專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗egfr人源化單克隆抗體制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物制劑領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明公開(kāi)了一種抗EGFR人源化單克隆抗體制劑。
背景技術(shù)：
EGFR在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、修復(fù)和生存、新生血管生成、侵襲和轉(zhuǎn)移中具有重要的作用，同時(shí)在相當(dāng)一部分的人類(lèi)腫瘤中都有表達(dá)。在很多惡性腫瘤中，EGFR的表達(dá)往往與較差的預(yù)后和較低的生存率相關(guān)。因此，眾多研究機(jī)構(gòu)和研究人員對(duì)能阻斷EGFR活性的 EGFR抗體進(jìn)行了研究，其中，Imclone公司提供了 EGFR的抗體藥物ErbituxJS Erbitux是一種抗EGFR嵌合抗體，其由小鼠抗表皮生長(zhǎng)因子抗體的可變區(qū)與人抗體Gl重鏈和輕鏈恒定區(qū)的免疫球蛋白組成，因此，當(dāng)使用時(shí)，患者會(huì)產(chǎn)生HAMA反應(yīng)(人抗小鼠抗體)，從而限制了抗體達(dá)到其抗原靶標(biāo)的能力，使抗體的效能降低。為克服該缺陷，上海張江生物技術(shù)有限公司提供了一種重組抗EGFR人源化單克隆抗體(專(zhuān)利號(hào)為2005100M158.3的中國(guó)專(zhuān)利)，但未能提供合適的重組抗EGFR人源化單克隆抗體制劑。雖然現(xiàn)有技術(shù)中有一些抗EGFR嵌合抗體的制劑，但首先由于抗EGFR嵌合抗體和抗EGFR人源化單克隆抗體的蛋白結(jié)構(gòu)等差異，因此，不能直接使用其制劑配方；其次，現(xiàn)有抗EGFR嵌合抗體制劑也存在有各自的不足，如=Imclone公司生產(chǎn)的Erbitux為液體制劑， 由重組抗體、氯化鈉、磷酸鹽緩沖液組成，其PH為7. 2 7. 4，該制劑禁止震動(dòng)或稀釋?zhuān)荒茏黛o脈注射使用，只能由輸液泵或注射器輸入體內(nèi)，穩(wěn)定性很差，保存和使用極為不便；申請(qǐng)?zhí)枮?00610147279. 1的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)，提供了一種穩(wěn)定的抗EGFR嵌合抗體的液體制劑， 但該制劑中的抗EGFR嵌合抗體的濃度較低，因此，當(dāng)需大量注射抗EGFR嵌合抗體時(shí)，會(huì)導(dǎo)致其使用上的不便；申請(qǐng)?zhí)枮?00780022178. 4和申請(qǐng)?zhí)枮?00810137278.8的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)峁┝丝笶GFR嵌合抗體的凍干制劑，但由于在使用前需要將凍干制劑重新溶解，因此導(dǎo)致了額外的操作步驟，更重要的是，還可能會(huì)導(dǎo)致藥品污染而對(duì)患者產(chǎn)生嚴(yán)重的危害。因此，有必要提供一種適宜的，特別是在高濃度下穩(wěn)定的重組抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑。對(duì)于患者，如能提供一種穩(wěn)定的、高濃度的抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑則可以提高使用便利性，又降低使用的痛苦(特別是在大劑量使用抗EGFR人源化單克隆抗體藥物時(shí))，因而具有重要使用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的申請(qǐng)人在研究中，意外發(fā)現(xiàn)了一種抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑，該制劑可以明顯的減少高濃度的抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑長(zhǎng)期放置后產(chǎn)生的顆粒，穩(wěn)定性很好，省去了藥品使用前過(guò)濾的煩瑣步驟，同時(shí)也可以使用藥更安全。因此，本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定的、高濃度的抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑。因此，本發(fā)明公開(kāi)了
