專利名稱：藥物組合物、食品飲料以及與它們相關(guān)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物、食品飲料以及關(guān)于它們的方法。
背景技術(shù)：
目前，人們正在進(jìn)行各種抗肥胖藥物的研發(fā)。例如，有報(bào)道指出脂肪酸合成酶 (FAS)的抑制劑通過(guò)降低下丘腦的神經(jīng)肽Y(NPY)的產(chǎn)生量，引起顯著的食欲減退，從而最終達(dá)到減少體重或脂肪量的效果(例如，參照非專利文獻(xiàn)1)?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)1 =Loftus, Τ. M.等 Science 288 :2379-2381 (2000)

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問(wèn)題然而，對(duì)于將作用于腦神經(jīng)系統(tǒng)的低分子化合物作為有效成分的抗肥胖藥物而言，會(huì)引起不良的副作用(例如，厭食癥)。因此，人們迫切期望研制出不會(huì)伴隨這種副作用(例如，厭食癥)的新的抗肥胖藥物。本發(fā)明是鑒于上述技術(shù)問(wèn)題而提出的，目的之一在于提供新型藥物組合物、食品飲料以及與它們相關(guān)的方法。技術(shù)方案為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的藥物組合物，特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明，可以提供新型藥物組合物。為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的蛋白質(zhì)，特征在于，是所述 (I)的蛋白質(zhì)或者所述(II)的蛋白質(zhì)，且作為藥物組合物的有效成分使用。根據(jù)本發(fā)明，可以提供用于新的藥物用途的蛋白質(zhì)。為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法，特征在于，制備所述藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明，可以提供制備新型藥物組合物的方法。為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法，特征在于，向生物機(jī)體給予所述藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明，可以提供向生物機(jī)體給予新型藥物組合物的方法。為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的食品飲料，特征在于，包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明，可以提供新型食品飲料。為了解決上述問(wèn)題的本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法，特征在于，制造所述食品飲料。根據(jù)本發(fā)明，可以提供制造新型食品飲料的方法。


圖1為將人類AIM氨基酸序列與cDNA堿基序列相對(duì)應(yīng)起來(lái)而示出的說(shuō)明圖。圖2為示出屬于SRCR-SF的分子的一種示例的說(shuō)明圖。圖3為將人類AIM氨基酸序列、小鼠AIM氨基酸序列以及它們共有的共有序列相對(duì)應(yīng)起來(lái)而示出的說(shuō)明圖。圖4是示出巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)到脂肪組織而產(chǎn)生AIM的狀態(tài)的顯微鏡照的一種示例的說(shuō)明圖。圖5A是示出對(duì)脂肪細(xì)胞的AIM處理方案的一種示例的說(shuō)明圖。圖5B是示出對(duì)根據(jù)圖5A中示出的方案用AIM處理的細(xì)胞采用油紅0脂肪染色的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖6A是示出對(duì)脂肪細(xì)胞的AIM處理方案的一種示例的說(shuō)明圖。圖6B是示出對(duì)根據(jù)圖6A中示出的方案用AIM處理的細(xì)胞采用油紅0脂肪染色的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖7A是示出根據(jù)圖6A中示出的方案用AIM處理時(shí)得到的具有脂滴的細(xì)胞的數(shù)的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖7B是示出根據(jù)圖6A中示出的方案用AIM處理時(shí)得到的具有脂滴的細(xì)胞的數(shù)中的脂滴直徑的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖8A是示出根據(jù)圖6A中示出的方案用AIM處理時(shí)釋放到培養(yǎng)上清液中的甘油的量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖8B是示出根據(jù)圖6A中示出的方案用AIM處理時(shí)釋放到培養(yǎng)上清液中的游離脂肪酸的量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖9是以模式化示出伴隨脂肪細(xì)胞分化的主要的基因的表達(dá)模式的說(shuō)明圖。圖10是示出根據(jù)圖5A以及圖6A中示出的方案用AIM處理的細(xì)胞中的基因表達(dá)的分析結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖IlA是示出對(duì)于脂肪細(xì)胞的AIM處理方案的一種示例的說(shuō)明圖。圖IlB是示出根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細(xì)胞中的FAS 酶活性的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖IlC是示出根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細(xì)胞中的FAS 酶活性的測(cè)定結(jié)果的另一種示例的說(shuō)明圖。圖12A是示出對(duì)根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細(xì)胞采用油紅0脂肪染色的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖12B是示出對(duì)根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細(xì)胞中的基因表達(dá)的分析結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖13A是示出根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理時(shí)釋放到培養(yǎng)上清液中的甘油的量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖1 是示出根據(jù)圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理時(shí)釋放到培養(yǎng)上清液中的游離脂肪酸的量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖14是示出證實(shí)添加有HA標(biāo)簽的AIM和添加有FLAG標(biāo)簽的FAS的結(jié)合的免疫沉淀的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖15A是示出用AIM處理并用抗AIM抗體染色的細(xì)胞的共焦顯微鏡照的一種示例的說(shuō)明圖。圖15B是示出用AIM處理并用抗AIM抗體染色的細(xì)胞的共焦顯微鏡照的另一種示例的說(shuō)明圖。圖16A是示出用AIM處理的細(xì)胞的免疫電子顯微鏡照的一種示例的說(shuō)明圖。圖16B是示出用AIM處理的細(xì)胞的免疫電子顯微鏡照的另一種示例的說(shuō)明圖。圖17是以模式化示出AIM內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的機(jī)制的說(shuō)明圖。圖18A是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細(xì)胞通過(guò)共焦顯微鏡以二維方式分析的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖18B是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細(xì)胞通過(guò)共焦顯微鏡以三維方式分析的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖18C是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細(xì)胞通過(guò)共焦顯微鏡以三維方式分析的結(jié)果的另一種示例的說(shuō)明圖。圖18D是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細(xì)胞通過(guò)共焦顯微鏡以三維方式分析的結(jié)果的又一個(gè)另一種示例的說(shuō)明圖。圖19A是示出將不存在⑶36中和抗體的情況下用AIM處理的細(xì)胞用抗AIM抗體染色的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖19B是示出將用⑶36中和抗體的同時(shí)用AIM處理的細(xì)胞用抗AIM抗體染色的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖20A是示出拍攝AIM+ Adipo+小鼠的腹腔內(nèi)脂肪組織的照片的一種示例的說(shuō)明圖。圖20B是示出拍攝AIM+a Adipo+小鼠的腹腔內(nèi)脂肪組織的照片的一種示例的說(shuō)明圖。圖21A是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖21B是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖22A是示出給予BSA的小鼠的脂肪組織的顯微鏡觀察結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖22B是示出給予AIM的小鼠的脂肪組織的顯微鏡觀察結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖23A是示出用HFD喂食之前的AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖2 是示出用HFD喂食之后的AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖23C是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的內(nèi)臟脂肪的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖23D是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的皮下脂肪的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖23E是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIMv+ Adipo+小鼠的肝臟的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖24A是示出用HFD喂食之前的AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖MB是示出用HFD喂食之后的AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖24C是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的內(nèi)臟脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖24D是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖24E是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的肝臟的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖25是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的飼料攝入量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖沈是示出AIM"+小鼠以及AIM+小鼠的脂肪細(xì)胞的大小的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖27A是示出從AIM+/+小鼠采集的內(nèi)臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖27B是示出從AIM+小鼠采集的內(nèi)臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖28A是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖
圖^B是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的內(nèi)臟脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖^C是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖^A是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的體溫的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖29B是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的耗氧速率的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖29C是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的飼料攝入量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖^D是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的活動(dòng)性的評(píng)價(jià)結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖30A是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的體重的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。
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圖30B是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的內(nèi)臟脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖30C是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測(cè)定結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖31是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的mRNA水平的評(píng)價(jià)結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖32是示出確認(rèn)體內(nèi)(in vivo)的AIM和FAS結(jié)合的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖33A是示出確認(rèn)體外(in vitro)的AIM和FAS結(jié)合的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖3 是示出確認(rèn)體外(in vitro)的AIM和FAS結(jié)合的結(jié)果的另一種示例的說(shuō)明圖。圖34A是示出二聚化的FAS以及各區(qū)域的主要功能的說(shuō)明圖。圖34B是示出將FAS各區(qū)域用Flag序列標(biāo)記，并通過(guò)共沉淀試驗(yàn)研究該各區(qū)域與用HA標(biāo)記的AIM的結(jié)合的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖35A是示出向野生型⑶36v+小鼠從靜脈注射rAIM，分析向脂肪組織的rAIM的內(nèi)吞的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖35B是示出向⑶36+小鼠從靜脈注射rAIM，分析向脂肪組織的rAIM的內(nèi)吞的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖36A是示出在相差顯微鏡下觀察分化刺激前的HMSC的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖36B是示出在相差顯微鏡下觀察rhAIM不存在下被分化刺激后的HMSC的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖36C是示出在相差顯微鏡下觀察rhAIM存在下被分化刺激后的HMSC的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖37是示出HMSC中的Glut_4的mRNA水平的評(píng)價(jià)結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。圖38是示出采用抗小鼠AIM抗體對(duì)狗血清以及貓血清進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn)的結(jié)果的一種示例的說(shuō)明圖。
