專利名稱：含有黃酮類的組合物的制備和使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃酮類的新穎的微顆粒和可溶的形式及其合成。本發(fā)明還包括這種黃酮類的新穎的制劑和生產(chǎn)該黃酮類制劑的新穎的方法。本發(fā)明還涉及該黃酮類制劑的各種應(yīng)用。
背景技術(shù)：
黃酮類被認(rèn)為可提供防癌作用的原理性植物衍生劑是黃酮類和膳食纖維(Patel，D, et al·，Apigenin and cancer chemoprevention:Progress，potential，and promise, Intl. J 0ncology2007Jan; 30 (I) :233-45)。化學(xué)預(yù)防是腫瘤學(xué)的 一個(gè)方面,其專注于通過自然存在的或合成的試劑來預(yù)防癌癥。黃酮類已被證實(shí)可充當(dāng)自由基清除劑、抗氧化劑、超氧陰離子、UV吸收劑和脂質(zhì)過氧自由基。黃酮類化合物也已知能有效地強(qiáng)化膠原蛋白結(jié)構(gòu)。此外，黃酮類已被證明可展示出抗誘變、抗炎和抗病毒的作用。所有黃酮類具有相同的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)，即三環(huán)分子。同族群中的各個(gè)黃酮類在取代基(羥基、甲氧基或糖類基團(tuán))的數(shù)量和位置方面各不相同。黃酮類具有如下通式(式I):
八jO
ry；黃酮類包括大約5000種自然存在的化合物?？砂l(fā)生大量的其他取代，產(chǎn)生了多種類型的黃酮類。皮膚癌皮膚癌的發(fā)展是一項(xiàng)主要的全球性公眾健康威脅。紫外線如太陽紫外線B(UVB) 和太陽紫外線A(UVA)的輻射是皮膚癌的主要誘因。盡管具有高SPF成分的防曬霜的出現(xiàn)和使用，基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌和黑色素瘤的發(fā)病率仍持續(xù)上升。早期檢測和治療對于提高存活率是必要的，然而皮膚癌很大程度上是可預(yù)防的癌癥。當(dāng)前的防曬霜制劑已證明了不足以使人體完全免受UV輻射的DNA損害作用。當(dāng)個(gè)體過度暴露于陽光下時(shí)，防曬霜的使用可能有時(shí)會(huì)造成安全的錯(cuò)覺。研究表明，黃酮具有抗氧化、抗誘變、抗癌、抗炎癥、抗增殖和抗惡化的特性 (Patel, D, et al. , Apigenin and cancer chemoprevention:Progress, potential, and promise, Intl. J Oncology 2007Jan; 30 (I) : 233-45)。此外，Birt 及其團(tuán)隊(duì)用活體小鼠模型證明了在UVB照射前外用涂敷芹菜素可將皮膚癌的發(fā)病率顯著地減少90%(Birt et al. , Anti-mutagenesis and anti-promotion by apigenin, robinetin and indole-3—car binol, Carcinogenesis, June 1986 ；7:959-963) 其他課題組已證明了芳:菜素的保護(hù)老鼠免受結(jié)腸癌的能力(Wang et al,Cell cycle arrest at G2/M and growth inhibition by apigenin in human cell colon carcinoma cell lines, Molecular Carcinogenesis, 28:
102-110(2000))o研究者已發(fā)現(xiàn)，芹菜素在細(xì)胞周期的Gl和G2/M階段可誘導(dǎo)可逆的細(xì)胞周期阻滯。 還發(fā)現(xiàn)了芹菜素通過多種機(jī)制在細(xì)胞周期中介導(dǎo)抑制，包括對有絲分裂激酶P34cdc2的直接和間接的抑制，以及以依賴于P53的方式對細(xì)胞周期抑制劑p21WAFl的誘導(dǎo)(I^pley DM, et al. , The chemopreventative flavonoid apigenin induces G2/M arrest in keratin ocytes, Carcinogenesis, 17, 2367-75 (1996))。Gl/S和/或G2/M細(xì)胞周期檢查點(diǎn)調(diào)控的喪失導(dǎo)致了轉(zhuǎn)化和癌癥發(fā)展。細(xì)胞周期的開始和發(fā)展主要受促使細(xì)胞增殖的原癌基因和用于減緩或中斷細(xì)胞生長的抑癌基因的控制。原癌基因和/或抑癌基因中的突變會(huì)通過縮短花費(fèi)在Gl或G2/M上的時(shí)間長度而使細(xì)胞易產(chǎn)生受損的G1/S檢查點(diǎn)。
