專利名稱：具有免疫調(diào)節(jié)劑的pH敏感釋放的靶向合成納米載體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及靶向細(xì)胞中作用位點(diǎn)的合成納米載體的組合物、以及相關(guān)方法，這些細(xì)胞例如抗原遞呈細(xì)胞(APC)，并且包括以一種pH敏感方式從合成納米載體解離的免疫調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明額外涉及保護(hù)不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑，借助它們?cè)诤铣杉{米載體中的膠囊化。
背景技術(shù)：
免疫調(diào)節(jié)劑被用于在受試者中產(chǎn)生免疫應(yīng)答。免疫系統(tǒng)的刺激，它包括先天性免疫和獲得性免疫之一或全部，是一種可以導(dǎo)致宿主的保護(hù)性亦或不良生理結(jié)果的復(fù)雜現(xiàn)象。近年對(duì)先天性免疫的機(jī)制已經(jīng)存在增加的興趣，它被認(rèn)為啟動(dòng)并支持獲得性免疫。這一興趣部分地出于近期發(fā)現(xiàn)的稱為Toll樣受體(TLR)的高度保守模式識(shí)別受體蛋白的一個(gè)家族，這些受體被認(rèn)為涉及先天性免疫，作為用于病原相關(guān)分子模式(PAMP)的受體。因此對(duì)于調(diào)節(jié)先天性免疫有用的組合物和方法是具有很大興趣的，因?yàn)樗鼈兛梢杂绊憣?duì)涉及炎癥、過(guò)敏癥、哮喘、感染、癌、以及免疫缺陷等癥狀的治療方法。有時(shí)偶合這樣的媒介物至遞送載體是有利的。然而，這樣的信息還是缺乏關(guān)于這樣的媒介物(特別是不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑)從遞送載體的釋放如何被控制，以及什么種類的釋放提供最佳體內(nèi)效果。對(duì)于用于遞送免疫調(diào)節(jié)劑的、允許最佳釋放的新遞送載體連同相關(guān)方法存在需要。發(fā)明概述本發(fā)明的多個(gè)方面涉及包括合成納米載體的組合物，這些合成納米載體包括偶合到合成納米載體的免疫調(diào)節(jié)劑，其中根據(jù)以下關(guān)系，該免疫調(diào)節(jié)劑從合成納米載體解離 IArel (4. 5)24% /IArel (7. 4)24%^ 1. 2，其中 IArel (4. 5)24%被定義為在 pH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在PH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在PH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，保留在合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)，并且其中IArel (7. 被定義為在pH = 7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在 PH = 7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在pH =7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，保留在合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到合成納米載體上。在某些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑被膠囊化在合成納米載體內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑包括不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑，例如咪唑并喹啉、腺嘌呤衍生物、或包括5’-CG-3’的寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。在某些實(shí)施方案中，該咪唑并喹啉包括咪唑并喹啉胺、咪唑并吡啶胺、6， 7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫德。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化主鏈。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑是一種佐劑。 在某些實(shí)施方案中，佐劑包括Toll樣受體(TLR)激動(dòng)劑(例如TLR3激動(dòng)劑、TLR7激動(dòng)劑、 TLR8激動(dòng)劑、TLR7/8激動(dòng)劑、或TLR9激動(dòng)劑。在一些實(shí)施方案中，TLR激動(dòng)劑是一種免疫刺激核酸(例如免疫刺激DNA或免疫刺激RNA)。在某些實(shí)施方案中，免疫刺激核酸是一種含有CpG的免疫刺激核酸，它包括一種或多種穩(wěn)定化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化主鏈。在一些實(shí)施方案中，佐劑包括一種通用T細(xì)胞抗原。在一些實(shí)施方案中，合成納米載體進(jìn)一步包括一種B細(xì)胞抗原和/或一種T細(xì)胞抗原。在某些實(shí)施方案中，該合成納米載體進(jìn)一步包括一種抗原遞呈細(xì)胞(APC)靶向特征。 在一些實(shí)施方案中，合成納米載體包括一種或多種可生物降解的聚合物。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到一種或多種可生物降解的聚合物上。在某些實(shí)施方案中，可生物降解的聚合物包括聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、或聚(丙交酯乙交酯)共聚物。在一些實(shí)施方案中，如使用凝膠滲透色譜法確定的那樣，該可生物降解的聚合物具有范圍從800道爾頓至10，000道爾頓的重均分子量。在某些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酰胺鍵。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酯鍵。在一些實(shí)施方案中，合成納米載體包括脂基納米顆粒、聚合物納米顆粒，金屬納米顆粒，表面活性劑基乳液，樹(shù)枝狀化合物，巴奇球，納米線，病毒狀顆粒，肽或蛋白基顆粒，包括納米材料、球狀納米顆粒、立方納米顆粒、錐形納米顆粒、長(zhǎng)方形納米顆粒、圓柱形納米顆粒、或環(huán)形納米顆粒的一種組合的納米顆粒。本發(fā)明的多個(gè)方面涉及包括合成納米載體的組合物，這些合成納米載體包括偶合到合成納米載體的免疫調(diào)節(jié)劑，其中根據(jù)以下關(guān)系，該免疫調(diào)節(jié)劑從合成納米載體解離 IA (4. 