專利名稱：用于預(yù)防和治療痤瘡的包含作為活性成分的蜂毒的組合物的制作方法
用于預(yù)防和治療痤瘡的包含作為活性成分的蜂毒的組合物技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明一般涉及包含作為活性成分的蜂毒的用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物，更具體地，本發(fā)明涉及包含蜂毒的用于預(yù)防和治療痤瘡的藥物組合物或化妝品組合物，所述蜂毒對(duì)已知為痤瘡致病菌的痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acne)和擴(kuò)大炎癥部位從而使痤瘡惡化的厭氧皮膚菌群具有優(yōu)異的抗菌活性，其中所述蜂毒還具有優(yōu)異的使受損皮膚細(xì)胞再生的能力。
背景技術(shù)：
痤瘡的確切病因尚不為人所知，但醫(yī)生們認(rèn)為引起它的主要相關(guān)因素包括皮脂分泌增加、由刺激皮脂腺的雄激素和在毛發(fā)皮脂腺中繁殖從而降解皮脂以形成游離脂肪酸的痤瘡丙酸桿菌導(dǎo)致的炎癥發(fā)展、毛囊角化不全(follicular parakeratosis)和遺傳素質(zhì)。 而且，雖然需氧皮膚菌群不是引起炎癥的主要原因，但已知其擴(kuò)大炎癥部位，從而促使痤瘡惡化。已知用于治療痤瘡的一般方法包括給藥口服抗生素和類視色素、施用外用藥物、粉刺擠出、化學(xué)脫皮等。具體而言，可通過用抗生素治療來緩解由細(xì)菌感染引起的炎性痤瘡，但最近已有報(bào)道稱主要用于抑制痤瘡丙酸桿菌增殖和減少炎性反應(yīng)的抗生素(如四環(huán)素、克林霉素和紅霉素)可增加對(duì)抗生素具有耐藥性的痤瘡丙酸桿菌并產(chǎn)生副作用。迄今，為了治療痤瘡，在醫(yī)藥領(lǐng)域，已使用諸如紅霉素的抗生素或過氧苯甲酰來抑制痤瘡丙酸桿菌，或使用雌激素來控制皮脂，但這些藥物引起副作用。在化妝品領(lǐng)域，已使用維生素A衍生物來去除皮膚角蛋白，并使用三氯生和水楊酸來抑制痤瘡丙酸桿菌。這些藥物表現(xiàn)出一些效應(yīng)， 但大多引起副作用，如皮膚紅斑，皮膚超敏反應(yīng)或光敏反應(yīng)，而且用這些藥物治療后痤瘡經(jīng)常復(fù)發(fā)。因此，尚無用于預(yù)防和治療痤瘡的藥品。
可在不對(duì)蜜蜂造成傷害的情況下采用電擊法通過蜂毒收集器大量收集產(chǎn)于韓國(guó)的蜜蜂(Apis mellifera)的蜂毒，并且可通過從收集到的蜂毒中去除雜質(zhì)隨后進(jìn)行冷凍干燥來獲得純化蜂毒。這樣獲得的蜂毒含有多種成分，在這些成分中，肽類具有抗炎和抗菌效應(yīng)、強(qiáng)效止痛效應(yīng)、免疫增強(qiáng)效應(yīng)等。蜂毒對(duì)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌二者均表現(xiàn)出抗菌活性，但已知其對(duì)革蘭氏陽性菌表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗菌活性。蜂毒的大部分藥效可歸因于毒性成分和單一主要成分組的活性。蜂毒的已知成分及效應(yīng)如下。
(1)治療免疫系統(tǒng)疾病蜂毒在大多數(shù)免疫疾病的治療中是有效的，并且能夠刺激免疫系統(tǒng)以成功對(duì)抗疾病。蜂毒的兩大免疫功能是刺激有機(jī)體的生物系統(tǒng)以及增強(qiáng)機(jī)體的防御力。
(2)抗炎效應(yīng)蜂毒的主要成分在炎癥的抑制中非常有效。具體而言，當(dāng)向關(guān)節(jié)炎患者注射蜂毒肽和蜂毒明肽時(shí)，水腫得到顯著抑制。此外，與蛋白酶抑制劑和dolapin共同治療使水腫得到15-40%的抑制。
(3)神經(jīng)毒性效應(yīng)被蜜蜂蟄引起疼痛和炎癥，并且引起疼痛和炎癥的蜂毒成分有效地用于開發(fā)用于在哺乳動(dòng)物中的止痛反應(yīng)(pain withdrawal response)的止痛藥物。 具體而言，蜂毒中的蜂毒明肽起到止痛作用，并且表現(xiàn)出強(qiáng)止痛效應(yīng)以及在神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、肌肉疼痛等中的高療效。