其他皮膚病Kang、Ecklund、Liu 和 Datta (Arthritis Research&Therapy 2009, Vol. 11)教導(dǎo)了增加諸如芹菜素等源于食用植物的C0X-2和NF- K B抑制劑的生物利用率可對抑制狼瘡中的發(fā)炎和諸如銀屑病等的其他Thl7介導(dǎo)的疾病很有意義。作為非誘變性食用黃酮類，芹菜素通過抑制針對自身反應(yīng)性的Thl和Thl7細(xì)胞的擴(kuò)張的自身抗原表達(dá)而抑制了狼瘡。二甲基亞砜(DMSO)已被廣泛用于活體研究中，作為包括芹菜素等的許多不溶于水的黃酮類的溶劑。然而，出于毒性的考慮，當(dāng)考慮用于人類的外用制劑時(shí)，不推薦用二甲基亞砜作為溶劑。幾乎所有的致力于抗皮膚癌外用治療的芹菜素研究都用二甲基亞砜 (DMSO)來作為選擇的溶劑,這是因?yàn)榍鄄怂卦谒?小于0. 005毫克/毫升(mg/ml))和其他水性溶劑中的溶解性較差(Li et al, Evaluation of Apigenin and[G-3H], Apigenin and analytical method development, J. of Pharmaceutical Sciences. Vol. 86, No.6, June 1997)。此外，許多黃酮類幾乎不溶水和大致所有適用于藥物、化妝品和食品添加劑的溶劑中，從而阻礙了其直接用作外用組合物的組分。因此，需要提供一些方法，通過利用可用于外用的、藥物的、腹膜的、保健品和醫(yī)療食品應(yīng)用的可接受成分來增強(qiáng)包括黃酮的這些黃酮類的生物利用率。其他疾病作為酚類化合物的典型特征，黃酮類可充當(dāng)有效的抗氧化劑和金屬螯合劑。它們也在很久之前就已被公認(rèn)為具有抗炎、抗誘變、保肝、抗血栓、抗病毒和抗癌的活性。黃酮和兒茶酚是用于保護(hù)人體不受活性氧(ROS)侵害的非常有效的黃酮類。人體細(xì)胞和組織不斷地受到由自由基和ROS引起的傷害的威脅，所述自由基和ROS在正常的氧代謝中產(chǎn)生，或者由外源損害所誘發(fā)。黃酮類在許多動(dòng)物模型中的抗炎活性已被報(bào)導(dǎo)。 黃酮/黃酮類如芹菜素、木犀草素、山萘酚、槲皮素、楊梅酮、非瑟酮已被報(bào)導(dǎo)具有脂加氧酶 (LO)和環(huán)加氧酶(COX)的抑制活性(Jachak SM. Natural products:Potential source ofCOXinhibitors. CRIPS 2001;2 (I):12-15)。形成納米顆粒的方法Petersen的美國專利申請US2010/0047297公開了用于外用化妝品制劑的化合物如芹菜素的納米晶體。Liversidge等人的美國專利5145684公開了通過產(chǎn)生剪切、沖擊、氣蝕和磨耗力的機(jī)械手段來形成藥物的納米晶體的方法。Bosch等人的美國專利5510118類似地公開了通過產(chǎn)生剪切、沖擊、氣蝕和磨耗力的機(jī)械手段來形成藥物的納米晶體的方法。Muller等人的美國專利5510118公開了用于形成納米顆粒懸浮液的高壓均質(zhì)化
方法。 美國專利4826689描述了固體的無定形顆粒的制備方法，其中在溫度和注入速率的受控條件下向有機(jī)液體中的該固體的溶液中注入水性沉淀液，由此控制顆粒尺寸。固體材料的水性懸浮液可通過機(jī)械碎裂來制備,例如通過碾磨。美國專利5145684 描述了難溶化合物在水介質(zhì)中的懸浮液的濕磨法。在本領(lǐng)域中已經(jīng)知道，由沉淀直接得到的晶體分散體系會(huì)受到溶液攪動(dòng)的影響。本領(lǐng)域公知各種攪動(dòng)方法，例如機(jī)械混合、振動(dòng)、微波處理和聲波法(例如見于 W001/92293)。攪動(dòng)可通過包括超聲波攪動(dòng)等的多種技術(shù)來實(shí)現(xiàn)。得到的晶體通常具有1_6 微米的質(zhì)量中位直徑。US 5314506描述了一種結(jié)晶化方法，其中將含有物質(zhì)的溶液的噴射流與含有該物質(zhì)的抗溶劑的另一噴射流相互撞擊。相比于常規(guī)的緩慢結(jié)晶化方法，由撞擊的噴射流產(chǎn)生的快速混合導(dǎo)致了所形成的晶體的縮小。所公開的最小晶體是大約3微米，而大多數(shù)在3 到20微米的范圍內(nèi)。