專利名稱：肽類的粘膜遞送的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開(kāi)涉及用于粘膜遞送肽類的組合物以及方法，具體地口腔粘膜遞送用于通過(guò)口腔粘膜進(jìn)行吸收。
背景技術(shù)：
肽基(肽類)藥物典型地是通過(guò)注射遞送的，因?yàn)橥ㄟ^(guò)攝食進(jìn)行ロ服遞送通常受較差的內(nèi)在滲透性以及在胃腸道內(nèi)(GI)降解所妨礙。然而，潛在的治療益處仍然是顯著的，包括易于使用以及更好的全部病人順應(yīng)性。對(duì)于多種肽類以及肽配制品而言，將肽類跨多個(gè)粘膜(例如在GI道、肺、鼻腔以及口腔中找到的)粘膜遞送到宿主血流中是可能的。然而，到達(dá)體循環(huán)的未改變肽的給予劑量的分?jǐn)?shù)(即，生物利用率(生物利用度))根據(jù)遞送的具體途徑、肽以及配制品而正常改變。因此，通過(guò)粘膜途徑非侵入性遞送肽類藥物提供了顯著的靈活性?！だ纾ㄟ^(guò)口腔粘膜遞送藥物提供通過(guò)頸內(nèi)靜脈直接進(jìn)入體循環(huán)，允許它們繞過(guò)腸以及肝臟首過(guò)代謝，并且進(jìn)入血流以便快速起效。這樣，口腔中的粘膜內(nèi)層(lining)代表用于遞送較大治療分子例如胰島素、干擾素類、以及白血病介素類(白介素類)的有希望的局部途徑(Veuillez et al. , Eur. J. Pharm. Biopharm. (2001) 51:93-109 ;和 Sudhakaret al. , J. Control. Release(2006) 114:15 - 40 ；以及 Amin et al. , Drug DeliveryTechnology(2007)7(3)48，50-55)。口腔粘膜遞送較大分子的ー個(gè)缺點(diǎn)是它們較差的總生物利用率。在此方面，已經(jīng)探索了多種方法用來(lái)改善肽類的口腔粘膜吸收，包括使用吸收促進(jìn)劑用來(lái)増加粘膜滲透性和/或添加酶抑制劑類用來(lái)増加藥物穩(wěn)定性。許多物質(zhì)可以用作吸收促進(jìn)劑，最常見(jiàn)的一種是基于細(xì)胞間脂類溶解作用的去污劑類(洗滌劑類)例如膽汁酸鹽類、十二烷基硫酸鈉等(Aungst et al. , Intl. J. Pharmaceutics (1989) 53 (3) : 227-35;Druker, D. J. , CurrPharm Design(2001)7(14):1399-1412;以及 Berstein, G.，Drug Development Res.(2006)67(7) : 597-599)。還使用了環(huán)狀化合物類例如冠狀物類(W0 08/037484)。已經(jīng)報(bào)道裝填有藥物的儲(chǔ)存器型設(shè)備，連同作為滲透促進(jìn)劑的膽酸鹽一起，用于頰遞送胰島素(美國(guó)專利號(hào)4，671，953,4, 863，737、5122127、以及5，132，114)。已經(jīng)報(bào)道由大豆磷脂酰膽堿、膽固醇、以及脫氧膽酸鈉組成的脂囊泡也增強(qiáng)了胰島素生物利用率(Yanget al. ,Chem. Pharm. Bull. (2002)50:749 - 753)。已經(jīng)報(bào)道了由包含胰島素和不飽和脂肪酸(例如油酸(18:1)、二十碳五烯酸(20:5)、或二十ニ碳六烯酸(22:6))的Pluronic F-127(PF-127)組成的凝膠(Morishita et al. , Int. J. Pharm. (2001)212:289 - 293)。還針對(duì)多種分子(例如a-干擾素以及胰島素)報(bào)道了卵清酸的吸收促進(jìn)劑(它是卵白蛋白和弱去污劑喊水解的產(chǎn)物)(Starokadomskyy et al. , Int. J. Pharm. (2006)308:149 - 154)。針對(duì)頰遞送類高血糖素促胰島素肽(GLP-I)已經(jīng)報(bào)道了多種遞送系統(tǒng)(美國(guó)專利號(hào)5，863，555以及 5，766，620)。還報(bào)道了多種粘膜粘著劑型用來(lái)増加在口腔中的遞送系統(tǒng)的停留時(shí)間(Ishida et al. , Chem. Pharm. Bull. (1981)29:810 - 816;以及 Senel et al. , Curr.Pharm. Biotechnol. (2001) 2:175-186),包括例如球?；恼衬ふ持w聚合體納米顆粒(Venugopalan et al.，Pharmazie (2001) 56:217 - 219),以及粘膜粘著劑片劑(Hosny etal.，Boll. Chim. Farm. (2002) 141:210—217)。還報(bào)道了使用不同溶劑的粘膜劑型，例如胰島素連同大豆卵磷脂和丙ニ醇(Xu etal. , Pharmacol. Res. (2002)46:459467)，以及使用非極性溶劑的頰部氣霧噴霧和的膠囊(美國(guó)專利號(hào)5，955，098)。已經(jīng)報(bào)道了肺部遞送不同有機(jī)溶劑的溶液或懸浮液的配制品，例如，其中該溶劑是第3類殘留溶劑例如こ醇、丙酮、こ酸こ酷、四氫呋喃、こ醚、以及丙醇(US6，660，715)。盡管有了多種進(jìn)步，這些粘膜遞送系統(tǒng)通常包括呈現(xiàn)多種副作用的吸收增強(qiáng)配制品，例如引起口腔或氣道中多種粘膜內(nèi)層的刺激作用。另ー個(gè)問(wèn)題是許多組合物令人厭惡的味道，具體地對(duì)于膽汁鹽類而言，意味著有可能產(chǎn)生病人接受和順應(yīng)性的問(wèn)題。ー個(gè)不同 的問(wèn)題涉及針對(duì)生物學(xué)作用、存儲(chǔ)穩(wěn)定性、以及再現(xiàn)性遞送足夠數(shù)量的活性肽成分所需要的體積。這類缺點(diǎn)意味著未能滿足對(duì)于用于給予具有穩(wěn)定性、良好的耐受性，提供增強(qiáng)的以及可靠的粘膜遞送，具體地口腔粘膜遞送，以及適合用于治療哺乳動(dòng)物受試者體內(nèi)疾病以及其他不利病癥的肽類組合物以及方法的需要。對(duì)于以治療量通過(guò)ー種或多種粘膜途徑提供較大藥物(例如肽類)有效遞送的方法以及組合物存在相關(guān)需要，它們是快速起效，易于給藥的，具有有限的不良副作用(例如粘膜刺激或組織損傷)，并且可再現(xiàn)。對(duì)于具有改善的穩(wěn)定性的肽類的非水性藥物以及診斷組合物也存在需要。ー個(gè)另外的需要涉及制造這類材料，以及它們的組合物。本公開(kāi)著手解決這些以及其他需要。相關(guān)文獻(xiàn)在下面報(bào)告了多種肽、用途、配制品和遞送途徑以及系統(tǒng)美國(guó)專利號(hào)4，671，953、4，863，737、5，122，127、5，132，114、5，346，701,5, 424，286、5，545，618、5，614，492,5,631，224,5,766，620,5,869，082,6,268，343,6, 312，665,6, 375，975、6，436，367,6, 451，286,6, 458，924,6, 660，715,6, 676，931,6, 770，625,6, 867，183、6，902，744,6, 969，508,6, 977，070,6, 998，110,7, 030，082,7, 070，799,7, 169，410、7，196，059 ;以及國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩0 9715297、TO/1999/016417、TO/2002/064115、TO/2003/024425、TO/2004/105790、W0/2006/025882、W0/2006/037811、TO/2006/103657、TO/2006/105615、TO/2006/127361、TO/2006/135930、W0/2007/014391、TO/2007/065156、W0/2007/067964, W0/2007/083146, W0/2007/121256, W0/2007/146448, W0/2008/037484、TO/2008/145728、TO/2008/145732、以及 TO/2008/016729 ；多種參考文獻(xiàn)討論了對(duì)皮下注射(s. c.)肽類以及用途的替代方案，包括經(jīng)ロ、ロ內(nèi)(頰/舌下)、直腸、經(jīng)皮、鼻內(nèi)、以及肺內(nèi)給藥途徑T0Uit0U，E.，J.Controlled Rel (1992)21:139-144;Amin et al., Drug Delivery Technology (2007) 7 (3)48，50-55;Aungst et al., Pharmaceutical Research(1988) 5 (5) :305-308;Aungst et al., Intl.J.Pharmaceutics (1989) 53 (3):227-35;Berstein, G. , Drug Development Res. (2006)67 (7):597-599;Druker,D.J.,Curr Pharm Design (2001)7 (14):1399-1412;Hosny et al.,Bollettino Chimico Farmaceutico(2002),141 (3) :210-217;Khafagy et al. , Advanced Drug Delivery Reviews(2007) 59(15):1521-1546;Lassmann-Vague et al.,Diabetes& Metabolism(2006) 32 (5, Pt2) :513-522;Morishita et al. , Intl. J. Pharmaceutics(2001) 212 (2):289-293 ; Pate
Iet al. , Drug Delivery Technology(2006)6(3)48-60;Pillion et al. , J. Pharm.Sci. (1995)84(II):1276-1279;Portero et al,Carbohydrate Polymers(2007)68(4):617-625;Pozzilli et al. , Metabolism, Clinical and Experimental(2005)54(7):930-934;Owens, D. R. , Nature Reviews Drug Discovery (2002)I (7):529-540;Rossi etal. , American J. Drug Delivery(2005)3(4):215-225;Sadrzadeh et al. , J. Pharm Sci (2007) 96(8) :1925-1954;Starokadomskyy et al. , Intl. J. Pharmaceutics (2006)308 (1-2)
:149-154;Xu et al. , Pharmacological Research(2002)46(5:459-467;Yang et al. , S.T. P. Pharm. Sciences(2001) 11 (6):415-419 ; Yang et al. , Chemical & PharmaceuticalBulletin(2002)50(6):749-753 ；Klibanov等人(1995同上)報(bào)告了從不同pH的水溶液中冷凍干燥多種生物分子 以及它們隨后在甲醇以及こ醇中的溶解度。US 2006/0178304公開(kāi)了從不同pH的水溶液或懸浮液中冷凍干燥多種類高血糖素肽類(glucagon-1 ike peptides)以及它們隨后在水溶液或懸浮液中的溶解度。

發(fā)明內(nèi)容
提供了與粘膜遞送的肽活性劑相關(guān)的組合物以及方法。這些粘膜遞送組合物包括一種有效量的與溶于處于與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同的PH下的非水性疏水載體中的冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤。還提供了包括預(yù)形成的肽復(fù)合物的組合物，該復(fù)合物包括與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，其中該預(yù)形成的肽絡(luò)合物是從具有與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥的。另外的組合物包括有效量的與溶于處于與該肽活性劑等電點(diǎn)不同的PH下的非水性疏水載體中的反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，其中與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑是從具有與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥的，并且其中在許多實(shí)施方式中該非水性疏水載體包括至少一種?；视鸵约爸辽侃`種有機(jī)溶劑和/或脂類。進(jìn)ー步提供了受試者組合物的藥物和/或診斷制劑。還提供了多種生產(chǎn)方法。在某些實(shí)施方式中，該方法包括在處于與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同的PH下的非水性疏水載體中預(yù)形成可溶性肽復(fù)合物，該肽復(fù)合物包括有效量的與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤。還提供了用于生產(chǎn)包括與冠狀化合物以及反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑的預(yù)形成的肽復(fù)合物的方法，該方法涉及(i)在具有與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中預(yù)形成肽復(fù)合物，以及(ii)在保留與該肽活性劑締合用于穩(wěn)定該肽活性劑的足夠量水的條件下從溶液或懸浮液中將該肽復(fù)合物干燥，由此生產(chǎn)該預(yù)形成的肽復(fù)合物。提供了另ー種涉及將有效量的與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑溶于處于與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同的pH下的非水性疏水載體中的方法，其中與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑是從具有與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥的，并且其中在許多實(shí)施方式中該非水性疏水載體包括至少ー種?；视鸵约爸辽侃`種有機(jī)溶劑和/或脂類。還提供了用于將有效量的肽活性劑粘膜遞送到需要它的宿主體內(nèi)的方法。該方法涉及將有效量的本公開(kāi)的粘膜遞送組合物施用到受試者的粘膜中，其中該施用將有效量的肽活性劑遞送到宿主的血流中。在一個(gè)特征的實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物是口腔粘膜遞送組合物，并且該粘膜是口腔粘膜。進(jìn)ー步提供了在實(shí)踐目標(biāo)方法中找到用途的試劑盒。在某些 實(shí)施方式中，該試劑盒包括有效量的本公開(kāi)的粘膜遞送組合物，和/或它的組分，這些組分以不同組合的形式以當(dāng)組合時(shí)能夠預(yù)形成粘膜遞送組合物的有效量各自獨(dú)立地提供于該試劑盒中。這些目標(biāo)方法和組合物在廣泛的不同應(yīng)用中找到用途，包括治療多種不同疾病病癥。說(shuō)明在此公開(kāi)的方法以及組合物的顯著優(yōu)點(diǎn)的一個(gè)示例性應(yīng)用是增強(qiáng)了肽的粘膜遞送，以及具體地，通過(guò)預(yù)形成并且使用保持在肽復(fù)合物以及非水性疏水載體中的肽活性剤的穩(wěn)定水合形式賦予可靠地可重現(xiàn)的粘膜遞送。目標(biāo)組合物和方法對(duì)于粘膜遞送肽激素類是特別有用的，例如可以影響體內(nèi)血糖水平用于治療糖尿病、肥胖癥、以及相關(guān)失調(diào)的類高血糖素肽-I以及通過(guò)利拉魯肽(Iiraglutide)和艾塞那肽-4 (exendin-4)(依澤那太(exenatide))舉例說(shuō)明的它的類似物。因此，在某些實(shí)施方式中，提供了用于粘膜遞送肽活性劑用于治療糖尿病、肥胖癥、以及相關(guān)失調(diào)的具體組合物和方法。在此說(shuō)明了本公開(kāi)的其他特征，并且當(dāng)閱讀本公開(kāi)時(shí)對(duì)于普通技術(shù)人員也應(yīng)當(dāng)是易于清楚的。


圖I繪出了一組結(jié)果，這些結(jié)果證明了在代表性粘膜遞送組合物中該類型反離子對(duì)舌下遞送艾塞那肽_4的影響，以及如通過(guò)腹膜內(nèi)葡萄糖耐受測(cè)試(IPGTT)測(cè)量的小鼠體內(nèi)葡萄糖水平的降低。圖2繪出了一組結(jié)果，這些結(jié)果證明了在代表性粘膜遞送組合物中改變載體pH對(duì)舌下遞送艾塞那肽_4的影響，以及如通過(guò)IPGTT測(cè)量的在小鼠體內(nèi)葡萄糖水平的降低。圖3繪出了一組結(jié)果，這些結(jié)果證明了在代表性粘膜遞送組合物中改變化學(xué)計(jì)量數(shù)量以及冠狀化合物和反離子相對(duì)于肽的比率對(duì)舌下遞送艾塞那肽-4的影響，以及如通過(guò)IPGTT測(cè)量的在小鼠體內(nèi)葡萄糖水平的降低。圖4繪出了一組結(jié)果，這些結(jié)果證明了在代表性粘膜遞送組合物中水含量以及加エ條件對(duì)舌下遞送艾塞那肽_4的影響，以及如通過(guò)IPGTT測(cè)量的在小鼠體內(nèi)葡萄糖水平的降低。定義當(dāng)說(shuō)明化合物、包含這類化合物的藥物組合物以及使用這類化合物以及組合物的方法時(shí)，除非另外指出，否則下面術(shù)語(yǔ)具有如下含義。還應(yīng)當(dāng)理解的是可以用多種取代基來(lái)取代下面定義的任何部分，并且這些對(duì)應(yīng)的定義是g在將這類取代的部分包括在它們的范圍內(nèi)。“氨基酸”是指處于D、L、或DL形式的任何天然存在的氨基酸(例如，Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gin、Gly、His、HyK Hyp、lie、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、以及Val)，以及它們的類似物/衍生物。天然存在的氨基酸的側(cè)鏈?zhǔn)潜绢I(lǐng)域熟知的并且包括例如氫(像例如在甘氨酸中)、烷基(像例如在丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸中)、取代的烷基(像例如在蘇氨酸、絲氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、以及賴氨酸中)、烷芳基(像例如在苯丙氨酸以及色氨酸中)、取代的芳烷基(像例如在酪氨酸中)、以及雜芳烷基(像例如在組氨酸中)。因此，這些氨基酸包括保護(hù)的或修飾的氨基酸，例如酰化的氨基酸、酰胺化的氨基酸等?！邦愃莆铩被颉把苌铩笔侵傅幌抻诰哂袕谋竟_(kāi)化合物的結(jié)構(gòu)衍生的結(jié)構(gòu)的任何化合物，并且它們的結(jié)構(gòu)與在此公開(kāi)的那些是充分類似的，并且基于該類似性本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以預(yù)期它們呈現(xiàn)與所要求保護(hù)的和/或參照的化合物相同或類似的活性以及效用?！邦a粘膜”是指沿著頰內(nèi)壁排列的膜。“電荷絡(luò)合劑”是指與離子、原子或分子可電離的官能團(tuán)形成非共價(jià)復(fù)合物(絡(luò)合 物)的化合物，其中該復(fù)合物(絡(luò)合物)表示該絡(luò)合劑通過(guò)非共價(jià)化學(xué)鍵與ー種或多種離子、原子、或分子可逆地締合。“絡(luò)合的”或“帶電荷復(fù)合物(charge complex)”是指通過(guò)非共價(jià)化學(xué)鍵與離子、原子或分子的可電離官能團(tuán)形成非共價(jià)復(fù)合物的帶電荷絡(luò)合劑例如冠狀化合物的可逆締合。如在此使用的，術(shù)語(yǔ)絡(luò)合的或帶電荷復(fù)合物不限于結(jié)合到絡(luò)合劑上的鹽或金屬離子。它總體上涉及絡(luò)合劑與肽上離子或離子基團(tuán)，具體地肽上陽(yáng)離子或陽(yáng)離子基團(tuán)之間的復(fù)合物?！肮跔罨衔铩鄙婕巴ǔ２粠щ姾傻拇蟓h(huán)多齒化合物，其中三個(gè)或更多個(gè)配位環(huán)原子(通常是氧或氮)是或可以變成適當(dāng)接近的以易于與陽(yáng)離子種類(不包括平面類似物，例如卩卜啉類)形成螯合復(fù)合物。參見(jiàn)例如M. Hiraoka, Crown Compounds: theirCharacteristics and Applications, Elsevier Science Publishers, 1982 ;以及E. Weberand F. Vogt I e, Inorg. Chim. Acta (1980) 45: L65-L67。“干燥肽”是指通過(guò)ー種過(guò)程例如冷凍干燥、噴霧干燥、離心蒸發(fā)、以及空氣干燥而干燥的肽，并且它包含與該肽相締合的殘留水分。該干燥肽典型地是可以具有干粉、微粒、或殘余物質(zhì)外觀(包括油狀或潮濕殘余物外觀)的粉末或殘余物。相對(duì)地，“無(wú)水肽”基本上不包含水。參見(jiàn)例如冷凍干燥(例如，Williams and Polli (1984) J. Parenteral Sci.Technol. 38:48-59);噴霧干燥(例如，Masters (1991) in Spray-Drying Handbook (5thed; Longman Scientific and Tecnnical, Essez, U. K ノ ，pp. 49丄一t>76 ; Broadnead etal. (1992) Drug DeveI. Ind. Pharm. 18:1169-1206,以及 Mumenthaler et al. (1994) Pharm.Res. 11:12-20);空氣干燥(例如，Carpenter and Crowe (1988) Cryobiology 25:459-470;以及 Roser (1991) Biopharm. 4:47-53)；以及離心蒸發(fā)(例如，www. genevac. com)。“有效的”是指足以完成希望的、預(yù)期的、或想要的結(jié)果。例如如在此提供的術(shù)語(yǔ)“有效量”或“藥學(xué)上有效量”g在指非致死但是用于提供希望效用的足夠數(shù)量的化合物。例如，為了降低宿主體內(nèi)的血糖水平，該有效量是引起有效應(yīng)答的數(shù)量(例如，將血糖水平降低到低于對(duì)照水平，或在血糖水平方面提供臨床顯著地降低)。如下面將指出的，所需要的確切數(shù)量在受試者之間會(huì)有變化，這取決于人種、年齡、以及受試者的一般性身體狀況、有待治療的病癥或疾病的嚴(yán)重性、所使用的具體化合物、它的給藥方式等。因此，不可能規(guī)定確定的“有效量”。然而，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員僅使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)就可以確定適當(dāng)?shù)挠行Я俊?br> “可電離官能團(tuán)”是指在與該基團(tuán)的pKa不同的pH下能夠提供或接受電荷的位于肽的氨基酸上的基團(tuán)?！罢衬みf送”是指將活性劑(例如藥物)施用到胃腸道(GI)、直腸、陰道、肺、鼻腔、或口腔(包括頰(面頰)、舌下(在舌頭下)、唇、齦、顎、以及舌)中的ー個(gè)或多個(gè)粘膜上，并且使活性劑通過(guò)覆蓋這些位置的這些膜并且使它們進(jìn)入到血流中?！罢衬みf送組合物”是指能夠粘膜遞送活性劑的藥物遞送組合物或系統(tǒng)?！半摹笔侵赴ǜ哌_(dá)2、5、10、20、30、40、50、75、100或約200個(gè)氨基酸殘基的聚氨基酸，這些氨基酸殘基可以包括編碼或非編碼氨基酸，化學(xué)地或生物化學(xué)地修飾或衍生的氨基酸、直鏈、支鏈或環(huán)狀肽、以及具有修飾主鏈的肽類。有時(shí)稱為多肽或蛋白，在此它們能夠可互換地使用。例如，包括包含ー個(gè)或多個(gè)非天然存在的氨基酸(例如，￠-丙氨酸、a-氨基丁酸、Y-氨基丁酸、a-氨基異丁酸、正纈氨酸、正亮氨酸、鳥(niǎo)氨酸、高絲氨酸以及羥脯氨酸)的肽類。例如，包括其中反應(yīng)基團(tuán)被修飾的肽類，例如可以通過(guò)多種標(biāo)記試劑，聚合物(例如聚こニ醇、脂類、碳水化合物類等)對(duì)肽的N-端和C-端進(jìn)行化學(xué)修飾，通過(guò)保護(hù)基團(tuán) 進(jìn)行封閉等，以及攜帯生物修飾功能的那些例如翻譯后修飾?！半幕钚詣垺笔侵干锘钚噪幕蚱漕愃莆?衍生物，包括它們的藥學(xué)上可接受的鹽類、溶劑化物、水合物、以及藥物前體形式?！鞍俜直热芙舛戎怠笔侵冈谕ǔ５氖覝叵略谌軇┗蛉軇w系中分子的平衡溶解度限或最大溶解度，表示為在該組合物中該分子的重量百分比?！皾B透性增強(qiáng)脂類”是指帶電荷或中性的疏水或兩親小分子，在正常室溫下它們可以是固體或液體(這取決于它們的結(jié)構(gòu)以及組成)，可以是飽和或不飽和的，支鏈或直鏈的，并且能夠增強(qiáng)粘膜滲透性以吸收這些肽?？梢园ㄖ绢?，蠟類，留醇類，脂溶性維生素類(例如，維生素A、D、E以及K)，甘油單酯類，甘油ニ酯類，磷脂類，以及其他物質(zhì)，例如油酸，甾醇類例如膽固醇，由附連到甘油主鏈上的油?；湣⒂操|(zhì)酰基鏈、以及棕櫚酰基鏈組成的甘油三酯類，磷脂類例如磷脂酰膽堿，等等。滲透性增強(qiáng)脂類的ー個(gè)子集是“滲透性增強(qiáng)脂肪酸”，它是指脂肪族羧酸類，該脂肪族羧酸可以是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈，并且能夠增強(qiáng)粘膜滲透性用以吸收這些肽?！?口腔粘膜遞送”是指將活性劑(例如藥物)施用到口腔的一個(gè)或多國(guó)粘膜中，包括頰(面頰)、舌下(在舌頭下)、唇、齦、顎、以及舌，并且使活性劑通過(guò)覆蓋這些位置的膜并且使它進(jìn)入到血流中?！?口腔粘膜遞送載體”是指能夠口腔粘膜遞送活性劑的藥物遞送系統(tǒng)?！叭軇┗饔谩笔侵溉苜|(zhì)(例如肽)與溶劑(例如水溶液、有機(jī)溶液、或有機(jī)水溶液)的相互作用，這導(dǎo)致溶質(zhì)在溶劑中的穩(wěn)定作用?！叭芙舛取笔侵府?dāng)溶解速率等于沉淀速率而實(shí)現(xiàn)的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。物質(zhì)在具體溶劑中的溶解程度被測(cè)量為飽和濃度，其中添加更多溶質(zhì)不能增加溶液的濃度?！胺€(wěn)定水合的肽活性劑”是指具有比得上或大于干肽活性劑的按重量計(jì)的水含量以及在有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑中溶解度的肽活性剤，并且是基本上不聚集的以及未氧化的?！吧嘞抡衬ぁ笔侵赴ㄉ嗟母箓?cè)面以及口腔底部的薄膜。術(shù)語(yǔ)“確定”、“測(cè)量”、和“評(píng)估”、以及“測(cè)定”可互換地使用并且包括定量和定性確定兩者。術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指非生物學(xué)地或另外地不想要的物質(zhì)，即具有醫(yī)藥上可接受品質(zhì)以及組成的物質(zhì)，它們可以與選擇的活性藥物成分一起給予個(gè)體而不以有害方式引起與它包含在其中的藥物組合物的任何其他組分的任何不希望的生物作用或相互作用。