(4)溶血效應(yīng)蜂毒的最卓越效應(yīng)之一是溶血效應(yīng)。蜂毒中的蜂毒肽、磷脂酶等通過吸收和排泄源于挫傷或內(nèi)出血的淤血(extravasated bood)以及向組織供應(yīng)新鮮血液、 氧和營(yíng)養(yǎng)來表現(xiàn)出療效和溶血效應(yīng)。
(5)血管擴(kuò)張效應(yīng)蜂毒中的組胺類物質(zhì)在毛細(xì)血管、小動(dòng)脈、小靜脈特別是內(nèi)臟血管的擴(kuò)張中非常有效。因此，蜂毒用于治療諸如對(duì)冷敏感、凍傷和肌肉疼痛的疾病。
(6)降血壓效應(yīng)蜂毒中的組胺類物質(zhì)具有強(qiáng)降血壓效應(yīng)。具體而言，它們甚至在 1/2. 5xl07的濃度下表現(xiàn)出降血壓作用，并且在原發(fā)性高血壓等的治療中高度有效。
(7)自主神經(jīng)調(diào)節(jié)效應(yīng)當(dāng)人體受到持續(xù)的壓力時(shí)，交感神經(jīng)系統(tǒng)和副交感神經(jīng)系統(tǒng)中的自主神經(jīng)變得紊亂，從而導(dǎo)致許多疾病。蜂毒中含有使自主神經(jīng)正?；璧膬翰璺影泛鸵阴Ｄ憠A，這些成分是有效治療心身疾病、絕經(jīng)期病癥、應(yīng)激反應(yīng)性疾病 (stress-induced disease)等的腦細(xì)胞遞質(zhì)(transmitter)。
(8)抗菌效應(yīng)蜂毒具有很強(qiáng)的抗菌效應(yīng)和抗真菌效應(yīng)，也有效對(duì)抗病毒性腫瘤。 具體而言，它在牙周炎、扁桃腺炎、瞼腺炎、化膿性疾病等的治療中高度有效。
基于蜂毒的上述生理效應(yīng)，本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行研究，以提供有效預(yù)防和治療痤瘡的蜂毒系組合物。根據(jù)本發(fā)明，會(huì)提高患有嚴(yán)重痤瘡的人們的生活質(zhì)量，并且會(huì)促進(jìn)韓國(guó)產(chǎn)蜂毒的消費(fèi)，同時(shí)會(huì)提高韓國(guó)蜂毒在全球的地位。發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物。更具體地，本發(fā)明提供包含蜂毒的用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物，所述蜂毒對(duì)已知使痤瘡惡化的痤瘡丙酸桿菌具有優(yōu)異的抗菌效應(yīng)，并且還具有優(yōu)異的抗炎效應(yīng)，能夠抑制或減輕由多種皮膚疾病如痤瘡引起的炎癥，其中所述組合物可以肥皂、化妝品以及藥用產(chǎn)品(如軟膏劑、繃帶(band)和敷料)形式使用。
從而，本發(fā)明的發(fā)明人已做了多方面的努力來研發(fā)有效用于預(yù)防和治療痤瘡的化妝品和藥品，并且因此已開發(fā)出有效用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物，其包含作為有效成分的蜂毒，所述蜂毒預(yù)期具有優(yōu)異的抗菌、抗炎和細(xì)胞再生效應(yīng)。
技術(shù)方案
本發(fā)明的一實(shí)施方案提供用于預(yù)防或治療痤瘡的組合物，其包含作為活性成分的蜂毒。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供用于預(yù)防或治療痤瘡的化妝品組合物，其包含作為活性成分的蜂毒。
本發(fā)明的又一實(shí)施方案提供用于預(yù)防或治療痤瘡的身體清潔或清洗產(chǎn)品(body cleansing or cleaning product)，其包含作為 舌j"生成分的蜂毒。
蜂毒在所述組合物中的濃度可為0.0001-10% (w/v) 0
具體而言，本發(fā)明提供用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物，其包含韓國(guó)產(chǎn)的純化蜂毒。