EP 275607描述了一種方法，其中將超聲波能量應(yīng)用在液相中的晶體的懸浮液中， 并使用超聲波來使預(yù)成型晶體碎裂。在通常情況下，所得晶體的體積平均直徑為10到40 微米。WO 03/059319描述了小顆粒的形成，其中通過向模板水包油乳狀液中加入溶解在與水不相溶的有機(jī)溶劑中的藥物溶液，然后將該與水不相溶的有機(jī)溶劑蒸發(fā)掉。然后例如用噴霧干燥法除去水，獲得粉末。美國專利6197349描述了一種形成無定形顆粒的方法，其中通過將結(jié)晶化合物熔融并將其與例如為磷脂的穩(wěn)定劑混合，然后用高壓均質(zhì)化法在升高的溫度下將該混合物分散至水中，之后降低溫度。Doseff的PCT/US2006/020905公開了用芹菜素或其衍生物來治療炎癥的方法。Hammerstone的美國專利申請US 2008/0227829公開了用包括芹菜素的神經(jīng)性化合物來治療患者的方法。Park等人的美國專利申請US2007/0154540公開了使用芹菜素作為軟骨再生劑來治療骨關(guān)節(jié)炎。Bing-Hua等人的美國專利申請US2007/0189680公開了芹菜素與治療劑相結(jié)合以用于化學(xué)預(yù)防和化學(xué)治療。Lintnera等人的美國專利申請US2006/0067905公開了使用芹菜素作為血管擴(kuò)張劑以用于治療脫發(fā)。透明質(zhì)酸(HA)透明質(zhì)酸是廣泛遍 布于結(jié)締組織、上皮組織和神經(jīng)組織中的帶負(fù)電荷的、非硫酸化的糖胺聚糖。它在糖胺聚糖類中是獨(dú)特的，因?yàn)樗欠橇蛩峄?，在質(zhì)膜中而不是在高爾基體中形成，并且它可以非常大，分子量通?？蛇_(dá)到數(shù)百萬。作為細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分中的一種，透明質(zhì)酸可顯著地促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移。諸如HA的多糖是相對復(fù)雜的糖類。多糖是由許多單糖通過糖苷鍵結(jié)合起來而構(gòu)成的聚合體。因此，糖苷鍵是較大的、通常為分枝狀的大分子。多糖在化妝品和醫(yī)藥應(yīng)用中很有用處。例如，HA在皮膚應(yīng)用中被用作結(jié)構(gòu)穩(wěn)定化填充劑。Gervasio-Nugent等人的美國專利申請2005/0271692公開了含有黃酮類和透明質(zhì)酸的外用化妝品組合物。Morariu的美國專利申請2006/021625公開了用于改善老化皮膚的外觀的外用制劑及其使用方法。優(yōu)選的組分包括例如芹菜素的黃酮類和透明質(zhì)酸。表面活性劑聚山梨醇酯(商業(yè)上也稱為吐溫類)是衍生于聚乙氧基山梨聚糖和脂肪酸的非離子表面活性劑和乳化劑。它們通常用于食品和化妝品中，以使精油在水基產(chǎn)品中增溶。聚山梨醇酯是粘性的、水溶性的淡黃色液體。聚山梨醇酯還可通過減少待乳化物質(zhì)的表面張力來有助于形成乳狀液。聚山梨醇酯被公認(rèn)具有這樣的能力，即有助于一些成分溶解在它們通常情況下不能溶解的溶劑中。聚山梨醇酯用于分散水包油而不是油包水。通過將多元醇、山梨醇和環(huán)氧乙烷反應(yīng)來制備聚山梨醇酯。聚氧乙烯山梨聚糖隨后與從例如硬脂酸、月桂酸和油酸等的植物油脂中獲得的脂肪酸進(jìn)行反應(yīng)。作為單純(非聚乙二醇化的)山梨聚糖和脂肪酸的酯的表面活性劑通常稱為司盤。Gupta的美國專利7329797公開了抗衰老化妝品輸送系統(tǒng)，包括使用如芹菜素等黃酮類作為抗炎劑和使用聚山梨醇酯表面活性劑作為乳化劑的應(yīng)用。Higuchi等人的美國專利申請2006/0229262公開了用于治療具有耐藥菌的傳染病的藥物組合物，包括作為活性成分的諸如芹菜素的黃酮類和作為乳化劑的聚山梨醇酯。研究已經(jīng)證實(shí)，芹菜素在減緩哮喘發(fā)病的過程中起關(guān)鍵的作用。近來的流行病學(xué)研究報(bào)道了在黃酮類高攝入的人群中，明顯觀察到哮喘的低發(fā)病率。鑒于以上所述情況，非常希望將黃酮類、例如芹菜素和木犀草素等黃酮作為外用制劑的一部分以幫助預(yù)防和/或治療由陽光暴曬作用導(dǎo)致的皮膚損害或皮膚癌，并且還提供可用于治療各種皮膚病癥狀的皮膚治療組合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種包含水合的微顆粒黃酮類和載體的組合物。通常情況下，該黃酮類在水中的溶解度小于lmg/ml,或小于O. lmg/mlo該微顆粒黃酮類的平均尺寸為200-500 納米，或者有利的是平均尺寸為250納米。