5)24/IA(4. 5)6彡1. 2，其中IA (4. 5) M被定義為當(dāng)合成納米載體暴露于pH = 4. 5的體外水環(huán)境M小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量，并且其中IA (4. 5) 6被定義為當(dāng)合成納米載體暴露于pH = 4. 5的體外水環(huán)境6小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑包括膠囊化在合成納米載體內(nèi)的不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。在某些實(shí)施方案中，不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑包括咪唑并喹啉、腺嘌呤衍生物、或包括 5’ -CG-3’的寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。在某些實(shí)施方案中，該咪唑并喹啉包括咪唑并喹啉胺、咪唑并吡啶胺、6，7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫德。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化主鏈。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。本發(fā)明的其他方面涉及包括合成納米載體的組合物，這些合成納米載體包括偶合到合成納米載體的免疫調(diào)節(jié)劑，其中根據(jù)以下關(guān)系，該免疫調(diào)節(jié)劑從合成納米載體解離 6彡IA (4. 5)24/IA(4. 5)6彡1.2，其中IA (4. 5) M被定義為當(dāng)合成納米載體暴露于pH = 4. 5 的體外水環(huán)境M小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量，并且其中IA (4. 5)6被定義為當(dāng)合成納米載體暴露于pH = 4. 5的體外水環(huán)境6小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑包括膠囊化在合成納米載體內(nèi)的不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。在一些實(shí)施方案中，不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑包括咪唑并喹啉、腺嘌呤衍生物、或包括 5’ -CG-3’的寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。在某些實(shí)施方案中，該咪唑并喹啉包括咪唑并喹啉胺、咪唑并吡啶胺、6，7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫德。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化主鏈。在一些實(shí)施方案中，該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。在某些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到合成納米載體上。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑被膠囊化在合成納米載體內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑是一種佐劑。在某些實(shí)施方案中，佐劑包括Toll 樣受體(TLR)激動(dòng)劑(例如TLR3激動(dòng)劑、TLR7激動(dòng)劑、TLR8激動(dòng)劑、TLR7/8激動(dòng)劑、或TLR9 激動(dòng)劑。在某些實(shí)施方案中，TLR激動(dòng)劑是一種免疫刺激核酸(例如免疫刺激DNA或免疫刺激RNA)。在一些實(shí)施方案中，免疫刺激核酸是一種含有CpG的免疫刺激核酸，它包括一種或多種穩(wěn)定化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化主鏈。在某些實(shí)施方案中，佐劑包括一種通用T細(xì)胞抗原。在一些實(shí)施方案中，合成納米載體進(jìn)一步包括一種B細(xì)胞抗原和/或一種T細(xì)胞抗原。在一些實(shí)施方案中，該合成納米載體進(jìn)一步包括一種抗原遞呈細(xì)胞(APC)靶向特征。在某些實(shí)施方案中，合成納米載體包括一種或多種可生物降解的聚合物。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到一種或多種可生物降解的聚合物上。在某些實(shí)施方案中，可生物降解的聚合物包括聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、或聚(丙交酯乙交酯)共聚物。在一些實(shí)施方案中，如使用凝膠滲透色譜法確定的那樣，該可生物降解的聚合物具有范圍從800道爾頓至10，000道爾頓的重均分子量。在某些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酰胺鍵。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酯鍵。在一些實(shí)施方案中，合成納米載體包括脂基納米顆粒、聚合物納米顆粒，金屬納米顆粒，表面活性劑基乳液，樹(shù)枝狀化合物，巴奇球，納米線，病毒狀顆粒，肽或蛋白基顆粒，包括納米材料、球狀納米顆粒、立方納米顆粒、錐形納米顆粒、長(zhǎng)方形納米顆粒、圓柱形納米顆粒、或環(huán)形納米顆粒的一種組合的納米顆粒。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明相關(guān)的組合物進(jìn)一步包括一種藥學(xué)上可以接受的賦形劑。
本發(fā)明的其他方面涉及包括一種疫苗的組合物，該疫苗包括任何本發(fā)明相關(guān)的組合物。本發(fā)明的其他方面涉及包括將本發(fā)明相關(guān)的任何組合物給予受試者的方法。在一些實(shí)施方案中，組合物以有效誘導(dǎo)或增強(qiáng)免疫應(yīng)答的量存在。在一些實(shí)施方案中，受試者患有癌、傳染病、非自身免疫性代謝病、退行性疾病、或依賴癥。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
