專利名稱：快速高效工業(yè)化生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)和植物學(xué)領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及一種快速高效的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)及其所生產(chǎn)的生物疫苗。
背景技術(shù)：
疫苗在防治人類和動物疾病，特別是人類和動物流感等傳染性疾病，起著極其重要的作用?？墒悄壳艾F(xiàn)有的工業(yè)化疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)具有生產(chǎn)周期長、疫苗品種有限等局限。同時，現(xiàn)有的工業(yè)化疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的疫苗大都必須經(jīng)由注射途徑，很難進(jìn)行大規(guī)模人類和動物疫苗投放。因此，目前很需要一種快速高效的工業(yè)化生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種快速高效的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)及其所生產(chǎn)的生物疫
田ο在本發(fā)明的第一方面，提供一個生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的系統(tǒng)包括(A)至少一種微生物細(xì)胞，所述的微生物細(xì)胞為炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis)或無毒炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis Sterne strain)，其缺陷或缺失選自以下的基因炭疽桿菌致死因子基因(LF)，炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)，炭疽桿菌水腫因子(EF)，或其組合之一；(B)至少一種構(gòu)建物，所述的構(gòu)建物包括至少一種抗原核酸序列，所述的抗原核酸序列表達(dá)至少一種抗原蛋白或抗原蛋白片段。在一個優(yōu)選例中，(B)中，所述的構(gòu)建物是表達(dá)載體，該表達(dá)載體可在所述的微生物細(xì)胞內(nèi)存在或復(fù)制；并且，所述的抗原核酸序列整合于該表達(dá)載體中并能在所述的微生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生所述的抗原蛋白或抗原蛋白片段。在另一優(yōu)選例中，所述的抗原蛋白或抗原蛋白片段存在于(表達(dá)于)所述的微生物細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞表面或細(xì)胞外。在另一優(yōu)選例中，所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞中(a)包含炭疽桿菌致死因子基因(LF)的核酸序列，但其編碼的炭疽桿菌致死因子的氨基酸序列第331至418位缺失；(b)不包含炭疽桿菌致死因子基因(LF)的核酸序列(c)不包含炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)的核酸序列；(d)包含炭疽桿菌炭疽桿菌水腫因子基因(EF)的核酸序列，但其編碼的炭疽桿菌水腫因子的氨基酸序列第359至601位缺失；或(e)以上(a)-(d)任意的二項或二項以上的組合。在另一優(yōu)選例中，所述的構(gòu)建物可整合于所述的炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillusanthracis)或無毒炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis Sterne strain)基因組或質(zhì)粒上。在另一優(yōu)選例中，所述的構(gòu)建物(如表達(dá)載體)可整合于Ief基因內(nèi)。在另一優(yōu)選例中，所述的抗原蛋白或抗原蛋白片段來源于選自下組的一種或多種微生物腺病毒(Adenovirus)，巨細(xì)胞病毒(Cytomegalovirus)，登革熱病毒(Dengue virus)，人類皰疹病毒第四型10(Epstein Barr virus)，甲肝病毒(Hepatitis A)，單純 M^Mn^ (Herpes virus), A ^ (Influenza A virus), ΕρΜΜ,^^Ι^ (Influenza A H1N1)，流感B病毒anfluenza B病毒)，麻疹病毒(Measles virus)，流行性腮腺炎病 _ (Mumps virus)，§0 ^ # 1 (Parainfluenzal)，§0 ^ # 2 (Parainfluenza 2)， 副流感病毒3 (Parainfluenza 3)，輪狀病毒(Rotavirus)，口蹄疫病毒，呼吸道合胞病毒 (Respiratory Syncytialvirus)，M # # KOS (Rubella K0S)，M # # KlS (Rubella KlS)，風(fēng)疹病毒 K2S (Rubella K2S)，水痘一帶狀皰疹病毒(Varicella-Zoster virus)，肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae),沙目艮衣原體(Chlamydia trachomatis),月市炎衣原體 (Chlamydia pneumoniae),或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述的抗原核酸序列編碼部分或全長流感病毒HAGnfluenza hemagglutinin)。