專利名稱：超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，屬于中藥制備技術(shù)領(lǐng) 域。
背景技術(shù)：
銀杏葉提取物是從銀杏科銀杏屬銀杏植物的葉子中提取分離而得，已被幾乎所有 的發(fā)達(dá)西方國家收載入藥典，銀杏葉提取物(EGB)也是中國古老藥用植物對國際藥學(xué)界的 一大貢獻(xiàn)。目前國際市場上銀杏葉提取物及其下游產(chǎn)品已形成年銷售額達(dá)50億美元以上 的銷售規(guī)模，堪稱“天然植物藥之王”。銀杏葉提取物中的有效成分主要為黃酮類化合物和內(nèi)酯類化合物，治療中老年人 心腦血管疾病、老年性癡呆癥、腦功能不全、精神障礙、記憶功能衰退、冠心病、高血壓、高血 脂、心絞痛等癥藥理功效，同時(shí)還具有延長心腦血管機(jī)能衰退，抗衰老、皮膚抗縐等保健功 能。但研究發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物中還含有一類被統(tǒng)稱為銀杏酚酸，可致人體強(qiáng)烈過敏和造成 接觸性皮炎等疾病的酚酸類物質(zhì)。國際要求銀杏葉提取物中的銀杏酚酸類物質(zhì)的含量必須 小于5ppm，2010年版中國藥典(一部)部分增修訂及新增品種中規(guī)定銀杏葉提取中總銀杏 酸的含量為不得過5ppm，這一限度在銀杏葉口服制劑中可以滿足質(zhì)量控制及安全的目的。 但對于安全性要求極高的銀杏葉針劑而言，銀杏葉提取物中的銀杏酚酸的限度要求不得過 lppm。而當(dāng)前國內(nèi)市售的銀杏葉提取物產(chǎn)品中的銀杏酚酸含量還達(dá)不到這一要求，我國出 口的銀杏葉提取物浸膏粉往往由于銀杏酚酸含量不符合西方客商要求而被退貨。因此如何 將銀杏葉提取物中銀杏酚酸脫除，生產(chǎn)低酸值銀杏提取物就顯得格外重要。目前，我國國內(nèi)廠家脫除銀杏酚酸的方法大都是采用溶劑萃取，和一次或多次過 柱層析柱吸附，這些工藝要么脫除效果不佳，無法達(dá)到要求；要么提取工藝復(fù)雜，脫除成本 高；要么脫除銀杏酚酸的同時(shí)，銀杏黃酮和內(nèi)酯含量也同時(shí)降低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種超聲提取制備低酸值銀杏 提取物的方法，工藝簡單、成本低廉、生產(chǎn)周期短、脫除銀杏酚酸效果好，符合國際標(biāo)準(zhǔn)的銀 杏葉提取物。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，所述超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括 以下工藝步驟(1)將銀杏葉在60 80°C的條件下烘干24 48h，并粉碎得到100 150目的銀 杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為10% 50%的乙醇溶液混合，銀杏粉 末與乙醇溶液的比例為Ig 5 30ml，在30 70°C的條件下超聲提取15分鐘 3小時(shí) 得到提取液，超聲頻率為20 50Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮后得到濃縮液，減壓濃縮的真空度為0. 05 0. 098MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑，直至濃縮液的pH值為5 10 ；經(jīng)抽濾或離心后 得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成分富 集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是5 30 1，清液的流速是0.5 lOml/min;用洗脫劑 對大孔樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是1 20ml/min，洗脫劑與樹脂的體積比是2 10 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液 體；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 05 0. 098MPa,干燥溫度為300 350°C，高壓噴霧干燥的 壓力為2 20MPa，干燥時(shí)間為10 30秒。所述沉淀劑為MgCl2、A1C13、CaCl2, CuCl2或FeCl2中的一種或多種的飽和溶液。所述沉淀劑為Ca(OH)2或NaOH中的一種或多種的飽和溶液。所述沉淀劑為NH3 · H2O或CaCl2中的一種或多種的飽和溶液。所述沉淀劑為Ca(OH)2或CaCl2中的一種或多種的飽和溶液。所述大孔樹脂柱中的填充樹脂為AB-8、BS-30、D311、D101、X_5、H107、S_8、NKA-9、 D3520.D4006或聚酰胺樹脂。所述洗脫劑為乙醇溶液、鹽酸溶液、氨水溶液、乙醇與鹽酸的混合溶液或乙醇與氨 水的混合溶液。所述乙醇溶液為濃度為50% 80%的乙醇溶液；所述鹽酸溶液為pH值為1 6 的鹽酸溶液；所述氨水溶液為pH值為8 14的氨水溶液。本發(fā)明從銀杏葉直接提取獲得脫除銀杏酸的銀杏葉提取物，將原有的兩次過柱技 術(shù)縮短為一次過柱，本發(fā)明具有操作簡便、生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)成本低、脫酸效果好等優(yōu)點(diǎn)，獲 得的產(chǎn)品符合有關(guān)國家藥品的技術(shù)要求，是一種具有較好推廣應(yīng)用前景的從銀杏葉中提取 銀杏葉提取物的方法。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例一一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在60°C的條件下烘干24h，并粉碎得到100目的銀杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為10%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 5ml，在30°C的條件下超聲提取15分鐘得到提取液，超聲頻率為 20Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮除去乙醇后，得到濃縮液，減壓濃縮的真空 度為0. 05MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑MgCl2的飽和溶液，直至濃縮液的pH值為5 ；經(jīng)抽濾 后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)AB-8大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成 分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是5 1，清液的流速是0.5ml/min;用洗脫劑對大孔 樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是lml/min，洗 脫劑與樹脂的體積比是2 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所使用的AB-8大孔樹脂的廠家為上海摩速科學(xué)器材有限公司；所述洗脫劑為濃度為50%的乙醇溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 05MPa，干燥溫度為300°C，高壓噴霧干燥的壓力為2MPa，干 燥時(shí)間為10秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1. 17%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為21. 