具體實(shí)施例方式以下，說(shuō)明本發(fā)明的一種實(shí)施方式。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明不受本實(shí)施方式的任何限制。首先，對(duì)于作為與本發(fā)明相關(guān)的蛋白質(zhì)的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子(Apoptosis Inhibitor of Macrophage，以下稱為 “AIM，，。)，進(jìn)行說(shuō)明。AIM在其氨基酸序列中存在保守的三個(gè)SRCR (Scavenger Receptor Cysteine-Rich)結(jié)構(gòu)域(從N末端依次稱為SRCR1、SRCR2、SRCR3。)，是具有由該三個(gè)SRCR 結(jié)構(gòu)域串聯(lián)的分子結(jié)構(gòu)的分泌蛋白。本發(fā)明的發(fā)明人研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)克隆小鼠基因，構(gòu)建基因敲除小鼠，并基于分析結(jié)果，首次發(fā)表了由巨噬細(xì)胞特異性產(chǎn)生的、作為具有抑制巨噬細(xì)胞的凋亡的功能的分泌蛋白的小鼠 AIM(文獻(xiàn) 1 :Miyazaki, Τ.等 Increased susceptibility of thymocytesto apoptosis in mice lacking AIM， a novel murine macrophage-derived soluble factor belonging to the scavenger receptor cysteine-rich domain superfamily. J Exp Med. 189 :413-422,1999. ；XM 2 :Haruta, I. ，Kato, Y. ，Hashimoto, Ε. ，Minjares, C.，Kennedy, S.，Uto, H.，Yamauchi, K.，Kobayashi, Μ.，Yusa, S.，Muller, U.，Hayashi, N. & Miyazaki, T.Association of AIM，a novel apoptosis inhibitory factor，with hepatitis via supporting macrophage survival and enhancing phagocytotic function of macrophages. J. Biol. Chem. 276 :22910-22914 (2001).)。另一方面，其他研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表過(guò)人類基因序列的“Sp ci ” (Secretion protein α) (文獻(xiàn)3 :Gebe，J. Α·等Molecular cloning，mapping to human chromosome 1 q21_q23，and cell binding characteristics of Spalpha,a new member of the scavenger receptor cysteine-rich (SRCR) family of proteins. J Biol Chem. 272 :6151_6158，1997.)。并且， 此后作為基因組測(cè)序工程的一環(huán)，將該基因命名為“Api6”。而且，由于具有三個(gè)SRCR結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)與CD5的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域相似，因此又將該基因命名為“CD5L”。并且，最近提出將這些名稱統(tǒng)一為“CD5L”。但是，從分子名稱應(yīng)當(dāng)反映其功能的觀點(diǎn)考慮，將這些蛋白質(zhì)名稱均統(tǒng)一為“AIM”，應(yīng)該更為恰當(dāng)。小鼠AIM是由示出在序列表5中的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，人類AIM是由示出在序列表1中的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。在此，圖1是將人類AIM氨基酸序列(序列表1中示出的氨基酸序列)與cDNA堿基序列(序列表9中示出的堿基序列)相對(duì)應(yīng)起來(lái)而示出的。接著，對(duì)AIM分子的特征進(jìn)行說(shuō)明。小鼠AIM原本是作為清道夫受體富含半胱氨酸殘基超家族 Gcavenger-Rec印tor Cysteine-Rich Super-Family，SRCR-SF)的新組成員而發(fā)現(xiàn)的，是具有MkDa分子量的分子。圖2中示出屬于該SRCR-SF的分子的一種示例。如圖2所示，AIM分子由在屬于 SRCR-SF的組成員分子之間保守的富含半胱氨酸殘基的三個(gè)SRCR結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成。該AIM雖然包含相比于作為最為靠近N末端側(cè)的SRCR結(jié)構(gòu)域的SRCRl，更靠近N 末端側(cè)的信號(hào)肽，但是不包含相當(dāng)于跨膜結(jié)構(gòu)域或胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的部分，在序列上是典型的分泌蛋白。需要說(shuō)明的是，如圖2所示，CD5或CD6等具有三個(gè)相同的SRCR結(jié)構(gòu)域的其他 SRCR-SF的組成員屬于跨膜蛋白。另外提一下，“SRCR-SF”的名稱是由于富含半胱氨酸殘基的結(jié)構(gòu)域在清道夫受體中最初被記載而被命名的名稱，但并不是所有的包含該結(jié)構(gòu)域的分子都具有清道夫功能。 實(shí)際上，小鼠AIM不具有清道夫功能。小鼠AIM與人類AIM的氨基酸序列具有68%的同源性。并且，雖然小鼠AIM中包含三個(gè)N-糖化位點(diǎn)，但人類AIM中沒(méi)有N-糖化位點(diǎn)。圖3是將人類AIM氨基酸序列(序列表1中示出的氨基酸序列的單字母標(biāo)記)、小鼠AIM氨基酸序列(序列表5中示出的氨基酸序列的單字母標(biāo)記)以及它們共有的共有序列相對(duì)應(yīng)起來(lái)而示出的。在圖3的六段中，示出在最上段到第三段的用方框圈起來(lái)的部分是SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表2中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表6中示出的氨基酸序列)。并且，示出在第三段到第五段的用方框圈起來(lái)的部分是SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表3中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表7中示出的氨基酸序列)。并且，示出在第五段到第六段的用方框圈起來(lái)的部分是SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表4中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表8中示出的氨基酸序列)。進(jìn)一步地，對(duì)于迄今為止了解到的AIM的功能進(jìn)行說(shuō)明。AIM的一部分功能在最初分析基因敲除小鼠時(shí)即已明確(上述文獻(xiàn)1)。S卩，已經(jīng)了解到雖然AIM基因缺失(AIM+) 小鼠基本上沒(méi)有出現(xiàn)異常，但腹腔巨噬細(xì)胞中，對(duì)于通過(guò)各種刺激而誘導(dǎo)的凋亡的抵抗性低下。同樣地，如果用重組AIM分子處理AIM^巨噬細(xì)胞，則會(huì)提高凋亡抵抗性。S卩，已經(jīng)明確AIM具有抑制巨噬細(xì)胞的凋亡的功能。對(duì)于AIM而言，能夠抑制的凋亡并不是通過(guò)限定的刺激而誘導(dǎo)的凋亡，其能夠作用于通過(guò)i^s/CD95、放射線、類固醇、感染(李斯特菌等)、氧化LDL等各種刺激而誘導(dǎo)的凋亡。AIM究竟通過(guò)什么樣的機(jī)制抑制凋亡，尚不明了。并且，本發(fā)明的發(fā)明人對(duì)于這種AIM反復(fù)進(jìn)行了專心研究，其結(jié)果獨(dú)立發(fā)現(xiàn)AIM發(fā)揮以下意外的功能。即，抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化，并且在成熟的脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解(lipolysis，脂解作用)。由此出發(fā)，最終完成了本發(fā)明。而且，令人驚訝的是，雖然AIM已經(jīng)被明確屬于分泌蛋白，但在細(xì)胞膜表面上表達(dá)的CD36介導(dǎo)下內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，由此發(fā)揮其功能。該事實(shí)表明，AIM僅特異性地作用于表達(dá)有⑶36的細(xì)胞。S卩，例如AIM對(duì)不表達(dá) CD36的腦神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞不起作用。并且，由于AIM是一種蛋白，因此不會(huì)通過(guò)血腦屏障。從而，AIM不會(huì)引起諸如由于現(xiàn)有的將低分子物質(zhì)作為有效成分的抗肥胖藥物而引起的副作用(例如，厭食癥)。接著，對(duì)本實(shí)施方式所涉及的藥物組合物(以下，稱為“本藥物組合物”。)進(jìn)行說(shuō)明。本藥物組合物作為有效成分而含有包含上述AIM的特定蛋白質(zhì)(以下，稱為“本蛋白質(zhì)，，。)°S卩，本藥物組合物作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)，(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子(AIM) ； (II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子(AIM)的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。在此，所述(I)的蛋白質(zhì)是天然AIM，而所述(II)的蛋白質(zhì)是該天然AIM的變異蛋白。本蛋白質(zhì)是所述(I)的蛋白質(zhì)或所述(II)的蛋白質(zhì)，是作為藥物組合物的有效成分而使用的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)是例如在后述的任意疾病的診斷、治療或預(yù)防中所使用的蛋白質(zhì)。本藥物組合物作為有效成分而包含例如人類或人類以外的動(dòng)物(以下，僅稱為 “動(dòng)物”。)的AIM。本蛋白質(zhì)例如是由序列表1中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。即，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是人類的AIM，是具有抑制巨噬細(xì)胞凋亡的功能(以下，稱為“凋亡抑制功能”)的分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)例如是動(dòng)物的AIM。對(duì)于動(dòng)物，只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)。更加具體地，本蛋白質(zhì)例如是小鼠、狗或貓的AIM。本蛋白質(zhì)例如是由序列表5中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是小鼠的AIM，是具有凋亡抑制功能的分泌蛋白。這些AIM例如可以利用基因重組技術(shù)而制備。即，首先，將序列表9中示出的人類 AIM的cDNA(需要說(shuō)明的是，序列表9中示出的氨基酸序列中3'末端的“tag”是終止密碼子。)整合到適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體(pCAGGS等)。接著，將該表達(dá)載體導(dǎo)入到動(dòng)物細(xì)胞株(CH0 細(xì)胞、293T細(xì)胞等)，使該動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生人類AIM。由于人類AIM屬于分泌蛋白，因此產(chǎn)生的重組人類AIM會(huì)被釋放到培養(yǎng)上清液中。 從而，例如，可以通過(guò)在該人類AIM上添加HA等標(biāo)簽多肽(9 12個(gè)氨基酸)，利用固定有針對(duì)該標(biāo)簽多肽的抗體的純化柱，從培養(yǎng)上清液純化該人類AIM。并且，例如，預(yù)先得到抗 AIM抗體時(shí)，還可以采用該抗AIM抗體，從培養(yǎng)上清液純化沒(méi)有添加標(biāo)簽的人類AIM。在此，對(duì)于人以外的動(dòng)物的AIM，也可以采用同樣的方法制備AIM。S卩，例如，對(duì)于小鼠，可以通過(guò)利用序列表10中示出的小鼠AIM的CDNA(需要說(shuō)明的是，序列表10中示出的氨基酸序列中3'末端的“tga”是終止密碼子。)，按照與制備上述的人類AIM時(shí)相同的順序，得到重組小鼠AIM。并且，對(duì)于其他的動(dòng)物種(例如，狗、貓)，例如，也可以基于包含保守的SRCR結(jié)構(gòu)域、具有三個(gè)該SRCR結(jié)構(gòu)域串聯(lián)的形態(tài)、是分泌蛋白，這三個(gè)特征，從該其他動(dòng)物種的cDNA 文庫(kù)中獲得AIM的cDNA，按照與制備上述的人類AIM時(shí)相同的順序，得到重組AIM。并且，例如，還可以從公知的數(shù)據(jù)庫(kù)(例如，National Center for Biotechnology hformatior^NCBI，美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心)提供的數(shù)據(jù)庫(kù))得到AIM的氨基酸序列。 具體而言，例如，將狗AIM的氨基酸序列示出在序列表11中，將黑猩猩AIM的氨基酸序列示出在序列表12中，將大鼠AIM的氨基酸序列示出在序列表13中。進(jìn)一步地，對(duì)于在這些天然AIM的部分氨基酸序列中發(fā)生如后述的變異的AIM類似蛋白質(zhì)，例如，只要合成并使用對(duì)應(yīng)的cDNA，就可以按照相同的順序，作為重組變異AIM 而獲得。并且，對(duì)于本蛋白質(zhì)而言，在不損壞其抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能(以下，稱為“脂肪分化抑制功能”。)和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解 (lipolysis，脂解作用)的功能(以下，稱為“脂解功能”。)的范圍內(nèi)，可以使用在上述的天然AIM的氨基酸序列中發(fā)生變異的蛋白質(zhì)(AIM變異蛋白)。即，本藥物組合物作為有效成分而包含例如人類或動(dòng)物的AIM變異蛋白。如上所述，AIM變異蛋白是由AIM氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。在此，對(duì)以下說(shuō)明的AIM變異蛋白，沒(méi)有明確記載時(shí)，也可以具有如下所述的特征。即，AIM變異蛋白也可以是分泌蛋白。并且，AIM變異蛋白也可以具有凋亡抑制功能。 并且，AIM變異蛋白也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為 320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，當(dāng)AIM變異蛋白的氨基酸序列與天然AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性時(shí)，以及當(dāng)AIM變異蛋白的結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與天然AIM的結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性時(shí)，該同源性優(yōu)選為85%以上，更優(yōu)選為90%以上，尤其優(yōu)選為95%。并且，AIM變異蛋白也可以是與AIM同樣地在⑶36介導(dǎo)下作用于細(xì)胞的蛋白質(zhì)。 此時(shí)，AIM變異蛋白與AIM同樣地、特異性地作用于含有⑶36的細(xì)胞。并且，AIM變異蛋白也可以是與AIM同樣地，與細(xì)胞的脂肪酸合成酶(FAS)結(jié)合而降低該FAS的活性的蛋白質(zhì)。本蛋白質(zhì)例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。此時(shí)，本蛋白質(zhì)包含分泌蛋白的特征氨基酸序列。 具體而言，本蛋白質(zhì)例如由具有以下分子結(jié)構(gòu)的分泌蛋白形成在其氨基酸序列的N端 (最前部分)包含疏水性的短的序列(leader sequence，前導(dǎo)序列)，但不包含跨膜序列 (transmembrane region，跨膜區(qū)(同樣具有疏水性))、細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。實(shí)際上，天然AIM是具有這種分子結(jié)構(gòu)的分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。本蛋白質(zhì)例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。即，該本蛋白質(zhì)具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域，即人類AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、以及SRCR3結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由與該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的序列表中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該對(duì)應(yīng)的序列表中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域也可以從N末端側(cè)依次連接。而且，本蛋白質(zhì)例如是由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由序列表2中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域(人類 AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域)、由序列表3中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域(人類AIM的 SRCR2結(jié)構(gòu)域)、以及由序列表4中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域(人類AIM的SRCR3 結(jié)構(gòu)域)串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，該本蛋白質(zhì)作為SRCR結(jié)構(gòu)域具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域，即人類AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域、 SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，具有上述的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的任意一種本蛋白質(zhì)， 也可以是該第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由第一結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列、第二結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列以及第三結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列直接串聯(lián)而成的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。因此，此時(shí)，本蛋白質(zhì)例如不包含相當(dāng)于人類AIM中構(gòu)成SRCRl結(jié)構(gòu)域與SRCR2結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的氨基酸序列、構(gòu)成該SRCR2結(jié)構(gòu)域與SRCR3結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的氨基酸序列的、結(jié)構(gòu)域之間的連接部分。但是，包含上述的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的本蛋白質(zhì)，不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCRl結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、 取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR2結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR3結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，該本蛋白質(zhì)具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域，即人類AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域或者在人類AIM的 SRCRl結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、人類AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域或者在 SRCR2結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、以及人類AIM的SRCR3結(jié)構(gòu)域或者在SRCR3結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。