圖1證明了在pH 7. 4、37°C條件下，從合成納米載體配制品釋放瑞喹莫德(R848)。圖2證明了在pH 4. 5、37°C條件下，從合成納米載體配制品釋放R848。圖3證明了在pH 7.4和？!1 4. 5，在M小時(shí)條件下，從合成納米載體配制品釋放 R848。圖4示出與用不具有含CpG免疫刺激核酸的合成納米載體的抗體誘導(dǎo)水平(組1) 比較，用具有含CpG免疫刺激核酸的合成納米載體的抗體誘導(dǎo)水平(組2和3)。圖5示出用釋放磷酸二酯、非-硫代的含CpG免疫刺激核酸或硫代的含CpG免疫刺激核酸的合成納米載體的抗體誘導(dǎo)水平。圖6示出用按不同速率釋放R848的納米載體的抗體誘導(dǎo)水平。圖7示出由攜帶封存的磷酸二酯(PO)CpG的合成納米載體(指定為NC-Nic/ PO-CpG)誘導(dǎo)的抗體水平。圖8示出在pH4. 5，封存的PO-CpG從合成納米載體的釋放與在pH7. 5的對(duì)比。數(shù)據(jù)證明通過(guò)膠囊化，不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑(例如PO-CpG)被保護(hù)在合成納米載體內(nèi)。在pH 4. 5 (例如在內(nèi)含體/溶酶體中)，這樣一種不穩(wěn)定的媒介物可以在希望的作用點(diǎn)釋放，同時(shí)在pH 7.4(例如在內(nèi)含體/溶酶體外的一般pH值)發(fā)生低水平的釋放。詳細(xì)說(shuō)明在詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明以前，已理解本發(fā)明并不局限于具體舉例說(shuō)明的材料或工藝參數(shù)，因?yàn)檫@些當(dāng)然可以變化。還已理解在此使用的術(shù)語(yǔ)只是為了說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方案的目的，并不旨在限制使用可替代的術(shù)語(yǔ)來(lái)說(shuō)明本發(fā)明。在此引用的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)，無(wú)論在前或在后，都出于所有目的通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此。如在本說(shuō)明書和附加權(quán)利要求中使用的那樣，單數(shù)形式“一個(gè)”、“一種”和“該”包括復(fù)數(shù)指示物，除非該內(nèi)容清楚地另外指明。例如，引用“一種聚合物”包括兩種或更多種這樣的分子的混合物，引用“一種溶劑”包括兩種或更多種這樣的溶劑的混合物，引用“一種粘合劑”包括兩種或更多種這樣的材料的混合物，并且以此類推。序論在感興趣的細(xì)胞，特別是抗原遞呈細(xì)胞的作用點(diǎn)，提供一種更直接地釋放免疫調(diào)節(jié)劑的方式方面，本發(fā)明是有用的，它會(huì)導(dǎo)致有益的免疫應(yīng)答和/或減少脫靶效應(yīng)和毒性， 因?yàn)槊庖哒{(diào)節(jié)劑的釋放多數(shù)會(huì)在感興趣的細(xì)胞的作用點(diǎn)。對(duì)于遞送佐劑，這具有特別的興趣。控制釋放特性第一次給感興趣的免疫細(xì)胞提供遞送免疫調(diào)節(jié)劑的受控方式，并且允許在免疫系統(tǒng)上的更精確的干涉，包括在延長(zhǎng)的時(shí)段釋放免疫調(diào)節(jié)劑的能力。所有這些導(dǎo)致一個(gè)非?？烧{(diào)的系統(tǒng)以獲得免疫調(diào)節(jié)劑的最佳釋放，這樣它將主要在所希望的細(xì)胞的作用點(diǎn)釋放。
本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到通過(guò)將不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑膠囊化在本發(fā)明的合成納米載體內(nèi)，將不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑偶合在本發(fā)明的合成納米載體內(nèi)，并且提供了遞送不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑至感興趣的免疫細(xì)胞的受控方式，優(yōu)選地在一個(gè)延長(zhǎng)的時(shí)段，導(dǎo)致不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑的靶向遞送，同時(shí)最小化免疫調(diào)節(jié)劑的脫靶效應(yīng)，特別是與免疫調(diào)節(jié)劑的全身給藥相關(guān)的脫靶效應(yīng)。此外，這一方法還增強(qiáng)了具有短的消除半衰期的不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑的性能，該免疫調(diào)節(jié)劑可能另外不具有希望水平的藥理學(xué)活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及某些寡核苷酸。最近，已經(jīng)存在很多說(shuō)明某些類型的核酸分子(包括CpG核酸、富含GU的ssRNA和雙鏈RNA)的免疫刺激作用的報(bào)告。值得注意的是，最近報(bào)告了 Toll樣受體9(TLR9)識(shí)別細(xì)菌DNA和含有一個(gè)CpG基序的寡核苷酸，其中胞嘧啶是未甲基化的。Hemmi H 等人(2000)Nature 408 :740-5 ；Bauer S. et al. (2001) Proc Natl Acad Sci USA 98:9237-42。在多個(gè)美國(guó)專利(例如美國(guó)專利號(hào)6，194，388 ； 6，207，646 ；6, 239, 116 ；和 6，218，371)，以及公開(kāi)的國(guó)際專利申請(qǐng)(例如 W098/37919、 W098/40100、W098/52581、和W099/5675Q中已經(jīng)廣泛說(shuō)明了含有CpG的寡核苷酸在免疫調(diào)節(jié)上的作用。完整的免疫刺激劑核酸可以是未甲基化的或部分可以是未甲基化的，但是至少5' -CG-3'的C是未甲基化的。天然DNA寡核苷酸含有被在細(xì)胞外環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的核酸酶迅速切割的磷酸二酯鍵。 Yu, D.，等人，Potent CpG oligonucleotides containing phosphodiester linkages in vitro and in vivo immunostimulatory properties. Biochem Biophys Res Commun, 2002. 297(1) :p. 83-90( "Yu et al. ”) ；Heeg，K.，等人，Structural requirements for uptake and recognition of CpG oligonucleotides.Int J Med Microbiol， 2008. 298(1-2) :p. 33-8 ("Heeg et al·”)·這樣的天然寡核苷酸可以被認(rèn)為是不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。因此，在文獻(xiàn)中已經(jīng)廣泛報(bào)告了通過(guò)用硫代磷酸酯基團(tuán)取代磷酸二酯連接基團(tuán)， 化學(xué)地穩(wěn)定這些鍵的方法。