專利名稱：滴眼劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及角膜障礙的治愈促進(jìn)效果以及滴眼劑中的有效成分的穩(wěn)定性得到改善的滴眼劑，所述滴眼劑含有氨基酸序列由kr-kr-kr-Arg表示的肽(以下稱為“SSSR”) 或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽(以下稱為“TOLM”) 或其藥學(xué)上允許的鹽，該滴眼劑通過規(guī)定SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比、SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽各自的配合濃度、及該滴眼劑的PH范圍而得到。
背景技術(shù)：
SSSR是胰島素樣生長因子-I (以下稱為“IGF-I”)的部分肽，此外，TOLM是物質(zhì)P 的C末端側(cè)的四肽(專利文獻(xiàn)1、專利文獻(xiàn)2)。在專利文獻(xiàn)1中公開了 關(guān)于創(chuàng)傷治愈促進(jìn)作用，發(fā)現(xiàn)SS SR為IGF-I的最小活性表達(dá)單元，此外，將SSSR等IGF-I的部分肽與TOLM或物質(zhì)P并用時(shí)，具有促進(jìn)治愈角膜的障礙以及治愈皮膚的創(chuàng)傷的效果。而且，專利文獻(xiàn)1是關(guān)于作為IGF-I的部分肽的SSSR等的新物質(zhì)、及并用了 SSSR 等IGF-I的部分肽和TOLM或物質(zhì)P的醫(yī)藥用途的發(fā)明，但是對(duì)于并用SSSR和TOLM的滴眼劑的配合處方?jīng)]有進(jìn)行充分研究。專利文獻(xiàn)1 日本特開2003-231695號(hào)專利文獻(xiàn)2 日本特開平10-17489號(hào)

發(fā)明內(nèi)容
因此，在并用SSSR和TOLM兩藥劑的滴眼劑的配合處方中，在詳細(xì)研究了 SSSR以及TOLM的各化學(xué)特性的基礎(chǔ)上，確定配合劑的配合濃度比、各藥物的配合濃度等，使配合劑的藥效最大化，同時(shí)使副作用的發(fā)生最小化，而且考慮滴眼劑的流通過程或滴眼劑的使用方式的改變，改善滴眼劑的保存穩(wěn)定性是意義深遠(yuǎn)的課題。本發(fā)明人等進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在含有SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM 或其藥學(xué)上允許的鹽的滴眼劑中，如果1)使SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比為 1/15 1/50，2)使SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0. 001 0. 3% (w/v)，3)使TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0.015 1.5% (w/v),4)使該滴眼劑的pH在2. 5 6. 5的范圍內(nèi)，就能夠使藥效即促進(jìn)角膜障礙的治愈效果最大化，并且能夠長期穩(wěn)定地保存滴眼劑等，從而完成了本發(fā)明。S卩，本發(fā)明通過研究在含有SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的滴眼劑中，SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比，能夠使配合劑的藥效最大化，此外，通過降低SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽各自的配合濃度，能夠避免由藥物引起的副作用的發(fā)生，進(jìn)而，通過研究由該滴眼劑的 PH造成的影響，能夠使滴眼劑長期穩(wěn)定地保存。在本發(fā)明中，作為藥學(xué)上允許的鹽，例如，可以列舉出鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乳酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、甲酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、草酸鹽、甲磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽等，對(duì)于SSSR，更優(yōu)選乙酸鹽，對(duì)于reLM，更優(yōu)選鹽酸鹽。在本發(fā)明的滴眼劑中，SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比為1/5 1/50，更優(yōu)選的配合濃度比為1/15 1/50，進(jìn)一步優(yōu)選的配合濃度為 1/15 1/20。從后述的藥理效果試驗(yàn)的結(jié)果可知，本發(fā)明的滴眼劑中的并用了 SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和reLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合劑的角膜上皮創(chuàng)傷治愈效果在配合濃度比為1/15 1/50的范圍內(nèi)得以促進(jìn)，特別是在配合濃度比為1/15 1/20的范圍內(nèi)得以最大化。本發(fā)明的滴眼劑中的SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0. 001 0. 3% (w/ ν)，更優(yōu)選為 0. 005 0. 1 % (w/v)。