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物是藥物組合物，而所述載體是藥學(xué)上可接受的載體。該組合物可包括透明質(zhì)酸，而載體典型地包括可防止或減少微粒聚集的化合物、分散劑或促滲劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物是膠體、納米懸浮液或乳狀液的形式。該組合物可以是營養(yǎng)食品、膳食補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑或者醫(yī)療食品O本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種包含黃酮類和例如為表面活性劑的熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物的組合物，其中所述組合物通過將該黃酮類和該化合物混合至使所述黃酮類溶解在所述化合物中的溫度來形成。通常情況下，該組合物進(jìn)一步包含選自乙醇、異丙醇和苯甲醇、乙氧基二甘醇和二甲基異山梨醇中的醇。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物是藥物組合物，所述載體是藥學(xué)上可接受的載體。該組合物可包含透明質(zhì)酸和/或促滲劑。 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物是乳狀液或微乳狀液的形式。該組合物可以是營養(yǎng)食品、膳食補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑或者醫(yī)療食品。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是用于透皮式施加黃酮類的膏藥，該膏藥由具有兩個(gè)面的基片組成，第一面具有本發(fā)明的組合物和粘合劑，而另一面帶有不能滲透到第一面上的組合物和粘合劑的材料。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是制備水合黃酮類的方法，包括將黃酮類與堿金屬的氫氧化物混合，以形成堿金屬黃酮類鹽的水溶液；用酸性劑將堿金屬黃酮類鹽的水溶液酸化至pH值低于7，以形成水合黃酮類沉淀物，其中，酸化步驟通常在產(chǎn)生具有50-1000納米、 更有利的是200-500納米的平均尺寸且長寬比測得為大于20的納米纖維的條件下進(jìn)行。在酸化步驟之后可以是調(diào)節(jié)PH值至小于7和過濾沉淀物的步驟。然后可將沉淀物洗滌并干燥。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是制備水合黃酮類的方法，包括將黃酮類溶解在非毒性的有機(jī)溶劑中，以形成混合物；以及向混合物中添加水以形成水合黃酮類沉淀物，其中， 添加水的步驟在產(chǎn)生具有50-1000納米、更有利的是200-500納米的平均尺寸且長寬比測得為大于20的納米纖維的條件下進(jìn)行。通常情況下，溶解步驟在比有機(jī)溶劑的沸點(diǎn)低約 20°C的溫度下進(jìn)行。有機(jī)溶劑可選自二甲基異山梨醇、乙氧基二甘醇和二甲基亞砜。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是形成水合黃酮類的外用制劑的方法，包括將黃酮類與堿金屬的氫氧化物在水中混合，以形成堿金屬黃酮類鹽溶液；將堿金屬黃酮類鹽溶液加入到皮膚病學(xué)上可接受的載體中；以及將該制劑的pH值調(diào)節(jié)至皮膚病學(xué)上可接受的pH值 (例如4-8)，其中，pH值調(diào)節(jié)步驟在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是制備水合黃酮類的外用制劑的方法，包括將黃酮類溶解在醇中；將醇溶解的黃酮類加入到皮膚病學(xué)上可接受的載體中；調(diào)節(jié)該制劑的PH值至皮膚病學(xué)上可接受的pH值(例如4-8)，其中，調(diào)節(jié)pH步驟在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。一種制備黃酮類外用制劑的方法，包括將黃酮類加入到乳狀液載體中，以形成混合物；加熱(例如至大約120° F-170° F)該混合物，直到其具有與水近似的粘度(或者是可以獲得分散體系的粘度)；在混合物中形成微粒的分散體系。通常情況下，該乳狀液是水包油或者油包水的乳狀液，并且該乳狀液含有穩(wěn)定劑、分散劑或表面活性劑，或者另外的穩(wěn)定齊U，以抑制微粒的聚集。在一個(gè)實(shí)施方案中，形成分散體系的步驟通過超聲處理或高壓均質(zhì)化來完成。