參見(jiàn)美國(guó)專利6811975-Phosphorothioate Oligonucleotides Having Modified Internucleoside Linkages。作為疫苗佐劑，含有硫代磷酸酯CpG的寡核苷酸已經(jīng)被全身給藥。Yu等人。然而，穩(wěn)定的CpG寡核苷酸的全身給藥可以導(dǎo)致脫靶免疫刺激效應(yīng)，例如一般的炎癥、淋巴細(xì)胞的非特異活化、以及類似流感的癥狀。Haas，T.，等人，kquence independent interferon-alpha induction by multimerized phosphodiester DNA depends on spatial regulation of Toll-like receptor-9activation in plasmacytoid dendritic cells. Immunology, 2009. 126(2) :p. 290-8 ( “Haas et al·”).因此，在實(shí)踐本發(fā)明中，這樣的寡核苷酸可以被有用地結(jié)合，如在以下更詳細(xì)地說(shuō)明的那樣。本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)意外地并且令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，通過(guò)實(shí)踐在此披露的本發(fā)明，可以克服以上提到的問(wèn)題和限制。特別是，本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)可能與相關(guān)方法一起提供一種組合物，包括包括偶合到合成納米載體上的免疫調(diào)節(jié)劑的合成納米載體；其中該免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑，根據(jù)以下關(guān)系從合成納米載體解 1 IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 1. 2 ；其中IArel (4. 5) 被定義為在pH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在PH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在PH = 4. 5，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，保留在合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)；并且其中IArel (7. 4)t%被定義為在pH = 7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在pH = 7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在pH = 7. 4，將合成納米載體暴露于體外水環(huán)境t小時(shí)，保留在合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)；并且其中1為2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、 26J8、或30小時(shí)。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑，根據(jù)以下關(guān)系從合成納米載體解離 JArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% ^ 1. 3，IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)
1.4, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t%^ 1.5, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t%^ 1.6, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 1. 7, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 1. 8, IArel (4. 5) t% /IArel (7. 4)t%^ 1. 9, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^2, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4) t% ^ 2. 2, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% ^ 2. 5, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% ^ 2. 7, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 3，IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 3. 5，IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% ^ 4, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t% ^ 4. 5, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4) t % ^ 5, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4) t % 彡 5. 5，IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 6, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 6. 5, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 7, IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % 彡 7. 5，IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 8, IArel (4. 5)t % / IArel (7. 4)t%^ 8. 5，IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t%^ 9, IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% 彡 9. 5，IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t% ^ 10，IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t% ^ 10. 