專(zhuān)利名稱(chēng)：包括銀離子源和薄荷醇的抗菌組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明在其一些實(shí)施方案中涉及抗菌組合物及其用途，并且更具體而言但是不限于，涉及可有效用于對(duì)表面例如身體表面進(jìn)行消毒并且因此可有效用于治療例如與感染相關(guān)的諸如急性和慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口的醫(yī)學(xué)病癥的抗菌組合物。慢性傷口的特征為愈合過(guò)程受損、炎癥階段延長(zhǎng)、缺乏再上皮化以及細(xì)胞外基質(zhì)重塑存在缺陷。積累在這些傷口中的細(xì)胞是衰老細(xì)胞并且它們對(duì)外源生長(zhǎng)因子的響應(yīng)降低。慢性傷口愈合過(guò)程受損的最終結(jié)果為組織破壞、局部壞死和感染。對(duì)傷口床的處理是實(shí)現(xiàn)最終傷口閉合必需的多階段過(guò)程。清創(chuàng)術(shù)、控制感染和傷口閉合是慢性傷口愈合中的重要階段。2005年，醫(yī)院獲得性感染已被列為美國(guó)的第四大死因。據(jù)報(bào)導(dǎo)每年約一千萬(wàn)具有外傷性傷口的患者在美國(guó)的急診部接受治療。慢性傷口累及1-3%的總?cè)丝诓⑶抑饕ㄏ轮o脈性潰瘍、糖尿病足潰瘍和壓瘡。由慢性靜脈功能不全引起的靜脈性潰瘍?cè)陔y愈慢性傷口中最常見(jiàn)( 70%)。慢性傷口感染導(dǎo)致危及生命的并發(fā)癥的急診病例的數(shù)量隨著被抗生素抗性微生物感染的慢性傷口數(shù)量的增加而不斷增加。細(xì)菌定植的存在是大多數(shù)慢性傷口發(fā)病機(jī)制中的最主要因素之一，引起傷口組織中高細(xì)菌計(jì)數(shù)和宿主炎癥反應(yīng)。在被感染的慢性傷口中，當(dāng)被大量細(xì)菌感染時(shí)創(chuàng)傷愈合會(huì)延遲甚至停止。減少細(xì)菌載量非常關(guān)鍵并且應(yīng)該在愈合過(guò)程之前進(jìn)行。為了優(yōu)化傷口愈合過(guò)程，通常有必要與減少細(xì)菌載量一起對(duì)潛在的影響因素例如營(yíng)養(yǎng)不良和缺血進(jìn)行治療。慢性傷口感染延遲愈合并且經(jīng)常引起慢性傷口床的情況惡化，這也會(huì)引起傷口的完全破壞。除了對(duì)傷口的有害作用，感染還能夠引起在一些條件下是致命的全身作用。細(xì)菌污染通過(guò)數(shù)種不同的機(jī)制延遲傷口愈合，例如持續(xù)產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，其導(dǎo)致炎癥反應(yīng)延長(zhǎng)從而促使宿主損傷并且延遲愈合過(guò)程。另外，細(xì)菌與宿主細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)傷口愈合過(guò)程必需的養(yǎng)分和氧。傷口感染還會(huì)導(dǎo)致組織缺氧、阻礙肉芽組織生長(zhǎng)、減少成纖維細(xì)胞的數(shù)量和膠原產(chǎn)生并且破壞再上皮化。因此解決感染傷口清洗的問(wèn)題是傷口護(hù)理的主要目標(biāo)并且對(duì)傷口處理具有重要作用。一大部分足潰瘍是由糖尿病并發(fā)癥引起的。這些損傷經(jīng)常被感染并且經(jīng)常伴有骨髓炎。這些損傷中的大多數(shù)感染為輕度至中度并且可以通過(guò)適當(dāng)?shù)膫谧o(hù)理和口服抗生素療法進(jìn)行治療。但是一些感染擴(kuò)散至筋膜、肌肉、關(guān)節(jié)和骨。在這些情況下，患者需要住院治治療、腸胃外抗生素治療以及手術(shù)。在一些病例中，糖尿病患者的足感染難以治療并且治療失敗常常導(dǎo)致下肢截肢。另外，由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)引起的糖尿病足感染與延遲愈合相關(guān)并且在許多病例中與截肢相關(guān)?？咕鷦┩ǔ１挥糜陬A(yù)防和治療傷口感染。與選擇性作用于特異微生物的抗生素不同，抗菌劑具有多個(gè)靶點(diǎn)和較寬的活性范圍。大多數(shù)現(xiàn)有抗菌劑未顯示明顯地阻礙愈合。在可商購(gòu)的抗菌劑中，臨床最常使用的為碘、氯己定、乙醇、醋酸、過(guò)氧化氫、溴酸、硝酸銀、磺胺嘧啶銀和次氯酸鈉。但是鑒于近期報(bào)導(dǎo)的與被污染的抗菌劑相關(guān)的疾病爆發(fā)，它們的功效似乎具有局限性[Weber等人，2007，Antimicrob Agent Chemother 51: 4217-4224]。銀化合物被廣泛用作傷口抗菌劑以對(duì)抗慢性傷口和包括燒傷在內(nèi)的急性傷口的細(xì)菌感染[Burrell 2003，Ostomy Wound Manag 49 :19-24 ；Ovington 2004，Ostomy Wound Manag 50:1S_15]。已知銀可以阻斷革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)。銀離子可以殺滅微生物但是它對(duì)于增殖的肉芽組織無(wú)細(xì)胞毒性。銀制劑表現(xiàn)出可增加微生物殺滅的速率和程度，減少滲出液形成并且據(jù)近期報(bào)導(dǎo)可作用于細(xì)菌被膜。最常使用的銀化合物是磺胺嘧啶銀(SSD)和硝酸銀(AgNO3)。其他通常使用的局部用含銀藥劑是銀納米晶顆粒。