本發(fā)明的另外一個(gè)實(shí)施方案是制備增溶的黃酮類組合物的方法，包括將黃酮類顆粒與諸如表面活性劑的熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物混合，以形成混合物；加熱該混合物至使黃酮類顆粒溶解的溫度；以及冷卻溶液。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物是非離子表面活性劑。通常情況下，在加熱混合物的時(shí)候進(jìn)行攪拌，并且添加多達(dá) 10wt%的黃酮類化合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，表面活性劑是聚山梨醇酯。在加熱或冷卻步驟之后是將溶液加入到皮膚病學(xué)的、口服的、可注射的、皮膚膏藥或者氣霧劑載體中的步驟。通常情況下，向溶液中加入小支鏈的醇以形成粘度減小的溶液，該醇選自乙醇、異丙醇、苯甲醇、乙氧基二甘醇和二甲基異山梨醇。本發(fā)明還涉及一種減少和/或防止陽光暴曬后果的方法，包括涂敷治療有效量的防曬霜制劑于皮膚上，該防曬霜包含水合的或增溶的黃酮類，以及可使黃酮類傳輸至云角質(zhì)和上皮的載體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該制劑還含有礦物氧化物，以提供額外的紫外線陽光暴曬保護(hù)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療陽 光暴曬后果的方法，包括在陽光損害的皮膚上涂敷治療有效量的制劑，該制劑含有水合的或增溶的黃酮類，以及可使黃酮類輸送至云角質(zhì)和上皮的載體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及減少哺乳動(dòng)物患癌癥的可能性或治療哺乳動(dòng)物的癌癥的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予預(yù)防性劑量或治療有效量的本發(fā)明的制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物的炎癥的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的本發(fā)明的制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物的諸如痤瘡、脫發(fā)、皮膚致敏和過敏、干燥皮膚(干燥病、魚鱗癬)、真菌感染和酒渣鼻、接觸性皮膚病等的皮膚疾病或皮膚不適的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的本發(fā)明的制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物的諸如銀屑病、狼瘡、關(guān)節(jié)炎等的自身免疫疾病的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的本發(fā)明的制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種治療變應(yīng)性疾病過敏癥、哮喘、過敏性皮炎 /濕疹的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的本發(fā)明的制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物中的TNFa相關(guān)疾病或者減少其可能性的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量或預(yù)防性量的本發(fā)明的黃酮類制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物中的IL-I β相關(guān)疾病或者減少其可能性的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量或預(yù)防性量的本發(fā)明的黃酮類制劑。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是形成維生素黃酮的均質(zhì)固體混合物的方法，包括將維生素加熱至熔化，其中維生素是選自維生素Β3、維生素Β5以及包含至少一種前述維生素的結(jié)合物；將黃酮溶解在熔化的維生素中，以形成維生素黃酮液體混合物；以及冷卻該維生素黃酮液體混合物，以形成均質(zhì)的固體混合物。