此外，本發(fā)明的滴眼劑中的TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0. 015 1. 5% (w/v)，更優(yōu)選為 0. 1 1 % (w/v)。從后述的穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果可知，本發(fā)明的滴眼劑中的SSSR乙酸鹽和TOLM鹽酸鹽的配合濃度分別為0.001% (w/v)以上和0.015% (w/v)以上時(shí)，作為配合劑發(fā)揮良好的藥效，但是通常藥物濃度變高時(shí)，有時(shí)發(fā)生副作用，因此優(yōu)選將藥物濃度設(shè)定得盡可能低。本發(fā)明的滴眼劑的pH在2. 5 6. 5的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在3.0 6.0的范圍內(nèi)，進(jìn)一步優(yōu)選在3. 5 5. 5的范圍內(nèi)。從后述的穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果可知，含有SSSR乙酸鹽的水溶液在PH6. 5以下(2. 5 6. 5的范圍)時(shí)穩(wěn)定，此外，含有TOLM鹽酸鹽的水溶液在pH2. 5 以上 7.0的范圍)時(shí)穩(wěn)定，所以本發(fā)明的含有SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和TOLM或其藥學(xué)上允許的鹽滴眼劑在pH為2. 5 6. 5的范圍內(nèi)能夠長期穩(wěn)定地保存。本發(fā)明的滴眼液可以通過通用的方法進(jìn)行配制，根據(jù)需要可以添加等滲劑、pH調(diào)節(jié)劑等。作為等滲劑，例如可以列舉出濃甘油、丙二醇、聚乙二醇、海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、 甘露醇、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂等，更優(yōu)選為氯化鈉、濃甘油。作為pH調(diào)節(jié)劑，例如可以列舉出鹽酸、檸檬酸、檸檬酸鈉、磷酸、磷酸一氫鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、冰醋酸、乙酸、乙酸鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、硼酸、硼砂、乙醇胺、硫酸、 碳酸鈉、碳酸氫鈉等。本發(fā)明的滴眼劑用作角膜障礙的治療劑，作為角膜障礙，例如可以舉出角膜潰瘍、 角膜上皮缺損、角膜炎、干眼癥等。本發(fā)明的滴眼劑的滴加次數(shù)可以根據(jù)癥狀、年齡、劑型等進(jìn)行適當(dāng)選擇，可以每日滴加1 多次(例如1 6次)，每次1 數(shù)滴。通過后述的試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行詳細(xì)說明，本發(fā)明的滴眼劑在使SSSR乙酸鹽和TOLM鹽酸鹽的配合濃度比1/15 1/50時(shí)，能夠促進(jìn)配合劑的角膜上皮創(chuàng)傷治愈效果，特別是在配合濃度比為1/15 1/20的范圍內(nèi)時(shí)，能夠使上述效果得以最大化，此外，使SSSR乙酸鹽的配合濃度為0.001% (w/v)以上、TOLM鹽酸鹽的配合濃度為0.015% (w/v)以上時(shí)，能夠發(fā)揮優(yōu)異的藥效，進(jìn)而，將本發(fā)明的滴眼劑的PH保持在2. 5 6. 5的范圍內(nèi)時(shí)，還能夠長期穩(wěn)定地保存SSSR乙酸鹽及TOLM鹽酸鹽。
具體實(shí)施例方式以下給出各種試驗(yàn)結(jié)果，這些例子用于更好地理解本發(fā)明，并不限定本發(fā)明的范圍。1、藥理效果試驗(yàn)使用以下所示的受試制劑實(shí)施藥理效果試驗(yàn)。1-1藥物的配制i) SSSR 乙酸鹽使用H-Arg(NO2)-OBzl作為C-末端氨基酸原料，通過Boc法使用 Boc-Ser (OBzl) -OH 進(jìn)行肽鏈延長，由此來合成保護(hù)四肽(Z-Ser (OBzl) -Ser (OBzl) -Ser (0B zl)-Arg(N02)-0Bzl)。在乙酸的存在下，使用鈀通過催化氫化將該保護(hù)四肽進(jìn)行脫保護(hù)，由此得到SSSR乙酸鹽。ii)TOLM 鹽酸鹽使用縮合劑由氨基酸衍生物Boc-Phe-OH和H-Gly-OBzl、以及Boc-Leu-OH和 H-Met-NH2分別形成肽鍵，由此合成保護(hù)二肽(Boc-Phe-Gly-OBzl以及Boc-Leu-Met-NH2)。 將這些保護(hù)二肽使用鈀進(jìn)行催化氫化來脫芐基、并且使用Boc法進(jìn)行肽合成，從而衍生成保護(hù)四肽(Boc-Phe-Gly-Leu-Met-Mg。使用氯化氫將該保護(hù)四肽進(jìn)行脫保護(hù)，由此得到 TOLM鹽酸鹽。1-2受試制劑的配制受試制劑1使SSSR乙酸鹽和TOLM鹽酸鹽溶解在磷酸緩沖生理食鹽溶液中，配制含有0. 01 % (w/v)的SSSR乙酸鹽和0. 005% (w/v)的FGLM鹽酸鹽的受試制劑1 (滴眼液)。受試制劑2 8改變受試制劑1的SSSR乙酸鹽的配合量和TOLM鹽酸鹽的配合量，使其為表1所示的各受試制劑的配合濃度、配合濃度比，除此之外，進(jìn)行與受試制劑1同樣的操作，配制受試制劑2 8。1-3試驗(yàn)方法及結(jié)果使用按照Nagano 等的方法(Invest. Ophthalmol. Vis. ki.，44， 3810-3815(2003))制作的神經(jīng)麻痹性角膜癥模型大鼠，研究對(duì)于剝離角膜上皮后的角膜上皮創(chuàng)傷治愈的影響。具體地按照以下的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。剝離角膜上皮后，以1.5小時(shí)間隔滴入各受試制劑，1日6次(5μ 1/次)。測定創(chuàng)傷面積時(shí)，進(jìn)行熒光素染色并拍攝角膜的照片，使用圖像分析系統(tǒng)計(jì)算出熒光素染色的面積。[表 1]
