專利名稱：丹參舒心膠囊的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種丹參舒心膠囊藥物的檢測方法，屬于對藥品進行質(zhì)量控制的技術(shù) 領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
丹參舒心膠囊是《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準》中藥成方制劑第七冊收載的品種，標(biāo)準編號為 WS3-B-1294-93，處方為丹參藥材一味中藥的提取物，是純中藥的膠囊劑。它具有活血化瘀， 鎮(zhèn)靜安神的作用，臨床上用于治療冠心病引起的心絞痛，胸悶及心悸等病癥，是目前市場上 用于治療冠心病引起的心絞痛，胸悶及心悸等病癥的常用藥品。但現(xiàn)有質(zhì)量控制標(biāo)準簡單， 產(chǎn)品質(zhì)量不易控制，只是對丹參舒心膠囊藥物以丹參酮II A對照品為對照進行了薄層色譜 鑒別，而未對其中的主要成份丹參酮II A、丹酚酸B的含量進行測定，其中的鑒別方法不但 煩瑣而且無法全面反映丹參的主要成份丹參酮II A、丹酚酸B等。因為丹參舒心膠囊療效 好，用量大，所以丹參藥材的用量相應(yīng)很大，其它不少藥品也要用到丹參，而資源有限，故丹 參藥材的價格也很高。因此，出現(xiàn)了部分不法廠商在生產(chǎn)丹參舒心膠囊時少投丹參或者以 僅含部份丹參成份的丹參提取物或者其它含丹參部份成份的植物提取物進行投料生產(chǎn)；另 外，丹參的有效成份既有醇溶性成份如丹參酮II A，又有水溶性成份如丹酚酸B，這兩種成 份都不太穩(wěn)定，有的生產(chǎn)廠家不注意控制生產(chǎn)工藝，會使其中部份甚至全部有效成份受到 損失；以上問題嚴重影響了該制劑的臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種丹參舒心膠囊的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明針對現(xiàn)有質(zhì) 量控制標(biāo)準簡單，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點，根據(jù)本方中丹參藥材及其提取物的含量、特性 及其制備工藝，研究定制了具體可行的鑒別和含量測定方法，以有效地控制丹參舒心膠囊 的質(zhì)量，從而確保該制劑的臨床療效。本發(fā)明所述的丹參舒心膠囊是這樣構(gòu)成的它是由丹參藥材提取物加淀粉、滑石 粉、硬脂酸鎂等輔料制備而成。丹參舒心膠囊的制備方法為取經(jīng)水煎后的丹參，干燥，粉碎，加90%乙醇回流三 次，第一次2小時，第二、三次各1. 5小時，分別濾過，合并濾液，減壓濃縮成浸膏，加入浸膏 10倍量的常水，邊加邊攪拌，靜置，濾過，沉淀物低溫干燥，粉碎，過篩，即得丹參提取物，取 丹參提取物200g，加淀粉88g，滑石粉10g，硬脂酸鎂2g，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。本發(fā)明所述檢測方法主要包括性狀、鑒別、檢查、含量測定項目中的部分或全部鑒別是以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行鑒別；含量測定是對其中的 主要成份丹參酮II A和丹酚酸B的含量進行測定。成分鑒別方法是取本品內(nèi)容物2 4g，研細，加乙醚5 10ml，振搖，放置40 80分鐘，濾過，濾
4液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 2ml使溶解，作為供試品溶液。取丹參對照藥材0. 5 1. 5g， 研細，加乙醚5 10ml，振搖，放置40 80分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 2ml 使溶解，作為對照藥材溶液。照中國藥典2010年版一部附錄VI B薄層色譜法，吸取上述兩 種溶液各3 10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯和乙酸乙酯為展開劑，其中苯乙 酸乙酯=18 20 1 1.5，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置 上，顯相同顏色的斑點；含量測定方法是丹參酮II A的含量測定方法照中國藥典2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠 為填充劑；甲醇水=70 80 20 30為流動相；檢測波長為268 272nm ；理論板數(shù) 按丹參酮II A峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹參酮II A對照品10mg，置50ml棕色量 瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每 Iml中含丹參酮IIA 16 μ g的對照品溶液，取本品內(nèi)容物0.7g，研細，精密稱定，置具塞錐形 瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理15 25分鐘，放冷， 密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密 吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹參酮II A不得少于0. 6mg ；丹酚酸B的含量測定方法照中國藥典2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠 為填充劑；以甲醇乙腈甲酸水=25 35 8 10 0. 5 1. 5 57 61為流 動相；檢測波長為284 288nm ；理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹酚 酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml含0. 14mg的溶液，即得對照品溶液，取本品內(nèi)容物 0. 6g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、 頻率59KHZ超聲處理15 25分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量， 搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1， 注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹酚酸B不得少于6mg。本發(fā)明所述檢測方法包括以下的部分或全部性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為深棕色粉末；味淡、微澀；鑒別取本品內(nèi)容物3g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣 加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液，取丹參對照藥材lg，研細，加乙醚5ml，振搖，放置 1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液。照中國藥典2010 年版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相 應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典2010年版一部附錄IL膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定丹參酮II A的含量測定方法照中國藥典2010年版一部附錄VID高效液相色譜 法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=75 25為流動相；檢測波長為270nm ；