S卩，本蛋白質(zhì)也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400 個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的序列表中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由與該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的序列表中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。即，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的序列表中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域也可以從N末端側(cè)依次連接。并且，具有上述的在共有序列以外的部分發(fā)生變異的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的任意一種本蛋白質(zhì)，也可以是該第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由第一結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列、第二結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列以及第三結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列直接串聯(lián)而成的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。但是，包含上述的在共有序列以外的部分發(fā)生變異的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的本蛋白質(zhì)，不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是下述的(xl)、(x2)或(x3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(xl)由序列表2中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(x2)由序列表3中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(x3)由序列表4中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)例如是由人類AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第一結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCRl結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(xl)的蛋白質(zhì))。并且，本蛋白質(zhì)例如是由人類AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第二結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCR2 結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(x2)的蛋白質(zhì))。并且，本蛋白質(zhì)例如是由人類AIM的 SRCR3結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第三結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCR3結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(x3)的蛋白質(zhì))。并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如也可以是下述的(yl)、(y2)或(y3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(yl)由序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)； (y2)由序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表 3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(y:3)由序列表4中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。
并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如也可以是下述的(zl)、(z2)或(z3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(zl)由在序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(z2)由在序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(z3)由在序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。并且，具有上述的第一結(jié)構(gòu)域蛋白、第二結(jié)構(gòu)域蛋白或第三結(jié)構(gòu)域蛋白的任意一種本蛋白質(zhì)，也可以是多個(gè)該第一結(jié)構(gòu)域蛋白、第二結(jié)構(gòu)域蛋白或第三結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。但是，本蛋白質(zhì)不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由動(dòng)物的AIM的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該動(dòng)物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質(zhì)例如是由序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列) 經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如是由序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列)或者序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表11、序列表12或者序列表13中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。進(jìn)一步地，本蛋白質(zhì)例如是由動(dòng)物的AIM的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質(zhì)例如是由序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列) 經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/ 或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，本蛋白質(zhì)例如是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如是由序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列)或者序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由具有SRCRl結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域的動(dòng)物的AIM的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由該SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該 SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是由與動(dòng)物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400 個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由與該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的SRCR結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該對(duì)應(yīng)的SRCR結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域也可以從N末端側(cè)依次連接。此時(shí)，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，例如，動(dòng)物的AIM的氨基酸序列是序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列)，SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表6中示出的氨基酸序列，SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表7中示出的氨基酸序列，SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表8中示出的氨基酸序列。并且，同樣地，動(dòng)物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。進(jìn)一步地，本蛋白質(zhì)例如是由所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者該SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，同樣地，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如， 小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質(zhì)例如是由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，該本蛋白質(zhì)具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域，S卩小鼠AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、以及SRCR3結(jié)構(gòu)域或者在該結(jié)構(gòu)域中發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由序列表5中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。即，本蛋白質(zhì)也可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且， 本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為320 380 個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，同樣地，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如， 小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質(zhì)例如是由序列表5中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由序列表6中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域 (小鼠AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域)、由序列表7中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域(小鼠 AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域)、以及由序列表8中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域(小鼠AIM 的SRCR3結(jié)構(gòu)域)串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。即，該本蛋白質(zhì)作為SRCR結(jié)構(gòu)域具有三個(gè)，即小鼠AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。即，本蛋白質(zhì)例如也可以是由序列表 5中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且， 本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為320 380 個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，具有上述的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的任意一種本蛋白質(zhì)， 也可以是該第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由第一結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列、第二結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列以及第三結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列直接串聯(lián)而成的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。但是，包含上述的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的本蛋白質(zhì)，不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是由具有SRCRl結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域的動(dòng)物的AIM的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在該SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在該SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由該 SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在該SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。此時(shí)，本蛋白質(zhì)也可以是由與動(dòng)物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400 個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由在該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的SRCR結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、 取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由與該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域所對(duì)應(yīng)的SRCR結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。即，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域也可以是由在該至少一個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的SRCR 結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu)域。并且，第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域也可以從N末端側(cè)依次連接。動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質(zhì)例如是由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCRl結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、 取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR2結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR3結(jié)構(gòu)域部分的共有序列)以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，該本蛋白質(zhì)作為SRCR結(jié)構(gòu)域具有三個(gè)，即小鼠AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域或者在小鼠AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、小鼠AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域或者在SRCR2結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域、以及小鼠AIM的SRCR3 結(jié)構(gòu)域或者在SRCR3結(jié)構(gòu)域的共有序列以外的部分發(fā)生變異的結(jié)構(gòu)域。并且，此時(shí)，本蛋白質(zhì)可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質(zhì)也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質(zhì)也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數(shù)目為300 400個(gè)，優(yōu)選為320 380個(gè)，更優(yōu)選為340 360個(gè)的蛋白質(zhì)。
