專利名稱：一種牛膝三萜皂苷的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種牛膝三萜皂苷的提取工藝。
背景技術(shù)：
牛膝(Radix Achyranthis Bidentatae)為莧科牛膝屬植物牛膝的根。具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、活血通經(jīng)、引火下行、利尿通淋的功效，用于腰膝酸痛、下肢痿軟、血滯經(jīng)閉、痛經(jīng)、產(chǎn)后血瘀腹痛、癥瘕、胞衣不下、熱淋、血淋、跌打損傷、癰腫惡瘡、咽喉腫痛等癥。根含皂苷，主要為三萜皂苷，另含有免疫活性的牛膝肽多糖等。王麗景發(fā)表的“牛膝指紋圖譜和牛膝皂苷的提取及其藥理作用的研究”，研究表明牛膝皂苷有興奮子宮、抗生育作用，抗腫瘤作用，心血管藥理作用以及抗炎、鎮(zhèn)痛作用等。目前，牛膝皂苷的提取純化方法很少，多采用醇提正丁醇萃取法，該方法存在成本高、有機(jī)溶劑毒性殘留的缺點(diǎn)。已有研究發(fā)現(xiàn)，用大孔吸附樹(shù)脂富集，純化黃芪、人參等總皂苷效果較理想。如中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)枮?01010191221. 3) “牛膝皂苷的提純方法”，該專利公開(kāi)的方法是以牛膝為原料，選用大孔吸附樹(shù)脂富集純化，用DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱吸附的流程式方法對(duì)牛膝的有效成分進(jìn)行分離提取，得到牛膝皂苷。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所要解決的問(wèn)題是提供一種牛膝三萜皂苷的提取工藝。本發(fā)明中，所述牛膝三萜皂苷提取物中，三萜皂苷的含量為85. 0-94. 0 %。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其特征在于包括以下步驟(1)提取將牛膝藥材粉碎，按重量比加入5-12倍熱水，超聲提取，頻率為 30-45kHz，提取2-4次，每次1_2小時(shí)，合并提取液；(2)分離上述提取液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用 15-60%醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集40-60%醇溶液洗脫液；(3)活性炭脫色將上述醇溶液洗脫液加入藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，得到脫色液；(4)結(jié)晶將上述脫色液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，無(wú)水乙醇重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。步驟(1)中熱水溫度為60_100°C。步驟( 所述大孔樹(shù)脂型號(hào)可選AB-8、HP100、D180、X_8中的一種，洗脫用醇溶液為乙醇溶液或甲醇溶液。步驟(3)中藥用活性炭用量為0.5% -1.0% (w/v)。本發(fā)明的提取工藝采用超聲提取，提取時(shí)間短，提取率高，以水為溶媒對(duì)牛膝三萜皂苷進(jìn)行提取，提取液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行純化處理，除去大量糖類雜質(zhì)，收集不同濃度乙醇的洗脫物，經(jīng)過(guò)活性炭脫色，重結(jié)晶得到牛膝三萜皂苷，具有步驟簡(jiǎn)單、無(wú)污染、得率高、成本低的優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例1 將牛膝藥材粉碎，取1kg，加入5倍熱水，熱水溫度為100°C，超聲提取，頻率為 45kHz,提取4次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，通過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以3L 蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用15^,30^^45^^60%甲醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集 40-60%醇溶液洗脫液，加入0.5% (w/v)藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，濾液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，過(guò)濾，將結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。實(shí)施例2 將牛膝藥材粉碎，取^ig,加入12倍熱水，熱水溫度為80°C，超聲提取，頻率為 35kHz,提取2次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，通過(guò)X-8大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以IOL 蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用20%、30%、40(%、50(%乙醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集 40-60%醇溶液洗脫液，加入0.6% (w/v)藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，濾液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，過(guò)濾，將結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。實(shí)施例3 將牛膝藥材粉碎，取^g，加入6倍熱水，熱水溫度為60°C，超聲提取，頻率為 30kHz，提取3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，通過(guò)D180大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以12L 蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用15^,30^^40^^60%乙醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集 40-60%醇溶液洗脫液，加入0.8% (w/v)藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，濾液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，過(guò)濾，將結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。實(shí)施例4 將牛膝藥材粉碎，取10kg，加入8倍熱水，熱水溫度為85°C，超聲提取，頻率為 35kHz,提取2次，每次1. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，通過(guò)HP100大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以 50L蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用18^^30^30^^55%甲醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集40-60%醇溶液洗脫液，加入1.0% (w/v)藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，濾液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，過(guò)濾，將結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。
權(quán)利要求
1.一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其特征在于包括以下步驟(1)提取將牛膝藥材粉碎，按重量比加入5-12倍熱水，超聲提取，頻率為30-45kHz，提取2-4次，每次1-2小時(shí)，合并提取液；(2)分離上述提取液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱層析，以蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用15-60%醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集40-60%醇溶液洗脫液；(3)活性炭脫色將上述醇溶液洗脫液加入藥用活性炭，加熱回流，趁熱過(guò)濾，得到脫色液；(4)結(jié)晶將上述脫色液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，無(wú)水乙醇重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其特征在于所述步驟(1)中熱水溫度為60-100°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其特征在于步驟( 所述大孔樹(shù)脂型號(hào)可選AB-8、HP100、D180、X-8中的一種，洗脫用醇溶液為乙醇溶液或甲醇溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其特征在于步驟(3)中藥用活性炭用量為0.5% -1.0% (w/v)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種牛膝三萜皂苷的提取工藝，其工藝具體包括將牛膝藥材粉碎，以熱水為提取溶媒超聲提取，提取液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，水和醇溶液洗脫，并用薄層層析法檢識(shí)，收集40-60％醇溶液洗脫液，活性炭脫色，脫色液濃縮得浸膏，熱水溶解，放置結(jié)晶，無(wú)水乙醇重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，噴霧干燥即得高純度牛膝三萜皂苷。本發(fā)明生產(chǎn)過(guò)程無(wú)污染，提取方法簡(jiǎn)單，該工藝易放大生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P17/02GK102178711SQ20111002914
公開(kāi)日2011年9月14日 申請(qǐng)日期2011年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月24日
發(fā)明者萬(wàn)冬梅, 劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司