在本發(fā)明的另一方面，提供一種生物疫苗，由所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生。在一個優(yōu)選例中，所述的生物疫苗為所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞，其含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段；或所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞的孢子，其含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段。在本發(fā)明的另一方面，提供一種生物疫苗在制備預(yù)防、控制或治療下述疾病、病癥或狀況的藥物中的用途感冒、流性感冒、口蹄疫、肺炎、肝炎、氣管炎、腹瀉、皰疹、眼內(nèi)炎、 角膜炎、麻疹、腮腺炎、德國麻疹和水痘-帶狀皰疹。在一個優(yōu)選例中，所述藥物的用藥途徑為下述任何一種口服，吸入，舌下吸收，口腔吸收，鼻腔吸收，尿道吸收和肛門內(nèi)吸收。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。


圖1、本發(fā)明的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)的一個樣例。本樣例中表達(dá)載體整合于細(xì)胞基因組上。其中，1表示細(xì)胞，2表示表達(dá)載體，3表示抗原核酸序列，4表示細(xì)胞基因組，5表示抗原蛋白或抗原蛋白片段，10表示炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞的孢子。圖2、本發(fā)明的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)的另一個樣例。本樣例中表達(dá)載體為質(zhì)粒存在于細(xì)胞內(nèi)。 其中，1表示細(xì)胞，2表示表達(dá)載體，3表示抗原核酸序列，4表示細(xì)胞基因組，5表示抗原蛋白或抗原蛋白片段，10表示炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞的孢子。
圖3、可用于本發(fā)明的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)的表達(dá)載體的一個樣例。
(A)質(zhì)粒pSK108帶有整個從pXOl質(zhì)粒來的炭疽桿菌Ief基因包含 900bp上游和下游從PXOl質(zhì)粒來的核酸序列?？寺≥d體為pBluescript II。(B)質(zhì)粒pSBl包含整個從pXOl質(zhì)粒來的炭疽桿菌Ief基因核酸序列?？寺≥d體為pUC19。(C)質(zhì)粒plefHal帶有從質(zhì)粒pT3PR8經(jīng)PCR獲得的流感病毒A (influenza A/ Puerto Rico/8/34) hemagglutinin (HA) (influenza HA)歹lj。
具體實施例方式本發(fā)明人經(jīng)過深入的研究，提供了一個生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括(A)至少一種微生物細(xì)胞，所述的微生物細(xì)胞為炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis)或無毒炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis Sterne strain)，其缺陷或缺失選自以下的基因炭疽桿菌致死因子基因(LF)，炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)，炭疽桿菌水腫因子(EF)，或其組合之一；(B)至少一種構(gòu)建物，所述的構(gòu)建物包括至少一種抗原核酸序列，所述的抗原核酸序列表達(dá)至少一種抗原蛋白或抗原蛋白片段。本發(fā)明也可為一種由上所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗。本發(fā)明也包括所述生物疫苗在制備預(yù)防、緩解、控制或治療下述疾病、病癥或狀況藥物中的用途感冒、流性感冒、肺炎、肝炎、氣管炎、腹瀉、皰疹、眼內(nèi)炎、角膜炎、麻疹、腮腺炎、德國麻疹和水痘-帶狀皰疹。該微生物細(xì)胞也可為大腸桿菌細(xì)胞，枯草桿菌細(xì)胞，或其組合之一。如圖1或圖2，本發(fā)明的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，該微生物細(xì)胞1可包含至少一個缺陷或缺失的基因。該缺陷或缺失的基因可在細(xì)胞基因組4中或質(zhì)粒上。該微生物細(xì)胞為炭 'MtfMMM (Bacillus anthracis) ^^cM^MtfMMM (Bacillus anthracis Sterne strain)時，該缺陷或缺失的基因可為炭疽桿菌致死因子Ief基因(LF，lethal factor), 炭疽桿菌磷脂酰肌醇酯酶基因(PI-PLC，phosphatidylinositol-specific phospholipase C)，炭疽桿菌水腫因子(EF，edma factor)，或其組合之一。包含至少一個缺陷或缺失基因的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞在文獻(xiàn)中已有詳細(xì)報道(W0 2009/073330，國際申請日為2008年11月12日)。該炭疽桿菌致死因子基因(LF)可含有缺失編碼氨基酸序列第331至418位的核酸序列。該炭疽桿菌致死因子基因(LF)可缺失編碼整個該炭疽桿菌致死因子基因(LF)的核酸序列。該炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)可含有缺失編碼整個該炭疽桿菌該炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)的核酸序列。