專利名稱：毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中 的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
毛冬青為冬青科植物毛冬青的根，含有皂苷、黃酮等成分，具有清熱解毒、活血通 脈之功用，主要用于治風(fēng)熱感冒、肺熱喘咳、冠心病、腦血管意外所致的偏癱、血栓閉塞性脈 管炎、、中心性視網(wǎng)膜炎，以及皮膚急性化膿性炎癥等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究還表明毛冬青對心血 管疾病有較好治療作用，臨床上有用于降壓，緩慢而持久。隨著醫(yī)學(xué)研究的深入，毛冬青的 醫(yī)用藥物價值有了新開始，但毛冬青在防治短暫腦缺血綜合癥的應(yīng)用中末見有報導(dǎo)，特別 是毛冬青有效成分總皂苷作為制備治療短暫腦缺血綜合癥藥物應(yīng)用無有報導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種，毛冬青總皂苷 在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng)用，可有效解決制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物 的問題。本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，取毛冬青藥材加藥材重量10倍量的質(zhì)量濃度為70% 的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液，藥渣再加毛冬青重量8倍量的質(zhì)量濃度為70 %的 乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH調(diào)到 4-5后，上大孔樹脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為 70 %的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總皂苷，該毛冬青總皂苷可有效解決制備治療短暫腦缺血綜 合癥的藥物，實(shí)現(xiàn)對短暫腦缺血綜合癥的防治問題。本發(fā)明制備方法簡單，原材料豐富，應(yīng)用效果好，有效解決了短暫腦缺血治療的用 藥問題，是中藥上的創(chuàng)新。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體情況，對本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作詳細(xì)說明。本發(fā)明在具體實(shí)施時，取毛冬青800g藥材加藥材重量10倍量的質(zhì)量濃度為70% 的乙醇8000g，浸泡30min，提取lh，回收藥液，藥渣再加毛冬青重量8倍的質(zhì)量濃度為70% 的乙醇6400g，浸泡30min，提取lh，回收藥液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液 PH調(diào)到4-5后，上大孔樹脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量 濃度為70%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總皂苷。該毛冬青總皂苷具有防治短暫腦缺血綜合癥的功能，有效用于治療制備防治短暫 腦缺血綜合癥藥物的問題，實(shí)現(xiàn)毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng) 用，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)資料得到了充分的證明，有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料如下1.毛冬青總皂苷對小鼠血瘀合并缺血再灌注模型的影響
1. 1.實(shí)驗(yàn)材料1.1.1藥物試劑本發(fā)明毛冬青總皂苷，由河南中醫(yī)學(xué)院分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，方法為，取毛冬青 800g藥材加10倍量70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加8倍量70% 的乙醇，浸泡30min，提取lh，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液PH調(diào)到4_5后上 大孔樹脂；用35%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，在用70%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青 總皂苷。尼莫地平，山東新華制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號0808170;華佗再造丸，廣州奇 星藥業(yè)有限公司；氯化鈉注射液，由鄭州永和制藥有限公司生產(chǎn)；水合氯醛，由上海山浦化 工有限公司生產(chǎn)；甲醛溶液，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；考馬斯亮蘭檢測試劑盒，由 南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；ATP(Adenosine-triphosphate)檢測試劑盒，由南京建成 生物工程研究所生產(chǎn)；NO (Nitric oxide)檢測試劑盒，由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)； NOS(Nitric oxide synthetase)檢測試劑盒，由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。1.1. 