具體實(shí)施例方式在更詳細(xì)地說(shuō)明本公開(kāi)之前，應(yīng)當(dāng)理解的是本公開(kāi)不限于所述的具體實(shí)施方式
，這樣它們當(dāng)然可以改變。還應(yīng)當(dāng)理解的是在此使用的術(shù)語(yǔ)僅是用于說(shuō)明具體實(shí)現(xiàn)方式的目的，并不g在進(jìn)行限制，因?yàn)楸竟_(kāi)范圍將僅受隨附權(quán)利要求書(shū)限制。當(dāng)提供一個(gè)范圍的數(shù)值時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解的是在該范圍的上限與下限之間每個(gè)插入值(除非上下文另外清楚地指出，否則達(dá)到下限単位的十分之一)以及在指出范圍內(nèi)任何其他 指出或插入數(shù)值都包括在該公開(kāi)中。這些較小范圍的上限和下限可以獨(dú)立地包括在較小范圍內(nèi)并且也包括在本公開(kāi)中，受到所指出范圍內(nèi)任何明確的排他限制。當(dāng)所指出的范圍包括這些限制之一或兩者時(shí)，排除這些包括限制之一或兩者的范圍也包括在本公開(kāi)中。本文存在某些范圍，其帶有在前面加有術(shù)語(yǔ)“約”的數(shù)值。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“約”是為了提供對(duì)于在其先于的確切數(shù)值以及鄰近或近似其先于數(shù)字的數(shù)值的字面支持(literal support)。在確定ー個(gè)數(shù)值是否鄰近或近似具體列舉的數(shù)值時(shí),鄰近或近似的未列舉的數(shù)值可以是，在其所存在的上下文中，提供具體列舉的數(shù)值的基本相當(dāng)?shù)臄?shù)值。除非另外定義，本文所使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與由本公開(kāi)所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員所通常理解的相同的含義。雖然類似或等同于本文所描述的(方法和材料的)任何方法和材料還可以用于實(shí)踐或測(cè)試本公開(kāi)，但現(xiàn)在將描述代表性的說(shuō)明性方法和材料。本發(fā)明說(shuō)明書(shū)中所引用的所有出版物和專利，其通過(guò)參考并入本文中，如同每個(gè)出版物或?qū)＠唧w并單獨(dú)地說(shuō)明，以通過(guò)參考并入，并通過(guò)參考并入本文以公開(kāi)和描述與出版物所引證的有關(guān)的方法和/或材料。任何出版物的引證是用于其在提交日之前的公開(kāi)，并不應(yīng)被解釋為本公開(kāi)由于現(xiàn)有的公開(kāi)而沒(méi)有先于此出版物的資格的許可。而且，所提供出版物的日期可不同于可能需要獨(dú)立確認(rèn)的實(shí)際公布日期。需要指出的是，作為本文和附加的權(quán)利要求中使用的，除非上下文另外明確規(guī)定，単數(shù)形式“一神”、“ー個(gè)”和“此”包括復(fù)數(shù)的指示物。需要進(jìn)ー步指出的是可以撰寫(xiě)權(quán)利要求以排除任何可選的要素。像這樣，本聲明g在作為先行基礎(chǔ)，用于與權(quán)利要求要素的列舉有關(guān)的此類排他的術(shù)語(yǔ)如“單獨(dú)地”、“僅”等的使用，或“否定”限制的使用。在閱讀本公開(kāi)之后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，本文所描述和說(shuō)明的各個(gè)實(shí)施方式具有分離的組分(元件)和特征，其可以容易地與不背離本公開(kāi)的范圍或精神的任何其他若干實(shí)施方式的特征相分離或組合。任何引證的方法可以按照所引證事件的順序或任何邏輯合理的其它順序來(lái)進(jìn)行。正如上面所概述的，本公開(kāi)提供用于粘膜遞送肽活性劑的組合物以及制備它們的方法。還提供的是使用該目標(biāo)組合物的試劑盒和方法。該組合物包括粘膜遞送組合物，其包括溶于非水性疏水載體中的有效量的肽復(fù)合物或肽鹽。該肽復(fù)合物包括ー種與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，并在非水性疏水載體中在不同于肽活性劑的Pl的PH下溶解。該肽鹽包括一種與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，并在非水性疏水載體中在不同于肽活性劑的Pl的PH下溶解。在某些實(shí)施方式中，非水性疏水載體包括至少ー種酰基甘油和至少ー種有機(jī)溶劑和/或至少ー種脂類，各自以這樣的有效量單獨(dú)存在用來(lái)(i)溶解肽復(fù)合物或肽鹽，以及(ii )增強(qiáng)肽活性劑的粘膜遞送。因此，粘膜遞送組合物一般包括各種在非水性介質(zhì)(如包含?；视秃陀袡C(jī)溶劑和/或脂類的介質(zhì))中的增溶劑(下文將更加詳細(xì)地描述)。粘膜遞送組合物及其組分還可以包含ー種或多種另外的藥用賦形劑，如一種或多種非離子表面活性齊U、抗氧化劑、緩沖劑、防腐劑等等(下文更加詳細(xì)描述的)。在許多實(shí)施方式中，預(yù)形成肽復(fù)合物或肽鹽，其中預(yù)形成的肽復(fù)合物或預(yù)形成的肽鹽從具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl的PH的溶液或懸浮液中干燥。在盡可能多的實(shí)施方式中，預(yù)形成非水性疏水載體。在一些實(shí)施方式中，預(yù)形成的非水性疏水載體從具有與肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥。在一些實(shí)施方式中，粘膜遞送組合物從具有與肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可 選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥。在某些實(shí)施方式中，該溶液或懸浮液是含水有機(jī)混合物。像這樣，進(jìn)ー步的實(shí)施方式涉及包括ー種或多種預(yù)形成的肽復(fù)合物、預(yù)形成的肽鹽、預(yù)形成的非水性疏水載體、以及其組合的組合物。還提供了該目標(biāo)組合物的生產(chǎn)方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，提供了產(chǎn)生粘膜遞送組合物的方法，該方法包括形成分散于PH不同于肽活性劑的pi的非水性疏水載體的肽復(fù)合物或肽鹽，該肽復(fù)合物包含有效量的與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，該肽鹽包含有效量的與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤。特征性實(shí)施方式為，其中肽復(fù)合物或肽鹽在非水性疏水載體中在不同于肽活性劑的Pl的PH下溶解。目標(biāo)方法的形成步驟包括，將期望的粘膜遞送組合物的有效量的每種組分組合(或其任何有效組合)(即，組合有效量的包含穩(wěn)定水合的肽活性剤、冠狀化合物、反離子、以及用于其中包含冠狀化合物的粘膜遞送組合物的非水性疏水載體的組分，或組合有效量的包含穩(wěn)定水合的肽活性剤、反離子、以及用于不包含冠狀化合物的粘膜遞送組合物的非水性疏水載體的組分)。例如，在某些實(shí)施方式中，目標(biāo)方法的形成步驟包括組合有效量的(i)包含非水性疏水載體的第一組合物、和(ii)包含肽復(fù)合物或肽鹽的第二組合物。在其他實(shí)施方式中，例如，目標(biāo)方法的形成步驟包括組合有效量的(i)包含非水性疏水載體和肽鹽的第一組合物、和(ii)包含冠狀化合物的第二組合物。在目標(biāo)生產(chǎn)方法中，許多實(shí)施方式中的肽復(fù)合物或肽鹽是作為通過(guò)干燥溶液或懸浮液而可獲得的干燥粉末或殘余物，該水性溶液或懸浮液包括以下作為其中組分(i)用于形成肽復(fù)合物的肽活性剤、冠狀化合物、以及反離子，或(ii)用于形成肽鹽的肽活性劑和反離子；并且其中干燥是在保留與肽活性劑締合的足夠量水分的條件下用來(lái)生產(chǎn)肽復(fù)合物或肽鹽。在某些實(shí)施方式中，溶液或懸浮液處于與肽活性劑的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)的pH。在具體的實(shí)施方式中，溶液或懸浮液為含水有機(jī)溶液或懸浮液。在特定的實(shí)施方式中，肽復(fù)合物和/或肽鹽作為干燥粉末或殘余物而預(yù)形成。一個(gè)特征性方面為，其中包含肽復(fù)合物、肽鹽、肽活性剤、冠狀化合物、和/或反離子的一種或多種干燥粉末或殘余物可溶于水性有機(jī)溶液或懸浮液。ー個(gè)具體的實(shí)施方式為，其中包含肽復(fù)合物或肽鹽的干燥粉末或殘余物可溶于水性有機(jī)溶液或懸浮液。
因此在許多實(shí)施方式中，提供了產(chǎn)生粘膜遞送組合物的方法，包括(a)提供第一組合物，包含肽活性剤，其作為從具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的P〗的PH的水溶液或含水有機(jī)溶液或懸浮液中干燥的預(yù)形成的鹽，且干燥是在保留與肽締合的足夠量水分的條件下用來(lái)保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性；以及(b)將步驟(a)的預(yù)形成的肽鹽和包含非水性疏水載體的第二組合物相結(jié)合，以形成粘膜遞送組合物；或(c)將步驟(a)的預(yù)形成的肽鹽和包含非水性疏水載體的第二組合物組合和冠狀化合物相結(jié)合，以形成粘膜遞送組合物；或(d)將步驟(a)的預(yù)形成的肽鹽與在有機(jī)或水性有機(jī)溶液或懸浮液中包含冠狀化合物的第二組合物相結(jié)合，并且(i )干燥有機(jī)或含水有機(jī)溶液或懸浮液，以在保留與肽締合的足夠量水分以保持肽活性剤的溶劑化和穩(wěn)定性的條件下，形成預(yù)形成的肽復(fù)合物；以及 (ii)將預(yù)形成的肽復(fù)合物與非水性疏水載體相結(jié)合以形成粘膜遞送組合物。還提供了用于生產(chǎn)如上面所描述的預(yù)形成的肽復(fù)合物和/或預(yù)形成的肽鹽的方法。例如，在一個(gè)實(shí)施方式中，該方法涉及(i)提供包含以下作為其中組分的水性有機(jī)溶液或懸浮液肽活性剤、冠狀化合物以及反離子，和(ii)在保留與肽活性劑締合的足夠量水分的條件下干燥含水有機(jī)溶液或懸浮液，以產(chǎn)生肽復(fù)合物。在相關(guān)的實(shí)施方式中，該含水有機(jī)溶液或懸浮液具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl的pH。還提供了將有效量的肽活性劑粘膜給予需要其的宿主的方法。該方法涉及將有效量的本公開(kāi)的粘膜遞送組合物給予宿主的粘膜，其中該給予將有效量的肽活性劑遞送入宿主的血流里。進(jìn)ー步提供的是用于實(shí)踐目標(biāo)方法的試劑盒。
相對(duì)于非穩(wěn)定水合的肽活性剤，該粘膜遞送組合物及其組分通常是無(wú)毒且無(wú)刺激性的，并且促進(jìn)穩(wěn)定肽活性劑增強(qiáng)且可靠重現(xiàn)地粘膜遞送入宿主的血流里。目標(biāo)組合物可以單獨(dú)給予，或者作為藥物遞送系統(tǒng)的一部分遞送至宿主的ー個(gè)或多個(gè)粘膜，如通過(guò)口腔粘膜(如頰粘膜、舌下粘膜，或頰粘膜和舌下粘膜兩者)給至宿主的口腔用于口腔粘膜遞送。因此，該組合物可以作為自由形式(如液體、凝膠、泡沫、乳膏、軟膏、半固體或噴霧劑)提供，或可以包括確定物理形式的設(shè)計(jì)，如片劑、貼劑、膜和錠劑。目標(biāo)組合物和方法在各種不同的應(yīng)用中可以使用，包括治療一系列表明需要給定的肽活性劑的不同疾病。說(shuō)明本公開(kāi)的方法和組合物顯著優(yōu)點(diǎn)的示例性應(yīng)用為肽激素(如改變體內(nèi)血糖水平用于糖尿病、肥胖和相關(guān)疾病治療的胰島素和腸降血糖素模擬肽)的有效且可靠重現(xiàn)的口腔粘膜遞送。像這樣，目標(biāo)組合物和方法代表優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)的重要優(yōu)勢(shì)。尤其是，由本公開(kāi)所克服的重大問(wèn)題是，除了其他方面，肽活性劑的可靠且可重復(fù)的粘膜遞送。在進(jìn)ー步描述的本公開(kāi)中，通過(guò)綜述可用于目標(biāo)方法的各種藥物配制品/診斷配制品和試劑盒，首先更加詳細(xì)地描述了目標(biāo)組合物和相關(guān)的生產(chǎn)方法，以及利用目標(biāo)組合物和方法的各種代表性應(yīng)用的討論。組合物以及生產(chǎn)方法本公開(kāi)是部分基于這樣的發(fā)現(xiàn)通過(guò)提供包含有效量的與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的、非水性疏水載體中在具有與肽活性劑的等電點(diǎn)(Pl)不同的PH下溶解的肽活性劑的粘膜遞送組合物而可以實(shí)現(xiàn)肽的粘膜遞送的顯著提高。與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤，本文中也稱為肽復(fù)合物(肽絡(luò)合物)，在這樣的限制性條件下在保留與肽締合的足夠量水分的條件下處理肽活性劑以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性，易于在非水性疏水載體中原位制備，或非原位預(yù)形成。因此，在某些實(shí)施方式中，肽復(fù)合物作為預(yù)形成的肽復(fù)合物非原位制備，然后與非水性疏水載體相結(jié)合。在其他實(shí)施方式中，肽復(fù)合物，例如，通過(guò)在這樣的限制性條件下在保留與肽締合的足夠量水分的條件下處理肽活性劑以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性，將(i )冠狀化合物與(ii )包含與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合作為肽鹽的肽活性劑的非水性疏水載體相結(jié)合而在非水性疏水載體中原位制備。本公開(kāi)還部分基于這樣的發(fā)現(xiàn)在從具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl的pH的溶液或懸浮液中干燥肽復(fù)合物或肽鹽時(shí)可以實(shí)現(xiàn)肽復(fù)合物或肽鹽在非水性疏水載體中的可溶性的顯著提高。在這樣的限制性條件下在保留與肽締合的足夠量水分的條件下處理肽活性劑以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性，可以容易地原位或利用這樣的干燥肽復(fù)合物或肽鹽而非原位制備粘膜遞送組合物。 因此不論粘膜遞送組合物是由上面所描述的原位或非原位方法形成，肽活性劑的可靠和可重復(fù)的粘膜遞送強(qiáng)烈取決于制備組合物的條件。例如，本公開(kāi)的下列方法說(shuō)明了這一點(diǎn)，并且可以將涉及的兩個(gè)基本步驟作為特征。在第一步驟中，肽活性劑一般作為從具有與肽活性劑的pi不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl的pH的水溶液或含水有機(jī)溶液或懸浮液中干燥(例如，通過(guò)冷凍干燥(凍干)或噴霧干燥)的預(yù)形成(肽)鹽而提供。取決于溶液或懸浮液的PH和肽的pl，該步驟易于采用，不論利用直接純化(例如，利用水/こ腈混合物在期望的反離子(如醋酸)存在的條件下的HPLC)或從前體肽鹽(例如肽三氟こ酸)經(jīng)脫鹽和在需要不同反離子(例如肽水楊酸)時(shí)的反離子交換而制備的預(yù)形成鹽。再次，對(duì)于脫鹽和反離子交換，采用水溶液或含水有機(jī)溶液或懸浮液(例如水、水/こ腈混合物)，且期望的預(yù)形成肽鹽最終從具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl的pH的溶液或懸浮液中干燥(例如，通過(guò)離心蒸發(fā)/真空離心蒸發(fā)濃縮器、凍干或噴霧干燥濃縮為殘余物)，以形成期望的預(yù)形成肽鹽。在每個(gè)步驟中，注意在保留與肽活性劑締合的足夠量水分的條件下處理肽活性剤，以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性。在第二步驟中，粘膜遞送組合物接著由以下形成(i)將第一步驟的干燥的預(yù)形成的肽鹽與冠狀化合物(或在某些實(shí)施方式中沒(méi)有冠狀化合物)和非水性疏水載體相結(jié)合，以形成粘膜遞送組合物；或(ii) (a)將第一歩的干燥的預(yù)形成的肽鹽與冠狀化合物在有機(jī)或水性有機(jī)溶液或懸浮液(例如甲醇、水/甲醇混合物)中相結(jié)合，(b)干燥步驟(ii) (b)的有機(jī)或水性有機(jī)溶液或懸浮液(例如，通過(guò)離心蒸發(fā)/真空離心蒸發(fā)濃縮器濃縮為殘余物)，然后(c)將步驟(ii) (b)的干燥的肽物質(zhì)(其包括預(yù)形成的肽復(fù)合物)與非水性疏水載體相結(jié)合以形成粘膜遞送組合物。在每個(gè)步驟中，注意在保留與肽活性劑締合的足夠量水分的條件下處理肽活性剤，以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性。在某些實(shí)施方式中，可選地將有效量的一種或多種穩(wěn)定化賦形劑和/或水在與冠狀化合物絡(luò)合之前、之中和/或之后，以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性的量加入至干燥的肽鹽。例如，水可以與預(yù)形成的肽鹽相結(jié)合并且用于首先溶解預(yù)形成的肽鹽，接著通過(guò)加入溶劑混合物如甲醇和冠狀組合物以在絡(luò)合期間幫助形成和/或保持穩(wěn)定水合的肽(例如，加入水以致在水-溶劑混合物中的最終水濃度在0. 5%-50%，更優(yōu)選地約1%-35%，常常約5%-25%，和典型地約10-15%的范圍內(nèi)，接著干燥以去除溶剤)。水還可以在其與非水性疏水載體相結(jié)合之前和/或同時(shí)可選地與肽復(fù)合物相結(jié)合(例如水在與非水性疏水載體相結(jié)合之前加入到干燥的肽復(fù)合物中，以致配制品混合物中的最終水濃度為約0. 1%-10%、通常約0. 5%-5%，且典型地約1%_3%，在這樣的限制性條件下所加入水的量為或少于能夠引起不期望的配制品組分相分離的量)。在另外的實(shí)例中，在制備預(yù)形成的肽鹽和/或肽復(fù)合物的一個(gè)或多個(gè)步驟中可包含有效量的一種或多種穩(wěn)定化賦形劑，如在干燥之前、之中、和/或之后的反離子交換過(guò)程中，以幫助保持穩(wěn)定水合的肽(例如非離子型去污劑(洗滌劑)如^ -D-辛基葡糖苷，張カ調(diào)節(jié)劑如甘露醇等)?？蓪⒘硗獾乃?或一種或多種穩(wěn)定化賦形齊U同樣以足以保持肽活性劑的溶劑化和穩(wěn)定性的量合并入最終的粘膜遞送配制品中。像這樣，在這樣的限制性條件下在保留與肽締合的足夠量水分的條件下處理肽活性劑以保持肽的溶劑化和穩(wěn)定性，易于通過(guò)從具有與肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離其的PH的溶液或懸浮液中干燥期望的肽物質(zhì)而制備穩(wěn)定水合的肽活性劑(単獨(dú)或與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合)。該溶液或懸浮液可以是含水的、有機(jī)的、或其混合物?？梢詢?chǔ)存制得的干燥的肽物質(zhì)(例如単獨(dú)的肽、肽鹽、或肽復(fù)合物)供以后和/或進(jìn)ー步地處理使用，如作為以上與粘膜遞送組合物的ー種或多種其余組分相結(jié)合。在從中干燥肽物質(zhì)的溶液或懸浮液的pH范圍可能與穩(wěn)定水合的肽活性劑的pH重疊時(shí)，通常，溶液或懸浮液的中點(diǎn)PH離肽的pi越遠(yuǎn)，干燥肽在隨后與其他溶劑(尤其是其有機(jī)和水性混合物，以及非水性疏水載體)相結(jié)合時(shí)的溶解度越高。通常，從中干燥肽物質(zhì)的溶液或懸浮液的pH比肽活性劑的pi高約0. 2,0.3,0. 4、或0. 5個(gè)pH單位，通常比肽活性劑的Pl高約0.6、0.7、0.8、或0.9個(gè)？11單位，且更通常比肽活性劑的？1高約I個(gè)pH單位以上的肽活性劑的Pl。在一個(gè)實(shí)施方式中，肽活性劑可以在肽高度帶電的pH下是穩(wěn)定形式或凍干或干燥，且在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，在肽活性劑大部分帶電的PH下，因而獲得最高可能的電荷數(shù)。