并且，同樣地，動(dòng)物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。并且，包含上述的在共有序列以外的部分發(fā)生變異的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的任意一種本蛋白質(zhì)，也可以是該第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)是由第一結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列、第二結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列以及第三結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列直接串聯(lián)而成的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。但是，包含上述的在共有序列以外的部分發(fā)生變異的第一結(jié)構(gòu)域、第二結(jié)構(gòu)域以及第三結(jié)構(gòu)域的本蛋白質(zhì)，不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。并且，本蛋白質(zhì)例如是下述的(pi)、(p2)或(p3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(Pl)由動(dòng)物的AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(P2)由動(dòng)物的AIM的SRCR2 結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(P3)由動(dòng)物的AIM的SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。S卩，此時(shí)，本蛋白質(zhì)例如是由動(dòng)物AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第一結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCRl結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(pi)的蛋白質(zhì))。并且，本蛋白質(zhì)例如是由動(dòng)物AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第二結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCR2 結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(P2)的蛋白質(zhì))。并且，本蛋白質(zhì)例如是由動(dòng)物AIM的 SRCR3結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的蛋白質(zhì)(第三結(jié)構(gòu)域蛋白)，或者多個(gè)該SRCR3結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)(所述(P3)的蛋白質(zhì))。并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如是下述的(ql)、(q2)或(q3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(ql)由動(dòng)物的AIM的SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(q2)由動(dòng)物的AIM的SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(q3)由動(dòng)物的AIM的SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。并且，同樣地，本蛋白質(zhì)例如是下述的(rl)、(r2)或(r3)蛋白質(zhì)，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質(zhì)。(rl)由動(dòng)物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的 SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(r2)由動(dòng)物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(r3)由動(dòng)物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。并且，具有上述的第一結(jié)構(gòu)域蛋白、第二結(jié)構(gòu)域蛋白或第三結(jié)構(gòu)域蛋白的任意一種本蛋白質(zhì)，也可以是多個(gè)該第一結(jié)構(gòu)域蛋白、第二結(jié)構(gòu)域蛋白或第三結(jié)構(gòu)域蛋白直接串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)。但是，本蛋白質(zhì)不限于此，也可以是包含結(jié)構(gòu)域之間的連接部分的蛋白質(zhì)。此時(shí)，動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，例如，當(dāng)動(dòng)物的AIM是小鼠AIM時(shí)，所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表 6中示出的氨基酸序列，所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表7中示出的氨基酸序列， 所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列是序列表8中示出的氨基酸序列。并且，同樣地，動(dòng)物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。本藥物組合物作為有效成分而包含上述的本蛋白質(zhì)中的一種或多種。并且，本藥物組合物可以進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的載體。對(duì)于藥學(xué)上可接受的載體，沒(méi)有特別限制， 例如可以優(yōu)選使用能夠在抗體藥學(xué)等所謂的蛋白質(zhì)制劑中使用的載體。具體而言，例如可以使用在賦形劑、溶劑、稀釋劑、分散劑、乳化劑、助溶劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、等張劑、緩沖劑、 PH調(diào)節(jié)劑、安撫劑、防腐劑、抗氧化劑中的一種或兩種以上。對(duì)于本藥物組合物的劑型，沒(méi)有特別限制，例如可以制備成注射劑、片齊IJ、丸齊IJ、膠囊劑、散劑、顆粒劑、液劑、糖漿劑。即，本醫(yī)藥組合物例如可以制備成注射到生物機(jī)體組織內(nèi)的局部注射劑；注射到血管內(nèi)的靜脈注射劑、動(dòng)脈注射劑或者滴劑；腹腔內(nèi)給藥的注射劑。當(dāng)本藥物組合物為局部注射劑時(shí)，本藥物組合物例如可以制備成直接注射到脂肪組織(內(nèi)臟脂肪組織、皮下脂肪組織等)的脂肪組織注射劑、皮下注射劑、肌肉注射劑。并且，當(dāng)本藥物組合物為注射劑時(shí)，本藥物組合物例如可以將含有本蛋白質(zhì)和上述的藥學(xué)上可接受的載體的溶液經(jīng)過(guò)冷凍干燥等方法進(jìn)行干燥，制備成粉末狀，并于安瓶等容器中無(wú)菌保存。在此，本發(fā)明的發(fā)明人確認(rèn)出AIM的功能不會(huì)因這種干燥以及再溶解而被破壞。并且，給予本藥物組合物時(shí)，將其粉末溶解于適當(dāng)?shù)娜軇?例如，生理鹽水、林格氏溶液、其他注射用溶液)中，由此配制出由將本蛋白質(zhì)作為有效成分而包含的液狀注射劑形成的本藥物組合物。并且，當(dāng)本藥物組合物為注射劑時(shí)，例如還可以將含有本蛋白質(zhì)和上述的藥學(xué)上可接受的載體的溶液直接無(wú)菌保存于安瓶等容器中。本藥物組合物中的本蛋白質(zhì)的含量，根據(jù)劑型、劑量等而適當(dāng)?shù)卮_定，例如本藥物組合物可以被制備成包含0. 1 10重量％的本蛋白質(zhì)的液狀注射劑。本藥物組合物用于人或動(dòng)物的疾病診斷、治療或預(yù)防中。動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物，沒(méi)有特別限制，但優(yōu)選表達(dá)野生型AIM，其脂肪細(xì)胞表達(dá)CD36的動(dòng)物。具體而言，動(dòng)物例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。即，本藥物組合物例如用于人或人以外的哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)的疾病診斷、治療或預(yù)防中，更加具體地，例如用于人、小鼠、狗或者貓的疾病診斷、治療或預(yù)防中。S卩，本藥物組合物例如是給予人的藥物組合物(人用藥物組合物)。并且，本藥物組合物例如是給予動(dòng)物的藥物組合物(動(dòng)物用藥物組合物)。動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物， 沒(méi)有特別限制，但優(yōu)選表達(dá)野生型AIM，其脂肪細(xì)胞表達(dá)CD36的動(dòng)物。具體而言，動(dòng)物例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地， 例如是小鼠、狗或者貓。即，本藥物組合物例如是給予人或人以外的哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、 大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)的藥物組合物，更加具體地，例如是給予人、小鼠、狗或者貓的藥物組合物。在此，對(duì)于成為本藥物組合物適用對(duì)象的疾病，應(yīng)當(dāng)廣義地解釋，包括在生物機(jī)體的結(jié)構(gòu)或功能上有任意不適感的所有的狀態(tài)。即，本藥物組合物例如是為了診斷、治療或預(yù)防代謝性疾病(metabolic disorder，代謝失調(diào))、脂肪瘤(腫瘤)、(包括神經(jīng)的)退化性疾病而向生物機(jī)體給予的藥物組合物。這些疾病領(lǐng)域中，例如還包括諸如糖尿病、肥胖癥、 高血壓、動(dòng)脈硬化等心血管疾??；脂肪瘤。更加具體地，本藥物組合物例如為了診斷、治療或預(yù)防與脂肪組織有關(guān)的不適感而使用。作為與脂肪組織有關(guān)的不適感，例如可以舉出肥胖、脂肪肉瘤(liposarcoma)。即， 本藥物組合物將消除或預(yù)防伴隨肥胖而引起的不適感作為目的，為了適當(dāng)調(diào)節(jié)內(nèi)臟脂肪和 /或皮下脂肪的量而使用。并且，本藥物組合物為了縮小脂肪肉瘤或者抑制其增大而使用。 并且，本藥物組合物例如還可以將調(diào)節(jié)外形上能看到的期望的部位的脂肪組織的量作為目的，用于美容整形或整形外科上的治療中。即，本藥物組合物將減少脂肪組織、抑制其增加、 降低其增加程度作為目的，向生物機(jī)體給藥。并且，本實(shí)施方式所涉及的方法(以下，稱為“本方法”。)中的一個(gè)，例如是向生物機(jī)體給予有效量的本蛋白質(zhì)的方法。即，本方法是向生物機(jī)體給予上述的本藥物組合物的方法。在此，生物機(jī)體例如是人。并且，生物機(jī)體例如是動(dòng)物。動(dòng)物只要是人以外的動(dòng)物， 沒(méi)有特別限制，但優(yōu)選表達(dá)野生型AIM，其脂肪細(xì)胞表達(dá)CD36的動(dòng)物。具體而言，動(dòng)物例如是哺乳動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地， 例如是小鼠、狗或者貓。本方法例如是為了診斷、治療或者預(yù)防人或人以外的哺乳動(dòng)物的疾病，向該人或人以外的哺乳動(dòng)物給予對(duì)該診斷、治療或者預(yù)防有效的量的本蛋白質(zhì)(即，本藥物組合物) 的方法。對(duì)于本蛋白質(zhì)的給藥方法，沒(méi)有特別限制，例如可以舉出，通過(guò)局部注射等的局部給藥、通過(guò)靜脈注射、動(dòng)脈注射、點(diǎn)滴注射等的血管內(nèi)給藥、口服給藥。當(dāng)將本蛋白質(zhì)局部給藥時(shí)，例如，將本藥物組合物配制成注射劑，利用注射器等局部給藥器具，將該注射劑注射到生物機(jī)體的組織內(nèi)。即，例如以消除或預(yù)防肥胖、美容整形等作為目的，將本藥物組合物直接注射到內(nèi)臟脂肪組織或皮下脂肪組織等脂肪組織內(nèi)。并且，例如，對(duì)于患有脂肪肉瘤的患者，將本藥物組合物局部注射到該脂肪肉瘤組織內(nèi)。當(dāng)將本蛋白質(zhì)向血管內(nèi)給藥時(shí)，將本藥物組合物配制成注射劑，并利用注射器、輸液器具等血管內(nèi)給藥器具，將該注射劑注射到生物機(jī)體的血管內(nèi)。當(dāng)將本蛋白質(zhì)口服給藥時(shí)，將本藥物組合物配制成諸如片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、液劑、糖漿劑等口服給藥齊U，并使患者服用該口服給藥劑。在此，AIM在PH值2 3左右的酸性條件下，其分子結(jié)構(gòu)仍穩(wěn)定，不會(huì)喪失功能。如此，可以通過(guò)將本蛋白質(zhì)向生物機(jī)體內(nèi)給藥，有效地減少該生物機(jī)體內(nèi)的脂肪組織的量，抑制其增加或者降低其增加的程度。其中，當(dāng)將本蛋白質(zhì)通過(guò)注射給藥時(shí)，尤其是將本蛋白質(zhì)向脂肪組織內(nèi)局部給藥時(shí)，可以更加有效地減少該脂肪組織的量，抑制其增加或者降低其增加的程度。本蛋白質(zhì)的劑量根據(jù)給藥對(duì)象的癥狀、年齡、體重等因素而適當(dāng)?shù)卮_定，例如一次劑量可以是每Ikg體重給予0. 1 5mg。當(dāng)然，本蛋白質(zhì)的劑量只要是在對(duì)減少作為給藥對(duì)象的生物機(jī)體的脂肪組織，抑制其增加或者降低其增加的程度有效的范圍內(nèi)，則不限于上述劑量。即，例如局部給藥時(shí)，由于可以使本蛋白質(zhì)有效且確實(shí)地到達(dá)該本蛋白質(zhì)的作用部位，因此與血管內(nèi)給藥等全身給藥時(shí)相比，可以減少劑量。并且，本蛋白質(zhì)的給藥方案同樣也根據(jù)給藥對(duì)象的癥狀、年齡、體重等因素而適當(dāng)?shù)卮_定，例如可以以1周 幾周的間隔，實(shí)施幾周 幾月多次給藥。根據(jù)這種本蛋白質(zhì)的給藥，該本蛋白質(zhì)在到達(dá)的生物機(jī)體的脂肪組織內(nèi)，可以誘導(dǎo)成熟脂肪細(xì)胞中的脂肪的分解，并且還可以抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化。即， 本藥物組合物例如還可以稱為前脂肪細(xì)胞的分化抑制劑或成熟脂肪細(xì)胞中的脂肪分解誘導(dǎo)劑。并且，給予本蛋白質(zhì)的結(jié)果，得到減少生物機(jī)體的脂肪組織的量、抑制其增加、降低其增加的程度的效果，進(jìn)而能夠得到降低體重的效果。并且，本方法只要是與本蛋白質(zhì)的使用有關(guān)的，不限于上述示例。即，本方法例如是將本蛋白質(zhì)作為藥物組合物的有效成分而使用的方法。并且，本方法例如是將本蛋白質(zhì)作為有效成分含有的藥物組合物的制備方法。此時(shí)，本方法例如也可以是將本蛋白質(zhì)與藥學(xué)上可接受的載體混合，制備含有該本蛋白質(zhì)和該載體的藥物組合物的方法。并且，本蛋白質(zhì)還可以適用于食品飲料。即，本實(shí)施方式所涉及的食品飲料(以下，稱為“本食品飲料”。)是含有本蛋白質(zhì)(即，所述(I)AIM或(II)由AIM的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的、與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂肪分解功能的蛋白質(zhì))的食品飲料。即，本食品飲料例如是含有本蛋白質(zhì)的食品。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質(zhì)的飲料。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質(zhì)的經(jīng)口攝入組合物。該經(jīng)口攝入組合物例如是不制備成藥物，而是使需要者類似于維生素劑等機(jī)能增強(qiáng)劑輔助攝取的組合物，例如制備成片劑、膠囊劑、顆粒、凝膠等形態(tài)。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質(zhì)的食品飲料用添加劑。該食品飲料用添加劑例如是在食品飲料制造工藝中作為部分原料而使用或者添加到原料中的組合物。并且，與本食品飲料相關(guān)的本方法例如是將本蛋白質(zhì)作為食品飲料的部分原料而使用的方法。并且，本方法是制造含有本蛋白質(zhì)的食品飲料的方法。此時(shí)，本方法例如也可以是將本蛋白質(zhì)與其他原料混合，制造含有該本蛋白質(zhì)和該其他原料的食品飲料的方法。在此，記載本發(fā)明的一方面。本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的藥物組合物是將作為有效成分而含有以下的(a)至(1)中一種或多種蛋白質(zhì)作為特征的藥物組合物。(a)由序列表1中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)；(b)由序列表5中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)；(c)由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(d)由序列表5中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(e)由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該序列表1示出的氨基酸序列具有 80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(f)由序列表5中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與該序列表5示出的氨基酸序列具有80% 以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/ 或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(g)由序列表2中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表4中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(h)由序列表6中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表7中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表8中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(i)由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(j)由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、 取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(k)由序列表2中示出的氨基酸序列或者在序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者在序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者在序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)；(1)由序列表6中示出的氨基酸序列或者在序列表6中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表 中示出的氨基酸序列或者在序列表 中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者在序列表8中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法的特征在于，向生物機(jī)體給予所述藥物組合物。并且，本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法的特征在于，向生物機(jī)體給予所述(a)至 (1)中一種或多種蛋白質(zhì)的有效量。并且，本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法的特征在于，將所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質(zhì)作為藥物組合物的有效成分使用。并且，本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法的特征在于，制備作為有效成分而含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質(zhì)的藥物組合物。并且，本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的食品飲料的特征在于，含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質(zhì)。并且，本發(fā)明的一種實(shí)施方式所涉及的方法的特征在于，制備含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質(zhì)的食品飲料。接著，對(duì)本實(shí)施方式所涉及的具體實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明。實(shí)施例1[脂肪組織中的巨噬細(xì)胞的AIM表達(dá)]對(duì)C57BL/6小鼠采用高脂飲食(High Fat Diet :HFD，60 %脂肪熱量飼料)喂養(yǎng) 20周。并且，同樣也對(duì)肥胖程度更顯著的脂聯(lián)素(adiponectin)基因敲除小鼠(Adipo+小鼠)，采用HFD喂養(yǎng)。然后，從這些小鼠腹腔內(nèi)部采集內(nèi)臟脂肪組織。使用該脂肪組織制作的石蠟切片用抗巨噬細(xì)胞單克隆抗體(F4/80)以及抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)進(jìn)行雙