磺胺嘧啶銀(SSD)通常被用作預(yù)防燒傷患者感染的治療 [Klasen 2000,Burns 26 131-138]。已研發(fā)了銀納米晶釋放系統(tǒng)例如Acticoat [Tredget 等人，1998，J. Burn Care Rehabil. 19 =531-537]以延長(zhǎng)其功效。對(duì)具有被感染的慢性壓瘡的患者進(jìn)行SSD治療并且在所有潰瘍中觀察到細(xì)菌載量有效減少。SSD1%霜?jiǎng)┛娠@著減少靜脈性潰瘍、對(duì)傷口清洗和肉芽組織形成具有正向作用。硝酸銀最早被用于慢性傷口和潰瘍的治療[Klasen 2000, Burns 26 :131-138] 0 已發(fā)現(xiàn)其對(duì)寬范圍的菌群特別是對(duì)革蘭氏陰性菌有效。后來(lái)將銀納米晶以緩釋制劑摻入傷口敷料中用于治療包括燒傷在內(nèi)的急性和慢性傷口 [Voight等人，2001，Wounds 13: B11-B21 ;Sondi 和 Salopek-Sondi2004，J Colloid Interf Sci 275 :177-182 ；Parsons ^ 人，2005，Wounds, 17 :222-232]。用于局部傷口治療的含銀制劑大多是基于含銀的傷口敷料。將銀離子通過(guò)此類(lèi)敷料遞送并擴(kuò)散至感染傷口常常受限于導(dǎo)致非活性氯化銀沉淀的例如與氯離子的化學(xué)反應(yīng)， 減少了到達(dá)靶感染區(qū)域的抗菌銀離子的有效量。其他缺點(diǎn)包括由銀引起的著色和局部刺激。在普遍并且過(guò)多地使用基于銀的局部治療用于處理傷口的同時(shí)還注意到關(guān)于細(xì)菌銀耐藥性的報(bào)導(dǎo)的數(shù)量增加[Silver 2003，F(xiàn)EMSMicrobiology Reviews 27 :341-353 ； Chopra 2007, J Antimicrobial Chemotherapy 59 :587-590]。薄荷醇是植物來(lái)源的天然單萜，其常常作為止癢、防腐、鎮(zhèn)痛和/或清涼制劑的一部分用于皮膚病。最近報(bào)導(dǎo)了構(gòu)成薄荷醇對(duì)這些活性特別是對(duì)其抗菌活性的作用基礎(chǔ)的分子機(jī)制[Patel，2007，J Am Acad Dermatol 57 :873-878 ；Evrand 2001，Pharma Resear 18 :943-949 ；Trombetta φ 入，2005， Antimicrob Agent Chemother 49 :2474-2478 ； Schelz 等人，2006，F(xiàn)iterapia 77 :279-285 ；Cristani 等人 2007，J Agri Food Chem 55 6300-6308]。預(yù)期高滲溶液通過(guò)減少微生物載量、加強(qiáng)滲出液的清除和對(duì)體液循環(huán)的影響而增加對(duì)傷口床處理的益處。已證明高滲鹽溶液是神經(jīng)外科實(shí)踐中非常有用的工具。相關(guān)技術(shù)包括第5，643，589和5，562，643號(hào)美國(guó)專(zhuān)利。這些技術(shù)中將薄荷醇記載為還可用于皮膚病應(yīng)用的止癢劑、抗菌劑、鎮(zhèn)痛劑和清涼劑。還記載了包含銀離子和薄荷醇的組合物。例如默克手冊(cè)在“皮膚病局部治療原則”一章中建議將薄荷醇和銀組合用于皮膚病組合物(www, merck. com/mmpe/print/seclO/chl 10/chl 10a. html)。其中將銀定義為抗菌劑并且將薄荷醇定義為止癢劑(抗癢劑)。
另外的相關(guān)技術(shù)包括第PCT/IL2007/000015號(hào)國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)、第6，551，608號(hào)美國(guó)專(zhuān)利、第11/783, 668號(hào)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)(公開(kāi)號(hào)20070255193)和第10/535，961號(hào)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)(公開(kāi)號(hào)20060105000)。包含銀離子的抗菌組合物還記載于第5，607，683號(hào)美國(guó)專(zhuān)利和第6，093，414號(hào)美國(guó)專(zhuān)利。治療液連續(xù)沖流(CST)是由本發(fā)明人和其他人員一起研發(fā)的新的慢性傷口處理方式，并且涉及新鮮劑量的治療液連續(xù)沖流入受控的創(chuàng)傷環(huán)境中。在慢性傷口上沖流 (stream，流動(dòng))使得能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)傷口的抗菌抑制(as印tic confinement)、負(fù)壓治療(不需使用泵)、潤(rùn)濕傷口、對(duì)傷口床的連續(xù)清洗和整體處理。此類(lèi)連續(xù)沖流療法記載于例如本發(fā)明一些發(fā)明人的第7，364，565號(hào)美國(guó)專(zhuān)利中。

發(fā)明內(nèi)容
