專(zhuān)利名稱(chēng)：聚乙二醇甘草次酸酯、復(fù)合載藥膠束及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及聚乙二醇甘草次酸酯、復(fù)合載藥膠束及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
目前，載藥膠束作為藥物載體已經(jīng)顯示了較好的應(yīng)用前景，其組成材料具有生物可降解性，毒性小等特點(diǎn)，還可緩釋藥物，延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間；靜脈給藥后可由肝臟 Kuppfer細(xì)胞攝取而被動(dòng)靶向于肝，使藥物達(dá)到肝器官的目的。但是普通膠束易被調(diào)理素識(shí)別，被肝臟以外的其他單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬，存在選擇性差，靶向效率低的問(wèn)題。Negishi等在證實(shí)了離體大鼠肝細(xì)胞勻漿的細(xì)胞膜組分中含有多量甘草次酸 (Glycyrrhetinic Acid,GA)特異結(jié)合位點(diǎn)，在所有臟器組織中，肝臟的GA結(jié)合位點(diǎn)活性最高。GA與該位點(diǎn)的結(jié)合呈可飽和性、高度特異性，且該位點(diǎn)具蛋白質(zhì)性質(zhì)。國(guó)內(nèi)也有學(xué)者用透射電鏡進(jìn)行觀察，證實(shí)了肝細(xì)胞表面確存在大量GA受體。隨后國(guó)內(nèi)外一些學(xué)者紛紛報(bào)道了以甘草酸/甘草次酸修飾的脂質(zhì)體或血清蛋白可以在肝臟組織中富集。如毛聲俊等在肝細(xì)胞靶向甘草次酸表面修飾脂質(zhì)體的制備[中國(guó)中藥雜志，2003 年4月第沘卷第4期，328-331]以及毛聲俊在2007年P(guān)r印aration，characterization and uptake by primary cultured rat hepatocytes of liposomes surface-modified with glycyrrhetinic acid. Pharmazie，[ORIGINAL ARTICLES，2007年，62卷第 8 期614-619]中公開(kāi)了一種甘草次酸表面修飾脂質(zhì)體，它是將GA與硬脂醇、琥珀酸酐偶聯(lián)，合成一新型兩親性導(dǎo)向分子，將其摻入脂質(zhì)體中，介導(dǎo)該修飾脂質(zhì)體與肝細(xì)胞表面的GA受體特異結(jié)合， 以期達(dá)到肝細(xì)胞主動(dòng)靶向作用。該甘草次酸表面修飾脂質(zhì)體簡(jiǎn)稱(chēng)LP-SM-GA。制得的甘草次酸修飾的脂質(zhì)體平均粒徑在65 79nm之間，甘草次酸修飾脂質(zhì)的摩爾含量最高為10%。 又如，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN101006983A公開(kāi)了甘草酸修飾殼聚糖/羧化殼聚糖復(fù)合載藥納米粒的制備方法，甘草酸修飾組可進(jìn)入到鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞核中，相同時(shí)間內(nèi)熒光標(biāo)記的甘草酸鹽修飾的納米粒在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于對(duì)照組，具體是將甘草酸鹽為靶向基團(tuán)，通過(guò)靜電相互作用制備成載藥納米粒而并未涉及甘草次酸的相關(guān)內(nèi)容(文獻(xiàn)報(bào)道肝細(xì)胞膜上甘草次酸的結(jié)合位點(diǎn)多于甘草酸)；中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN1743008A公開(kāi)了甘草次酸修飾的殼聚糖納米粒子并表現(xiàn)出明顯的肝靶向性，但甘草次酸直接修飾殼聚糖的制備條件較為復(fù)雜，取代度低(5% )，因此開(kāi)發(fā)新的方法引入靶向基團(tuán)，提高給藥系統(tǒng)中靶向基團(tuán)的含量意義重大；中國(guó)專(zhuān)利CN1012M308B制備了甘草次酸-氨基聚乙二醇/殼聚糖或殼聚糖衍生物肝靶向復(fù)合納米粒，體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)肝細(xì)胞有很強(qiáng)的結(jié)合能力，可提高給藥系統(tǒng)的肝靶向能力，實(shí)現(xiàn)對(duì)肝臟的靶向定位。