53%, 銀杏內(nèi)酯含量為5. 32%，銀杏酚酸含量大于lOppm。實(shí)施例二 一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在80°C的條件下烘干48h，并粉碎得到150目的銀杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為50%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 30ml，在70°C的條件下超聲提取3小時(shí)得到提取液，超聲頻率為 28Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮除去乙醇后得到濃縮液，減壓濃縮的真空 度為0. 098MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑AlCl3的飽和溶液，直至濃縮液的pH值為10 ；經(jīng)抽 濾或離心后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)BS-30大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成 分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是30 1，清液的流速是lOml/min;用洗脫劑對大孔 樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是20ml/min，洗 脫劑與樹脂的體積比是10 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所使用的BS-30 大孔樹脂采用蛘埠市遼源新材料有限公司生產(chǎn)的BS-30大孔吸附樹脂；所述洗脫劑為濃度 為60%的乙醇溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 098MPa，干燥溫度為350°C，高壓噴霧干燥的壓力為20MPa， 干燥時(shí)間為30秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1. 23%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為24. 02%, 銀杏內(nèi)酯含量為5. 27%，銀杏酚酸含量大于lOppm。實(shí)施例三一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在70°C的條件下烘干36h，并粉碎得到100目的銀杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為30%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 10ml，在50°C的條件下超聲提取2小時(shí)得到提取液，超聲頻率為 35Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮去除乙醇后得到濃縮液，減壓濃縮的真空 度為0. 06MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑CaCl2的飽和溶液，直至濃縮液的pH值為6 ；經(jīng)抽濾 或離心后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)D-IOl大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成 分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是10 1，清液的流速是5ml/min;用洗脫劑對大孔 樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是5ml/min，洗 脫劑與樹脂的體積比是5 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所使用的D-IOl 大孔樹脂為江陰明大化工有限公司生產(chǎn)的D-IOl大孔吸附樹脂；所述洗脫劑為濃度為75% 的乙醇溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 06MPa，干燥溫度為325°C，高壓噴霧干燥的壓力為lOMPa，干燥時(shí)間為20秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1. 45%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為24. 31%, 銀杏內(nèi)酯含量為6. 37%，銀杏酚酸含量小于5ppm。實(shí)施例四一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在75°C的條件下烘干40h，并粉碎得到120目的銀杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為40%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 20ml，在50°C的條件下超聲提取2小時(shí)得到提取液，超聲頻率為 35Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮以去除乙醇后得到濃縮液，減壓濃縮的真 空度為0. 07MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑Ca(OH)2的飽和溶液，直至濃縮液的pH值為7 ；經(jīng) 抽濾或離心后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)D311大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成 分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是20 1，清液的流速是6ml/min;用洗脫劑對大孔 樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是15ml/min，洗 脫劑與樹脂的體積比是3 1;收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所述D311大孔樹 脂采用安徽三星樹脂科技有限公司生產(chǎn)的D311大孔吸附樹脂；所述洗脫劑為pH值為12的 氨水溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 07MPa，干燥溫度為330°C，高壓噴霧干燥的壓力為15MPa， 干燥時(shí)間為25秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1. 33%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為25. 32%, 銀杏內(nèi)酯含量為5. 72%，銀杏酚酸含量小于5ppm。