在研究性能改善的抗菌組合物時(shí)，本發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)銀離子和薄荷醇的組合物表現(xiàn)出協(xié)同作用。已進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)該活性在高滲劑存在下得以保留。因此，本文公開(kāi)當(dāng)在等滲或高滲介質(zhì)中與低濃度薄荷醇組合時(shí)基于銀離子的抗菌組合物表現(xiàn)出協(xié)同作用，其中所述銀離子以低于通常用于抗菌(防腐)目的的濃度存在。此類(lèi)組合物能夠?qū)V譜的病原微生物發(fā)揮抗微生物活性同時(shí)能夠?qū)崿F(xiàn)緩解疼痛、清涼和傷口愈合，而與現(xiàn)有含銀離子溶液經(jīng)常觀察到的不良副作用例如著色和刺激無(wú)關(guān)。已進(jìn)一步證明包含與濃度為0. 05% w/v至0. 5% w/v的薄荷醇和高滲劑例如甘油組合的濃度為0. 005% w/v至0. 5% w/v的銀離子或其絡(luò)合物的抗菌組合物為無(wú)沉淀的澄清溶液。因此，可以使用本文所述的抗菌組合物有效治療急性和慢性傷口例如糖尿病潰瘍。此外，當(dāng)將本文所述的防腐組合物以連續(xù)流施用至傷口上并通過(guò)傷口從而將與傷口接觸的抗微生物藥劑和高滲劑的濃度保持恒定時(shí)，可達(dá)到較高的傷口愈合率。已進(jìn)一步證明此類(lèi)抗菌組合物可通過(guò)預(yù)防或減少非無(wú)菌條件下的細(xì)菌生長(zhǎng)充當(dāng)防腐劑(preservative)。已進(jìn)一步證明此類(lèi)抗菌組合物表現(xiàn)出優(yōu)于商購(gòu)抗真菌產(chǎn)品的有效的殺真菌活性。 已進(jìn)一步證明本文所述的抗菌組合物和基于聚己縮胍(polyhexadine)的商購(gòu)抗菌產(chǎn)品的組合、連續(xù)治療對(duì)抑制各種真菌菌株的生長(zhǎng)非常有效，尤其是當(dāng)首先使用銀抗菌組合物時(shí)。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的一個(gè)方面提供了包含作為活性成分的薄荷醇和銀離子源以及藥學(xué)可接受的載體的抗菌組合物，其中銀離子在該組合物中的濃度低于6mM。在--些實(shí)施方案中，所述薄荷醇和銀離子具有協(xié)同作用。
在--些實(shí)施方案中，薄荷醇的濃度為0. 3mM至32mM。
在--些實(shí)施方案中，薄荷醇的濃度為0. 6mM至6. 4mM。
在--些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 05mM至6mM。
在--些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 25mM至0. 6mM。
在--些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 25mM至0. 6mM,并且薄荷醇的濃度為0. 6mM至 6. 4mM0
在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0.四識(shí)，并且薄荷醇的濃度為6. 4mM。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0.四識(shí)，并且薄荷醇的濃度為3. 2mM。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0.四福，并且薄荷醇的濃度為0. 64mM。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 44mM，并且薄荷醇的濃度為3. 2mM。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 6mM，并且薄荷醇的濃度為3. 2mM。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度為0. 6mM，并且薄荷醇的濃度為0. 64mM。在一些實(shí)施方案中，所述銀離子源選自硝酸銀、磺胺嘧啶銀(silver sulfadiazine)、氨基醇-銀離子絡(luò)合物、氨基酸_銀離子絡(luò)合物以及聚合物_銀離子絡(luò)合物。在一些實(shí)施方案中，所述聚合物-銀離子絡(luò)合物為聚乙烯吡咯烷酮(PVP)-銀離子絡(luò)合物。在一些實(shí)施方案中，所述抗菌組合物還包含高滲劑。在一些實(shí)施方案中，所述高滲劑選自甘油、聚乙二醇、多糖、甘露醇以及它們的組
I=I O在一些實(shí)施方案中，所述高滲劑是甘油。在一些實(shí)施方案中，基于抗菌組合物的總體積，甘油的濃度為3% ν/ν至15% ν/ν。在一些實(shí)施方案中，基于抗菌組合物的總體積，甘油的濃度為10% ν/ν。在一些實(shí)施方案中，所述高滲劑是聚乙二醇(PEG)。在一些實(shí)施方案中，基于抗菌組合物的總體積，PEG的濃度為8% ν/ν至16% ν/ν。在一些實(shí)施方案中，所述抗菌組合物還包含增溶劑。在一些實(shí)施方案中，所述增溶劑是TWEEN 20 (吐溫20)。在一些實(shí)施方案中，所述藥學(xué)可接受的載體是水溶液。在一些實(shí)施方案中，將所述抗菌組合物配制成局部劑型。在一些實(shí)施方案中，所述局部劑型選自霜?jiǎng)?、噴霧劑、紗布、擦劑、海綿體、無(wú)紡布、 棉布、泡沫劑、溶液劑、洗劑、軟膏劑、糊劑和凝膠劑。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的一個(gè)方面提供包括包裝材料和包裝于該包裝材料內(nèi)的如本文所述的抗菌組合物的抗菌試劑盒。在一些實(shí)施方案中，在包裝材料之內(nèi)或之上以印刷方式指明所述試劑盒抗菌試劑