重染色。圖4示出將染色的切片通過(guò)相差顯微鏡以及熒光顯微鏡觀察的結(jié)果的一種示例。 圖4中，對(duì)于野生型的C57BL/6小鼠(Wild-type)以及Adipo+小鼠(AdiponectirT勺，分別示出相差顯微鏡照(Phase)、染色了巨噬細(xì)胞的熒光顯微鏡照(F4/80 macrophage)、染色了 AIM的熒光顯微鏡照(AIM)以及將這些熒光顯微鏡照合并的照片(merge)。如圖4所示，可以確認(rèn)，在野生型小鼠以及Adipo+小鼠中，均出現(xiàn)巨噬細(xì)胞染色部分與AIM染色部分相重疊，且浸潤(rùn)到脂肪組織的巨噬細(xì)胞強(qiáng)烈表達(dá)AIM。實(shí)施例2[AIM的對(duì)脂肪細(xì)胞分化的抑制]為了研究浸潤(rùn)到脂肪組織的巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的AIM對(duì)周圍的脂肪細(xì)胞起什么樣的作用，進(jìn)行了在3T3L1前脂肪細(xì)胞(preadipocyte)向成熟脂肪細(xì)胞分化的培養(yǎng)過(guò)程中用 AIM處理的實(shí)驗(yàn)。S卩，如圖5A所示，根據(jù)以下的互不相同的4種方案a至d，進(jìn)行了 3T3L1細(xì)胞的培養(yǎng)。(a)沒(méi)有用AIM處理；(b)從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始時(shí)起用AIM處理10天(day2 dayl2)； (c)僅在分化誘導(dǎo)前的增殖(clonal expansion，克隆增殖)期間(day (_2) day2)用AIM 處理；(d)僅在分化誘導(dǎo)刺激的初期(day2 day4)用AIM處理。作為AIM，使用小鼠重組AIM蛋白質(zhì)或者人類重組AIM蛋白質(zhì)。這些重組AIM蛋白質(zhì)，通過(guò)培養(yǎng)由小鼠或人類的AIM的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染的來(lái)源于人類的HEK293T細(xì)胞，從該培養(yǎng)上清分離純化而配制。其中，在以下示出的其他實(shí)施例中，作為AIM使用同樣的重組AIM蛋白質(zhì)。AIM處理，通過(guò)在培養(yǎng)液中以5 μ g/ml濃度添加AIM而進(jìn)行。并且，如圖5A所示，3T3L1細(xì)胞的分化誘導(dǎo)通過(guò)以下步驟進(jìn)行首先，培養(yǎng)3T3L 1 細(xì)胞4天(day (-2) day2)，使其增殖(cell proliferation)，然后在含有胰島素、地塞米松(DEX)、3_異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)的培養(yǎng)液中培養(yǎng)2天(day2 day4)，由此開(kāi)始分化誘導(dǎo)刺激，進(jìn)一步地，在含有胰島素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)2天(day4 day6)。分化誘導(dǎo)刺激期間(day2 day6)過(guò)后，在不含有這些分化誘導(dǎo)刺激因子的培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。并且，用油紅0(Oil-red-O)對(duì)從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始起第十天(dayl2)的細(xì)胞進(jìn)行染色，觀察從3T3L1細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化狀況。圖5B中示出，分別對(duì)于四種方案a d，用小鼠AIMQjH^rAIM)或者人類AIM(人類rAIM)處理的實(shí)驗(yàn)(但是，方案a是沒(méi)有用AIM處理)中得到的染色后的細(xì)胞的顯微鏡照。其中，對(duì)使用人類AIM的方案c，沒(méi)有拍攝顯微鏡照(N.D.)。如圖5B所示，根據(jù)方案d僅在分化誘導(dǎo)刺激的初期(day2-day4)用AIM處理時(shí)， 幾乎沒(méi)有觀察到包含脂滴的細(xì)胞，3T3L1細(xì)胞的分化幾乎完全被抑制住。S卩，AIM在存在有上述的分化誘導(dǎo)因子的情況下，抑制3T3L1細(xì)胞的分化。在此需要說(shuō)明的是，配制包含有分化誘導(dǎo)因子和AIM的培養(yǎng)液之后，利用純化柱從該培養(yǎng)液去除AIM時(shí)，該分化誘導(dǎo)因子仍然沒(méi)有喪失分化3T3L1細(xì)胞的能力(沒(méi)有示出數(shù)據(jù))。因此，認(rèn)為分化誘導(dǎo)因子與AIM之間實(shí)質(zhì)上不存在化學(xué)相互作用。并且，根據(jù)方案b從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始時(shí)起用AIM處理10天(day2-dayl2)時(shí)，也幾乎沒(méi)有觀察到包含脂滴的細(xì)胞，3T3L1細(xì)胞的分化幾乎完全被抑制住。并且，還確認(rèn)出這種AIM的分化抑制效果跟AIM濃度有關(guān)(沒(méi)有示出數(shù)據(jù))。S卩，如果對(duì)3T3L 1細(xì)胞進(jìn)行處理的AIM的濃度減少到1 μ g/ml、0. 1 μ g/ml，則AIM的分化抑制效果也會(huì)下降。并且，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)AIM的處理會(huì)增加死細(xì)胞數(shù)。因此，認(rèn)為AIM不會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞死亡， 而通過(guò)減少向成熟脂肪細(xì)胞分化的3T3L1細(xì)胞的數(shù)量來(lái)發(fā)揮分化抑制作用。另一方面，根據(jù)方案c僅在分化誘導(dǎo)前(day(-2)-day2)用AIM處理時(shí)，確認(rèn)出與根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM處理時(shí)同樣地，幾乎所有的細(xì)胞包含有脂滴，幾乎所有的3T3L1細(xì)胞分化成成熟脂肪細(xì)胞。即，僅在分化誘導(dǎo)前使用AIM處理時(shí)，3T3L1細(xì)胞的向成熟脂肪細(xì)胞的分化沒(méi)有被抑制住。但是，從分化誘導(dǎo)前開(kāi)始經(jīng)過(guò)分化誘導(dǎo)期間且其后(day (-2) -dayl2) 也繼續(xù)用AIM處理時(shí)，3T3L1細(xì)胞的向脂肪細(xì)胞的分化完全被抑制住(沒(méi)有示出數(shù)據(jù))。在此，小鼠AIM和人類AIM的氨基酸序列之間的同源性高達(dá)68%左右。并且，如圖3所示，在小鼠AIM和人類AIM中，SRCR結(jié)構(gòu)域中的共有序列(⑶5、⑶6等包含SRCR結(jié)構(gòu)域的其他分子中也保守的氨基酸序列)完全一致。并且，如上所述，人類AIM與小鼠AIM 同樣地，抑制作為來(lái)源于小鼠的細(xì)胞的3T3L1細(xì)胞的分化。即，人與小鼠之間，關(guān)于AIM功能具有互換性。實(shí)施例3[AIM的脂滴分解(lipolysis，脂解作用)的誘導(dǎo)]研究了對(duì)于成熟脂肪細(xì)胞的AIM的效果。如圖6A所示，與上述的實(shí)施例2同樣地， 作為方案e進(jìn)行了以下培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。即，從3T3L1細(xì)胞分化而在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成脂滴開(kāi)始用小鼠 AIM 處理 6 天(day6-dayl2)。
并且，用油紅0(oil-red-O)對(duì)從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始起第十天(day 12)的細(xì)胞進(jìn)行染色。并且，計(jì)算具有脂滴的細(xì)胞數(shù)。進(jìn)一步地，對(duì)于具有脂滴的細(xì)胞，測(cè)定脂滴的直徑。其中，為了進(jìn)行比較，對(duì)于通過(guò)上述的方案a培養(yǎng)的細(xì)胞以及通過(guò)方案d培養(yǎng)的細(xì)胞，也進(jìn)行了細(xì)胞計(jì)數(shù)以及脂滴直徑的測(cè)定。并且，回收根據(jù)方案e用AIM處理而培養(yǎng)后的培養(yǎng)液的上清液，通過(guò)ELISA法測(cè)定包含在該上清液中的甘油以及游離脂肪酸(free fatty acids, FFAs)的量。并且，為了進(jìn)行比較，對(duì)于上述的方案a，同樣也測(cè)定包含在培養(yǎng)上清液中的甘油以及游離脂肪酸的量。在此，為了防止包含在培養(yǎng)液中的白蛋白吸附游離脂肪酸，從分化誘導(dǎo)開(kāi)始起的第十天(day 12)時(shí)，將10% FBS(胎牛血清)添加培養(yǎng)液換成無(wú)血清培養(yǎng)液，將細(xì)胞進(jìn)一步在該無(wú)血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)6小時(shí)，然后測(cè)定包含在該無(wú)血清培養(yǎng)液的上清液中的甘油以及游離脂肪酸。圖6B中示出脂肪被油紅0染色的細(xì)胞的顯微鏡照。圖7A以及圖7B中分別示出對(duì)于方案a、d以及e (Exp. a, d，e)，評(píng)價(jià)具有脂滴的細(xì)胞(Droplet (+) cells)的數(shù)(個(gè) /IO4Um2)以及脂滴的相對(duì)大小(脂滴相對(duì)直徑)(％)的結(jié)果。其中，圖7B中示出的脂滴的相對(duì)大小是將在沒(méi)有用AIM處理的方案a中得到的細(xì)胞所具有的脂滴的大小視為100% 而計(jì)算出的。圖8A以及圖8B中分別示出對(duì)于方案a以及e(Exp.a，e)，測(cè)定培養(yǎng)液中的甘油濃度(甘油釋放量)(mM)以及游離脂肪酸濃度(FFA釋放量)(XlOmM)的結(jié)果。如圖6B以及圖7A所示，通過(guò)方案e用AIM處理分化后的脂肪細(xì)胞而繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)得到的具有脂滴的細(xì)胞的數(shù)與通過(guò)方案a沒(méi)有用AIM處理分化后的脂肪細(xì)胞而培養(yǎng)時(shí)相比， 顯著減少。并且，如圖7B所示，在方案e中得到的包含在脂肪細(xì)胞中的脂滴的直徑與在方案 a中得到的細(xì)胞中的相比，縮小至約25%。并且，如圖8A以及圖8B所示，根據(jù)方案e用AIM處理時(shí)，與根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM 處理時(shí)相比，培養(yǎng)上清液中的甘油濃度以及游離脂肪酸濃度均顯著增加。進(jìn)一步地，根據(jù)方案e用AIM處理時(shí)，觀察到用AIM處理后，培養(yǎng)液的粘度急劇增力口。該觀察結(jié)果支持培養(yǎng)液中的甘油以及游離脂肪酸的量顯著增加的事實(shí)。如此，確認(rèn)出AIM誘導(dǎo)成熟脂肪細(xì)胞的脂解(lipolysis)。從以上結(jié)果可以確認(rèn)，AIM不僅抑制前脂肪細(xì)胞的分化以及成熟，而且還作用于成熟的脂肪細(xì)胞而誘導(dǎo)脂解 (lipolysis)，發(fā)揮使成熟脂肪細(xì)胞“變瘦的功能”。實(shí)施例4[AIM的對(duì)伴隨脂肪細(xì)胞分化的基因群的表達(dá)的抑制]對(duì)于在上述的實(shí)施例2以及實(shí)施例3中通過(guò)上述的五種方案a e培養(yǎng)的細(xì)胞， 在從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始起的第十天(dayU)時(shí)，進(jìn)行回收，通過(guò)定量RT-PCR(QPCR)分析伴隨脂肪化而表達(dá)的基因的表達(dá)量。在此，圖9中以模式化示出伴隨脂肪細(xì)胞分化的主要的基因的表達(dá)模式。如圖9的左側(cè)的虛線方框內(nèi)示出的那樣，在分化誘導(dǎo)期，基于分化誘導(dǎo)刺激，暫時(shí)誘導(dǎo)C/ΕΒΡβ，據(jù)此
的表達(dá)被上調(diào)。進(jìn)一步地，因PPAR γ而誘導(dǎo)諸如脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase，F(xiàn)AS)、CD36、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 4 (Glucose transporter 4，Glut4)等對(duì)于分化的脂肪細(xì)胞必須的功能性基因的表達(dá)。
此后，如果C/EBP α以下的基因表達(dá)一定程度被上調(diào)，則如圖9的右側(cè)的虛線方框內(nèi)示出的那樣，根據(jù)FAS而產(chǎn)生的脂肪酸(fatty acids,FAs)活化PPAR γ蛋白質(zhì)，其使C/ EBPa基因的表達(dá)維持在一定水平。C/EBPa進(jìn)一步誘導(dǎo)PPAR γ基因的表達(dá)。根據(jù)這種交互刺激，即使C/ΕΒΡβ的表達(dá)水平已下調(diào)，也形成維持PPARy以及C/EBP α的表達(dá)的機(jī)制 (參照?qǐng)D9的右側(cè)的虛線方框)。圖10中示出通過(guò)五種方案a e培養(yǎng)的細(xì)胞中的基因表達(dá)的分析結(jié)果。如圖10 所示，根據(jù)方案d僅在分化誘導(dǎo)刺激的初期(day2-day4)用AIM(小鼠AIM，本實(shí)施例4中以下相同)處理時(shí)以及根據(jù)方案b從分化誘導(dǎo)刺激開(kāi)始用AIM處理10天(day2-dayU)時(shí)， C/ΕΒΡα、PPARy、⑶36、Glut4各基因的表達(dá)幾乎完全被抑制。其中，非常有趣的是，在這些情況下，只有FAS基因表達(dá)反而稍微上調(diào)。另一方面，根據(jù)方案c僅在分化誘導(dǎo)前(day (D-daO用AIM處理時(shí)以及根據(jù)方案e僅在細(xì)胞分化誘導(dǎo)后(day6-dayl2)用AIM處理時(shí)，與根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM處理時(shí)比較，基因表達(dá)模式?jīng)]有出現(xiàn)變化。如此，對(duì)于FAS基因表達(dá)以外的基因，基于AIM處理的表達(dá)調(diào)控的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述實(shí)施例2中的細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的變化結(jié)果相匹配。實(shí)施例5 [AIM的對(duì)FAS酶活性的抑制]研究AIM是否對(duì)FAS的酶活性產(chǎn)生影響。S卩，如圖IlA所示，根據(jù)上述的方案d僅在3T3L1細(xì)胞的分化誘導(dǎo)初期(day2-day4)用AIM(小鼠AIM，本實(shí)施例5中以下相同)處理，然后從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)2天后(day4)，回收細(xì)胞，配制細(xì)胞裂解液(cell lysate)，測(cè)定FAS的酶活性。并且，作為與上述的方案e相似的方案f，在3T3L1細(xì)胞分化之后用AIM處理4天 (day8-dayl2)，然后從分化誘導(dǎo)開(kāi)始起十天后(dayl2)，回收細(xì)胞，配制細(xì)胞裂解液(cell lysate) JIUSFAS的酶活性。其中，F(xiàn)AS的酶活性基于丙二酸單酰輔酶AOiialonyl-CoA)消耗量進(jìn)行測(cè)定。并且，代替AIM而使用FAS抑制劑(C75)，根據(jù)方案d以及f用25 μ M濃度的該FAS 抑制劑處理，與上述AIM的情形同樣地，從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)2天后(day4，方案d)以及10 天后(dayl2，方案f)，回收細(xì)胞，測(cè)定FAS的酶活性。進(jìn)一步地，為了進(jìn)行比較，對(duì)于根據(jù)上述方案a沒(méi)有用AIM處理而培養(yǎng)的細(xì)胞，也分別在分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)2天后(day4)以及10天后(dayl2)的時(shí)間，同樣測(cè)定FAS的酶活性。圖IlB以及圖IlC中示出FAS的酶活性(Fatty acid synthase activity，脂肪酸合成酶活性)(nmol NADPH/min/mg蛋白質(zhì))的測(cè)定結(jié)果。圖IlB中分別示出對(duì)于根據(jù)方案 a沒(méi)有用AIM處理時(shí)(None)、根據(jù)方案d用AIM處理時(shí)(ΑΙΜ(5 μ g/ml))、根據(jù)方案d用FAS 抑制劑處理時(shí)(C75 (25 μ M))，從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)2天后(day4)得到的結(jié)果。圖IlC中分別示出對(duì)于根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM處理時(shí)(None)、根據(jù)方案f用AIM處理時(shí)(AIM(5 μ g/ ml))、根據(jù)方案f用FAS抑制劑處理時(shí)(C75 (25 μ M))，從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)10天后(dayl2) 得到的結(jié)果。如圖IlB以及圖IlC所示，任意一種方案中，用AIM處理時(shí)與沒(méi)有用AIM處理時(shí)相比，F(xiàn)AS的酶活性均顯著下降。該AIM降低FAS的酶活性的程度與用作為FAS抑制劑的C75的有效濃度(25 μ M)處理時(shí)相同。并且，圖12Α以及圖12Β中分別示出對(duì)于根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM處理時(shí)(None)Jg 據(jù)方案d用AIM處理時(shí)(AIM (5 μ g/ml))、根據(jù)方案d用FAS抑制劑處理時(shí)(C75(25yM)), 分別從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)2天后(day4)，進(jìn)行細(xì)胞的油紅0染色以及基因表達(dá)的RT-PCR分析的結(jié)果。并且，圖13A以及圖13B中分別示出對(duì)于根據(jù)方案a沒(méi)有用AIM處理時(shí)(None)、 根據(jù)方案f用AIM處理時(shí)(AIM)、根據(jù)方案f用FAS抑制劑處理時(shí)(C75)，從分化誘導(dǎo)開(kāi)始經(jīng)過(guò)10天后(day 12)，測(cè)定培養(yǎng)液中的甘油濃度(甘油釋放量)(mM)以及游離脂肪酸濃度 (FFA釋放量)(XlOmM)的結(jié)果。如這些圖12A、圖12B、圖13A以及圖1 所示，用AIM處理時(shí)和用FAS抑制劑(C75) 處理時(shí)，發(fā)現(xiàn)對(duì)于細(xì)胞的形態(tài)、基因表達(dá)、甘油以及游離脂肪酸的細(xì)胞外釋放，具有相同的效果。即，在前脂肪細(xì)胞的分化以及成熟脂肪細(xì)胞中的脂解作用(lipolysis)這兩個(gè)方面， AIM表現(xiàn)出與C75相同的效果。在上述的實(shí)施例4中只有FAS基因的表達(dá)沒(méi)有被AIM抑制的原因，認(rèn)為是根據(jù)AIM 的FAS功能抑制，可能出現(xiàn)了負(fù)反饋(negative feedback)，根據(jù)PPAR γ以外的表達(dá)調(diào)控系統(tǒng)(例如，基于LXR-SREBP1系統(tǒng)的調(diào)控等)，F(xiàn)AS基因的表達(dá)被上調(diào)。并且，認(rèn)為如果對(duì)成熟脂肪細(xì)胞用AIM處理，以抑制FAS功能，則由于內(nèi)源性的游離脂肪酸(FFAs)的量會(huì)下降，因此作為對(duì)游離脂肪酸(FFAs)的量下降的反饋，誘導(dǎo)脂解作用(lipolysis)，從而調(diào)節(jié)FFAs的量。實(shí)施例6[脂肪細(xì)胞內(nèi)的AIM和FAS的結(jié)合]細(xì)胞中的FAS活性調(diào)節(jié)，并不是根據(jù)磷酸化等蛋白修飾而進(jìn)行的，而主要是根據(jù)表達(dá)調(diào)控和分子結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)而進(jìn)行的。通過(guò)AIM處理，即使FAS的活性降低，在FAS的表達(dá)上， 如上所述，并沒(méi)有確認(rèn)出在mRNA水平、蛋白質(zhì)的量中的任意一方面的下調(diào)。因此，作為一種可能性，認(rèn)為AIM與FAS結(jié)合，在結(jié)構(gòu)上抑制其活性。為此，為了證實(shí)上述的假設(shè)，首先，構(gòu)建均表達(dá)添加有HA標(biāo)簽的AIM(小鼠AIM)和添加有FLAG標(biāo)簽的FAS的HEK293T細(xì)胞。并且，將該HEK293T細(xì)胞培養(yǎng)預(yù)定時(shí)間之后，回收，配制細(xì)胞裂解液(cell lysate)，采用抗FLAG抗體進(jìn)行免疫沉淀。其結(jié)果，如圖14所示，確認(rèn)出添加有HA標(biāo)簽的AIM(HA-AIM)和添加有FLAG標(biāo)簽的FAS(FL-FAS)的共沉淀。即，可以確認(rèn)存在AIM與FAS結(jié)合的可能性。該結(jié)果支持上述的假設(shè)。實(shí)施例7[AIM的向脂肪細(xì)胞的內(nèi)吞]AIM是由巨噬細(xì)胞分泌的可溶性蛋白。通常，分泌蛋白分子與存在于靶細(xì)胞的膜表面的受體結(jié)合，引起信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，由此功能性地作用于靶細(xì)胞。然而，如上所述，要想使AIM與 FAS結(jié)合而抑制其活性，AIM作為分子需要內(nèi)吞進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。為了證明上述觀點(diǎn)，與上述的其他實(shí)施例同樣地，分化誘導(dǎo)3T3L1細(xì)胞，從分化誘導(dǎo)后的培養(yǎng)第四天(day4)起用AIM(小鼠AIM) (5 μ g/ml)處理3小時(shí)。然后，回收細(xì)胞，用抗AIM抗體對(duì)細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行染色。在此，進(jìn)一步地對(duì)細(xì)胞核采用DAPI進(jìn)行染色。