圖I是在10，000Χ的放大倍率下放大顯示了未加工的芹菜素粉末的晶體形狀的典型的掃描電子顯微鏡(SEM)圖。
圖2顯示了未加工的芹菜素粉末的典型的“體積頻率”顆粒分布圖。圖3顯示了未加工的芹菜素的典型的“累積細(xì)化體積”顆粒分布圖。圖4是水合芹菜素樣品的典型的掃描電子顯微鏡(SEM)圖。該典型的水合芹菜素樣品展示出來的形態(tài)和如圖I所示的未加工樣品所展示出來的形態(tài)有很大差異。圖5和圖6是來自3批分別生產(chǎn)的“水相乳液”的顆粒尺寸分布圖。幾乎所有的芹菜素顆粒都小于I微米。圖7是在水相乳液中含有12.5%黃酮類濃度的療菜素、木犀草素、蕓香苷和槲皮素的“累積顆粒尺寸分布”圖。圖8顯示了在水中的I. 25%的未加工槲皮素相比于通過實(shí)施例2中所述方法制備的、包含在水相乳液中的I. 25%的“水合芹菜素”的顆粒尺寸分布的比較。 圖9是表明了在未加工的聚山梨醇酯80對照樣品和熱處理的聚山梨醇酯80樣品之間的微小化學(xué)組成差異的質(zhì)譜圖。圖10是顯示了對于含有I. 5%芹菜素濃度的幾種所施加的外用制劑來說，沉積在人體組織的表皮、真皮和接收液區(qū)域的芹菜素含量的圖示。圖11是顯示了對于含有I. 5%芹菜素濃度的幾種所施加的外用制劑來說，沉積在鼠科動(dòng)物組織的表皮、真皮和接收液區(qū)域的芹菜素含量的圖示。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明涉及黃酮類、制劑、食品補(bǔ)充劑和藥物組合物的新形式及其制備和使用方法。I 一本發(fā)明的化合物一些常見的植物黃酮類的化學(xué)結(jié)構(gòu)列于表I中。表I 一些常見的植物黃酮類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)—代表性的黃酮類—I
Ir:
黃綱RjRi^H, R2—Ο.Η:芹菓素j
IL JC.Rl=RZ=OH:木犀草素丨
Oi
IP
黃酮醇『.炎.1:·^.-"·-,R2.=OH. K i二Κ3=ΙΙ:山萘驗(yàn)
iI" Jl 丨 KI=H=OH, R3 = H:槲皮素
ro^pTpT —.ri=r2=k3=ok::楊梅酮 !'O· O
^ 異黃酮KJ=H..大豆甙元
κ 1 ^om 染料木黃酮‘_
黃坑醇RjRl= H2=0H. R3=H-兒茶酴
JT------JO!OOl 1:沒食子兒茶素
R1
I
%#π
二氫黃酮^R I r I-1, R 2-011:槲皮素
jjfR 〗=K 2=0Hf:圣草歡
R I-OH* R2^0C；'I13:橘皮苷
B、I
花色素I cmRl=H, R2=H:花塞音；
f=|fWRbOH, R+2=H:花青色素
:^ftsKI=R2-OU:
' U I JRI=C 0'13, R.2=C:,H.:雜牟氙音|
X 一—，__&錦葵色素__黃酮類包括黃酮(例如芹菜素、木犀草素)、黃酮醇(例如槲皮素、楊梅酮)、二氫黃酮(例如柚皮素、橘皮苷)、黃烷醇(或兒茶酚)(例如表兒茶素、沒食子兒茶素)、花色素(例如花青色素、花葵素)，以及異黃酮(例如染料木黃酮、大豆甙元)。芹菜素是黃酮結(jié)構(gòu)種類中的一員，化學(xué)上稱為4’，5，7-三羥基黃酮。芹菜素具有如下的結(jié)構(gòu)式(式II):
II
^γΟΗ H。Nv-if^svXO vy^SSi5x^
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木犀草素也是黃酮結(jié)構(gòu)種類中的一員，化學(xué)上稱為3’，4’，5，7-四羥基黃酮。木犀草素具有如下的結(jié)構(gòu)式(式III):
權(quán)利要求
1.一種組合物，包括 水合微顆粒黃酮類，和 載體。
2.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，黃酮類在水中的溶解度小于lmg/ml。
3.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，黃酮類選自黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、黃酮醇(或」L茶酚)、花色素和異黃酮。
4.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，黃酮類是選自芹菜素和木犀草素的黃酮。
