專利名稱：一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法，尤其作為抗腫瘤藥物和免疫增強(qiáng)劑的應(yīng)用，屬中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
苦豆子(Sophora alopecuroides L.)系豆科槐屬植物，是一種多年生草本植物。 苦豆子全株味苦性寒，藥用根、莖、全草及種子，具有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕、止痛殺蟲等作用。 隨著現(xiàn)代藥理藥效學(xué)研究的不斷深入，苦豆子的藥用價(jià)值被醫(yī)藥界所公認(rèn)?？喽棺邮侵匾乃幱弥参镔Y源和飼用植物資源，早在1914年國外就從苦豆子籽實(shí)中提出“苦參總堿”。世界性研究苦豆子始于20世紀(jì)30年代初，前蘇聯(lián)學(xué)者用提出的“苦參總堿”入藥后，發(fā)現(xiàn)具有清熱解毒，抗菌消炎等作用，又分離出槐定堿、槐胺堿。此后，波蘭、美國學(xué)者相繼研究報(bào)導(dǎo)了苦豆子植物體內(nèi)的多種化學(xué)成份。1930年被正式列入《美國藥典》，在世界上廣泛引起重視并用于醫(yī)藥界，隨后美國抗癌研究中心發(fā)現(xiàn)苦參堿中槐果堿在臨床上有抗癌效果。國內(nèi)研究始于1971年，為了開發(fā)資源，1975年研制的苦豆子生物堿制劑“苦豆子片”治療腹瀉新藥，被正式載入1977年版《中國藥典》，現(xiàn)改名為“克瀉靈片”。1983年開發(fā)出“苦參堿制劑婦炎栓”，用于治療婦科疾病。1984年國內(nèi)建成了第一條苦豆子生物堿工業(yè)生產(chǎn)線，生產(chǎn)苦豆總堿、苦參素、苦參堿、槐定堿等，開始了苦豆子生物堿系列產(chǎn)品的批量生產(chǎn)。苦豆子的化學(xué)成分主要是蛋白質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、黃酮類、色素和生物堿。苦豆子生物堿屬于喹諾里西啶生物堿，由三價(jià)氮原子形成的稠合的二個(gè)哌啶環(huán)，又稱雙稠哌啶，仍屬于哌啶或吡啶的衍生物。按其結(jié)構(gòu)可分為3個(gè)類型即羽扇豆堿，二環(huán)型；金雀花堿，三環(huán)型；鷹爪豆堿，四環(huán)型。目前從苦豆子中提取分離及鑒定的生物堿有苦參堿、槐果堿、槐胺堿、新槐胺堿、 槐定堿、苦參堿-N-氧化物、槐果堿-N-氧化物、槐定堿-N-氧化物、3-d-羥筌槐定堿、13， 14-脫氫槐定堿、N-羥定槐定堿、N-羥筌-13，14-脫氫槐定堿、苦豆堿、N-甲基苦豆堿、烯丙基苦豆堿、金雀花堿、N-甲村金雀花堿、鷹啶葉堿、三巴豆筌基四胺及具有羽扁豆結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的兩種新生物堿，共21種生物堿。由于苦豆子的根上結(jié)有大量的根瘤，固氮能力很強(qiáng)，因此是一種很好的綠肥植物。 在新疆農(nóng)村，農(nóng)民將收割的苦豆子新鮮枝葉埋入瓜和葡萄的根部，結(jié)出來的西瓜、甜瓜和葡萄都會(huì)又大又甜。苦豆子體內(nèi)含有沈種以上的生物堿單體，全株味極苦，成為荒漠草原及農(nóng)田上生長(zhǎng)的一種有毒植物?？喽棺又饕飰A為喹里西啶生物堿，一般稱之為羽扇生物堿，具有抗病毒、抗腫瘤、抗心律失常、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗?jié)?、抗升高白?xì)胞、平喘、清熱、止痛、殺蟲、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和多種保健功效。這就是民間用藥中的“以毒攻毒”的治療方法，民間用其根治療喉痛、咳嗽及濕疹等。根、莖、葉和花可作為提取生物堿的原料，廣泛用于醫(yī)藥和生物農(nóng)藥的制造。在苦豆子所含的許多生物堿中，科學(xué)家們提煉出了苦參素，苦參素對(duì)改善肝臟生物化學(xué)指標(biāo)及抗乙肝病毒具有良好效果，已經(jīng)制成了注射制劑和口服制劑。目前，將從苦豆子中提取的多糖制成口服制劑的文獻(xiàn)尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種苦豆子多糖口服制劑，該多糖所含雜質(zhì)較少，經(jīng)藥理篩選實(shí)驗(yàn)證明苦豆子多糖具有有效抗腫瘤活性和免疫增強(qiáng)作用，制得的口服制劑不僅方便患者攜帶使用，且副作用較小，安全性較高。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種苦豆子多糖口服制劑的制備方法。本發(fā)明提供的一種苦豆子多糖口服制劑，其改進(jìn)之處在于所述口服制劑包括按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖5% -80%和藥用輔料。本發(fā)明提供的第一優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑，所述口服制劑包括按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖20% -60%和藥用輔料。本發(fā)明提供的第二優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑，所述口服制劑包括顆粒劑、片劑、 丸劑、膠囊劑或口服液。本發(fā)明提供的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過10-60目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內(nèi)，用濃度為30% -100% 的乙醇浸泡18-24小時(shí)；再以濃度為30% -100%的乙醇為溶劑，以流速10-15ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟(2)晾干后的固體產(chǎn)物中加入體積為該固體產(chǎn)物6-15倍量的水， 于60-110°C，回流l_5h得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于35-90°C減壓濃縮成密度為1. 