當(dāng)該穩(wěn)定水合的肽活性劑是以這種方式制備并且無(wú)需進(jìn)一步輪次的溶劑交換和/或干燥與非水性疏水載體一起配制時(shí)，絡(luò)合反應(yīng)的益處以及該肽物質(zhì)最初從中干燥的溶液或懸浮液的PH可以有效地保持。然而，除非小心地保持該肽的穩(wěn)定水合作用，否則這樣的益處可能失去或顯著地降低。具體地，如果該肽未穩(wěn)定地水合，則可靠的和可重現(xiàn)的肽活性劑的粘膜遞送將受到不利影響。例如，當(dāng)使穩(wěn)定水合的肽活性劑經(jīng)受涉及溶劑交換和干燥的進(jìn)ー步加工步驟時(shí)(例如，脫鹽、反離子交換、和/或非原位制備預(yù)形成的肽復(fù)合物)，可以通過(guò)處理該穩(wěn)定干燥的肽活性剤，以及從在與該肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離肽活性劑的Pl不的PH下的溶液或懸浮液中干燥得到的肽材料實(shí)現(xiàn)和/或保持穩(wěn)定水合作用(如上所述)。在某些實(shí)施方式中，可以通過(guò)仔細(xì)地添加酸和/或堿來(lái)調(diào)節(jié)溶液或懸浮液的PH從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)pH，典型地目標(biāo)pH在約0. 5至8. 5的范圍內(nèi)，更通常地從2. 0至約8. 0，通常地約4. 0至8. 0 (取決于肽活性劑的PD，其中可選地包括ー種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑例如緩沖劑、等滲劑、防腐剤、抗氧化劑等用來(lái)幫助保持該穩(wěn)定水合的肽活性剤。在某些實(shí)施方式中，其中PH被調(diào)節(jié)的該溶液或懸浮液是水、和/或こ腈/水混合物，具體地包含10%-90% (包括、約20%-80%、30%-70%、40%-60%、以及更具體地約55%_65%)乙腈的乙腈/水混合物，通常地約50:50混合物。也可以通過(guò)處理該穩(wěn)定水合的肽活性劑，以及從包括含水物(水性物)、有機(jī)物、或它們混合物的溶液或懸浮液中干燥得到的肽材料(其中干燥是在避免不希望的水損失的條件下實(shí)現(xiàn)的)，特別地通過(guò)保持適當(dāng)溫度、壓力以及干燥時(shí)間(例如大約或小于40° C，例如大約或小于35° C，典型地大約或小于32° C，持續(xù)大約或小于3小時(shí)，例如小于2小時(shí)，更典型地小于I. 5小時(shí)，在離心蒸發(fā)器/真空離心蒸發(fā)濃縮器(SpeedVac)中)來(lái)實(shí)現(xiàn)和/或保持穩(wěn)定水合作用。在此為了穩(wěn)定性可以再次添加一種或多種另外的藥學(xué)可接受的輔劑(賦形劑)。上面討論的多個(gè)處理步驟可以使用多種溶液或懸浮液，這些溶液或懸浮液是含水物(水性物)、有機(jī)物、或它們的混合物(通常取決于具體處理步驟(例如，水、乙腈、甲醇、乙醇、它們的含水混合物等))、或單獨(dú)的有機(jī)溶劑。在某些實(shí)施方式中，具體地為了非原位形成的肽復(fù)合物，該溶液或懸浮液是醇水溶液，例如甲醇水溶液或乙醇水溶液，包括具有按體 積計(jì)約1%至50%水含量的醇水溶液，例如約1%至約25%，具體地約1%至15%，并且更具體地約2%至8%醇水溶液，例如具有按體積計(jì)約5%水含量的醇水溶液。甲醇水溶液和懸浮液是特別感興趣的，因?yàn)榧状际亲罱咏谒⑶夷軌蛉芙夥浅挿秶挠袡C(jī)化合物的有機(jī)溶齊U。另外的混合物是DMSO/水以及乙腈/水。另外地，上面討論的多個(gè)處理步驟能夠以任何有效組合形式使用用來(lái)例如在涉及下面的步驟中生產(chǎn)希望的最終組合物(i)對(duì)肽活性劑進(jìn)行可選地脫鹽；(ii)對(duì)該肽活性劑進(jìn)行可選地反離子交換；和/或(iii)非原位形成肽復(fù)合物以及在非水性疏水載體中配制，和/或在非水性疏水載體中在原位形成肽復(fù)合物，其條件是在考慮了肽活性劑Pl并且保持足夠量的水與肽締合用來(lái)保持該肽的溶劑化作用和穩(wěn)定性的條件下對(duì)肽活性劑進(jìn)行處理。除了與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的肽活性劑的pi以及水合作用之外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的是可以通過(guò)本公開(kāi)的其他方面進(jìn)一步改善粘膜遞送肽活性劑，包括選擇冠狀化合物，反離子，以及它們的數(shù)量，以及選擇非水性疏水載體，可選地輔劑以及它們的數(shù)量。例如，該肽活性劑與足夠量的絡(luò)合劑相絡(luò)合，例如感興趣的冠狀物以及反離子，它們能夠以超過(guò)肽活性劑的摩爾量存在，總體上以大致2比1、5比1、10比1、15比1、20比I、30比1、60比I或更大的比率。典型地，該冠狀物和反離子組分以某一摩爾比率進(jìn)行絡(luò)合，這取決于在該肽活性劑上存在的可電離基團(tuán)的類型以及數(shù)量。在一個(gè)實(shí)施方式中，該肽活性劑包括一個(gè)或多個(gè)陽(yáng)離子基團(tuán)(例如，伯胺、仲胺、胍基基團(tuán)、以及它們的組合)，該冠狀化合物是陽(yáng)離子結(jié)合的冠狀化合物(例如冠醚類型化合物)，并且該反離子是一種陰離子型反離子(例如酸性反離子)。特別感興趣的是其中該陽(yáng)離子結(jié)合的冠狀化合物和陰離子型反離子各自獨(dú)立地以每個(gè)陽(yáng)離子基團(tuán)約0. 5至10個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量，更具體地每個(gè)陽(yáng)離子約2至4個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量，并且最具體地約I至2個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該陽(yáng)離子結(jié)合的冠狀化合物以約每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基基團(tuán)2個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在，并且該陰離子型反離子以該肽活性劑的每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基基團(tuán)約I個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該陽(yáng)離子基團(tuán)與一種或多種中和的羧酸鹽締合，該陽(yáng)離子基團(tuán)可以是從無(wú)機(jī)物質(zhì)衍生的，包括但不限于Na+、K+、Li+、Mg++、Ca++等。除了 pi、肽水合作用、以及冠狀物/反離子量之外，另一個(gè)特征是配制以及使用具有穩(wěn)定該肽復(fù)合物的PH范圍的非水性疏水載體。例如，如果該非水性疏水載體pH與用于保持載體中肽復(fù)合物的希望的溶解度(溶解性)的邊界離得太遠(yuǎn)，在粘膜遞送組合物中絡(luò)合作用和控制從中以干燥形式制備肽活性劑的溶液或溶劑PH的優(yōu)點(diǎn)可能喪失或顯著地降低。典型地，該非水性疏水載體的PH具有約+/-I至約+/-4pH單位，通常地約+/_3pH單位的范圍，例如約3-6、約4-7、約5-8、以及更經(jīng)常地約+/_2pH個(gè)單位的pH范圍，例如約3_5、約4-6、約5-7、或約6-8等的pH范圍。當(dāng)然，可以調(diào)節(jié)該非水性疏水載體的最終pH范圍(包括通過(guò)添加酸、堿、緩沖劑和/或其他輔劑，以及通過(guò)添加肽鹽和/或肽復(fù)合物本身，這取決于與其締合的組分和數(shù)量)。雖然，該非水性疏水載體的pH范圍總體上可以與該肽活性劑的pi重疊，但是載體 的中點(diǎn)PH越遠(yuǎn)離該肽的pl，則該肽復(fù)合物在載體中的溶解度越高。而且，在遠(yuǎn)離該肽活性劑Pl的PH下通過(guò)原位亦或非原位地形成肽復(fù)合物，容易接近目標(biāo)pH而無(wú)需當(dāng)將該物質(zhì)與載體結(jié)合時(shí)不必要地必需跨該肽活性劑的P〗。例如，對(duì)于具有Pl約5. 0的肽活性劑，以及具有pH范圍約3. 0至6. 0的非水性疏水載體，可以通過(guò)從處于大于5. 0的pH下(通常地至少高I個(gè)pH)的溶液或懸浮液中干燥該材料非原位地制備該肽鹽或肽復(fù)合物，且其條件是在保持足夠數(shù)量與肽相締合的水用來(lái)保持該肽的溶劑化作用和溶解度的條件下對(duì)該肽活性劑進(jìn)行處理。如果希望的話，在結(jié)合之后，可以進(jìn)一步調(diào)節(jié)結(jié)合混合物的PH和/或允許在該混合物中平衡以實(shí)現(xiàn)溶劑化作用。這些發(fā)現(xiàn)是顯著的，因?yàn)槟承┱衬みf送組合物，例如包括具有至少一種?；视鸵约爸辽僖环N有機(jī)溶劑和/或脂類的非水性疏水載體的那些，顯著地增強(qiáng)了，并且在許多情況下，除了別的希望的方面(包括存儲(chǔ)穩(wěn)定性)，有可能粘膜遞送有效量的肽活性劑。例如，在某些實(shí)施方式中，該非水性疏水載體包括至少一種酰基甘油，以及至少一種有機(jī)溶齊U，以及可選地至少一種脂類，它們各自獨(dú)立地以有效地實(shí)現(xiàn)下面各項(xiàng)的數(shù)量存在(i)溶解與該冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑，以及(ii)增強(qiáng)肽活性劑的粘膜遞送。在這個(gè)方面，“非水性”旨在指小于約10%的水，更具體地小于約5%的水。因此，該粘膜遞送組合物總體上在非水性介質(zhì)中(例如包括?；视?，和有機(jī)溶劑，以及可選地脂類例如脂肪酸或中性脂類(如下面更詳細(xì)說(shuō)明)的介質(zhì))包括多種增溶劑。粘膜遞送組合物及其組分還可以包括一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑(如下面更詳細(xì)說(shuō)明的)，例如非離子型表面活性劑、抗氧化劑、緩沖劑、粘度調(diào)節(jié)劑、防腐劑、等滲劑、螯合劑等中的一種或多種。這樣，通過(guò)使用具有穩(wěn)定該肽復(fù)合物的PH范圍，和/或如上所述一個(gè)或多個(gè)額外特征的這類非水性疏水載體，可以使目標(biāo)公開(kāi)的益處最大化。如上匯總的，將有效量的穩(wěn)定水合的肽活性劑復(fù)合物溶于粘膜遞送組合物中，并且因此當(dāng)施用到其粘膜上時(shí)能夠?qū)⒂行Я康脑撾幕钚詣┻f送到宿主血流中。在某些實(shí)施方式中，與未穩(wěn)定水合的肽活性劑相比較，如在本公開(kāi)的粘膜遞送組合物中提供的粘膜遞送該肽活性劑是增強(qiáng)的。特別感興趣的是其中該增強(qiáng)大于約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、或90%，并且通常大于約100% (S卩，I倍或更大)。例如，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)(例如通過(guò)色譜法(例如，HPLC、質(zhì)譜-分光光度法等)、酶學(xué)方法(測(cè)量底物消耗和/或修飾、或產(chǎn)物和/或副產(chǎn)物產(chǎn)生)、抗原-抗體結(jié)合(例如，蛋白質(zhì)印跡、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)等)，通過(guò)生物作用(例如，如在下面實(shí)驗(yàn)部分中說(shuō)明的，通過(guò)間接測(cè)量進(jìn)入血流的肽活性劑數(shù)量的藥理學(xué)生物利用率)等)定性地和/或定量地、直接地和/或間接地測(cè)量進(jìn)入宿主血流中肽活性劑的量。通過(guò)已知的或多種這類技術(shù)通過(guò)比較進(jìn)入宿主血流的肽活性劑的量，可以容易地確定增強(qiáng)作用。這樣，在某些實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物顯示該肽活性劑的藥理學(xué)生物利用率，它比胸膜內(nèi)給藥(Pl)高約10%，通常高約15%，并且典型地約16%、17%、18%、19%、20%或更多。在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，當(dāng)舌下施用該粘膜遞送組合物時(shí)，該肽活性劑具有比胸膜內(nèi)給藥高約10%的藥理學(xué)生物利用率，通常高約15%，并且更典型地約20%或更多。在某些實(shí)施方式中，相對(duì)于未穩(wěn)定水合的肽活性劑，如在本公開(kāi)的粘膜遞送組合物中提供的粘膜遞送肽活性劑是增強(qiáng)的并且能夠可靠地再現(xiàn)?！翱煽康卦佻F(xiàn)” 一詞是指在完全相同的條件下在基本上相同的組合物的反復(fù)測(cè)試中測(cè)試的測(cè)量值保持一致的程度。這樣，如果它產(chǎn)生基本上相同測(cè)量的一致結(jié)果，則使用本公開(kāi)的粘膜遞送組合物進(jìn)行粘膜遞送是可靠地可重現(xiàn)的。相對(duì)地，如果重復(fù)測(cè)試給出基本上不同測(cè)量的不一致結(jié)果，則粘膜遞送組合物的粘膜遞送是不可靠的。 在進(jìn)一步說(shuō)明的目標(biāo)公開(kāi)中，現(xiàn)在更詳細(xì)地分別評(píng)述具體組分或組成。穩(wěn)定水合的肽活性劑該穩(wěn)定水合的肽活性劑具有比得上或大于干燥的肽活性劑按重量計(jì)的水含量以及在有機(jī)溶劑或有機(jī)含水溶劑中的溶解度，并且是基本上非聚集以及非氧化的。在一個(gè)實(shí)施方式中，該穩(wěn)定水合的肽活性劑具有比得上或大于從(i )處于與該肽的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽的等電點(diǎn)的PH下的溶液或懸浮液中，并且(ii)在保持足夠量的水以保持該肽的溶劑化作用和穩(wěn)定性的條件下干燥的肽活性劑的按重量計(jì)的水含量以及在有機(jī)溶劑或有機(jī)含水溶劑中的溶解度。在一個(gè)相關(guān)實(shí)施方式中，該穩(wěn)定水合的肽活性劑具有按重量計(jì)比得上該肽存儲(chǔ)穩(wěn)定的干燥形式的水含量。在這個(gè)方面，在-20° C至25° C范圍內(nèi)的溫度下存儲(chǔ)時(shí)當(dāng)具有等于或大于一個(gè)月的儲(chǔ)存壽命時(shí)該肽干燥形式的存儲(chǔ)穩(wěn)定性是確定的。在許多實(shí)施方式中，該肽的存儲(chǔ)穩(wěn)定的干燥形式與一種或多種藥學(xué)上可接受輔劑相關(guān)聯(lián)，例如共同干燥輔劑例如反離子、防腐劑、等滲劑、和/或緩沖劑。這樣，與無(wú)水肽相比較，穩(wěn)定水合的肽活性劑水含量可以是約按重量計(jì)約0. 1%至約50%，并且通常地是約0. 5%至約50%，1%至約30%，1%至約25%，更通常地約1%至約20%，約1%至約15%，以及典型地約1%至約10%，例如約1%至約5%。可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)相對(duì)于無(wú)水肽對(duì)肽水合作用進(jìn)行測(cè)量。例如，可以使用干燥失重法和/或卡爾-費(fèi)休法(例如，J. A. Dean, Analytical ChemistryHandbook, Section 19, McGraw-Hill, New York, 1995)。或通過(guò)美國(guó)藥典(USP)出版物USP-NF(2004)(它描述了美國(guó)食品和藥品管理局(FDA)強(qiáng)制實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)(2004—USP—Chapter921)來(lái)測(cè)量水含量。就溶解度而言，在環(huán)境溫度下該穩(wěn)定水合的肽活性劑在給定的有機(jī)溶劑或有機(jī)含水溶劑中具有百分比溶解度值，它等于或大于0. 001%，通常小于或等于125%的百分比溶解度值，并且典型地小于或等于從處于與該肽的等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離肽的等電點(diǎn)的PH下的溶液或緩沖液中干燥的肽活性劑的百分比溶解度值。以濃度形式容易地測(cè)量在有機(jī)或含水有機(jī)溶液或懸浮液中的溶解度，其中添加更多的該肽不增加在該溶液或懸浮液中它的濃度。還可以在相對(duì)澄清的液體或凝膠配制品中通過(guò)視檢來(lái)估計(jì)溶解度(例如，如果肽配制品在外觀上是基本上清澈的話，則溶解)。pH 和 pi靶向目標(biāo)組合物的pH使得該肽活性劑被充分電離以保持與希望的一種或多種絡(luò)合劑的絡(luò)合作用，以及當(dāng)結(jié)合到非水性疏水載體中時(shí)能夠溶解或再溶解。例如，當(dāng)該肽的氨基基團(tuán)被質(zhì)子化時(shí)(電離)有助于與陽(yáng)離子結(jié)合的冠狀化合物絡(luò)合。因此，這些目標(biāo)組合物的PH與組合物中該肽活性劑的pi不同，通常與其遠(yuǎn)離，其中該肽被充分電離用來(lái)與冠狀化合物和反離子絡(luò)合?！暗入婞c(diǎn)”一詞是指該肽活性劑總體上不帶有凈電荷時(shí)的PH值。總體上，選擇pH使得肽復(fù)合物保持穩(wěn)定和可溶(或當(dāng)制備成干燥的、預(yù)形成的肽復(fù)合物時(shí)的再溶解)。“遠(yuǎn)離肽活性劑的等電點(diǎn)”一詞是指離開(kāi)該肽活性劑等電點(diǎn)約I個(gè)PH單位或更大。該P(yáng)H可以是高于或低于該肽活性劑的等電點(diǎn)，其條件是它在該組合物中穩(wěn)定化該穩(wěn)定水合的肽活性劑用于給定的最終用途的范圍內(nèi)。因此在某些實(shí)施方式中，該P(yáng)H是 高于該肽活性劑的Pl，而在其他實(shí)施方式中，該P(yáng)H是低于該肽活性劑的pi。在某些實(shí)施方式中，該pH是離開(kāi)該肽活性劑的等電點(diǎn)約0. I至約4個(gè)pH單位。在一些實(shí)施方式中，該pH是離開(kāi)該肽活性劑等電點(diǎn)約0. 5至約3個(gè)pH單位，包括約I至約2個(gè)pH單位?？梢匀菀椎卮_定以及調(diào)節(jié)給定組合物的實(shí)際pH用來(lái)保持單獨(dú)地，和/或在非水性疏水載體中與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑的穩(wěn)定性。在某些實(shí)施方式中，包括緩沖液用來(lái)將PH保持在給定范圍內(nèi)。在主要包含水的溶劑混合物中，緩沖液的PKa接近于水的數(shù)值。相對(duì)地，當(dāng)有機(jī)溶劑的比例增加時(shí)，緩沖劑PKa改變。例如，中性弱酸(例如乙酸和陰離子酸例如H2PO4O典型地得到較弱的值，并且當(dāng)有機(jī)溶劑比例增加時(shí)PKa變得更大。陽(yáng)離子酸(例如NH4+)得到較強(qiáng)的值，但是在較高有機(jī)物濃度下這個(gè)趨勢(shì)逆轉(zhuǎn)并且它們變得較弱。因此，該pH能夠以經(jīng)驗(yàn)方式接近，和/或通過(guò)參照已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液計(jì)算溶液pH而進(jìn)行估計(jì)(例如，Rondinini, S.，AnalyticalBioanalytical Chem (2004) 374 (5) :8 I 3-8 16;Bosch et al. , Anal. Chem.(1996)68 (20):3651-3657;Subirats et al. , J Chrom A, (2007) 1138:203-215;Subiratset al. Separation & Purification Reviews (2007) 36 (3) : 231-255;以及 Gagliardi etal. J. Chromatography A(2005) 1077 (2) : 159-169)。在這類條件下還可以確定肽類的 pKa(和等電點(diǎn))值(例如，Sanz-Nebot et al. , J. Chromatography A (2002) 942 (1-2) : 145)。當(dāng)包括反離子和/或緩沖劑時(shí)，針對(duì)選擇的考慮包括在組合物中的緩沖容量、溶解度、以及離子強(qiáng)度。因此，優(yōu)化PH以增加肽的離子化形式相對(duì)于中性形式的比率(即，遠(yuǎn)離該肽的等電點(diǎn))可以在水溶液、有機(jī)溶液、以及含水有機(jī)溶液中實(shí)現(xiàn)，從而有助于冠狀物和反離子的絡(luò)合作用。肽活性劑本公開(kāi)的肽活性劑是當(dāng)與目標(biāo)粘膜遞送組合物和方法結(jié)合施用時(shí)其粘膜遞送被促進(jìn)或增強(qiáng)的那些肽。例如可以使用在下面實(shí)驗(yàn)部分中使用的測(cè)定法容易地確定給定的肽活性劑是否適合于根據(jù)本公開(kāi)的用途?？傮w上，如果肽活性劑與本公開(kāi)的目標(biāo)非水性疏水載體結(jié)合的粘膜遞送將有效量的試劑遞送到宿主血流中，則它適用于目標(biāo)方法中，特別地其中如通過(guò)測(cè)量宿主血流中存在的肽濃度確定的(例如使用適合于如上討論的并且在下面實(shí)驗(yàn)部分中說(shuō)明的這類目的的監(jiān)測(cè)系統(tǒng))，與在不存在粘膜遞送載體下的粘膜遞送該肽相比較(例如處于無(wú)菌鹽水溶液中的肽)這種遞送增加了 I至10倍或更多，例如增加了 50倍或更多，并且有時(shí)增加了 100倍或更多。在某些實(shí)施方式中，該肽活性劑是通過(guò)粘膜遞送增加了它的發(fā)生率和/或可觀察到生物作用的強(qiáng)度一種(例如，如在下面實(shí)驗(yàn)部分中所述小鼠測(cè)定法中觀察到的)。感興趣肽的實(shí)例包括但不限于acetalin類(例如，acetalin 1、2以及3 (乙酰基加上腦啡肽))、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和相關(guān)肽類、脂肪動(dòng)員激素類(例如腎上腺髓素)、ADP-核糖基化因子(ARF)、腎上腺髓素肽類、刺鼠(Agouti)相關(guān)肽類、咽側(cè)體抑制素、白糊精肽類(amylin p印tides)、淀粉樣蛋白肽類、血管緊張素類和相關(guān)肽類、膜聯(lián)蛋白、各種抗炎性肽類、抗微生物劑和相關(guān)肽類、抗氧化劑肽類、apelin肽類、凋亡肽類、Bad和Bag細(xì)胞肽類、腎上腺髓質(zhì)肽類、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、鈴蟾肽(bombesins)、緩激肽、C-肽類、C3a肽類、降鈣素和相關(guān)肽類、CART (可卡因-和苯丙胺調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄本)肽類、Casomorphin類、半胱天冬酶相關(guān)肽類、細(xì)胞附著肽類、膽囊收縮素-促胰酶素肽類、促皮質(zhì)素相關(guān)肽類、細(xì)胞色素類和相關(guān)肽類、細(xì)胞因子類(例如粒細(xì)胞集落刺激因子、紅細(xì)胞生成 素等)、趨化因子類、防御素類、強(qiáng)啡肽類、內(nèi)嗎啡肽類、內(nèi)啡肽類、內(nèi)皮縮血管肽類、腦啡肽類、艾塞那肽類、纖維蛋白原和相關(guān)肽類、纖連蛋白片段、加蘭肽類、腸抑胃肽類(GIP)、胃泌素類、葛瑞林(ghrelin)類、高血糖素、高血糖素樣肽類、生長(zhǎng)因子類、生長(zhǎng)激素相關(guān)肽類、鳥(niǎo)苷蛋白類、熱休克蛋白類、丙型肝炎病毒(HCV)相關(guān)肽類、高遷移率組(HMG)肽類、HIV相關(guān)肽類、整聯(lián)蛋白類、白細(xì)胞介素類、干擾素類、激酶類/磷酸酶底物類、促黃體激素釋放激素類和相關(guān)肽類、基質(zhì)金屬蛋白酶類(MMP)、黑素-A (melan-A)和粘蛋白相關(guān)肽類、黑色素細(xì)胞刺激激素類和類似物、髓磷脂堿性蛋白質(zhì)類(MBP)、肌球蛋白、鈉尿肽類、神經(jīng)激肽類、神經(jīng)調(diào)節(jié)肽類、神經(jīng)肽Y和類似物、神經(jīng)肽類、神經(jīng)降壓肽類和相關(guān)肽類、NF-kB/轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)肽類、食欲素類、骨鈣素片段、OVA肽類、催產(chǎn)素類、血管升壓素類、去氨加壓素和相關(guān)肽類、胰多肽類、甲狀旁腺激素類和相關(guān)肽類、肽YY和類似物、肽多糖肽類、磷肽類、植物螯合肽類、垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽類(PACAPS)、朊蛋白(PrP)片段類、催乳素釋放肽類、蛋白脂質(zhì)蛋白類(PLP)、salusin肽類、saposin相關(guān)肽類、分泌素類、選擇素相關(guān)肽類、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)肽類、促生長(zhǎng)素抑制素類、P物質(zhì)和類似物、速激肽相關(guān)肽、凝血酶相關(guān)肽類、凝血酶敏感蛋白類、促甲狀腺激素釋放激素和相關(guān)肽類、TNF肽類、毒素類、尾加壓素相關(guān)肽類、血管活性腸肽類(VIP)、加壓素相關(guān)肽類、病毒肽類、等等。