盒用于表面消毒。 在一些實(shí)施方案中，所述表面為身體表面。在一些實(shí)施方案中，在包裝材料之內(nèi)或之上以印刷方式指明所述試劑盒抗菌試劑盒用于處理傷口。在一些實(shí)施方案中，所述傷口選自急性傷口、慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口。在一些實(shí)施方案中，所述慢性傷口選自糖尿病潰瘍、靜脈性潰瘍和壓瘡。在一些實(shí)施方案中，將銀離子源、薄荷醇和藥學(xué)可接受的載體中至少之一單獨(dú)包裝于所述包裝材料中。在一些實(shí)施方案中，將銀離子源、薄荷醇和藥學(xué)可接受的載體各自單獨(dú)包裝于所述包裝材料中。在一些實(shí)施方案中，將銀離子源、薄荷醇和藥學(xué)可接受的載體一起包裝于所述包裝材料中。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的一個(gè)方面提供用于對(duì)表面進(jìn)行消毒的方法，所述方法包括將有效量的本文所述的抗菌組合物施用至表面，由此對(duì)該表面進(jìn)行消毒。在一些實(shí)施方案中，所述表面是身體表面，所述方法是用于消毒有此需要的患者的身體表面。在一些實(shí)施方案中，所述方法包括將所述抗菌組合物局部施用至身體表面。在一些實(shí)施方案中，所述身體表面為皮膚組織。在一些實(shí)施方案中，所述方法是用于處理(treat，治療)所述身體表面內(nèi)的感染。在一些實(shí)施方案中，所述感染是由選自細(xì)菌、酵母和真菌的致病微生物引起的。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的一方面提供在有此需要的患者中治療如本文所述的傷口的方法，所述方法包括將有效量的本文所述的抗菌組合物施用至傷口區(qū)域，由此對(duì)該傷口進(jìn)行處理。在一些實(shí)施方案中，所述方法包括將所述抗菌組合物局部施用至傷口區(qū)域。在一些實(shí)施方案中，通過(guò)使抗菌組合物液流(fluid)在傷口區(qū)域上流動(dòng)并流過(guò)傷口區(qū)域而進(jìn)行抗菌組合物的施用。在一些實(shí)施方案中，該液流(流)是由來(lái)自至少一個(gè)包含所述抗菌組合物的貯器的重力引起的。在一些實(shí)施方案中，該液流(流)是由與至少一個(gè)包含所述抗菌組合物的貯器成液體流通的泵引起的。本發(fā)明一些實(shí)施方案的一方面提供了本文所述抗菌組合物在制備用于表面消毒的產(chǎn)品中的用途。在一些實(shí)施方案中，所述產(chǎn)品為用于消毒身體表面的藥物。 在一些實(shí)施方案中，所述藥物是用于治療所述身體表面內(nèi)的感染。在一些實(shí)施方案中，所述感染是由選自細(xì)菌、酵母和真菌的致病微生物引起的。本發(fā)明一些實(shí)施方案的一方面提供了本文所述抗菌組合物在制備用于處理本文所述傷口的藥物中的用途。本發(fā)明一些實(shí)施方案的一方面提供了制備本文所述抗菌組合物的方法，所述方法包括將銀離子源、薄荷醇和藥學(xué)可接受的載體混合，由此獲得抗菌組合物。在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括將高滲劑與所述組合物混合。在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括將增溶劑與所述組合物混合。在一些實(shí)施方案中，在將薄荷醇與銀離子源和載體混合前將增溶劑與薄荷醇混合。在一些實(shí)施方案中，所述增溶劑是TWEEN 20 (吐溫20)。根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的一方面提供了降低包含銀離子的抗菌組合物中銀離子濃度的方法，所述方法包括將銀離子源與協(xié)同有效量的薄荷醇混合，由此降低抗菌組合物中銀離子的濃度。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度被降低至少2倍。在一些實(shí)施方案中，銀離子的濃度被降低至少10倍。本發(fā)明一些實(shí)施方案的一方面提供了增加包含濃度低于6mM的銀離子的抗菌組合物的抗菌活性的方法，所述方法包括將該組合物與協(xié)同有效量的薄荷醇混合。除非另外定義，本文使用的所有技術(shù)和/或科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。盡管可使用與本文所述那些相似或相等的方法和材料實(shí)施或檢測(cè)本發(fā)明的實(shí)施方案，但是仍在下文描述了示例性方法和/或材料。如有沖突，以包括定義在內(nèi)的專(zhuān)利說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。另外，所述材料、方法和實(shí)施例為示例性的并且不意圖一定具有限制作用。