5, or IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4) t % 彡 11，其中 IArel (4. 5)t%, IArel (7. 4)t%,并且 t 如以上定義的那樣。在其他實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑，根據(jù)以下關(guān)系從合成納米載體解離2 ( IArel (4. 5)t% /IArel (7. 4)t% ^ 1. 2,2. 5 ( IArel (4. 5)t% / IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,3 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,3. 5 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,4 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,4. 5 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,5 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,6 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,7 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,8 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2,9 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2，10 彡 IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 1. 2，10 彡 IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 2,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 2. 5,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 3,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 3. 5,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 4,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 4. 5,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 5,10 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 6,10 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % 彡 7，10 彡 IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % 彡 8，10 彡 IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 9,3 ^ IArel (4. 5) t % /IArel (7. 4)t % ^ 2,4 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 3,5 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 4,6 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 5,7 ^ IArel (4. 5)t % / IArel (7. 4)t % ^ 6,8 ^ IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4)t % ^ 7, or 9 彡 IArel (4. 5)t % /IArel (7. 4) 8，其中 IArel (4. 5)t%, IArel (7. 4) ，并且 t 如以上定義的那樣。在一些實(shí)施方案中，丨是對(duì)小時(shí)。因此，本發(fā)明涉及包括在中性和酸性pH以顯著不同的速率釋放免疫調(diào)節(jié)劑的合成納米載體的組合物和方法。在遞送免疫調(diào)節(jié)劑中，為了具有最有效的作用，希望使得多數(shù)免疫調(diào)節(jié)劑在它們可以具有希望的作用的APC內(nèi)釋放。在以游離態(tài)注射免疫調(diào)節(jié)劑時(shí)，或者在它們從APC外的合成納米顆粒釋放時(shí)，只有小部分免疫調(diào)節(jié)劑找到它們通往APC的路， 同時(shí)剩余的通過(guò)身體擴(kuò)散，其中免疫刺激會(huì)更少并且會(huì)導(dǎo)致有害效果。在此提供的本發(fā)明的合成納米載體優(yōu)先地被APC接收。在被APC接收時(shí)，假定合成納米載體被內(nèi)吞到內(nèi)含體/ 溶酶體區(qū)室，那里pH變得更酸，和細(xì)胞外的中性pH相反。在這些條件下，免疫調(diào)節(jié)劑表現(xiàn)出從合成納米載體(例如從免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分)的PH敏感的解離并且從合成納米載體釋放。然后免疫調(diào)節(jié)劑與內(nèi)含體/溶酶體相關(guān)受體自由地相互作用，并且刺激希望的免疫應(yīng)答。在或約中性PH下，或者在或約生理pH(即pH = 7.4)的實(shí)施方案中，本發(fā)明的合成納米載體具有免疫調(diào)節(jié)劑的更低釋放的特性，但是對(duì)于它靶向免疫調(diào)節(jié)劑至合成納米載體靶向的APC的內(nèi)含體/溶酶體區(qū)室，在或約4. 5的pH的增加的釋放是希望的。通過(guò)很多方法中的任何一種，免疫調(diào)節(jié)劑可以被偶合到合成納米載體。一般地，偶合可以是免疫調(diào)節(jié)劑和合成納米載體之間的鍵合的結(jié)果。該鍵合可以導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)劑被附著到合成納米載體表面和/或被包含(膠囊化)在合成納米載體內(nèi)。然而在一些實(shí)施方案中，由于合成納米載體的結(jié)構(gòu)，免疫調(diào)節(jié)劑被合成納米載體膠囊化而不是鍵合到合成納米載體。在由于免疫調(diào)節(jié)劑和合成納米載體之間的鍵合而發(fā)生偶合時(shí)，經(jīng)由一個(gè)免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分發(fā)生偶合。