特別感興趣的是肽激素類，它們是當(dāng)進(jìn)入到血流中時(shí)顯示活性并且在活的動(dòng)物體內(nèi)具有內(nèi)分泌功能的一類肽。特別感興趣的肽激素的實(shí)例包括但不限于高血糖素、高血糖素樣肽、胰島素、促生長(zhǎng)素抑制素、降鈣素、甲狀旁腺激素等，以及它們的類似物/衍生物。因此在某些實(shí)施方式中，該肽活性劑是一種肽激素，例如胰島素以及腸降血糖素模擬物類例如艾塞那肽類(exendin)以及相關(guān)的類似物/衍生物(例如化學(xué)合成的和/或生物方式生產(chǎn)的艾塞那肽類例如艾塞那肽-3和艾塞那肽_4、利拉魯肽、高血糖素樣肽-I (GLP-I)、和Taspoglutide、Albiglutide、ZPlO (AVEOO10)、以及它們各自類似物 / 衍生物)。天然存在的腸降血糖素例如GLP-I在從腸釋放到循環(huán)系統(tǒng)中之后顯示促胰島素特性。GLP-I的作用包括(a)以葡萄糖依賴方式刺激胰島素分泌，(b)抑制高血糖素，(C)降低食欲以及食物攝入，(d)減慢胃排空，(e)在動(dòng)物以及組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中刺激￠-細(xì)胞新生、生長(zhǎng)以及分化，以及(f)體外抑制由不同毒素誘導(dǎo)的P -細(xì)胞凋亡。 天然存在的艾塞那肽是可從外分泌腺分離的但是具有內(nèi)分泌作用的肽激素類。艾塞那肽刺激應(yīng)答于血糖水平升高的胰島素分泌，并且調(diào)節(jié)胃排空用來(lái)減慢攝入的糖進(jìn)入血流中。艾塞那肽-3是一種39-氨基酸肽，它與VIP (血管活性腸肽)、分泌素、helospectinI和II以及毒蜥素享有同源性。它刺激增加細(xì)胞cAMP以及淀粉酶從分散的豚鼠胰腺泡中釋放。艾塞那肽-4,最初地從蜥 蜴毒蜥(Heloderma suspectum)的口腔分泌物中分離的一種39個(gè)氨基酸的肽，已經(jīng)顯示與高血糖素樣肽-I (GLP-I)享有某些活性。依澤那太(艾塞那肽，Exenatide) (BYETTA (艾塞那肽注射劑)的活性成分，也稱為艾塞那肽-4)是一種GLP-I拮抗劑，它通過(guò)模擬天然發(fā)生的GLP-I的作用改善了葡萄糖內(nèi)穩(wěn)態(tài)。通過(guò)已知機(jī)理的組合(包括葡萄糖依賴性胰島素分泌，第一相胰島素應(yīng)答的恢復(fù)、調(diào)節(jié)高血糖素分泌、延緩胃排空、以及降低食物攝入)通過(guò)減少禁食以及食后葡萄糖濃度改善了升血糖控制(升胰島素控制，glycemic control)。作為藥物，艾塞那肽是批準(zhǔn)用于治療2型糖尿病的(其中身體不能正常地使用胰島素，并且因此不能控制血液中糖的數(shù)量的病癥)皮下注射的腸降血糖素模擬肽。艾塞那肽是與二甲雙胍、磺酰脲、或噻唑二酮結(jié)合使用的(聯(lián)合使用的)。當(dāng)血糖水平較高時(shí)艾塞那肽通過(guò)刺激胰臟分泌胰島素來(lái)起作用。胰島素幫助將糖從血液移動(dòng)到其他身體組織中，在那里它用于產(chǎn)能。艾塞那肽還顯示使胃排空并且引起食欲降低。艾塞那肽不用于治療I型糖尿病(其中身體不能生產(chǎn)胰島素并且因此不能控制血液中糖數(shù)量的病癥)。艾塞那肽通常在早餐和晚餐之前60分鐘內(nèi)每日注射兩次。利拉魯肽是一種GLP-I衍生物，它類似于艾塞那肽在例如治療2-型糖尿病中找到用途。在皮下注射11-15小時(shí)之后利拉魯肽具有一個(gè)半衰期，這使它適合于每日一次給藥(與Byetta的每日兩次相對(duì)比)。利拉魯肽的延長(zhǎng)作用是通過(guò)附連到GLP-I分子上的脂肪酸分子來(lái)實(shí)現(xiàn)的，它結(jié)合到皮下組織和血流中的白蛋白上。然后活性GLP-I以較慢的、一致速率從白蛋白中釋放。與GLP-I相比較，與白蛋白結(jié)合還導(dǎo)致了更慢的降解以及降低了利拉魯肽通過(guò)腎臟從循環(huán)中消除。因此，用于本公開(kāi)目標(biāo)方法以及組合物中的肽活性劑可以包括腸降血糖素模擬物，例如GLP-1，以及它的各種類似物/衍生物，包括艾塞那肽_4、利拉魯肽、以及它們的各種類似物/衍生物。腸降血糖素模擬物以及感興趣的相關(guān)化合物在美國(guó)專利號(hào)5，118,666;5，120，712;5，187，154;5，264，372; 5, 376，637; 5, 424，286; 5, 512，549; 5, 545，618;5，552，520; 5, 574，008; 5, 614，492; 5, 631，224; 5, 686，511;5，846，937; 5, 958，909; 6, 162，907; 6, 19I, 102; 6，268，343; 6，284，727 ; 6，358，924; 6，448，045; 6，458，924; 6，506，724; 6，528，486; 6，703，359; 6，706, 689; 6，723，530; 6，767，887; 6，828，303 ; 6，849，708; 6，852，690; 6，858，576 ; 6，872，700; 6，884，585; 6，899，883; 6，902，744; 6，911，324; 6，924，264; 6，956，026 ; 6，982，248; 6，989，148; 6，989，366 ; 7，022，674; 7，056，734; 7，056，887; 7，078，375; 7，084，243 ; 7，115，569; 7, 119，168; 7, 138，375 ; 7, 138，486; 7, 153，825; 7, 157，555; 7, 164，005; 7, 220，721;7，223，725; 7，226，990; 7，259，234; 7，273，850; 7，297，761; 7, 307，148 中進(jìn)行說(shuō)明，它們的披露內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。用于本公開(kāi)的目標(biāo)方法以及組合物中的另外的肽活性劑可以包括胰島素，例如人胰島素以及它的各種類似物/衍生物。胰島素和感興趣的相關(guān)化合物在美國(guó)專利號(hào)4，511，505; 5，631，347; 5，646，242 ; 5，693，609; 5，700，904; 5，750，497; 5，922，675; 6，011，007; 6，051，551; 6，159，931; 6，162，895; 6，268，335; 6，309，633 ; 6，444，641; 6，465，426; 6，531，448;6，713，452; 6，770，625; 6，828，297; 6，835，802; 6，858，580; 6，867，183; 6，869，930 ; 6，913，903; 7, 030，084; 7, 060，675 ; 7, 084，114;7，084，121;7，166，571;7，169，889; 7, 196，059; 7, 211，557; 7, 273，921; 7, 312，192中進(jìn)行說(shuō)明，它們的披露內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。用于本公開(kāi)的目標(biāo)方法以及組合物中的其他肽活性劑可以包括甲狀旁腺激素、或降鈣素(例如用于治療佩吉特病、高血鈣以及骨質(zhì)疏松，包括天然的，合成的或重組的人、鮭魚(yú)、豬或鰻魚(yú)降鈣素)。甲狀旁腺激素，降鈣素以及感興趣的相關(guān)化合物在美國(guó)專利號(hào)4，692，433、以及RE40，850中進(jìn)行說(shuō)明，它們的披露內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。在目標(biāo)方法以及組合物的某些方面中，該肽活性劑是腸降血糖素模擬肽。在一個(gè)特征實(shí)施方式中，該腸降血糖素模擬肽是艾塞那肽-4以及它的類似物/衍生物。在一個(gè)特征性實(shí)施方式中，該腸降血糖素模擬物是利拉魯肽以及它的類似物/衍生物。在其他實(shí)施 方式中，該肽活性劑是類高血糖素肽(GLP-I)-I以及它們的類似物/衍生物。在其他實(shí)施方式中，該肽活性劑是胰島素以及它們的類似物/衍生物。在一些實(shí)施方式中，該肽活性劑是除了選自在此所述肽(例如胰島素)的一種或多種的肽，包括大于約50個(gè)氨基酸的肽，例如大于約100個(gè)氨基酸的肽。本公開(kāi)的范圍還包括這些肽活性劑的藥物前體。通常地這類藥物前體是在體內(nèi)可易于轉(zhuǎn)換成所需要化合物的化合物的功能性衍生物。因此，在本公開(kāi)的方法中，術(shù)語(yǔ)“給予(施用)”包括給予(施用)明確公開(kāi)的化合物或與尚未明確公開(kāi)的化合物一起給予(施用)，但是在給予(施用)到需要它的受試者體內(nèi)之后在體內(nèi)它轉(zhuǎn)換成特定化合物。用于選擇和制備適當(dāng)藥物前體衍生物的常規(guī)步驟例如在Wermuth, “Designing Prodrugsand Bioprecursors，，in Wermuth, ed. The Practice of Medicinal Chemistry, 2dEd. ,pp. 561-586 (Academic Press 2003)中進(jìn)行說(shuō)明。藥物前體包括具有翻譯后位點(diǎn)或合成修飾位點(diǎn)，酶或化學(xué)可斷裂鍵的肽類，例如具有蛋白酶可切割前導(dǎo)序列殘基或序列的肽，或在體內(nèi)水解(例如在人體內(nèi))從而產(chǎn)生在此所述的適合于本公開(kāi)化合物的酯。適當(dāng)?shù)孽セ鶊F(tuán)包括但不限于從藥學(xué)上可接受的脂肪族羧酸，具體地鏈烷酸、鏈烯酸、環(huán)烷酸以及烷二酸衍生的那些。示例性的酯類包括甲酸酯類、乙酸酯類、丙酸酯類、丁酸酯類、丙烯酸酯類、檸檬酸酯類、琥珀酸酯類、以及琥珀酸乙酯類。冠狀化合物這些冠狀化合物包括例如環(huán)狀聚醚類(冠醚類，例如18-冠-6)以及環(huán)狀聚酯類(冠酯類，例如聚內(nèi)酯類如無(wú)活菌素(nonactine)以及四抗菌素(tetranactine),聚乙醇酸酯或乳酸酯)，以及它們的類似物/衍生物(例如，WO 08/037484; Lifsonet al. , J. Am. Chem. Soc. (1983) 105 : 3866-3875 ; Lifson et al. , J. Am. Chem. Soc.(1984)23:2577-2590;以及 McGeary et al.，Tetrahedron (2000) 56:8703-8713 ;這些參考文獻(xiàn)以其全部?jī)?nèi)容結(jié)合在此)。特別感興趣的是選自下面的冠狀化合物(i)環(huán)狀聚酯；
(ii)環(huán)狀聚酰胺；(iii)環(huán)狀聚醚；(iv)環(huán)狀聚廂；(v)聚硫酯(polythioester); (vi)氨基含氧酸的聚合物；(vii)聚二硫化物；(viii)環(huán)狀聚二B,惡燒酮，以及(ix)屬于(i)至(ix)的多于一個(gè)的環(huán)狀化合物，其中該冠狀物是能夠與陽(yáng)離子例如質(zhì)子化的伯氨基基團(tuán)(-NH3+),和/或質(zhì)子化的仲氨基基團(tuán)(-NH2+-),和/或質(zhì)子化的胍基基團(tuán)(-NH-C (=NH2+)-NH2)形成電荷屏蔽復(fù)合物的結(jié)合陽(yáng)離子的冠狀化合物。這些冠狀化合物包括例如環(huán)狀聚醚類。在某些實(shí)施方式中，這些冠狀化合物是環(huán)狀聚醚類、環(huán)狀聚酯類、以及環(huán)狀縮酚肽(其中“縮酚肽”是指包括a-羥基酸類和a-氨基酸類、或它們混合物或由其構(gòu)成的冠狀化合物，它們通過(guò)a-羥基酸的羥基與羥基酸亦或氨基酸的羧基基團(tuán)之間的酯鍵以及通過(guò)a -氨基酸的氨基基團(tuán)與羥基酸亦或氨基酸的羧基基團(tuán)之間的酰胺鍵連接到彼此上)。目標(biāo)冠狀化合物的直鏈形式，例如它們的斷裂(cleavage)形式，能夠以帶電荷絡(luò)合劑形式用于本公開(kāi)的一些方面中。這樣，在某些實(shí)施方式中，該冠狀化合物包括可生物降解的鍵。通常地，該生物可 降解的鍵是在體內(nèi)可斷裂的。特別感興趣的生物可降解鍵的實(shí)例包括酯類，例如羧酸酯類(-C(o)-o-)、硫酯類(-C(O)-S-)、原酸酯類(-C(C)R1) (0R2)以及(-C(C)R1) (OR2) (0R3))等。生物可降解鍵的另外實(shí)例包括二硫化物(-S-S-)、希夫堿(R1R2C=N-R3)等。特別感興趣的是其中生物可降解鍵是酯，并且更具體地選自羧酸酯，以及原酸酯的酯。在與其同日提交的名稱為 “Orthoester derivatives of crown ethers” 并且具有律師案號(hào) “R1856” 的共同未決的專利申請(qǐng)中公開(kāi)了特別感興趣的冠狀化合物，該參考文獻(xiàn)以其全部?jī)?nèi)容結(jié)合在此。羧酸酯和原酸酯冠狀化合物的實(shí)例包括但不限于氧代-冠狀物以及它們的類似物/衍生物，具體地氧代-冠狀物醚類。在一個(gè)實(shí)施方式中，這些氧代-冠醚包括4至8個(gè)配位氧環(huán)原子，8至16個(gè)環(huán)碳原子，以及至少一個(gè)氧代取代側(cè)鏈。特別感興趣的是氧代-(18-冠-6)化合物以及它們的類似物/衍生物，例如如下面所示包括選自氧代-(18-冠-6)、酒石酸氧代-(18-冠-6) - 二乙酯、以及酒石酸氧代-(18-冠-6)- 二甘油酯結(jié)構(gòu)的那些。
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酒石酸氧代JI
冠狀物乙隱 HOnOH
酒石酸氧代- 冠狀物貨油酯反離子存在反離子允許形成穩(wěn)定水合肽活性劑的可電離基團(tuán)的中性電荷種類。總體上，反離子以在部分中和、或賦予該穩(wěn)定水合的肽活性劑整體中性的條件下與冠狀化合物相結(jié)合的數(shù)量存在。在某些實(shí)施方式中，該反離子是酸性鹽(例如，水楊酸、乙酸、三氟乙酸、酒石酸、磷酸、乳酸、富馬酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、甲磺酸、對(duì)-甲苯磺酸)、氨基酸(例如，賴氨酸、甘氨酸、組氨酸、精氨酸)、或修飾的氨基酸(例如，N-乙?；?賴氨酸-酰胺，N-乙?；?精氨酸-酰胺)的反離子。還考慮了不同反離子的組合。因此，在一些實(shí)施方式中，該反離子選自酸性鹽、氨基酸、修飾的氨基酸、以及它們的混合物。一個(gè)方面是其中酸性鹽的反離子是親水性酸或親脂性酸。感興趣的親水性酸的實(shí)例包括但不限于三氟乙酸、磺酸、以及苯甲酸。特別感興趣的親脂性酸的實(shí)例包括但不限于芳基和烷基磺酸類例如十二烷基磺酸以及更高級(jí)同系物，磷脂酰甘油衍生物例如二月桂酰基磷脂酰甘油(DLPG),硫辛酸(lipoic acid)等。這樣,可以使用其他適當(dāng)?shù)挠H脂性酸類。特別感興趣的是強(qiáng)親脂性酸(例如烷基磺酸以及更高級(jí)的同系物)的酸性鹽的反離子。在某些實(shí)施方式中，該親水性酸選自由三氟乙酸、磺酸、以及苯甲酸組成的組。在其他實(shí)施方式中，該親脂性酸是十二烷基磺酸。當(dāng)使用較強(qiáng)酸性反離子時(shí)(例如十二烷基磺酸)，要小心避免例如易于包含抗氧化劑的肽類氧化，限制反離子濃度等。如上所述，親脂性酸類，例如具有在2至30個(gè)之間，并且通常在8至10個(gè)之間碳原 子烷基鏈的烷基磺酸類是特別感興趣的。在芳環(huán)上具有一個(gè)或多個(gè)烷基取代基的芳基磺酸類(每個(gè)烷基取代基通常具有2至30之間，更通常在8至10個(gè)之間碳原子)是適當(dāng)反離子的另外的實(shí)例。在一些實(shí)施方式中，還可以使用某些磷脂類作為反離子。例如，在磷酸酯上具有至少一個(gè)酸性質(zhì)子的磷脂類，例如具有一個(gè)酸性質(zhì)子的磷脂酰甘油或磷脂酰糖，或具有兩個(gè)酸性質(zhì)子的磷脂酸是令人感興趣的。對(duì)應(yīng)地包括在這類磷脂或磷脂酰部分中的鏈烷酸通常各自具有4至30個(gè)之間，更典型地在6至20個(gè)之間，并且通常在8至18個(gè)之間的碳原子。包括兩個(gè)鏈烷酸的磷脂可以是對(duì)稱的亦或非對(duì)稱的。在后者情況中，磷脂分子包括兩個(gè)不同的脂肪酸。在另一個(gè)實(shí)施方式中，這些磷脂具有天然起源，像例如磷脂酰肌醇。在某些感興趣的實(shí)施方式中，該反離子可以是具有多個(gè)酸性化合價(jià)的酸(多質(zhì)子)或多羧酸。特別感興趣的是包括但不限于磷酸硫酸等的無(wú)機(jī)酸類，以及包括但不限于雙羧酸芳香族酸類例如苯二甲酸以及對(duì)苯二甲酸，以及來(lái)自烷基草酸、丙二酸、琥珀酸、酒石酸、馬來(lái)酸、富馬酸等的有機(jī)酸類。實(shí)際上，在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，選擇的雙羧酸可以用作反離子用來(lái)使肽側(cè)鏈的氨基基團(tuán)(顯著地賴氨酸以及精氨酸)產(chǎn)生陽(yáng)離子電荷。因此在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，可以制備每個(gè)氨基基團(tuán)反離子具有約I個(gè)雙羧酸的肽活性劑，并且然后可以使PH從約pH6至PH8恢復(fù)到大約中性。在這類條件下，在肽鏈上的氨基基團(tuán)(具體地賴氨酸以及精氨酸)仍然可以通過(guò)該酸的第一酸性部分完全質(zhì)子化，并且另一個(gè)酸性功能同時(shí)電離并且適合與緩沖劑形成鹽產(chǎn)生額外的陽(yáng)離子電荷，例如鈉或鉀。在這種策略下，可以顯著地增加肽的陽(yáng)離子電荷，有可能導(dǎo)致更好的溶解度(溶解性)，減少聚集并且增強(qiáng)肽穩(wěn)定性。非水性疏水載體非水性疏水載體通常能夠增溶，或保持肽復(fù)合物和/或肽鹽均勻分散在其中的溶解性。因此，當(dāng)結(jié)合在非水性疏水載體中時(shí)該肽復(fù)合物和/或肽鹽在外觀上可以是清澈或渾濁的，其條件是有效量的肽活性劑均勻地分散在其中而不形成不想要的沉淀和/或聚集體。如上所述，特別感興趣的是其中粘膜組合物的非水性疏水載體包括至少一種?；视?，以及至少一種有機(jī)溶劑和/或脂類，它們各自獨(dú)立地以對(duì)于下面各項(xiàng)有效的量存在(i )使與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑溶解以及(ii)增強(qiáng)肽活性劑的粘膜遞送。酰基甘油?；视腕w現(xiàn)不溶于水的甘油(丙-1，2，3-三醇)與脂肪酸的酯類，并且可以細(xì)分成單、二或三-0-?；视?S卩，根據(jù)?；鶊F(tuán)的數(shù)量以及位置的I-或2-甘油單酯類；1，2-或1，3-甘油二酯類；以及甘油三酯類，以及用于混合物的甘油單-二酯類等)。酰基甘油的實(shí)例包括但不限于玉米油二甘油單-二-三酯類、中鏈甘油(C8-Cltl)單-以及二酯類、長(zhǎng)鏈甘油三酯類(蓖麻油、玉米油、棉籽油、橄欖油、花生油、薄荷油、紅花油、芝麻油、大豆油、氫化大豆油、氫化蔬菜油)、以及中鏈甘油三酯類(例如從椰子油或棕櫚子油衍生的辛酸/羊脂酸甘油三酯類)。這類酰基甘油類通常認(rèn)為可安全地用作直接的食物添加劑，以及用作化妝品以及藥物應(yīng)用。具有取代或未取代的、飽和或不飽和的約8-10個(gè)碳(C8-Cltl)以及更高級(jí)同系物的脂肪鏈的?；视皖愂锹匀苡诨虿蝗苡谒?，是特別感興趣的。在某些實(shí)施方式中，該?；视褪沁x自單酰基甘油、二?；视?、以及它們的混合物。特別感興趣的是在環(huán)境的、正常室溫下是固體或半固體的單酰基甘油類以及二?；?甘油類，具體地是中鏈(C8-Cltl)單-以及二?；视汀Ｒ虼?，一個(gè)特征性方面是針對(duì)中鏈(C8-C10)單?；视皖?，例如單癸?；视?。根據(jù)給定的給藥途徑以及劑型，能夠以一定數(shù)量包括至少用作酰基甘油使得該配制品在希望的溫度下是液體、凝膠、或固體或半固體。例如固體口服遞送配制品能夠以一定數(shù)量使用一種或多種特定的?；视褪沟迷撆渲破吩诳蛇_(dá)約50° C至約55° C的溫度下是固體或半固體。相對(duì)地，可以選擇一種酰基甘油配制品，在比這個(gè)溫度低的溫度下該配制品是液體或凝膠。例如，可以選擇一種酰基甘油配制品使得以一定數(shù)量包括至少一種?；视蛷亩峁┮环N配制品，該配制品在4° C下是固體，并且在室溫下或在宿主體溫下或其附近熔化(例如，在4° C是固體并且在37° C-45° C附近熔化或開(kāi)始熔化)。特別感興趣的是在低于宿主大致體溫的溫度下是固體或半固體的?；视团渲破罚缭谛∮诩s37° C-45° C下是固體或半固體的酰基甘油配制品。通常地，可以基于其熔點(diǎn)選擇具有這類特征(除了給定配制品的其他組分)的?；视?。特別感興趣的是在環(huán)境溫度下是固體或半固體并且具有約60° C或更低，通常地約55° C或更低，并且更典型地約53° C或更低熔點(diǎn)的?；视停鐔喂秕；视途哂屑s53° C的熔點(diǎn)。許多這類?；视褪且阎牟⑶铱缮藤?gòu)。特別感興趣的是具有不飽和長(zhǎng)烷基鏈的?；视?優(yōu)選C18-C21)，例如油酸單酯(mono-olein)(與油酸的甘油酯)、亞油酸單酯、反油酸單酯(mono elaidin)、芥子酸單酯等，在室溫下它們是液體和/或半固體。例如，在低于大致宿主體溫的溫度下中鏈(C8-Cltl)單-以及二酰基甘油典型地是固體或半固體，并且因此具有，或可以配制以具有，低于大致宿主體溫的熔點(diǎn)，通常小于約37° C，并且這樣是特別令人感興趣的。因此，一旦將這類?；视突衔镞f送到宿主體內(nèi)，宿主體溫可以熔化該半固體物質(zhì)，允許根據(jù)需要溶解和遞送該肽活性劑。因此，在低于宿主大致體溫的溫度下是半固體的?；视涂梢杂欣赜糜?I)降低粘膜遞送載體的體積，因?yàn)榕c它們液體形式相比較固體或半固體具有減少的體積，以及