通過(guò)結(jié)合附圖僅以舉例說(shuō)明的方式在本文中描述本發(fā)明的一些實(shí)施方案。雖然現(xiàn)在具體詳細(xì)地結(jié)合了附圖，應(yīng)強(qiáng)調(diào)所顯示的細(xì)節(jié)僅為示例性的并且用于說(shuō)明性討論本發(fā)明的實(shí)施方案。就此而言，描述與附圖一起使得如何實(shí)施本發(fā)明的實(shí)施方案對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。所述附圖中圖1示出的圖總體圖解了在暴露于供試溶液30分鐘并且隨后洗滌之后培養(yǎng)對(duì)天后的真菌培養(yǎng)物的外觀，表現(xiàn)出無(wú)生長(zhǎng)(殺真菌作用，表示為“F”)、最小不良生長(zhǎng)(抑制作用，表示為“IN”)或者完全生長(zhǎng)(無(wú)作用，表示為“NE”)。圖2-4示出的解了在暴露于每一種供試溶液30分鐘并且隨后清洗之后培養(yǎng)3、8、11和16天后的已暴露真菌培養(yǎng)物的外觀。供試溶液包括如上文實(shí)施例5所述的包含銀離子和薄荷醇的組合物(表示為“S”)、PRONTOSAN (表示為“P”)、交替相繼暴露于包含銀離子和薄荷醇的組合物和PRONTOSAN (表示為“S+P”和“P+S”)、 MICROCYN (表示為“M”)和ANACEPT (表示為“A”)以及它們的稀釋液(1:2; 1 4;1 8)。供試真菌菌株為紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)的臨床菌株(圖2)、 紅色毛癬菌的NCPF 118商購(gòu)菌株(圖3)和犬小孢子菌(Microsporum canis)的臨床菌株 (圖 4)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明在其一些實(shí)施方案中涉及抗菌組合物及其用途，并且更具體而言但是不限于，涉及可有效用于消毒表面例如身體表面并且因此可有效用于例如治療與感染相關(guān)的諸如急性和慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口的醫(yī)學(xué)病癥和/或用作防腐劑的抗菌組合物。本文所述抗菌組合物包含銀離子源和薄荷醇，其中銀離子和薄荷醇具有協(xié)同作用，因此使能夠使用各自相對(duì)低的濃度。因此可容易地將本文所述的抗菌組合物制備成溶液(舉例而言)，其不含活性成分的沉淀并且不具有與現(xiàn)有的基于銀離子的抗菌劑相關(guān)的不良副作用同時(shí)表現(xiàn)出高且寬范圍的治療功效。在詳細(xì)闡述至少一個(gè)本發(fā)明的實(shí)施方案之前，應(yīng)理解本發(fā)明的應(yīng)用不一定受限于下文說(shuō)明中所列或?qū)嵤├兴e例說(shuō)明的細(xì)節(jié)。本發(fā)明還有其他實(shí)施方案或者能夠以各種方式實(shí)踐或?qū)嵤１景l(fā)明人已認(rèn)識(shí)到對(duì)銀的微生物抗性形成的潛在解決方法之一為使用銀離子源和另一種與銀離子一起表現(xiàn)出抗細(xì)菌(或抗微生物)協(xié)同作用的抗菌劑的組合。這樣的組合使能夠大大減少銀使用量并且因此消除了由銀離子引起的諸如傷口著色和刺激的副作用。但是這樣的組合需基于所有成份與銀離子的相容性從而避免銀的潛在沉淀。如果所提出的組合物是相容的，可容易地獲得用于協(xié)同抗微生物作用的可行性驗(yàn)證的檢測(cè)(參見(jiàn)，例如 Mackay 等人，2000Int JAntimicrob Agents 15 125-1 ；和 Peter 等人，2006，J Antimic Chemother 57 :573-576)。盡管已知許多抗細(xì)菌、抗微生物和/或抗菌(防腐)劑，但是難以預(yù)測(cè)當(dāng)這些藥劑組合時(shí)是否具有協(xié)同作用。本文使用的術(shù)語(yǔ)“抗菌的(antis印tic) ”描述一種藥劑或組合物通過(guò)局部施用該藥劑或組合物實(shí)現(xiàn)微生物載量減少和/或?qū)崿F(xiàn)預(yù)防微生物載量增長(zhǎng)的能力。因此抗菌組合物或藥劑能夠預(yù)防或阻止微生物(例如細(xì)菌、酵母和真菌)的生長(zhǎng)或作用，其方式為抑制它們的活性和/或生長(zhǎng)或者為破壞(殺滅)微生物。術(shù)語(yǔ)“抗菌劑”在本領(lǐng)域中通常用于描述用于局部施用至如下文詳述的感染的活組織或任何其他感染的表面或具有被感染風(fēng)險(xiǎn)的表面的制劑?？咕M合物和藥劑在本文中還被稱(chēng)作抗微生物組合物或藥劑。本文使用的術(shù)語(yǔ) “抗微生物劑”描述能夠通過(guò)抑制微生物的活性、抑制微生物的生長(zhǎng)或殺滅微生物來(lái)預(yù)防或阻止微生物的生長(zhǎng)和/或作用的組合物或藥劑。本文使用的術(shù)語(yǔ)“協(xié)同”、“協(xié)同效應(yīng)”及其任何語(yǔ)法轉(zhuǎn)換形式描述在兩種或更多種生物活性化合物的組合中出現(xiàn)的協(xié)同作用，其中當(dāng)兩種化合物被同時(shí)使用時(shí)表現(xiàn)出的組合作用超過(guò)每一種化合物單獨(dú)使用時(shí)作用的累加。因此通常當(dāng)表示兩種活性藥劑的組合的作用的數(shù)值大于每一種這些藥劑單獨(dú)作用時(shí)獲得的同類(lèi)數(shù)值的總和時(shí)可以確定存在“協(xié)同”。兩種抗菌劑之間的協(xié)同可由本領(lǐng)域公知的方法來(lái)確定。如下文的實(shí)施例部分所示，出乎意料地發(fā)現(xiàn)銀離子和薄荷醇具有協(xié)同作用。通過(guò)測(cè)量單獨(dú)薄荷醇和單獨(dú)銀離子對(duì)各種細(xì)菌的抗菌活性并且與一起給藥時(shí)它們的活性相比確定協(xié)同。