該炭疽桿菌水腫因子(EF)可含有缺失編碼氨基酸序列第359至601的核酸序列。上述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，該表達(dá)載體可整合于細(xì)胞基因組或質(zhì)粒上。若使用炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞，該表達(dá)載體可整合于該炭疽桿菌細(xì)胞或該無毒炭疽桿菌細(xì)胞基因組(圖1)或質(zhì)粒上(圖幻。該表達(dá)載體可整合于該炭疽桿菌細(xì)胞或該無毒炭疽桿菌細(xì)胞基因組或質(zhì)粒上的Ief (炭疽桿菌致死因子，lethal factor)基因內(nèi)。上述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，該抗原核酸序列可編碼一個或多個抗原基因。任何可以在微生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的抗原基因均可適用于本發(fā)明。該抗原核酸序列可編碼一個或多個異源或同源抗原基因。該抗原核酸序列可編碼一個或多個雜合抗原基因。該抗原核酸序列可編碼一個或多個人工合成的抗原基因。該抗原核酸序列可編碼一個或多個完整的抗原基因，也可編碼一個或多個抗原基因的片段。在一個樣例中，該抗原核酸序列可編碼一個或多個完整的抗原基因。在另一個樣例中，該抗原核酸序列可編碼一個或多個抗原基因片段。該完整的抗原基因或抗原基因的片段可受控于一個或多個表達(dá)調(diào)控機制，諸如啟動子、增強子、抑制子或其組合之一。該抗原核酸序列可編碼一個或多個基因，所述基因選自下組的一個或多個微生物腺病毒(Adenovirus)，巨細(xì)胞病毒(Cytomegalovirus)，登革熱病毒(Dengue virus), 人類皰疹病毒第四型(Epstein Barr virus),甲肝病毒Ofepatitis A)，單純皰疹病 _ (Herpes virus), M1 ^ A ^f # (Influenza A virus), ￥ M ^ # (Influenza A Hmi)，流感B病毒anfluenza B病毒)，麻疹病毒(Measles virus)，流行性腮腺炎病 _ (Mumps virus)，ilU^胃;) 1 (Parainfluenza 1)，ilU^胃;) 2 (Parainfluenza 2)， 副流感病毒3 (Parainfluenza 3)，輪狀病毒(Rotavirus)，口蹄疫病毒，呼吸道合胞病毒 (Respiratory Syncytialvirus)， M # # KOS (Rubella K0S)，M # # KlS (Rubella KlS)，風(fēng)疹病毒 K2S (Rubella K2S)，水痘一帶狀皰疹病毒(Varicella-Zoster virus)，肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae),沙目艮衣原體(Chlamydia trachomatis),月市炎衣原體 (Chlamydia pneumoniae),或其組合之一。上述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，該抗原核酸序列可編碼部分或整個influenza hemagglutinin (HA)基因。本發(fā)明還提供了一種由上所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗。該生物疫苗可為該炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis)或該無毒炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis Sterne strain)含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段，也可為該炭疽桿菌細(xì)胞或該無毒炭疽桿菌細(xì)胞的孢子10，所述孢子含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段(圖1和圖2)。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗可用于在預(yù)防、控制或治療下述疾病、病癥或狀況藥物中的用途感冒、流性感冒、口蹄疫(Aphtae印izooticae或 foot-and-mouth disease (FMD)或hoof-and-mouth disease)、肺炎、肝炎、氣管炎、腹瀉、皰疹、眼內(nèi)炎、角膜炎、麻疹、腮腺炎、德國麻疹和水痘-帶狀皰疹。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗在用于上述用途時，其用藥途徑為下述任何一種口服，吸入，舌下吸收，口腔吸收，鼻腔吸收，尿道吸收和肛門內(nèi)吸收。本發(fā)明所述生物疫苗可與食物混合口服。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗可用于人類或動物。動物可包括家禽和鳥類或其它經(jīng)濟(jì)動物，諸如雞、鴨、鵝、鵪鶉、觀賞鳥類等；家畜或其它經(jīng)濟(jì)動物，諸如豬、牛、馬、羊、騾等；其它哺乳動物，諸如猴、駱駝、狗、貓、貍貓等。因為微生物細(xì)胞具有快速生長繁殖的特性，本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)具有快速高效的優(yōu)點。由于利用克隆技術(shù)，本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)可具有廣泛的適用性，可根據(jù)需要生產(chǎn)特定的生物疫苗。由于可利用微生物孢子作為生物疫苗的形式，本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)的生物疫苗具有高度的穩(wěn)定性和長久的保存有效期。