純化蜂毒在本發(fā)明的用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物中的含量是0. 0001-10% (w/ ν)，優(yōu)選為0.01-1% (w/v)。如果蜂毒在所述組合物中的含量少于0.0001%，則所述組合物對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抗菌和抗炎效應(yīng)會(huì)較低，而如果所述含量大于10 %，則所述組合物會(huì)具有細(xì)胞毒性。
同時(shí)，包含蜂毒的供皮膚施用的組合物可以任意狀態(tài)(如液態(tài)、乳霜態(tài)、糊態(tài)或固態(tài))存在，并且可以乳霜(cream)、護(hù)膚乳(skin lotion)、面膜(pack)、底妝(makeup base)、面部清潔劑和清洗劑(facial cleanser and cleaner)(如肥皂、潔面泡沫(facial foam)或沐浴露(body cleanser))以及發(fā)用產(chǎn)品(如洗發(fā)水或沖洗型護(hù)發(fā)素(rinse))的形式配制。所述組合物可視需要與那些常用于供皮膚施用的組合物的組分(如水性組分、 油性組分、表面活性劑、保濕劑、增稠劑、防腐劑、香料、色素等)一起配制。而且，所述組合物可與藥學(xué)上可接受的載體、成型劑(forming agent)或稀釋劑混合，并以散劑、顆粒劑、 膠囊劑或注射液的形式配制。此外，所述組合物也可用作身體清潔或清洗產(chǎn)品如濕巾(wet tissue)ο
此外，本發(fā)明的組合物可與已用于現(xiàn)有的痤瘡治療藥物中的抗菌劑(如過氧苯甲酰、四環(huán)素、紅霉素或三氯生)、激素類(如雄激素藥物或類固醇)或維生素A衍生物(如維甲酸)組合使用。
有益效果
如上所述，通過從使用蜂毒收集器從蜜蜂中收集的國(guó)產(chǎn)蜂毒中去除雜質(zhì)得到的純化蜂毒對(duì)已知通過擴(kuò)大炎癥部位從而使痤瘡惡化的痤瘡丙酸桿菌、對(duì)克林霉素具有耐藥性的痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌 (Staphylococcus epidermidis)禾口酉良月農(nóng)鏈球菌(Sreptococcus pyogenes)具有優(yōu)異的抗菌效應(yīng)。并且，蜂毒可迅速而有效地使受損皮膚細(xì)胞再生，并且可促進(jìn)皮膚細(xì)胞再生以使得受損部位不發(fā)炎。此外，蜂毒促進(jìn)膠原蛋白的合成以及作為皮膚細(xì)胞生長(zhǎng)因子的EGF和VEGF 的表達(dá)，并且對(duì)預(yù)防皺紋和衰老具有優(yōu)異的效應(yīng)。因此，本發(fā)明可提供包含蜂毒并用于預(yù)防和治療痤瘡的化妝品、美容皂和藥用產(chǎn)品如軟膏劑、繃帶或敷料。具體而言，本發(fā)明提供包含蜂毒的乳液(lotion)、潤(rùn)膚乳(nourishing lotion)、潤(rùn)膚霜(nourishingcream)、按摩霜(massage cream)禾口精華素(essence)。
因此，根據(jù)本發(fā)明研發(fā)的包含蜂毒的用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物會(huì)大大有助于治療患有嚴(yán)重痤瘡的患者，并且由于該國(guó)產(chǎn)蜂毒的高附加值的應(yīng)用會(huì)有助于提高養(yǎng)蜂者的收入。


圖1顯示蜂毒對(duì)HEK(人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞)的細(xì)胞毒性的評(píng)價(jià)結(jié)果。
圖2顯示蜂毒對(duì)受損HEK(人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞)的再生的效應(yīng)。
圖3顯示用蜂毒治療受損HEK(人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞)后的膠原蛋白合成。