如果一起給藥時(shí)所觀察到的兩種藥劑的抗菌活性超過(guò)將單獨(dú)使用時(shí)所觀察到的藥劑的活性相加得到的預(yù)期累加抗菌活性，則認(rèn)為這兩種藥劑具有協(xié)同作用。另外，當(dāng)一起給予藥劑時(shí)所表現(xiàn)出的抗菌活性的藥劑代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)優(yōu)于將每一種藥劑單獨(dú)給藥時(shí)所述藥劑的抗菌活性的相同藥劑代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，則可以證明并因此確定存在協(xié)同作用。示例性藥劑代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)為達(dá)到某一水平的抗菌作用所需要的時(shí)長(zhǎng)。 因此，如果當(dāng)一起給藥兩種藥劑時(shí)達(dá)到這一抗菌作用水平所需要的時(shí)長(zhǎng)與每一種藥劑單獨(dú)給藥時(shí)的這一時(shí)長(zhǎng)相比有所減少，則認(rèn)為這兩種藥劑具有協(xié)同作用。就這一點(diǎn)而言，應(yīng)注意在藥劑代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)數(shù)值總和常常沒(méi)有任何意義，因此相對(duì)于單獨(dú)給藥每一種化合物，將兩種藥劑合并給藥后的藥劑代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)的任何改善均認(rèn)為反應(yīng)了協(xié)同作用。因此，已證明例如當(dāng)對(duì)大腸桿菌ATCC47076菌株進(jìn)行檢測(cè)時(shí)分別觀察包含濃度為 0. 005% w/v% +0. lw/v%,0. 005% w/v+0. 05% w/v、0. 005% w/v+0. 01% w/v,0. 0075% w/ v+0. 05% w/v、0. 01% w/v+0. 05% w/v 以及 0. 01% w/v+0. 01% w/v 的銀離子源 AgNO3 和薄荷醇的高滲溶液的協(xié)同抗菌活性(參見(jiàn)，下文表1)。這些數(shù)值分別對(duì)應(yīng)于0. 29mM+6. 4mM、 0. 29mM+3. 2mM、0. 29mM+0. 64mM、0. 44mM+3. 2mM、0. 6mM+3. 2mM 和 0. 6mM+0. 64mM 的銀離子和薄荷醇摩爾濃度。具體而言，在這些濃度下，當(dāng)單獨(dú)給藥時(shí)薄荷醇和銀離子的累積抗菌活性低于將藥劑一起給藥時(shí)觀察到的抗菌活性。
11
還證明了銀離子和薄荷醇對(duì)各種類(lèi)型的細(xì)菌具有協(xié)同作用，包括克雷伯氏肺炎桿菌、金黃色葡萄球菌的耐甲氧西林臨床菌株(MRSA)、表皮葡萄球菌的臨床菌株、產(chǎn)超廣譜 β內(nèi)酰胺酶的大腸桿菌的臨床菌株、多重耐藥性鮑氏不動(dòng)桿菌的臨床菌株以及多重耐藥性綠膿假單胞菌的臨床菌株(參見(jiàn)下文的表幻。在這些研究中，通過(guò)與單獨(dú)給藥每一種藥劑時(shí)觀察到直至某一水平的抗菌活性的時(shí)長(zhǎng)相比，觀察到直至銀離子和薄荷醇的相同水平的抗菌活性所測(cè)量到的更短的時(shí)長(zhǎng)證明了銀離子和薄荷醇的協(xié)同作用。還證明了包含銀離子源和薄荷醇的溶液為無(wú)沉淀的澄清溶液。還證明了以1 4稀釋所述組合物后獲得這樣的組合物的最小抑菌濃度，并且以 1 2稀釋所述組合物后獲得這樣的組合物的最小殺菌濃度(參見(jiàn)，下文實(shí)施例部分的表 3)。因此，當(dāng)以至少1 2 并且任選 1 2. 1、1 2. 2,1 2. 3,1 2. 4,1 2.5、 1 2.6,1 2. 7,1 2.8,1 2.9,1 3、1 3. Ul 3. 2,1 3. 3,1 3. 5,1 3.5、 1 3.6,1 3. 7,1 3.8,1 3.9,1 4甚至更高的稀釋倍數(shù)稀釋(例如1 5、1 6、 1 7、1 8、1 9和1 10)時(shí)，本文所述的抗菌組合物可有利地用于本文所述的任何方法中。還證明了 1 10稀釋后，包含銀離子和薄荷醇的示例性組合物可防止非無(wú)菌樣品中各種細(xì)菌和真菌菌株的生長(zhǎng)(參見(jiàn)，下文實(shí)施例部分的實(shí)施例5)。通過(guò)與商購(gòu)產(chǎn)品PRONTOSAN 、MICROCYN 、和ANASEPT 比較進(jìn)
一步證明了本文所述抗菌組合物的有益治療作用(參見(jiàn)下文實(shí)施例部分的實(shí)施例6和圖 2-4)。已證明本文所述抗菌組合物表現(xiàn)出對(duì)真菌菌株例如紅色毛癬菌和犬小孢子菌的殺真菌活性，其超過(guò)了一些商購(gòu)產(chǎn)品并且發(fā)現(xiàn)可與PRONTOS AN 有效組合。因此所觀察到的銀離子和薄荷醇組合物的協(xié)同作用能夠提供具有濃度降低的銀離子同時(shí)利用薄荷醇的其他有利性質(zhì)例如其止癢作用、清涼劑作用等的抗菌組合物。這些發(fā)現(xiàn)證明包含銀離子和薄荷醇的組合物可充當(dāng)有效的抗菌組合物用于消毒表面例如身體表面并且因此可用于治療或預(yù)防與感染相關(guān)的病癥例如傷口，如下文詳述。這些發(fā)現(xiàn)還證明包含銀離子和薄荷醇的組合物可充當(dāng)有效的抗菌組合物用于消毒例如醫(yī)療器械和保存容器的表面并且用于防止此類(lèi)表面上微生物載量的增長(zhǎng)。