圖15A以及圖15B示出用AIM處理培養(yǎng)3小時(shí)后染色的細(xì)胞在共焦顯微鏡下觀察的結(jié)果的一種示例。圖15A示出用200倍的倍數(shù)，圖15B示出用400倍的倍數(shù)拍攝的結(jié)果。 如圖15A以及圖15B所示，確認(rèn)出AIM以圓點(diǎn)(dot)狀(在原圖中呈紅色)內(nèi)吞到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。進(jìn)一步地，通過(guò)采用膠體金標(biāo)記的抗AIM抗體的免疫電子顯微鏡法，確認(rèn)AIM內(nèi)吞到脂肪細(xì)胞的現(xiàn)象。圖16A以及圖16B中分別示出用AIM處理后培養(yǎng)3小時(shí)(3hr)以及12 小時(shí)(overnight，過(guò)夜)的細(xì)胞的免疫電子顯微鏡照。圖16A示出從用AIM處理經(jīng)過(guò)3小時(shí)CBhr)后回收的細(xì)胞，圖16B示出從用AIM處理經(jīng)過(guò)12小時(shí)后回收的細(xì)胞的結(jié)果。如圖16A所示，在AIM的存在下培養(yǎng)3小時(shí)的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，AIM以圓點(diǎn)狀聚集在被認(rèn)為是內(nèi)涵體(endosome)的粒子(particle)的膜上。這認(rèn)為是AIM與脂肪細(xì)胞表面的某種分子結(jié)合，并以結(jié)合的狀態(tài)與該表面分子一同內(nèi)吞(Endocytosis)到細(xì)胞內(nèi)而出現(xiàn)的現(xiàn)象。并且，如圖16B所示，在AIM的存在下培養(yǎng)12小時(shí)的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，內(nèi)涵體 (endosome)變性，從此處還可以觀察到AIM進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)中。其中，AIM沒(méi)有聚集在吞噬體 (Phagosome)、吞噬溶酶體(Phagolysosome)或者線粒體(mitochondria)上。圖17以模式化示出基于這些觀點(diǎn)推測(cè)的AIM內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的機(jī)制。實(shí)施例8[細(xì)胞表面的CD36分子介導(dǎo)下的AIM內(nèi)吞(internalization)]如上所述，認(rèn)為AIM在細(xì)胞表面分子的介導(dǎo)下內(nèi)吞到細(xì)胞內(nèi)。因此，認(rèn)定了該細(xì)胞表面分子。⑶36是二次跨膜分子，在脂肪細(xì)胞或巨噬細(xì)胞中表達(dá)，參與包括脂肪酸、LDL等的多種分子的細(xì)胞內(nèi)內(nèi)吞。因此，構(gòu)建超表達(dá)C端上添加有FLAG標(biāo)簽的小鼠⑶36的HEK293 細(xì)胞，將該細(xì)胞與小鼠AIM —同培養(yǎng)3小時(shí)。然后，回收細(xì)胞，采用抗AIM抗體以及抗CD36 抗體染色，通過(guò)共焦顯微鏡觀察。圖18A至圖18D中示出得到的共焦顯微鏡照。圖18示出以二維方式分析的結(jié)果 (2-dimensional analysis，二維分析)，圖18B至圖18D分別示出以三位方式分析的結(jié)果 (3-dimensional analysis，三位分析)。如圖18A至圖18D所示，如果以二維以及三位方式進(jìn)行分析，則觀察到，在細(xì)胞的表達(dá)有CD36的部位(原圖中FLAG以紅色表示)上結(jié)合有 AIM圓點(diǎn)(dot)(原圖中以綠色表示)的形態(tài)。并且，在部分細(xì)胞上，還觀察到AIM內(nèi)吞到細(xì)胞內(nèi)的形態(tài)。從這些結(jié)果認(rèn)為，AIM與⑶36結(jié)合，內(nèi)吞(internalize)到細(xì)胞內(nèi)。但是，本次使用的HEK293T細(xì)胞中，主要觀察到的是AIM存在于細(xì)胞表面的形態(tài)， 與上述的實(shí)施例7的脂肪細(xì)胞(分化的3T3-L1細(xì)胞)相比，幾乎沒(méi)有觀察到AIM進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)的形態(tài)。其原因認(rèn)為是，HEK293T細(xì)胞與脂肪細(xì)胞相比，內(nèi)吞(endocytosis)能力較弱， 因此與CD36結(jié)合的AIM容易以結(jié)合的狀態(tài)停留在細(xì)胞表面上。并且，進(jìn)一步地，為了確認(rèn)AIM在⑶36介導(dǎo)下內(nèi)吞的事實(shí)，用AIM處理通過(guò)上述的分化誘導(dǎo)而分化的3T3L1脂肪細(xì)胞時(shí)，同時(shí)用抑制與CD36的配體(Iigand)結(jié)合的中和抗體處理。然后，回收培養(yǎng)的3T3L1脂肪細(xì)胞，用抗AIM抗體染色。并且，對(duì)沒(méi)有用CD36中和抗體處理而僅用AIM進(jìn)行同樣的處理而培養(yǎng)的3T3L 1脂肪細(xì)胞，也進(jìn)行同樣的染色。圖19A以及圖19B分別示出沒(méi)有用CD36中和抗體處理時(shí)(no CD36 antibody，無(wú)CD36 抗體)以及用 CD36 中和抗體處理時(shí)(with CD36 neutralizing antibody，使用 CD36 中和抗體)的染色結(jié)果。如圖19A所示，沒(méi)有用CD36中和抗體處理時(shí)，可以觀察到AIM內(nèi)吞到細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象(原圖中AIM在細(xì)胞內(nèi)以紅色的圓點(diǎn)狀被檢測(cè)出)。另一方面，如圖19B 所示，當(dāng)用CD36中和抗體處理時(shí)，細(xì)胞內(nèi)完全沒(méi)有被抗AIM抗體染色，沒(méi)有觀察到AIM的內(nèi)吞。S卩，由于用⑶36中和抗體進(jìn)行處理，因此向細(xì)胞內(nèi)的AIM的內(nèi)吞被顯著地抑制住。 從以上結(jié)果可以明確，負(fù)責(zé)向脂肪細(xì)胞的AIM的內(nèi)吞作用的至少一種分子是CD36。實(shí)施例9[AIM缺失小鼠的體重以及脂肪量的增加]從上述的實(shí)施例中得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以明確，AIM抑制前脂肪細(xì)胞的成熟以及分化，并且誘導(dǎo)成熟的脂肪細(xì)胞中發(fā)生脂解作用(lipolysis)。因此，為了研究該作用在生物機(jī)體內(nèi)的效果，對(duì)AIM被敲除的AIM缺失小鼠(AIM+小鼠)以及AIM沒(méi)有被敲除的正常的小鼠(AIMv+小鼠)，采用高脂飲食(HFD)喂養(yǎng)20周以上，測(cè)定體重和內(nèi)臟白色脂肪的重量。 其結(jié)果，AIM缺失的AIM+小鼠與AIMv+小鼠相比，體重以及內(nèi)臟白色脂肪的重量的增加有意義地被加劇(沒(méi)有示出數(shù)據(jù))。進(jìn)一步地，為了增強(qiáng)肥胖的發(fā)展效果，將上述的兩種小鼠分別與脂聯(lián)素 (adiponectin)基因敲除小鼠(Adipo+小鼠)交配，構(gòu)建AIM+ Adipo+小鼠和AIM"+ Adipo+小鼠。并且，對(duì)這些小鼠同樣采用HFD處理20周以上，進(jìn)行分析。圖20A以及圖20B分別示出拍攝AIM+ Adipo+小鼠(AIM+)以及AIM+" Adipo+小鼠(AIMv+)的腹腔內(nèi)的照片。在圖20A中，上側(cè)的箭頭表示腸粘膜脂肪組織，下側(cè)的箭頭表示附睪脂肪組織。圖21A以及圖21B分別示出AIM"+ Adipo+小鼠(WT)以及 AIM+ Adipo+小鼠(KO)的體重(Body weight (g))以及內(nèi)臟白色脂肪組織的重量(Total fat tissue (g)，總脂肪組織(g))的測(cè)定結(jié)果。如圖21A以及圖21B所示，與上述的沒(méi)有被敲除脂聯(lián)素基因的小鼠同樣地，AIM缺失的AIM+ Adipo+小鼠與AIMv+ Adipo+小鼠相比，體重以及內(nèi)臟白色脂肪重量的增加被加劇。這種體重增加的加劇，主要是由于脂肪組織重量增加的加劇而引起的。這些結(jié)果支持以下結(jié)論。S卩，由浸潤(rùn)到脂肪組織的巨噬細(xì)胞分泌的AIM在周圍的脂肪細(xì)胞中，通過(guò)降低FAS活性，誘導(dǎo)脂解作用(lipolysis)，同時(shí)抑制新的成熟脂肪細(xì)胞的分化，由此抑制性地調(diào)節(jié)脂肪組織的量(mass)。并且，有報(bào)道指出，對(duì)于小鼠給予FAS抑制劑(C75)，會(huì)降低下丘腦的神經(jīng)肽 Y(NPY)的產(chǎn)生量，引起顯著的食欲減退以及體重減少。與此相比，AIM+小鼠和AIMv+小鼠之間在攝入量(Food intake)上沒(méi)有出現(xiàn)差異。因此，本次的AIM給予實(shí)驗(yàn)中，不存在如同全身給予上述的FAS抑制劑(C75)時(shí)出現(xiàn)的對(duì)于腦神經(jīng)系統(tǒng)的作用，在AIM+小鼠中出現(xiàn)的脂肪量的增加，認(rèn)為是AIM的缺失直接對(duì)脂肪細(xì)胞引起影響的結(jié)果。這認(rèn)為是，由于AIM需要在不包含于下丘腦的細(xì)胞中，而包含于脂肪細(xì)胞中的作為特異性的內(nèi)吞中介物(endocytosis mediator)的CD36的存在下，發(fā)揮作用的結(jié)果。實(shí)施例10[向肥胖小鼠給予AIM而引起的脂解(Lipolysis)的誘導(dǎo)]
構(gòu)建采用HFD處理20周以上的肥胖的AIM+小鼠。另一方面，準(zhǔn)備純化的小鼠重組AIM蛋白，將該AIM以0. 2mg/m濃度溶解于PBS (磷酸緩沖液，pH7. 4)的AIM溶液配置成注射劑。并且，將該AIM注射劑通過(guò)小鼠的尾靜脈，一周兩次，四周給藥。對(duì)于劑量來(lái)說(shuō)，每Ig小鼠體重給予1 μ g。其中，決定該劑量時(shí)，基于上述的體外 (in vitro)實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)液中的AIM濃度，考慮使小鼠血液中的AIM濃度達(dá)到與該培養(yǎng)液中的AIM濃度相同的程度而決定。并且，作為對(duì)照，同樣地對(duì)于用HFD處理20周以上的肥胖的AIM+小鼠，根據(jù)同樣的方案，從尾靜脈注射相同量的牛血清白蛋白(BSA)。并且，對(duì)于給藥后的小鼠，測(cè)定體重， 同時(shí)采集內(nèi)臟白色脂肪組織而測(cè)定重量。其結(jié)果，在體重以及脂肪組織的總重量上，根據(jù)AIM給予與否而沒(méi)有確認(rèn)出有意義的差異，但是在采集的脂肪組織中，在局部(點(diǎn)狀)觀察到脂肪細(xì)胞的縮小以及分解，為了處理這個(gè)而聚集的巨噬細(xì)胞，而且好像是大致釋放出(分解)了脂滴的脂肪細(xì)胞的、脂肪細(xì)胞的前細(xì)胞(分化誘導(dǎo)前的3T3L1那樣的細(xì)胞)。圖22A以及圖22B中示出用顯微鏡觀察被蘇木精-伊紅(Hematoxylin-Eosin， HE)染色的脂肪組織切片的結(jié)果。圖22A示出關(guān)于給予白蛋白的小鼠(BSA injected (control), BSA注射(對(duì)照))的結(jié)果，圖22B示出關(guān)于給予AIM的小鼠(rAIM injected，rAIM注射)的結(jié)果。如圖22A以及圖22B所示，可以確認(rèn)出當(dāng)給予AIM時(shí)與給予白蛋白時(shí)相比，脂肪組織的脂肪細(xì)胞的大小顯著減小的同時(shí)，巨噬細(xì)胞顯著聚集。即，向肥胖小鼠全身(systemic) 靜脈注射純化AIM蛋白時(shí)，在該肥胖小鼠的脂肪組織中誘導(dǎo)脂肪分解(Lipolysis)。本次實(shí)驗(yàn)中，在部分脂肪組織中局部觀察到脂解(Lipolysis)的原因認(rèn)為可能是，通過(guò)靜脈注射全身給藥時(shí)，脂肪組織中的局部濃度只在局部充分上升(認(rèn)為局部濃度根據(jù)毛細(xì)血管的走行等而被決定)，而不能達(dá)到在整個(gè)脂肪組織中誘導(dǎo)脂解(lipolysis) 且減少脂肪組織的總重量以及體重的程度的可能性較高。但是，如上所述，可以明確地確認(rèn) AIM在生物機(jī)體中也表現(xiàn)出誘導(dǎo)脂解(lipolysis)的作用。在此，沒(méi)有確認(rèn)出根據(jù)AIM的給予而導(dǎo)致小鼠的攝入量發(fā)生變化。如上所述，為了根據(jù)AIM而誘導(dǎo)脂解(lipolysis)，認(rèn)為有效的是提高生物機(jī)體內(nèi)的局部濃度。因此，認(rèn)為例如通過(guò)局部注射，將AIM局部注射到脂肪組織內(nèi)，由此可以更有效地誘導(dǎo)脂解(lipolysis)，并有效地減少脂肪組織的重量以及體重。并且，認(rèn)為通過(guò)將 AIM全身給藥以及局部給藥，還可以得到抑制生物機(jī)體內(nèi)的前脂肪細(xì)胞的分化的效果。在此，說(shuō)明通過(guò)上述的實(shí)施例1至10得到的部分見(jiàn)解。在實(shí)施例1中，確認(rèn)出浸潤(rùn)到肥胖的小鼠脂肪組織中的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生AIM。了解到巨噬細(xì)胞也同樣地浸潤(rùn)到肥胖的人類脂肪組織中。因此，認(rèn)為浸潤(rùn)到人的脂肪組織中的巨噬細(xì)胞也產(chǎn)生AIM。在實(shí)施例2中，確認(rèn)出AIM抑制前脂肪細(xì)胞的成熟分化。并且，在小鼠AIM以及人類AIM中的任意一個(gè)均表現(xiàn)出同樣的分化抑制功能。這種小鼠和人之間的分化抑制功能的互換性，認(rèn)為是由于AIM氨基酸序列具有高的同源性，而且參與前脂肪細(xì)胞的分化以及AIM 的功能表達(dá)的分子之間也具有高的同源性而導(dǎo)致的。在實(shí)施例3中，確認(rèn)出AIM作用于成熟的脂肪細(xì)胞而誘導(dǎo)脂滴分解(Lipolysis)。 在實(shí)施例7以及實(shí)施例8中，確認(rèn)出AIM與脂肪細(xì)胞的細(xì)胞膜表面上的CD36分子結(jié)合，通過(guò)內(nèi)吞作用(endocytosis)而進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。在實(shí)施例5以及實(shí)施例6中，確認(rèn)出內(nèi)吞到細(xì)胞內(nèi)的AIM進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，與脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase ；FAS)結(jié)合而抑制其酶活性。因此，基于AIM的前脂肪細(xì)胞的分化抑制以及成熟脂肪細(xì)胞中的脂肪分解誘導(dǎo)，認(rèn)為是該AIM抑制FAS而產(chǎn)生的結(jié)果。在實(shí)施例9中，確認(rèn)出如果采用高脂飲食(High Fat Diet, HFD)處理，則AIM缺失 (AIM+)小鼠與正常(AIMv+)小鼠相比，體重以及脂肪組織的重量增加得更快。但是，沒(méi)有確認(rèn)出AIM缺失(AIM+)小鼠和正常(AIMv+)小鼠之間的在攝入量上的差異。即，認(rèn)為AIM并不像現(xiàn)有的抗肥胖藥物那樣誘導(dǎo)食欲減退，而根據(jù)完全不同的機(jī)制 (AIM直接特異性地作用于脂肪細(xì)胞或脂肪組織的機(jī)制)抑制體重以及脂肪組織重量的增加。進(jìn)一步地，在實(shí)施例10中，確認(rèn)出如果向肥胖的AIM+小鼠從尾靜脈全身注射純化重組AIM蛋白0周)，則在脂肪組織中局部發(fā)生脂解(lipolysis)。即，實(shí)際在生物機(jī)體也確認(rèn)出與在體外(in vitro)實(shí)驗(yàn)中確認(rèn)出的對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的效果相同的效果。如上所述，人類AIM以及小鼠AIM中含有保守的三個(gè)特征性的結(jié)構(gòu)域(SRCR1 3)，氨基酸序列的同源性高達(dá)68%。而且，參與AIM向脂肪細(xì)胞的內(nèi)吞的⑶36以及作為AIM 的一種靶分子的FAS也在人與小鼠之間具有較高的同源性。即，負(fù)責(zé)基于AIM的前脂肪細(xì)胞的分化以及成熟脂肪細(xì)胞中的脂解(lipolysis)的分子的任意一個(gè)，均在人與小鼠之間具有較高的同源性。在此，對(duì)于現(xiàn)有的其他藥物而言，存在雖然在利用小鼠的實(shí)驗(yàn)中有效果， 但在人體上沒(méi)有得到效果的例子，這主要是因?yàn)閰⑴c該效果的分子在小鼠和人之間同源性較低而引起的。并且，在體外(in vitro)實(shí)驗(yàn)中，人類AIM以及小鼠AIM中的任意一個(gè)在相同的濃度范圍下均對(duì)于來(lái)源于小鼠的脂肪細(xì)胞發(fā)揮同樣的分化抑制功能以及脂肪分解誘導(dǎo)功能。并且，采用與在體外(in vitro)實(shí)驗(yàn)中獲得效果的濃度對(duì)應(yīng)的劑量，向小鼠機(jī)體內(nèi)給予AIM時(shí)，實(shí)際確認(rèn)出在脂肪組織中發(fā)生脂解(lipolysis)。因此，認(rèn)為AIM在人的機(jī)體內(nèi)也同樣作用于脂肪細(xì)胞，獲得同樣的效果的可能性非常之高。并且，AIM為了發(fā)揮如上所述的功能，需要在⑶36的介導(dǎo)下內(nèi)吞進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。根據(jù)該作用機(jī)制，向生物機(jī)體內(nèi)給予AIM時(shí)，不需要考慮如同現(xiàn)有的FAS抑制劑中出現(xiàn)的那種對(duì)腦神經(jīng)系統(tǒng)引起的副作用。