對(duì)甘草次酸的改性研究很多，華東理工大學(xué)的洪偉等從甘草次酸的羧基修飾聚乙二醇作為一種抗腫瘤藥物，而并未提及其作為靶向配基的可能 (洪偉，何明磊，魏東芝.18-β甘草次酸聚乙二醇軛合物的合成及體外抗腫瘤活性.華東理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，32 :415)。基于上述應(yīng)用背景，發(fā)明人欲提供一種全新的，以甘草次酸為主要原料制備的化合物——聚乙二醇甘草次酸酯，并應(yīng)用該化合物制成載藥膠束。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種以甘草次酸為主要原料制備的化合物—— 聚乙二醇甘草次酸酯，具體地，是利用甘草次酸的羥基或羧基，與聚乙二醇或聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)得到的化合物。(1)當(dāng)甘草次酸的羧基與聚乙二醇兩端偶聯(lián)時(shí)，得到式I化合物(以下簡(jiǎn)稱(chēng) GA-PEG)
權(quán)利要求
1.聚乙二醇甘草次酸酯，其特征在于利用甘草次酸的羥基或羧基，與聚乙二醇或聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)得到的化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乙二醇甘草次酸酯，其特征在于 (1)當(dāng)甘草次酸的羧基與聚乙二醇兩端偶聯(lián)時(shí)，得到式I化合物丨^^η = 43 2000 式I(2)當(dāng)甘草次酸的羧基與聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)時(shí)，得到式II化合物η = 43 2000 式II(3)當(dāng)甘草次酸的羥基與聚乙二醇兩端偶聯(lián)時(shí)，得到式III化合物οζO〇η = 43 2000 式III(4)當(dāng)甘草次酸的羥基與聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)時(shí)，得到式IV化合物
3.權(quán)利要求2所述的聚乙二醇甘草次酸酯的制備方法，其特征在于(1)式I化合物的制備方法為甘草次酸，聚乙二醇溶解于有機(jī)溶劑中，0°c下加入縮合劑及4-N，N- 二甲胺基吡啶，攪拌0. 5 1小時(shí)，升溫回流反應(yīng)12 48小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮后用乙醚沉淀，收集固體，室溫真空干燥，得甘草次酸羧基偶聯(lián)聚乙二醇的式I化合物；其中，所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮、二氧六環(huán)、N， N- 二甲基甲酰胺或其中任意兩種或多種的混合溶液；(2)式II化合物的制備方法為甘草次酸，聚乙二醇單甲醚溶解于有機(jī)溶劑中，0°C下加入縮合劑及4-N，N- 二甲胺基吡啶，攪拌0. 5 1小時(shí)，升溫回流反應(yīng)12 48小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮后用乙醚沉淀，收集固體，室溫真空干燥，得甘草次酸羧基偶聯(lián)聚乙二醇單甲醚的II化合物；其中，所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮、二氧六環(huán)、N， N-二甲基甲酰胺或其中任意兩種或多種的混合溶液；(3)式III化合物的制備方法為A、甘草次酸溶于甲醇中，加入對(duì)甲苯磺酸，回流M 72小時(shí)，濃縮反應(yīng)液，在水中沉淀，然后用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用5%碳酸鈉洗滌，再用無(wú)水硫酸鎂干燥，旋蒸得到白色固體為甘草次酸甲酯；B、取甘草次酸甲酯和丁二酸酐，溶于無(wú)水吡啶中，加入三乙胺，回流14 15小時(shí)，冷卻，冷水稀釋?zhuān)}酸調(diào)PH值為3 4，過(guò)濾，熱水洗滌固體，色譜柱分離提純，得丁二酸化甘草次酸甲酯；C、丁二酸化甘草次酸甲酯，聚乙二醇溶解于二氯甲烷中，0°C下緩慢加入縮合劑及4-N， N- 二甲胺基吡啶，攪拌0. 