因此，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的一方面提供了包含作為活性成分的薄荷醇和銀離子源以及藥學(xué)可接受的載體的抗菌組合物，其中銀離子在該組合物中的濃度低于6mM。根據(jù)一些實(shí)施方案中，薄荷醇和銀離子具有如上文定義的協(xié)同作用。薄荷醇(5-甲基-2-丙-2-基-環(huán)己-1-醇；CASNo. 89-78-1，MW = 156 克/mol) 是植物來(lái)源的天然單萜，常常作為止癢、抗菌、鎮(zhèn)痛和或清涼制劑的一部分用于皮膚病。薄荷醇是一種蠟狀晶體物質(zhì)、透明或呈白色，其在室溫下為固體并且在高于室溫時(shí)略微熔化。 薄荷醇具有三個(gè)不對(duì)稱(chēng)中心并且以八種立體異構(gòu)體存在(+)_薄荷醇、(+)_異薄荷醇、 (+)_新薄荷醇、(+)_新異薄荷醇、(-)_薄荷醇、(-)_異薄荷醇、(-)_新薄荷醇、(-)_新異薄荷醇，均被本文使用的術(shù)語(yǔ)“薄荷醇”所涵蓋。自然界中最常見(jiàn)的薄荷醇形式是(-)_薄荷醇立體異構(gòu)體，其具有(1R，2S，5R)構(gòu)型并且具有以下結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.抗菌組合物，包含作為活性成分的薄荷醇和銀離子源，以及藥學(xué)可接受的載體，其中所述銀離子在所述組合物中的濃度低于6mM。
2.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述薄荷醇和所述銀離子具有協(xié)同作用。
3.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述薄荷醇的濃度為0.3mM至32mM的范圍。
4.權(quán)利要求3的抗菌組合物，其中所述薄荷醇的濃度為0.6mM至6. 4mM的范圍。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.05mM至6mM的范圍。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.25mM至0. 6mM的范圍。
7.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.25mM至0. 6mM的范圍并且所述薄荷醇的濃度為0. 6mM至6. 4mM的范圍。
8.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.四福，并且所述薄荷醇的濃度為6. 4mM。
9.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.四福，并且所述薄荷醇的濃度為3. 2mM。
10.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.29mM,并且所述薄荷醇的濃度為 0. 64mM。
11.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.44mM,并且所述薄荷醇的濃度為3. 2mM。
12.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.6mM，并且所述薄荷醇的濃度為3. 2mM。
13.權(quán)利要求1的抗菌組合物，其中所述銀離子的濃度為0.6mM，并且所述薄荷醇的濃度為 0. 64mM。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的抗菌組合物，其中所述銀離子源選自由硝酸銀、磺胺嘧啶銀、氨基醇-銀離子絡(luò)合物、氨基酸-銀離子絡(luò)合物和聚合物-銀離子絡(luò)合物組成的組。
15.權(quán)利要求14的抗菌組合物，其中所述聚合物-銀離子絡(luò)合物為聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)-銀離子復(fù)合物。
16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的抗菌組合物，進(jìn)一步包含高滲劑。
17.權(quán)利要求16的抗菌組合物，其中所述高滲劑選自由甘油、聚乙二醇、氯化鈉、多糖、 甘露醇、氯化銨、硫酸鎂以及它們的組合組成的組。
18.權(quán)利要求16的抗菌組合物，其中所述高滲劑是甘油。
19.權(quán)利要求18的抗菌組合物，其中基于所述抗菌組合物的總體積，所述甘油的濃度為3% ν/ν至15% ν/ν的范圍。
20.權(quán)利要求18的抗菌組合物，其中基于所述抗菌組合物的總體積，所述甘油的濃度為 10% ν/ν。
21.權(quán)利要求16的抗菌組合物，其中所述高滲劑是聚乙二醇(PEG)。
22.權(quán)利要求21的抗菌組合物，其中基于所述抗菌組合物的總體積，所述PEG的濃度為 8% ν/ν至16% ν/ν的范圍。
23.權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)的抗菌組合物，進(jìn)一步包含增溶劑。
24.權(quán)利要求23的抗菌組合物，其中所述增溶劑是TWEEN20。
25.權(quán)利要求I-M中任一項(xiàng)的抗菌組合物，其中所述藥學(xué)可接受的載體是水溶液。
26.權(quán)利要求1-25中任一項(xiàng)的抗菌組合物，其被配制成局部劑型。