本發(fā)明所述生物疫苗微生物孢子可真空干燥后長期保存。下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件如 Sambrook 等人，分子克隆實驗室指南(New York Co Id Spring Harbor Laboratory Press, 1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)按重量計算。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。實施例1、構(gòu)建表達(dá)載體質(zhì)粒pSK108(圖3A)帶有整個從pXOl質(zhì)粒來的炭疽桿菌Ief基因，包含 900bp 上游和下游從pXOl質(zhì)粒來的核酸序列。質(zhì)粒PSK108的克隆載體為pBluescript II。質(zhì)粒pSK108的限制酶HincII/SacI片段包含整個從pXOl質(zhì)粒來的炭疽桿菌Ief 基因核酸序列再克隆到載體PUC19中，構(gòu)成質(zhì)粒pSBl (圖;3B)。A (influenza A/Puerto Rico/8/34) hemagglutinin (HA) (inf luenzaHA) 核酸序列可從質(zhì)粒PT3PR8經(jīng)PCR獲得的。該流感病毒A (influenza HA)核酸序列克隆到質(zhì)粒pSBl的NcoI/BsaAI位點中，構(gòu)成質(zhì)粒plefHal (圖3C)。質(zhì)粒plefHal的含有該流感病毒A (influenza HA)和Ief基因片段核酸序列的限制酶HindIII酶切片段可克隆到炭疽桿菌質(zhì)粒PAT113的HindIII酶切位點中構(gòu)成質(zhì)粒pSB2?；?qū)⒃撓拗泼窰indIII 片段直接用于轉(zhuǎn)化炭疽桿菌。該炭疽桿菌質(zhì)粒PAT113可見下列文獻(xiàn)=Trieu-Cuot P， Carlier C，Poyart-Salmeron C，Courvalin P :An integrative vector exploiting the transposition properties of Tnl545for insertional mutagenesis and cloning of genes from gram-positive bacteria. Gene 106(1) :21_7，19910實施例2、構(gòu)建生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)無毒炭疽桿菌的衍生菌株DMXH可作為受體菌株。該衍生菌株DMXH的Ief基因的一段798bp片段被一大觀霉素(spectinomycin)抗性基因置換導(dǎo)致大觀霉素抗性(sper)， 同時導(dǎo)致炭疽桿菌致死因子(lethal factor) Ief基因失活。上述質(zhì)粒pSB2可用于轉(zhuǎn)化炭疽桿菌衍生菌株DMXH ；所述的限制酶HindIII片段也可直接用于轉(zhuǎn)化炭疽桿菌衍生菌株DMXH。轉(zhuǎn)化后的炭疽桿菌衍生菌株DMXH經(jīng)雙次重組后，該大觀霉素(spectinomycin)抗性基因被上述質(zhì)粒pSB2或該限制酶HindIII片段抗性基因置換，獲得大觀霉素敏感(spes)衍生菌株DMXH 1。該大觀霉素敏感(spes)衍生菌株 DMXH 1經(jīng)擴大培養(yǎng)后即成為生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)。實施例3、生物疫苗的生產(chǎn)該大觀霉素敏感(spes)衍生菌株DMXH 1可按常規(guī)方法大量培養(yǎng)制成大量桿菌培養(yǎng)物。然后，該桿菌培養(yǎng)物可置于產(chǎn)孢培養(yǎng)條件下(Nicholson WL, and P. Setlow, Molecular biological methods for B acillus.Sporulation, germination and out-growth ed. I. C. R. H. a. S. M. C. (ed. ). 1990, Chichester John Wiley & Sons Ltd.p. 391-450.)形成炭疽桿菌孢子。該炭疽桿菌孢子真空干燥后即可用作抗流感的生物疫苗。實施例4、用生物疫苗免疫哺乳動物該炭疽桿菌孢子可置入C57BL/6小鼠的鼻腔內(nèi)進(jìn)行免疫。該炭疽桿菌孢子也可混入C57BL/6小鼠的食物中對小鼠進(jìn)行免疫。實施例5、用生物疫苗免疫家禽家禽流行性感冒A (avian influenza, Al)由A型流行性感冒病毒引起。A型流行性感冒病毒的HA基因片段(avian influenza HA)經(jīng)PCR獲得后克隆到質(zhì)粒pSBl中構(gòu)成質(zhì)粒plefHa2。無毒炭疽桿菌的衍生菌株DMXH可作為受體菌株。然后可大量培養(yǎng)制成大量桿菌培養(yǎng)物。然后，該桿菌培養(yǎng)物可置于產(chǎn)孢培養(yǎng)條件下形成炭疽桿菌孢子。該炭疽桿菌孢子真空干燥后即可用作抗流感的生物疫苗。該炭疽桿菌孢子可混入雞的食物中對雞群進(jìn)行免疫。在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
權(quán)利要求
1.一個生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的系統(tǒng)包括(A)至少一種微生物細(xì)胞，所述的微生物細(xì)胞為炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillusanthracis) 或無毒炭疽桿菌細(xì)胞(Bacillus anthracis Sterne strain)，其缺陷或缺失選自以下的基因炭疽桿菌致死因子基因(LF)，炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)，炭疽桿菌水腫因子 (EF)，或其組合之一；(B)至少一種構(gòu)建物，所述的構(gòu)建物包括至少一種抗原核酸序列，所述的抗原核酸序列表達(dá)至少一種抗原蛋白或抗原蛋白片段。