免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分可以是任何部分，免疫調(diào)節(jié)劑通過(guò)它被鍵合到合成納米載體上。這樣的部分包括共價(jià)鍵(例如酰胺鍵或酯鍵)，連同鍵合(共價(jià)地或非共價(jià)地)免疫調(diào)節(jié)劑至合成納米載體的分離分子。這樣的分子包括連接物或聚合物或它們的單元。例如，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分可以包括免疫調(diào)節(jié)劑(例如一種免疫刺激核酸)靜電結(jié)合的一種帶電聚合物。如另一個(gè)實(shí)例，免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分可以包括免疫調(diào)節(jié)劑共價(jià)結(jié)合的一種聚合物或其單元。在一些實(shí)施方案中，該聚合物或其單元包括聚酯、聚碳酸酯、聚酰胺、或聚醚、或其單元。在其他實(shí)施方案中，該聚合物或其單元包括聚(乙二醇)(PEG)、聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、聚(乳酸-乙醇酸)共聚物、或聚己酸內(nèi)酯、或其單元。在一些實(shí)施方案中，優(yōu)選該聚合物是生物可降解的。因此，在這些實(shí)施方案中，優(yōu)選如果該聚合物包括聚醚(例如聚 (乙二醇)或其單元)，那么該聚合物包括聚醚和生物可降解聚合物的嵌段共聚物，這樣該聚合物是生物可降解的。在其他實(shí)施方案中，該聚合物并不單獨(dú)包括聚醚或其單元(例如聚(乙二醇)或其單元)。因此如在此提供的免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分可以包括一個(gè)以上提到的聚合物或其單元(例如一種丙交酯或乙交酯)。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于用作合成納米載體的一部分，在pH = 7. 4并且在25V 下，在此提供的化合物或結(jié)合物的聚合物在水中是不可溶的，是生物可降解的，或者同時(shí)具有這二者。在其他實(shí)施方案中，在pH = 7. 4并且在25°C下，該聚合物在水中是不可溶的， 但是在PH = 4. 5并且在25°C下是可溶的。仍在其他實(shí)施方案中，在PH= 7. 4并且在25°C 下，該聚合物在水中是不可溶的，但是在pH = 4. 5并且在25°C下是可溶的并且生物可降解的。在其他實(shí)施方案中，如使用凝膠滲透色譜法確定的那樣，任何在此提供的聚合物可以具有約800Da至10，OOODa (例如2，OOODa)的重均分子量。在一些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑可以是一種佐劑(例如咪唑并喹啉)。咪唑并喹啉包括多種化合物，例如咪喹莫特和瑞喹莫德(也稱為R848)。這樣的佐劑可以被偶合到如以上提到的聚合物上。如一個(gè)實(shí)例，瑞喹莫德可以被結(jié)合到約2000Da的聚乳酸(PLA)聚合物上。在體外釋放研究中，這樣的一個(gè)實(shí)施方案證明在pH從7. 4跌至4. 5時(shí)，R848的釋放增加了 3-至6-倍。表1列出了測(cè)試的顆粒的組合物。這些包括了膠囊化R848的兩種配制品，2種具有通過(guò)R848胺共價(jià)偶合到R848的PLA的配制品，四種具有共價(jià)偶合到R848 (經(jīng)由一種開(kāi)環(huán)作用方法)的PLA的配制品。在所有配制品中，在更低pH值，R848的釋放顯著增加。膠囊化的釋放速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于結(jié)合的釋放速率，并且在這些結(jié)合方法之間的釋放速率中也存在差異。表1具有共價(jià)R848的配制品靶
權(quán)利要求
1.一種組合物，包括合成納米載體，包括一種偶合到該合成納米載體上的免疫調(diào)節(jié)劑；其中該免疫調(diào)節(jié)劑根據(jù)以下關(guān)系從該合成納米載體解離IArel (4. 5)24% /IArel (7. 4) 1. 2 ；其中IArel (4. 5) 被定義為在pH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在PH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在PH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，保留在該合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)；并且其中IArel (7. 被定義為在pH = 7. 4，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量除以在PH = 7. 4，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量加上在PH = 7. 4，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)，保留在該合成納米載體中的免疫調(diào)節(jié)劑的重量之和，表示為重量百分?jǐn)?shù)，并且被取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由一個(gè)免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到該合成納米載體上。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑被膠囊化在該合成納米載體內(nèi)。
4.如權(quán)利要求3所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑包括一種不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。
5.如權(quán)利要求4所述的組合物，其中該不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑包括一種咪唑并喹啉、一種腺嘌呤衍生物、或包括5’ -CG-3’的一種寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。
6.如權(quán)利要求5所述的組合物，其中該咪唑并喹啉包括一種咪唑并喹啉胺、一種咪唑并吡啶胺、一種6，7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、一種咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫 "(惠ο
7.如權(quán)利要求5所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化該主鏈。
8.如權(quán)利要求7所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。