5.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，微顆粒黃酮類具有50-1000納米的平均尺等。
6.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包含透明質(zhì)酸。
7.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，載體包括防止或減少水合微顆粒黃酮類的聚集的化合物。
8.如權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，組合物的形式為保健品、膳食補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑或醫(yī)療食品。
9.一種組合物,包括 黃酮類，和 熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物， 其中，所述組合物通過將黃酮類和所述熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物混合至所述黃酮類溶解于所述表面活性劑中的溫度來形成。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其特征在于，黃酮類是芹菜素，而所述熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物是非離子表面活性劑。
11.如權(quán)利要求9所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包括醇。
12.如權(quán)利要求9所述的組合物，其特征在于，其中組合物的形式為保健品、膳食補(bǔ)充齊U、食品補(bǔ)充劑或醫(yī)療食品。
13.一種用于透皮式施用黃酮類的膏藥，包括具有兩個(gè)面的基片，第一面具有根據(jù)權(quán)利要求I或9所述的組合物和粘合劑，而第二面帶有不能滲透到第一面上的組合物和粘合劑中的材料。
14.一種生產(chǎn)水合黃酮類的方法，包括 將黃酮與堿金屬氫氧化物混合，以形成堿金屬黃酮鹽的水溶液； 用酸性劑將堿金屬黃酮類鹽的水溶液酸化至小于7. 0的pH水平，以形成水合黃酮類沉淀物； 其中，酸化步驟是在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于，在酸化步驟之后是過濾沉淀物的步驟。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，過濾步驟包括將酸化步驟的產(chǎn)物調(diào)節(jié)至PH值小于7，以及用大于2微米的過濾器將材料過濾。
17.—種生產(chǎn)水合黃酮類的方法，包括 將黃酮類溶解在無毒有機(jī)溶劑中，以形成混合物；和 向所述混合物中加入水，以形成水合黃酮類沉淀物；其中，加水步驟在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其特征在于，溶解步驟在低于有機(jī)溶劑的沸點(diǎn)大約20°C的溫度下進(jìn)行。
19.如權(quán)利要求17所述的方法,其特征在于,水合黃酮選自水合療菜素和水合木犀草素。
20.一種形成水合黃酮類的外用制劑的方法，包括 將黃酮類在水中與堿金屬氫氧化物混合，以形成堿金屬黃酮類鹽溶液； 將所述堿金屬黃酮類鹽溶液加入到皮膚病學(xué)上可接受的載體中； 調(diào)節(jié)制劑的PH至皮膚病學(xué)上可接受的pH ； 其中，調(diào)節(jié)PH步驟在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，將制劑的pH值調(diào)節(jié)至4到8。
22.—種制備水合黃酮類的外用制劑的方法，包括 將黃酮類溶解在醇中； 將醇溶解的黃酮類加入到皮膚病學(xué)上可接受的載體中； 調(diào)節(jié)制劑的PH值至皮膚病學(xué)上可接受的pH值； 其中，調(diào)節(jié)PH步驟是在產(chǎn)生具有50-1000納米的平均尺寸的黃酮類納米纖維的條件下進(jìn)行。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其特征在于，將制劑的pH值調(diào)節(jié)至4到8。
24.一種制備黃酮類的外用制劑的方法，包括 將黃酮類加入到乳狀液載體中，以形成混合物； 加熱所述混合物，直至其具有與水近似的粘度；和 利用氣蝕作用力來形成混合物中的微顆粒的分散體系。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其特征在于，乳狀液是水包油或油包水乳狀液。