一種抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑，該制劑中含有高濃度抗EGFR人源化單克隆抗體、PEG、甘露醇和緩沖液，所述制劑中含有或不含有溶液穩(wěn)定劑，所述制劑中含有或不含有等滲調(diào)節(jié)劑。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，該液體制劑中的PEG為PEG 400-PEG8000，優(yōu)選為 PEG 1000-PEG 4000。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，該液體制劑中的緩沖液為磷酸鹽緩沖液、Trisdi 氨酸緩沖液之一，優(yōu)選為由磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉組成的磷酸鹽緩沖液。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，該液體制劑中的溶液穩(wěn)定劑為蔗糖、海藻糖、麥芽糖之一或其組合。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，該液體制劑中的等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施例，該液體制劑中含有抗EGFR人源化單克隆抗體20 100mg/ml，PEG 0. 01 5 %，甘露醇2 10mg/ml，溶液穩(wěn)定劑0 10mg/ml，緩沖液 2 15mmol/l, NaCl 0 10mg/mlo根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施例，該液體制劑中含有抗EGFR人源化單克隆抗體20mg/ml、PEG 0. 01%、甘露醇ang/ml、溶液穩(wěn)定劑10mg/ml、緩沖液2mmol/l或含有抗 EGFR人源化單克隆抗體40mg/ml、PEG 2 %、甘露醇5mg/ml、溶液穩(wěn)定劑5mg/ml、緩沖液 5mmol/l或含有抗EGFR人源化單克隆抗體60mg/ml、PEG 3%、甘露醇7mg/ml、溶液穩(wěn)定劑 8mg/ml、緩沖液8mmol/l或含有抗EGFR人源化單克隆抗體80mg/ml、PEG 1 %、甘露醇6mg/ ml、緩沖液15mmol/l或含有抗EGFR人源化單克隆抗體100mg/ml、PEG 5%、甘露醇IOmg/ ml、溶液穩(wěn)定劑3mg/ml、緩沖液lOmmol/1。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例僅僅對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明，不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制?？笶GFR人源化單克隆抗體制備參見(jiàn)專(zhuān)利號(hào)為2005100M158. 3、發(fā)明名稱(chēng)為重組抗EGFR人源化單克隆抗體的中國(guó)專(zhuān)利，本發(fā)明所述的抗EGFR人源化單克隆抗體不僅僅限于這一種，如本領(lǐng)域的技術(shù)人員利用通用的基因工程技術(shù)得到的抗EGFR人源化單克隆抗體也在本發(fā)明所述的抗EGFR人源化單克隆抗體之列。本發(fā)明的下述實(shí)施例中，使用的PEG為PEG 400-PEG 8000，優(yōu)選為PEG1000-PEG 4000。其它輔料如果沒(méi)有特別說(shuō)明，均為市售藥用級(jí)別。在本發(fā)明的下述實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例中，雖然僅使用了磷酸鹽緩沖液，但使用其他的pH 合適的緩沖液，也能達(dá)到本發(fā)明的目的，這對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的，因此，也屬于本發(fā)明的保護(hù)內(nèi)容。在本發(fā)明的下述實(shí)施例中，活性檢測(cè)方法參見(jiàn)Dual-Agent Molecular Targeting of the Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) Combining Anti-EGFR Antibody with Tyrosine Kinase Inhibitor. Shyhmin Huang，Eric A. Armstrong, Sergio Benavente, Prakash Chinnaiyan and Paul M. Harari. Cancer Res. 2004Aug 1 ；64(15) :5355-62.