02-1. 1的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為40% -90%醇沉，4°C冰箱放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水復(fù)溶后，再加入乙醇至濃度為70% -90% 放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85-95 °C保溫20-40分鐘；加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1 % -3 %的活性炭于40-70 °C回流30-50min脫色、以 2000-5000r/min速率離心；取上清液采用Sevage法脫蛋白，重復(fù)3_5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和選自納米大孔氧化鋁、纖維素DEAE-52以及 NKA、NKA-II、AB-8、S_8、X_5、H103、D301R、D201、001 X 7 型樹脂中的一種載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0.01%-2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍
干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0. 01% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。8)制劑按照苦豆子多糖重量5% _80%，其他藥用輔料余量的比例，制成顆粒劑、 片劑、小丸劑、膠囊劑或口服液。本發(fā)明提供的第一優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述洗脫液為濃度 0. 02% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液。本發(fā)明提供的第二優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述藥用輔料為選自交聯(lián)聚維酮、糊精、淀粉、糖粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明提供的第三優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述顆粒劑制備包括如下步驟將5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯(lián)聚維酮和糊精、淀粉、糖粉一種或幾種余量混合均勻制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。本發(fā)明提供的第四優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述片劑制備包括如下步驟將重量百分比計(jì)的5% -80%苦豆子多糖、3%交聯(lián)聚維酮、糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂其中一種或幾種余量制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片。本發(fā)明提供的第五優(yōu)選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述丸劑制備包括如下步驟將按重量百分比計(jì)的5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯(lián)聚維酮和糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉其中一種或幾種余量；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機(jī)制備小丸。另外，苦豆子多糖口服液制備，包括如下步驟將按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖 5% -80%和藥用輔料余量，用常規(guī)方法制成口服液。其次，本發(fā)明采用洗脫液梯度洗脫，使得苦豆子多糖的純度明顯提高，產(chǎn)率增加； 純化的技術(shù)除了以上提供的幾種樹脂材料外，采用由天津神能科技有限公司提供的納米氧化鋁大孔樹脂，目前，該種樹脂為新研發(fā)產(chǎn)品，其應(yīng)用尚處于試驗(yàn)階段，該樹脂通過將硫酸和偏鋁酸鈉混合加熱后經(jīng)干燥得到，該樹脂比普通的氧化鋁樹脂孔徑較大，吸附能力較強(qiáng)， 該公司將此樹脂運(yùn)用于石油化工領(lǐng)域，但沒有應(yīng)用到醫(yī)藥領(lǐng)域，本發(fā)明將此樹脂用于對(duì)苦豆子多糖進(jìn)行純化；通過去比表面積大吸附力強(qiáng)的特點(diǎn)、使得苦豆子多糖的純度明顯提高， 處理所得上清液最后經(jīng)減壓濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥等過程可得苦豆子多糖精品；得到的苦豆子多糖精品通過藥劑學(xué)方法，可制成醫(yī)藥學(xué)上的各種劑型。一般豆類中的淀粉含量較高，本發(fā)明采用在常溫下采用濃度為30% -100%的乙醇浸泡，避免了淀粉在溫度較高情況下糊化影響有效成分的提取。另外，苦豆子中的生物堿成分含量較高，通常情況下，含量較高的生物堿多采用稀酸或乙醇提取，但鑒于本發(fā)明要提取的為苦豆子多糖，采用稀酸可能會(huì)影響多糖的結(jié)構(gòu)，且可能引入雜質(zhì)。