27.權(quán)利要求沈的抗菌組合物，其中所述局部劑型選自由霜?jiǎng)?、噴霧劑、紗布、擦劑、海綿、無(wú)紡布、棉布、泡沫劑、溶液、洗劑、軟膏劑、糊劑和凝膠劑組成的組。
28.一種抗菌試劑盒，包括包裝材料和包裝在所述包裝材料中的權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的抗菌組合物。
29.權(quán)利要求觀的抗菌試劑盒，在所述包裝材料中或所述包裝材料上以印刷方式指明用于表面消毒。
30.權(quán)利要求四的抗菌試劑盒，其中所述表面為身體表面。
31.權(quán)利要求觀的抗菌試劑盒，在所述包裝材料中或所述包裝材料上以印刷方式指明用于傷口處理。
32.權(quán)利要求31的抗菌試劑盒，其中所述傷口選自由急性傷口、慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口組成的組。
33.權(quán)利要求32的抗菌試劑盒，其中所述慢性傷口選自由糖尿病潰瘍、靜脈性潰瘍和壓瘡組成的組。
34.一種對(duì)表面進(jìn)行消毒的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的抗菌組合物施用至所述表面，由此消毒所述表面。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述表面是身體表面，所述方法是用于消毒有需要的個(gè)體的身體表面。
36.權(quán)利要求35的方法，包括將所述抗菌組合物局部施用至所述身體表面。
37.權(quán)利要求35的方法，其中所述身體表面是皮膚組織。
38.權(quán)利要求35的方法，其是用于處理所述身體表面的感染。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述感染是由選自由細(xì)菌、真菌和酵母組成的組中的致病微生物引起的。
40.一種在有需要的個(gè)體中處理傷口的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1-27 中任一項(xiàng)的抗菌組合物施用至所述傷口區(qū)域，由此處理所述傷口。
41.權(quán)利要求40的方法，其中所述傷口選自由急性傷口、慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口組成的組。
42.權(quán)利要求41的方法，其中所述慢性傷口選自由糖尿病潰瘍、靜脈性潰瘍和壓瘡組成的組。
43.權(quán)利要求40的方法，其包括將所述抗菌組合物局部施用至所述傷口區(qū)域。
44.權(quán)利要求43的方法，其中通過(guò)使所述抗菌組合物的液流在所述傷口區(qū)域上方流動(dòng)并流過(guò)所述傷口區(qū)域而進(jìn)行所述抗菌組合物的局部施用。
45.權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的抗菌組合物在制備用于對(duì)表面進(jìn)行消毒的產(chǎn)品中的用途。
46.權(quán)利要求45的用途，其中所述產(chǎn)品為用于消毒身體表面的藥物。
47.權(quán)利要求46的用途，其中所述藥物是用于處理所述身體表面的感染。
48.權(quán)利要求47的用途，其中所述感染是由選自由細(xì)菌、真菌和酵母組成的組中的致病微生物引起的。
49.權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的抗菌組合物在制備用于處理傷口的藥物中的用途。
50.權(quán)利要求49的用途，其中所述傷口選自由急性傷口、慢性傷口、燒傷和手術(shù)傷口組成的組。
51.一種制備權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的抗菌組合物的方法，所述方法包括將所述銀離子源、所述薄荷醇和所述藥學(xué)可接受的載體混合，由此獲得所述抗菌組合物。
52.權(quán)利要求51的方法，進(jìn)一步包括將高滲劑與所述組合物混合。
53.權(quán)利要求51的方法，進(jìn)一步包括將增溶劑與所述組合物混合。
54.權(quán)利要求53的方法，其中在將所述薄荷醇與所述銀離子源和所述載體混合前，將所述增溶劑與所述薄荷醇混合。
55.權(quán)利要求53的方法，其中所述增溶劑是TWEEN20。
56.一種降低包含銀離子的抗菌組合物中的銀離子濃度的方法，所述方法包括將銀離子源與協(xié)同有效量的薄荷醇混合，由此降低所述抗菌組合物中所述銀離子的濃度。
57.權(quán)利要求56的方法，其中所述銀離子的濃度被降低至少2倍。
58.權(quán)利要求56的方法，其中所述銀離子的濃度被降低至少10倍。
59.一種增大包含濃度低于6mM的銀離子源的抗菌組合物的抗菌活性的方法，所述方法包括將所述抗菌組合物與協(xié)同有效量的薄荷醇混合。
全文摘要
本文公開(kāi)了包含銀離子源和薄荷醇的抗菌組合物和試劑盒，其中銀離子和薄荷醇具有協(xié)同作用從而顯著降低了組合物中銀離子的濃度。還公開(kāi)了所述抗菌組合物用作消毒劑和在傷口處理中的用途。
文檔編號(hào)A61K31/045GK102387793SQ201080016122
公開(kāi)日2012年3月21日 申請(qǐng)日期2010年2月11日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月11日
發(fā)明者諾阿·哈達(dá)爾, 阿米?！じダ锫?申請(qǐng)人:雷蒙特亞特特拉維夫大學(xué)有限公司