圖4顯示用蜂毒治療受損HEK(人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞)后的EGF生成。
圖5顯示用蜂毒治療受損HEK(人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞)后的VEGF生成。
發(fā)明實(shí)施方式
下文中會(huì)參考實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)說明。然而，本發(fā)明的范圍并不局限于這些實(shí)施例。
采用SAS(SAS enterprise guide 3.0)的Duncan t_檢驗(yàn)對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。
實(shí)施例1 從峰毒中分離有效成分
使用蜂毒收集器從蜜蜂(Apis meliffera L.)中收集蜂毒。將收集的蜂毒溶解于蒸餾水中，離心，過濾并冷凍干燥，從而得到用于測(cè)試的純蜂毒。
實(shí)施例2 測(cè)量抗菌活件
測(cè)試?yán)? 測(cè)量對(duì)癉瘡致病菌的抗菌活件
測(cè)量對(duì)已知引起痤瘡的痤瘡丙酸桿菌和對(duì)抗生素克林霉素具有耐藥性的痤瘡丙酸桿菌的抗菌效應(yīng)。采用肉湯稀釋法測(cè)量對(duì)痤瘡丙酸桿菌和對(duì)抗生素克林霉素具有耐藥性的痤瘡丙酸桿菌的最低抑制濃度(MIC)。
用蒸餾水稀釋干燥的蜂毒，無菌過濾，并按照肉湯稀釋法連續(xù)稀釋。在35°C下將痤瘡丙酸桿菌和對(duì)抗生素具有耐藥性的痤瘡丙酸桿菌各自在補(bǔ)充有5%羊血的TS(胰酪胨大豆)肉湯中無氧培養(yǎng)48小時(shí)，然后用于測(cè)試。以2X IO6個(gè)CFU/孔的細(xì)胞密度將每個(gè)細(xì)菌菌株加入到孔板中，并與蜂毒樣品一起培養(yǎng)M小時(shí)，其后在肉眼和顯微鏡下均觀察到菌株生長(zhǎng)，并且測(cè)量在MOnm的吸收波長(zhǎng)下的吸光度。將表現(xiàn)出與純?nèi)鉁奈舛戎迪嗤奈舛戎档臉悠窛舛葴y(cè)定為最低抑制濃度(MIC)。測(cè)量結(jié)果顯示在下表1中
表 權(quán)利要求
1.用于預(yù)防或治療痤瘡的組合物，其包含作為活性成分的蜂毒。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述蜂毒在所述組合物中的濃度為0.0001-10% (w/v)。
3.用于預(yù)防或治療痤瘡的化妝品，其包含作為活性成分的蜂毒。
4.權(quán)利要求3的化妝品，其中所述蜂毒在所述化妝品中的濃度為0.0001-10% (w/v)。
5.用于預(yù)防或治療痤瘡的身體清潔或清洗產(chǎn)品，其包含作為活性成分的蜂毒。
6.權(quán)利要求5的身體清潔或清洗產(chǎn)品，其中所述蜂毒在所述產(chǎn)品中的濃度為 0. 0001-10% (w/v) O
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療痤瘡的組合物，其包含對(duì)已知為痤瘡致病菌的痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes)具有優(yōu)異的抗菌活性并且對(duì)擴(kuò)大炎癥部位從而使痤瘡惡化的皮膚菌群表現(xiàn)出強(qiáng)抗菌活性的物質(zhì)，其中所述物質(zhì)還有助于使受到痤瘡損傷的皮膚細(xì)胞再生。本發(fā)明組合物包含(從蜜蜂(Apis meliffera)中收集的)蜂毒，并且以用于基礎(chǔ)性預(yù)防和治療痤瘡的肥皂、化妝品以及供皮膚施用的藥用產(chǎn)品(如軟膏劑、繃帶和敷料)形式使用。
文檔編號(hào)A61K8/98GK102548564SQ201080031247
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月28日
發(fā)明者呂奏洪, 李亮求, 李光吉, 韓忠燮, 韓相美 申請(qǐng)人:東星制藥(株), 農(nóng)村振興廳