采用30% -100% 的乙醇浸泡，及流速6-lOml/min條件下，可以最大程度提取生物堿，當(dāng)流速大于lOml/min 時(shí)，由于流速過快，苦豆子中的生物堿不能及時(shí)釋放，當(dāng)流速小于6ml/min時(shí)，由于流速過慢，生物堿已被溶解導(dǎo)致釋放時(shí)間過長(zhǎng)，不能最大程度提取生物堿。采用濃度40% -100%的乙醇醇沉，使得上清液中有效成分最大限度的得到保留，且存在的生物堿得到有效去除。醇沉后靜置10-4 ，使絕大部分沉淀析出，若靜置時(shí)間小于 10h，則將導(dǎo)致部分苦豆子淀粉雜質(zhì)不能有效去除。由于苦豆子本身屬豆科類，淀粉含量較高，獲得的浸膏的粘稠性較大，將浸膏濃縮在密度為1.02-1. 10范圍，避免了發(fā)生有效成分絮凝現(xiàn)象，且濃度越大，生產(chǎn)成本越低；另外加入淀粉酶，使得淀粉通過酶的進(jìn)一步催化水解獲取多糖；采用柱層脫色分離進(jìn)一步情制獲取多糖。本發(fā)明從提取過苦參素和苦參堿的苦豆子藥渣中進(jìn)行多糖提取。純化的技術(shù)除了之前提供的幾種樹脂材料外，加入納米大孔氧化鋁樹脂，這種樹脂現(xiàn)今在多糖純化領(lǐng)域未曾應(yīng)用，其主要特點(diǎn)為吸附力強(qiáng)、比表面積大。洗脫液濃度先后為0. 01% NaCUO. 02% NaCl、飽和氯化鈉溶液；2%醋酸銨溶液， 純化后多糖含量大于90%。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法具有以下優(yōu)點(diǎn)1、采用滲漉提取苦豆子總堿后剩余的藥渣方法提取多糖，提取工藝簡(jiǎn)單，提取的多糖純度高；2、制備的多糖口服劑的劑型多種，可以方便患者攜帶、使用；3、成本低，適合藥物的工業(yè)化生產(chǎn)條件；4、抗腫瘤活性很好，可以有效的用于腫瘤患者的治療，同時(shí)可以從提高患者機(jī)體的免疫力；5、中藥成分較多，對(duì)患者的身體產(chǎn)生的副作用較小，因此患者用藥相對(duì)安全，可以使得患者的病情得到有效治療；6、苦豆子多糖的成分在制備過程中得到充分的發(fā)揮。


圖1是本發(fā)明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-試驗(yàn)2混合四種單糖對(duì)照品衍生物色譜圖；圖2是本發(fā)明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-試驗(yàn)3苦豆子多糖水解衍生物色譜圖；圖3是本發(fā)明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-苦豆子多糖分子量測(cè)定色譜圖；圖中1 =D-甘露糖、2 =D-鼠李糖、3 =D-葡萄糖、4 =D-半乳糖。
具體實(shí)施例方式以下通過具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法做進(jìn)一步更詳細(xì)的說明。相關(guān)試驗(yàn)試驗(yàn)1苦豆子多糖相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定1. 1餼譜條件的確定流動(dòng)相的選擇根據(jù)OHpak SB-804色譜柱條件，可采用三次蒸餾水、磷酸鹽緩沖溶液或醋酸鹽緩沖溶液做流動(dòng)相，但緩沖液濃度控制在0. 1 0. 3mol/L之間，pH值控制在 3. 0 8. 0之間；選用三次蒸餾水和0. 2mol/LpH5. 0磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，以右旋糖酐作為分離試樣在柱中進(jìn)行分離檢測(cè)；3種流動(dòng)相對(duì)苦豆子多糖的分離效果都很好，出于保護(hù)色譜柱的考慮，選用三次蒸餾水作流動(dòng)相；流速的選擇根據(jù)色譜柱條件，流速應(yīng)當(dāng)不超過1.5ml/min，采用0.6、0.8、1.0、 1. 2ml/min的流速進(jìn)行樣品分離實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，出峰時(shí)間隨著流速的加大而減少，其峰形也有所改變，隨之柱壓也明顯升高，對(duì)多糖的分離效果也有所下降；采用0. 8ml/min的流速，進(jìn)樣量20 μ 1 ；柱溫的選擇根據(jù)色譜柱條件，柱溫選擇30°C。1. 2多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作分別精密稱取右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)品Mw2000000、133800、84400、41100、21400、7100、 4600,2500,180各50. Omg，用三次蒸餾水定容于5ml容量瓶中，配成10. Omg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照1. 3. 1節(jié)中確定的色譜條件下分別進(jìn)樣，測(cè)得各色譜峰保留時(shí)間。應(yīng)用島津GPC 軟件以不同分子量標(biāo)準(zhǔn)右旋糖酐的保留時(shí)間(RT)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)數(shù)值 (IgMw)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1. 3苦豆子多糖樣品測(cè)定 稱取苦豆子多糖50. Omg,用三次蒸餾水定容于5ml容量瓶中，配成10. Omg/mL的樣品溶液。按制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的色譜條件進(jìn)樣，得到苦豆子多糖的保留時(shí)間和相對(duì)分子質(zhì)量如下表1。表1苦豆子多糖的保留時(shí)間和相對(duì)分子質(zhì)量