(2)為固體或半固體劑型提供靈活性(如下面更詳細(xì)說(shuō)明的)。本公開(kāi)的這個(gè)方面還有助于在肽活性劑保持在粘膜遞送組合物中以避免在遞送之前不希望的泄露，當(dāng)遞送時(shí)更均勻地溶解該肽活性劑，通常增強(qiáng)了跨感興趣粘膜的滲透性，以及將該肽活性劑以其穩(wěn)定水合形式保持在粘膜遞送組合物中。因此在某些實(shí)施方式中，在低于宿主大致體溫的溫度下該?；视褪前牍腆w。在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，在環(huán)境的、正常室溫下該?；视褪前牍腆w，例如中鏈單-以及二?；视?。本公開(kāi)的一個(gè)特征性方面是針對(duì)中鏈(C8-Cltl)單酰基甘油類，例如單癸酰基甘油。在其他實(shí)施方式中，一種或多種飽和的?；视偷幕旌衔?優(yōu)選C6-C24)可以與如上定義的一種或多種長(zhǎng)烷基鏈不飽和酰基甘油一起使用。使用這類混合物允許優(yōu)化多種物理/化學(xué)特性，例如但不限于本發(fā)明組合物的粘度、以及熔點(diǎn)。脂質(zhì)(酯類)脂類通常定義為疏水或兩親的小分子。脂類的實(shí)例包括脂肪類、蠟類、留醇類、脂溶性維生素類(例如維生素A、D、E以及K)、甘油單酯類、甘油二酯類、磷脂類等。因此，在某些實(shí)施方式中，酯類組分包括?；视停绠?dāng)脂類是一種油時(shí)，例如玉米油甘油 單-二 -三酯、長(zhǎng)鏈甘油三酯例如橄欖油、蓖麻油、玉米油、棉籽油、花生油、薄荷油、紅花油、芝麻油、大豆油、氫化大豆油、氫化植物油、中鏈甘油三酯例如從椰子油或棕櫚子油等衍生的辛酸/羊脂酸甘油三酯。在某些實(shí)施方式中，該脂類不是一種?；视?，例如當(dāng)該脂類是脂肪酸、或一種中性脂類例如維生素E (例如，a-、P-、Y-、以及S-生育酚類，以及相應(yīng)的四生育三烯酚類，它們是脂溶性中性維生素)時(shí)。特別感興趣的是其中該脂類包括脂肪酸，更具體地滲透性增強(qiáng)的脂肪酸，該脂肪酸是脂肪酸羧酸，它可以是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈的，并且可以包括不同脂肪酸的混合物。除了飽和之外，脂肪酸是短、中或長(zhǎng)(鏈)的。短鏈脂肪酸是具有小于7個(gè)碳脂肪族尾部的脂肪酸。中鏈脂肪酸是具有7-14個(gè)碳的脂肪族尾部的脂肪酸。長(zhǎng)鏈脂肪酸是具有16個(gè)碳或更多碳的脂肪族尾部的脂肪酸。特別感興趣的脂肪酸的實(shí)例包括具有7-19個(gè)碳原子選自羊脂酸、辛酸、壬酸、癸酸、i^一烷酸、十二烷酸、肉豆蘧酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、以及它們混合物的飽和脂肪酸。不飽和脂肪酸的實(shí)例包括具有7-19個(gè)碳原子選自棕櫚油酸、油酸、亞油酸、a -亞油酸、以及它們混合物的那些。這些脂肪酸的每一種都在不同消費(fèi)品中找到用途，包括它們作為食物添加劑、在化妝品、以及藥物應(yīng)用中的用途，并且因此總體上可以認(rèn)為對(duì)于它們的預(yù)期用途是安全的。感興趣的一個(gè)方面是滲透性增強(qiáng)的脂肪酸用作粘膜遞送組合物的賦形劑用來(lái)幫助和/或保持肽活性劑處于其穩(wěn)定水合狀態(tài)。為了這個(gè)目的具有從7至14個(gè)碳原子并且具體地7-12個(gè)碳原子的滲透增強(qiáng)的脂肪酸是特別感興趣的。一個(gè)特征性方面是一種滲透性增強(qiáng)的脂肪酸，該脂肪酸是選自羊脂酸、辛酸、壬酸、癸酸、十一烷酸、十二烷酸的飽和脂肪酸。特別感興趣的是壬酸，并且因此當(dāng)用于本公開(kāi)的粘膜遞送組合物中時(shí)，這些脂肪酸呈現(xiàn)其粘膜遞送特性。例如如在此說(shuō)明的，可以容易地確定脂肪酸的滲透性增強(qiáng)特征。在許多實(shí)施方式中，該非水性疏水載體包括能夠溶解與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑的非水性溶劑。根據(jù)本公開(kāi)的非水性溶劑包括可以用作藥物或診斷組合物中的組分的溶劑，和/或可以在其制造和配制過(guò)程期間中使用的溶劑。換言之，這類溶劑的醫(yī)學(xué)用途得到批準(zhǔn)和/或它們的用途沒(méi)有對(duì)有待治療的個(gè)體健康造成威脅。這樣，術(shù)語(yǔ)“非水性溶劑”還包括天然產(chǎn)物例如油類，以及天然產(chǎn)物衍生物類例如Cremofor EL
坐寸o
有機(jī)溶劑在一個(gè)實(shí)施方式中，該非水性疏水載體包括至少一種有機(jī)溶劑。術(shù)語(yǔ)“有機(jī)溶劑”是本領(lǐng)域已知的并且涉及通常用于化學(xué)工業(yè)中，能夠溶解或分散一種或多種物質(zhì)的的碳基(含碳)物質(zhì)。總體上講，有機(jī)溶劑是比水更親脂性或更疏水性的。其結(jié)果是，它們的IogP值通常大于零。特別感興趣的是非極性有機(jī)溶劑類、具有比水更小偶極距的有機(jī)溶劑類、以及疏水性的有機(jī)溶劑類(即，難以或根本與水混溶的溶劑)。根據(jù)本公開(kāi)的有機(jī)溶劑是指未取代的烴溶劑例如石蠟烴、脂肪烴以及芳香烴類以及包含雜原子(例如氧(例如，醇類 、酮類、二醇酯類)、鹵素類(例如四氯化碳)、氮(例如，DMF、二甲基甲酰胺以及乙腈)或硫(例如，DMSO :二甲基亞砜))的它們的衍生物。常用的有機(jī)溶劑是甲醇、乙醇、從C3至Cltl的醇類、乙腈、丁酮、1，I, I-三氟乙醇(TFE)、六氟異丙醇(HFIP)、乙酸乙酯、四氯化碳、丁醇、二丁醚、二乙醚、環(huán)己烷、亞甲基氯(二氯甲烷)、己烷、乙酸丁酯、二異丙醚、苯、二戊醚、氯仿、庚烷、四氯乙烯、甲苯、十六烷、二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃(THF)以及二噁烷。在某些實(shí)施方式中，至少一種有機(jī)溶劑是水溶性的有機(jī)溶劑。這種水溶性有機(jī)溶劑的實(shí)例包括但不限于六乙二醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、乙醇、丙二醇、甘油、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、以及二甲基亞砜。這些組分的每一種都是可商購(gòu)的，發(fā)現(xiàn)于多種藥物產(chǎn)品中，并且通常認(rèn)為對(duì)于它們的預(yù)期用途是安全的。因此，在某些實(shí)施方式中，該水溶性的有機(jī)溶劑包括濕潤(rùn)劑(例如二醇、多元醇、或它們的混合物)或由其組成。在其他實(shí)施方式中，該水溶性的有機(jī)溶劑是極性非質(zhì)子溶劑。在一些實(shí)施方式中，該水溶性有機(jī)溶劑包括極性非質(zhì)子溶劑與濕潤(rùn)劑的混合物。濕潤(rùn)劑是具有用來(lái)與水分子形成氫鍵的親和性的吸濕性物質(zhì)。它典型地是具有數(shù)個(gè)親水性基團(tuán)的分子，這些基團(tuán)最通常地是羥基基團(tuán)，但是也可以遇到胺類以及羧基基團(tuán)(有時(shí)酯化的)。濕潤(rùn)劑的實(shí)例包括甘油、丙二醇以及甘油三乙酸酯。其他種類可以是多元醇例如糖醇類赤蘚醇、阿糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露醇、山梨醇、異麥芽糖醇、麥芽糖醇、以及拉克替醇、或聚合物多元醇例如聚葡萄糖或天然提取物類例如皂樹(shù)皮，或聚乙二醇類例如六乙二醇(麗282. 3)、聚乙二醇300或聚乙二醇400。在某些實(shí)施方式中，一種或多種二醇、多元醇以及它們的混合物包括在該非水性疏水載體中不僅有助于溶解穩(wěn)定水合的肽活性劑，而且作為OH (羥基)基團(tuán)的來(lái)源(它易于與該肽形成氫鍵以有助于穩(wěn)定作用)。作為舉例，當(dāng)配制成干粉或殘余物時(shí)，肽類，具體地較大的肽類(例如蛋白)可以與糖醇例如甘露醇一起干燥從而保持折疊以及生物活性。這是因?yàn)楫?dāng)無(wú)水(在溶液中)以及以干粉或殘余物形式配制時(shí)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些肽通常失去生物活性。特別感興趣的是包括極性非質(zhì)子溶劑、丙二醇、甘油、以及聚乙二醇中的兩種或多種的混合物的水溶性有機(jī)溶劑。甘油(或丙-I. 2. 3-三醇)是無(wú)色、無(wú)嗅、粘稠液體，廣泛用于食物以及藥物配制品中。也通常稱為甘油或丙三醇，它是一種糖醇，并且具有甜味以及低毒性。甘油具有三個(gè)親水性醇羥基基團(tuán)，它們負(fù)責(zé)它在水中的溶解性以及它的吸濕特性。丙二醇(或丙-1，2- 二醇)是一種二醇，通常是無(wú)味、無(wú)嗅、以及無(wú)色的澄清油狀液體，它具有吸濕性并且與水、丙酮、以及氯仿混溶。由于其低慢性口服毒性，對(duì)于用作直接食品添加齊U，以及用于化妝品以及藥物應(yīng)用而言丙二醇通常被認(rèn)為是安全的(GRAS)。聚乙二醇(或PEG)，也稱為聚乙烯氧化物(PEO)或聚氧乙烯(P0E)，是聚醚類。特別感興趣的是具有低于20，000g/mol分子量的PEG低聚物以及聚合物，以及多種衍生物，其中最常見(jiàn)的是單官能的甲基醚PEG (甲氧基聚乙二醇)，縮寫(xiě)為mPEG。特別感興趣的是具有低于8000g/mol、4000g/mol、1000g/mol、800g/mol、700g/mol、或600g/mol分子量的PEG 二醇類，并且具體地具有在約200-500g/mol之間分子量的PEG 二醇類，例如六乙二醇，并且更好地是稱為PEG300和PEG 400的。關(guān)于上面提到的其他組分，對(duì)于用作直接的食品添加劑，以及用于化妝品和藥物應(yīng)用而言，目標(biāo)的PEG化合物通常認(rèn)為是安全的。極性非質(zhì)子溶劑是享有質(zhì)子溶劑的離子的溶解力但是缺少酸性氫的溶劑。這些溶劑通常具有較高的介電常數(shù)以及較高的極性。實(shí)例是N-甲基-吡咯烷酮(或N-甲基-2-批咯烷酮)、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、二噁烷以及六甲基磷酸三酰胺。在目標(biāo)組合物中極性非質(zhì)子溶劑的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它們的高溶解特性以及保持和/或減少肽的不希望的電離作用的能力。特別感興趣的是N-甲基-2-吡咯烷酮。N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP，PharmasoIve)是非常強(qiáng)的增溶劑并且作為增溶劑發(fā)現(xiàn)于數(shù)種可商購(gòu)的藥物產(chǎn)品中。它還以揮發(fā)組分的形式發(fā)現(xiàn)于燒烤的堅(jiān)果中，并且是可與水、乙醇、醚、氯仿、苯、乙酸乙酸以及二硫化碳混溶的通用溶劑。·在某些實(shí)施方式中，該有機(jī)溶劑包括一種非離子型表面活性劑。該非離子型表面活性劑還可以是一種非水性溶劑、有機(jī)溶劑、和/或水溶性有機(jī)溶劑。非離子型表面活性劑的實(shí)例包括但不限于聚乙二醇35蓖麻油(Cremophor EL)、聚乙二醇40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40)、和聚乙二醇60氧化蓖麻油(Cremophor RH 60)、以及d_ a -生育酌 、聚乙二醇1000琥珀酸酯、聚山梨酯20、聚山梨酯80、山梨坦單月桂酸酯(司盤20)、山梨坦單棕櫚酸酯(司盤40)、山梨坦單硬脂酸酯(司盤60)、山梨坦單油酸酯(司盤80)、Solutol HS
15、山梨醇單油酸酯、泊洛沙姆 407、Labrafil M-1944CS、Labrafil M-2125CS、LabrasoUGellucire 44/14、Softigen 767、以及 PEG 300、400、或 1750 的單-以及二脂肪酸酯。這些組分的每一種都是可商購(gòu)的，發(fā)現(xiàn)于多種藥物產(chǎn)品中，并且對(duì)于它們的預(yù)期用途而言通常認(rèn)為是安全的。因此，在某些實(shí)施方式中，該非離子型表面活性劑選自聚氧乙基化的多元醇、用脂肪酸酯化的聚氧乙基化的多元醇、以及它們的混合物。在某些實(shí)施方式中，該非離子型表面活性劑是選自由聚乙二醇35蓖麻油(Cremophor EL)、聚乙二醇40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40)、聚乙二醇60氫化的蓖麻油(Cremophor RH 60)、以及它們的混合物組成的組中的聚氧乙基化的多元醇，并且用脂肪酸酯化的聚乙氧基化的多元醇選自由聚山梨酯20 (吐溫20)、聚山梨酯80 (吐溫80)、以及它們的混合物組成的組。一個(gè)特征性實(shí)施方式是其中非離子型表面活性劑是聚氧乙基化的多元醇例如聚乙氧基化的蓖麻油，并且具體地聚乙二醇35蓖麻油(Cremophor EL)。還感興趣的是維生素E,例如單獨(dú)地d-a -生育酹或與其他維生素E化合物結(jié)合,因?yàn)樗梢杂欣谀繕?biāo)配制品的適度的酸性酚基團(tuán)。這樣，在某些實(shí)施方式中，該非水性疏水載體是酸性的，并且至少一種?；视褪侵墟滜；视?，至少一種脂類包括短鏈脂肪酸和/或中鏈脂肪酸，并且至少一種水溶性有機(jī)溶劑是極性非質(zhì)子溶劑。例如，在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該中鏈?；视褪菃喂秕；视?，該短鏈脂肪酸是壬酸，該中鏈脂肪酸是油酸，并且該極性非質(zhì)子溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮。在其他實(shí)施方式中，該非水性疏水載體是中性的，并且至少一種?；视褪侵墟滜；视?，至少一種脂類是中性脂，并且至少一種水溶性有機(jī)溶劑是極性非質(zhì)子溶劑。例如，該中鏈酰基甘油是單癸?；视团c辛?；视偷幕旌衔铮撝行灾愂蔷S生素E，并且該極性非質(zhì)子溶劑是丙二醇N-甲基-2-吡咯烷酮。在一些實(shí)施方式中，將該粘膜遞送組合物構(gòu)成為乳液、分散體、脂質(zhì)體、或膠束，包括反膠束(如下面更詳細(xì)說(shuō)明的)。其他組分這些組合物可以進(jìn)一步包括其他藥學(xué)上可接受的組分作為賦形劑。這類組分的實(shí)例是本領(lǐng)域熟知的并且包括非離子型表面活性劑、抗氧化劑、緩沖劑、粘度調(diào)節(jié)劑、螯合劑、各種類型的潤(rùn)濕劑、稀釋劑、滅菌劑等(如下面更詳細(xì)地說(shuō)明的)。 非離子型表面活性劑或去污劑(洗滌劑)包括具有疏水性尾部以及不帶電荷的頭部基團(tuán)的有機(jī)化合物。實(shí)例包括但不限于烷基聚(乙烯氧化物)、烷基酚聚(乙烯氧化物)、聚(乙烯氧化物)與聚(丙烯氧化物)的共聚物(商業(yè)上稱為泊洛沙姆或泊洛沙胺(poloxamine))、烷基聚葡糖苷例如例如辛基葡糖苷以及癸基麥芽糖苷、脂肪醇類例如鯨蠟醇以及油醇、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、以及聚山梨酯類例如吐溫20、吐溫80、以及十二烷基二甲胺氧化物等。特別感興趣的是非離子型去污劑例如P-D-辛基葡糖苷。特別感興趣的是抗氧化劑類，它們通常是還原劑類例如硫醇類、褪黑激素、硫辛酸、尿酸、胡蘿卜素、抗壞血酸、多酚類等，例如谷胱甘肽，以及維生素E，以及酶類例如過(guò)氧化氫酶、超氧化物歧化酶以及各種過(guò)氧化物酶。特別感興趣的抗氧化劑的實(shí)例包括但不限于N-乙?；?甲硫氨酸、生物素、抗壞血酸、谷胱甘肽、以及維生素E。這樣，在一個(gè)實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括一種抗氧化劑。在一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方式中，預(yù)形成的肽復(fù)合物包括抗氧化劑。特別感興趣的其他組分是抗壞血酸鏈烷酸酯，其烷基鏈優(yōu)選地是從CS至C24并且是飽和或不飽和的。這類化合物可以用作表面活性劑。這樣，它們可以促進(jìn)微乳化作用以及形成微凝膠。落在這個(gè)類別中的優(yōu)選的化合物是例如如在Zaino et al.，Lat.Am. J. Pharm.，28，438-442，2009中披露的6_0_月桂基抗壞血酸。抗壞血酸鏈烷酸酯的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它們不但用于遞送和穩(wěn)定根據(jù)本發(fā)明的肽活性劑，而且進(jìn)一步能夠防止或減少其氧化作用。因此，這些化合物可以用作表面活性劑和/或抗氧化劑。根據(jù)本公開(kāi)的用于粘膜遞送的優(yōu)選載體或用于配制品的稀釋劑包括如上討論的非水性溶劑。考慮存儲(chǔ)和劑量方案(這可以通過(guò)多種臨床因素來(lái)確定)通過(guò)熟知的常規(guī)方法可以配制包括這類載體的組合物。例如，該肽活性劑能夠以Ing至10mg/kg體重/劑量的量存在；然而，考慮了低于或高于該示例性范圍的劑量，特別地考慮了上述因素?？紤]的配制品另外包括微球、脂質(zhì)體、微膠囊、以及納米顆粒/納米膠囊。針對(duì)本公開(kāi)的組合物另外考慮的成分包括環(huán)糊精類(參見(jiàn)例如Irie andUekama(1999)或Challa et al. (2005))和/或殼聚糖。環(huán)糊精與化合物上存在的疏水性部分形成包涵體復(fù)合物。此外，它們提供一個(gè)親水性外表面。包括環(huán)糊精或殼聚糖的組合物可以提供肽活性劑的延遲釋放和/或在延長(zhǎng)的時(shí)間期間內(nèi)釋放。因此，有待制造的組合物進(jìn)一步包括環(huán)糊精。環(huán)糊精是本領(lǐng)域已知的并且包括a-環(huán)糊精、￠-環(huán)糊精以及Y-環(huán)糊精。換言之，在第一步驟中，將穩(wěn)定水合的肽活性劑絡(luò)合從而形成第一肽復(fù)合物，然后，在第二步驟中，將第一肽復(fù)合物絡(luò)合從而與環(huán)糊精形成一個(gè)第二層，更具體地是環(huán)糊精的疏水性內(nèi)部空腔，由此產(chǎn)生總計(jì)兩個(gè)水平的復(fù)合作用。這打開(kāi)了用于設(shè)計(jì)新型遞送方案的可能性例如，將穩(wěn)定的活性肽成分捕獲于(i)脂質(zhì)體、(ii)微球、(iii)微膠囊、(iv)納米顆粒/納米膠囊中。這些賦形劑可以進(jìn)一步包括一種或多種螯合劑，它們也可以用作抗氧化劑、反離子、和/或緩沖劑等，這取決于具體的化合物。這類螯合劑的實(shí)例包括但不限于檸檬酸、膦酸酯類、抗生素類例如四環(huán)素家族的那些、丙烯酸類聚合物、抗壞血酸、亞氨基二琥珀酸四鈉(tetrasodium iminodisuccinate)、二羧甲基谷氨酸、乙二胺二玻拍酸(EDDS)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五(亞甲基磷酸)的七鈉鹽(DTPMP Na7)、蘋(píng)果酸、次氮基三乙酸(NTA)、非極性氨基酸類(例如，甲硫氨酸以及它的衍生物)、草酸、磷酸、極性氨基酸類(例如，精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、賴氨酸、和鳥(niǎo)氨酸、以及它們的衍生物)、鐵載體類例如去鐵胺B、以及琥珀酸。緩沖劑例如磷酸鈉、TRIS、甘氨酸、馬來(lái)酸、以及檸檬酸鈉是另外賦形劑的實(shí)例，可 以包括它們用來(lái)降低否則由于化學(xué)反應(yīng)將發(fā)生的組合物的PH隨時(shí)間改變的趨勢(shì)。此外，可以包括一種或多種防腐劑用來(lái)防止或延緩微生物活性(生長(zhǎng)和代謝作用)。藥學(xué)上可接受的防腐劑的實(shí)例是苯酚、間甲酚以及苯酚和間甲酚的混合物、苯甲酸酯/鹽及其衍生物等。當(dāng)然等滲劑通常表示一種較寬類別的輔劑，并且可以包括例如鹽(例如氯化鈉)，糖或糖醇(即，具有至少一個(gè)-OH基團(tuán)的C4-C8烴并且包括例如甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇(galacititol )、衛(wèi)矛醇、木糖醇、以及阿糖醇)，氨基酸(例如L-甘氨酸、L-組氨酸、精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、蘇氨酸)，醛糖醇(例如，甘油(丙三醇)、1，2-丙二醇(丙二醇)、1，3-丙二醇、1，3- 丁二醇)聚乙二醇(例如，PEG400)、或它們的混合物。等滲劑還包括任何糖例如單_、二 _、或多糖類，或水溶性葡聚糖類包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、芽霉菌糖(支鏈淀粉，pullulan)、糊精、環(huán)糊精、可溶性淀粉、羥乙基淀粉以及羧甲纖維素鈉。輔劑(賦形劑)(例如上述的那些)可以個(gè)別地或結(jié)合(聯(lián)合)使用。對(duì)使用量沒(méi)有固定限制，只要輔劑可溶于制劑中并且對(duì)于給定的最終用途對(duì)粘膜遞送組合物或其組分不造成不利影響。為了方便，參考Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19thedition, 1995。存儲(chǔ)穩(wěn)定性在某些實(shí)施方式中，將目標(biāo)粘膜遞送組合物和取代組分制備成存儲(chǔ)穩(wěn)定的制劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物、和/或包括該粘膜遞送組合物的藥物制劑和/或診斷制劑是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。在一個(gè)實(shí)施方式中，預(yù)形成的肽復(fù)合物是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。在一個(gè)相關(guān)實(shí)施方式中，該非水性疏水載體是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。術(shù)語(yǔ)“存儲(chǔ)穩(wěn)定”是指制備組合物用于存儲(chǔ)，等分取樣和/或運(yùn)輸和/或結(jié)合多種組分例如用于包括在試劑盒中，并且具體地作為藥物和/或診斷配制品，它們包括肽活性劑作為活性成分，并且其中在存儲(chǔ)穩(wěn)定性測(cè)試期間有效地保存該活性成分的濃度，并且在存儲(chǔ)穩(wěn)定性測(cè)試期間沒(méi)有或顯著地減少了產(chǎn)物降解、產(chǎn)物氧化、和/或在這類配制品的存儲(chǔ)穩(wěn)定性測(cè)試中典型地觀察到的雜質(zhì)。
在一個(gè)實(shí)施方式中，在從約-20° C至約80° C、約4° C至約70° C、約4° C至約60° C、約4° C至約50° C、約4° C至約40° C、或約4° C至約30° C的溫度范圍下對(duì)存儲(chǔ)穩(wěn)定性進(jìn)行確定。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在大于約1%至5%RH，通常地從約10%RH至約90%RH，約20%RH至約65%RH，或約30%RH至約75%RH范圍的相對(duì)濕度(〃RH〃)下對(duì)存儲(chǔ)穩(wěn)定性進(jìn)行確定。在一個(gè)另外的實(shí)施方式中，在惰性氣體(例如氮、氬等)下對(duì)存儲(chǔ)穩(wěn)定性進(jìn)行確定。特別感興趣的是用于測(cè)量存儲(chǔ)穩(wěn)定性的時(shí)間間隔，它的范圍例如從約I周至5年，從約2周至約4個(gè)月，或間隔為2周、4周、8周、12周、16周、6個(gè)月、以及12個(gè)月?？傮w上，當(dāng)組合物存儲(chǔ)在希望的適合于給定最終用途的條件下時(shí)給定組合物的存儲(chǔ)穩(wěn)定性是確定的，并且溫度大致為或大于約3至6個(gè)月的時(shí)間期間，典型地約I年或更長(zhǎng)?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域熟知的多種技術(shù)對(duì)存儲(chǔ)穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)估。例如,可以定性地和/或定量地、直接地和/或間接地、通過(guò)本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)(例如通過(guò)色譜法(例如，HPLC、質(zhì)譜-分光光度法等)、酶學(xué)方法(測(cè)量底物消耗和/或修飾，或產(chǎn)物和/或副產(chǎn)物生產(chǎn))、抗原-抗體結(jié)合(例如，蛋白質(zhì)印跡、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)等)、通過(guò)生物學(xué)作用(例如通過(guò)直接測(cè)量進(jìn)入血流中的肽活性劑的數(shù)量通過(guò)藥理學(xué)生物利用率，例如在下面 實(shí)驗(yàn)部分中說(shuō)明的)等)對(duì)存儲(chǔ)穩(wěn)定性進(jìn)行測(cè)量。目標(biāo)公開(kāi)的存儲(chǔ)穩(wěn)定的藥物和/或診斷配制品包括將該肽活性劑的初始濃度保持在滿足或超過(guò)的水平的那些。美國(guó)食品和藥品管理局(FDA)規(guī)定了對(duì)于肽藥物的標(biāo)準(zhǔn)。這樣，本公開(kāi)的具體配制品將肽活性劑的初始濃度保持大于約6個(gè)月的一段時(shí)間，并且在某些實(shí)施方式中，持續(xù)大于約12個(gè)月的一段時(shí)間，包括高達(dá)約2年，同時(shí)平均雜質(zhì)濃度低于約1%，典型地低于約0. 1%。而且，在各自對(duì)應(yīng)的時(shí)間期間內(nèi)，在具體實(shí)施方式