26.如權(quán)利要求24所述的方法，其特征在于，形成分散體系的步驟利用超聲處理或高壓均質(zhì)化來完成。
27.如權(quán)利要求24所述的方法，其特征在于，將混合物加熱至大約120°F-170。F。
28.如權(quán)利要求24所述的方法，其特征在于，乳狀液包括抑制微顆粒聚集的試劑。
29.—種制備增溶的黃酮類組合物的方法，包括 將黃酮類顆粒與熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物混合，以形成混合物； 加熱所述混合物至黃酮類顆粒被增溶的溫度，以形成溶液；和 冷卻所述溶液。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其特征在于，熱穩(wěn)定的黃酮類增溶化合物是非離子表面活性劑。
31.如權(quán)利要求30所述的方法，其特征在于，非離子表面活性劑是聚山梨醇酯，而黃酮類是芹菜素。
32.如權(quán)利要求29所述的方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括向溶液中加入小鏈醇以形成粘度減小的溶液。
33.一種減少和/或預(yù)防陽光暴曬后果的方法，包括在皮膚上涂敷治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的防曬霜制劑。
34.一種治療陽光暴曬后果的方法，包括在陽光損傷的皮膚上涂敷治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的制劑。
35.一種治療哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的制劑。
36.一種減小在哺乳動(dòng)物中發(fā)生癌癥的可能性的方法，包括對哺乳動(dòng)物給予預(yù)防性量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的制劑。
37.一種治療哺乳動(dòng)物中的痤瘡、脫發(fā)、皮膚致敏和過敏、干燥皮膚(干燥病、魚鱗癬)、真菌感染和酒渣鼻、接觸性皮膚病的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的制劑。
38.一種治療哺乳動(dòng)物中的自身免疫性疾病的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的制劑。
39.如權(quán)利要求38所述的方法，其特征在于，自身免疫性疾病選自銀屑病、狼瘡和關(guān)節(jié)炎。
40.一種治療在哺乳動(dòng)物中的TNFa相關(guān)疾病的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的黃酮類制劑。
41.一種減小發(fā)生在哺乳動(dòng)物中的TNFa相關(guān)疾病的可能性的方法，包括對哺乳動(dòng)物給予預(yù)防性量的如權(quán)利要求I或9所述組合物的黃酮類制劑。
42.一種治療哺乳動(dòng)物中的IL-I P相關(guān)疾病的方法，包括對需要這種治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的包括如權(quán)利要求I或9所述組合物的黃酮類制劑。
43.一種減小發(fā)生在哺乳動(dòng)物中的IL-I 3相關(guān)疾病的可能性的方法，包括對哺乳動(dòng)物給予預(yù)防性量的如權(quán)利要求I或9所述組合物的黃酮類制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及新穎的微粒和可溶形式的黃酮類及其合成。本發(fā)明還包括這些黃酮類的新穎的制劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明包括制造該黃酮類制劑的新穎的方法。本發(fā)明還涉及該黃酮類制劑的廣泛應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/00GK102711743SQ201080058485
公開日2012年10月3日 申請日期2010年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月22日
發(fā)明者菲利普·J·比爾巴拉 申請人:Api起源有限責(zé)任公司