Combined Epidermal Growth Factor Receptor Targeting with the Tyrosine Kinase Inhibitor Gefitinib(ZD 1839)and the Monoclonal Antibody Cetuximab (IMC-C225). Superiority Over Single-Agent Receptor Targeting. Pablo Matar1, Federico Rojo2, Raiil Cassia3, Gema Moreno-Bueno3, Serena Di Cosimo4, JoseTabernero1, Marta Guzman1, Sonia Rodriguez1, Joaquin Arribas1, JosePalacios3 andJoseBaselga1. Clin Cancer Res. 20040ct 1 ；10(19) :6487-501.The Effects of Cetuximab Alone and in Combination With Radiation and/or Chemotherapy in Lung Cancer. David Raben1, Barb Helfrich2, Daniel C. Chan2,Fortunato Ciardiello5,LiMin Zhao2,Wilbur Franklin3, Anna E. Baron4,Chan Zeng4,Tim K. Johnson1 and Paul A. Bunn, Jr2. Clin Cancer Res. 2005Jan 15 ；ll(2Ptl) :795-805.實(shí)施例1-5、抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑的制備按表1的配方分別配置抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑，獲得半成品產(chǎn)品。表1、抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑配方
權(quán)利要求
1.一種抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑，其特征在于，所述制劑中含有高濃度抗 EGFR人源化單克隆抗體、PEG、甘露醇和緩沖液，所述制劑中含有或不含有溶液穩(wěn)定劑，所述制劑中含有或不含有等滲調(diào)節(jié)劑。
2.如權(quán)利要求1所述的液體制劑，其特征在于，所述PEG為PEG400-PEG8000。
3.如權(quán)利要求2所述的液體制劑，其特征在于，所述PEG為PEG1000-PEG4000。
4.如權(quán)利要求1所述的液體制劑，其特征在于，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、Trisji 氨酸緩沖液之一。
5.如權(quán)利要求4所述的液體制劑，其特征在于，所述緩沖液為由磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉組成的磷酸鹽緩沖液。
6.如權(quán)利要求1所述的液體制劑，其特征在于，所述溶液穩(wěn)定劑為蔗糖、海藻糖、麥芽糖之一或其組合。
7.如權(quán)利要求1所述的液體制劑，其特征在于，所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的液體制劑，其特征在于，所述液體制劑中含有抗 EGFR人源化單克隆抗體20 100mg/ml，PEG 0. 01 5%，甘露醇2 10mg/ml，溶液穩(wěn)定劑 0 10mg/ml，緩沖液 2 15mmol/l, NaCl 0 10mg/ml。
9.如權(quán)利要求8所述的液體制劑，其特征在于，所述液體制劑中含有抗EGFR人源化單克隆抗體20mg/ml、PEG 0. 01 %、甘露醇ang/ml、溶液穩(wěn)定劑10mg/ml、緩沖液2mmol/l，或含有抗EGFR人源化單克隆抗體40mg/ml、PEG2%、甘露醇5mg/ml、溶液穩(wěn)定劑5mg/ml、緩沖液 5mmol/l，或含有抗EGFR人源化單克隆抗體60mg/ml、PEG 3%、甘露醇7mg/ml、溶液穩(wěn)定劑 8mg/ml、緩沖液8mmol/l，或含有抗EGFR人源化單克隆抗體80mg/ml、PEG 1%、甘露醇6mg/ ml、緩沖液15mmol/l，或含有抗EGFR人源化單克隆抗體100mg/ml、PEG 5%、甘露醇IOmg/ ml、溶液穩(wěn)定劑3mg/ml、緩沖液lOmmol/1。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑，該制劑中含有高濃度抗EGFR人源化單克隆抗體、PEG、甘露醇和緩沖液，所述制劑中含有或不含有溶液穩(wěn)定劑，所述制劑中含有或不含有等滲調(diào)節(jié)劑。該制劑可以明顯的減少高濃度的抗EGFR人源化單克隆抗體的液體制劑長(zhǎng)期放置后產(chǎn)生的顆粒，穩(wěn)定性很好，省去了藥品使用前過(guò)濾的煩瑣步驟，同時(shí)也可以使用藥更安全。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102552903SQ20101058152
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月9日
發(fā)明者周波, 杜荔, 王皓, 馬凱 申請(qǐng)人:上海張江生物技術(shù)有限公司