中粘膜遞送活性最多降低10%，并且藥代動(dòng)力性和/或藥理學(xué)參數(shù)未顯示任何顯著的改變。配制品在某些實(shí)施方式中，該肽復(fù)合物和/或肽鹽以及該非水性疏水載體結(jié)合到給予宿主的一種單一組合物中。在又另外實(shí)施方式中，該肽復(fù)合物和/或肽鹽以及非水性疏水載體各自獨(dú)立地提供于分開(kāi)的組合物中用于隨后結(jié)合成給予宿主的一種單一組合物。在另外實(shí)施方式中，處于該非水性疏水載體中的肽鹽和/或冠狀化合物各自獨(dú)立地提供于分開(kāi)的組合物中用于隨后結(jié)合成給予宿主的一種單一組合物。因此，該肽復(fù)合物和/或肽鹽以及非水性疏水載體可以提供于一種單一組合物中，或各自獨(dú)立地提供于分開(kāi)的組合物中，以及它們的多種組合，包括在劑型或裝置的分開(kāi)的存儲(chǔ)器中，用于隨后結(jié)合成本公開(kāi)遞送系統(tǒng)的一部分，或它們的任何有效變化(變體)。無(wú)論該肽復(fù)合物和/或肽鹽是非原位形成的還是在原位組裝的，為了粘膜遞送該肽復(fù)合物和/或肽鹽以及其他粘膜遞送組合物組分各自獨(dú)立地以有效量(即生物學(xué)相關(guān)的量)進(jìn)行結(jié)合。通常地，該肽活性劑包括按重量計(jì)約0.001-10%的粘膜遞送組合物，通常地約0. 01-5%、約0. 01-3%，更通常地約0. 01-2%，其中余量是該粘膜遞送組合物的剩余組分。因此，以用于粘膜遞送有效量的肽活性劑的量來(lái)結(jié)合目標(biāo)粘膜遞送組合物的組分。因此這類組合物包括適合于這個(gè)目的以及相應(yīng)的給定最終用途的它們的組成組分的有效混合物。通常地該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-50%的肽復(fù)合物或肽鹽、以及按重量計(jì)約50-99. 9%的非水溶性疏水載體，余量基本上是一種或多種另外的藥學(xué)上可接受輔齊U (賦形劑)的有效混合物。一個(gè)具體方面是其中該非水性疏水載體包括至少一種?；视汀⒅辽僖环N有機(jī)溶劑(例如水溶性有機(jī)溶劑)、以及可選地至少一種脂類。在這些先決條件下，在希望的PH下用選擇的反離子干燥或凍干的肽能夠以相對(duì)于最終混合物組合物1%至50%v/v溶于或懸浮于有機(jī)溶劑中，更精確地相對(duì)于最終混合物組成3%至25%、5%至20%、6%至15%v/v，可選地水為相對(duì)于有機(jī)溶劑和冠狀物結(jié)構(gòu)的0. 1%至15%v/v。然后在肽溶于該第一有機(jī)溶劑中之后，與任選地第二有機(jī)溶劑(非離子型表面活性劑)以及可選地脂類一起加入酰基甘油。一個(gè)特征性方面是其中該非水性疏水載體包括至少一種酰基甘油、至少一種脂類、以及可選地至少一種有機(jī)溶劑(例如水溶性有機(jī)溶劑)。該?；视桶蛇_(dá)按重量計(jì)粘膜遞送組合物的約80%，例如約20-80%、約30-70%、約40_60%、以及通常地約45_55%。該脂類組分包括按重量計(jì)粘膜遞送組合物的約5-60%，例如約10-50%，通常地約20-40%。當(dāng)存在時(shí)，該有機(jī)溶劑包括按重量計(jì)粘膜遞送組合物的約1_50%，通常地約5-30%，典型地約5-10%,這取決于該有機(jī)溶劑或系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-20%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約35-55%的?；视汀⒁约鞍粗亓坑?jì)約30-50%的脂類，余量基本上是一種或多種另外的藥學(xué)上可接受輔劑(賦形劑)的有效混合物。在一些實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-15%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約45-55%的?；视?、以及按重量計(jì)約30-45%的脂類，余量基本上是一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑(賦形劑)的有效混合物，其中該酰基甘油選自單?；视?、二酰基甘油、以及它們的混合物，并且該脂類是選自中性脂類、帶電荷脂類、或它們混合物的滲透性增強(qiáng)的脂類。特別感興趣的是其中該酰基甘油是單?；视屠鐔喂秕；视秃?或辛?；视停⑶以摑B透性增強(qiáng)的脂類包括短鏈和中鏈飽和或不飽和的具有7-19個(gè)碳原子的脂肪酸(例如壬酸和油酸)的混合物，和/或包括中性脂類例如維生素E。在某些實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-15%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約35-55%的?；视汀粗亓坑?jì)約30-45%的脂類、以及按重量計(jì)約5-15%的水溶性有機(jī)溶劑、余量基本上是一種或多種另外的藥學(xué)上可接受輔劑(賦形劑)的有效混合物。一個(gè)特征性方面是其中該酰基甘油選自單?；视汀⒍；视?、或它們的混合物，該脂類是選自中性脂類、帶電荷的脂類、或它們混合物的滲透增強(qiáng)的脂類，并且該水溶性有機(jī)溶劑選自極性溶劑以及極性非質(zhì)子溶劑。特別感興趣的是其中該酰基甘油是單?；视屠鐔喂秕；视秃?或辛酰基甘油，該滲透增強(qiáng)的脂類包括短鏈和中鏈脂肪酸的混合物例如壬酸和油酸，或包括中性脂類例如維生素E，并且其中該水溶性有機(jī)溶劑包括極性溶劑例如二醇或多元醇，或極性非質(zhì)子溶劑例如N-甲基吡咯烷酮。在某些實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-15%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約35-45%的水溶性有機(jī)溶劑、以及按重量計(jì)約35-55%的?；视?、余量基本上是非離子型表面活性劑以及可選地一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑的有效混合物，其中該水溶性有機(jī)溶劑包括二醇和多元醇的混合物，并且該?；视褪菃熙；视?。特別感興趣的是這樣一種組合物，其中二、醇是甘油，多元醇是丙二醇，并且單?；视褪菃喂秕；视秃?或辛?；视?。還特別感興趣的是這樣一種組合物，其中該非離子型表面活性劑包括按重量計(jì)粘膜遞送組合物的約10-30%，并且其中該非離子型表面活性劑包括聚氧乙基化的多元醇。感興趣的具體的聚氧乙基化的多元醇是聚乙二醇35蓖麻油(CremophorEU。在其他實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物包括按重量計(jì)約0. 1-15%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約5-25%的水溶性有機(jī)溶劑、以及按重量計(jì)約45-55%的?；视?，余量基本上是非離子型表面活性劑、滲透性增強(qiáng)的脂肪酸、以及可選地一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑的有效混合物，并且其中該水溶性有機(jī)溶劑可選地包括聚乙二醇的極性非質(zhì)子溶齊U，并且該?；视褪菃熙；视?。特別感興趣的是這樣一種組合物其中該極性非質(zhì)子溶劑是N-甲基吡咯烷酮，該單酰基甘油是中鏈單?；视屠鐔喂秕；视秃?或辛酰基甘油，并且該聚乙二醇是短鏈聚乙二醇，例如選自六乙二醇、PEG300、PEG400、以及它們混合物的聚乙二醇。另外感興趣的是這樣一種組合物，其中該非離子型表面活性劑包括按重量計(jì)粘膜遞送組合物的約10-30%，并且其中該非離子型表面活性劑包括聚氧乙基化的多元醇， 例如聚乙二醇35蓖麻油(Cremophor EL)。還感興趣的是一種粘膜遞送組合物，該組合物包括按重量計(jì)約0. 1-15%的肽復(fù)合物或肽鹽、按重量計(jì)約5-25%水溶性有機(jī)溶劑、按重量計(jì)約45-55%的?；视?、按重量計(jì)約15-25%的滲透性增強(qiáng)的脂肪酸、按重量計(jì)約10-30%的非離子型表面活性劑、余量是可選地一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑的有效混合物，并且其中該水溶性有機(jī)溶劑可選地包括聚乙二醇的極性非質(zhì)子溶劑，該酰基甘油是單?；视?，該非離子型表面活性劑包括聚氧乙基化的多元醇，并且其中該滲透性增強(qiáng)的脂肪酸是具有7-19個(gè)碳原子的飽和或不飽和的脂肪酸。特別感興趣的是這類組合物，其中該極性非質(zhì)子溶劑是N-甲基吡咯烷酮，該單酰基甘油是中鏈單?；视屠鐔喂秕；视秃?或辛?；视?，該聚乙二醇是短鏈聚乙二醇(例如六乙二醇、PEG300、PEG400、以及它們的混合物)，該非離子型表面活性劑包括聚氧乙基化的多元醇(例如聚乙二醇35蓖麻油(Cremophor EL)),并且該滲透性增強(qiáng)的脂肪酸是選自羊脂酸、辛酸、壬酸、癸酸、i^一烷酸、十二烷酸、肉豆蘧酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、以及它們的混合物的飽和脂肪酸，和/或選自棕櫚油酸、油酸、亞油酸、a-亞油酸、以及它們的混合物的不飽和脂肪酸。一個(gè)特征性方面是這類組合物，其中該滲透性增強(qiáng)的脂肪酸是選自羊脂酸、辛酸、壬酸、癸酸、i^一烷酸、十二烷酸、以及它們混合物的具有7-12個(gè)碳原子的飽和脂肪酸。一個(gè)具體實(shí)施方式
是這樣一種組合物，其中該滲透性增強(qiáng)的脂肪酸是壬酸。為了使這些組合物的優(yōu)點(diǎn)最大化，存在針對(duì)本公開(kāi)的某些實(shí)施方式特別優(yōu)選的混合物。例如，如果該水溶性有機(jī)溶劑主要是由酰基甘油組成的，則特征性組合物包括一種非水性疏水載體，該載體是單?；视?例如單癸?；视秃?或辛?；视?、飽和或不飽和的具有7-21或7-19個(gè)碳原子的滲透性增強(qiáng)的脂肪酸混合物(例如壬酸和油酸)、以及極性非質(zhì)子溶劑(例如N-甲基-2-吡咯烷酮)的組合。如果該水溶性有機(jī)溶劑主要是由濕潤(rùn)劑組成的，則特征性組合物包括一種非水性疏水載體，該載體是甘油、丙二醇、單?；视?例如單癸?；视秃?或辛酰基甘油)、聚乙氧基化的多元醇(例如聚乙氧基化的35蓖麻油(Cremophor EL)),以及可選地短鏈PEG 二醇(例如六乙二醇、PEG300或PEG400)的組合。如果該水溶性有機(jī)溶劑主要是由極性非質(zhì)子溶劑組成的，則特征性組合物包括一種非水性疏水載體，該載體是N-甲基-2-吡咯烷酮、單?；视?例如單癸酰基甘油和/或辛?；视?、聚乙氧基化的多元醇(例如聚乙氧基化的35蓖麻油(Cremophor EL))、中鏈飽和的脂肪酸(例如壬酸)、以及可選地短鏈PEG 二醇(例如六乙二醇、PEG300或PEG400)的組合。進(jìn)一步通過(guò)舉例，一個(gè)特征性方面是其中在上述配制品中該肽活性劑是人胰島素、艾塞那肽-4、或利拉魯肽(或它的藥學(xué)上可接受的類似物/衍生物)，并且該組合物進(jìn)一步包括抗氧化劑例如N-乙酰基-甲硫氨酸，以及優(yōu)選地緩沖劑。有待用于本發(fā)明組合物的一種優(yōu)選有機(jī)溶劑是多元醇。優(yōu)選的多元醇是丙二醇以及甘油或兩者的混合物。實(shí)際上，丙二醇和甘油兩者的LogP都是負(fù)的并且在水的范圍附近，因此是水的優(yōu)選替換物。添加本發(fā)明載體的另外組分，包括單酰基甘油和可選地脂肪酸脂類以及可選地具有最終大約或高于I. 5，優(yōu)選地高于2的正LogP的非離子型表面活性劑混合物或由其組成的所述另外的組分令人驚奇地使得肽溶解性增強(qiáng)，穩(wěn)定性優(yōu)異、以及通過(guò)粘膜的遞送改善。因此，優(yōu)選地隨后進(jìn)行多元醇以及該載體的另外組分的添加；還參見(jiàn)如實(shí)例部分中所描述的配制品la。為了將這些組合物的優(yōu)點(diǎn)最大化，使該穩(wěn)定水合的肽活性劑與下面各項(xiàng)絡(luò)合
(i)選自18-冠-6以及它的氧代冠狀物類似物/衍生物的冠狀化合物，以及(ii)選自水楊酸、乙酸、磷酸鹽、鈉、鉀、N -乙?；?賴氨酸-酰胺、N-乙酰基-精氨酸-酰胺、以及它們混合物的反離子，在該組合物的PH與該肽活性劑的等電點(diǎn)不同，具體地其中該組合物的pH遠(yuǎn)離該肽活性劑的等電點(diǎn)，并且更具體地其中該組合物包括緩沖劑。對(duì)于多個(gè)實(shí)施方式而言，水楊酸和乙酸是特別感興趣的。組成這些混合物的每種組分的水平在前面以及在下面實(shí)驗(yàn)部分進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，并且部分地取決于配制器所帶來(lái)的益處，并且因此還可以有利地包括一種或多種另外的藥學(xué)上可接受的輔劑。上述目標(biāo)組合物可以直接地使用或以適應(yīng)用于目標(biāo)方法中的用于粘膜給藥的其他劑型。因此，這些組合物能夠以多種產(chǎn)品形式以及多種包裝遞送選項(xiàng)給藥。本公開(kāi)的組合物提供了改善的活性同時(shí)將潛在的副作用降至最低。例如，為了利用本公開(kāi)組合物的優(yōu)點(diǎn)，該穩(wěn)定水合的肽活性劑典型地與冠狀化合物和/或反離子相絡(luò)合，然而，該穩(wěn)定水合的肽活性劑的游離形式在本公開(kāi)中也是有用的。無(wú)論其形式如何，本公開(kāi)的粘膜遞送組合物以基本上非聚集以及非氧化形式包含穩(wěn)定水合的肽活性劑。另一個(gè)考慮是基于上述組合物組分的選擇感興趣的具體的非水性疏水載體在環(huán)境或室溫下正常地是半固體、凝膠或液體。因此，存在對(duì)于本公開(kāi)的某些實(shí)施方式是特別優(yōu)選的這些組分的混合物。例如，提供了具有不同熔點(diǎn)包括由?；视汀⒅舅?、以及水溶性有機(jī)溶劑的混合物組成的非水性疏水載體的組合物。這樣，可以容易地以液體形式或以凝膠或設(shè)計(jì)成溶于哺乳動(dòng)物口中的固體劑型的形式提供這種粘膜遞送組合物。例如，特別感興趣的非水性疏水載體包括按重量計(jì)約8%的NMP，按重量計(jì)約50%的單癸酰甘油，按重量計(jì)約20%壬酸、以及按重量計(jì)約15%的油酸。該混合物在19-20° C下是固體，在38-40° C下明確地是液體，但是在25-30° C下變軟或開(kāi)始熔化?？梢酝ㄟ^(guò)暴露于冷板或磨具來(lái)制造這種組合物的固體配制品，其中將液體置于冷板上的孔中用來(lái)固化以及形成丸劑結(jié)構(gòu)。當(dāng)置于哺乳動(dòng)物口腔中時(shí)，它在約I分鐘內(nèi)熔化。然而，為了制備在25。C下是固體，但是在約35-40° C下開(kāi)始熔化的固體配制品，可以調(diào)節(jié)配方用來(lái)提高單十二烷醇甘油的百分比(提高10-15%用來(lái)將熔化溫度提高約2-3° C)從而提高該配制品的熔化溫度。而且，因?yàn)樵谑覝叵氯伤崾且后w而癸酸是固體，并且油酸在室溫下是液體而在4° C下是固體，為了制備在25° C下是固體，但是在約35-40° C下開(kāi)始熔化的固體配制品，可以增加脂肪酸長(zhǎng)度(例如將壬酸添加或取代成癸酸從而形成具有約35° C至40° C熔點(diǎn)的粘膜遞送組合物)。因此，當(dāng)與本公開(kāi)的穩(wěn)定水合的肽復(fù)合物結(jié)合使用時(shí)，在劑型設(shè)計(jì)方面非水性疏水載體的配制品提供了較大靈活性。還如上所述，在某些實(shí)施方式至，該粘膜遞送組合物是一種藥物和/或診斷組合物，該組合物可以包括一種或多種額外的藥學(xué)上可接受的輔劑，其條件是這類輔劑與保持該肽復(fù)合物相一致。這些藥學(xué)上和/或診斷上可接受的輔劑也是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的并且易于得到?？梢圆糠值赝ㄟ^(guò)具體組合物以及通過(guò)用于給予該組合物的具體方法來(lái)確定輔劑的選擇。因此，存在廣泛多樣的本公開(kāi)的藥物和/或診斷組合物的適當(dāng)配制品。作為舉例說(shuō)明，如果希望的話，與非水性疏水載體結(jié)合的肽復(fù)合物或肽鹽可以單獨(dú)地(即，按重量計(jì)100%的藥物和/或診斷組合物)或與常規(guī)藥學(xué)上和/或診斷上可接受的載體和輔劑混合使用，并且以溶液、片劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、圓片(wafer)等形式使用。在某些實(shí)施方式中，這類藥物組合物包含按重量計(jì)高達(dá)約99. 975%的與非水性疏水載體相結(jié)合的肽復(fù)合物，這取決于劑型和預(yù)期的最終用途。例如，在一些實(shí)施方式中，針對(duì)給 定單位劑量該藥物和/或診斷組合物通?？梢园瑥募s0. 001%至10%的穩(wěn)定水合的肽活性劑，典型地約0. 05%至5%的穩(wěn)定水合的肽活性劑，通常地約0. 01%至3%的穩(wěn)定水合的肽活性劑，并且更通常地約0. 1%至2%穩(wěn)定水合的肽活性劑。因此，與本公開(kāi)的非水性疏水載體結(jié)合的肽復(fù)合物將包含按重量計(jì)從約60%至約99. 975%，通常地從70%至約99%，并且最通常地從約85%至約98%的藥用組合物。這些藥物和/或診斷組合物可以單獨(dú)地或作為藥物遞送系統(tǒng)的一部分給予，該藥物遞送系統(tǒng)以與目標(biāo)粘膜(例如口腔粘膜例如頰膜和/或舌下膜)的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)系保持該肽配制品。這樣，該肽配制品可以處于游離形式，例如液體、凝膠、乳膏、泡沫、油膏、或半固體，或可以包括確定物理形式的設(shè)備，例如噴霧劑、片劑、貼劑、以及錠劑，例如，如美國(guó)專利號(hào)4，226，848; 4，250，163 ; 4，292，299; 4，517，173; 4，552，751; 4，572，832; 4，615，697; 4，713，243; 4, 900，554; 4, 915，948; 5, 047，244; 5, 081，157; 5, 081，158; 5, 137，729; 5, 192，802; 5, 298，258; 5，314，915; 5，458，879; 5，462，749; 5，578，315; 5，624，677; 5，750，134; 5，750，136; 5，766，620; 5，780，045 ; 5，800，832; 5，827，525; 5，849，322; 5，855，908; 5，861，174; 5，863，555;5，869，082; 5, 888，534; 5, 908，637; 5, 955，097; 5, 955，098; 6, 103，226; 6, 103，266; 6, 110，486;6, 117,446;以及6，159, 498中所瞄述的，它們的公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。在感興趣的某些實(shí)施方式中，本公開(kāi)的藥物和/或診斷組合物還可以與在本發(fā)明上下文中作為輔劑(賦形劑)的其他活性劑結(jié)合使用，包括在同一個(gè)組合物中使該肽活性劑與一種非肽活性劑，或兩種或更多種肽活性劑等結(jié)合。還應(yīng)當(dāng)理解的是本公開(kāi)的藥物和/或診斷組合物可以針對(duì)涉及粘膜表面(包括口腔粘膜、氣道表面、腸等)的具體給藥途徑找到更有利的用途。例如，在某些實(shí)施方式中，用于口腔粘膜給藥的藥物組合物是特別感興趣的，具體地是用于頰和/或舌下給藥的藥物組合物。因此，在口腔粘膜遞送載體中包括穩(wěn)定水合的肽活性劑的本公開(kāi)的藥物和/或診斷組合物是特別感興趣的。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是將本公開(kāi)的配制品給予需要它的受試者或宿主(例如病人)的多種適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ强晒┦褂玫模⑶译m然可以使用多于一種途徑來(lái)給予具體配制品，一個(gè)具體途徑可以比另一種途徑提供更即時(shí)的以及更有效的反應(yīng)(例如，頰噴霧相對(duì)于舌下凝膠劑)。因此，藥物和/或診斷組合物可以可選地包含其他藥物和/或診斷上可接受的組分，例如緩沖劑、表面活性劑、抗氧化劑、抑菌劑、粘度調(diào)節(jié)劑、懸浮劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、防腐劑等。這些組分的每一種都是本領(lǐng)域熟知的。例如，參見(jiàn)美國(guó)專利號(hào)6，193，997;6，214，375; 6, 221，378;6, 231，882; 6, 271，200;6, 290，987;6, 294，153;6，312，665;6, 315，984; 6，350，432; 6，350，458; 6，375，975; 6，432，383; 6，436，367; 6，451，286; 7，070，799 ; 7，087,215;7, 115, 561;以及7，255，102，它們公開(kāi)的內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。適合用于本公開(kāi)的配制品中的其他組分可以在 Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19thedition, 1995 中找到。這些配制品能夠以單位劑量或多劑量密封容器的形式來(lái)提供，例如安瓿和小瓶、噴霧容器、片劑等，或可以在冷凍-干燥(凍干)條件下存儲(chǔ)，在即時(shí)使用之前僅需要添加適當(dāng)?shù)臒o(wú)菌液體輔劑?？梢詮那懊嫠f(shuō)明種類的無(wú)菌粉末、顆粒、以及片劑來(lái)制備即用(extemporaneous)溶液和懸浮液。例如,可以提供用于口服給藥的單位劑型例如半固體、凝膠劑、糖漿、酏劑、片劑以及懸浮液，其中每種劑量單位，例如一茶匙的量、一湯匙的量、或片 齊U，包含預(yù)定量的在粘膜遞送載體中包含肽活性劑的組合物。如在此使用的，術(shù)語(yǔ)“單位劑型”是指適合以單一劑量用于人類和動(dòng)物受試者的物理分離的單位，每個(gè)單位包括與藥學(xué)上可接受的稀釋劑、載體或運(yùn)載體相結(jié)合以足以產(chǎn)生希望作用的數(shù)量計(jì)算的預(yù)先確定量的本公開(kāi)的化合物。本公開(kāi)的新型單位劑型的規(guī)格取決于所使用的具體化合物以及有待實(shí)現(xiàn)的作用，以及與宿主體內(nèi)每種化合物相關(guān)聯(lián)的藥代動(dòng)力學(xué)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易理解的是劑量水平可以作為特定化合物、遞送載體的特性等的函數(shù)而改變。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以通過(guò)多種方法容易地確定用于給定化合物的適當(dāng)劑量。在本公開(kāi)的上下文中給予動(dòng)物具體地人的劑量將足以在合理的時(shí)間框架內(nèi)在動(dòng)物體內(nèi)引起預(yù)防性或治療性應(yīng)答(反應(yīng))。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是該劑量將取決于多種因素，包括所使用的具體化合物的濃度、動(dòng)物的身體狀況、和動(dòng)物體重、以及疾病嚴(yán)重性和疾病階段。還可以通過(guò)可能伴隨給予特定化合物的任何不利副作用的存在、特性、以及程度來(lái)確定劑量大小?？梢酝ㄟ^(guò)與已知引起希望應(yīng)答的試劑相比較來(lái)確定適當(dāng)劑量和給藥方案。在某些實(shí)施方式中，以選自由頰、舌下、以及它們的組合組成的組中的劑量形式包括該粘膜遞送組合物。應(yīng)用目標(biāo)方法在多種應(yīng)用中找到用途。實(shí)例包括試劑、診斷劑、以及用于治療感興趣的宿主的藥劑。在某些實(shí)施方式中，治療方法涉及將本公開(kāi)的組合物施用到需要它的宿主粘膜上，例如用于治療患有可通過(guò)肽活性劑治療的疾病或病癥的宿主。目標(biāo)方法的一個(gè)方面是給予有效量的組合物用來(lái)將有效量的肽活性劑遞送到宿主血流中。