實(shí)際上，AIM缺失小鼠的攝入量與正常的小鼠相比，沒(méi)有出現(xiàn)差異。因此，認(rèn)為向人機(jī)體給予AIM時(shí)，至少不會(huì)出現(xiàn)如同現(xiàn)有的FAS抑制劑中出現(xiàn)的那種對(duì)腦神經(jīng)系統(tǒng)引起的副作用。實(shí)施例11[給予肥胖小鼠的AIM的向脂肪細(xì)胞的內(nèi)吞以及與FAS的結(jié)合]對(duì)于從肥胖小鼠采集的脂肪組織樣品，采用抗巨噬細(xì)胞F4/80抗體(紅色)以及抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)(綠色)進(jìn)行共染色，在熒光顯微鏡下觀察。其結(jié)果，包圍巨噬細(xì)胞的若干個(gè)脂肪細(xì)胞被抗AIM抗體染色。另一方面，與巨噬細(xì)胞分開(kāi)的脂肪細(xì)胞沒(méi)有被抗AIM抗體染色。發(fā)明人認(rèn)為，這些結(jié)果說(shuō)明來(lái)源于巨噬細(xì)胞的AIM被組織內(nèi)的脂肪細(xì)胞內(nèi)吞。進(jìn)一步地，向肥胖AIM+小鼠的附睪脂肪組織直接注射小鼠rAIM，然后在組織學(xué)上分析該脂肪組織。即，向附睪脂肪組織的若干處直接注射共100 μ g的rAIM。從注射經(jīng)過(guò) 3小時(shí)后，從附睪脂肪組織制作組織切片，將該組織切片用抗AIM抗體以及抗巨噬細(xì)胞抗體染色。其結(jié)果，在注射了 rAIM的脂肪組織內(nèi)，AIM+脂肪細(xì)胞被染色成AIM陽(yáng)性。艮口， 確認(rèn)出脂肪組織中的外源性的rAIM內(nèi)吞進(jìn)入脂肪細(xì)胞。在更高倍數(shù)的熒光顯微鏡下觀察時(shí)，觀察到在脂肪細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，內(nèi)吞(endocytosed)的rAIM以點(diǎn)狀聚集(dot-forming accumulation)。并且，將rAIM通過(guò)靜脈注射而向AIM+小鼠全身給藥，然后在組織學(xué)上分析脂肪組織。即，向AIM+小鼠通過(guò)靜脈內(nèi)注射全身給予200yg的rAIM。從注射經(jīng)過(guò)3小時(shí)后， 從附睪脂肪組織制作組織切片，將該組織切片用抗AIM抗體以及抗巨噬細(xì)胞抗體染色。其結(jié)果，在脂肪組織的脂肪細(xì)胞內(nèi)，雖然與上述的向組織內(nèi)直接注射時(shí)相比程度較低，但是檢測(cè)出內(nèi)吞的rAIM信號(hào)。非常有趣的是，脂肪組織的巨噬細(xì)胞也被抗AIM抗體染色。該結(jié)果給出以下啟示，即外源性rAIM同樣內(nèi)吞到巨噬細(xì)胞內(nèi)。進(jìn)一步地，使用來(lái)源于這些脂肪組織的裂解物(Iysate)，使內(nèi)吞的rAIM沉淀， 研究?jī)?nèi)源性FAS是否發(fā)生共沉淀。S卩，使用HA-tagged rAIM和抗HA抗體，通過(guò)免疫印跡 (Western blotting)分析在沉淀物中是否包含F(xiàn)AS。其結(jié)果，rAIM以及FAS兩種蛋白發(fā)生共沉淀。從該結(jié)果確認(rèn)出，內(nèi)吞的rAIM和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的FAS結(jié)合。從這些所有的結(jié)果證實(shí)，在體內(nèi)(in vivo)在生理學(xué)上實(shí)現(xiàn)了通過(guò)脂肪細(xì)胞的 AIM的內(nèi)吞以及隨之發(fā)生的該AIM與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的FAS的結(jié)合。實(shí)施例12[AIM缺失導(dǎo)致的肥胖的促進(jìn)]為了試驗(yàn)在體內(nèi)(in vivo)中AIM對(duì)脂肪細(xì)胞的效果，分析了采用HFD喂食40周以上的AIM+ Adipo+小鼠以及AIMv+ Adipo+小鼠的肥胖狀態(tài)。在此，采用Adipo+背景的小鼠是有用的，因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)AIM缺失對(duì)于脂肪組織量的影響時(shí)，可以排除脂聯(lián)素 (Adiponectin)白勺#=%。分析結(jié)果示出在圖23A至圖23E。圖23A示出用HFD喂食之前的體重(BW(pre)) (g)，圖2 示出用HFD喂食之后的體重(BW(HFD)) (g)。圖23C、圖23D以及圖23E分別示出用HFD喂食之后的內(nèi)臟脂肪(Visceral Fat)的重量(g)、皮下脂肪(Subcutaneous Fat)的重量(g)以及肝臟(Liver)的重量(g)。在圖23A至圖23E中，“v+”表示AIMv+ Adipo+小鼠的結(jié)果，“ + ”表示AIM+ Adipo+小鼠的結(jié)果。如圖23A以及圖2 所示，在體重增加方面，與AIMv+ Adipo+小鼠相比，在AIM+ Adipo+小鼠中被加快。如圖23C以及圖23D所示，這種體重的差異主要是因脂肪組織的重量增加而導(dǎo)致的。并且，如圖23E所示，肝臟組織的重量也同樣地與AIMv+ Adipo+小鼠相比，在 AIM+ Adipo+小鼠中得到顯著地增加。該結(jié)果揭示AIM還作用于肝細(xì)胞(h印atocyte)，并控制該細(xì)胞內(nèi)的甘油儲(chǔ)藏的可能性。其中，心臟或腎臟等其他臟器的重量在兩種小鼠之間大致相同。在用HFD喂食40周以上的沒(méi)有敲除脂聯(lián)素(Adiponectin)基因的AIM+小鼠以及AIMv+小鼠分析中，也觀察到同樣的結(jié)果。將分析結(jié)果示出在圖24A至圖ME中。如圖24A 至圖24E所示，與Adipo+背景的小鼠同樣地，與AIM"+小鼠相比，AIM+小鼠的體重、脂肪組織重量以及肝臟重量的增加更顯著。圖25中示出對(duì)于用HFD喂食的AIM+小鼠以及AIM+a小鼠評(píng)價(jià)成為其食欲指標(biāo)的飼料攝入量(Food intake (g/24h))的結(jié)果。在圖25中，“+/+”表示AIMv+小鼠的結(jié)果， 表示AIM+小鼠的結(jié)果。在此，如上述的實(shí)施例9中也記載的那樣，有報(bào)道指出給予FAS抑制劑C75時(shí)， 會(huì)降低小鼠下丘腦的神經(jīng)肽Y(NPY)的產(chǎn)生，其結(jié)果引起顯著的食欲減退，作為整體， 力口速體重的減少(Loftus, Τ. M.等 Reduced food intake and body weight in mice treated with fatty acid synthase inhibitors.Science 288,2379-2381 (2000) ；Kumar, Μ. V. , Shimokawa, Τ. , Nagy, T. R. & Lane, M. D. Differential effects of a centrally acting fatty acid synthase inhibitor in lean and obese mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 99,1921-1925 (2002) ；Shimokawa, T. ， Kumar, Μ. V. & Lane， M. D. Effect of a fatty acid synthase inhibitor on food intake and expression of hypothalamic neuropeptides. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 99,66-71 (2002) ；Chakravarthy, Μ. V.等 Inactivation of hypothalamic FAS protects mice from diet-induced obesity and inflammation. J. Lipid Res.50,630-640(2009)) 與此相比，本發(fā)明所涉及的實(shí)驗(yàn)中，如圖25所示，AIM+小鼠和AIMv+小鼠之間在 M小時(shí)的飼料攝入量(g/Mh)上大致相同。即，說(shuō)明AIM不具有神經(jīng)學(xué)上的效果。發(fā)明人認(rèn)為，其原因在于，AIM的作用需要由沒(méi)有報(bào)道出在下丘腦的細(xì)胞中表達(dá)的CD36介導(dǎo)的、特異性內(nèi)吞過(guò)禾呈(endocytotic process)。在此，用HFD喂食的AIM+小鼠以及AIMv+小鼠(無(wú)論Adipo+背景還是Adipo"+ 背景)中，血清中的TNFa以及IL-6的水平?jīng)]有顯著的差異，且血液中的葡萄糖水平也大致相同。實(shí)施例13[AIM缺失小鼠的脂肪細(xì)胞大小、脂肪組織量以及體重的增加]給AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠用HFD喂食20周。并且，從各小鼠采集的附睪脂肪組織切片用HE染色，在顯微鏡下觀察。并且，利用安裝有圖像分析軟件的計(jì)算機(jī)，評(píng)價(jià)各組織切片的顯微鏡照內(nèi)的不同區(qū)域中的50個(gè)獨(dú)立的脂肪細(xì)胞的大小。脂肪細(xì)胞的大小以平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差(SEM) (in pixels)來(lái)表示。圖沈中示出分別對(duì)于AIM"+小鼠(“+A”)以及AIM+小鼠(“ + ”)測(cè)定脂肪細(xì)胞的大小(pixel/cell)的結(jié)果。圖27A以及圖27B中示出從AIM"+小鼠(“+/+”)以及 AIM+小鼠(“+”)采集的內(nèi)臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結(jié)果。其中，在圖27A以及圖27B中示出的比例尺表示100 μ m。如圖沈、圖27A以及圖27B所示，與上述的體外(in vitro)實(shí)驗(yàn)中的3T3-L1細(xì)胞的觀察結(jié)果相同，肥胖AIM+小鼠的內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的大小與肥胖AIM"+小鼠相比，更大。并且，給AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠采用HFD喂食12周，測(cè)定體重以及脂肪組織的重量。圖28A、圖28B以及圖28C中分別示出對(duì)于AIM+"小鼠(“+/+”)以及AIM+小鼠 (“+”)分別測(cè)定體重(Body) (g)、內(nèi)臟脂肪組織(Visceral fat)的重量(g)以及皮下脂肪組織(Subcutaneous fat)的重量(g)的結(jié)果。如圖^A至圖28C所示，關(guān)于上述的脂肪細(xì)胞的增大，在用HFD喂食12周后的體重、內(nèi)臟脂肪組織的重量以及皮下脂肪組織的重量的增加方面，與AIMv+小鼠相比，在 AIM+小鼠中增加得更快。在此，需要說(shuō)明的是，用HFD喂食的AIM+/+小鼠和AIM+小鼠中，代謝速度 (metabolic rates)大致相同。圖^A、圖^B、圖^C中分別示出對(duì)于AIMv+小鼠(“"+”)以及AIM+小鼠(“ + ”)，作為反映代謝速度的指標(biāo)分別評(píng)價(jià)體溫(Body temperature) (°C ), 耗氧速率(Oxygen Consumption) (V02/min/kg)以及飼料攝入量(Food Intake) (g/24h)的結(jié)果。其中，在圖29C中表示在用HFD喂食時(shí)(HFD)和用普通飼料喂食時(shí)(normal chow，普通食物)，每M小時(shí)攝食的飼料的量。如圖29A至圖29C所示，在體溫、耗氧速率以及飼料攝入量中的任意一項(xiàng)上，AIM+/+小鼠和AIM+小鼠之間不存在較大的差異。進(jìn)一步地，用HFD喂食的AIM+"小鼠和AIM+小鼠的活動(dòng)性(Locomotor activity) 也大致相同。圖四0中示出對(duì)于AIM"+小鼠(“"+”)以及AIM+小鼠(“+”)，分別評(píng)價(jià)活動(dòng)性(Locomotor activity) (count)的結(jié)果。圖^D中示出黑暗環(huán)境下(Dark) 12小時(shí)以及光照環(huán)境下(light) 12小時(shí)的活動(dòng)性以及共M小時(shí)的綜合活動(dòng)性(Total)。從這些結(jié)果認(rèn)為，AIM通過(guò)特異性地作用于脂肪細(xì)胞，由此對(duì)脂肪組織量產(chǎn)生影響。實(shí)施例14[基于向AIM缺失小鼠給予AIM而引起的對(duì)脂肪組織量以及體重增加的抑制]向AIM+小鼠用HFD喂食15周期間，在最后9周向該AIM+小鼠的腹腔內(nèi)注射小鼠rAIM，研究該rAIM的給予是否抑制脂肪組織量的增加。即，最后的9周，向AIM+小鼠的腹腔內(nèi)每周3次注射rAIM([150 μ g/注射/小鼠]X [3次/周]=[450 μ g/小鼠/周])， 第15周測(cè)定體重、內(nèi)臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量。其中，作為對(duì)照，對(duì)于按照同樣的方案而向腹腔內(nèi)給予BSA (Bovine Serum Albumin，牛血清白蛋白)的AIM+小鼠，也測(cè)定體重、內(nèi)臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量。圖30A、圖30B以及圖30C中示出對(duì)于給予BSA的AIM+小鼠(“BSA”)以及給予 rAIM的AIM+小鼠(“rAIM”)，分別測(cè)定體重(Body) (g)、內(nèi)臟脂肪組織(Visceral fat) 的重量(g)以及皮下脂肪組織(Subcutaneous fat)的重量(g)的結(jié)果(n = 3，即給予BSA 的AIM+小鼠以及給予rAIM的AIM+小鼠分別為3例)。如圖30A至圖30C所示，對(duì)于內(nèi)臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量這兩項(xiàng)指標(biāo)的增加來(lái)說(shuō)，與體重同樣地，相比于作為對(duì)照而注射BSA的小鼠，在注射rAIM的小鼠中顯著減小。進(jìn)一步地，對(duì)于給予BSA的AIM+小鼠以及給予rAIM的AIM+小鼠，分別評(píng)價(jià) FSP27、Perilipin (圍脂滴蛋白)以及Adipophilin (脂肪分化相關(guān)蛋白)的mRNA水平。 mRNA水平使用從附睪脂肪分離的RNA，通過(guò)QPCR測(cè)定。圖31中示出對(duì)于給予BSA的AIM+小鼠(“BSA”)以及給予rAIM的AIM+小鼠 ("rAIM")，分別進(jìn)行評(píng)價(jià)的 FSP27、Perilipin 以及 Adipophilin 的 mRNA 水平(n = 3)。其中，圖31中示出的值表示經(jīng)GAPDH歸一化(normalized to GAPDH)的、相對(duì)于注射BSA的小鼠的結(jié)果的相對(duì)值(Relative Expression)。
如圖31所示，與用rAIM處理上述的3T3-L1脂肪細(xì)胞時(shí)觀察到的結(jié)果同樣地，隨著進(jìn)行脂解(Iipolysis)而減少的FSP27、Perilipin以及Adipophilin的mRNA水平，也相比于作為對(duì)照而注射BSA的小鼠，注射rAIM的小鼠中較低。因此，認(rèn)為根據(jù)AIM的注射，生物機(jī)體內(nèi)進(jìn)行了脂解(lipolysis)。實(shí)施例15[AIM的向FAS的結(jié)合]體內(nèi)(in vivo)以及體外(in vitro)兩種實(shí)驗(yàn)中，均確認(rèn)出AIM與FAS的結(jié)合。 艮口，向肥胖AIM+小鼠的附睪脂肪組織的若干處直接注射共IOOyg的用HA標(biāo)記的小鼠 rAIM。從注射經(jīng)過(guò)3小時(shí)后，采集附睪脂肪組織。接著，使用抗HA抗體，從該脂肪組織的裂解物沉淀分離內(nèi)吞的rAIM。并且，采用免疫印跡(WB)，分析在得到的沉淀物中是否包含 FAS。其結(jié)果，如圖32所示，確認(rèn)出兩種蛋白發(fā)生共沉淀，內(nèi)吞的rAIM和內(nèi)源性的細(xì)胞質(zhì)內(nèi) FAS結(jié)合。進(jìn)一步地，使用表達(dá)用Flag標(biāo)記的FAS和用HA標(biāo)記的小鼠AIM這兩種蛋白的 HEK293T細(xì)胞以及抗Flag抗體或抗HA抗體，進(jìn)行共免疫沉淀試驗(yàn)。其結(jié)果，如圖33A以及圖3 所示，兩種蛋白均發(fā)生共沉淀。因此，認(rèn)為AIM具有與FAS結(jié)合的能力。進(jìn)一步地，試圖繪出FAS中的對(duì)于AIM的結(jié)合區(qū)域。如圖34A所示，F(xiàn)AS由下還的 7個(gè)獨(dú)立的功能結(jié)構(gòu)域構(gòu)成。S卩，酮脂酰合成酶(ketoacyl synthase，KS)、丙二酰轉(zhuǎn)移酶和乙酰轉(zhuǎn)移酶(malonyl/acetyl transferase，MAT)、脫水酶(dehydrase，DH)、烯酰還原酶 (enoylreductase, ER)、酮月旨酉先還原酶(ketoreductase, KR)、酉先基載體蛋白(acyl carrier protein, ACP)以及硫酯酶(thioesterase，TE)。在DH結(jié)構(gòu)域和ER結(jié)構(gòu)域之間包含中央核心區(qū)(central core，CC)。認(rèn)為，該CC不具有已知的酶功能，而起結(jié)構(gòu)上穩(wěn)定二聚體的作用。在此，圖34A中示出頭尾(head-to-tail) 二聚化的FAS以及其各區(qū)域的主要功能。因此，通過(guò)共沉淀試驗(yàn)，研究用Flag標(biāo)記的FAS的各區(qū)域與用HA標(biāo)記的AIM的結(jié)合。即，使N末端中添加有Flag標(biāo)簽的FAS的各結(jié)構(gòu)域，在表達(dá)用HA標(biāo)記的小鼠AIM的 HEK293T細(xì)胞中，穩(wěn)定表達(dá)。并且，使用抗Flag抗體以及抗HA抗體，通過(guò)共免疫沉淀試驗(yàn)，研究各區(qū)域與AIM的結(jié)合。其結(jié)果，如圖34B所示，AIM特異性地結(jié)合于ER、DH、TE以及CC結(jié)構(gòu)域。但是，AIM不結(jié)合于參與初期的酰基鏈集合體(initial asyl chain assembly，初期的?；溠b配)(即，伴隨二氧化碳的釋放的、乙?；约氨；?-ketobutyryl-ACP 的縮合(condensation))的、包含KS以及MAT的N末端區(qū)域(參照?qǐng)D34A)。因此，認(rèn)為AIM 對(duì)于脂肪酸鏈延長(zhǎng)(由ER以及DH參與)以及釋放合成的棕櫚酸酯(palmitate)(依賴于 TE)產(chǎn)生影響。其中，ER或KR的過(guò)度表達(dá)會(huì)帶來(lái)多數(shù)細(xì)胞的死亡。這會(huì)引起使用這些細(xì)胞裂解物的WB中的信號(hào)低下(圖34B的下側(cè)板，通道ER以及KR)。實(shí)施例16[細(xì)胞表面⑶36介導(dǎo)下的AIM的內(nèi)吞]對(duì)于缺失⑶36的⑶36+小鼠以及野生型⑶36v+小鼠，分別從靜脈注射小鼠rAIM， 分析向脂肪組織的rAIM的內(nèi)吞。S卩，將在PSB中溶解rAIM而配制的注射液分別靜脈注射到⑶36+小鼠以及CD36+/+小鼠(300 μ g/小鼠)。從注射經(jīng)過(guò)16小時(shí)后，處死小鼠，從其附睪脂肪組織制作組織切片。并且，將組織切片用抗AIM抗體染色。其結(jié)果，如圖35A以及圖35B所示，在CD36+小鼠(CD36+)的脂肪組織中檢測(cè)出的AIM的信號(hào)水平與CD36+/+小鼠(CD36+/+)相比，顯著地低下。即，向脂肪細(xì)胞的rAIM內(nèi)吞，相比于0)36+/+小鼠(CD36V+)，在CD36+小鼠(CD36—勺中顯著地少。實(shí)施例17[人rAIM的對(duì)人前脂肪細(xì)胞的成熟的抑制]為了確認(rèn)AIM在人細(xì)胞中也作用于脂肪細(xì)胞分化(adipogenesis)，在重組人 AIM(rhAIM)的存在以及不存在下，刺激人間葉干細(xì)胞(human mesenchymal stem cell, HMSC) (Lonza Walkersville Inc.，USA)的分化。S卩，將 HMSC，在間葉干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Mesenchymal Stem Cell Basal Medium, MSCBM) (Lonza Walkersville Inc.)