5理論板數(shù)按丹參酮IIA峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置50ml棕 色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即 得每Iml中含丹參酮IIA 16μ g的對照品溶液；取本品內(nèi)容物0. 7g，研細，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，放 冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別 精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹參酮IIA不得少于0. 6mg。丹酚酸B的含量測定方法是照中國藥典2010年版一部附錄VID高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為 填充劑；以甲醇乙腈甲酸水=30 10 1 59為流動相；檢測波長為286nm;理論 板數(shù)按丹酚酸B峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每 Iml含0. 14mg的溶液，即得對照品溶液；取本品內(nèi)容物0. 6g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，取出，放 冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分 別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹酚酸B不得少于6mg。鑒別還可以采用以下方法取本品1粒的內(nèi)容物，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，加 中性氧化鋁適量，拌勻，干燥后裝入一預(yù)先裝填好的中性氧化鋁柱(8g內(nèi)徑15mn)頂部，以 醋酸乙醋洗脫，收集最先流出的洗脫液1ml，作為供試品溶液。另取丹參酮IIA對照品，加 醋酸乙酯制成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照中國藥典2010年版一部附錄VIB 薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上以正己烷-醋酸乙醋 (17 3)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 的顏色的斑點。為確保本發(fā)明的檢測方法科學(xué)、合理、可行，本申請人進行了一系列的實驗研究， 具體實驗資料如下一、薄層色譜鑒別由于本品是丹參藥材提取物，保留了原藥材的全部有效成份，為了檢驗本品是否 保留了原藥材的全部有效成份，單純用某一種或兩種成份來控制是不行的，所以選用丹參 對照藥材進行對照，用薄層色譜法來進行鑒別。對于展開劑和薄層板的選擇我們做了大量 的試驗。直接點樣于硅膠G薄層板上，展開后效果比較理想，但是展開劑不同其分離度不 同，所以考察了幾個展開系統(tǒng)，從簡單到復(fù)雜，有苯乙酸乙酯=10 5、苯乙酸乙酯= 10 1、最后是以苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，分離度好，斑點清晰，展開效果好。所 以決定采用以下方法取本品內(nèi)容物3g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙 酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液，取丹參對照藥材lg，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小 時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液。照中國藥典2010年 版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以 苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。二、丹參酮IIA的含量測定方法照高效液相色譜法測定指標(biāo)成分的選擇參照丹參的成份分析，丹參酮IIA是其主要有效成份之一，是主 要的醇溶性成份，所以選定丹參酮IIA為指標(biāo)成份之一，進行成品含量控制，采用高效液相 色譜法對丹參酮IIA行含量測定。1.儀器與試藥SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色譜儀，UV762型雙光束紫外分光光度計，F(xiàn)A2004 電子分析天平。甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純，對照品為中檢所提供。2.檢測波長的選擇借鑒中國藥典2010年版一部丹參藥材項下丹參酮II A含量測定方法。選擇相同 的檢測波長，為270nm，用紫外檢測器檢測。并通過如下實驗確認取丹參酮II A對照品的 甲醇溶液，在200 600nm波長處進行掃描測定，最大吸收波長與藥典丹參酮II A測定波 長(270nm)是一致的。3.流動相的選擇參照中國藥典2010年版一部丹參藥材項下丹參酮IIA含量測定方法對本品進行 含量測定，即選擇甲醇水=75 25為流動相。色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。流速1· Oml/min。柱溫28°C。4.供試溶液的制備4.1對照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密 量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每Iml中含丹參酮IIA 16 μ g的對 照品溶液；4. 2樣品溶液的制備取本品內(nèi)容物0.7g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定 重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失 重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；4. 3提取溶劑的考察取本品內(nèi)容物0.7g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別加50%甲醇、甲醇、乙 醇各50ml，稱定重量，超聲處理(功率120W，頻率59KHZ) 20分鐘，放冷，密塞，再稱定重量， 用相應(yīng)溶劑補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；按上述色譜條件測定， 計算，結(jié)果見表1。表1 提取溶劑考察結(jié)果
提取溶劑50%甲醇甲醇乙醇丹參酮IIA含量(mg/ml)0. 0380. 0410. 037
7
由表1可知，以甲醇為提取溶劑，提取效率優(yōu)于50%甲醇、乙醇，因此選用甲醇為 提取溶劑。4. 4提取方法的考察取本品內(nèi)容物0.7g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定 重量，一份超聲處理(功率120W，頻率59KHZ) 20分鐘，另一份置水浴中加熱回流20分鐘，放 冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；按上 述色譜條件進行測定，計算，結(jié)果見表2。表2 提取方法考察結(jié)果
權(quán)利要求