在一個(gè)特征性實(shí)施方式中，該粘膜遞送組合物是口腔粘膜遞送組合物，并且該粘膜是口腔粘膜。還提供了將有效量的肽活性劑粘膜遞送到需要它的宿主體內(nèi)的方法，該方法包括將有效量的本公開(kāi)的粘膜遞送組合物和/或肽復(fù)合物施用到宿主粘膜上，其中該施用將有效量的肽活性劑遞送到宿主的血流中。在某些實(shí)施方式中，該粘膜是口腔粘膜例如選自由頰、舌下、以及它們的組合物組成的組中的口腔粘膜。特別感興趣的是其中該組合物的舌下給藥導(dǎo)致該肽活性劑的藥物生物利用率比腹膜內(nèi)給藥(Pl)高約10%，優(yōu)選地高約15%，并且更優(yōu)選地約20%或更大。如上所述，該肽活性劑通常是能夠在目標(biāo)配制品中粘膜遞送的一種。在某些應(yīng)用中，這些方法是調(diào)節(jié)與該肽活性劑相關(guān)聯(lián)的至少一種細(xì)胞功能的方法。在這個(gè)方面，目標(biāo)方法以及組合物在多種肽活性劑的已知應(yīng)用中找到用途，例如在治療使用該肽活性劑能夠治療的疾病或失調(diào)中。使用本公開(kāi)的目標(biāo)組合物在例如治療疾病和失調(diào)中具有特定效用，其中希望逐步地(例如，胃腸粘膜給藥)或快速地(例如 ，口腔粘膜給藥)起效，而不需要注射。這樣，這些目標(biāo)方法以及組合物在其中指示施用給定肽活性劑的治療應(yīng)用中找到具體用途。在許多實(shí)施方式中，該肽活性劑是肽激素，例如胰島素、降血鈣素、副甲狀腺激素、腸降血糖素模擬肽例如高血糖素樣肽等。一個(gè)代表性治療應(yīng)用是用本公開(kāi)的組合物來(lái)治療糖尿病、肥胖癥以及相關(guān)病癥，其中該肽活性劑是例如胰島素、和/或腸降血糖素模擬肽，例如艾塞那肽-4或利拉魯肽?！爸委煛币辉~是指實(shí)施至少改善與折磨宿主的病癥相關(guān)的癥狀，其中改善是在廣義上使用的用來(lái)指至少降低與所治療的病癥相關(guān)聯(lián)的參數(shù)(例如癥狀)的大小。這樣，治療還包括多種情況其中病理?xiàng)l件或至少與其相關(guān)聯(lián)的癥狀被完全抑制(例如防止發(fā)生)，或停止(例如消除)，使得宿主不再患該病癥，或至少不再有表征該病癥的癥狀?！獋€(gè)感興趣的具體應(yīng)用是在本公開(kāi)的粘膜遞送載體組合物中使用肽活性劑，具體地胰島素、艾塞那肽_4、高血糖素樣肽I、利拉魯肽、以及它們的類似物/衍生物，用來(lái)降低宿主體內(nèi)的血糖水平。在一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方式中，該病癥是II型糖尿病。另一個(gè)感興趣的具體應(yīng)用是在本公開(kāi)的粘膜遞送載體組合物中使用肽活性劑，具體地艾塞那肽_4、利拉魯肽、以及它們的類似物/衍生物，用于降低宿主體重。因此，在某些實(shí)施方式中，提供了用有效量的本公開(kāi)的藥劑來(lái)治療需要它的宿主的方法，該藥劑包括選自胰島素、艾塞那肽_4、利拉魯肽、高血糖素樣肽I、以及它們的類似物/衍生物的肽活性劑。血糖水平的降低是通過(guò)阻止、減緩、或降低因血糖水平升高而導(dǎo)致的高血糖發(fā)病的可能性來(lái)表征的。體重降低是通過(guò)防止、減緩、減少因血糖水平升高、胃排空、以及食物攝入中一項(xiàng)或多項(xiàng)造成的肥胖癥或體重增加的發(fā)病的可能性來(lái)表征的。這包括，例如，用在本公開(kāi)的粘膜遞送載體中有效量的GLP活性劑治療需要它的宿主用來(lái)降低血糖水平、延遲胃排空、和/或減少食物攝入到宿主體內(nèi)?！癎LP活性劑” 一詞是指艾塞那肽_4、利拉魯肽、以及它們藥學(xué)上可接受的類似物/衍生物。例如，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)容易地對(duì)高血糖進(jìn)行評(píng)估，例如通過(guò)測(cè)量血糖水平。同樣地，可以容易地確定胃排空、食物攝入降低、以及宿主體重。因此，可以使用任何一種或所有這些測(cè)試系統(tǒng)容易地確定用GLP活性劑治療的作用。根據(jù)目標(biāo)方法，許多宿主(或受試者)是可治療的。通常地，這類宿主是“哺乳動(dòng)物”或“哺乳類”，其中這些術(shù)語(yǔ)廣泛地用于說(shuō)明在哺乳動(dòng)物分類內(nèi)的生物體，包括食肉動(dòng)物目(例如，狗和貓)、嚙齒目(例如，小鼠、豚鼠、以及大鼠)、以及靈長(zhǎng)目(例如，人類、黑猩猩、以及猴)。在許多實(shí)施方式中，受試者可以是人。在某些實(shí)施方式中，宿主可以是已經(jīng)對(duì)其診斷并且因此需要給予該活性劑的受試者。在某些實(shí)施方式中，這些方法可以包括針對(duì)有待通過(guò)給予肽活性劑治療的疾病病癥的存在對(duì)受試者進(jìn)行診斷。如上所述，在本公開(kāi)上下文中給予動(dòng)物，具體地人體的劑量將足以在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生預(yù)防性或治療性應(yīng)答(反應(yīng))持續(xù)合理的時(shí)間框架。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是劑量將取決于多種因素包括所使用的具體肽活性劑的強(qiáng)度，該肽活性劑的劑量，用于肽活性劑的給藥方案，動(dòng)物的病癥、和動(dòng)物的體重，以及疾病的嚴(yán)重性和疾病的階段。還可以通過(guò)可能伴隨具體肽活性劑給藥的任何不利副作用的存在、特性、以及程度來(lái)確定劑量大小。這將通常遵循用于治療病癥的劑量和給藥曲線圖，該肽活性劑指示用于劑量和給藥曲線圖和/或根據(jù)常規(guī)方法經(jīng)驗(yàn)性確定。在用本公開(kāi)的化合物治療的一些個(gè)體中，與標(biāo)準(zhǔn)治療相結(jié)合使用高劑量方案可以是令人希望的。例如，艾塞那肽-4和利拉魯肽可以與二甲雙胍、磺酰脲、或噻唑烷二酮結(jié)合(聯(lián)用)，以及與標(biāo)準(zhǔn)胰島素治療結(jié)合使用(聯(lián)合使用)用于管理II型糖尿病的血糖水平。這類治療方案是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的。 一個(gè)特征性實(shí)施方式是使用粘膜遞送組合物，該粘膜遞送組合物是本公開(kāi)的口腔粘膜遞送組合物，并且其中該口腔粘膜遞送組合物包括選自胰島素、艾塞那肽-4、利拉魯肽、高血糖素樣肽-I、以及它們的類似物/衍生物的肽活性劑，用于治療需要其的宿主，例如用于治療在上面針對(duì)這些化合物所述的一種或多種病癥。目標(biāo)方法和組合物在其中找到用途的具體應(yīng)用包括在美國(guó)專利號(hào)5，118，666;5, I20，712;5，187，154;5，264，372; 5, 376，637; 5, 424，286; 5, 512，549 ; 5, 545，618;5，552，520;5，574，008; 5, 614，492; 5, 631，224; 5, 686，511;5，846，937; 5, 958，909; 6, 162，907; 6, 191，I02; 6，268，343 ; 6，284，727; 6，358，924; 6，448，045; 6，458，924; 6，506，724; 6，528，486; 6，703，359; 6，706，689; 6，723，530; 6，767，887 ; 6，828，303; 6，849，708; 6，852，690; 6，858，576; 6，872，700; 6, 884，585; 6, 899，883; 6, 902，744; 6, 911，324; 6, 924，264; 6, 956，026; 6, 982，248; 6，989，148 ; 6，989，366; 7，022，674; 7，056，734; 7，056，887; 7，078，375; 7，084，243; 7, 115，569; 7, 119，168; 7, 138，375; 7, 138，486 ; 7, 153，825; 7, 157，555; 7, 164，005; 7, 220，721;7，223，725; 7，226，990; 7，259，234; 7，273，850; 7，297，761; 7, 307，148 中說(shuō)明的那些；它們公開(kāi)的內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此。試劑盒和系統(tǒng)如上所述，還提供了包括本公開(kāi)的一種或多種組合物的試劑盒以及系統(tǒng)，以及在實(shí)踐目標(biāo)方法中找到用途的那些。在一個(gè)實(shí)施方式中，該試劑盒包括有效量的粘膜遞送組合物，和/或其組分，這些組分各自獨(dú)立地分開(kāi)和/或當(dāng)組合時(shí)以能夠形成粘膜遞送組合物的有效量以不同組合形式提供于試劑盒中。例如，在一個(gè)實(shí)施方式中該試劑盒包括(i)包括與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合肽活性劑的第一組合物，以及(ii)包括非水性疏水載體的第二組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，這些試劑盒包括(i)包括在非水性疏水載體中與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑的第一組合物，以及(ii)包括冠狀化合物的第二組合物。其他有效組合物是可能的。用于實(shí)踐目標(biāo)方法的試劑盒和系統(tǒng)可以包括一種或多種藥物和/或診斷配制品。這樣，在某些實(shí)施方式中這些試劑盒可以包括以一個(gè)或多個(gè)單位劑型存在的一種單一藥物組合物和/或診斷組合物，其中該組合物包括預(yù)先安排在粘膜遞送組合物中的肽活性劑。在其他實(shí)施方式中，這些試劑盒可以包括兩個(gè)或更多個(gè)分開(kāi)的藥物組合物和/或診斷組合物，它們各自包含與冠狀(化合物)和反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑亦或非水性疏水組合物，以及它們?nèi)魏斡行ё兓?變體)。在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，用于本公開(kāi)的試劑盒和系統(tǒng)中或能夠由其形成的粘膜遞送組合物是一種口腔粘膜遞送組合物。除了上述組分，目標(biāo)試劑盒可以進(jìn)一步包括用于實(shí)踐目標(biāo)方法的說(shuō)明書(shū)。這些說(shuō)明書(shū)能夠以多種形式存在于目標(biāo)試劑盒中，它們中的一種或多種可以存在于該試劑盒中。這些說(shuō)明書(shū)可以存在于其中的一種形式是將信息打印在適當(dāng)介質(zhì)或基質(zhì)上，例如在試劑盒包裝中，在包裝插入物等中將信息打印到其上的一張或多張紙。又另一種方法可以是將信息記錄在其上的計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)，例如磁盤、CD等。可以存在的又另一種方法是可以通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)在遠(yuǎn)端接入信息而使用的網(wǎng)站地址。任何方便的裝置可以存在于試劑盒中。例如，根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式的試劑盒包括(a)用于使用本公開(kāi)的藥物組合物和/或診斷組合物的說(shuō)明書(shū)作為第一部分，以及(b)本公開(kāi)的藥物組合物和/或診斷組合物作為第二部分。特別感興趣的試劑盒是包括本公開(kāi)的藥物和/或診斷組合物以及適合用于實(shí)踐 本公開(kāi)的目標(biāo)方法的那些，例如用于降低血糖水平、延緩胃排空、和/或降低食物攝入到宿主體內(nèi)。如在此使用的，術(shù)語(yǔ)“系統(tǒng)”是指本公開(kāi)的肽配制品的組分集合，它們存在于單一或不同組合物中，為了實(shí)踐目標(biāo)方法的目的將它們放到一起。例如，根據(jù)本公開(kāi)放到一起并且與粘膜遞送載體或它的組分混合用于給予宿主的分開(kāi)獲得的肽或肽形式是根據(jù)本公開(kāi)的一個(gè)系統(tǒng)。與其他給藥途徑相比較，用于直接通過(guò)粘膜肽遞送的目標(biāo)方法以及組合物提供了優(yōu)點(diǎn)。如上所注意到的，感興趣的具體途徑是通過(guò)口腔粘膜遞送。例如，通過(guò)口腔粘膜給予的藥物快速起效，提供治療性血漿水平，避免肝代謝的首過(guò)效應(yīng)，并且避免將藥物暴露于敵對(duì)的GI環(huán)境。另外的優(yōu)點(diǎn)包括易于進(jìn)入膜部位從而可以將藥物容易地施用、局部化以及去除。另外，對(duì)于延長(zhǎng)遞送大分子通過(guò)這些膜存在良好的潛力。此外，口腔粘膜通常具有優(yōu)異的可進(jìn)入性、較寬的平滑肌、以及相對(duì)固定的粘膜，并且因此適合滯留劑型的給藥。通過(guò)頸內(nèi)靜脈直接進(jìn)入體循環(huán)允許藥物繞開(kāi)肝臟首過(guò)代謝，產(chǎn)生較高的生物利用率。其他優(yōu)點(diǎn)包括較低的酶活性，適合于溫和地或可逆地?fù)p傷或刺激粘膜的藥物賦形劑、無(wú)痛給藥、易于撤出藥物、有助于在配制品中包括滲透增強(qiáng)劑/酶抑制劑或PH調(diào)節(jié)劑、以及在設(shè)計(jì)用于局部或全身起作用的多方向或單方向(unidirectional)釋放系統(tǒng)方面的多樣性。因此,位于口腔內(nèi)層(lining)的粘膜代表用于遞送較大的治療性化合物(例如根據(jù)本公開(kāi)的肽)的一種重要的局部途徑。下面實(shí)施例舉例說(shuō)明了有效的口腔粘膜給予本公開(kāi)的代表性肽活性劑，并且舉例說(shuō)明了該活性肽希望的生物學(xué)作用，包括對(duì)于血液的恒定的，可預(yù)測(cè)的藥物濃度。因此，與注射以及其他給藥模式相比較，根據(jù)本公開(kāi)通過(guò)口腔粘膜或其他粘膜遞送途徑給予這些和其他肽類可以提供某些優(yōu)點(diǎn)，包括給藥的方便性和速度，以及降低或消除順應(yīng)性問(wèn)題和通過(guò)注射遞送所帶來(lái)的副作用。因此，下面實(shí)施例進(jìn)一步舉例說(shuō)明了本公開(kāi)并且不應(yīng)解釋成以任何形式限制其范圍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果
I.用于制備粘膜遞送配制品的一般性步驟步驟I :通過(guò)脫鹽可替代的肽溶解度改善通過(guò)反相高效色譜法(RP-HPLC)(溶劑是水以及存在1%乙酸的乙腈)將這些肽可選地脫鹽，并且凍干(即，在低于室溫下冷凍干燥)。根據(jù)分子的pl，分子或者當(dāng)它處于凍干形式時(shí)被使用，或者當(dāng)需要時(shí)，再溶解或懸浮于水或水/乙腈混合物中。然后使得到的溶液或懸浮液的PH達(dá)到范圍從4至7. 5的希望值，使得該pH與該分子的pi足夠不同從而確保在隨后反離子交換反應(yīng)和/或絡(luò)合反應(yīng)中使用的多種溶劑中的溶解度。例如，對(duì)于類高血糖素肽類例如艾塞那肽-4以及利拉魯肽而言，是通過(guò)仔細(xì)地和/或逐步地添加堿以獲得希望的pH (例如，碳酸氫鈉或碳酸氫鉀、氨基酸類例如賴氨酸(Lys)或精氨酸(Arg)以及保護(hù)的衍生物例如N-乙?；?或酰胺化形式)來(lái)制備的。當(dāng)達(dá)到希望的pH時(shí)，如果必要的話通過(guò)0. 45 y m過(guò)濾器將得到的溶液或懸浮液過(guò)濾并且在范圍從4至7. 5的這種給定pH下凍干。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這種處理對(duì)于在不同溶劑或溶劑混合物(例如，水/乙腈混合物，有機(jī)溶劑例如甲醇或乙醇)中進(jìn)一步的肽溶解度是關(guān)鍵性的。 還可以將穩(wěn)定化賦形劑例如甘露醇包括在用于RP-HPLC的溶劑中，和/或在RP-HPLC之后的水/乙腈混合物中，其條件是以溶于混合物中的數(shù)量(典型地0. 1-20%)添加該一種或多種賦形劑。步驟2 :可替代的反離子交換可替代地用酸性化合物例如水楊酸、不同取代的或非苯甲酸衍生物、草酸、磺酸鹽(酯)類、硫酸鹽(酯)類例如硫酸月桂基酯、磷脂酰甘油衍生物例如磷脂酰甘油二月桂基酯(DLPG)、磷酸、三氟乙酸或氯化物來(lái)取代肽反離子(通常地為乙酸鹽反離子)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這種反離子交換影響蛋白/肽溶解度和/或體內(nèi)活性。例如，通過(guò)下面處理將肽乙酸鹽轉(zhuǎn)化成水楊酸鹽。將水楊酸(138. 12g/mol)溶于ACN/H20 50/50混合物中從而給出母液。將固定體積的后者溶液(包含相對(duì)于肽/蛋白堿性氨基酸含量處于I :n當(dāng)量比率下的固定數(shù)量的水楊酸)添加到溶于50/50 ACN/H20中的肽乙酸鹽中。在一些情況中，將少量的非離子型去污劑例如P-D-辛基葡糖酐(0.05%至10%，更優(yōu)選0. 1%至5%)、甘露醇(在配制品混合物中10-20%終濃度)、和/或甘油(在配制品混合物中1%終濃度)添加到該混合物中。使用離心蒸發(fā)器/真空離心蒸發(fā)濃縮器(SpeedVac)(在25° C-40° C下，典型地約35° C)將得到的溶液干燥/濃縮I小時(shí)，然后添加50/50ACN/H20，并且通過(guò)真空離心蒸發(fā)濃縮器(在25° C-40° C下，典型地約35° C)將該溶液干燥/濃縮另外I小時(shí)，提供了肽水楊酸鹽，為一種白色固體。步驟3 :制備肽-冠狀化合物復(fù)合物將肽鹽溶于MeOH或Me0H/H20混合物中(水含量范圍從1%至15%)并且添加適當(dāng)數(shù)量的溶于MeOH或Me0H/H20混合物中的環(huán)狀冠狀化合物(包含相對(duì)于肽/蛋白堿性氨基酸含量處于I比n當(dāng)量比率的固定數(shù)量的冠狀化合物)。在真空離心蒸發(fā)濃縮器(在25° C-40° C下，典型地約35° C)中將得到的溶液干燥/濃縮I小時(shí)，從而產(chǎn)生包括該肽鹽-冠狀化合物復(fù)合物(絡(luò)合物)的油狀殘余物?？商娲兀谝恍┣闆r中，將冠狀化合物的有機(jī)溶劑(例如，DMS0、NMP或丙二醇)溶液添加到干燥的肽鹽中并且在加入配制品載體之前將得到的混合物溫育約10-15分鐘。步驟4:最終配制品制備
將粘性非水性疏水配制品載體添加到肽-冠狀化合物復(fù)合物中，并且將得到的混合物渦旋然后在40° C下加熱10分鐘。然后將得到的清澈制劑存儲(chǔ)在+4° C下。配制品I :通討將NMP (20 ill)、油酸(40 ill)緊接著壬酸(50 ill)添加到癸?；视?130mg)中來(lái)制備配置品載體。在40-45° C下在水浴中將得到的混合物加熱用以完全溶解。在蛋白/肽序列包括易于氧化的殘基的情況下，可以添加用于IOOiU配制品混合物的0. 25mg N-乙?；?甲硫氨酸(Ac-Met-OH) (191. 25g/mol)作為抗氧化劑，并且在40-45° C下在水浴中將混合物加熱直至得到清澈溶液。該混合物具有在3. 0至5. 0之間的pH (典型地約3. 5-4. 0，取決于Ac-Met-OH抗氧化劑的添加，該抗氧化劑是酸性的)，它可以根據(jù)該肽的Pl通過(guò)添加酸或堿來(lái)調(diào)節(jié)和/或緩沖，并且添加到該肽-冠狀物復(fù)合物中。在一種具體情況中，配制品la，可以通過(guò)14iU的丙二醇、或甘油或兩者的混合物來(lái)取代NMP，并且在有機(jī)溶劑中原位形成該肽復(fù)合物。然后將包括油酸(40 yl)、壬酸(50u I)以及癸酰基甘油(130mg)的載體添加到處于多元醇有機(jī)混合物中的肽復(fù)合物中。 配制品2 :通討將 NMP (25 ill)、Cremophor EL (35 yl)緊接著壬酸(50 yl)添加到癸?；视?130mg)中來(lái)制備配制品載體。在40-45° C下在水浴中將得到的混合物加熱用以完全溶解。在肽序列包括易于氧化的殘基的情況下，然后添加用于IOOiU配制品混合物的0. 25mg Ac-Met-OH (191. 25g/mol)作為抗氧化劑，并且在40-45° C下在水浴中將該混合物加熱直至得到清澈溶液。沒(méi)有該肽的混合物具有在4. 0至6. 0之間的pH，可以根據(jù)該肽的Pl通過(guò)添加酸或堿對(duì)它進(jìn)行調(diào)節(jié)和/或緩沖，并且添加到該肽-冠狀物復(fù)合物中。配制品3 :通討將辛酰某甘油(50mg)、NMP (25 yl)、以及維生素E (50yl)添加到癸?；视?130mg)中來(lái)制備配制品載體。在40-45° C下在水浴中將得到的混合物加熱用于完全溶解。在肽序列包括易于氧化的殘基的情況下，然后添加用于IOOiU配制品混合物的0. 25mg N-乙酰-甲硫氨酸-酰胺(Ac-Met-NH2) (190. 27g/mol)作為抗氧化劑，并且在40-45° C下在水浴中將該混合物加熱直至得到清澈溶液。沒(méi)有該肽的混合物具有估計(jì)在5. 5至7. 0之間的pH，可以根據(jù)該肽的pi通過(guò)添加酸或堿對(duì)它進(jìn)行調(diào)節(jié)和/或緩沖，并且添加到該肽-冠狀物復(fù)合物中。配制品4 :通過(guò)將司盤20 (60U I)以及油酸(50 yl)的混合物添加到癸?；视?IlOmg)中來(lái)制備配制品載體。在約45° C下在水浴中將得到的混合物加熱用以完全溶解。在這種情況下，通過(guò)將該肽溶于14 Ul包含該冠狀化合物的丙二醇中來(lái)得到該肽復(fù)合物。在室溫下在15分鐘之后，將配制品載體添加到處于丙二醇中的肽-冠狀物復(fù)合物中。配制品5 :通過(guò)添加司盤20 (60 U I)、單亞油酸甘油酯(Monolinolein)(亞油酸的單?；视?(50iU)以及癸?；视?IlOmg)的混合物來(lái)制備配制品載體。在約45° C下在水浴中將得到的混合物加熱用以完全溶解。在這種情況下，通過(guò)將該肽溶于14iU包含該冠狀化合物的丙二醇中來(lái)獲得該肽復(fù)合物。在室溫下在15分鐘之后，將配制品載體添加到處于丙二醇中的肽-冠狀物復(fù)合物中。對(duì)于上面的非水性疏水載體(S卩，配制品I至5)而言，可以通過(guò)用于其他配制品的類似化合物消除或替換一種或多種組分。例如，可以使用其他抗氧化劑例如生物素、生物素乙酯或維生素C。II 測(cè)試物品(項(xiàng)目，article)通常地，針對(duì)使用各種冠狀化合物、反離子、以及非水性疏水載體在小鼠和/或大鼠體內(nèi)的溶解度、穩(wěn)定性、和/或舌下粘膜遞送對(duì)包含甲狀旁腺激素、艾塞那肽-4、利拉魯肽、或人胰島素的粘膜遞送配制品進(jìn)行預(yù)篩選。代表性的冠狀化合物包括18-冠-6、氧代-(18-冠-6)、酒石酸氧代-(18-冠-6) -二乙酯、以及酒石酸氧代-(18-冠-6) - 二甘油。代表性的反離子包括TFA、乙酸鹽、水楊酸、DLPG, C12H25OSO3H, C14H29SO3H,以及C18H37SO3H15代表性的非水性疏水載體包括載體配制品1、2以及3。在血流中不同程度地對(duì)所有肽進(jìn)行檢測(cè)。選出艾塞那肽-4 (具有約5. 0的計(jì)算等電點(diǎn))用于進(jìn)一步詳細(xì)研究，除非另外指出，否則這些研究是根據(jù)前面在實(shí)驗(yàn)部分I中所描述的步驟以及配制品進(jìn)行的。下面報(bào)告說(shuō)明性研究。III.使用代表性粘膜遞送配制品的動(dòng)物研究在這些研究中使用的所有小鼠或大鼠都是與用于每個(gè)單個(gè)研究相同的窩 (litter)或家族的年齡和性別匹配的。所有操作都是根據(jù)批準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方案以及按照標(biāo)準(zhǔn)步驟的指南進(jìn)行的。下面詳細(xì)說(shuō)明用于小鼠的研究，并且代表了大鼠研究。在過(guò)夜禁食(大致16-18h)之后進(jìn)行腹膜內(nèi)葡萄糖耐受試驗(yàn)(IPGTT)。在t=_40分鐘時(shí)將小鼠麻醉。在t=-30分鐘時(shí)，將測(cè)試物品或鹽水對(duì)照舌下(SubL)或通過(guò)腹膜內(nèi)給藥(IP)進(jìn)行施用。在t=0分鐘時(shí),給予IP keta-xyla 100 ii 1+IP葡萄糖。在實(shí)驗(yàn)期間根據(jù)需要給予另外的150ul麻醉劑。麻醉的小鼠接受處于3-5 u I粘膜遞送配制品載體SubL體積中的5-10nmol肽測(cè)試物品亦或Inmol肽對(duì)照IP。在治療之后在不同時(shí)間點(diǎn)將血樣收集起來(lái)，并且按照標(biāo)準(zhǔn)步驟通過(guò)葡萄糖氧化酶法對(duì)血糖水平進(jìn)行確定。貫穿整個(gè)采血過(guò)程所有動(dòng)物都保持麻醉狀態(tài)。使用小鼠體內(nèi)血糖變化來(lái)指示出現(xiàn)生物活性量的肽測(cè)試物品。將測(cè)試物品存儲(chǔ)在4° C下，并且然后在給予之前升溫至37° C。除非另外指出，否則以平均值土 S. E. M的方式對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析以及報(bào)告。反離子圖I顯示了針對(duì)在載體配制品I中用不同反離子構(gòu)建的艾塞那肽-4在小鼠體內(nèi)得到的結(jié)果(Fl=乙酸鹽反離子；F2=DLPG反離子；F3=水楊酸反離子)，使用18-冠-6作為冠狀化合物。應(yīng)當(dāng)注意的是DLPG和水楊酸(SA)比乙酸具有更高的酸性(在水中DLPG pKa〈2，SA pKa 2.97，以及乙酸卩1^ 4.76)。對(duì)于圖I中顯示的數(shù)據(jù)而言，使用下面實(shí)驗(yàn)方案步驟A.制備艾塞那肽-4鹽類(i)乙酸鹽結(jié)合2. 4ml在商購(gòu)的Byetta配制品(pH 4. 5)中各自包含3. 6mg艾塞那肽-4的6個(gè)樣品，并且冷凍干燥。在1%乙酸存在下在水以及乙腈中使得到的物質(zhì)經(jīng)歷反相高效液相色譜法(RP-HPLC)，緊接著冷凍干燥。使用S印Pack C18小柱(S^)Pack C18cartridge)(用包含1%乙酸的水-乙腈混合物對(duì)肽進(jìn)行洗脫)對(duì)凍干的物質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步純化，提供了如此使用的純艾塞那肽-4，或在下面步驟A (ii)或步驟A (iii)中進(jìn)行反離子交換。(ii)DLPG (610g/mol，0. 66mg):將 0. 66mg DLPG (二月桂酰基磷脂酰甘油)溶于100 u I的50/50 ACN/H20中。將該溶液添加到處于50 u I 50/50 ACN/H20中的0. 76mg艾塞那肽-4乙酸鹽中，然后通過(guò)在大致35° C下真空離心濃縮(speedvac) I小時(shí)使它經(jīng)受濃縮。然后添加另外等分部分的50/50 ACN/H20,緊接著通過(guò)在大致35° C下真空離心濃縮I小時(shí)進(jìn)行干燥。(iii)水楊酸(138. 12g/mol, 0. 15mg):將 I. 5mg 水楊酸溶于 IOOu I 的 50/50 ACN/H2O混合物中從而給出母液。然后將10 u I這種后者溶液添加到溶于50 u I 50/50 ACN/H20中的0. 76mg艾塞那肽-4乙酸鹽中，緊接著在大致35°C下如上進(jìn)行真空離心濃縮2X I小時(shí)，提供了艾塞那肽-4水楊酸鹽，為一種白色固體。