2實(shí)驗(yàn)儀器UV-2000紫外可見分光光度計，尤尼柯(上海)儀器有限公司生產(chǎn)；TGL-16G臺式 離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；電子分析天平，奧豪斯(上海)公司生產(chǎn)；DZKW-4型電 子恒溫水浴鍋，北京永光明醫(yī)療儀器廠生產(chǎn)；DY89-1型電動玻璃勻漿機(jī)，寧波新芝生物科 技有限公司生產(chǎn)；可調(diào)式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司生產(chǎn)。1.1. 3實(shí)驗(yàn)動物昆明種小鼠，雄性，體重^ 32g，河北省實(shí)驗(yàn)動物中心提供。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1造模與給藥取體重為28 32g的昆明種小鼠216只，雄性，隨即均勻分為9組，即1組為空 白組、1組為血瘀模型假手術(shù)組、1組為不造血瘀模型手術(shù)組，另6組小鼠全部造血瘀模型加 手術(shù)造血瘀合并腦缺血模型。每組M只。除空白組、血瘀模型假手術(shù)組、不造血瘀模型手 術(shù)組及1組血瘀模型加手術(shù)外，其余8組造小鼠短暫腦缺血再灌注模型。造模型9組分別 灌服大、中、小劑量毛冬青總皂苷混懸液(0. 3g/kg、0. 15g/kg、0. 075g/kg)、華佗再造丸混懸 液(lg/kg)、尼莫地平混懸液(0. 04g/kg)、模型組(灌服同體積生理鹽水)，空白對照組灌服 同體積生理鹽水。每天給藥1次，連續(xù)給藥16天。在第1天給藥同時，造血瘀模型的10組 均每天后腿肌肉注射地塞米松0. 8mg/kg (不造血瘀模型的2組注射等體積生理鹽水)，連續(xù) 15d。于第16天給藥后Ih (禁食不禁水12h)，10%水合氯醛0. 03;3ml/10g腹腔注射麻醉 (小鼠的翻正反射消失)，消毒局部，手術(shù)刀作頸部正中切口，逐漸分離周圍肌肉，直到見到 雙側(cè)頸總動脈(CCA)，再用彎頭小鑷子剝離周圍神經(jīng)，分離CCA,用微動脈夾夾閉雙側(cè)頸總 動脈lOmin，恢復(fù)灌流lOmin，再用微動脈夾夾閉雙側(cè)頸總動脈lOmin，恢復(fù)供血，縫合小鼠 (此過程注意其保溫，室溫保持在25°C )。空白對照組及血瘀模型假手術(shù)組做假手術(shù)，即除 了不結(jié)扎CCA外，其它操作同造模各組。各組觀察，隨時清出死亡小鼠，于手術(shù)后24h統(tǒng)計 死亡情況；然后各組小鼠眼眶取血測血液流變學(xué)，結(jié)果見表6，然后脫頸椎處死，迅速取腦， 在濾紙上吸干凈上面的血跡，然后用天平稱量其重量，根據(jù)此重計算該加入的冰冷的生理 鹽水量，以腦組織(g)生理鹽水(ml) =1:9的比例在盛有冰塊的玻璃勻漿機(jī)中勻漿。4°C，3000r/min離心lOmin。取上清液于_20°C以下低溫保存。制成10%的腦勻漿按測試
盒說明操作，分別測定Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++--ATPase活力、NO含量、NOS酶活力。見表7、表8
試劑盒測定方法
表1考馬斯亮蘭蛋白測定操作順序表
權(quán)利要求
1.一種毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng)用，該毛冬青總皂苷 是，取毛冬青藥材加藥材重量10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收 藥液，藥渣再加毛冬青重量8倍量的質(zhì)量濃度為70 %的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥 液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后，上大孔樹脂，用質(zhì)量濃度為 35%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總皂 苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng)用， 其特征在于，該毛冬青總皂苷是，取毛冬青800g藥材加藥材重量10倍量的質(zhì)量濃度為70 % 的乙醇8000g，浸泡30min，提取lh，回收藥液，藥渣再加毛冬青重量8倍的質(zhì)量濃度為70% 的乙醇6400g，浸泡30min，提取lh，回收藥液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液 PH調(diào)到4-5后，上大孔樹脂，用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量 濃度為70%的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總皂苷。
全文摘要
本發(fā)明涉及毛冬青總皂苷在制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物中的應(yīng)用，可有效解決制備防治短暫腦缺血綜合癥藥物的問題。本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，取毛冬青藥材加藥材重量10倍量的質(zhì)量濃度為70％的乙醇，浸泡30min，提取1h，回收藥液，藥渣再加毛冬青重量8倍量的質(zhì)量濃度為70％的乙醇，浸泡30min，提取1h，回收藥液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH調(diào)到4-5后上大孔樹脂；用質(zhì)量濃度為35％的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70％的乙醇沖樹脂柱得毛冬青總皂苷，該毛冬青總皂苷可有效解決制備治療短暫腦缺血綜合癥的藥物，實(shí)現(xiàn)對短暫腦缺血綜合癥的防治問題。本發(fā)明制備方法簡單，原材料豐富，應(yīng)用效果好，有效解決了短暫腦缺血治療的用藥問題，是中藥上的創(chuàng)新。
文檔編號A61K125/00GK102058635SQ201110006860
公開日2011年5月18日 申請日期2011年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月13日
發(fā)明者白明, 苗明三, 苗艷艷 申請人:河南中醫(yī)學(xué)院