中培養(yǎng)10天，以達(dá)到匯合。然后，將細(xì)胞在rhAIM 存在(lOyg/mL)或者不存在下，加入人胰島素、MCGS、地塞米松(dexamethasone)、吲哚美辛(indomethacin)以及IBMX，培養(yǎng)3天，由此刺激該細(xì)胞的分化(adipogenesis) (adipogenesis induction)(參考文獻(xiàn)Janderrova 等，Obes. Res. 11 :65,2003)。經(jīng)過(guò)該刺激后，將細(xì)胞在添加有人胰島素以及MCGS的MSCBM中培養(yǎng)10天。并且，回收細(xì)胞，用油紅0染色。圖36A、圖36B以及圖36C中分別示出在相差顯微鏡下觀察分化刺激前 (Pre-stimulation)、rhAIM 不存在下刺激后(rhAIM (-))以及 10 μ g/mL 的 rhAIM 存在下刺激后(rhAIM(10 μ g/mL))的細(xì)胞的結(jié)果。如圖36A至圖36C所示，rhAIM戲劇性地抑制HMSC的分化。并且，通過(guò)RT-PCR評(píng)價(jià)在成熟脂肪細(xì)胞中表達(dá)的Glut-4的mRNA水平。并且，對(duì)于β肌動(dòng)蛋白的mRNA，也同樣地進(jìn)行評(píng)價(jià)。在圖37中示出其結(jié)果。圖37中示出評(píng)價(jià)分化刺激前O^re)、rhAIM不存在下刺激后(-rhAIM)以及10 μ g/mL的rhAIM存在下刺激后(+rhAIM)的細(xì)胞中的Glut_4以及 β肌動(dòng)蛋白的mRNA的水平的結(jié)果。如圖37所示，與上述的組織學(xué)分析結(jié)果一致，Glut-4 的mRNA水平，相比于rhAIM不存在的狀態(tài)，在rhAIM存在下顯著地減少。實(shí)施例18[狗以及貓中的AIM的表達(dá)]為了研究狗以及貓中的AIM的表達(dá)，采用抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)，對(duì)從3只狗以及3只貓采集的血清進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn)。并且，為了進(jìn)行比較，對(duì)小鼠血清也同樣進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn)。圖38中示出對(duì)于狗3例(dog 1、2、3)、貓3例(cat 1、2、3)以及小鼠(mouse)分別進(jìn)行免疫印跡的結(jié)果。如圖38所示，在狗血清中檢測(cè)出明顯的條帶。另一方面，在貓血清中檢測(cè)出分子量比狗更大、而與小鼠大致相同的、較淺的條帶。即，確認(rèn)出在狗以及貓中也表達(dá)，與小鼠AIM具有能夠被抗小鼠AIM多克隆抗體檢測(cè)出的程度的同源性的AIM。在此，說(shuō)明通過(guò)上述的實(shí)施例11至18得到的部分見(jiàn)解。在實(shí)施例11中，在向 AIM+小鼠的附睪脂肪組織直接注射rAIM以及向AIM+小鼠靜脈注射rAIM的任意一種情況下，均出現(xiàn)給予的外源性rAIM內(nèi)吞進(jìn)入脂肪細(xì)胞，且內(nèi)吞的rAIM與該脂肪細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的內(nèi)源性FAS結(jié)合的現(xiàn)象。并且，在實(shí)施例16中，確認(rèn)出向⑶36+小鼠以及野生型⑶36v+ 小鼠分別靜脈注射rAIM時(shí)，向脂肪細(xì)胞的rAIM的內(nèi)吞，相比于⑶36v+小鼠，在⑶36+小鼠中顯著地少。即，在上述的實(shí)施例5至8中采用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行的體外(in vitro)實(shí)驗(yàn)中確認(rèn)出的現(xiàn)象，在采用小鼠進(jìn)行的體內(nèi)(in vivo)實(shí)驗(yàn)中也被確認(rèn)出。其中，實(shí)施例15中，再次確認(rèn)出在細(xì)胞內(nèi)AIM與FAS結(jié)合，同時(shí)還獲得關(guān)于FAS的與AIM結(jié)合的區(qū)域的見(jiàn)解。在實(shí)施例12以及實(shí)施例13中，示出以下現(xiàn)象用HFD喂食的AIM+小鼠的體重、月旨肪組織的重量、肝臟的重量以及脂肪組織中所包含的脂肪細(xì)胞的大小的增加，與同樣用HFD 喂食的AIMv+小鼠相比，被顯著地促進(jìn)；但是該AIM+小鼠的飼料攝入量、代謝速率以及活動(dòng)性方面，與該AIMv+小鼠大致相同。即，更加詳細(xì)地確認(rèn)出在上述的實(shí)施例9中被確認(rèn)出的現(xiàn)象。在實(shí)施例14中，示出同時(shí)實(shí)施攝取HFD和腹腔內(nèi)注射rAIM的處理的AIM+小鼠的體重、內(nèi)臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量的增加，與同時(shí)實(shí)施攝取HFD和腹腔內(nèi)注射 BSA的處理的AIM+小鼠相比，被顯著地抑制的結(jié)果。并且，這種由AIM引起的效果還可以根據(jù)以下分析結(jié)果證實(shí)，即，隨著脂解(lipolysis)的進(jìn)行而減少的FSP27、Perilipin(圍脂滴蛋白)以及Adipophilin(脂肪分化相關(guān)蛋白)的mRNA水平，相比于腹腔內(nèi)注射BSA 的AIM+小鼠，在腹腔內(nèi)注射rAIM的AIM+小鼠中更低。即，如在上述的實(shí)施例10中已經(jīng)理解的那樣，通過(guò)相比于靜脈注射可以提高脂肪組織中的局部濃度的腹腔內(nèi)注射，明確地確認(rèn)出由于給予AIM而抑制體重以及脂肪組織重量的增加的效果。在實(shí)施例17中，確認(rèn)出人AIM通過(guò)作用于人前脂肪細(xì)胞，抑制該人前脂肪細(xì)胞向人脂肪細(xì)胞的分化。即，確認(rèn)出如同基于上述的實(shí)施例1至10中得到的見(jiàn)解以及與AIM分子結(jié)構(gòu)及其作用機(jī)制相關(guān)的小鼠和人的同源性而已經(jīng)理解的那樣，小鼠AIM作用于小鼠細(xì)胞，同樣地人AIM作用于人細(xì)胞。該結(jié)果加強(qiáng)了支持下述理解的依據(jù)，即AIM在人的機(jī)體內(nèi)與在小鼠機(jī)體內(nèi)同樣地作用于脂肪細(xì)胞，帶來(lái)前脂肪細(xì)胞的分化抑制、脂肪細(xì)胞中的脂解 (lipolysis)、脂肪組織重量的增加抑制、體重的增加抑制的效果。在實(shí)施例18中，確認(rèn)出在狗以及貓中也表達(dá)，與小鼠AIM具有能夠被抗小鼠AIM 多克隆抗體檢測(cè)出的程度的同源性的AIM。實(shí)際上，由序列表11中示出的氨基酸序列構(gòu)成的狗AIM與由序列表1中示出的人AIM具有66%的同源性，并與序列表5中示出的小鼠AIM 具有60%的同源性。如上所述，得到以下見(jiàn)解，即AIM基于在各種哺乳動(dòng)物的種間的氨基酸序列的同源性以及該AIM的作用機(jī)制的同源性，通過(guò)向生物機(jī)體給藥，帶來(lái)該生物機(jī)體的脂肪組織的量和/或體重的減少、增加的抑制、增加程度的降低等效果。進(jìn)一步地，在作為藥物的有用性以及安全性方面還得到極其令人感興趣的見(jiàn)解，即AIM基于在CD36的介導(dǎo)下內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而作用于該細(xì)胞的機(jī)制，不會(huì)改變生物機(jī)體的代謝狀態(tài)，而特異性地作用于該生物機(jī)體的脂肪細(xì)胞。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含所述(I)的蛋白質(zhì)。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述(I)的蛋白質(zhì)是由序列表1中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)。
4.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述(I)的蛋白質(zhì)是動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或貓。
6.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含所述(II)的蛋白質(zhì)。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
9.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表1中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4 中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表2 中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
11.如權(quán)利要求10所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表2 中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
12.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，所述第一結(jié)構(gòu)域、所述第二結(jié)構(gòu)域以及所述第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
13.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由序列表2 中示出的氨基酸序列或者在序列表2中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者在序列表3中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者在序列表4中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
14.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，所述第一結(jié)構(gòu)域、所述第二結(jié)構(gòu)域以及所述第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
15.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是下述的(xl)、 (x2)或(x3)蛋白質(zhì)(xl)由序列表2中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(x2)由序列表3中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(x3)由序列表4中示出的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)，且是具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
16.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
17.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
18.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
19.如權(quán)利要求18所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
20.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由包含 SRCRl結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域的動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCRl的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、 由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
22.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由所述 SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成， 且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
23.如權(quán)利要求22所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
24.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由所述 SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
25.如權(quán)利要求M所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
26.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，所述第一結(jié)構(gòu)域、所述第二結(jié)構(gòu)域、以及所述第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
27.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，由包含 SRCRl結(jié)構(gòu)域、SRCR2結(jié)構(gòu)域以及SRCR3結(jié)構(gòu)域的動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成，并且由所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在所述SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域、由所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在所述SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域、以及由所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或者在所述SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成，而且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
28.如權(quán)利要求27所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
29.如權(quán)利要求27所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是，所述第一結(jié)構(gòu)域、所述第二結(jié)構(gòu)域、以及所述第三結(jié)構(gòu)域直接串聯(lián)而成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
30.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質(zhì)是下述的(pi)、 (p2)或(p3)蛋白質(zhì)(Pl)由動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的SRCRl結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第一結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第一結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(p2)由動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的SRCR2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第二結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第二結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)；(p3)由動(dòng)物的巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的SRCR3結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列構(gòu)成的第三結(jié)構(gòu)域蛋白或者多個(gè)所述第三結(jié)構(gòu)域蛋白串聯(lián)而成的蛋白質(zhì)，且是具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
31.如權(quán)利要求30所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
32.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，是給予人的藥物組合物。
33.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，是給予動(dòng)物的藥物組合物。
34.如權(quán)利要求33所述的藥物組合物，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
35.一種蛋白質(zhì)，其特征在于，是如權(quán)利要求1至34中任意一項(xiàng)記載的所述(I)的蛋白質(zhì)或所述(II)的蛋白質(zhì)，且作為藥物組合物的有效成分使用。
36.一種方法，其特征在于，制備如權(quán)利要求1至34中任意一項(xiàng)記載的藥物組合物。
37.一種方法，其特征在于，向生物機(jī)體給予如權(quán)利要求1至34中任意一項(xiàng)記載的藥物組合物。
38.如權(quán)利要求37所述的方法，其特征在于，所述生物機(jī)體是人。
39.如權(quán)利要求37所述的方法，其特征在于，所述生物機(jī)體是動(dòng)物。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述動(dòng)物是小鼠、狗或者貓。
41.一種食品飲料，其特征在于，包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。
42.一種方法，其特征在于，制造如權(quán)利要求41所述的食品飲料。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新型藥物組合物、食品飲料以及與它們相關(guān)的方法。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物，特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(zhì)(I)巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經(jīng)過(guò)缺失、取代或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構(gòu)成，且具有抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的蛋白質(zhì)。即，本發(fā)明所涉及的藥物組合物作為有效成分，例如包含由序列表1中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)、由序列表5中示出的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白質(zhì)、或者這些蛋白質(zhì)在不損壞抑制前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)脂滴分解的功能的范圍內(nèi)發(fā)生變異的蛋白質(zhì)。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102458472SQ20108003081
公開(kāi)日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月1日
發(fā)明者宮崎徹 申請(qǐng)人:宮崎徹