多1唐樣品保留時(shí)間(min)Μ M\MpMzD17. 3475019304219905235495799250.032i式駘2梓前衍Φ化HPLC法分析苦百.子多糖中單糖鉬成2. 1方法以三氟乙酸水解苦豆子多糖，加入衍生化試劑1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)生成衍生化產(chǎn)物，采用RP-HPLC法，色譜柱C18色譜柱Q50mmX 4. 6mm, 5 μ m)， 流動(dòng)相乙腈-0. Imol · L-1磷酸鹽緩沖液ρΗ6· 7(17 83)，流速1. OmL · mirT1，檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)2Mnm，柱溫35°C ；結(jié)果苦豆子多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、 D-葡萄糖、D-半乳糖等主要4種單糖組成；D-甘露糖、D-鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖的比例約450. 76 1 4.45 193. 97 ；結(jié)論該方法可以準(zhǔn)確的測(cè)定出苦豆子多糖中含有的各種單糖。表2苦豆子多糖水解衍生物色譜測(cè)定對(duì)應(yīng)參數(shù)1 254nm，8nm
_保留時(shí)間_Area
13.66213649463
19.30230281
28.626134951
32.5015873544
8
試驗(yàn)2苦豆子多糖抗腫瘤篩選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明小鼠動(dòng)物腫瘤:3180(骨肉瘤)、!1印4(肝癌膠水)、肌4(宮頸癌)34((艾氏膠水)測(cè)試樣品苦豆子多糖(除蛋白后)；腫瘤接種取接種腫瘤7-10天狀態(tài)良好的荷瘤(膠水型)動(dòng)物，常規(guī)消毒后抽取少量膠水，推片瑞氏染色細(xì)胞分類證實(shí)腫瘤細(xì)胞數(shù)不少于75%后將膠水抽出，以膠水與生理鹽水之比為1 4比例稀釋，制備成接種用的腫瘤細(xì)胞懸液；腫瘤細(xì)胞懸液的制備均在無菌條件下完成。吸取上述制備的腫瘤細(xì)胞混懸液0.2ml接種于小鼠右側(cè)腋窩皮下，從取出腫瘤膠水至腫瘤接種完成在60min內(nèi)完成。分組與給藥腫瘤細(xì)胞接種后M小時(shí)動(dòng)物分組并給藥，所有動(dòng)物按體重均勻分組，依實(shí)驗(yàn)要求不同分為6組，每組動(dòng)物數(shù)量14只，雌雄各半；分組情況正常對(duì)照組、荷瘤對(duì)照組、環(huán)磷酰胺組(陽性對(duì)照組)、苦豆子多糖低劑量(100mg/kg)、苦豆子多糖中劑量組 (200mg/kg)、苦豆子多糖高劑量組G00mg/kg)。給藥方式除環(huán)磷酰胺組為接種腫瘤M小時(shí)后腹腔一次性給藥(50mg/kg)外，其余各組均為灌胃給藥，每天一次，連續(xù)七天?？鼓[瘤活性評(píng)價(jià)末次給藥后Mh，稱取小鼠體重，處死后取其腫瘤組織，并稱重，以腫瘤生長(zhǎng)抑制率來評(píng)價(jià)藥物的體內(nèi)抗癌效果。計(jì)算公式腫瘤生長(zhǎng)抑制率=(1-T/C) X100%式中，T為給藥組平均瘤重，C為荷瘤對(duì)照組平均瘤重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果S180 環(huán)磷酰胺組抑瘤率77. 11% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率23. 17% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率23. 94% ；苦豆子多糖高劑量組抑瘤率43. 11%。肝癌環(huán)磷酰胺組抑瘤率66. 14% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率28. 75% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率16. 26% ；苦豆子多糖高劑量組抑瘤率19%。U14 :t檢驗(yàn)結(jié)果顯示無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義EAC 環(huán)磷酰胺組抑瘤率44. 14% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率34. 22% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率22. 99%;苦豆子多糖高劑量組抑瘤率19. 46%;實(shí)驗(yàn)證明，苦豆子多糖具有一定的細(xì)胞免疫活性。實(shí)施例1以下實(shí)施例中，采用的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過篩；2)醇提取已粉碎的苦豆子，裝入滲漉柱內(nèi)，用70%乙醇浸泡Mh ；以70%乙醇為溶劑，流速6ml/min，滲漉提取苦豆子中所含生物堿成分，直至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉；回收乙醇，得苦豆子藥渣，風(fēng)干備用；3)水提向上述風(fēng)干的固體產(chǎn)物中加入其固體產(chǎn)物2倍體積的水，于60°C回流反應(yīng)Ih得水提物；4)醇沉將上述水提物于35°C減壓濃縮成密度為1. 