步驟B.制備艾塞那肽-4鹽-18-冠-6復(fù)合物將來(lái)自步驟A的艾塞那肽-4鹽溶于MeOH (50u I)中并且添加處于100 U I MeOH中的IOmg 18-冠-6，緊接著在大致35° C下真空離心濃縮I小時(shí)從而生成油狀殘余物。將大致SOiU的載體配制品I添加到來(lái)自步驟A的艾塞那肽-4-冠狀復(fù)合物中從而獲得大致90 u I的配制品FI、F2以及F3，將它們渦旋然后在40° C下加熱10分鐘。然后將得到的制劑存儲(chǔ)在+4° C下直至使用。為了動(dòng)物研究，將這些配制品升溫至37° C，然后將3iU(大致6nmol艾塞那肽-4測(cè)試物品)FI、F2以及F3混合物舌下給予小鼠。所給予的表I的粘膜遞送組合物(數(shù)據(jù)示于圖I中)相對(duì)于肽208個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的冠狀物(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)大致35個(gè)冠狀(化合物)分子)，相對(duì)于肽6個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的反離子(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)I個(gè)反離子分子)，導(dǎo)致每I個(gè)反離子35個(gè)冠狀(化合物)的比率。表I :所施用的粘膜遞送組合物(圖I)
參考號(hào)___nmol__冠狀物 nmol__反1 I'_Timol__溶解性
FlEX-4 618-cr-6 1250乙酸鹽>36+ 近淸澈 *
F2 EX-4 6 18-cr-6 1250 DLPG36清澈
F3_ EX-4 618-cr-6 1250 水楊酸鹽 36清澈所有配制品都包含40nmol Ac-Met-OH ; 18-cr_6=18-冠 _6 ；+ 估計(jì)值；*稍許沉淀。如圖I中所示，水楊酸反離子顯示最好的活性。載體DH以及纟目合物圖2顯示了改變非水性疏水載體和組合物的pH對(duì)舌下給予艾塞那肽-4的影響。圖2要點(diǎn)是F4=在100%Me0H中用乙酸鹽反離子和酒石酸氧代-(18-冠-6)-二乙酯(“ST5”)冠狀化合物形成艾塞那肽-4肽，并且在大致35° C下真空離心濃縮I小時(shí)，緊接著結(jié)合到配制品3中。所給予的表2的粘膜遞送組合物(數(shù)據(jù)示于圖2中):相對(duì)于肽50個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的冠狀(化合物)(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)大致8個(gè)冠狀分子)，相對(duì)于肽12個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的反離子(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)2個(gè)反離子分子)，導(dǎo)致每I個(gè)反離子4個(gè)冠狀物的比率。表2 :所給予的粘膜遞送組合物(圖2)
參考號(hào)肽nmol 冠狀物nmol 反離子nmol溶解性
~F4EX-4 5 ST5 250乙酸鹽 60WS~
配制品包含40nmol Ac-Met-OH圖2中呈現(xiàn)的結(jié)果顯示當(dāng)與在更加酸性的載體(例如配制品I)中配制時(shí)相比較，在載體配制品3中的艾塞那肽-4肽復(fù)合物導(dǎo)致舌下遞送減少，后者也是更遠(yuǎn)離該肽的pi。并且，與配制品1-3、以及多種其他配制品相比較的研究顯示配制品I適合于艾塞那肽_4，當(dāng)使用可生物降解的冠狀化合物酒石酸氧代-(18-冠-6)- 二乙酯以及水楊酸反離子時(shí)與胸膜內(nèi)給藥相比較呈現(xiàn)類似的藥代動(dòng)力學(xué)以及約20%藥理學(xué)生物利用率?；谶@些研究，對(duì)與酒石酸氧代-(18-冠-6)-二乙酯以及水楊酸反離子絡(luò)合，并且在載體配制品I中配制的艾塞那肽-4進(jìn)行更詳細(xì)地檢查。代表性結(jié)果報(bào)告 于下面實(shí)驗(yàn)中。每個(gè)堿性氨基基團(tuán)冠狀化合物以及反離子的摩爾當(dāng)暈艾塞那肽-4含有四個(gè)伯胺(I用于N端，2個(gè)用于兩個(gè)賴氨酸，I個(gè)用于精氨酸)，以及兩個(gè)仲胺(I個(gè)用于組氨酸，I個(gè)用于精氨酸)，在酸性條件下總計(jì)六個(gè)堿性氨基基團(tuán)可電離。該艾塞那肽-4氨基酸序列如下hgegtftsdlskqmeeeavrlfiewlknggpssgappps-nh2圖3顯示了在載體配制品I中在粘膜遞送方面調(diào)節(jié)反離子和冠狀化合物(酒石酸氧代-(18-冠-6) 二乙酯)的化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的結(jié)果。所給予的粘膜遞送組合物的匯總提供于表3中。圖3要點(diǎn)是F1=具有相對(duì)于肽24個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的冠狀物(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)4個(gè)冠狀物分子)、相對(duì)于肽6個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的反離子(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)I個(gè)反離子分子)的艾塞那肽_4，導(dǎo)致每I個(gè)反離子4個(gè)冠狀物的比率。F2=具有相對(duì)于肽12個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的冠狀物(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)2個(gè)冠狀物分子)，相對(duì)于肽6個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的反離子(即，每個(gè)堿性氨基基團(tuán)I個(gè)反離子分子)的艾塞那肽_4，導(dǎo)致每I個(gè)反離子2個(gè)冠狀物的比率。這些結(jié)果證明了冠狀化合物和反離子對(duì)粘膜遞送的影響，其中F2顯示更好的性能。表3 :所施用的粘膜遞送組合物(圖3)
權(quán)利要求
1.ー種粘膜遞送組合物，包括在與肽活性劑的等電點(diǎn)(PD不同的PH下溶于非水性疏水載體中的有效量的與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性剤。
2.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述穩(wěn)定水合的肽活性劑具有按重量計(jì)約1%至約50%的水含量。
3.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述PH離開(kāi)所述肽活性劑的pi約0.5至約4個(gè)pH單位,優(yōu)選地離開(kāi)所述肽活性劑的pi約I至約2個(gè)pH單位。
4.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中與所述冠狀化合物和/或所述反離子絡(luò)合的所述穩(wěn)定水合的肽活性劑是從具有與所述肽活性劑的Pl不同，可選地遠(yuǎn)離所述肽活性劑的Pl的pH的溶液或懸浮液中以干肽形式預(yù)形成的。
5.如權(quán)利要求4所述的粘膜遞送組合物，其中所述溶液或懸浮液包括作為選自由水性物、有機(jī)物、以及它們的混合物組成的組中的溶劑。
6.如權(quán)利要求5所述的粘膜遞送組合物，其中所述有機(jī)物是醇、或極性非質(zhì)子溶剤。
7.如權(quán)利要求6所述的粘膜遞送組合物，其中所述極性非質(zhì)子溶劑是こ臆，并且所述醇選自由甲醇和こ醇組成的組。
8.如權(quán)利要求5所述的粘膜遞送組合物，其中所述混合物是具有約1%至20%，優(yōu)選地約1%至約10%水含量的甲醇水溶液或懸浮液，或具有約30%至約70%，優(yōu)選地約40%至約60%水含量的こ腈水溶液或懸浮液。
9.如權(quán)利要求4所述的粘膜遞送組合物，其中所述預(yù)形成的干肽是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。
10.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述組合物是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。
11.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中當(dāng)將所述組合物舌下給藥時(shí)，所述肽活性劑具有比胸膜內(nèi)給藥高約10%的藥理學(xué)生物利用率。
12.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述肽活性劑包括一種或多種陽(yáng)離子基團(tuán)，所述冠狀化合物是結(jié)合陽(yáng)離子的冠狀化合物，并且所述反離子是陰離子型反離子。
13.如權(quán)利要求12所述的粘膜遞送組合物，其中所述ー種或多種陽(yáng)離子基團(tuán)是選自由伯胺、仲胺、胍基、以及它們的組合組成的組。
14.如權(quán)利要求13所述的粘膜遞送組合物，其中所述結(jié)合陽(yáng)離子的冠狀化合物以及所述陰離子型反離子各自獨(dú)立地以每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基約0. 5至10個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。
15.如權(quán)利要求14所述的粘膜遞送組合物，其中所述結(jié)合陽(yáng)離子的冠狀化合物以每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基約2至4個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。
16.如權(quán)利要求14所述的粘膜遞送組合物，其中所述陽(yáng)離子型反離子以每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基約I至2個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。
17.如權(quán)利要求14所述的粘膜遞送組合物，其中所述結(jié)合陽(yáng)離子的冠狀化合物以每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基約2個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在，并且所述陽(yáng)離子型反離子以每個(gè)伯胺、仲胺、和/或胍基約I個(gè)化學(xué)計(jì)量當(dāng)量存在。
18.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述冠狀化合物包括生物可降解的鍵。
19.如權(quán)利要求18所述的粘膜遞送組合物，其中所述生物可降解的鍵是酯鍵。
20.如權(quán)利要求19所述的粘膜遞送組合物，其中所述冠狀化合物是選自由氧代-(18-冠-6)化合物以及它們的類似物/衍生物組成的組。
21.如權(quán)利要求20所述的粘膜遞送組合物，其中所述冠狀化合物是選自由氧代-(18-冠-6)、酒石酸氧代-(18-冠-6) - ニこ基酷、以及酒石酸氧代-(18-冠-6) - ニ甘油酯組成的組。
22.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述反離子選自由下面各項(xiàng)組成的組中水楊酸、こ酸、磷酸、酒石酸、N-こ酰基-賴氨酸-酰胺、N-こ?；?精氨酸-酰胺、苯甲酸以及它的類似物/衍生物、草酸、磺酸鹽/酯類、硫酸鹽/酯類例如硫酸月桂基酷、磷脂酰甘油衍生物類例如二月桂基磷脂酰甘油、磷酸、三氟こ酸、或氯化物、以及它們的混合物。
23.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述組合物包括選自由緩沖劑、防腐齊U、等滲劑、以及抗氧化劑組成的組中的藥學(xué)上可接受的賦形劑。
24.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述非水性疏水載體包括至少ー種?；视?，以及至少ー種有機(jī)溶劑和/或至少ー種脂類，它們各自獨(dú)立地以有效量存在用來(lái)(i)使與所述冠狀化合物和所述反離子絡(luò)合的所述穩(wěn)定水合的肽活性劑溶解，以及(ii)增強(qiáng)所述肽活性劑的粘膜遞送。
25.如權(quán)利要求24所述的粘膜遞送組合物，其中所述非水性疏水載體包括至少ー種有機(jī)溶剤。
26.如權(quán)利要求25所述的粘膜遞送組合物，其中至少ー種有機(jī)溶劑是水溶性有機(jī)溶齊U。
27.如權(quán)利要求26所述的粘膜遞送組合物，其中所述非水性疏水載體是酸性的，并且其中至少ー種?；视褪侵墟滜；视?，至少ー種脂質(zhì)包括短鏈脂肪酸和/或中鏈脂肪酸，并且至少ー種水溶性有機(jī)溶劑是極性非質(zhì)子溶剤。
28.如權(quán)利要求27所述的粘膜遞送組合物，其中所述中鏈?；视褪菃喂秕；视?，所述短鏈脂肪酸是壬酸，所述中鏈脂肪酸是油酸，并且所述極性非質(zhì)子溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮。
29.如權(quán)利要求26所述的粘膜遞送組合物，其中所述非水性疏水載體是中性的，并且其中至少ー種?；视褪侵墟滜；视?，至少ー種脂質(zhì)是中性脂類，并且至少ー種水溶性有 機(jī)溶劑是極性非質(zhì)子溶剤。
30.如權(quán)利要求29所述的粘膜遞送組合物，其中所述中鏈酰基甘油是單癸?；视?、辛酰基甘油、或它們的混合物，所述中性脂類是維生素E，并且所述水溶性有機(jī)溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮。
31.如權(quán)利要求23所述的粘膜遞送組合物，其中所述抗氧化劑選自由N-こ?；?甲硫氨酸、生物素、生物素こ酷、以及抗壞血酸組成的組。
32.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述肽活性劑是肽激素。
33.如權(quán)利要求32所述的粘膜遞送組合物，其中所述肽激素是類高血糖素肽、以及它的類似物/衍生物。
34.如權(quán)利要求33所述的粘膜遞送組合物，其中所述類高血糖素肽選自由類高血糖素肽I、艾塞那肽、利拉魯肽、以及它們的類似物/衍生物組成的組。
35.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述粘膜遞送組合物包括作為選自由含服、舌下、以及它們的組合組成的組中的劑型。
36.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述組合物是膠束。
37.如權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，其中所述膠束是反膠束。
38.一種生產(chǎn)用于將肽活性劑粘膜遞送到宿主血流中的粘膜遞送組合物的方法，所述方法包括 在與所述肽活性劑的等電點(diǎn)(Pl)不同的PH下在非水性疏水載體中預(yù)形成可溶性的肽復(fù)合物，所述肽復(fù)合物包括與冠狀化合物和反離子絡(luò)合的有效量的穩(wěn)定水合的肽活性剤。
39.如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述預(yù)形成包括使有效量的(i)非水性疏水載體和(ii)所述肽復(fù)合物相結(jié)合。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中所述肽復(fù)合物是可通過(guò)干燥水性有機(jī)溶液或懸浮液而獲得的干粉或殘余物，所述水性有機(jī)溶液或懸浮液包括作為其中組分的所述肽活性齊U、所述冠狀化合物、以及所述反離子，并且其中所述干燥是在保留足夠量水分的條件下與所述肽活性劑相結(jié)合用來(lái)生產(chǎn)所述肽復(fù)合物。
41.如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述水性有機(jī)溶液或懸浮液是在與所述肽活性劑等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離所述肽活性劑等電點(diǎn)的PH下。
42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中所述肽活性劑以及所述反離子預(yù)形成為ー種肽鹽。
43.如權(quán)利要求42所述的方法，其中所述肽鹽是可通過(guò)干燥溶液或懸浮液而得到的干粉或殘余物，所述溶液或懸浮液包括作為其中組分的所述肽活性劑以及所述反離子，所述溶液或懸浮液具有與所述肽活性劑等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離所述肽活性劑等電點(diǎn)的pH。
44.如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述預(yù)形成包括使有效量的(i)具有有效量的與反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性劑的非水性疏水載體，和(ii )冠狀化合物相結(jié)合。
45.如權(quán)利要求44所述的方法，其中與所述反離子絡(luò)合的所述肽活性劑預(yù)形成為ー種肽鹽。
46.如權(quán)利要求45所述的方法，其中所述肽鹽是可通過(guò)干燥溶液或懸浮液而得到的干粉或殘余物，所述溶液或懸浮液包括作為其中組分的所述肽活性劑以及所述反離子，所述溶液或懸浮液具有與所述肽活性劑等電點(diǎn)不同，任選地遠(yuǎn)離所述肽活性劑等電點(diǎn)的pH。
47.ー種將有效量的肽活性劑粘膜遞送到需要它的宿主體內(nèi)的方法，所述方法包括 將根據(jù)權(quán)利要求I所述的有效量的粘膜遞送組合物給予所述宿主的粘膜，其中所述給予將有效量的所述肽活性劑遞送到所述宿主的血流中。
48.如權(quán)利要求47所述的方法，其中所述粘膜是口腔粘膜。
49.如權(quán)利要求48所述的方法，其中所述口腔粘膜選自由頰、舌下、以及它們的組合組成的組。
50.如權(quán)利要求49所述的方法，其中舌下給予所述組合物使得所述肽活性劑的藥理學(xué)生物利用率比胸膜內(nèi)給予高約10%。
51.ー種預(yù)形成的肽復(fù)合物，包括與冠狀化合物以及反離子絡(luò)合的穩(wěn)定水合的肽活性齊U，其中從具有與所述肽活性劑等電點(diǎn)不同，可選地遠(yuǎn)離所述肽活性劑等電點(diǎn)的PH的溶液或懸浮液中干燥所述預(yù)形成的肽復(fù)合物。
52.如權(quán)利要求51所述的預(yù)形成的肽復(fù)合物，其中所述溶液或懸浮液選自由水性物、有機(jī)物、以及它們的混合物組成的組。
53.如權(quán)利要求53所述的預(yù)形成的肽復(fù)合物，其中所述有機(jī)物是醇、或極性非質(zhì)子溶齊IJ。
54.如權(quán)利要求57所述的預(yù)形成的肽復(fù)合物，其中所述極性非質(zhì)子溶劑是こ臆，并且所述醇選自由甲醇和こ醇組成的組。
55.如權(quán)利要求56所述的預(yù)形成的肽復(fù)合物，其中所述混合物是具有約1%至約20%，優(yōu)選地約1%至約10%水含量的甲醇水溶液或懸浮液，或具有約30%至約70%，優(yōu)選地約40%至約60%水含量的こ腈水溶液或懸浮液。
56.如權(quán)利要求56所述預(yù)形成的肽復(fù)合物，其中所述預(yù)形成的肽復(fù)合物是存儲(chǔ)穩(wěn)定的。
57.ー種用于將肽活性劑粘膜遞送到宿主血流中的試劑盒，所述試劑盒包括在結(jié)合時(shí)能夠預(yù)形成所述粘膜遞送組合物的有效量的根據(jù)權(quán)利要求I所述的粘膜遞送組合物，和/或其組分。
全文摘要
提供了用于粘膜遞送肽類的組合物以及方法。這些組合物包括在與肽活性劑的pI不同的pH下溶于非水性疏水載體中的與冠狀化合物和/或反離子絡(luò)合的一種穩(wěn)定水合的肽活性劑。這些方法包括將有效量的公開(kāi)組合物給予受試者。其他方面包括用于制造本發(fā)明組合物的方法。還提供了在實(shí)踐本發(fā)明實(shí)施方案中找到用途的組合物以及試劑盒。這些方法以及組合物在多種應(yīng)用中找到用途，包括治療多種不同疾病病癥。
文檔編號(hào)A61K38/26GK102770152SQ201080062361
公開(kāi)日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2010年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月25日
發(fā)明者保羅·博蒂, 西爾維·切爾特基安 申請(qǐng)人:阿瑞斯根股份有限公司