權(quán)利要求
1.一種滴眼劑，含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由Wie-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽，其中，1)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由 Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比1/15 1/50，2)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為 0. 001 ~ 0. 3% (w/v)，3)氨基酸序列由Wie-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為 0. 015 ~ 1. 5% (w/v)，4)所述滴眼劑的pH在2.5 6. 5的范圍內(nèi)。
2.一種滴眼劑，含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸鹽和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽，其中，1)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸鹽和氨基酸序列由 Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽的配合濃度比為1/15 1/20，2)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸鹽的配合濃度為0.005 0. 1 % (w/ν),3)氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽的配合濃度為0.1 1 % (w/ν),4)所述滴眼劑的pH在3.0 6. 0的范圍內(nèi)。
3.一種角膜障礙的治愈促進(jìn)效果優(yōu)異的滴眼劑的穩(wěn)定化方法，在含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的滴眼液中，1)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由 Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比為1/15 1/50，2)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為 0. 001 ~ 0. 3% (w/v)，3)使氨基酸序列由Wie-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為 0. 015 ~ 1. 5% (w/v)，4)使所述滴眼液的pH在2.5 6. 5的范圍內(nèi)。
4.一種角膜障礙的治愈促進(jìn)效果優(yōu)異的滴眼劑的穩(wěn)定化方法，在含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸鹽和氨基酸序列由 Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽的滴眼劑中，1)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸鹽和氨基酸序列由 Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽的配合濃度比為1/15 1/20，2)使氨基酸序列由kr-kr-kr-Arg表示的肽的乙酸鹽的配合濃度為0.005 0. (w/ν),3)使氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的鹽酸鹽的配合濃度為0.1 (w/ν),4)使所述滴眼劑的pH在3.0 6. 0的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明的課題在于使滴眼劑的藥效最大化、副作用的發(fā)生最小化，改善滴眼劑的保存穩(wěn)定性，所述滴眼劑含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽(SSSR)或其藥學(xué)上允許的鹽和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽(FGLM)或其藥學(xué)上允許的鹽。通過使SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽和FGLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度比為1/15～1/50、使SSSR或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0.001～0.3％(w/v)、使FGLM或其藥學(xué)上允許的鹽的配合濃度為0.015～1.5％(w/v)，并且將滴眼劑的pH范圍保持在2.5～6.5，能夠?qū)崿F(xiàn)上述課題。
文檔編號(hào)A61P27/02GK102548575SQ20108004278
公開日2012年7月4日 申請日期2010年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月25日
發(fā)明者中村孝祐, 中村雅胤, 中田雄一郎, 長野敬 申請人:參天制藥株式會(huì)社