02的液體，用40%的乙醇醇沉，室溫放置10h，離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水溶后，再加入80 %的乙醇醇沉放置10h，離心，取沉淀冷凍干燥，得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述精制糖提取物按比例添加淀粉酶，置于85°C保溫 20min ；加活性炭90°C回流30min、脫色、離心；取上清液kvage法脫蛋白，重復(fù)3次，取水層濃縮、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末粉末；6)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10的比例上樣，采用濃度為0.01 %的醋酸銨溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析Mh，醇沉，過夜，以2000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖；7)制劑將苦豆子多糖重量5%、淀粉50%、糊精40%、5%交聯(lián)聚維酮和淀粉漿混合均勻制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實(shí)施例2本實(shí)施例的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過篩；2)醇提取已粉碎的苦豆子，裝入滲漉柱內(nèi)，用90%乙醇浸泡Mh ；以85%乙醇為溶劑，流速lOml/min，滲漉提取苦豆子中所含生物堿成分，直至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉；回收乙醇，得苦豆子藥渣，風(fēng)干備用；3)水提向上述風(fēng)干的固體產(chǎn)物中加入其固體產(chǎn)物8倍體積的水，于110°C回流反應(yīng)5小時(shí)得水提物；4)醇沉將上述水提物于90°C減壓濃縮成密度為1. 1的液體，用100%的乙醇醇沉，室溫放置48h，離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水溶后，再加入100 %的乙醇醇沉放置48h，離心，取沉淀；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于95°C保溫40min ； 加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3%的活性炭于70°C回流50min脫色、以5000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復(fù)5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和纖維素DEAE-52樹脂載體按重量比為 1 100的比例上樣，采用濃度為2%的醋酸銨溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析 48h，醇沉，過夜，以5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)制劑按照苦豆子多糖重量80%，交聯(lián)聚維酮和糊精、淀粉、糖粉余量混合均勻制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實(shí)施例3苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過50目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內(nèi)，用濃度為80%的乙醇浸泡20h ；再以濃度為60%的乙醇為溶劑，以流速12ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產(chǎn)物中加入體積為該固體產(chǎn)物6倍量的水，于 80°C，回流池得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于70°C減壓濃縮成密度為1. 02的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為50%醇沉，4°C冰箱放置30h，以3000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水復(fù)溶后，再加入乙醇至濃度為80%放置30h，以3000r/min速率離心， 取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85°C保溫30min ； 加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為2. 5%的活性炭于60°C回流40min脫色、以3000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復(fù)4次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和NKA載體按重量比為1 10的比例上樣， 采用濃度為0. 01%的氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析30h，醇沉，過夜，以 3000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；本實(shí)施例的片劑制備將重量百分比計(jì)的80%苦豆子多糖、3%交聯(lián)聚維酮溶液和17%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂余量制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片。實(shí)施例4苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過50目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內(nèi)，用濃度為60%的乙醇浸泡20h ；再以濃度為70%的乙醇為溶劑，以流速12ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產(chǎn)物中加入體積為該固體產(chǎn)物8倍量的水，于 70°C，回流4h得水提物；4)醇沉將步驟(3)得到的水提物于60°C減壓濃縮成密度為1. 