲；5)吸取聚乙烯吡咯酮液進(jìn)入顯微注射針內(nèi)用于顯微注射針的壓力緩沖，把顯微注射針移至聚乙烯吡咯酮滴外的石蠟油中，吸取石蠟油密封聚乙烯吡咯酮柱，形成所述緩沖柱。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述聚乙烯吡咯酮液是濃度為 10%的聚乙烯吡咯酮液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述10%的聚乙烯吡咯酮液包含聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液，其中聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液的比例為Ig聚乙烯吡咯酮IOml D-PBS緩沖液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述10%的聚乙烯吡咯酮液通過(guò)下述方法制備將Ig聚乙烯吡咯酮倒入IOml D-PBS液中溶解而成。
5.一種聚乙烯吡咯酮液，其特征在于，其包含聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的聚乙烯吡咯酮液，其特征在于，所述聚乙烯吡咯酮液是濃度為10%的聚乙烯吡咯酮液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的聚乙烯吡咯酮液，其特征在于，所述10%聚乙烯吡咯酮液中聚乙烯吡咯酮和D-PBS緩沖液的比例為Ig聚乙烯吡咯酮IOml D-PBS緩沖液。
8.權(quán)利要求6或7所述的聚乙烯吡咯酮液的制備方法，包括步驟將Ig聚乙烯吡咯酮倒入IOml D-PBS液中溶解而成。
9.權(quán)利要求5所述的聚乙烯吡咯酮液在制備顯微注射針用緩沖柱中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1所述的方法制備的顯微注射針用緩沖柱。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種顯微注射針用緩沖柱的制備方法及其制備的緩沖柱。方法包括步驟從注射針的后端注入水銀使水銀柱在針管中長(zhǎng)度為2～3mm；用注射器把注射針中的水銀柱推至針管的前端；在低倍鏡下調(diào)整針管的位置與角度，降低注射針的位置至石蠟油中，吹出水銀柱前端殘留空氣，用油洗尖端數(shù)次；把注射針移到聚乙烯吡咯酮液(PVP)滴中，抽吸水銀柱3～5次，使PVP液進(jìn)入針管潤(rùn)滑針管內(nèi)壁，直到水銀在管內(nèi)平滑地移動(dòng)且沒(méi)有時(shí)間延遲；吸取PVP液進(jìn)入注射針內(nèi)用于注射針的壓力緩沖，把注射針移至PVP滴外的石蠟油中，吸取石蠟油密封PVP柱，形成所述緩沖柱。本發(fā)明提供的緩沖柱的制備方法簡(jiǎn)單、實(shí)用，且制備的緩沖柱的緩沖效果優(yōu)良。
文檔編號(hào)A61B17/425GK102451033SQ201010519578
公開(kāi)日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月26日
發(fā)明者陳浩杰 申請(qǐng)人:陳浩杰