2.如權(quán)利要求1所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，其特征在于，(B)中，所述的構(gòu)建物是表達(dá)載體，該表達(dá)載體可在所述的微生物細(xì)胞內(nèi)存在或復(fù)制；并且，所述的抗原核酸序列整合于該表達(dá)載體中并能在所述的微生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生所述的抗原蛋白或抗原蛋白片段。
3.按照權(quán)利要求1所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞中(a)包含炭疽桿菌致死因子基因(LF)的核酸序列，但其編碼的炭疽桿菌致死因子的氨基酸序列第331至418位缺失；(b)不包含炭疽桿菌致死因子基因(LF)的核酸序列(c)不包含炭疽桿菌毒力因子基因(PI-PLC)的核酸序列；(d)包含炭疽桿菌炭疽桿菌水腫因子基因(EF)的核酸序列，但其編碼的炭疽桿菌水腫因子的氨基酸序列第359至601位缺失；或(e)以上(a)-(d)任意的二項或二項以上的組合。
4.按照權(quán)利要求1所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的構(gòu)建物可整合于所述的炭疽桿菌 ^ffllfi (Bacillus anthracis) 5 ^IillfliiS3Ifi (Bacillus anthracis Sterne strain) 基因組或質(zhì)粒上。
5.按照權(quán)利要求1所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的抗原蛋白或抗原蛋白片段來源于選自下組的一種或多種微生物腺病毒(Adenovirus)，巨細(xì)胞病毒(Cytomegalovirus)， 登革熱病毒(Dengue virus)，人類皰疹病毒第四型10 (Epstein Barr virus)，甲肝病毒 (Hepatitis k), it M^(Herpes virus), M1^ A ^f # (Influenza A virus), ^ 型流感病毒(Influenza A H1N1)，流感B病毒(Influenza B病毒)，麻疹病毒(Measles virus)，流行性腮腺炎病毒(Mumpsvirus)，副流感病毒1 (Parainfluenza 1)，副流感病 _ 2 (Parainfluenza 2)， gij ^ # 3 (Parainfluenza 3)，# _ _ (Rotavirus)， Π 蹄疫病毒，呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytialvirus)，風(fēng)疹病毒KOS (Rubella K0S)，風(fēng)疹病毒KlS(Rubella KlS)，風(fēng)疹病毒K2S(Rubella K2S)，水痘一帶狀皰疹病毒(Varicella-Zoster virus)，月市炎支原體(Mycoplasma pneumoniae)，沙目艮衣原體 (Chlamydia trachomatis)，月市炎衣原體(Chlamydia pneumoniae)，或其組合。
6.按照權(quán)利要求1所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)，所述的抗原核酸序列編碼部分或全長流感病毒 HA (influenza hemagglutinin)。
7.—種生物疫苗，由權(quán)利要求1-6任一所述的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生。
8.按照權(quán)利要求7所述的生物疫苗，所述的生物疫苗為所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞，其含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段；或所述的炭疽桿菌細(xì)胞或無毒炭疽桿菌細(xì)胞的孢子，其含有任何一個或多個上述抗原蛋白或抗原蛋白片段。
9.按照權(quán)利要求8所述的生物疫苗在制備預(yù)防、控制或治療下述疾病、病癥或狀況的藥物中的用途感冒、流性感冒、口蹄疫、肺炎、肝炎、氣管炎、腹瀉、皰疹、眼內(nèi)炎、角膜炎、麻疹、腮腺炎、德國麻疹和水痘-帶狀皰疹。
10.按照權(quán)利要求9所述的用途，所述藥物的用藥途徑為下述任何一種口服，吸入，舌下吸收，口腔吸收，鼻腔吸收，尿道吸收和肛門內(nèi)吸收。
全文摘要
本發(fā)明為一個快速高效的生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)及其所生產(chǎn)的生物疫苗。該生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)利用至少一種微生物細(xì)胞，至少一種表達(dá)載體，至少一個抗原核酸序列決定一抗原蛋白或抗原蛋白片段來生產(chǎn)生物疫苗。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗可用于人類或動物。動物可包括家禽、鳥類、家畜和其它哺乳動物。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)具有快速高效的優(yōu)點并具有廣泛的適用性。本發(fā)明所述生物疫苗生產(chǎn)系統(tǒng)產(chǎn)生的生物疫苗具有高度的穩(wěn)定性和長久的保存有效期。
文檔編號A61K39/29GK102462838SQ20101054546
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月15日
發(fā)明者沈浩 申請人:沈浩