1的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為70%醇沉，4°C冰箱放置30h，以4000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水復(fù)溶后，再加入乙醇至濃度為80%放置38h，以5000r/min速率離心， 取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于95°C保溫40min; 加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3%的活性炭于70°C回流50min脫色、以3000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復(fù)5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10的比例上樣，采田濃度為2%的氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析Mh，醇沉，過夜， 以5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。本實(shí)施例的片劑制備將重量百分比計(jì)的80%苦豆子多糖、3%交聯(lián)聚維酮溶液和17%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂余量制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片。實(shí)施例5顆粒劑本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例4步驟1)-步驟7)，本實(shí)施例的顆粒劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖5乳糖80
交聯(lián)聚維酮5具體操作過程將上述比例的苦豆子多糖與乳糖、交聯(lián)聚維酮混合均勻，加入5% 聚維酮溶液制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實(shí)施例6小丸劑本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例3步驟1)-步驟7)，小丸劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖80微晶纖維素20具體操作過程以60-80空白微晶纖維素小丸為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機(jī)制備小丸。實(shí)施例7片劑本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例2步驟1)-步驟7)，片劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖 60淀粉15微晶纖維素 20硬脂酸鎂5制備將上述比例的苦豆子多糖與其余組分混合均勻，加入淀粉漿制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片。實(shí)施例8顆粒劑制備本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例1步驟1)-步驟7)，顆粒劑制備將20%苦豆子多糖、3%交聯(lián)聚維酮和77%糊精、淀粉和糖粉混合均勻制成軟材， 用制粒機(jī)制得顆粒劑，糊精、淀粉和糖粉的比例為1 1 2。實(shí)施例9片劑制備本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例4步驟1)-步驟7)，將重量百分比計(jì)的 70%苦豆子多糖、5%交聯(lián)聚維酮和25%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的混合物制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的比例為 1:1:2:3:4。實(shí)施例10丸劑制備本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例3步驟1)-步驟7)，將按重量百分比計(jì)的 60%苦豆子多糖、2%交聯(lián)聚維酮和38%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的混合物；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機(jī)制備小丸劑，其中糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的比例為1:2:3:6。實(shí)施例11片劑制備本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例1步驟1)-步驟7)，片劑制備將重量百分比計(jì)的70%苦豆子多糖、5%交聯(lián)聚維酮、和25%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的混合物制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、 硬脂酸鎂的比例為1:2:4:3:5。實(shí)施例12小丸劑制備
本實(shí)施例的苦豆子多糖的提取同實(shí)施例2步驟1)-步驟7)，小丸劑制備將按重量百分比計(jì)的80%苦豆子多糖、5%交聯(lián)聚維酮和15%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的混合物；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機(jī)制備小丸劑，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的比例為1 2 1 3。最后應(yīng)當(dāng)說明的是以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對(duì)其限制，盡管參照上述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解技術(shù)人員閱讀本申請(qǐng)說明書后依然可以對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