9.如權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑是一種佐劑。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中該佐劑包括一種Toll樣受體(TLR)激動(dòng)劑。
11.如權(quán)利要求10所述的組合物，其中該TLR激動(dòng)劑是一種TLR3激動(dòng)劑、TLR7激動(dòng)齊U、TLR8激動(dòng)劑、TLR7/8激動(dòng)劑或一種TLR9激動(dòng)劑。
12.如權(quán)利要求10或11所述的組合物，其中該TLR激動(dòng)劑是一種免疫刺激核酸。
13.如權(quán)利要求12所述的組合物，其中該免疫刺激核酸是一種免疫刺激DNA或免疫刺激 RNA。
14.如權(quán)利要求12或13所述的組合物，其中該免疫刺激核酸是一種含有CpG的免疫刺激核酸，它包括一種或多種穩(wěn)定化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化該主鏈。
15.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中該佐劑包括一種通用T-細(xì)胞抗原。
16.如權(quán)利要求1-15中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體進(jìn)一步包括一種B細(xì)胞抗原和/或一種T細(xì)胞抗原。
17.如權(quán)利要求1-16中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體進(jìn)一步包括一種抗原遞呈細(xì)胞(APC)靶向特征。
18.如權(quán)利要求1-17中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體包括一種或多種可生物降解的聚合物。
19.如權(quán)利要求18所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到這一種或多種可生物降解的聚合物上。
20.如權(quán)利要求18或19所述的組合物，其中該可生物降解的聚合物包括聚(丙交酯)、 聚(乙交酯)、或聚(丙交酯乙交酯)共聚物。
21.如權(quán)利要求18-20中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中如使用凝膠滲透色譜法確定的那樣，這些可生物降解的聚合物具有范圍從800道爾頓至10，000道爾頓的重均分子量。
22.如權(quán)利要求2和9-21中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酰胺鍵。
23.如權(quán)利要求2和9-21中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酯鍵。
24.如權(quán)利要求1-23中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體包括脂基納米顆粒，聚合物納米顆粒，金屬納米顆粒，表面活性劑基乳液，樹(shù)枝狀化合物，巴奇球，納米線， 病毒狀顆粒，肽或蛋白基顆粒，包括納米材料、球狀納米顆粒、立方納米顆粒、錐形納米顆粒、長(zhǎng)方形納米顆粒、圓柱形納米顆粒、或環(huán)形納米顆粒的一種組合的納米顆粒。
25.一種組合物，包括合成納米載體，包括一種偶合到該合成納米載體上的免疫調(diào)節(jié)劑； 其中該免疫調(diào)節(jié)劑根據(jù)以下關(guān)系從該合成納米載體解離 IA (4. 5)24/ΙΑ(4· 5)6 彡 1. 2 ；其中IA (4. 5)24被定義為在pH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)， 取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量；并且其中IA (4. 5) 6被定義為在pH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境6小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量。
26.如權(quán)利要求25所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑包括膠囊化在該合成納米載體內(nèi)的一種不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。
27.如權(quán)利要求沈所述的組合物，其中該不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑包括一種咪唑并喹啉、 一種腺嘌呤衍生物、或包括5’ -CG-3’的一種寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。
28.如權(quán)利要求27所述的組合物，其中該咪唑并喹啉包括一種咪唑并喹啉胺、一種咪唑并吡啶胺、一種6，7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、一種咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫德。
29.如權(quán)利要求27所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾， 這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化該主鏈。
30.如權(quán)利要求四所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。
31.一種組合物，包括合成納米載體，包括一種偶合到該合成納米載體上的免疫調(diào)節(jié)劑；其中該免疫調(diào)節(jié)劑根據(jù)以下關(guān)系從該合成納米載體解離6 彡 IA (4. 5)24/IA(4. 5)6 彡 1. 2 ；其中IA (4. 5)24被定義為在pH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境M小時(shí)， 取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量；并且其中IA (4. 5) 6被定義為在pH = 4. 5，將該合成納米載體暴露于體外水環(huán)境6小時(shí)，取作跨合成納米載體樣品的平均數(shù)的釋放的免疫調(diào)節(jié)劑的重量。
32.如權(quán)利要求31所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑包括膠囊化在該合成納米載體內(nèi)的一種不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑。