一種丹參舒心膠囊的檢測方法，所述丹參舒心膠囊是丹參藥材提取物加淀粉、滑石粉、硬脂酸鎂等輔料制備而成，所述檢測方法包括性狀、鑒別及檢查項目；其特征在于所述檢測方法還包括含量測定，該含量測定是對丹參酮IIA和/或丹酚酸B的含量測定，丹參酮IIA的含量測定是以丹參酮IIA為對照品，采用高效液相色譜法進行測定；丹酚酸B的含量測定是以丹酚酸B為對照品，采用高效液相色譜法進行測定；所述鑒別是以丹參藥材為對照品，采用薄層色譜法進行鑒別，鑒別方法是取本品內(nèi)容物2～4g，研細，加乙醚5～10ml，振搖，放置40～80分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1～2ml使溶解，作為供試品溶液；取丹參對照藥材0.5～1.5g，研細，加乙醚5～10ml，振搖，放置40～80分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1～2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典2010年版一部附錄VI B薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各3～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯和乙酸乙酯為展開劑，其中苯∶乙酸乙酯＝18～20∶1～1.5，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點；丹參酮II A的含量測定方法是照中國藥典2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇∶水＝70～80∶20～30為流動相；檢測波長為268～272nm；理論板數(shù)按丹參酮IIA峰計算不低于2000；精密稱取丹參酮II A對照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每1ml中含丹參酮IIA 16μg的對照品溶液，取本品內(nèi)容物0.7g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理15～25分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹參酮II A不得少于0.6mg；丹酚酸B的含量測定方法是照中國藥典2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶乙腈∶甲酸∶水＝25～35∶8～10∶0.5～1.5∶57～61為流動相；檢測波長為284～288nm；理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應(yīng)不低于2000；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得對照品溶液，取本品內(nèi)容物0.6g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理15～25分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹酚酸B不得少于6mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參舒心膠囊的檢測方法，其特征在于所述檢測方法包括性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為深棕色粉末；味淡、微澀；鑒別取本品內(nèi)容物3g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加 乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液；取丹參對照藥材lg，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1 小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典2010年÷版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以 苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng) 位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典2010年版一部附錄IL膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定； 含量測定丹參酮II A的含量測定方法照中國藥典2010年版一部附錄VID高效液相色譜法，用 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=75 25為流動相；檢測波長為270nm;理論 板數(shù)按丹參酮IIA峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹參酮II A對照品10mg，置50ml棕色 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得 每Iml中含丹參酮IIA 16 yg的對照品溶液；取本品內(nèi)容物0. 7g，研細，精密稱定，置具塞 錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，放冷， 密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密 吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每粒含丹參酮IIA不得少于0. 6mg ； 丹酚酸B的含量測定方法是照中國藥典2010年版一部附錄VID高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充 劑；以甲醇乙腈甲酸水=30 10 1 59為流動相；檢測波長為286nm ；理論板數(shù) 按丹酚酸B峰計算應(yīng)不低于2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml 含0. 14mg的溶液，即得對照品溶液；取本品內(nèi)容物0. 6g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，經(jīng)功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，取出，放冷， 再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精 密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每粒含丹酚酸B不得少于6mg。
全文摘要
本發(fā)明提供一種丹參舒心膠囊的質(zhì)量檢測方法，該方法包括性狀、鑒別、檢查和含量測定項目中的部分或全部；其中性狀為膠囊劑，內(nèi)容物為深棕色粉末；味淡、微澀；鑒別是以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行的丹參定性鑒別；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2010年版一部附錄IL膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定是對其中的主要成份丹參酮IIA和丹酚酸B的含量采用高效液相色譜法進行測定；本發(fā)明質(zhì)量檢測方法專屬性強，精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，回收率高，測量結(jié)果準確，簡單方便，對其中的水溶性成份和醇溶性成份都進行了含量測定，提高了丹參舒心膠囊的質(zhì)量控制標(biāo)準，可有效地控制不法廠商或者工藝控制技術(shù)水平低的生產(chǎn)廠家生產(chǎn)偽劣丹參舒心膠囊，從而確保了該制劑的臨床療效。
文檔編號A61P9/10GK101982189SQ201010527588
公開日2011年3月2日 申請日期2010年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月29日
發(fā)明者古莉, 溫國梁, 鄧元鳳, 鄧元平, 鐘茂團, 黎勇 申請人:四川逢春制藥有限公司