進(jìn)行修改或者等同替換，但這些修改或變更均未脫離本發(fā)明申請(qǐng)待批權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖5% -80%和藥用輔料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖20% -60%和藥用輔料。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊劑或口服液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過10-60目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內(nèi)，用濃度為30%-100%的乙醇浸泡18-24h ；再以濃度為30% -100%的乙醇為溶劑，以流速10-15ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無顏色變化時(shí)停止?jié)B漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產(chǎn)物中加入體積為該固體產(chǎn)物6-15倍量的水，于 60-110°C，回流l-5h得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于35-90°C減壓濃縮成密度為1.02-1. 1的液體， 加入乙醇至乙醇終濃度為40-90%醇沉，4°C冰箱放置10-48h，以2000_5000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水復(fù)溶后，再加入乙醇至濃度為70-90%放置 10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85-95°C保溫 20-40min ；加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為的活性炭于40_70°C回流30_50min脫色、以2000_5000r/ min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復(fù)3_5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和選自納米大孔氧化鋁、纖維素DEAE-52以及 NKA、NKA-II, AB-8、S_8、X_5、H103、D301R、D201、001 X7 型樹脂中的一種載體按重量比為 1 10-100的比例上樣，采用濃度為0.01%-2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0. 01 % -2 %的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。8)制劑按照苦豆子多糖重量5%_80%，其他藥用輔料余量的比例，制成顆粒劑、片劑、小丸劑、膠囊劑或口服液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述洗脫液為濃度0. 01% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述藥用輔料為選自交聯(lián)聚維酮、糊精、淀粉、糖粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂中的一種或幾種的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述顆粒劑制備包括如下步驟將5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯(lián)聚維酮和糊精、淀粉、糖粉一種或幾種余量混合均勻制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述片劑制備包括如下步驟將重量百分比計(jì)的5% -80%苦豆子多糖、3%交聯(lián)聚維酮、糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂其中一種或幾種余量制成軟材，用制粒機(jī)制顆粒，干燥后壓片。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述丸劑制備包括如下步驟將按重量百分比計(jì)的5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯(lián)聚維酮和糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉其中一種或幾種余量；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機(jī)制備小丸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計(jì)的苦豆子多糖5-80％和藥用輔料；制得的口服制劑不僅方便患者攜帶使用，副作用較小，安全性較高；制備方法采用1)粉碎；2)醇提；3)水提；4)醇沉；5)酶解、脫色及除蛋白；6)柱層脫色分離；7)柱層純化分離；8)制劑；該制備方法可以制備多種進(jìn)口服劑型，方便患者使用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102579563SQ20111000788
公開日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2011年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月14日
發(fā)明者張巖, 王文彤, 鄭奪, 陶遵威, 馬麗娜 申請(qǐng)人:天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所