33.如權(quán)利要求32所述的組合物，其中該不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑包括一種咪唑并喹啉、 一種腺嘌呤衍生物、或包括5’ -CG-3’的一種寡核苷酸，其中C未甲基化并且其中該寡核苷酸包括一個(gè)主鏈，該主鏈包括一個(gè)或多個(gè)不穩(wěn)定的核苷酸間連鍵。
34.如權(quán)利要求33所述的組合物，其中該咪唑并喹啉包括一種咪唑并喹啉胺、一種咪唑并吡啶胺、一種6，7-稠合的環(huán)烷基咪唑并吡啶胺、一種咪唑并喹啉胺、咪喹莫特、或瑞喹莫德。
35.如權(quán)利要求33所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈不包括穩(wěn)定化的化學(xué)修飾， 這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化該主鏈。
36.如權(quán)利要求35所述的組合物，其中該寡核苷酸的主鏈包括一個(gè)未被修飾以結(jié)合穩(wěn)定化學(xué)修飾的硫代磷酸酯的主鏈。
37.如權(quán)利要求25或31所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由一個(gè)免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到該合成納米載體上。
38.如權(quán)利要求25或31所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑被膠囊化在該合成納米載體內(nèi)。
39.如權(quán)利要求25、31、或37所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑是一種佐劑。
40.如權(quán)利要求39所述的組合物，其中該佐劑包括一種Toll樣受體(TLR)激動(dòng)劑。
41.如權(quán)利要求40所述的組合物，其中該TLR激動(dòng)劑是一種TLR3激動(dòng)劑、TLR7激動(dòng)齊U、TLR8激動(dòng)劑、TLR7/8激動(dòng)劑或一種TLR9激動(dòng)劑。
42.如權(quán)利要求40或41所述的組合物，其中該TLR激動(dòng)劑是一種免疫刺激核酸。
43.如權(quán)利要求42所述的組合物，其中該免疫刺激核酸是一種免疫刺激DNA或免疫刺激 RNA。
44.如權(quán)利要求42或43所述的組合物，其中該免疫刺激核酸是一種含有CpG的免疫刺激核酸，它包括一種或多種穩(wěn)定化學(xué)修飾，這些修飾的功能是在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定化該主鏈。
45.如權(quán)利要求39所述的組合物，其中該佐劑包括一種通用T-細(xì)胞抗原。
46.如權(quán)利要求25-45中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該合成納米載體進(jìn)一步包括一種B細(xì)胞抗原和/或一種T細(xì)胞抗原。
47.如權(quán)利要求25-46中的任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該合成納米載體進(jìn)一步包括一種抗原遞呈細(xì)胞(APC)靶向特征。
48.如權(quán)利要求25-47中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體包括一種或多種可生物降解的聚合物。
49.如權(quán)利要求48所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)由該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分偶合到這一種或多種可生物降解的聚合物上。
50.如權(quán)利要求48或49所述的組合物，其中該可生物降解的聚合物包括聚(丙交酯)、 聚(乙交酯)、或聚(丙交酯乙交酯)共聚物。
51.如權(quán)利要求48-50中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中如使用凝膠滲透色譜法確定的那樣，這些可生物降解的聚合物具有范圍從800道爾頓至10，000道爾頓的重均分子量。
52.如權(quán)利要求37和39-51中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酰胺鍵。
53.如權(quán)利要求37和39-51中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中該免疫調(diào)節(jié)劑偶合部分包括一個(gè)酯鍵。
54.如權(quán)利要求25-53中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中這些合成納米載體包括脂基納米顆粒，聚合物納米顆粒，金屬納米顆粒，表面活性劑基乳液，樹(shù)枝狀化合物，巴奇球，納米線，病毒狀顆粒，肽或蛋白基顆粒，包括納米材料、球狀納米顆粒、立方納米顆粒、錐形納米顆粒、長(zhǎng)方形納米顆粒、圓柱形納米顆粒、或環(huán)形納米顆粒的一種組合的納米顆粒。
55.如權(quán)利要求I-M中任意一項(xiàng)所述的組合物，進(jìn)一步包括一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
56.一種組合物，包括一種疫苗，該疫苗包括如權(quán)利要求1-55中任意一項(xiàng)所述的組合物。
57.一種方法，包括將如權(quán)利要求1-56中任意一項(xiàng)所述的組合物給予一個(gè)受試者。
58.如權(quán)利要求57所述的方法，其中該組合物以一個(gè)有效誘導(dǎo)或增強(qiáng)免疫應(yīng)答的量存在。
59.如權(quán)利要求58所述的方法，其中該受試者患有癌、一種傳染病、一種非自身免疫性代謝病、一種退行性疾病、或一種依賴癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及靶向細(xì)胞中作用位點(diǎn)的合成納米載體的組合物、以及相關(guān)方法，這些細(xì)胞例如抗原遞呈細(xì)胞(APC)，并且包括以一種pH敏感方式從合成納米載體離解的免疫調(diào)節(jié)劑。還披露了多種組合物和方法，這些組合物和方法涉及膠囊化不穩(wěn)定的免疫調(diào)節(jié)劑的合成納米載體，這些免疫調(diào)節(jié)劑以一種pH敏感的方式從這些合成納米載體解離。
文檔編號(hào)A61K9/16GK102481374SQ201080028109
公開(kāi)日2012年5月30日 申請(qǐng)日期2010年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月27日
發(fā)明者付芬妮, 查爾斯·澤普, 格雷森·B·利甫福德, 洛伊德·約翰斯頓, 薩姆·鮑德溫, 馬克·J·基根, 高云 申請(qǐng)人:西萊克塔生物科技公司