5 1小時(shí)，升溫回流12 48小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮后用乙醚沉淀，收集固體，室溫真空干燥，得甘草次酸羥基偶聯(lián)聚乙二醇的式III化合物；(4)式IV化合物的制備方法為A、甘草次酸溶于甲醇中，加入對(duì)甲苯磺酸，回流M 72小時(shí)，濃縮反應(yīng)液，在水中沉淀，然后用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用5%碳酸鈉洗滌，再用無(wú)水硫酸鎂干燥，旋蒸得到白色固體為甘草次酸甲酯；B、取甘草次酸甲酯和丁二酸酐，溶于無(wú)水吡啶中，加入三乙胺，回流14 15小時(shí)，冷卻，冷水稀釋?zhuān)}酸調(diào)PH值為3 4，過(guò)濾，熱水洗滌固體，色譜柱分離提純，得丁二酸化甘草次酸甲酯；C、丁二酸化甘草次酸甲酯，聚乙二醇單甲醚溶解于二氯甲烷中，0°C下緩慢加入縮合劑及4-N，N- 二甲胺基吡啶，攪拌0. 5 1小時(shí)，升溫回流12 48小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮后用乙醚沉淀，收集固體，室溫真空干燥，得甘草次酸羥基偶聯(lián)聚乙二醇單甲醚的式IV化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的聚乙二醇甘草次酸酯的制備方法，其特征在于制備式I-IV 四種化合物采用的縮合劑包括二環(huán)己基碳二亞胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、羰基二咪唑、二異丙基碳二亞胺、苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯、苯并三唑四甲基四氟硼酸、六氟磷酸苯并三唑-ι-基-氧基三吡咯烷基磷酸鹽、苯并三氮唑-ι-基氧基三(二甲基氨基)磷鐺六氟磷酸鹽中的至少一種或其中任意幾種的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的聚乙二醇甘草次酸酯的制備方法，其特征在于甘草次酸與聚乙二醇偶聯(lián)時(shí)，甘草次酸與聚乙二醇的摩爾配比為1 0.1-1;甘草次酸與聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)時(shí)，甘草次酸與聚乙二醇單甲醚摩爾配比為1 1-10。
6.權(quán)利要求1或2所述的聚乙二醇甘草次酸酯作為給藥系統(tǒng)的載藥載體中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于以聚乙二醇甘草次酸酯為載體材料制備載藥膠束。
8.復(fù)合載藥膠束，其特征在于以權(quán)利要求1或2所述的聚乙二醇甘草次酸酯為載體材料，與藥物混合制備而成。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的復(fù)合載藥膠束，其特征在于聚乙二醇甘草次酸酯與藥物的質(zhì)量比為1 0.01 1。
10.權(quán)利要求8或9所述的復(fù)合載藥膠束的制備方法，其特征在于采用混合法、乳化-溶劑揮發(fā)法、自組裝溶劑蒸發(fā)法、薄膜分散法、透析法、熔融法中的任意一種，以聚乙二醇甘草次酸酯為載體材料，與藥物混合制備復(fù)合載藥膠束。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及聚乙二醇甘草次酸酯、復(fù)合載藥膠束及其制備方法和用途。本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種以甘草次酸為主要原料制備的化合物——聚乙二醇甘草次酸酯，具體地，是利用甘草次酸的羥基或羧基，與聚乙二醇或聚乙二醇單甲醚偶聯(lián)得到的化合物。經(jīng)檢測(cè)，采用本發(fā)明聚乙二醇甘草次酸酯與藥物混合制備的復(fù)合載藥膠束的粒徑小、包封率和載藥量均較高，為臨床提供了一種全新的藥用載體及應(yīng)用該藥用載體制備載藥膠束。
文檔編號(hào)A61K9/00GK102558546SQ20101061743
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月31日
發(fā)明者何谷, 宋相容, 趙霞, 魏于全 申請(qǐng)人:四川大學(xué)