實(shí)施例五一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在65°C的條件下烘干30h，并粉碎得到110目的銀杏葉粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為45%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 16ml，在60°C的條件下超聲提取2小時(shí)得到提取液，超聲頻率為 35Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮以去除乙醇后得到濃縮液，減壓濃縮的真 空度為0. OSMPa ；向濃縮液中加入沉淀劑CuCl2的飽和溶液，直至濃縮液的pH值為8 ；經(jīng)抽 濾或離心后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)聚酰胺大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物 成分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是25 1，清液的流速是6ml/min;用洗脫劑對大 孔樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是15ml/min， 洗脫劑與樹脂的體積比是8 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所述洗脫劑為 濃度為80%的乙醇溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 08MPa，干燥溫度為320°C，高壓噴霧干燥的壓力為12MPa， 干燥時(shí)間為25秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1. 38%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為24. 52%, 銀杏內(nèi)酯含量為6. 35%，銀杏酚酸含量小于5ppm。實(shí)施例六一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在80°C的條件下烘干48h，并粉碎得到150目的銀杏葉粉末；
(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為50%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 30ml，在70°C的條件下超聲提取3小時(shí)得到提取液，超聲頻率為 20Hz ；(3)將步驟(2)得到的提取液減壓濃縮以去除乙醇后得到濃縮液，減壓濃縮的真 空度為0. 098MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑NaOH和Ca (OH) 2的飽和溶液，直至濃縮液的pH值 為9 ；經(jīng)抽濾或離心后得到清液；(4)將步驟(3)得到的清液經(jīng)NKA-9大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成 分富集在樹脂上，清液與樹脂的體積比是25 1，清液的流速是Sml/min;用洗脫劑對大孔 樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是18ml/min，洗 脫劑與樹脂的體積比是8 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；所述NKA-9大孔 樹脂采用上海摩速公司生產(chǎn)的NKA-9大孔樹脂；所述洗脫劑為pH值為1的鹽酸溶液；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏 提取物；減壓濃縮的真空度為0. 098MPa，干燥溫度為350°C，高壓噴霧干燥的壓力為20MPa， 干燥時(shí)間為30秒。銀杏提取物的產(chǎn)品得率為1.58%，經(jīng)檢測其中銀杏黃酮含量為21. 12%, 銀杏內(nèi)酯含量為4. 35%，銀杏酚酸含量大于lOppm。
權(quán)利要求
1.一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉在60 80°C的條件下烘干M 48h，并粉碎得到100 150目的銀杏葉 粉末；(2)將步驟(1)得到的銀杏葉粉末與濃度為10% 50%的乙醇溶液混合，銀杏粉末與 乙醇溶液的比例為Ig 5 30ml，在30 70°C的條件下超聲提取15分鐘 3小時(shí)得到 提取液，超聲頻率為20 50Hz ；(3)將步驟( 得到的提取液減壓濃縮后得到濃縮液，減壓濃縮的真空度為0.05 0. 098MPa ；向濃縮液中加入沉淀劑，直至濃縮液的pH值為5 10 ；經(jīng)抽濾或離心后得到清 液；(4)將步驟C3)得到的清液經(jīng)大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成分富集在 樹脂上，清液與樹脂的體積比是5 30 1，清液的流速是0.5 lOml/min;再用洗脫劑 對大孔樹脂柱進(jìn)行洗脫，將樹脂上富集的銀杏提取物成分洗脫下來，洗脫劑的流速是1 20ml/min，洗脫劑與樹脂的體積比是2 10 1 ；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液 體；(5)將步驟(4)收集的過柱液減壓濃縮后再經(jīng)高壓噴霧干燥，即得到所述的銀杏提取 物；減壓濃縮的真空度為0. 05 0. 098MPa,干燥溫度為300 350°C，高壓噴霧干燥的壓力 為2 20MPa，干燥時(shí)間為10 30秒。
2.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述沉淀 劑為MgCl2、AlCl3、CaCl2、CuCl2或FeCl2中的一種或多種的飽和溶液。
3.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述沉淀 劑為Ca(OH)2或NaOH中的一種或多種的飽和溶液。
4.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述沉淀 劑為NH3 · H2O或CaCl2中的一種或多種的飽和溶液。
5.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述沉淀 劑為Ca(OH)2或CaCl2中的一種或多種的飽和溶液。
6.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述大孔 樹脂柱中的填充樹脂為 AB-8、BS-30、D311、D101、X-5、H107、S-8、NKA-9、D3520、D4006 或聚 酰胺樹脂。
7.如權(quán)利要求1所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述洗脫 劑為乙醇溶液、鹽酸溶液、氨水溶液、乙醇與鹽酸的混合溶液或乙醇與氨水的混合溶液。
8.如權(quán)利要求7所述的超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，其特征是，所述乙醇 溶液為濃度為50% 80%的乙醇溶液；所述鹽酸溶液為pH值為1 6的鹽酸溶液；所述氨 水溶液為PH值為8 14的氨水溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種超聲提取制備低酸值銀杏提取物的方法，包括以下工藝步驟(1)將銀杏葉烘干、粉碎得到銀杏葉粉末；(2)將銀杏葉粉末與乙醇溶液混合，超聲提取得到提取液；(3)將提取液減壓濃縮后得到濃縮液；向濃縮液中加入沉淀劑，調(diào)節(jié)濃縮液的pH值至5～10；經(jīng)抽濾或離心后得到清液；(4)將清液經(jīng)大孔樹脂柱富集，以使清液中的銀杏提取物成分富集在樹脂上；用洗脫劑對大孔樹脂柱進(jìn)行洗脫；收集過柱液，即經(jīng)洗脫劑洗脫下來的液體；(5)將過柱液減壓濃縮后高壓噴霧干燥得到所述的銀杏提取物。本發(fā)明操作簡便、生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)成本低、脫酸效果。
文檔編號A61P3/06GK102091103SQ20111002681
公開日2011年6月15日 申請日期2011年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月25日
發(fā)明者吳超, 李百健 申請人:江蘇九久環(huán)境科技有限公司